Eine Erhöhung des Bilirubins über 2 mg/dl betrifft 90 % aller Neugeborenen. Sie ist meist physiologisch und tritt optisch sichtbar bei 60-70 % dieses Kollektivs auf. In der pathologischen, exzessiv erhöhten Form ist sie der häufigste Grund für eine stationäre Wiederaufnahme während der ersten sieben Lebenstage. Ihre schwerste Komplikation, der Kernikterus, scheint - trotz allgemein verfügbarer, preiswerter und sicherer Therapiemöglichkeiten - wieder vermehrt aufzutreten. Die Gründe liegen im Überwachungsdefizit bei früher Entlassung von schlecht aufgeklärten Eltern, Nichtbeachtung der Besonderheiten der Neugeborenen ≤ 38 Schwangerschaftswochen und der zunehmenden Tendenz zum Stillen bei häufig unzureichender Anleitung. Ferner werden ikterische Kinder nur zu oft lediglich visuell bezüglich des Grades der Bilirubinämie eingeschätzt und die Therapie somit erheblich verzögert. Gegenstand dieser Arbeit ist die Frage, ob aus der Dynamik des Serumbilirubinspiegels von der Geburt bis zum 3. Lebenstag die Wahrscheinlichkeit des Auftretens einer phototherapiepflichtigen Hyperbilirubinämie abgeschätzt werden kann. Dazu wurde der Serumbilirubinspiegel direkt postnatal aus dem Nabelschnurblut, bzw. am 3. Lebenstag gleichzeitig mit dem Stoffwechselscreening ermittelt und der Phototherapiebedarf im Verlauf festgehalten. Um die Aussage zu präzisieren, wurde die Studienpopulation aus 2573 Kindern weiter unterteilt in 2180 reife tAGA- (hier Eu- und Hypertrophe), 267 reife tSGA-Kinder (Hypotrophe) und 126 FG (Frühgeborene). In allen 3 Gruppen korrelierten das Nabelschnurbilirubin und der Serumbilirubinwert vom 3. Lebenstag positiv mit der Entwicklung einer Hyperbilirubinämie. Anhand dieser Ausgangswerte konnten Grenzen für Hoch-, Mittelhoch-, Mittelniedrig- und Niedrigrisikogruppen definiert werden, welche die Entwicklung einer Hyperbilirubinämie mit einer Wahrscheinlichkeit von ≥ 20 %, 5-20 %, 0 < x <5 % und 0 % voraussagen. Damit kann man bereits früh eine Vorabselektion entsprechend dem Gefährdungspotential treffen und die Verlaufskontrollen entsprechend terminieren. Als Risikofaktoren einer therapiepflichtigen Hyperbilirubinämie wurden außerdem Frühgeburtlichkeit, seltener tSGA, geringes Geburtsgewicht und niedriges Gestationsalter (in der vorliegenden FG-Gruppe nicht signifikant) gefunden. Im Falle einer Sectiogeburt und bei Zuhilfenahme von Hilfsmitteln im Rahmen einer vaginalen Entbindung nahm der Bedarf an Phototherapie in der tAGA- und tSGA-Gruppe zu.:Bibliographische Beschreibung……………………………………………………………………….1 Abkürzungsverzeichnis………………………………………………………………………………..2 1. Einleitung…………………………………………………………………………………...3 1.1. Geschichtliche Entwicklung……………………………………………………………………...3 1.2. Wandel der Anschauungen zu den Therapiegrenzen…..…………………………….................4 1.3. Hyperbilirubinämie……………………………………………………………………………….7 1.4. Kernikterusregister………………………………………………………………………………..8 1.5. Problemstellung…………………………………………………………………………………...9 2. Patienten und Methoden………………………………………………………………..11 2.1. Patientenkollektiv………………………………………………………………………………...11 2.2. Ausschlusskriterien………………………………………………………………………………11 2.3. Datenerfassung………………………………………………………………………………...…11 2.4. Phototherapie (PT)………………………………………………………………………………12 2.5. statistische Analyse………………………………………………………………………………13 2.5.1. konkrete Fragestellung………………………………………………………………………………...…13 2.6. Signifikanzniveau……………………………………………………..………………………….13 3. Ergebnisse………………………………………………………………………………..14 3.1. Gesamtpopulation…………………………………………………………….………………….14 3.2. Charakteristika der Studienpopulation…………………………….…………………………..14 3.3. tAGA (reife eu- und hypertrophe Neugeborene)………………………………………………16 3.4. tSGA (reife hypotrophe Neugeborene).……….……………………………………………….18 3.5. Frühgeborene (FG)………………………………..…………………………….……………….20 3.6. direkter Vergleich der 3 Untergruppen (tAGA, tSGA und FG)…………………………...…22 3.7. Charakteristika der Population der zweiten Studienphase…………………………………...28 3.8. tAGA-Kinder in der zweiten Studienphase (TSB3-tAGA)……………………………………30 3.9. tSGA in der zweiten Studienphase (TSB3-tSGA)….…………………………………………..32 3.10. Frühgeborene in der zweiten Studienphase (TSB3-FG)……………….…………………….35 3.11. direkter Vergleich der drei Untergruppen der zweiten Studienphase…………….………..37 3.12. Vergleich der retro- und prospektiven Teile der Studie…….……………………………….43 3.13. Die Phototherapiegruppe………………………………………………………………………45 3.13.5. Zusammenhang zwischen Phototherapie und Geburtsmodus………………………………………..47 3.13.6. Zusammenhang zwischen Phototherapie und Nabelschnurbilirubin………………………………..48 3.13.7. Zusammenhang zwischen Phototherapie und Serumbilirubin vom 3.LT (TSB3)…………………..51 3.14. Vorhersage der therapiepflichtigen Hyperbilirubinämie anhand der Nabelschnurbilirubin-Werte…..………………………………………………….…………………………………….……..54 3.14.1. statistische Begriffe………………………………………………………………………………………54 3.14.2. Vorhersage der therapiepflichtigen Hyperbilirubinämie anhand der Nabelschurbilirubin-Werte.54 3.15. Vorhersage der therapiepflichtigen Hyperbilirubinämie anhand TSB3 (Serumbilirubin vom 3. Lebenstag)……………………...………………………………………..……………………56 3.16. Zusammenhang zwischen NS-Bili und TSB3(Serumbilirubin vom 3. Lebenstag)…………58 3.17. Regressionsanalyse…………………………………...…………………………………………59 3.17.1. univariate Regressionsanalyse………………………………………………………………………….59 3.17.2. multivariate Regressionsanalyse………………………………………………………………………..59 3.18. Odds Ratio einer therapiepflichtigen Hyperbilirubinämie………………………………….61 3.19. Beginn und Dauer der Phototherapie…………………………………………………………62 4. Diskussion……………………………………….…………………………………..…….64 Nabelschnurbilirubin und Phototherapie………………………………………………….……….64 Serumbilirubin vom 3. Lebenstag und Phototherapie….………………………………………….67 Kombination aus Nabelschnurbilirubin und Serumbilirubin vom 3.Lebenstag…………………71 Phototherapiegruppe…………………………………………………………………………………73 Schlussfolgerung…………………………...…………………………………………………………76 5. Zusammenfassung der Arbeit……………………………………………………………78 6. Literaturverzeichnis………………………………………………………………………82 7. Abbildungsverzeichnis……………………………………………………………………98 8. Tabellenverzeichnis……………………………………………………………………….99 Erklärung über die eigenständige Abfassung der Arbeit…………………………..……101 Danksagung…………………...…………………………………………………..………..102 Lebenslauf……………………………………………………………………………………………103

Úlcera venenosa é o tipo de úlcera mais freqüente nos membros inferiores, conseqüente à insuficiência venosa crônica. Há várias condutas terapêuticas para o seu tratamento, desde terapias tópicas como a sulfadiazina de prata a 1% a aparelhos bioestimuladores como fototerapia, ultra-som e outros. A fototerapia por laser ou LEDs (diodos emissores de luz) tem sido estudada principalmente como método bioestimulador para o reparo tecidual e alívio da dor. O presente estudo tem como objetivo analisar a eficácia do tratamento com fototerapia (LEDs) associado ao curativo diário de sulfadiazina de prata a 1% creme (SDZ) em pacientes com úlceras venosas crônicas. Estudo randomizado, duplo-cego, no qual foi utilizado aparelho de fototerapia (Dynatron 880 Infrared Therapy Probe - Dynatron Solaris) contendo 2 sondas de conformação idêntica, cujas especificidades foram reveladas apenas ao final do estudo: sonda 1 (1 LED de 644 nm, 18 mW, 1,12 J/\'CM POT.2\') e sonda 2 (1 LED de 641 nm e 32 LEDs de 891 nm; 131 mW; 1,57 J/\'CM POT.2\'). Foram selecionados 20 pacientes com 32 úlceras venosas crônicas, atendidos no ambulatório de úlceras da dermatologia do CSE-FMRP-USP, das quais se constituíram 3 grupos (G) distintos pela forma de tratamento: G1-sonda 1 e SDZ; G2-sonda 2 e SDZ e G3-somente SDZ, seguidos por 90 dias. Após a assepsia das úlceras, as sondas foram aplicadas pontualmente sobre a ferida protegida com PVC, a 1,5 J/\'CM POT.2\', durante 30 seg/5 \'CM POT.2\', 2x/semana, e posterior curativo com SDZ. Quinzenalmente, as úlceras foram fotografadas digitalmente e suas imagens avaliadas por meio do software Image J (marca registrada), para mensuração das áreas total, de tecido de granulação (cor vermelha) e de esfacelo/fibrina (cor amarela). Foram calculados os índices de cicatrização das úlceras (ICU) pela fórmula [(ICU=Ai-Af)/Ai], sendo Ai (área inicial) e Af (área final). O ICUs médios do G2 foram de 0,3 e 0,5 no 30º e 90º dias com redução significante das áreas ulceradas (p < 0,01), quando comparado ao G3 com ICUs médios de -0,08 e -0,03 respectivamente. No G1, apenas no 90º dia, o ICU médio (0,42) foi diferente do G3 (-0,03), sendo p < 0,01. Ao considerar a freqüência das úlceras pequenas com ICU \'> OU =\' 0,4, o G2 teve esse índice alcançado por 75% das úlceras no 30º e no 90º dias, enquanto o G1 o atingiu em 33% das úlceras somente no 60º dia. À análise espectofotométrica no final do estudo, observou-se que os LEDs de 641 nm não emitiam luz eficaz na sonda 2, a qual se constituía essencialmente de LEDs de 891 nm. Os resultados obtidos demonstraram que a fototerapia LED 891 nm acelerou o processo cicatricial das úlceras venosas crônicas em relação ao LED 644 nm e, ambos, em relação à sulfadiazina de prata a 1%, corroborando as evidências de vários estudos in vivo e in vitro sobre o uso de fototerapia (laser e LEDs) de 600 a 1000 nm no reparo tecidual. Desta forma, a fototerapia por LEDs mostrou-se como um bom método físico, bioestimulador, não invasivo e coadjuvante aos tratamentos convencionais para úlceras venosas, como a sulfadiazina de prata a 1% / Venous ulcer is the most common type of ulcer in the lower limbs, consequent to chronic venous insufficiency. There are several forms to treat them from topical therapies such as 1% silver sulfadiazine cream to biostimulators devices as ultrasound, phototherapy and others. The phototherapy laser or LEDs (light-emitting diode) has been studied, mainly as biostimulator method for tissue repair and pain relief. This study aims to analyze the effectiveness of treatment with phototherapy (LEDs) associated with the daily dressing of 1% silver sulfadiazine cream (SDZ) in patients with chronic venous ulcers. This study was randomized, double-blind, in which device was used for phototherapy (Dynatron 880 Infrared Therapy Probe - Dynatron Solaris) containing 2 probes of similar conformation and their specifications were revealed only at the end of the study: probe 1 (1 LED - 644 nm, 18 mW, 1.12 J/\'CM POT.2\') and probe 2 (1 LED - 641 nm and 32 LEDs - 891 nm; 131 mW; 1.57 J/\'CM POT.2\'). Twenty patients were selected from ulcer outpatient clinic of dermatology service CSE-FMRP-USP, with 32 chronic venous ulcers, which were created 3 groups (G) by different forms of treatment: G1-probe 1 and SDZ; G2-probe 2 and SDZ and G3-only SDZ, followed by 90 days. After ulcers asepsis, the probes were applied on the wound punctually protected with PVC plastic sheet, to 1.5 J/\'CM POT.2\' for 30 seg/5 \'CM POT.2\', twice a week, and dressing with SDZ later. Fifthly, the ulcers were photographed digitally and their images were evaluated by the software ImageJ to measure of the total, granulation tissue (red) and sphacel/fibrin (yellow) areas. The wound healing rates (WHR) were calculated by formula [(WHR = Ao-Af)/Ai], meaning Ao (original area) and Af (final area). The averages of the G2 WHRs were 0.3 and 0.5 in the 30th and 90th days, with a significant reduction of the ulcerated areas (p < 0.01) when compared to the G3 with averages -0.08 and -0.03 respectively. In the G1, only at the 90th day, the mean of WHR (0.42) was different from the G3 (-0.03), and p<0.01. Considering the frequency of small ulcers with WHR \'> OU =\' 0.4, the G2 has reached this index by 75% of the ulcers in 30th and 90th days, while the G1 achieved in 33% of ulcers only in the 60th day. In the spectrophotometric analysis in the end of the study, it was observed that the 641 nm LEDs didn\'t issued effective light in probe 2, which was mainly constituted of 891 nm LEDs. The results showed that the 891 nm LED phototherapy accelerated the healing process of chronic venous ulcers in relation to the 644 nm LED, and both in relation to the silver sulfadiazine cream to 1%, corroborating evidence from several studies in vivo and in vitro on using of phototherapy (lasers and LEDs) of 600 to 1000 nm in tissue repair. Thus, the phototherapy by LEDs showed itself as a good physical method, biostimulator, noninvasive and an adjunct to conventional treatments for venous ulcers, such as silver sulfadiazine to 1%.

A cirurgia ortognática é o procedimento cirúrgico que visa a correção das deformidades dentofaciais esqueléticas e pode levar a diminuição dos movimentos mandibulares, dor e edema. Uma possibilidade de tratamento para essas consequências é a fototerapia com laser de baixa potência. O objetivo deste estudo foi realizar uma avaliação longitudinal dos movimentos mandibulares, dor e edema em pacientes submetidos à cirurgia ortognática bimaxilar, após fototerapia com laser de baixa potência (LLLT). Foram avaliados 30 pacientes, divididos em grupo laser (n=15) e grupo controle (n=15) de modo aleatório. O grupo laser recebeu laserterapia pós-operatória por 19 sessões. O grupo controle recebeu placebo de laserterapia. Os grupos foram comparados quanto aos movimentos mandibulares - abertura máxima, lateralidade e protrusão máxima, dor - escala visual analógica, edema - medidas entre pontos cefalométricos, em um período de 60 dias após a cirurgia. Foram aplicados testes estatísticos para comparação entre os grupos (p<0,05). Houve diferença significante para abertura máxima, lateralidade e protrusão máxima nos períodos de 14 a 60 dias para a maioria das comparações. Foi verificada diferença significante para dor pós-operatória na maioria das comparações, nos períodos 24 h a 5 semanas, sendo que grupo laser atingiu o valor 0, 2 semanas antes. Ocorreu redução do edema, sem diferença estatisticamente significante para maioria das mensurações. Com base neste estudo, foi possível concluir que após a fototerapia com laser de baixa potência (LLLT) houve um ganho nos valores de todos os movimentos mandibulares, não houve diferença significante para ocorrência de edema e houve uma diminuição da ocorrência de dor. / The orthognathic surgery is the surgical procedure that aims to correct skeletal dentofacial deformities and can lead to decrease in jaw movements, pain and edema. A possible treatment for these consequences is the low-power laser phototherapy. The aim of this study was a longitudinal evaluation of jaw movements, pain and edema in patients undergoing orthognathic surgery bimaxillary after lowlevel laser light therapy (LLLT). We evaluated 30 patients divided into laser group (n=15) and control group (n=15) randomly. The laser group received postoperative laser therapy for 19 sessions. The control group received laser therapy placebo. The groups were compared regarding jaw movements - maximum aperture, laterality and maximum protrusion, pain - visual analog scale, edema - measured between cephalometric points in a period of 60 days after surgery. Statistical tests were applied to compare the groups (p <0.05). There was a significant difference for maximum aperture, laterality and maximum protrusion in periods of 14 to 60 days for most comparisons. There was a significant difference in postoperative pain in most comparisons, in the periods 24 h to 5 weeks, and laser group reached the value 0 a 2 weeks before. There was a reduction of edema, with no statistically significant difference for most measurements. Based on this study, it was concluded that after phototherapy with low power laser (LLLT) there was a gain in the amount of all mandibular movements, there was no significant difference in the occurrence of edema and there was a decrease in the occurrence of pain.

Atualmente existem diversas opções terapêuticas para o tratamento do fotoenvelhecimento cutâneo.Uma das formas de tratamento muito utilizada é a fototerapia com laser. Com o desenvolvimento da tecnologia em lasers surgiu um novo conceito de tratamento da pele envelhecida, a fototermólise fracionada microablativa. Essa tecnologia fracionada visa combinar os efeitos visíveis de uma terapia ablativa com o conforto e segurança dos métodos não ablativos. Antes de atingir a pele o laser passa por uma lente óptica especial que o divide em microrraios. Tal procedimento produz colunas de lesões térmicas microscópicas que penetram na epiderme e derme, sem danificar o tecido circunvizinho. A grande vantagem de ser fracionado é que a pele íntegra ao redor de cada coluna funciona como um reservatório de células potentes para a rápida cicatrização e regeneração da pele, culminando com a produção de colágeno e resultando em uma pele mais jovial, sem o inconveniente de um longo período de recuperação pós-tratamento. 20 pacientes foram selecionadas para o tratamento das rítides periorais com uma sessão de laser Erbium-YAG de 2940nm, fracionado. Após 28 dias do procedimento observou-se melhora na textura da pele, clareamento de manchas e atenuação de rugas finas periorais. Foi realizado um estudo comparativo da quantificação das células de Langerhans e receptores toll-like ( TLRs ) 2, 3 e 9 na epiderme, antes e após 3, 7, 14 e 28 dias do tratamento e da quantificação das fibras de colágeno na derme superior, antes e após 28 dias do laser. Houve diferenças estatisticamente significativas entre as medianas dos valores de CD1a (p = 0,0085), TLR 2 (p = 0,0108), TLR 3 (p = 0,0011) e TLR 9 (p = 0,0012) na epiderme pré e pós-tratamento. Foi constatado que a significância se deu entre os valores: antes e após 14 dias para CD1a (diminuição), antes e após 7 dias para TLR 2 (diminuição), antes e após 14 dias para TLR 3 (aumento), antes e após 7 dias para TLR 9 (diminuição). Não se encontraram diferenças estatisticamente significativas entre os valores medianos das fibras colágenas do tipo I (p = 1,0000) e III (p = 0,3125) antes e após 28 dias do tratamento. O protocolo desse estudo mostrou-se bastante seguro, pois apresentou efeitos colaterais transitórios e nenhuma complicação permanente. / There are several treatment options for skin photoaging. One of them widely used nowadays is lasertherapy. The development of lasers technology introduced a new therapeutic concept for aging skin: ablative fractional photothermolysis. This technology combines the visible effects of an ablative therapy with the comfort and safety of nonablative methods. Before reaching the skin the laser passes through a special optical lens that splits it into tiny rays. This procedure produces columns of microscopic thermal injuries that penetrate the epidermis and dermis, without damaging the surrounding tissue. The great advantage of the fractional photothermolysis is that the intact skin around each column acts as a potent reservoir of cells for fast healing and skin regeneration, resulting in collagen production and a youthful skin without the inconvenience of a long period of recovery after treatment. 20 patients were selected for perioral wrinkles treatment with a session of fractional Erbium-YAG 2940nm. After 28 days of the procedure the perioral skin showed improvement in texture, bleaching of sunspots and attenuation of superficial wrinkles. A comparative study was conducted between the expression of Langerhans cells and toll-like receptors 2, 3 and 9 in the epidermis, before and after 3,7,14 and 28 days of treatment and among collagen fibers in the dermis, before and after 28 days of the laser. There were statistically significant differences between the median values of CD1a (p = 0.0085), TLR 2 (p = 0.0108), TLR 3 (p = 0.0011) and TLR 9 (p = 0.0012) in the epidermis pre and post-treatment. The significance occurred between the values: before and after 14 days for CD1a (decrease) before and after 7 days to TLR 2 (decrease) before and after 14 days for TLR 3 (increase) before and after 7 days for TLR 9 (decrease). There were not statistically significant differences between the median values of collagen type I (p = 1.0000) and III (p = 0.3125) before and after 28 days of treatment. The irradiation of skin with fractional Erbium-YAG was safe, as it showed transitory side effects and no permanent complication.

O estudo avaliou a influência de diversas formas de fototerapia na cicatrização de úlceras cutâneas de ratos nutridos e desnutridos (desnutrição induzida). No 1º experimento, de 60 ratos Wistar sob controle dietético, 30 foram selecionados aleatoriamente, recebendo metade da dieta diária para indução de desnutrição (marasmo), confirmada pela perda de massa corporal, sinais clínicos e dosagem de albumina sérica. Os animais nutridos (N) e desnutridos (D) foram distribuídos em grupos (n=10) conforme tratamento fototerápico, a saber: aparelhos desligados (LED e laser - sham) e ligados (4 LED\'s 660 nm e 32 LED\'s 890 nm, 500 mW; e laser HeNe 632,8 nm, 3 mW), sendo designados GNS, GNL, GNH, GDS, GDL e GDH, respectivamente. Duas úlceras cutâneas foram realizadas com punch 8 mm e irradiadas 3 vezes por semana durante 14 dias. Os programas LAS e Photoshop foram utilizados para análise histológica (HE) da espessura da pele após o período de desnutrição, e o ImageJ para análise das imagens e cálculo do índice de cicatrização das úlceras no 7º e 14º dias, além da análise histológica (tricrômio de Gomori) para avaliação da colagênese após a desnutrição e no 14º pós-operatório. No 2º experimento 30 ratos receberam dieta controle e 30 receberam dieta normoprotéica associada à proteína de baixa qualidade (gelatina) para induzir desnutrição. A distribuição dos animais em grupos foi semelhante ao experimento 1, porém utilizando o aparelho de laser de diodo (L1 660 nm e L2 808 nm, 100 mW), sendo designados GNS, GNL1, GNL2, GDS, GDL1 e GDL2, respectivamente. A confirmação da desnutrição, o procedimento cirúrgico, protocolo de tratamento e as análises de imagens e histológicas seguiram a mesma metodologia do experimento 1. Os resultados do experimento 1 mostraram que após o período de desnutrição, a espessura da derme dos animais desnutridos apresentou-se menor (p<0,0001) em relação aos nutridos, assim como o percentual da ) colagênese (p<0,0005). No 7º dia pós-operatório as úlceras do GDS apresentaram menores ICU\'s em relação aos GNS (p<0,01), GDL (p<0,001) e GDH (p<0,05). No 14º dia, as úlceras do GNS apresentaram maiores ICU\'s em relação ao GNH e GDS (p<0,05) e GDH (p<0,01), assim como as do GDL em relação ao GDH (p<0,05). Histologicamente, o GDS apresentou menor percentual de colágeno em relação ao GNS (p<0,05), GNH, GDL e GDH (p<0,01). Os resultados do experimento 2 mostraram que após a desnutrição, a espessura da derme dos animais desnutridos apresentou-se menor (p<0,0001) em relação aos nutridos, assim como o percentual da colagênese (p<0,03). No 7º dia, as úlceras do GDS apresentaram menores ICU\'s em relação aos demais grupos (p<0,001). No 14º dia não houve diferença entre os grupos (p<0,05). Histologicamente, o GDS apresentou menor percentual de colágeno que os demais grupos (p<0,001), e os grupos desnutridos tratados com laser apresentaram maior percentual de colágeno que os demais grupos (p<0,001). Os resultados evidenciaram a influência negativa da desnutrição na cicatrização, e que as diversas formas de fototerapia apresentaram efeito bioestimulador na cicatrização e colagênese nas úlceras cutâneas de ratos desnutridos em comparação à cicatrização natural e fotoestimulada nos grupos nutridos. / The study evaluated the influence of various forms of phototherapy in the healing of cutaneous wounds in nourished and undernourished rats (induced malnutrition). In the 1st experiment, from 60 rats under control diet, 30 were randomly selected to receive half of the daily diet for induction of malnutrition (marasmus), confirmed by loss of body weight, clinical signs and serum albumin. Nourished (N) and undernourished (U) animals have been distributed into groups (n=10) according phototherapic treatment, viz: off devices (LED and laser - sham) and on devices (4 LEDs 660 nm, 32 LEDs 890 nm, 500 mW, and HeNe laser 632.8 nm, 3 mW) and they were designed GNS, GNL, GNH, GUS, GUL and GUH, respectively. Two 8mm dorsal cutaneous wounds were punched and irradiated 3 times per week for 14 days. LAS and Photoshop softwares were used for histological analysis (HE) of the skin thickness after malnutrition time, and ImageJ for analysis of images to calculate the wound healing rate in 7th and 14th days, besides the histological analysis (Gomori trichrome) to calculate the colagenesis after the malnutrition time and in 14th post operative day. In the 2nd experiment 30 rats have received control diet and 30 received normal protein diet associated of low quality protein (gelatin) to induce malnutrition. The distribution of animals in groups was similar to experiment 1, but using a diode laser device (L1 660 nm and L2 808nm, 100 mW) and they were designed GNS, GNL1, GNL2, GDS, GDL1 and GDL2 respectively. The malnutrition status, the surgical proceeding, the protocol for treatment and analysis of histological images followed the same methods used in experiment 1. The results of experiment 1 showed that after malnutrition time, the thickness of the dermis in the undernourished animals was lower (p<0.0001) than nourished even as the percentage of coallagenesis (p<0.0005). In the 7th post operative day the wound healing rates were lower in the GUS than GNS (p<0.01), GUL (p<0.001) and GUH (p<0.05). In the 14th day, the WHRs were higher in the GNS than GNH, GUS (p<0.05) and GUH (p<0.05). Histologically, the GUS showed lower percentage of collagen than GNS (p<0.05), GNH, GUL and GUH (p<0.01). In experiment 2, the results showed that after malnutrition time, the thickness of the dermis of the undernourished animals was lower (p<0.0001) than nourished, as well as the percentage of collagenesis (p<0.03). In the 7th day, the WHRs were lower in the GUS than other groups (p<0.001). In 14th day there was no difference between groups (p<0.05). Histologically, the GUS presented lower percentage of collagen than the other groups (p<0.001), and the undernourished group treated with laser presented higher percentage of collagen than other groups (p<0.001). The results showed the negative influence of the malnutrition in the wound healing and that the various kinds of phototherapy presented biostimulator effect in the cutaneous wound healing and collagenesis in undernourished rats as compared to natural and photostimulated healing in the nourished groups.

Photodynamic therapy (PDT) is an alternative treatment of cancer requiring the use of chromophore molecules (photosensitizers), which can induce cell death after light excitation. Gold nanoparticles (AuNP), exhibiting localized Surface Plasmon Resonance, can enhance the photophysical response of chromophores located in their vicinity, and thus improve their therapeutic action. Moreover, the use of highly localized two-photon chromophores (photosensitizers and fluorophores), capable to undergo a localized excitation by light in the Near InfraRed region, should increase the penetration depth into tissues, thus improve the treatment efficiency (by PDT) and the imaging (by fluorescence microscopy) of cancer tissues.In this work, we describe the elaboration of water-soluble hybrid nano-objects for PDT and fluorescence bioimaging applications, composed of two-photon chromophore-polymer conjugates grafted onto gold nanoparticles. In order to obtain these nano-objects we follow a multistep strategy: i) the synthesis of a well-defined water-soluble chromophore-polymer conjugates; ii) the end-group oriented grafting of chromophore-polymer conjugates onto 20 nm AuNP. The coupling of hydrophobic two-photon chromophores on linear water-soluble copolymer chains (poly(N-acryloylmorpholine-co-N-acryloxysuccinimide)), obtained by controlled/living RAFT polymerization, resulted in well-defined water-soluble chromophore-polymer conjugates, with different polymer lengths (2 000 g.mol-1 < Mn < 37 000 g.mol-1) and architectures (random or block), and a controlled number of chromophores per chain (varying between 1 and 21). Their grafting onto 20 nm AuNP gave water-soluble hybrid nano-objects with high grafting densities (~0.5 chains/nm²). The role of the polymer chain being to tune the distance between chromophores and AuNP surface, we have evidenced the increase in the polymer corona thickness of grafted AuNP (estimated by TEM) with the increasing polymer Mn, corroborating with the corresponding distance-dependent fluorescence properties of those. Finally, the in cellulo biological properties of two-photon chromophore-polymer conjugates, before and after grafting onto AuNP, have been investigated, highlighting their potential for two-photon bioimaging and PDT applications.

Thesis (Ph. D.)--Uniformed Services University of the Health Sciences, 2005. / Typescript (photocopy).

O estudo avaliou a influência de diversas formas de fototerapia na cicatrização de úlceras cutâneas de ratos nutridos e desnutridos (desnutrição induzida). No 1º experimento, de 60 ratos Wistar sob controle dietético, 30 foram selecionados aleatoriamente, recebendo metade da dieta diária para indução de desnutrição (marasmo), confirmada pela perda de massa corporal, sinais clínicos e dosagem de albumina sérica. Os animais nutridos (N) e desnutridos (D) foram distribuídos em grupos (n=10) conforme tratamento fototerápico, a saber: aparelhos desligados (LED e laser - sham) e ligados (4 LED\'s 660 nm e 32 LED\'s 890 nm, 500 mW; e laser HeNe 632,8 nm, 3 mW), sendo designados GNS, GNL, GNH, GDS, GDL e GDH, respectivamente. Duas úlceras cutâneas foram realizadas com punch 8 mm e irradiadas 3 vezes por semana durante 14 dias. Os programas LAS e Photoshop foram utilizados para análise histológica (HE) da espessura da pele após o período de desnutrição, e o ImageJ para análise das imagens e cálculo do índice de cicatrização das úlceras no 7º e 14º dias, além da análise histológica (tricrômio de Gomori) para avaliação da colagênese após a desnutrição e no 14º pós-operatório. No 2º experimento 30 ratos receberam dieta controle e 30 receberam dieta normoprotéica associada à proteína de baixa qualidade (gelatina) para induzir desnutrição. A distribuição dos animais em grupos foi semelhante ao experimento 1, porém utilizando o aparelho de laser de diodo (L1 660 nm e L2 808 nm, 100 mW), sendo designados GNS, GNL1, GNL2, GDS, GDL1 e GDL2, respectivamente. A confirmação da desnutrição, o procedimento cirúrgico, protocolo de tratamento e as análises de imagens e histológicas seguiram a mesma metodologia do experimento 1. Os resultados do experimento 1 mostraram que após o período de desnutrição, a espessura da derme dos animais desnutridos apresentou-se menor (p<0,0001) em relação aos nutridos, assim como o percentual da ) colagênese (p<0,0005). No 7º dia pós-operatório as úlceras do GDS apresentaram menores ICU\'s em relação aos GNS (p<0,01), GDL (p<0,001) e GDH (p<0,05). No 14º dia, as úlceras do GNS apresentaram maiores ICU\'s em relação ao GNH e GDS (p<0,05) e GDH (p<0,01), assim como as do GDL em relação ao GDH (p<0,05). Histologicamente, o GDS apresentou menor percentual de colágeno em relação ao GNS (p<0,05), GNH, GDL e GDH (p<0,01). Os resultados do experimento 2 mostraram que após a desnutrição, a espessura da derme dos animais desnutridos apresentou-se menor (p<0,0001) em relação aos nutridos, assim como o percentual da colagênese (p<0,03). No 7º dia, as úlceras do GDS apresentaram menores ICU\'s em relação aos demais grupos (p<0,001). No 14º dia não houve diferença entre os grupos (p<0,05). Histologicamente, o GDS apresentou menor percentual de colágeno que os demais grupos (p<0,001), e os grupos desnutridos tratados com laser apresentaram maior percentual de colágeno que os demais grupos (p<0,001). Os resultados evidenciaram a influência negativa da desnutrição na cicatrização, e que as diversas formas de fototerapia apresentaram efeito bioestimulador na cicatrização e colagênese nas úlceras cutâneas de ratos desnutridos em comparação à cicatrização natural e fotoestimulada nos grupos nutridos. / The study evaluated the influence of various forms of phototherapy in the healing of cutaneous wounds in nourished and undernourished rats (induced malnutrition). In the 1st experiment, from 60 rats under control diet, 30 were randomly selected to receive half of the daily diet for induction of malnutrition (marasmus), confirmed by loss of body weight, clinical signs and serum albumin. Nourished (N) and undernourished (U) animals have been distributed into groups (n=10) according phototherapic treatment, viz: off devices (LED and laser - sham) and on devices (4 LEDs 660 nm, 32 LEDs 890 nm, 500 mW, and HeNe laser 632.8 nm, 3 mW) and they were designed GNS, GNL, GNH, GUS, GUL and GUH, respectively. Two 8mm dorsal cutaneous wounds were punched and irradiated 3 times per week for 14 days. LAS and Photoshop softwares were used for histological analysis (HE) of the skin thickness after malnutrition time, and ImageJ for analysis of images to calculate the wound healing rate in 7th and 14th days, besides the histological analysis (Gomori trichrome) to calculate the colagenesis after the malnutrition time and in 14th post operative day. In the 2nd experiment 30 rats have received control diet and 30 received normal protein diet associated of low quality protein (gelatin) to induce malnutrition. The distribution of animals in groups was similar to experiment 1, but using a diode laser device (L1 660 nm and L2 808nm, 100 mW) and they were designed GNS, GNL1, GNL2, GDS, GDL1 and GDL2 respectively. The malnutrition status, the surgical proceeding, the protocol for treatment and analysis of histological images followed the same methods used in experiment 1. The results of experiment 1 showed that after malnutrition time, the thickness of the dermis in the undernourished animals was lower (p<0.0001) than nourished even as the percentage of coallagenesis (p<0.0005). In the 7th post operative day the wound healing rates were lower in the GUS than GNS (p<0.01), GUL (p<0.001) and GUH (p<0.05). In the 14th day, the WHRs were higher in the GNS than GNH, GUS (p<0.05) and GUH (p<0.05). Histologically, the GUS showed lower percentage of collagen than GNS (p<0.05), GNH, GUL and GUH (p<0.01). In experiment 2, the results showed that after malnutrition time, the thickness of the dermis of the undernourished animals was lower (p<0.0001) than nourished, as well as the percentage of collagenesis (p<0.03). In the 7th day, the WHRs were lower in the GUS than other groups (p<0.001). In 14th day there was no difference between groups (p<0.05). Histologically, the GUS presented lower percentage of collagen than the other groups (p<0.001), and the undernourished group treated with laser presented higher percentage of collagen than other groups (p<0.001). The results showed the negative influence of the malnutrition in the wound healing and that the various kinds of phototherapy presented biostimulator effect in the cutaneous wound healing and collagenesis in undernourished rats as compared to natural and photostimulated healing in the nourished groups.

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No. of bitstreams: 1 TeseJCTR.pdf: 2688877 bytes, checksum: ce817179772a53321d1ef825e400760f (MD5) Previous issue date: 2016-05-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Fundação Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico (FUNCAP) / Tissue repair in diabetic patients is hampered by several factors, including secretion of insulin deficiency that leads to hyperglycemia and production of free radicals. Mitochondrial dysfunction has been identified as one of the probable factors of DM. It is known that phototherapy has proliferative effects in tissues with some pathologies. This study aimed to evaluate the effects of phototherapy using laser and low power LED on tissue regeneration, oxidative stress and mitochondrial markers in diabetic animals. Methodology: 20 Swiss mice (30g, 6 weeks) for the study relating to oxidative stress and 20 Wistar rats (250 g, 8 weeks) were subjected to induction of DM (streptozotocin injection 70 mg / kg) and after 120 days follow up, suffered skin lesions and were treated with Low Level Laser Therapy and LED for 5 consecutive days and on day 6 the animals were killed and the skin removed. Another group of animals (20 male Wistar rats weighing 250 g, 8 weeks) was subjected to laser irradiation and in the LED region of the pancreas for 5 consecutive days and on day 6 animals were killed and the pancreas, liver, and gastrocnemius muscle were removed. Animals were divided into four groups: Sham (healthy control), NID (non-irradiated diabetic), DLED (diabetic irradiated by LED) and DLASER (diabetic irradiated by LED). Levels of catalase, thiobarbituric acid (TBARS), nitrite, collagen content, vascular endothelial growth factor (VEGF), cyclooxygenase-2 (COX2) Mitofusin 2 (MFN2), Mitochondrial fission 1 protein (FIS1) liver and muscle glycogen and functional insulin and glucose tests were measured. Results: It was observed in the skin of these animals, increase in collagen content and angiogenesis in irradiated diabetic animals, TBARS levels and lower nitrite in irradiated diabetic. Furthermore, COX-2 expression was higher among NID compared to SHAM and DLED groups. DLED showed the highest scores against MFN2 and FIS1 expression was higher in DLASER group. Laser and LED Therapy altered the expression of VEGF and COX2 and stimulated the proliferation of mature collagen fibers in diabetic animal wounds. About irradiation over pancreas results showed that the NID group, hepatic and muscle glycogen content were statistically lower than DLASER and DLED groups. Adding to these data, the density of the pancreatic duct and pancreatic islets were significantly different when compared to NID. These results suggest that both the low-level laser LED obtained as potential therapeutic effects on the skin and pancreas under conditions hyperglycemic and that both therapies acted modulating histological, angiogenic and mitochondrial parameters on pancreas and skin of diabetic animals. / O reparo tecidual em pacientes diabéticos é prejudicado por vários fatores, dentre eles a deficiência da secreção de insulina que conduz à hiperglicemia e consequente produção de radicais livres. A disfunção mitocondrial tem sido apontada como um dos prováveis fatores etiopatogênicos do DM mellitus. Sabe-se que a Fototerapia tem efeitos proliferativos em tecidos com algumas patologias. O presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da Fototerapia utilizando-se Laser e LED de baixa Potência sobre a regeneração tecidual, estresse oxidativo e marcadores mitocondriais em animais diabéticos. Metodologia: 20 camundongos Swiss, pesando entre 30g , 6 semanas, para o estudo relacionado ao estresse oxidativo e 20 ratos Wistar pesando 250 g, 8 semanas, foram submetidos a indução do DM (injeção de streptozotocina 70mg/kg) e após 120 dias de seguimento, sofreram lesão cutânea e foram tratados com Terapia Laser de Baixa Intensidade e LED durante 5 dias consecutivos e no 6º dia os animais foram mortos e retirada a pele. Um outro grupo de animais (20 ratos Wistar pesando 250 g, 8 semanas) foi submetido à irradiação Laser e LED na região do pâncreas durante 5 dias consecutivos e no 6º dia os animais foram mortos e retirado o pâncreas, fígado e músculos gastrocnêmio. Foram divididos em quatro grupos: Sham (controle saudável), NID (diabético não irradiado), DLED(diabético irradiado pelo LED) e DLASER (diabético irradiado pelo LED). Mensurou-se níveis de catalase, àcido tiobarbitúrico (TBARS), nitrito, conteúdo de colágeno, fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), Ciclo-oxigenase-2 (COX2) Mitofusin 2 (MFN2), Mitochondrial fission 1 protein (FIS1), glicogênio hepático e muscular bem como testes funcionais de glicose e insulina. Resultados: Observou-se na pele desses animais, aumento no conteúdo de colágeno e angiogênese nos animais diabéticos irradiados pela Terapia Laser de Baixa Intensidade 904nm bem como níveis de TBARS e nitrito menores nos diabéticos irradiados. Além disso, a expressão da COX-2 foi maior entre NID quando comparados aos grupos SHAM e DLED. DLED apresentou os maiores scores em relação a MFN2 e a expressão da FIS1 foi maior no grupo DLASER. As Terapias Laser e LED alteraram a expressão de VEGF e COX2 e estimularam a proliferação das fibras colágenas maduras em feridas de animais diabéticos. Os resultados relacionados à irradiação sobre o pâncreas demonstraram que no grupo NID, o conteúdo de glicogênio hepático e muscular foram estatisticamente menores que os grupos DLASER e DLED. Somando-se a esses dados, a densidade dos ductos pancreáticos e ilhotas pancreáticos diferiram significativamente quando comparados ao grupo diabético controle.Constatamos com esses resultados que tanto o Laser de Baixa Intensidade quanto o LED obtiveram potenciais efeitos terapêuticos sobre a pele e o pâncreas sob condições hiperglicêmicas e que ambas as terapias atuaram modulando parâmetros histológicos, angiogênicos e mitocondriais no pâncreas e pele dos animais diabéticos. / CAPES: 006648/2015-00. / FAPESP: 2010/07194-7.

Present work has been focused on the importance of the products of the heme catabolic pathway, in particular under conditions of unconjugated hyperbilirubinemias (neonatal jaundice and Crigler-Najjar syndrome (CNS)). The second part of the project was focused on the improvement of some pharmacological approaches used in the treatment of these diseases, as well as on studies of bilirubin products that are formed during the treatment by phototherapy (PT). Neonatal jaundice is one of the most common complications in neonates. Currently, there is no efficient pharmacotherapy and the treatment with blue light is used as a gold standard for severe neonatal jaundice. However, the absolute safety of PT has still not been confirmed. In this context, it is important to note that some neonatologists start the PT before serum bilirubin levels reach the recommended values and that patients with CNS type I (CNSI) are forced to be on life-long PT (unless undergoing liver transplantation). The focus of the present project was to study biological effects of bilirubin photoisomers (PI) in an in vitro model of the human neuroblastoma SH-SY5Y cells that are used for studies of the neuronal metabolism. In further studies performed on animal model of hyperbilirubinemic rats and mice, we investigated a suitable gene...