Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / The development of analytical methods for multiresidue determination of pesticides in food is essential for the efficient monitoring of these compounds in products consumed by the population, enabling regulators to obtain faster and reliable results. This study aimed to the development and validation of a method based on techniques modified QuEChERS-citrate and gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS) for the multiresidue determination of 45 pesticides in fruits of pineapple. The method was validated by determining the selectivity, linearity, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), precision and accuracy, being configured with detection based on electron impact ionization (EI) and selected ion monitoring (SIM). The method was satisfactory selectivity for all target compounds, except chloroneb. Limits of detection ranged from 0.005 mg/kg and 0.05 mg/kg and limits of quantification between 0.015 mg/kg and 0.09 mg/kg. The linearity was adequate for most analytes at a range of concentration of 0.01 to 0.75 mg/kg with correlation coefficients ranged from 0.9593 to 0.9996. Of pineapple samples analyzed, applying the developed method, were detected the pesticides fenpropathrin, pyraclostrobin, ametryn, triflumizole and trifluralin. / O desenvolvimento de mÃtodos analÃticos para a determinaÃÃo multirresÃduos de agrotÃxicos em alimentos à fundamental para o monitoramento eficiente desses compostos nos produtos consumidos pela populaÃÃo, possibilitando aos ÃrgÃos reguladores a obtenÃÃo de resultados mais rÃpidos e confiÃveis. Este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento e validaÃÃo de um mÃtodo fundamentado nas tÃcnicas QuEChERS-citrato modificada e cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG/EM), para a determinaÃÃo multirresÃduo de 45 agrotÃxicos em frutos de abacaxi. O mÃtodo foi validado determinando-se a seletividade, a linearidade, limite de detecÃÃo (LD), limite de quantificaÃÃo (LQ), precisÃo e exatidÃo, sendo configurado com detecÃÃo baseada em ionizaÃÃo por impacto de elÃtrons (IE) e monitoramento de Ãons selecionados (MIS). O mÃtodo apresentou seletividade satisfatÃria para todos os compostos alvo, com exceÃÃo do cloroneb. Os limites de detecÃÃo variaram entre 0,005 mg/kg e 0,05 mg/kg e os limites de quantificaÃÃo entre 0,015 mg/kg e 0,09 mg/kg. A linearidade foi adequada para a maioria dos analitos na faixa de concentraÃÃo de 0,01 a 0,75 mg/kg, com coeficientes de correlaÃÃo variando entre 0,9593 a 0,9996. Das amostras de abacaxi analisadas, aplicando-se o mÃtodo desenvolvido, foram detectados os agrotÃxicos fenpropatrina, piraclostrobina, ametrina, triflumizol e trifluralina.

Submitted by dayse paz (daysepaz@hotmail.com) on 2016-04-08T01:52:47Z No. of bitstreams: 1 Disserta_o_Mestrado_Danieli_Saul_da_Luz_PPGBAC.pdf: 1261512 bytes, checksum: 46a4fd5456a59985b29eecee57175fd5 (MD5) / Approved for entry into archive by cleuza maria medina dos santos (cleuzamai@yahoo.com.br) on 2016-04-13T22:59:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Disserta_o_Mestrado_Danieli_Saul_da_Luz_PPGBAC.pdf: 1261512 bytes, checksum: 46a4fd5456a59985b29eecee57175fd5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-13T22:59:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Disserta_o_Mestrado_Danieli_Saul_da_Luz_PPGBAC.pdf: 1261512 bytes, checksum: 46a4fd5456a59985b29eecee57175fd5 (MD5) Previous issue date: 2014 / As microalgas são organismos de extrema importância responsáveis pela produção de matéria orgânica e oxigênio nos ambientes aquáticos, portanto, qualquer alteração causada por agrotóxicos na estrutura e/ou função desses organismos podem acarretar graves consequências para a biota. Nesta linha,, os efeitos tóxicos do pesticida carbofurano foram avaliados sobre duas espécies de microalgas da Classe Chlorophyceae, Pediastrum boryanum e Desmodesmus communis, a partir da mensuração de: viabilidade celular, biomassa, teor de clorofila e quantificação de espécies reativas de oxigênio (ERO). Ainda, foi avaliada a capacidade de estas algas retirarem o carbofurano presente no meio extracelular. Para tanto, ambas as espécies foram expostas agudamente ao carbofurano (100, 1.000 e 10.000 µg L-1 ) na sua formulação comercial Furadan 350 SC® por 7 dias. Com o objetivo de escolher o melhor método para analisar a viabilidade das microalgas, foram testadas três metodologias usadas rotineiramente para medir a viabilidade de células animais – MTT, Azul de Evans e Vermelho Neutro (VN) – em P. boryanum e D. communis expostas ao herbicida glifosato (Roudup Transorb®), usado neste caso como tóxico de referência. Os resultados mostraram que as técnicas de MTT e VN são ferramentas aptas a serem utilizadas em análises de toxicidade de microalgas-alvo do estudo, sendo que o VN apresentou maior sensibilidade e o MTT maior facilidade de execução. Dessa forma, foi utilizado o MTT para medir a viabilidade das algas expostas ao carbofurano e não foi observada redução na viabilidade das células. Ainda, registramos que ambas as espécies cresceram quando em contato com o agroquímico, embora D. communis tenha apresentado crescimento menor que o controle, indicando um efeito negativo do pesticida sobre a espécie. Assim como a viabilidade celular, a concentração de clorofila não foi afetada pela presença do carbofurano. Em contrapartida, pudemos observar um aumento significativo na produção de ERO em D. communis e P. boryanum na maior concentração de exposição, sendo este aumento observado já aos quatro dias de exposição para a primeira alga e apenas ao sétimo dia para a segunda. Quanto à concentração de carbofurano no meio de cultivo, houve um rápido decréscimo do pesticida quando na presença das algas, indicando que elas foram capazes de remover o químico do meio em, no máximo, 5 dias de exposição. Em resumo, nossos resultados demonstram que existem diferenças de sensibilidade entre as duas algas, sendo a D. communis mais sensível. Além disso, a aplicação do carbofurano pode exercer efeitos negativos sobre as espécies de microalgas testadas, sendo estes expressos na forma de inibição do crescimento e geração de ERO; no entanto, tais efeitos ocorrem, principalmente, em concentração muito elevada do pesticida. Pela resistência e capacidade das microalgas em concentrar o carbofurano, sugere-se a possibilidade de utilização destas cepas como ferramentas para descontaminação de ambientes impactados por esta classe de contaminantes. / Microalgae are very important organisms responsible for the production of organic matter and oxygen in aquatic environments. Therefore, any change caused by pesticides in the structure and / or function of these organisms may have serious consequences for biota. For this reason, the toxic effects of carbofuran were evaluated in two freshwater Chlorophyceae, Pediastrum boryanum and Desmodesmus communis. The parameters cell viability, biomass, chlorophyll a content and production of Reactive Oxygen Species (ROS) were measured. Still, we evaluated the capacity of these algae to remove carbofuran from the medium. Both species were exposed to carbofuran (100, 1000, and 10000 µg L-1 ) as its commercial formula Furadan 350 SC® for 7 days. To choose the best method to analyze microalgae cell viability, we tested three methods which are routinely used to measure cell viability of animal cells – MTT, Evans’ Blue, and Neutral Red (NR). This test was performed on P. boryanum and D. communis exposed to the herbicide glyphosate (Roudup Transorb® ), used as a reference toxicant. Results showed that the techniques MTT and NR are appropriate tools to measure the microalgae cell viability. The NR was more sensitive and MTT the easiest to perform. Thus, MTT was used to measure cell viability of the microalgae exposed to carbofuran, and no reduction in their viability was observed. Likewise, we verified that both algae grew in the presence of the pesticide, however, D. communis was more affected by the pesticide than the control, indicating a negative effect of the pesticide on this species. As well as cell viability, chlorophyll a content was not affected by the presence of carbofuran. On the other hand, we observed a significant increase in ROS production by the fourth and seventh day for D. communis and just by the seventh day for P. boryanum, at the highest concentration tested. Regarding carbofuran concentration in the medium, there was a rapid decrease of its concentration in the presence of microalgae, which suggest that they are able to bioconcentrate the agrochemical at the maximum of 5 days. In summary, our results show that exist sensitivity differences between the two microalgae for carbofuran, being D. communis the most sensitive. Furthermore, the carbofuran exerted toxicity in the two species tested, being the toxic effects expressed as growth inhibition and ROS production; however, toxicity occured mainly when the pesticide was present in high concentration. Due to their resistance and capacity to remove the agrochemical from the environment, even in high concentrations, these species have potential to be used as tools for decontamination of carbofuran contaminate environments.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-11-25T08:40:33Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 7983251 bytes, checksum: 5f6d6830b746d01b9e45183b84281ef3 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-25T08:40:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 7983251 bytes, checksum: 5f6d6830b746d01b9e45183b84281ef3 (MD5) Previous issue date: 2015-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A importância das abelhas para a polinização é inquestionável. Apesar disso, populações desses organismos têm sofrido consideráveis reduções no mundo por diversos fatores que incluem o uso de pesticidas. Abelhas eussociais geralmente vivem em ninhos, onde parte do desenvolvimento pós-embrionário ocorre em favos fechados, constituindo empecilho para o estudo do desenvolvimento. Portanto, para se estudar o efeito de pesticidas nesses organismos sem interferência de fatores ambientais é necessário a criação em condições controladas em laboratório, sendo que em condições naturais parte da exposição a pesticidas ocorre via alimentação larval. Nesse sentido, o aprimoramento de métodos de criação pode contribuir para o entendimento de como pesticidas afetam processos morfofisiológicos e moleculares nas abelhas mediante exposição das larvas a esses compostos. A presente tese objetivou desenvolver e/ou melhorar técnicas de criação de abelhas in vitro e realizar testes toxicológicos para avaliar a plasticidade cerebral e comportamental em abelhas sem ferrão. Além disso, desordens ocasionadas por pesticidas em abelhas sem ferrão e abelhas melíferas também foram estudadas. De maneira geral, os resultados obtidos na presente tese permitiram concluir que: 1) a criação de abelha sem ferrão M. quadrifasciata em laboratório retarda o desenvolvimento de algumas regiões cerebrais em relação às abelhas mantidas em condições naturais; 2) o inseticida sintético imidaclopride e o bioinseticida spinosade são altamente tóxicos a abelha sem ferrão M. quadrifasciata e também promovem efeitos subletais em operárias dessa espécie; 3) é possível reduzir consideravelmente a mortalidade de Apis mellifera criadas in vitro mediante o uso de procedimentos descritos de forma inédita no presente estudo e 4) todos os pesticidas causaram mortalidade e efeitos subletais (reduções no peso corporal, alterações na atividade de genes associados a destoxificação, distúrbios no desenvolvimento e estruturas das antenas) em abelhas melíferas em virtude da exposição de concentrações realistas de campo durante a fase larval. / The importance of bees for pollination is unquestionable. Nevertheless, populations of these organisms have suffered considerable reductions in the world by several factors including the use of pesticides. Eusocial bees usually live in nests, where part of the post-embryonic development occurs in closed combs, what makes difficult the study of bee development. Therefore, to study the impact of these pesticides without interference from environmental factors, the rearing of these organisms under controlled conditions in laboratory is necessary whereas part of pesticide exposure occurs via larval feeding in natural conditions. In this sense, the improvement of rearing methods can contribute to the understanding of how pesticides affect morphophysiological and molecular processes in bees by exposure of larvae to these compounds. This work aimed to develop and/or improve in vitro bee rearing techniques and perform toxicological tests to assess brain and behavioral plasticity in stingless bees. In addition, disorders caused by pesticides in stingless bees and honeybees were also studied. In general, it can be concluded that: 1) the rearing of stingless M. quadrifasciata laboratory de reased de elop e t of so e ees’ rai regio s compared with bees kept in natural conditions; 2) the synthetic insecticide imidacloprid and bio-insecticide spinosad are highly toxic to stingless M. quadrifasciata and also promote sublethal effects on workers of this species; 3) the mortality of Apis mellifera reared in vitro can be greatly reduced by using procedures described in the present study and 4) all pesticides tested caused mortality and sublethal effects (reductions in body weight, changes in gene activity associated with detoxification, developmental disorders and structures of the antennas) in honey bees after exposure during the larval stage to realistic field pesticide concentrations.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-11-21T13:52:07Z No. of bitstreams: 1 Ricardo Lins Vale.pdf: 1686790 bytes, checksum: 103cee1a5061a9861a635c47b4d8a3f0 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-21T13:52:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ricardo Lins Vale.pdf: 1686790 bytes, checksum: 103cee1a5061a9861a635c47b4d8a3f0 (MD5) Previous issue date: 2017-08-31 / There is a strong and unavoidable commitment between water protection and its conditions of use to meet human needs, such as obtaining food, feed, fiber, biofuels and biomass. However, the inappropriate use of technologies such as agricultural pesticides can jeopardize the evolution observed in the agricultural sector. In sugarcane, several agricultural pesticides are applied simultaneously, and a set of these can be detected in the same body of water, characterizing a contamination of the water by means of mixtures of pesticides with different concentrations occurring simultaneously in a body of private water. Thus, the objective of this work was to estimate the gray water volume of the pesticide mixture (herbicides) based on the toxicity of each pesticide used in a sugarcane cultivation system in a soil in the Sugarcane Zone of Pernambuco. For this, the model developed by Paraiba et al. (2014), who assumes that pesticides are organic compounds with well-defined functions and known toxic effects, and follow first order kinetics and linear sorption process. The gray water volume is then determined by: physical-chemical characteristics of pesticides, such as soil half-life (t1/2) and organic carbon partition coefficient in the soil of the pesticide (KOC); of pesticide application rates (dose); of soil physical-chemical properties, such as soil density (ρd), soil organic carbon fraction (fOC), and volumetric water content in field capacity (θfc); and the lowest concentration value inducing half the maximum effect of a substance in a population of organisms (EC50). The volume of gray water is calculated for each of the pesticides used in the different situations in which it was applied, the gray water volume of the pesticide mixture being obtained by the sum of the gray water volume of each of the pesticides. The gray water volume of the pesticide mixture was 1.57x106 m3 in the 11.86 ha, or 1.32x105 m3 ha-1 The largest volumes of gray water and higher rankings of the blend were Amicarbazone and Hexazinone, with 1.05x105 m3 ha-1 (r = 5) and 3.71x104 m3 ha-1 (r = 4.6), respectively, influenced by the high dose applied in the case of Amicarbazone, and the low PNEC in the case of Hexazinone, which demonstrates the importance of considering the organism more susceptible to PNEC calculation, making the volume of gray water found safe for the whole ecosystem. The lowest volumes of gray water were from Paraquat and Glyphosate, with gray water volume of 1.64 and 8.43 m3 ha-1, respectively. Finally, the gray water volume for the yield of the sugarcane crop under cultivation at the Argisol dystrophic Yellow at 1731.1 m3 ton-1 was estimated, being a high value for the gray footprint of the sugarcane, which demonstrates the as this crop may require water resources to dilute its load of contaminants. Therefore, a combination of pesticides should be used to reduce the volume of gray water, taking into account the ranking of the pesticides used in this mixture, so that they bring the same results of productivity and quality. With the approximation of gray water volume of pesticides per hectare and pesticide ranking, it was possible to validate the model developed by Paraiba et al. (2014) to estimate the gray water volume of the pesticide mixture, which model is more accurate and conservative of the environment among the existing models to obtain this component of the water footprint. / Há um compromisso forte e inevitável entre a proteção da água e suas condições de utilização para suprir as necessidades do ser humano, tais como a obtenção de alimentos, rações, fibras, biocombustíveis e biomassa. Entretanto, o uso inadequado de tecnologias como, por exemplo, os defensivos agrícolas, pode colocar em risco a evolução observada no setor Agropecuário. Em cana-de-açúcar, vários defensivos agrícolas são aplicados simultaneamente, sendo que um conjunto destes pode ser detectado em uma mesma massa de água, caracterizando uma contaminação da água por meio de misturas de pesticidas com diferentes concentrações que ocorrem simultaneamente em um corpo de água particular. Assim, o objetivo deste trabalho foi estimar o volume de água cinza da mistura de pesticidas (herbicidas) baseada na toxicidade de cada pesticida usado em um sistema de cultivo de cana-de-açúcar em um solo da Zona Canavieira de Pernambuco. Para tanto, utilizou-se o modelo desenvolvido por Paraiba et al. (2014), que assume que os pesticidas são compostos orgânicos com funções bem definidas e efeitos tóxicos conhecidos, e seguem uma cinética de primeira ordem e processo de sorção linear. O volume de água cinza é então determinado através de: características físico-químicas de pesticidas, como meia-vida no solo (t1/2) e coeficiente de partição de carbono orgânico no solo do pesticida (KOC); das taxas de aplicação de pesticidas (dose); de propriedades físico-químicas do solo, como densidade do solo (ρd), fração de carbono orgânico do solo (fOC) e conteúdo volumétrico de água na capacidade de campo (θfc); e do menor valor da concentração que induz metade do efeito máximo de uma substância em uma população de organismos (EC50). O volume de água cinza é calculado para cada um dos pesticidas usados, nas diferentes situações em que este foi aplicado, sendo o volume de água cinza da mistura de pesticidas obtido pelo somatório de volume de água cinza de cada um dos pesticidas. O volume de água cinza da mistura de pesticidas foi de 1,57x106 m3 nos 11,86 ha, ou 1,32x105 m3 ha-1. Os maiores volumes de água cinza e maiores rankings da mistura foram do Amicarbazona e o Hexazinona, com 1,05x105 m3 ha-1(r = 5) e 3,71x104 m3 ha-1 (r = 4,6), respectivamente, influenciados pela alta dose aplicada, no caso do Amicarbazona, e ao baixo PNEC, no caso do Hexazinona, que demostra a importância de considerar o organismo mais susceptível para o cálculo da PNEC, tornando o volume de água cinza encontrado, seguro para todo o ecossistema. Os menores volumes de água cinza foram do Paraquat e do Glifosato, com volume de água cinza de 1,64 e 8,43 m3 ha-1, respectivamente. Por fim, foi estimado o volume de água cinza para o rendimento da cultura da cana-de-açúcar sob cultivo no Argissolo Amarelo distrófico em 1731,1 m3 ton-1, sendo um valor elevado para a pegada cinza da cana, que demonstra o quanto essa cultura pode exigir de recursos hídricos para diluir sua carga de contaminantes. Logo, uma combinação de defensivos agrícolas deve ser utilizada para diminuir o volume de água cinza, levando-se em consideração o ranking dos pesticidas utilizados nesta mistura, de forma que tragam os mesmos resultados de produtividade e qualidade. Com a aproximação dos dados de volume de água cinza dos pesticidas por hectare e ranking de pesticidas, foi possível validar o modelo desenvolvido por Paraiba et al. (2014) para estimar o volume de água cinza da mistura de pesticidas, sendo esse modelo o mais preciso e conservador do meio ambiente entre os modelos existentes para se obter esse componente da pegada hídrica.

A crescente utilização do controle químico para o manejo de pragas na cultura dos citros tem afetado significativamente a dinâmica populacional de inimigos naturais como os ácaros predadores que são importantes no controle biológico de pragas como o ácaro-da-leprose Brevipalpus phoenicis (Geijskes). Dentro desse contexto, a integração dos controles químico e biológico, seja pela utilização de produtos seletivos ou linhagens de ácaros predadores resistentes a pesticidas, poderia resultar em uma forma de manejo racional de ácaros fitófagos. Sendo assim, a presente pesquisa foi desenvolvida para avaliar a suscetibilidade de diferentes espécies de ácaros fitoseídeos (Amblyseius chiapensis De Leon, Euseius concordis (Chant) e Iphiseiodes zuluagai Denamark & Muma) a dicofol e deltametrina, em populações coletadas em pomares de citros. Não houve variabilidade interespecífica na suscetibilidade ao dicofol. E também, não foi constatada variabilidade intraespecífica na suscetibilidade das populações de E. concordis testadas. Por outro lado, E. concordis apresentou-se aproximadamente 50 vezes mais tolerante do que I. zuluagai à deltametrina. Foi detectada variabilidade intraespecífica na suscetibilidade à deltametrina nas populações de E. concordis e I. zuluagai, sendo que a razão de resistência estimada foi maior do que 14 vezes para as populações de E. concordis e de 18 vezes para as populações de I. zuluagai testadas. E por último, verificou-se diferenças significativas quanto a respostas de repelência apresentadas pelas populações de E. concordis a resíduos de deltametrina. / The increase in the use of chemical control for managing pests of citrus has significantly affected the population dynamics of natural enemies such as predator mites that are important in the biological control of phytophagous mites such as Brevipalpus phoenicis (Geijskes). Within this context, the integration of chemical and biological control through the use of selective pesticides or strains of predator mites resistant to pesticides could be a more rational way to manage phytophagous mites. Thus, the objective of this research was to evaluate the susceptibility to dicofol and deltamethrin in populations of different phytoseiid species (Amblyseius chiapensis DeLeon, Euseius concordis (Chant) e Iphiseiodes zuluagai Denamark & Muma) collected in citrus groves. There was no interespecific variability in response to dicofol. And also, no intraespecific variability in the susceptibility to dicofol in E. concordis populations was detected in this study. On the other hand, E. concordis was 50 times more tolerant than I. zuluagai to deltamethrin. Intraespecific variability in the susceptibility to deltamethrin was detected for both E. concordis and I. zuluagai populations. A resistance ratio of > 14- fold and 18- fold was detected to deltamethrin in E. concordis and I. zuluagai populations, respectively. And finally, there was a significant difference in the repellency of E. concordis populations in deltamethrin residues.

Bases para a implementação de um programa de manejo da resistência de Blattella germanica (L.) a inseticidas foram coletadas no presente trabalho. Técnicas de bioensaio de aplicação tópica e de contato tarsal foram comparadas inicialmente para a detecção da resistência a deltametrina e clorpirifós. O bioensaio de aplicação tópica possibilitou uma melhor discriminação entre a linhagem suscetível e as populações de campo de B. germanica testadas. Resultados do monitoramento da suscetibilidade de B. germanica a inseticidas evidenciaram a presença de variabilidade genética que confere resistência a deltametrina, clorpirifós e fipronil em populações coletadas em alguns estabelecimentos comerciais dos Estados de São Paulo e Rio de Janeiro. As razões de resistência encontradas para deltametrina e clorpirifós foram de aproximadamente 43 e 6 vezes, respectivamente. A resistência de B. germanica a deltametrina foi instável, ou seja, houve uma redução significativa na freqüência de resistência na ausência de pressão de seleção. Estudos de relações de resistência cruzada revelaram uma baixa intensidade de resistência cruzada (aproximadamente 2 vezes) entre fipronil e os inseticidas deltametrina e clorpirifós. E por último, a mistura de deltametrina e clorpirifós foi avaliada para o controle de linhagens de B. germanica resistentes a deltametrina. A mistura proporcionou um melhor controle da linhagem suscetível do que os produtos utilizados isoladamente. No entanto, a discriminação entre as linhagens suscetível e resistente a deltametrina foi evidente com a mistura nas doses recomendadas comercialmente, o que inviabilizaria o emprego desta estratégia no manejo da resistência de B. germanica a deltametrina. / Bases for implementing a resistance management program of Blattella germanica (L.) to insecticides were collected in this study. Initially, we compared the topical and residual tarsal-contact bioassays for detecting resistance to deltamethrin and chlorpyrifos. The topical bioassay gave better discrimination between susceptible and field-collected populations of B. germanica. Results from a survey of the susceptibility of B. germanica to insecticides revealed the presence of genetic variability that confers resistance to deltamethrin, chlorpyrifos and fipronil in field-collected populations of B. germanica from the States of São Paulo and Rio de Janeiro. The resistance ratios to deltamethrin and chlorpyrifos were approximately 43 and 6-fold, respectively. The resistance of B. germanica to deltamethrin was unstable; that is, a significant reduction in the frequency of resistance was detected under absence of selection pressure. Studies on cross-resistance relationships showed a low intensity of cross-resistance (approximately 2-fold) between fipronil and the insecticides deltamethrin and chlorpyrifos. And finally, the viabilility of the use of deltamethrin and chlorpyrifos mixture was evaluated for controlling deltamethrin-resistant strains of B. germanica. The use of mixtures gave better control of the susceptible strain than the use of the products by itself. However, the discrimination between susceptible and resistant strains was clear with the use of mixtures at recommended rates, which impairs the use of this strategy for managing B. germanica resistance to deltamethrin.

Agrotóxicos são produtos químicos aplicados no ambiente para controlar as espécies que causam danos às culturas agrícolas. No entanto, podem atingir espécies não-alvo ao serem carreados para os ecossistemas aquáticos e ainda causar sérios danos a saúde humana. Dentre os diversos agrotóxicos destaca-se o Vertimec®, utilizado em várias culturas agrícolas, incluindo morango e batata, produtos que compõem a renda econômica de muitos produtores rurais. Porém, apesar de seu uso intenso, existe ainda uma carência de estudos sobre seus potenciais riscos a biota terrestre e aquática. Dentro desse contexto, procurou-se avaliar os efeitos da aplicação do Vertimec® sobre o fitoplâncton, por meio de estudos laboratoriais (bioensaio unialgal com Pseudokirchneriella subcapitata) e in situ (composição e densidade, em mesocosmos) a partir da simulação da contaminação do solo com Vertimec® e posterior carreamento ao corpo hídrico, utilizando a água do runoff em bioensaio unialgal; da adição da água do runoff em mesocosmos, em quatro tratamentos (controle, runoff contaminado, não contaminado e adição direta do contaminante), avaliando os efeitos na estrutura da comunidade e do bioensaio unialgal com Abamectina, principal princípio ativo do Vertimec®. Os resultados obtidos demonstram que os efeitos do runoff sobre a densidade celular de P. subcapitata não ocorreram em função do produto aplicado e sim pela elevada turbidez das amostras. Nos testes com a água dos mesocosmos, os tratamentos que receberam o runoff estimularam o crescimento de P. subcapitata, indicando o efeito do aporte de nutrientes ao meio de cultura, enquanto menores densidades ocorreram no tratamento com adição direta de Vertimec®, porém, ainda maiores em relação ao controle. Na análise da estrutura da comunidade de fitoplâncton nos mesocosmos, verificou-se alterações nas características físicas e químicas da água (pH, oxigênio dissolvido, turbidez, condutividade e nutrientes), caracterizando efeitos do runoff (com ou sem Vertimec®) ou da adição direta do contaminante, os quais implicaram em mudanças na densidade e composição do fitoplâncton (como a redução de Bacillariophyta, o aumento de Chlorophyceae e, entre estas, uma maior contribuição da espécie Monoraphidium minutum). Apesar do reconhecimento dos efeitos do Vertimec® no fitoplâncton, por meio dos estudos in situ, os resultados com a Abamectina não demonstram toxicidade a alga P. subcapitata, indicando a presença de outros contaminantes no produto comercial. / Pesticides are chemical products applied to environment in order to control species which cause harm to agriculture. However, these chemicals can reach non-target species when flushed into aquatic ecosystems and even bring grave diseases to human health. Amongst many, Vertimec® stands out in a range of pesticides, being utilized in numerous agricultures, including potatoes and strawberries, which constitute the income of many farmers. Nevertheless, despite its intensive use, there is still lack of research and study on its potential risks on terrestrial and aquatic biota. In this context, we sought to evaluate the effects of the application of Vertimec® on phytoplankton, through laboratorial study (unialgal bioassay, with Pseudokircheneriella subcapitata) and in situ (composition and density, in mesocosms) starting from the simulation of soil contamination with Vertimec® and subsequent flushing into the body of water, making use of the runoff water in unialgal bioassay; the addition of runoff water from mesocosms in four treatments (control, contaminated runoff, non-contaminated and direct addition of contaminant), evaluating the effects on the community structure and unialgal bioassay with Abamectin, main Vertimec®s active principle. The results obtained show that the runoff effects on the cellular density of P. subcapitata will not occur according the product used but due to the high turbidity of the samples. At the tests with water at the mesocosms, the treatments which received runoff motivated the growing of P. subcapitata, indicating the nutrient-contributing effect to the environment of the culture. At the analysis of the phytoplanktonic community at the mesocosms, alterations on the physical and chemical characteristics of the water were observed (pH, dissolved oxygen, turbidity, conductivity and nutrients) featuring effects of runoff (with or without Vertimec®) or the direct addition of the contaminant, which implicated chances in the density and composition of the phytoplankton (such as the reduction of Bacillariophyta, increase of Chlorophyceae and, along with these , a larger contribution to the species Monoraphidium minutum). Despite acknowledging the effects of Vertimec® on phytoplankton, though in situ studies, the results from Abamectin do not show toxicity to the algae P.subcapitata, demonstrating the presence of other contaminants in the marketable product.

Este estudo foi realizado com o objetivo de identificar genótipos de feijão Phaseolus vulgaris resistentes aos carunchos Acanthoscelides obtectus e Zabrotes subfasciatus, bem como avaliar o efeito associado desses genótipos resistentes com inseticidas de origem vegetal. Para tanto, foram utilizados acessos de P. vulgaris do Banco de Germoplasma do Instituto Agronômico de Campinas e inseticidas comerciais de origem botânica. No screening inicial, amostras dos genótipos foram infestadas com cada uma das espécies de bruquídeos separadamente, avaliando-se o número de insetos emergidos aos 50 dias após a infestação. Dos 49 genótipos testados contra A. obtecus, não houve emergência naqueles com números de acesso 525, 584 e 615, podendo ser considerados os mais resistentes. Em relação a Z. subfasciatus, os genótipos com números de acesso 2, 35, 251, 570, 583, 584, 610, 621, 634, 816, 818 e 819 se mostraram mais resistentes entre os 185 avaliados. Destes, os genótipos portadores de arcelina 583, 584, 816, 818 e 819, além de 570 e 610, foram selecionados como os mais promissores para os testes subseqüentes, juntamente com a variedade Bolinha, que foi utilizada como controle de suscetibilidade. Não foi observada correlação entre as características morfoagronômicas dos genótipos de P. vulgaris e a sua resistência às espécies de bruquídeos avaliadas, indicando que a resistência a estas pragas não está associada às características da flor, vagem, semente e fenologia dos genótipos. A massa de mil sementes, que é indicativa da origem dos genótipos, foi um dos descritores analisados, mostrando também que a resistência de P. vulgaris a A. obtectus e a Z. subfasciatus não está relacionada à origem dos genótipos. Em testes de livre escolha e de confinamento, avaliou-se o efeito dos genótipos selecionados no screening, juntamente com a variedade Bolinha, sobre o comportamento e biologia de Z. subfasciatus. Verificou-se que a avaliação da preferência de Z. subfasciatus por genótipos de P. vulgaris em teste de livre escolha pode ser feita com 1 dia após a infestação e que \'Bolinha\', apesar de ser suscetível a Z. subfasciatus e favorecer o seu desenvolvimento, apresenta antixenose para oviposição em relação à praga. Nos testes realizados, os genótipos contendo arcelina tenderam a ser mais resistentes que os demais sem essa proteína, sendo que os seus efeitos sobre Z. subfasciatus incluíram o aumento da mortalidade no período de desenvolvimento, alongamento desse período e redução do peso de adultos emergidos, mantendo-se, de certa forma, estáveis ao longo de duas gerações da praga. A resistência conferida pela arcelina revelou ser do tipo antibiose, tendo como causas a impropriedade nutricional e a ação no metabolismo do inseto. Com relação aos inseticidas botânicos, foram testados 3 produtos comerciais, sendo 2 à base de azadiractina e um à base de rotenona. Entre estes, o produto que mais afetou o desenvolvimento de Z. subfasciatus foi NeemPro®, derivado de nim (Azadirachta indica), o qual apresentou efeito ovicida e prolongou a duração do período de desenvolvimento de Z. subfasciatus. Frente a isto, avaliou-se o efeito associado de NeemPro® com o genótipo resistente portador de arcelina 818 sobre alguns parâmetros biológicos de Z. subfasciatus. Verificou-se que os efeitos mais severos sobre Z. subfasciatus foram causados pelo genótipo resistente, independentemente do inseticida à base de nim e que o uso associado de ambos não provoca efeito aditivo ou sinérgico, não sendo recomendado para o manejo de Z. subfasciatus. / This research was carried out to identify Phaseolus vulgaris genotypes resistant to the bean weevils Acanthoscelides obtectus and Zabrotes subfasciatus, as well as to evaluate the effect of these genotypes in association with botanical insecticides. To reach this objective, P. vulgaris accessions from the Germplasm Bank of Instituto Agronômico de Campinas and commercial insecticides from botanical origin were tested. In the initial screening, samples of bean genotypes were infested with the weevil species separately and the number of adults emerged at the 50th day after infestation was evaluated. There was no A. obtectus emergence in genotypes 525, 584 and 615, among the 49 ones screened against this pest. In relation to Z. subfasciatus, genotypes with accession numbers 2, 35, 251, 570, 583, 584, 610, 621, 634, 816, 818 and 819 showed themselves resistant among 185 screened ones. The arcelin-containing genotypes 583, 584, 816, 818 and 819, plus 570 and 610 (both lacking this protein), were selected as the most promising for additional evaluations. Bolinha variety was also used as the susceptible standard. No correlation between morpho-agronomical characteristics of the P. vulgaris genotypes and their resistance to the weevils was observed, indicating that resistance to these two pests is not associated to genotypes flower, pod and seed characters or plant phenology. The mass of 1000 seeds, which indicates the origin of genotypes, was one of the used descriptors, showing that P. vulgaris resistance to A. obtectus and Z. subfasciatus is not related to genotypes origin too. In free- and no-choice tests, it was evaluated the effect of the screened genotypes on Z. subfasciatus behavior and biology, compared to \'Bolinha\'. It was verified that in free-choice tests, the evaluation of Z. subfasciatus preference for P. vulgaris genotypes can be done 1 day after infestation. Despite being susceptible to Z. subfasciatus and supporting its development, \'Bolinha\' holds antixenosis for oviposition in relation to the pest. In the bioassays carried out, genotypes containing arcelin tended to be more resistant than those lacking this protein and their effects on Z. subfasciatus include increasing of the mortality in the developmental period, enlargement of this period and reduction in adult weight, also being stable during two pest generations. The resistance provided by arcelin revealed itself to be antibiosis, by acting as antinutrients and also as antimetabolics. In relation to botanical insecticides, 3 commercial products, 2 of them based on azadirachtin and 1 based on rotenone, were evaluated. The insecticide NeemPro®, extracted from neem (Azadirachta indica) was the only one significantly causing ovicidal effect and enlarging Z. subfasciatus developmental period. Based on these results, the associated effect of NeemPro® and the resistant arcelin-containing P. vulgaris genotype 818 on some Z. subfasciatus biological parameters was evaluated. It was verified that the most severe effects on Z. subfasciatus were caused by the resistant bean genotype, independently of the neem based insecticide. The associated use of these two control methods no results in additive or synergistc effect and is not recommended for the management of Z. subfasciatus.

O experimento teve por objetivo avaliar diferentes estratégias de manejo para ensilagem do capim Xaraés (Brachiaria brizantha, Stapf., cv Xaraés), considerando os reflexos destas sobre a composição químico-bromatológica e estabilidade aeróbia das silagens obtidas. Os tratamentos foram assim definidos: Controle - corte e ensilagem; Em - ceifa, emurchecimento (5 horas) e ensilagem; Glifosato 0h+Em - aplicação de glifosato (3 mL/1,5L H2O), ceifa, emurchecimento (5 horas) e ensilagem; Glifosato 24h+Em - aplicação de glifosato, ceifa após aproximadamente 24 horas da aplicação, emurchecimento (5 horas) e ensilagem; Glifosato 72h+Em - aplicação de glifosato, ceifa 72 horas após a aplicação, emurchecimento (5 horas) e ensilagem; Glifosato 72h - aplicação de glifosato, corte 72 horas após a aplicação, e ensilagem. Confirmando a tendência típica de gramíneas tropicais a forragem apresentou, originalmente, baixo teor de MS e de carboidratos solúveis. Características como produtividade, PB, fração fibrosa e digestibilidade apontam para sua utilização como silagem através de alternativas capazes de contornar os problemas relativos a alta umidade. Em relação às características das silagens obtidas, os tratamentos não se mostraram efetivos na elevação do teor de MS aos níveis preconizados, resultando em silagens com alto teor de N-NH3, AGV’s, e redução sensível das frações solúveis em favor das fibrosas. Como conseqüência disto, a estabilidade aeróbia das silagens foi alta, com degradação evidente apenas nas frações fibrosas. De forma geral, o emurchecimento determinou melhoria nas silagens quando comparadas as silagens não emurchecidas (P<0,05), mesmo não tendo sido atingido o teor de MS planejado. A aplicação do glifosato não determinou alterações consistentes em relação às variáveis analisadas (P>0,05), com exceção para a redução da proteólise durante a fermentação. / The trial focused on the management strategies to ensile Xaraés grass (Brachiaria brizantha, Stapf. cv Xaraés) considering side effects on chemical composition and aerobic stability of silages. Treatments were described as follows: Control - cut and ensiled; Em - chopped, wilted (5 hours) and ensiled; Gly0h+EM - glyphosate (3mL/1,5L H2O), chopped, wilted (5 hours) and ensiled; Gly24h+EM - glyphosate, chopped 24 h latter, wilted (5 hours) and ensiled; Gly72h+EM - glyphosate, chopped 72 h latter, wilted (5 hours) and ensiled; Gly72h - glyphosate, cut 72 h latter and ensiled. Forage samples showed low content of DM and soluble carbohydrate which was typical. DM yield, CP, fiber fraction and digestibility, however demonstrated a interesting potential for this forage source which need alternative strategy to overcome the problems related with excessive moisture content. Treatments studied were not effective to improve DM content as planned, resulting in silages containing higher levels of N-NH3, VFA’s, fiber fractions and marked decrease in soluble fractions. Generally, the wilting resulted in better silage quality as compared with the wet silages, even though. The DM goal was not achieved. Glyphosate did not determined, consistent changes on the studied variables, with exception to lower level of proteolysis on the treated silages.

A utilização descontrolada de pesticidas tem provocado no decorrer dos anos a intoxicação de milhares de pessoas no mundo, uma vez que, seus resíduos têm sido depositados em alimentos, em solos e em ambientes aquáticos. Assim, a construção de duas novas plataformas sensoras para a detecção de pesticidas é o objetivo desse trabalho. Na primeira plataforma foi utilizado o polieletrólito catiônico polietilenoimina (PEI) em conjunto com o polissacarídeo extracelular algal (PSE) produzido pela microalga criptofícea Cryptomonas tetrapirenoidosa preparados através da técnica de deposição \"spin-coating\". E a segunda plataforma foi produzida por eletrodeposição pulsada, entre um potencial de redução e um de oxidação, utilizando nanoestruturas de óxido de zinco (ZnO). Para caracterizar as plataformas, foram utilizadas as técnicas de microscopia eletrônica de varredura com fonte de emissão de campo (FEG-SEM), difração de raios X (XRD), espectroscopia de absorção ultravioleta-visível (UV-Vis), microscopia de força atômica (AFM) e espectroscopia de reflexão-absorção no Infravermelho com modulação da polarização (PM-IRRAS). Através da imobilização da enzima polifenol oxidase na forma de extrato bruto em sua fonte natural (fruto abacate), as plataformas de PEI/PSE e ZnO, foram avaliadas como biossensores de catecol e do inseticida carbaril. De modo comparativo, as plataformas de PEI/PSE sem a presença imobilizada da enzima também foram estudadas para a detecção do catecol e do carbaril. A simplicidade na formação e na construção dessas plataformas vem qualificá-las como viáveis a serem produzidas em escala industrial e com baixo custo de processamento. E diante dos resultados obtidos no desenvolvimento desses biossensores destaca-se a eficiência e a rapidez de detecção, o que os tornam economicamente promissores e competitivos em termos de aplicações ambientais. / The uncontrolled use of pesticides has resulted over the years the intoxication of thousands of people in the world, since their waste has been deposited in food, in soil and aquatic environments. Thus, the construction of two new sensors platforms for pesticide detection is the objective of this work. At first platform was used cationic polyelectrolyte polyethyleneimine (PEI) along with the extracellular algal polysaccharide (EPS) produced by microalgae criptofícea Cryptomonas tetrapirenoidosa prepared by deposition technique \"spin-coating\". The second platform was produced by pulsed electrodeposition between a reduction and an oxidation potential using nanostructures zinc oxide (ZnO). To characterize the platforms, we used the techniques of field emission gun scanning electron microscopy (FEG-SEM), X-ray diffraction (XRD), ultraviolet visible absorption spectroscopy (UV-Vis), atomic force microscopy (AFM), and polarization modulation infrared reflection-absorption spectroscopy (PM-IRRAS). By immobilization of the polyphenol oxidase enzyme as a crude extract in their natural source (avocado fruit), platforms PEI/PSE and ZnO, they were evaluated as catechol and carbaryl insecticide biosensors. In a comparative way, the platforms PEI/PSE without the presence of immobilized enzyme were also studied for detection of catechol and carbaryl. The simplicity in the formation and construction of these platforms comes qualify them as viable to be produced on an industrial scale and low cost processing. And on the results obtained in the development of such biosensors stand out the efficiency and speed of detection, which make them economically promising and competitive in terms of environmental applications.