A melatonina, produzida pela pineal e secretada de maneira cíclica num período de 24 horas, possui ação na sincronização dos ritmos biológicos. Admitindo-se que a expressão circadiana dos clock genes está envolvida na regulação do metabolismo energético e que este padrão oscilatório está sob influência da melatonina, avaliamos o processo de incorporação de glicose em lipídeos no tecido adiposo de ratos controles e pinealectomizados e verificamos a interferência da pinealectomia na expressão dos genes relógio. Os resultados mostram que a pinealectomia alterou a expressão circadiana dos genes Clock, Per2 e Cry1, aumentou a expressão de Rev-erb (Zt 8) e alterou a expressão de Ppar. Ainda, provocou aumento nas concentrações séricas de corticosterona e diminuição nas de leptina. No entanto, o processo de incorporação de glicose em lipídeos não foi alterado. Sendo assim, concluímos que apesar da pinealectomia ter afetado eventos moleculares e metabólicos, quatro semanas de cirurgia ainda é curto para evidenciar repercussões metabólicas mais significativas no animal. / Melatonin, which is produced by pineal gland and secreted in a cyclic fashion over 24 hours, acts in biological rhythms synchronization. Thus, assuming that circadian expression of clock genes is involved in the regulation of energy metabolism and that oscillatory pattern is under influence of melatonin, we analyzed the process of glucose incorporation into lipids in adipose tissue of pinealectomized and controls rats and we determined whether pinealectomy interferes on the expression of clock genes in this tissue. Our results show that pinealectomy alters the circadian pattern of Clock, Per2, Cry1 and Ppar expression, while increases the Rev-erb gene expression (Zt 8). Moreover, the pinealectomy promoted increased corticosterone and decreased leptin plasma levels. However, the incorporation of glucose into lipids over 24 hours was not altered by pinealectomy. Thus, we conclude that despite the pinealectomy have affected molecular and metabolic events, four weeks of surgery is still too short to induce more significant metabolic effects in animals.

A melatonina é um hormônio que possui ritmos circulatórios robustos e previsíveis. Em animais pinealectomizados a concentração plasmática de melatonina é abolida e acompanha alterações fisiológicas como resistência à insulina e desequilíbrio entre requerimento e mobilização energética do tecido adiposo. Este estudo objetivou avaliar os efeitos da suplementação de melatonina central, através de injeção intracerebroventricular (ICV). Os resultados obtidos indicam que a pinealectomia, provoca um aumento do consumo alimentar e um considerável aumento de peso. Mostrou-se, ainda, que a reposição ICV de melatonina é capaz de provocar a diminuição do consumo alimentar, assim como uma diminuição expressiva do peso corporal. Observou-se, também, que a administração de melatonina nos animais controles regularizam o peso corpóreo, impedindo o aumento de peso próprio do avançar da idade e que a melatonina foi um agente importante na redução de gordura corporal. / Melatonin is a hormone with robust and predictable rhythms being a strong synchronizer for the expression of several physiological processes. But in pinealectomized rats plasma concentration of melatonin is abolished, leading to physiological changes such as insulin resistance and imbalance between energy requirement and mobilization from adipose tissue. The aim of the study was to evaluate the effects of intracerebroventricular supplementation of melatonin. We studied food intake, weight gain and peripheral insulin sensitivity. The results obtained indicate that the pinealectomy caused an increase in food consumption and a considerable weight gain. Furthermore, icv melatonin replacement in these animals counteracted both effects. It was observed also that melatonin in control animals regulates body weight, preventing weight gain characteristic of aging. Finally, it was also observed that melatonin-induced decrease in body weight is due to a reduction of fat adipose tissues.

A melatonina é um hormônio que possui ritmos circulatórios robustos e previsíveis. Em animais pinealectomizados a concentração plasmática de melatonina é abolida e acompanha alterações fisiológicas como resistência à insulina e desequilíbrio entre requerimento e mobilização energética do tecido adiposo. Este estudo objetivou avaliar os efeitos da suplementação de melatonina central, através de injeção intracerebroventricular (ICV). Os resultados obtidos indicam que a pinealectomia, provoca um aumento do consumo alimentar e um considerável aumento de peso. Mostrou-se, ainda, que a reposição ICV de melatonina é capaz de provocar a diminuição do consumo alimentar, assim como uma diminuição expressiva do peso corporal. Observou-se, também, que a administração de melatonina nos animais controles regularizam o peso corpóreo, impedindo o aumento de peso próprio do avançar da idade e que a melatonina foi um agente importante na redução de gordura corporal. / Melatonin is a hormone with robust and predictable rhythms being a strong synchronizer for the expression of several physiological processes. But in pinealectomized rats plasma concentration of melatonin is abolished, leading to physiological changes such as insulin resistance and imbalance between energy requirement and mobilization from adipose tissue. The aim of the study was to evaluate the effects of intracerebroventricular supplementation of melatonin. We studied food intake, weight gain and peripheral insulin sensitivity. The results obtained indicate that the pinealectomy caused an increase in food consumption and a considerable weight gain. Furthermore, icv melatonin replacement in these animals counteracted both effects. It was observed also that melatonin in control animals regulates body weight, preventing weight gain characteristic of aging. Finally, it was also observed that melatonin-induced decrease in body weight is due to a reduction of fat adipose tissues.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseDB.pdf: 12056295 bytes, checksum: 0e3e0204f25b4fc1d59fa3df6d67bf78 (MD5) Previous issue date: 2005-12-09 / Osteoporosis is an important world s public health problem. The resulting fracture from this sickness becomes concerning, because it can start other problems. So, the mortality and morbidity that follow the osteoporosis diagnosis are concerning, once a high rate in old people can be seen. Based on evidences found in literature regarding the melatonin effects on bone tissue, the aim of this study was to check the possible consequences of the absence of melatonin, (pinealectomy) on body weight and femur of rats, from distinct bone analysis. It was used male rats of the Wistar strain (220-260g BW), bred at the Universidade Federal de São Carlos, were housed under conditions controlled for temperature (22±1oC) and light (lights on between 8 am and 6 pm daily). All rats were allowed free access to water and a pelleted standard commercial diet. The experimental protocol was divided in 8 groups (each group n=7): Basal; Pinealectomized-Sham; Pinealectomized and Intact (non-orchidectomized); Pinealectomized and Orchidectomized; Pinealectomized, Orchidectomized treated with Melatonin; Pinealectomized, Orchidectomized treated with Saline; Pinealectomized and Intact treated with Melatonin; Pinealectomized and Intact treated with Saline. Some groups of animals received hormonal replacement with subcutaneous melatonin injections at a dose of 200ug/kg, during 8 weeks (six days a week). Then, biometric, physical and biomechanical right femur analysis were done. It was also analyzed the body weight of each animal and bone quality. Bone mineral density was analysed on the left femur, as well as scanning electron microscopy of bone histomorphology. Pinealectomized animals treated with melatonin evoked a lower body weight increase in relation to their respective control groups. Pinealectomy associated with castration seems to enhance osteopeny indicators values, what isn´t corrected by hormonal replacement. Results from differents parameters were smallest to pinealectomized and orchidectomized rats, or only orchidectomized rats, in relation to Basal and Sham groups. Hormonal replacement is to pinealectomized and non-castrated animals enough to allow higher Maximum Force values in the flex test of the femur and protect from loss of bone density and avoid the formation of big spaces in cancellous bone. This study has shown for the first time that Pinealectomy seems to enhance the osteopeny effects of orchidectomy in rats. / A osteoporose constitui importante problema de saúde pública mundial. A mortalidade e a morbidade que se segue ao diagnóstico de osteoporose é alarmante, visto ser um índice alto em pessoas idosas. Há uma relação direta entre o sistema endócrino e o metabolismo do tecido ósseo e há evidências em relação à atuação da melatonina sobre o mesmo. O objetivo deste trabalho foi verificar as possíveis decorrências da ausência de melatonina (pinealectomia) sobre o fêmur de ratos, a partir de diferentes parâmetros de análise óssea. Foram utilizados ratos Wistar adultos, com 4 meses de idade, provenientes do Biotério Central da Universidade Federal de São Carlos e mantidos no biotério do Laboratório de Neuroendocrinologia/DCF, em regime de luz e temperatura controlados. O protocolo experimental foi dividido em 8 grupos (cada grupo com n=7-8): Basal; Pinealectomizadossham (Sham); Pinealectomizados e Intactos (não orquiectomizados) (Pin.intactos); Pinealectomizados e Orquiectomizados (Pin.orquiect.); Pinealectomizados, orquiectomizados tratados com melatonina (Pin.orq.melatonina); Pinealectomizados, orquiectomizados tratados com salina (Pin.orq.salina); Pinealectomizados e intactos tratados com melatonina (Pin.intacto melatonina); Pinealectomizados e intactos tratados com salina (Pin.intacto salina). Alguns grupos de animais tiveram reposição hormonal de injeções subcutâneas de melatonina com a dose de 200 µg/kg, durante 8 semanas (6 dias por semana). Após, foi realizada a análise biométrica, física e biomecânica do fêmur direito de cada animal. Foi analisado também o ganho de peso de cada rato e a qualidade óssea. O fêmur esquerdo foi analisado através de densitometria óssea e microscopia eletrônica de varredura. O ganho de peso variou em função do aumento de peso corporal final dos animais. Verificou-se menor ganho de peso corporal para os animais pinealectomizados intactos e castrados tratados com melatonina em comparação aos seus respectivos controles (tratados com salina). A pinealectomia associada à castração parece acentuar os valores indicadores da osteopenia, o que não foi corrigido realizando a reposição hormonal. Houve menores valores dos parâmetros analisados para os grupos de animais pinealectomizados e castrados, e somente pinealectomizados, em relação aos grupos Basal e Sham. A reposição hormonal para os animais pinealectomizados e não castrados é suficiente para permitir maiores valores de Força Máxima no teste de flexão do fêmur, também protege contra diminuição da densidade óssea e menor espaçamentos entre as trabéculas. Este estudo mostra pela primeira vez que a pinealectomia parece acentuar os efeitos osteopênicos da orquiectomia em ratos.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-05-31T13:08:58Z No. of bitstreams: 1 Danielle Dutra Pereira.pdf: 3044987 bytes, checksum: 91384731b08064b6fcb5fd9015771069 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-31T13:08:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Danielle Dutra Pereira.pdf: 3044987 bytes, checksum: 91384731b08064b6fcb5fd9015771069 (MD5) Previous issue date: 2013-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Breast tumors are estrogen-dependent and receptors are related to the first bitch death cause. The cancer cells spreading induced by estrogen, could be melatonin suppressed, that comes from the pineal gland. Knowing the proceeding importance of these hormones on the breast carcinomas development, the purpose of this study was assess the melatonin and estrogen effects on Ehrlich tumor in Swiss mice, through its interaction with the reproductive system. The experiments were carried out in 104 female Swiss mice (Mus musculus), 8 weeks old, obtained from the Pharmacology Laboratory from DMFA-UFRPE. The animals were maintained on a 12 hours light/dark cycle, at 22 ºC, and food and water were freely available. They were divided in the respective groups (n= 8 animals/group): A- Pinealectomized melatonin treated; B- Sham-Pinealectomized melatonin treated; C- Pinealectomized no treated; D- Sham-Pinealectomized no treated; E- Pinealectomized melatonin vehicle treated; F- Sham-Pinealectomized melatonin vehicle treated; G- Control; H- Pinealectomized melatonin and estrogen treated; I- Sham-Pinealectomized melatonin and estrogen treated; J- Pinealectomized estrogen treated; K- Sham-Pinealectomized estrogen treated; L- Pinealectomized estrogen vehicle treated; M- Sham-Pinealectomized estrogen vehicle treated. It could be noticed in the ovaries a higher follicle number in pinealectomized estrogen treated group, there was a corpus luteum increase compared to other groups in Sham-Pinealectomized melatonin treated group. The experiments showed a high tumor growth in the pinealectomized groups and in the estrogen treated groups, while it has observed a higher tumor inhibition percentage in the animals that received melatonin treatment. The estrogen treated animals presented a less cumulative survival relative to the other groups. Analysis of these results allows us to conclude that estrogen and melatonin, through its actions in the ovary interfere with regulatory mechanisms of the processes of Ehrlich tumor growth. / umores de mama são estrógeno-dependentes e estão relacionados com a primeira causa de morte em cadelas. A proliferação de células cancerígenas, induzida por estrógeno, pode ser suprimida pela melatonina, hormônio produzido da glândula pineal. Sabendo-se da importância da atuação desses hormônios no desenvolvimento de carcinomas mamários, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da melatonina e do estrógeno sobre o tumor de Ehrlich em Camundongos Swiss, através de sua interação com o aparelho reprodutor. Foram utilizados 104 camundongos fêmeas Swiss (Mus musculus), com 60 dias de idade, procedentes do Laboratório de Farmacologia do DMFA-UFRPE. Os animais foram submetidos a ciclo claro/escuro (12/12 horas), em ambiente com temperatura controlada (22 ºC), água e alimentação ad libitum. Estes foram divididos nos seguintes grupos (n= 8 animais/grupo): A- Pinealectomizados tratados com melatonina; B- Shampinealectomizados tratados com melatonina; C- Pinealectomizados sem tratamento; D- Sham-pinealectomizados sem tratamento; E- Pinealectomizados tratados com veículo da melatonina; F- Sham-pinealectomizados tratados com veículo da melatonina; G- Controle; H- Pinealectomizados tratados com estrógeno e melatonina; I- Sham-pinealectomizados tratados com estrógeno e melatonina; JPinealectomizados tratados com estrógeno; K- Sham-pinealectomizados tratados com estrógeno; L- Pinealectomizados tratados com veículo do estrógeno; M- Shampinealectomizados tratados com veículo do estrógeno. Nos ovários, pôde-se observar maior número de folículos no grupo pinealectomizado tratado com estrógeno, e no grupo sham-pinealectomizado tratado com melatonina, houve um aumento no número de corpo lúteo quando comparados aos demais grupos. O crescimento tumoral mostrou-se elevado nos grupos pinealectomizados e nos grupos tratados com estrógeno, enquanto que nos que receberam melatonina observou-se um maior percentual de inibição tumoral. Os animais tratados com estrógeno apresentaram uma sobrevida cumulativa menor em relação aos demais grupos. A análise destes resultados nos permite concluir que o estrógeno e a melatonina, através de sua atuação no ovário, interferem nos mecanismos regulatórios dos processos de crescimento do tumor de Ehrlich.

A melatonina, produzida pela pineal e secretada de maneira cíclica num período de 24 horas, possui ação na sincronização dos ritmos biológicos. Admitindo-se que a expressão circadiana dos clock genes está envolvida na regulação do metabolismo energético e que este padrão oscilatório está sob influência da melatonina, avaliamos o processo de incorporação de glicose em lipídeos no tecido adiposo de ratos controles e pinealectomizados e verificamos a interferência da pinealectomia na expressão dos genes relógio. Os resultados mostram que a pinealectomia alterou a expressão circadiana dos genes Clock, Per2 e Cry1, aumentou a expressão de Rev-erb (Zt 8) e alterou a expressão de Ppar. Ainda, provocou aumento nas concentrações séricas de corticosterona e diminuição nas de leptina. No entanto, o processo de incorporação de glicose em lipídeos não foi alterado. Sendo assim, concluímos que apesar da pinealectomia ter afetado eventos moleculares e metabólicos, quatro semanas de cirurgia ainda é curto para evidenciar repercussões metabólicas mais significativas no animal. / Melatonin, which is produced by pineal gland and secreted in a cyclic fashion over 24 hours, acts in biological rhythms synchronization. Thus, assuming that circadian expression of clock genes is involved in the regulation of energy metabolism and that oscillatory pattern is under influence of melatonin, we analyzed the process of glucose incorporation into lipids in adipose tissue of pinealectomized and controls rats and we determined whether pinealectomy interferes on the expression of clock genes in this tissue. Our results show that pinealectomy alters the circadian pattern of Clock, Per2, Cry1 and Ppar expression, while increases the Rev-erb gene expression (Zt 8). Moreover, the pinealectomy promoted increased corticosterone and decreased leptin plasma levels. However, the incorporation of glucose into lipids over 24 hours was not altered by pinealectomy. Thus, we conclude that despite the pinealectomy have affected molecular and metabolic events, four weeks of surgery is still too short to induce more significant metabolic effects in animals.

O metabolismo energético é dependente, dentre outros fatores, de uma temporização circadiana entre os tecidos participantes da regulação metabólica. O processo de sincronização parece depender da expressão dos genes relógio e de mediadores como a melatonina, que associam o oscilador central e os osciladores periféricos. Investigamos o papel da melatonina na expressão dos genes relógio em tecidos periféricos, onde ratos Wistar foram divididos em dois grupos: pinealectomizados e controle. Após 45 dias os animais foram sacrificados circadianamente e seus tecidos de interesse extraídos para análise através do PCR convencional. A pinealectomia ocasionou significativa desorganização temporal na expressão de quase todos os genes relógios dos tecidos muscular e do adiposo periepididimal. O tecido hepático foi o que menos sofreu alterações pela pinealectomia. Em conclusão, esses dados mostram que a melatonina é necessária para manutenção da ritmicidade dos genes relógio no tecido muscular estriado esquelético, no tecido adiposo periepididimal e no tecido hepático. / The energy metabolism is dependent, between other factors, of a circadian timing among the tissues participants of the metabolic regulation. The synchronization process appears to depend on the expression of clock genes and mediators such as melatonin, involving the central oscillator and peripheral oscillators. We have investigated the role of melatonin in the expression of clock genes in peripheral tissues. Rats have been divided into two groups: pinealectomized and control rats. After 45 days the animals were sacrificed and their tissues of interest have been extracted for analysis by conventional PCR. Pinealectomy caused a significant disruption in the temporal expression of almost all genes of muscle tissue and fat tissue. The liver tissue was the least affected by changes of pinealectomy. In conclusion, these data show that melatonin is necessary for maintaining the rhythmicity of clock genes in skeletal muscle, adipose tissue and liver tissue.

O hormônio melatonina é produzido pela glândula pineal de mamíferos de forma circadiana e sua secreção é mais elevada durante a noite. Melatonina é liberada no sistema ventricular cerebral através do recesso pineal do 3º ventrículo. Sabe-se que a concentração de melatonina é maior nos ventrículos cerebrais que no plasma e no líquido cerebroespinhal lombar. Para avaliar a dinâmica da melatonina liquórica no rato Wistar, coletamos, através de microdiálise, amostras do líquor do terceiro ventrículo cerebral de animais jovens. Para avaliar a variação ontogenética em sua produção e liberação compararam-se as concentrações de melatonina liquórica em animais jovens e idosos. Observou-se também o perfil da melatonina liquórica em animais pinealectomizados. Esses procedimentos darão base para uma análise sistemática da dinâmica da melatonina no líquido cerebroespinal ventricular. / The hormone melatonin is produced by the mammalian pineal gland in a circadian way and its secretion is higher at night. Melatonin is released to the cerebral ventricular system through the pineal recess of the III ventricle. We know that the concentration of melatonin is higher in the cerebral ventricles than in plasma and lumbar cerebrospinal fluid. To evaluate the dynamic of melatonin in the cerebrospinal fluid (CSF) in Wistar rats, we collected, using microdialisys, samples of cerebrospinal fluid in the III ventricle of young animals. To estimate the ontogenetic decrease in melatonin production and release we compared the concentrations of CSF melatonin in young and aged animals. The concentration of CSF melatonin was also evaluated in pinealectomized rats. These procedures will elucidate the dynamic of ventricular CSF melatonin.

O hormônio melatonina é produzido pela glândula pineal de mamíferos de forma circadiana e sua secreção é mais elevada durante a noite. Melatonina é liberada no sistema ventricular cerebral através do recesso pineal do 3º ventrículo. Sabe-se que a concentração de melatonina é maior nos ventrículos cerebrais que no plasma e no líquido cerebroespinhal lombar. Para avaliar a dinâmica da melatonina liquórica no rato Wistar, coletamos, através de microdiálise, amostras do líquor do terceiro ventrículo cerebral de animais jovens. Para avaliar a variação ontogenética em sua produção e liberação compararam-se as concentrações de melatonina liquórica em animais jovens e idosos. Observou-se também o perfil da melatonina liquórica em animais pinealectomizados. Esses procedimentos darão base para uma análise sistemática da dinâmica da melatonina no líquido cerebroespinal ventricular. / The hormone melatonin is produced by the mammalian pineal gland in a circadian way and its secretion is higher at night. Melatonin is released to the cerebral ventricular system through the pineal recess of the III ventricle. We know that the concentration of melatonin is higher in the cerebral ventricles than in plasma and lumbar cerebrospinal fluid. To evaluate the dynamic of melatonin in the cerebrospinal fluid (CSF) in Wistar rats, we collected, using microdialisys, samples of cerebrospinal fluid in the III ventricle of young animals. To estimate the ontogenetic decrease in melatonin production and release we compared the concentrations of CSF melatonin in young and aged animals. The concentration of CSF melatonin was also evaluated in pinealectomized rats. These procedures will elucidate the dynamic of ventricular CSF melatonin.

O metabolismo energético é dependente, dentre outros fatores, de uma temporização circadiana entre os tecidos participantes da regulação metabólica. O processo de sincronização parece depender da expressão dos genes relógio e de mediadores como a melatonina, que associam o oscilador central e os osciladores periféricos. Investigamos o papel da melatonina na expressão dos genes relógio em tecidos periféricos, onde ratos Wistar foram divididos em dois grupos: pinealectomizados e controle. Após 45 dias os animais foram sacrificados circadianamente e seus tecidos de interesse extraídos para análise através do PCR convencional. A pinealectomia ocasionou significativa desorganização temporal na expressão de quase todos os genes relógios dos tecidos muscular e do adiposo periepididimal. O tecido hepático foi o que menos sofreu alterações pela pinealectomia. Em conclusão, esses dados mostram que a melatonina é necessária para manutenção da ritmicidade dos genes relógio no tecido muscular estriado esquelético, no tecido adiposo periepididimal e no tecido hepático. / The energy metabolism is dependent, between other factors, of a circadian timing among the tissues participants of the metabolic regulation. The synchronization process appears to depend on the expression of clock genes and mediators such as melatonin, involving the central oscillator and peripheral oscillators. We have investigated the role of melatonin in the expression of clock genes in peripheral tissues. Rats have been divided into two groups: pinealectomized and control rats. After 45 days the animals were sacrificed and their tissues of interest have been extracted for analysis by conventional PCR. Pinealectomy caused a significant disruption in the temporal expression of almost all genes of muscle tissue and fat tissue. The liver tissue was the least affected by changes of pinealectomy. In conclusion, these data show that melatonin is necessary for maintaining the rhythmicity of clock genes in skeletal muscle, adipose tissue and liver tissue.