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Associação de Fusarium solani, Macrophomina phaseolina e Rhizoctonia solani causando podridão radicular em meloeiro sob efeito de adubos verdes / Association of Fusarium solani, Macrophomina phaseolina and Rhizoctonia solani causing root rot in muskmelon under effect of green manure

Porto, Maria Alice Formiga 27 February 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MariaAFP_DISSERT.pdf: 1443517 bytes, checksum: e637327b3212fa22033a29f0e0c82333 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The occurrence of root diseases is one of the main reasons of yield loss in melon crop, especially the pathogens that causes root and collar rot, as the fungi Fusarium solani (Mart.) Sacc., Macrophomina phaseolina (Tassi) Gold. and Rhizoctonia solani Kuhn, being observed in muskmelon either alone or associated. The use of crop residues and plant materil, besides the improvement in the physical properties of the soil, also favors microbial activity of the species presents in this environment and affects negatively onpathogens population. Therefore, the objective of this work was to evaluate the associations of F. solani, M. phaseolina and R. solani in the incidence and severity of root rot and fresh and dry weight of muskmelon and verify the effect of green manure in root rot caused by these pathogens alone or associated. The experiment was conducted in two stages, in a greenhouse. The first stage evaluated the association of F. solani, M. phaseolina and R. solani causing root rot in melon, using a randomized block design with 8 treatments (F. solani; M. phaseolina, R. solani, F. solani + M. phaseolina, F. solani + R. solani; M. phaseolina + R. solani, F. solani + M. phaseolina + R. solani; non-infested soil) and 8 repetitions with experimental unit of one pot (3.5 L) with 2 plants. The characteristics evaluated were the incidence of root rot in melon plants at the end of the cycle; disease severity based on a scale notes, and the fresh and dry weight of muskmelon. At the second stage, evaluated the effects of green manure in the association of these pathogens in muskmelon, which was conducted one experiment with Jack beans (Canavalia ensiformis L. DC) and another with Pearl millet (Pennisetum glaucum (L.) R. BR.). The experiments were performed simultaneously in a randomized block design with 8 x 4 factorial {8 types of fungi / association (M. phaseolina, R. solani, F. solani, M. phaseolina + R. solani; M. phaseolina + F. solani, R. solani + F. solani; M. phaseolina + R. solani + F. solani; non-infested soil), 4 forms of management [incorporated, in coverage, polyethylene film (mulching) and without managment]} and 4 repetitions. The characteristics evaluated were the incidence of root rot of melon plants at the end of the cycle, and the fresh and dry weight of muskmelon. The results of disease incidence were submitted to the non-parametric test of Kruskal-Wallis and the fresh and dry weight of muskmelon were analyzed by the Scott-Knott test, both with significance level of 5% of probability (α = 0.05%). At stage 1, the treatment with the three pathogens F. solani, M. phaseolina and R. solani associated resulted in lower incidence of plants with symptoms and was not statistically different from the control. The pathogen R. solani was the least prevalent in the associations. The lowest accumulation of fresh and dry matter happened when the soil was infested with Fusarium solani alone. At stage 2, Jack beans in coverage provided lower incidence of root rot in muskmelon with Fusarium solani alone and in triple association (F. solani +M. phaseolina and R. solani). The use of Pearl millet had no effect on root rot incidence in most treatments. In both experiments (Jack beans andPearl millet), Macrophomina phaseolina was the fungus that prevailed in almost all associations. Jack beans and millet did not increase the fresh and dry weight of muskmelon in most treatments / A ocorrência de doenças radiculares representa uma das principais causas de perda de rendimento na cultura do melão, com destaque para os patógenos causadores das podridões de raízes e colos, como os fungos Fusarium solani (Mart.) Sacc., Macrophomina phaseolina (Tassi) Gold. e Rhizoctonia solani Kuhn, sendo observados no meloeiro tanto de forma isolada quanto associada. A utilização de restos de cultura e material vegetal, além de melhorar as propriedades físicas do solo, favorece a atividade microbiana das espécies presentes neste ambiente e interfere negativamente sobre a população de patógenos. Portanto, objetiva-se com este trabalho avaliar as associações dos patógenos F. solani, M. phaseolina e R. solani na incidência e severidade de podridão radicular e na massa da matéria fresca e seca do meloeiro e verificar o efeito de materiais vegetais na podridão radicular causada por estes patógenos isolados ou associados. O experimento foi conduzido em duas etapas, em casa de vegetação, sendo que na primeira avaliou-se a associação de F. solani, M. phaseolina e R. solani causando podridão radicular em meloeiro, quando foi utilizado o delineamento em blocos casualizados com 8 tratamentos (F. solani; M. phaseolina; R. solani; F. solani + M. phaseolina; F. solani + R. solani; M. phaseolina + R. solani; F. solani + M. phaseolina + R. solani; solo não infestado) e 8 repetições, com unidade experimental de 1 vaso (3,5 L) com duas plantas. As características avaliadas foram: incidência de podridão radicular nas plantas de melão no fim do ciclo, severidade da doença com base em escala de notas, além da matéria fresca e seca das plantas de melão. Na segunda etapa, foi avaliado o efeito de materiais vegetais na associação desses patógenos, também em meloeiro, onde foi realizado um experimento com Feijão-de-porco (Canavalia ensiformis L. DC) e outro com Milheto (Pennisetum glaucum (L.) R. BR.). Os experimentos foram conduzidos simultaneamente, em delineamento experimental de blocos casualizados, com esquema fatorial 8 x 4, sendo 8 tipos de fungos/associação (M. phaseolina; R. solani; F. solani; M. phaseolina + R. solani; M. phaseolina + F. solani; R. solani + F. solani; M. phaseolina + R. solani + F. solani; solo sem inoculação), 4 formas de manejo (incorporado, cobertura, mulching e sem manejo) e 4 repetições. As características avaliadas foram: incidência de podridão radicular nas plantas de melão no fim do ciclo, a massa da matéria fresca e seca das plantas de melão. Os resultados de incidência de doença obtidos foram submetidos ao teste não paramétrico de Kruskal-Wallis e a massa damatéria fresca e seca foram analisados pelo teste de Scott-Knott, ambos com nível de significância a 5% de probabilidade (α = 0,05%). Na etapa 1, o tratamento no qual foram associados três patógenos F. solani, M. phaseolina e R. solani propiciou menor porcentagem de plantas com sintomas da doença e não diferiu estatisticamente da testemunha. O fitopatógeno R. solani foi o que menos prevaleceu nas associações. Quando o solo foi infestado com Fusarium solani, isoladamente, o melão obteve baixo acúmulo de matéria fresca e seca. Na etapa II, o feijão-de-porco em cobertura proporcionoiu menor incidência de podridão radicular do meloeiro quando o Fusarium solani estava sozinho e em associação tripla (F. solani +M. phaseolina e R. solani). A utilização do milheto não apresentou efeito na incidência de podridão radicular na maioria dos tratamentos. Tanto na utilização do feijão-de-porco quanto do milheto, M. phaseolina foi o fungo que prevaleceu na maioria das associações nas quais estava presente. O feijão-de-porco e o milheto não proporcionaram aumento na massa da matéria fresca e seca do meloeiro na maioria dos tratamentos
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Phenotypic plasticity and susceptibility to pathogens in Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae) / Plasticidade fenotípica e susceptibilidade a patógenos em Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae)

Silva, Farley William Souza 17 July 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:30:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 586923 bytes, checksum: 24da6077dcd7d4efe5e55cbc10a1c8a1 (MD5) Previous issue date: 2010-07-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Prophylactic investment in defense from parasites and pathogens involves a high cost. Thus, it is expected that organisms use this only when required, for example, when at high population densities, where the risk of parasite or pathogen transmission may be increased. If the infection risk for individuals increases with host density, it is expected that hosts subject to high densities evolve mechanisms of resistance, as proposed by the "density-dependent prophylaxis" (DDP) hypothesis. Tests of these predictions have been conducted in a wide range of insects, both in comparative studies, where species live at different densities and in experimental studies, where the host density is manipulated. In the latter case, however, tests have mostly been restricted to gregarious insects that present density-dependent phase polyphenism. For this reason, we chose to test these predictions in a solitary species, Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae), that presents features of gregarious insects. We showed a prophylactic response to increased conspecific densities in A. gemmatalis larvae. When at increased larval density, with the accompanying phenotypic change, there is a greater degree of encapsulation of the nylon filament, higher hemocyte numbers, but lower melanization. We showed that this response was a function, not only the density per se, but also of the contact among conspecifics. Thus, we showed that DDP is a more common phenomenon thatpreviously thought, occurring even in a species known as being solitary. Furthermore, the prophylactic responses in this species are not only densitydependent, but are more specifically contact- dependent. This may provide a new context to the DDP hypothesis; in which even solitary species may present plastic prophylactic responses at crowded moments. / Investimentos profiláticos em defesa a parasitas e patógenos envolvem um custo. Assim, é esperado que organismos os usem somente quando requeridos, por exemplo quando em altas densidades populacionais, onde o risco de transmissão de parasitas e patógenos pode ser aumentado. Se o risco para o individuo aumenta com a densidade populacional, é esperado que hospedeiros evoluam mecanismos de resistência, como proposto pela hipótese da "profilaxia densidade-dependente" (PDD). Testes dessas predições têm sido conduzidos em uma gama de insetos, seja em estudos comparativos onde espécies vivem em diferentes densidades ou em estudos experimentais onde a densidade do hospedeiro é manipulada. Nesse caso, no entanto, testes têm sido restritos a insetos gregários que apresentam o polifenismo de fase densidade-dependente. Por isso, nós escolhemos testar essas predições em uma espécie solitária que apresenta características de insetos gregários, Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae). Neste estudo, nós mostramos as repostas profiláticas de larvas de A. gemmatalis ao aumento da densidade de co-específicos. Quando em maiores densidades larvais, acompanhada de mudança fenotípica, há um maior grau de encapsulação do filamento de nilon, aumento no número de hemócitos, mas menor melanização. Nós mostramos que essas respostas foram função não só densidade per se, mas também do contato entre co-específicos. Dessa forma, nós mostramos que a PDD é um fenômeno mais comum que se pensava, ocorrendo mesmo em espécies conhecidas como sendo solitárias. Além disso, as respostas profiláticas nessa espécie não são só densidade-dependente, mas mais especificamente, contato-dependente. Isto fornece um novo contexto a essa hipótese, já que mesmo espécies solitárias podem apresentar respostas profiláticas ao aumento da densidade populacional.
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Avaliação físico-química e microbiológica de lodo antigo proveniente de um sistema de lagoas de estabilização usado para tratamento de efluentes de indústrias frigoríficas

Carneiro, Ricardo de Sousa 22 August 2014 (has links)
Submitted by Simone Souza (simonecgsouza@hotmail.com) on 2017-10-16T11:52:55Z No. of bitstreams: 1 DISS_2014_Ricardo de Sousa Carneiro.pdf: 3249963 bytes, checksum: 5a05cf20b4818f8fee9d578fe63e013a (MD5) / Approved for entry into archive by Jordan (jordanbiblio@gmail.com) on 2017-11-07T13:25:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISS_2014_Ricardo de Sousa Carneiro.pdf: 3249963 bytes, checksum: 5a05cf20b4818f8fee9d578fe63e013a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-07T13:25:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISS_2014_Ricardo de Sousa Carneiro.pdf: 3249963 bytes, checksum: 5a05cf20b4818f8fee9d578fe63e013a (MD5) Previous issue date: 2014-08-22 / Indústrias frigoríficas estão inseridas como o mais frequente empreendimento industrial em Mato Grosso justificado, principalmente, pela agropecuária ser a principal atividade econômica no Estado, tornando os abatedouros uma opção para agregar valor ao que aqui é criado, principalmente na produção de bovinos e aves. Intrínseco a indústria frigorífica está a geração de efluente, que precisa ser tratado antes da sua disposição no solo ou em corpos d’água. Lagoas de estabilização constitui o principal tipo de tratamento de efluente presente em frigoríficos no Estado. Este tipo de tratamento gera um resíduo semissólido denominado lodo. Este subproduto pode ser rico em nutrientes tornando-o um material que é denominado biossólido. Entretanto, para receber tal denominação o lodo de lagoas de estabilização deve apresentar características químicas e biológicas compatíveis com sua utilização. Estas características são também relevantes quanto à patogenicidade. No Brasil, a Resolução CONAMA 375/2006 estabelece parâmetros de concentração de microrganismos para utilização de lodo gerado em sistemas de tratamento de efluentes como fonte de nutrientes para o solo. Em Várzea Grande – MT um complexo de Indústrias Frigoríficas, instalado desde o fim dos anos 70, destinou seus efluentes gerados a um sistema de tratamento de efluentes composto por lagoas de estabilização contendo duas lagoas anaeróbias, uma lagoa facultativa e uma lagoa de maturação. Em janeiro de 2012 este tratamento de efluentes foi desativado e substituído por outro em outra área, o lodo presente no sistema foi reunido nas duas lagoas aeróbias objetivando sua estabilização, desidratação e inertização de patógenos. Diante deste contexto, este trabalho avaliou quali-quantitativamente o lodo acumulado das lagoas de estabilização do complexo de indústrias com vistas à disposição final no solo. Para tal, foram realizados dois estudos de batimetria, um em outubro de 2012 e outro em janeiro de 2014, a determinação das variáveis físico-químicas de SST, pH, DBO, Nitrogênio e Fósforo e a determinação das concentrações de Ovos de Helmintos, Coliformes Termotolerantes e Salmonellas junto ao segundo teste de batimetria. Por fim, conclui-se que o lodo reunido nas lagoas anaeróbias reduziu em aproximadamente 30% seu volume, possui concentração satisfatória de nitrogênio se comparado a outros materiais utilizados como biossólidos, porém pobre em fósforo realizando a mesma comparação. Está ausente de Salmonellas e possui alto teor de umidade, próximo de 98% e concentrações dos microrganismos coliformes termotolerantes e ovos de helmintos acima do permitido pela Resolução CONAMA 375/2006 o que inviabiliza, por hora, a sua utilização no solo. Também foi determinado, em função de formulações apresentadas na metodologia e das condições locais, que até fevereiro de 2015 o lodo possuirá umidade próxima de 70%. Sugestões para aceleração do desaguamento e inertização também estão presentes neste trabalho. / Slaughterhouses are inserted as the most frequent industrial enterprise in Mato Grosso justified mainly by agriculture is the main economic activity in the state, making slaughterhouses an option to add value to what is created here, especially in the production of cattle and poultry. Intrinsic to the slaughter industry is the generation of wastewater that must be treated prior to disposal in soil or water bodies. Stabilization ponds are the main type of treatment of this effluent in refrigerators in the state. This type of treatment generates a semisolid residue called sludge. This by-product can be rich in nutrients making it a material that is called biosolids. However, to receive this designation sludge stabilization ponds shall provide chemical and biological characteristics consistent with its use. These characteristics are also relevant as to pathogenicity. In Brazil, the CONAMA Resolution 375/2006 establishes parameters for concentration of microorganisms for use of sludge generated in wastewater treatment systems as a source of nutrients to the soil. In Várzea Grande – MT a complex of industries slaughter, installed since the late '70s, their effluents destined to a wastewater treatment system consisting of stabilization ponds containing two anaerobic ponds, a facultative pond and maturation pond. In January 2012 this treatment effluent was deactivated and replaced by another in another area, the sludge present in the system was assembled in both aerobic lagoons aiming its stabilization, dewatering and blanketing of pathogens. Given this context, this study evaluated qualitative and quantitatively the accumulated sludge from the waste stabilization ponds of complex industries with a view to disposal in soil. To this end, two studies bathymetry, one in October 2012 and another in January 2014, the determination of physico-chemical parameters of TSS, pH, BOD, COD, nitrogen and phosphorus concentrations and the determination of helminth eggs were performed , thermotolerant coliforms and Salmonella with the second test bathymetry. Finally, it is concluded that the sludge collected in anaerobic pounds reduced by approximately 30% in volume, has satisfactory nitrogen concentration compared to other materials used as biosolids, but poor in phosphorus performing the same comparison. Salmonella is absent and has high moisture content, around 98%, and concentrations of thermotolerant coliform microorganisms and helminth eggs above those permitted by CONAMA Resolution 375/2006 which prevents, for now, their use in soil. Was also determined according to the methodology presented formulations and local conditions, that until February 2015 the sludge possess humidity close to 70%. Suggestions for accelerated dewatering and blanketing are also present in this work.
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Controle químico de patógenos e desempenho fisiológico de sementes de amendoim

Barbosa, Rafael Marani [UNESP] 28 June 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-28Bitstream added on 2014-06-13T19:57:59Z : No. of bitstreams: 1 barbosa_rm_me_jabo.pdf: 415053 bytes, checksum: e36ec28051d3bfcf834e79d17be492d0 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O estabelecimento da cultura do amendoim pode não ser adequado em função do baixo desempenho das sementes em campo. Isto pode ser atribuído, dentre outros fatores, à redução do vigor das sementes no armazenamento e presença de patógenos. Assim, objetivou-se neste trabalho verificar a eficiência do tratamento de sementes de amendoim com fungicidas sobre o desempenho fisiológico e controle de patógenos no armazenamento. Para tanto, dois lotes de sementes de amendoim, cv. Runner IAC 886 foram submetidas a cinco tratamentos fungicidas: 1) testemunha (sem tratamento); 2) thiram; 3) carbendazin + thiram; 4) fludioxonil + metalaxyl-m; 5) fludioxonil + mefenoxam + thiabendazole e avaliadas mensalmente após armazenamento por 60 dias. As sementes foram armazenadas sem tratamento, este foi realizado após os períodos pré-estabelecidos para cada momento de avaliação, e, posteriormente, foram submetidas aos testes de germinação, de vigor (primeira contagem da germinação e envelhecimento acelerado), de emergência de plântulas em campo e de sanidade das sementes. Os resultados revelaram diferenças no potencial de desempenho dos lotes, com superioridade para o lote 1, durante o armazenamento, e entre os fungicidas. O teste de sanidade mostrou que os tratamentos de sementes utilizados foram eficientes no controle dos patógenos (Aspergillus spp. e Penicillium sp.) e todos os tratamentos fungicidas melhoraram o desempenho das sementes em campo. Houve indício de fitotoxicidade dos fungicidas sobre a germinação e vigor das sementes avaliadas em condições de laboratório / The establishment of peanut crop may not be suitable, due to the poor seeds performance in the field. This can be attributed among other factors to reducing seed vigor as a function of storage and seed pathogens. Thus, this research was carried out to study the efficacy of peanut seeds treatment with fungicides upon the seed physiological performance and the chemical control of pathogens during storage. Two peanut seeds lots, cv. Runner IAC 886, were submitted to five seed treatments (1. control – no seed treatment, 2. seed treatment with thiram, 3. with carbendazin + thiram, 4. with fludioxonil + metalaxyl-m and, 5. with fludioxonil + mefenoxam + thiabendazole) and evaluated monthly and after storage for 60 days. The seeds were stored without treatment, this was done after the evaluation period, and then were subjected to germination, vigor (first count and accelerated aging), seedling field emergence and seed pathogens tests. The results showed differences in the performance potential of the lots, with superiority for lot 1, during storage, and among the fungicides. The sanity test showed that seed treatments were effective in pathogens control (Aspergillus spp. and Penicillium sp.) and all fungicide treatments improved seed performance in the field. There was evidence of phytotoxicity of fungicides on the germination and vigor evaluated under laboratory conditions. The fungicide does not maintain the high physiological seed quality in storage
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Bactérias ácido láticas autóctones de leite cru e queijo minas frescal: isolamento de culturas bacteriocinogênicas, caracterização da atividade antagonista e identificação molecular / Autochthonous lactic acid bacteria from raw milk and soft cheese: screening of bacteriocinogenic cultures, characterization of antagonistic activity and molecular identification

Ortolani, Maria Beatriz Tassinari 13 February 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1309961 bytes, checksum: 3eca74b86d020398c16106400cefbe19 (MD5) Previous issue date: 2009-02-13 / The poor microbiological quality of Brazilian raw milk as a result of poor hygienic conditions usually observed during the production. As consequence, raw milk and dairy products present high levels of hygiene indicators microorganisms, suggesting the presence of pathogens. However, pathogens have low competitive ability, suffering direct interference of the autochthonous microbiota of these products. This interference is confirmed by the low occurrence of pathogens in milk and dairy products with poor microbiological quality. Lactic acid bacteria (LAB) are the main member of dairy microbiota that establishes this interference, due their ability of producing several antimicrobial substances, like bacteriocins. Innumerable bacteriocins are described in literature, such as nisin, plantaricin and enterocins, and they are characterized by their antagonistic activity against pathogens and spoilage microorganisms, and they are often used as tools for food safety. The objectives of this study were characterize the microbiota of raw milk and soft cheese, associate the LAB population with other microbiological indicators, detect LAB that present antagonistic activity and characterize their bacteriocinogenic nature, identify the antagonistic cultures by genetic sequencing, and detect the presence of nisin genes. Raw milk samples (n = 36) and raw milk soft cheese (n = 18) were collected in Viçosa region, MG and submitted to microbiological analysis for mesophilic aerobes, total coliforms, Escherichia coli, LAB, Coagulase positive Staphylococcus (CPS), Listeria monocytogenes and Salmonella sp. Considering the LAB enumeration plates, 389 cultures were randomly selected and evaluated to the production of antimicrobial substances against L. monocytogenes, S. aureus, Salmonella Typhimurium and Lactobacillus sakei, and to the production of bacteriocins against L. monocytogenes. 20 bacteriocinogenic cultures were submitted to enzymatic tests to confirm the protein nature of antagonistic substances, molecular identification by genetic sequencing and phylogenetic analysis. The cultures identified as Lactococcus lactis subsp. lactis were submitted to polymerase chain reaction in order to detect genes related to nisin codification. The analyzed samples presented higher counts of hygiene indicators microorganisms and LAB, low counts of E. coli and CPS, and absence of Salmonella sp. and L. monocytogenes. LAB populations presented high correlation indexes with mesophilic aerobes, suggesting the effective participation of this group in the microbiota of the samples. It was observed high frequencies of samples presenting autochthonous LAB with antagonistic activity against the target microorganisms, except against S. Typhimurium. 58 (14.9%) LAB cultures presented bacteriocinogenic activity against L. monocytogenes. The LAB cultures submitted to enzymatic tests presented distinct patterns of enzymes sensitivity, confirming the bacteriocins production. The bacteriocinogenic cultures were identified as Lb. plantarum (2) and Lc. lactis subsp. lactis (18) with genetic similarity to several strains and grouped in distinct phylogenetic groups. Considering the 18 L. lactis subsp. lactis, 7 presented genes related to nisin codification. The obtained results indicate the presence of bacteriocinogenic LAB as natural compounds of raw milk and soft cheese microbiota, presenting antagonistic activity against pathogens. The wide variability genetic and bacteriocins production of these cultures indicate their potential for controlling L. monocytogenes in foods. / A qualidade microbiológica do leite cru brasileiro é reflexo das precárias condições de higiene usualmente observadas em sua produção. Como consequência, esse produto e seus derivados apresentam altas contagens de microrganismos indicadores de higiene, sugerindo a presença de patógenos. Entretanto, devido a sua fraca capacidade de competição, os patógenos sofrem interferência direta da microbiota autóctone desses produtos. Essa interação é confirmada pela baixa ocorrência desses microrganismos em leite e derivados com elevadas contagens de indicadores de higiene. As bactérias ácido láticas (BAL) são os principais componentes da microbiota láctea que determinam essa interferência, pela habilidade de produzir diversas substâncias com atividade antimicrobiana, como as bacteriocinas. Diversas bacteriocinas são descritas na literatura, como nisina, plantaricina e enterocinas, e são caracterizadas por possuírem atividade antagonista contra diversos patógenos e microrganismos deteriorantes, sendo frequentemente utilizadas como ferramentas para garantia da segurança alimentar. Os objetivos desse estudo foram caracterizar a microbiota de amostras de leite cru e queijo minas frescal, relacionar as populações de BAL com a de outros grupos naturalmente presentes, detectar BAL com atividade antagonista e caracterizar sua natureza bacteriocinogênica, identificar essas culturas por sequenciamento genético, e detectar a presença de genes codificadores de nisina. Amostras de leite cru (n = 36) e queijo minas frescal produzido com leite cru (n = 18) foram coletadas na região de Viçosa, MG e submetidas à pesquisa de aeróbios mesófilos, coliformes totais e Escherichia coli, BAL, Estafilococos coagulase positivoss (ECP), Listeria monocytogenes e Salmonella sp. A partir das placas semeadas para enumeração de BAL, 389 culturas foram aleatoriamente selecionadas e avaliadas quanto à produção de substâncias antimicrobianas com atividade contra L. monocytogenes, S. aureus, Salmonella Typhimurium e Lactobacillus sakei, e quanto à produção de bacteriocinas contra L. monocytogenes. Vinte culturas identificadas como bacteriocinogênicas foram submetidas a testes enzimáticos para confirmação da natureza protéica, à identificação molecular e análise filogenética. O DNA das culturas identificadas como Lactococcus lactis subsp. lactis foram submetidas à reação em cadeia da polimerase para detecção de genes codificadores de nisina. As amostras analisadas apresentaram altas contagens de indicadores de higiene e BAL, baixas contagens de E. coli e ECP e ausência de Salmonella sp. ou L. monocytogenes. As populações de BAL apresentam alta correlação com as populações de aeróbios mesófilos, sugerindo a participação efetiva desse grupo na microbiota das amostras. Foram observadas altas frequências de amostras contendo BAL com atividade antagonista contra os microrganismos alvo, com exceção à S. Typhimurium. Cinquenta e oito (14,9%) culturas de BAL apresentaram atividade bacteriocinogênica contra L. monocytogenes. As culturas submetidas à confirmação da natureza protéica das substâncias antimicrobianas apresentaram distintos padrões de sensibilidade a enzimas, confirmando a produção de bacteriocinas. As culturas bacteriocinogênicas foram identificadas como Lactobacillus plantarum (2) e Lc. lactis subsp. lactis (18), com similaridade genética em diferentes isolados, e agrupadas em diferentes grupos filogenéticos. Das 18 culturas identificas como Lc. lactis subsp. lactis, 7 apresentaram genes relacionados a codificação de nisina. Os resultados obtidos indicam a presença de BAL bacteriocinogênicas como constituintes da microbiota de leite cru e queijo minas frescal, com potencial antagonista contra patógenos. Essas culturas apresentaram diferentes perfis genéticos e quanto à produção de bacteriocinas, revelando seu uso potencial no controle de L. monocytogenes em alimentos.
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Comércio informal de carne e leite e caracterização da qualidade do leite cru na zona urbana do município de Viçosa, Minas Gerais / Informal trade of meat and milk and characterization of the quality raw milk in the urban area of Viçosa, Minas Gerais

Merhi, Carolina Milner 23 February 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1081545 bytes, checksum: c144c9ea0ec238b67b9d2fce7bb28131 (MD5) Previous issue date: 2011-02-23 / Foodborne diseases are commonly observed in several populations being a problem to the public health systems and the cause of significant economic losses. The consumption of food from animal origin without surveillance called informal food, are usually associated to these diseases, because they are potential vehicle for pathogenic agents. The absence of adequate surveillance does not guarantee other quality and safety aspects of these products that can be defrauded or adulterated. The control of that kind of commerce, however, depends directly on the knowledge of the main reasons that determine the consumption of this food, and the association to visual tools, such as georeferencing, that help to identify the main problems that may guide the direction to official actions. In order to propose a model of study, the population from urban area of Viçosa, Minas Gerais, Brazil, was submitted to an epidemiologic survey to describe the consumption habits of people concerning animal origin foods and from clandestine commerce, and also the possible features associated to foodborne diseases. Every data obtained were geo-referenced, associated to official data from Secretaria Municipal de Saúde on diarrhea cases, and thematic maps were elaborated to visualize the main variables that were identified. Still, 69 samples of raw milk from clandestine commerce were collected and analyzed for microbiological and physicochemical characteristics. 411 residences were visited, and the responsible for food acquisition answered a detailed questionnaire about food handling and consumption habits. Considering the answers, the consumption of raw milk (18.7%) was related mainly to possible benefits of this product to consumers, and the consumption of raw or rare meat (9.0%) was related to personal choice. For some factors, significant relation was observed (p < 0.05) to monthly income and level of education of respondents. The visualization of thematic maps allowed the identification of a lack of association between diarrhea occurrence and the consumption of feed that are usually associated to foodborne disease. Considering raw milk samples analyzed, high counts of the hygiene indicators and high frequency of samples with higher counts than the international standards of quality were observed. The assessment of physicochemical characteristics indicated high frequency of frauds, mainly by water adding. However, L. monocytogenes and Salmonella spp. were not detected in any sample. The presented model of study was able to show the importance of applying different tools for the characterization of food consumption habits and the possible association to foodborne diseases. Finally, the raw milk samples analyzed presented results that evidenced the importance of official inspection of products from animal origin that must be associated to educational programs for people about the problems of informal commerce, the possible hazards inherent to these products and the consequences to the health of consumers. / As toxinfecções alimentares são enfermidades observadas com grande freqüência nas populações, e determinam problemas em saúde pública e prejuízos econômicos significativos. O consumo de alimentos de origem animal sem fiscalização, denominados informais, são usualmente associados a essas enfermidades, por serem potenciais carreadores de agentes patogênicos. Ainda, a ausência de fiscalização adequada não garante outros aspectos de qualidade e segurança desses produtos, estando sujeitos a fraudes e adulterações. O controle adequado desse comércio, entretanto, depende diretamente do conhecimento dos principais motivos que determinam o consumo desses alimentos, e a associações de ferramentas de visualização, como o georeferenciamento, facilitam a identificação dos principais problemas e direcionamento de ações oficiais. Com o objetivo de se propor um estudo modelo, a população da zona urbana de Viçosa, MG, Brasil, foi submetida a um questionário epidemiológico visando caracterizar os hábitos de consumo de alimentos de origem animal, comercializados informalmente, e possíveis fatores associados à toxinfecções alimentares. Todos os dados obtidos foram geo-referenciados, associados a levantamentos oficiais da Secretaria Municipal de Saúde sobre casos de doenças diarréicas, e mapas temáticos foram elaborados para visualização das principais variáveis identificadas. Ainda, 69 amostras de leite cru comercializadas informalmente foram coletadas e analisadas quanto a suas características microbiológicas e físico-químicas. 411 residências da zona urbana foram visitadas, e os responsáveis pela aquisição dos alimentos responderam um questionário detalhado sobre consumo e manipulação de alimentos. Desse total, foi verificado que em 18,7% das residências ocorre consumo de leite cru, relacionado principalmente a possíveis benefícios desse produto aos consumidores, e em 9,0% ocorre o consumo de carne crua ou mal passada, devido principalmente a preferência pessoal. Para alguns fatores, foi verificada relação significativa (p < 0,05) com a renda mensal e escolaridade dos entrevistados. A visualização de mapas temáticos permitiu a identificação de falta de associação entre a ocorrência de doenças diarréicas e o consumo de alimentos usualmente associados a toxinfecções alimentares. Considerando as amostras de leite cru analisadas, foram observadas altas contagens dos indicadores de higiene, e altas frequências de amostras com contagens superiores a padrões internacionais de qualidade. A pesquisa das características físico-químicas demonstrou altas frequências de fraudes, principalmente por adição de água. Entretanto, L. monocytogenes e Salmonella spp. não foram detectados em nenhuma amostra. O modelo de estudo apresentado demonstrou a importância da aplicação de diferentes ferramentas para a caracterização de hábitos alimentares e possíveis associações com toxinfecções alimentares. Finalmente, em relação às amostras de leite cru analisadas, os resultados obtidos evidenciam a importância da fiscalização oficial de produtos de origem animal, associada a programas de conscientização da população sobre os problemas do mercado informal e, os possíveis perigos inerentes a esses produtos e suas consequências para a saúde dos consumidores.
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Doenças associadas ao cavalo-marinho hippocampus reidi (teleostei syngnathidae) em sistema de cultivo experimental, com ênfase em infecções bacterianas

Souto Neto, José Araújo 28 May 2016 (has links)
Submitted by Leonardo Cavalcante (leo.ocavalcante@gmail.com) on 2018-04-26T15:24:14Z No. of bitstreams: 1 Arquivototal.pdf: 2102292 bytes, checksum: a57525d8f4e150a95eb60a9e574ddd8e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-26T15:24:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arquivototal.pdf: 2102292 bytes, checksum: a57525d8f4e150a95eb60a9e574ddd8e (MD5) Previous issue date: 2016-05-28 / This study is a retrospective of five years of experimental cultivation of a seahorse specie Hippocampus reidi. The aim was to characterize and quantify the main diseases of the specie in captivity, associated with water quality parameters in two types of systems (SCF - Closed System Circulation and SI – Isolated unfiltered system), as well an assessment of bacterial infections associated with skin lesions and water during one year. It was recorded 192 ill seahorses in the experimental cultivation over the five years in which individuals with dermatitis were the most frequent, occurring in 46.3% of cases and leading to severe medical conditions as epidermal ulceration, whitish spots along the entire organism and tissue desquamation. Other illnesses as gas bubbles diseases, balance difficulties and sudden death were also observed but to a lesser extent. Samples of ulcerative lesions were collected, using swabs, between april/14 and april/15 of two 2 classes of lesions in the tail and one type in the brood pouch from experimental cultivation seahorses. Samples of water from the water distribution system were also gathered. A total of 119 bacterial strains were isolated. Isolated Bacteria were identified using the 16S sRNA gene according to similarity searches in databases NCBI (National Center for Biotechnology Information) and RDP (Ribosomal Database Project). Among isolated bacterial strains, it was identified 12 species of Bacteria, distributed in seven families. The main families identified in skin lesions of Hippocampus reidi were Micrococcaceae (38.2%), Vibrionaceae (25.5%) and Bacillaceae (23.4%), while the main families founded in water were Pseudoalteromonadaceae (51,4%) and Bacillaceae (34,2%). The number of ill individuals in maintaining systems were directly associated with increased levels of nitrite and ammonia, as well pathogenic bacteria or opportunistic pathogens. / O presente estudo é uma retrospectiva de 5 anos de cultivo experimental de cavalos-marinhos da espécie Hippocampus reidi, caracterizando e quantificando as principais doenças da espécie em cativeiro em associação com parâmetros da qualidade da água em dois tipos de sistemas de manutenção da espécie (SCF – Sistema de Ciculação Fechada e SI – Sistema de aquários isolados sem filtragem) e uma avaliação de infecções bacterianas associadas a lesões cutâneas e a água durante o período de um ano. Foram registrados 192 cavalos-marinhos doentes no cultivo experimental ao longo dos 5 anos, nos quais indivíduos com dermatites foram os mais frequentes, representando 46,3% dos casos, gerando quadros clínicos severos que incluem lesões ulcerativas, manchas esbranquiçadas ao longo do corpo e descamação de tecido. Doenças das bolhas, dificuldades de equilíbrio e morte súbita foram outras doenças observadas, porém em menor proporção. Foram coletadas, entre abril/2014 e abril/2015, amostras de esfregaço por meio de swab de 2 tipos de lesões ulcerativas na região da cauda e 1 tipo de lesão ulcerativa na região da bolsa incubadora de cavalos-marinhos provenientes do cultivo experimental e amostras de água provenientes dos sistemas de distribuição (SD) de água, das quais totalizam 119 isolados bacterianos. As cepas isoladas foram identificadas a partir do sequenciamento do gene 16S sRNA por meio de buscas de similaridade nos bancos de dados NCBI (National Center for Biotechnology Information) e RDP (Ribosomal Database Project). Dentre os isolados, foram identificadas um total de 12 espécies bacterianas distintas, distribuídas em 7 famílias, cujas famílias mais abundantes em lesões cutâneas foram Micrococcaceae (38,2%), Vibrionaceae (25,5%) e Bacillaceae (23,4%) e em isolados da água Pseudoalteromonadaceae (51,4%) e Bacillaceae (34,2%). O número de indivíduos doentes nos sistemas de manutenção está diretamente associado a aumento nos níveis de nitrito e amônia e de bactérias patogênicas ou patogênicas oportunistas.
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Potencial fisiológico e sanidade de sementes de soja-hortaliça produzidas em diferentes adubações e armazenadas por doze meses / Physiological potential and sanity of vegetable soybean seeds produced with different fertilization and stored for 12 months

Juliana Maria Espíndola Lima 11 December 2012 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As sementes de soja são de grande importância para a humanidade, em razão da farta aplicabilidade dos seus produtos, da facilidade de seu cultivo e por ser a única proteína vegetal que mais se assemelha a dos produtos animais. Neste contexto, objetivou-se neste trabalho determinar o potencial fisiológico e a sanidade de sementes de soja-hortaliça produzidas no cerrado de Roraima com diferentes adubações e armazenadas por 12 meses. O delineamento experimental utilizado foi de blocos ao acaso, em esquema fatorial 5 x 2, com cinco adubações (convencional, intermediária, alternativa, uso de manipueira e de casca de arroz carbonizada) e duas épocas de avaliação das sementes (após a colheita e aos 12 meses de armazenamento). Foram estudadas duas cultivares de soja-hortaliça (BRS 258 e BR 9452273). As sementes foram avaliadas em laboratório pelos testes físico, fisiológico e de sanidade. As adubações convencional, intermediária, alternativa, com manipueira e casca de arroz carbonizada, utilizadas na produção de soja-hortaliça cv. BRS 258, não influenciam na qualidade fisiológica das sementes após a colheita, mas aos 12 meses de armazenamento é superior para as adubações com manipueira e casca de arroz carbonizada. As sementes de soja-hortaliça linhagem BR 9452273 produzidas com as cinco adubações, apresentam melhor qualidade fisiológica na adubação com manipueira. Na colheita, a incidência dos fungos e bactérias não reduz a qualidade fisiológica das sementes de soja-hortaliça, produzidas com as cinco adubações para a cv. BRS 258 e a linhagem BR 9452273. Constatou-se a presença de Macrophomina phaseolina e Botryodiplodia theobromae nas sementes dos dois genótipos de soja-hortaliça, onde não há registros relacionados com esses fungos para esta cultura. A qualidade fisiológica das sementes de soja-hortaliça dos genótipos estudados, não é preservada no armazenamento em garrafas de politereftalato de etileno por 12 meses. Houve redução da qualidade fisiológica das sementes de soja-hortaliça da cv. BRS 258 e linhagem BR 9452273 aos 12 meses de armazenamento, independentemente do tipo de adubação utilizada. / Soybean seeds are of great importance for humanity, because of the abundant applicability of their products, cultivation easeness and for being the only plant protein most similar to animal products. The objective of this study was to determine the physiological potential and seed sanity of vegetable soybean produced in cerrado environment of Roraima with different fertilization and stored for 12 months. The experimental design was randomized blocks in a 5 x 2 factorial arrangement with five fertilization (conventional, intermediate, alternative, use of cassava waste water and carbonized rice hulls) and two seed evaluation periods (after harvest and after 12 months of storage). Two vegetable soybean (BRS 258 and BR 9452273) were assessed. Seeds were evaluated in laboratory concerning sanity, physical and physiological tests. Conventional, intermediate, alternative, with cassava waste water and carbonized rice hulls fertilizations, used at vegetable soybean cv. BRS 258 production, did not influence physiological seed quality after harvest but after 12 months of storage cassava waste water and carbonized rice hulls fertilizations are superior. Lineage BR 9452273 vegetable soybean seeds produced with five fertilization showed better physiological quality with cassava waste water fertilization. At harvest, incidence of fungi and bacteria do not reduce physiological quality of cv. BRS 258 and lineage BR 9452773 vegetable soybean seeds, produced with five different fertilizations. It found the Presence of Macrophomina phaseolina and Botryodiplodia theobromae was found among seeds of these two soybean genotypes, although there are no records relating to such fungi for this culture. Physiological quality of vegetable soybean seeds of the two genotypes studied is not preserved after 12 months storage in polyethylene terephthalate bottles. There was a decrease in physiological quality of cv. BRS 258 and lineage BR 9452273 vegetable soybean seeds after 12 months of storage, independently of fertilization used.
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Ocorrência de periodontopatógenos em brasileiros portadores de periodontite crônica

de Carvalho Farias, Bruna 31 January 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo969_1.pdf: 1672515 bytes, checksum: 57a925ef24be8c7dd06dd31514a160d4 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho teve por objetivo avaliar a presença dos periodontopatógenos que formam o complexo vermelho (Tannerella forsythia (Tf), Porphyromonas gingivalis (Pg) e Treponema denticola (Td)) e o Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) em pacientes portadores de periodontite crônica. A amostra foi constituída de 29 pacientes com diagnóstico clínico e radiográfico de periodontite crônica de acordo com os critérios da AAP (2000). Todos os dentes foram sondados em seis sítios para registro de profundidade, perda de inserção clínica e sangramento após sondagem. As amostras para análise microbiológica foram coletadas dos 4 sítios com maior profundidade de sondagem para cada paciente, totalizando 116 amostras. Estas amostras foram processadas através da técnica de PCR convencional e foram observados os seguintes resultados: 46,6% apresentaram resultado positivo para a bactéria Pg; 41,4% para Tf; 33,6% para Td e 27,6% para Aa. Não se verificou associação significante entre a presença dos periodontopatógenos e as variáveis faixa etária, sexo e sangramento à sondagem. Para a bactéria Pg verificou-se associação significante (p<0,05) com a variável placa visível, e a presença das bactérias Pg e Tf foi mais prevalente (p < 0,05) em bolsas periodontais &#8805; 8 mm. Nos sítios com profundidade &#61619; 8 mm foram observadas com maior freqüência as combinações Pg + Tf (23,2%) e Pg + Tf + Td (20,0%). Foram estatisticamente significantes (p < 0,05) as associações entre a presença simultânea das bactérias Aa + Pg, Aa+ Tf, Pg + Tf e entre Tf + Td. Concluiu-se que as bactérias analisadas, principalmente as do complexo vermelho, estiveram fortemente relacionadas com a periodontite crônica, e que as bactérias Pg e Tf foram mais frequentes em bolsas periodontais profundas
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SISTEMA DE BIOSENSADO FOTÓNICO PARA LA DETECCIÓN DE TROMBINA, ALÉRGENOS Y PATÓGENOS. FUNCIONALIZACIÓN QUÍMICA DE CHIPS FOTÓNICOS BASADOS EN ESTRUCTURAS DE ANILLOS RESONANTES

Sánchez Sánchez, Carlos 16 December 2019 (has links)
[ES] En este trabajo se ha realizado la detección de analitos implicados en el sector sanitario (trombina) e industria alimentaria (alérgenos y patógenos), mediante el uso de un sistema de biosensado fotónico. Este sistema desarrollado por el equipo de LUMENSIA Sensors, emplea la tecnología de chips fotónicos de nitruro de silicio (Si3N4), basados en estructuras de anillos resonantes (RR). Las estrategias de funcionalización química e inmovilización de biomoléculas como aptámeros (fragmentos de ADN de cadena sencilla) y anticuerpos, se han realizado sobre superficies planas de Si3N4 para la detección de analitos, como paso previo a las medidas fotónicas. Por tanto, estas estrategias se han implementado en la preparación del chip fotónico para las medidas en un entorno de laboratorio (set-up). En cuanto a la estrategia aplicada, ésta consiste en la activación química de la superficie del sensor. Después sobre los RR del chip, cuyo tamaño es del orden de las micras, se inmoviliza la sonda de captura (anticuerpo o aptámero), siendo ésta la encargada de reconocer específicamente al analito de interés (trombina, alérgeno o patógeno). En los resultados obtenidos de trombina, se ha elaborado un estudio para la detección de trombina en el seno de diferentes matrices biológicas sobre superficies planas de Si3N4, además del control sobre la activación de una muestra de sangre mediante el uso de factor tisular (TF) y cloruro de calcio (CaCl2). Estos resultados han servido como un estudio preliminar a la optimización del aptámero empleado como sonda de captura, específico de la trombina para su detección sobre chips fotónicos. En lo referente a la detección de alérgenos, se han empleado dos estrategias claramente diferenciadas. Por un lado, la utilización de aptámeros como sondas de captura en la detección del Ovomucoide (OVO) y la Gliadina (GLN) sobre superficies planas Si3N4. Por otro lado, la implementación de anticuerpos monoclonales como moléculas biológicas de captura sobre chips fotónicos, se ha llevado a cabo en la detección de los alérgenos Gliadina (GLN) y caseína (CAS), cuyos resultados han dado lugar a una recta de calibrado. Asimismo, se ha realizado un ensayo para la detección de GLN en muestra real, procedente de un extracto cárnico con gluten de trigo. En cuanto a la detección de patógenos, se han utilizado dos tipos de estrategias, al igual que para los alérgenos. En primer lugar, el uso de aptámeros como sondas de captura han dado como resultado la detección de dos cepas de carácter no patogénico de la bacteria E.coli (Origami y XL1BLUE) sobre superficies planas de Si3N4. En segundo lugar, la utilización de un anticuerpo policlonal como sonda de captura, se ha inmovilizado sobre la superficie del chip fotónico para la detección del Circovirus Porcino tipo 2 (PCV2) en un estudio realizado sobre la dosis dependencia del virus a diferentes factores de dilución. Finalmente, el desarrollo de una plataforma de sensado para la detección de los analitos (trombina, alérgenos y patógenos) y donde se vayan a implementar los diferentes biosensores está en proceso. / [CA] En aquest treball s'ha realitzat la detecció d'anàlits implicats en el sector sanitari (trombina) i indústria alimentària (al·lergògens i patògens), mitjançant l'ús d'un sistema de biosensat fotònic. Aquest sistema desenvolupat per l'equip de LUMENSIA Sensors, empra la tecnologia de xips fotònics de nitrur de silici (Si3N4), basats en estructures d'anells ressonants (RR). Les estratègies de funcionalització química i immobilització de biomolècules com aptàmers (fragments d'ADN de cadena senzilla) i anticossos, s'han realitzat sobre superfícies planes de Si3N4 per a la detecció d'anàlits, com a pas previ a les mesures fotòniques. Per tant, aquestes estratègies s'han implementat en la preparació del xip fotònic per a les mesures en un entorn de laboratori (set-up). Quant a l'estratègia aplicada, aquesta consisteix en l'activació química de la superfície del sensor. Després sobre els RR del xip, la grandària del qual és de l'ordre de les micres, s'immobilitza la sonda de captura (anticòs o aptàmer), sent aquesta l'encarregada de reconèixer específicament a l'anàlit d'interés (trombina, al·lergogen o patogen). En els resultats obtinguts de trombina, s'ha elaborat un estudi per a la detecció de trombina en el si de diferents matrius biològiques sobre superfícies planes de Si3N4, a més del control sobre l'activació d'una mostra de sang mitjançant l'ús de factor tissular (TF) i clorur de calci (CaCl2). Aquests resultats han servit com un estudi preliminar a l'optimització del aptàmer empleat com sonda de captura, específic de la trombina per a la seua detecció sobre xips fotònics. Referent a la detecció d'al·lergògens, s'han emprat dues estratègies clarament diferenciades. D'una banda, la utilització de aptàmers com sondes de captura en la detecció del Ovomucoide (OVO) i la Gliadina (GLN) sobre superfícies planes Si3N4. D'altra banda, la implementació d'anticossos monoclonals com a molècules biològiques de captura sobre xips fotònics, s'ha dut a terme en la detecció dels al·lergògens Gliadina (GLN) i caseïna (CAS), els resultats de la qual han donat lloc a una recta de calibrat. Així mateix, s'ha realitzat un assaig per a la detecció de GLN en mostra real, procedent d'un extracte carni amb gluten de blat. Quant a la detecció de patògens, s'han utilitzat dos tipus d'estratègies, igual que per als al·lergògens. En primer lloc, l'ús de aptàmers com sondes de captura han donat com a resultat la detecció de dos ceps de caràcter no patogènic del bacteri E.coli (Origami i XL1BLUE) sobre superfícies planes de Si3N4. En segon lloc, la utilització d'un anticòs policlonal com sonda de captura, s'ha immobilitzat sobre la superfície del xip fotònic per a la detecció del Circovirus Porcí tipus 2 (PCV2) en un estudi realitzat sobre la dosi dependència del virus a diferents factors de dilució. Finalment, el desenvolupament d'una plataforma de sensat per a la detecció dels anàlits (trombina, al·lergògens i patògens) i on es vagen a implementar els diferents biosensors està en procés. / [EN] In this work the detection of analytes involved in the health sector (thrombin) and food industry (allergens and pathogens) has been carried out, through the use of a photonic biosensing system. This system, developed by the LUMENSIA Sensors team, uses the technology of silicon nitride (Si3N4) photonic chips, based on resonant ring structures (RR). The strategies of chemical functionalization and immobilization of biomolecules such as aptamers (single chain DNA fragments) and antibodies, have been performed on flat surfaces of Si3N4 for the detection of analytes, as a previous step to photonic measurements. Therefore, these strategies have been implemented in the preparation of the photonic chip for measurements in a laboratory environment (set-up). Refering to the strategy applied, it consists of the chemical activation of the sensor surface. Then on the RR of the chip, whose size is of the order of microns, the capture probe (antibody or aptamer) is immobilized, being the one in charge of specifically recognizing the analyte of interest (thrombin, allergen or pathogen). In the results obtained from thrombin, a study for the detection of thrombin in different biological matrices on flat surfaces of Si3N4 has been developed, in addition to the control on the activation of a blood sample through the use of tissue factor (TF) and calcium chloride (CaCl2). These results have served as a preliminary study to the optimization of the aptamer used as a capture probe, specific for thrombin for detection on photonic chips. Regarding the detection of allergens, two clearly differentiated strategies have been used. On the one hand, the use of aptamers as capture probes in the detection of Ovomucoid (OVO) and Gliadin (GLN) on Si3N4 flat surfaces. On the other hand, the implementation of monoclonal antibodies as biological capture molecules on photonic chips has been carried out in the detection of the allergens Gliadina (GLN) and casein (CAS), whose results have resulted in a calibration line. Likewise, an assay for the detection of GLN in real sample, from a meat extract with wheat gluten, has been carried out. As for the detection of pathogens, two types of strategies have been used, as for allergens. First, the use of aptamers as capture probes has resulted in the detection of two non-pathogenic strains of the E.coli bacteria (Origami and XL1BLUE) on flat surfaces of Si3N4. Secondly, the use of a polyclonal antibody as a capture probe has been immobilized on the surface of the photonic chip for the detection of Porcine Circovirus type 2 (PCV2) in a study on the dose dependence of the virus at different dilution factors. Finally, the development of a sensing platform for the detection of analytes (thrombin, allergens and pathogens) and where the different biosensors are going to be implemented is in process. / Quiero agradecer al Instituto de Salud Carlos III por el contrato i-PFIS concedido / Sánchez Sánchez, C. (2019). SISTEMA DE BIOSENSADO FOTÓNICO PARA LA DETECCIÓN DE TROMBINA, ALÉRGENOS Y PATÓGENOS. FUNCIONALIZACIÓN QUÍMICA DE CHIPS FOTÓNICOS BASADOS EN ESTRUCTURAS DE ANILLOS RESONANTES [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/133060 / TESIS

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