TAJRA, F.S.Avaliação das potencialidades biotecnológicas de lectinas vegetais no diagnóstico e prevenção de cárie dentária. 2010. 91 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, 2010. / Submitted by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-04-04T14:15:19Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_fstajra.pdf: 1032248 bytes, checksum: c86b2654a67d23ae171e7d3e6ba7ef8c (MD5) / Approved for entry into archive by Djeanne Costa(djeannecosta@gmail.com) on 2016-04-04T14:16:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_fstajra.pdf: 1032248 bytes, checksum: c86b2654a67d23ae171e7d3e6ba7ef8c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-04T14:16:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_fstajra.pdf: 1032248 bytes, checksum: c86b2654a67d23ae171e7d3e6ba7ef8c (MD5) Previous issue date: 2010 / Dental Caries is an infectious disease naturally multi-factorial that begins in the childhood, able to spread its intensity and prevalence according to the mouth ambient conditions of each host. The risk of the patients to develop, in some time of their lives, carious lesions can be measured through a complex analysis using health determinant factors and other specific factors of the health-disease process. Since the dental caries forward diagnostic as well as the review of the auxiliary determinant factors of the dental caries danger evaluation, the treatment becomes simpler, less invasive and costing lower. It has been quite broad-casted lately the use of lectins to diagnose and to prevent some diseases. When dealing with dental caries disease, through many years this strategy has been explored still inceptively. Looking through this perspective, the goal of this trial was to investigate the biotechnological potential of the red marine alga Hypnea musciformis (HML) applied to Dentistry. It is about an explanatory-experimental study of quantitative approach through the health questionnaire and data statistics analysis. The research makes reference to some comparative analysis of salivary tests and the cariogenic activity in twelve year-old students and it searches to evaluate the biotechnological potentialities of the lectin from the red marine alga Hypnea musciformis (HML) in the diagnose and prevention of the dental caries. The concentration area of this trial was the macromolecules/ lectin biotechnological application. In the present trial were compared obtained results through the application of the conventional clinical exams to dental caries and salivary tests of dental caries activity pointed by the CARIOGRAM® program in association with lab analysis using specific lectins. From this trial, it has been concluded that, about lectins as a biotechnological potential to prevention and diagnose of the dental caries, it has been noticed that there is recognition of resident glycoconjugate on pacifier saliva of high and low risk observed in immunofluorescence pattern. The results showed that the tested lectin has the capacity to intervene on the bacterial growth in a negative way, it is being distinguished statistically (p<0,01) in relation to control group of saline and BSA. However, inhibition studies of the microbial biofilms using the HML are being programmed to evaluate the using possibility of these protein as biotech input to be used for dental caries prevention. It could be said also that the obtained results by the use of HML in the antimicrobial activity were promising, showing that this lectin has presented antimicrobial activity even on very small amounts. As to the use of these protein in the biofilm formation and developing there was no characteristic pattern. / A cárie é uma doença infecciosa de natureza multifatorial que se inicia na infância, podendo aumentar de intensidade e prevalência de acordo com as condições do ambiente bucal de cada hospedeiro. O risco do paciente em desenvolver, em algum período de seu ciclo de vida, lesões cariosas pode ser medido através de uma análise complexa que utiliza os fatores determinantes da saúde e outros fatores específicos do processo saúde-doença. A partir do diagnóstico precoce da doença cárie, assim como análise dos fatores determinantes auxiliares da avaliação do risco de cárie, o tratamento torna-se mais simples, menos invasivo e de menor custo. Tem sido bastante difundida ultimamente a utilização de lectinas para diagnóstico e prevenção de algumas doenças. Em se tratando da doença cárie, ao longo de muitos anos, essa estratégia tem sido explorada ainda de forma incipiente. Nesta perspectiva, o objetivo deste trabalho foi investigar as potencialidades biotecnológicas da lectina de alga marinha da espécie de Hypnea musciformis (HML) aplicadas à odontologia. Trata-se de um estudo explicativo-experimental de abordagem quantitativa através de questionário de saúde e análises estatísticas de dados. A pesquisa faz referência à uma análise comparativa de testes salivares e atividade cariogênica em escolares de 12 anos de idade e a busca avaliar as potencialidades biotecnológicas da lectina de alga marinha da espécie de Hypnea musciformis (HML) no diagnóstico e prevenção de cárie dentária. A área de concentração deste estudo Macromolétulas / Aplicação Biotecnológica de Lectinas. No presente estudo, foram comparados os resultados obtidos através da aplicação de exame clínico convencional para cárie e testes salivares de atividade cariogênica apontados pelo programa CARIOGRAM® em associação com análises laboratoriais com a utilização de lectinas específicas. A partir deste estudo, concluiu-se que, em se tratando do uso de lectinas como potencial biotecnológico para a prevenção e diagnóstico de cárie dentária, percebeu-se que há reconhecimento de glicoconjugados presentes na saliva de pacientes de alto e baixo risco observados em padrão de fluorescência. Os resultados demonstram que a lectina testada tem a capacidade de interferir no crescimento bacteriano de forma negativa, sendo estatisticamente significante (p<0,01) em relação aos grupos controle de salina e BSA. Entretanto estudos de inibição da formação de biofilmes microbianos utilizando a HML estão sendo programados, para assim avaliar a possibilidade de utilização dessas proteínas como insumos biotecnológicos a ser utilizados para prevenção da cárie dentária. Pode-se ainda afirmar que os resultados obtidos pelo uso de HML na atividade antibacteriana foram promissores, mostrando que esta lectina apresentou atividade antibacteriana mesmo em quantidades muito pequenas. Quanto ao uso destas proteínas na formação e desenvolvimento de biofilmes, não houve padrão característico.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-12-15Bitstream added on 2014-06-13T19:53:10Z : No. of bitstreams: 1 dignani_df_me_arafcf.pdf: 773247 bytes, checksum: 12484d76e725fa6e5f7ad83c157f0655 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Peperomia blanda é uma erva rupestre, pequena que cresce em fendas de rochas, nesta espécie foi verificada a presença de componentes voláteis, associações de lignanas, flavonóides, entre outros compostos. Com o objetivo de determinar o potencial biológico de P. blanda, foi estudada a atividade antibacteriana e antioxidante de extratos, frações e substâncias isoladas de suas partes aéreas e raízes, obtidas por maceração a frio. Para determinação da atividade antibacteriana foram utilizadas as técnicas de difusão em agar e microdiluição contra cepas Gram-positivas e Gramnegativas. Para determinação do potencial antioxidante foram realizados os ensaios espectrofotométricos: radical ABTS.+, HOCl, taurina-cloramina e ânion superóxido (O2 ●-), utilizando como padrões a quercetina e cisteína. Na técnica de difusão em agar, 100μL de suspensão bacteriana a concentração de 108 UFC/mL foram semeadas em agar Muller-Hinton com alça de Drigalski. Discos de papel com 10 mm de diâmetros embebidos com 25μL das amostras vegetais foram dispostos na superfície dessas placas. Após incubação a 37ºC por 24 horas em aerobiose foram feitas as leituras dos halos de inibição de crescimento ao redor dos discos, medidos em milímetros. No teste de microdiluição os orifícios das microplacas foram preenchidos com 80μL de caldo de Muller-Hinton, 100μL de soluções da amostra vegetal diluída seriadamente de 1000 a 12,5μg/mL e 20μL da cultura bacteriana a concentração de 107 células/mL. As microplacas foram incubadas a 37ºC durante 24 horas sob condições de aerobiose e posteriormente determinada a leitura da absorbância em leitor de microplaca a 595nm. As amostras vegetais não apresentaram atividade contra nenhuma das bactérias testadas pelo método... / The species of Peperomia blanda is a perennial herb, which grows in small rocks crevices that showed the presence of volatile components, associations of lignans, flavonoids and other compounds. In order to determine the biological potential of P. blanda, we studied the antibacterial and antioxidant activity of extracts, fractions and compounds isolated from its aerial parts and roots, obtained by cold maceration. For determination the antibacterial activity was used agar diffusion and microdilution against strains Gram-positive and Gram-negative. For determination of antioxidant potential were performed spectrophotometric assay: ABTS+ radical, HOCl, taurinecloroamine and superoxide anions (O2 ●-), using quercetin and cysteine as standards. In agar diffusion assay, 100 μL of bacterial suspension in the concentration of 108 CFU/mL were placed on Mueller-Hinton agar with Drigalski. Paper disks with 10 mm in diameter embededd with 25μL samples of vegetables were placed on the surface of these plates. After incubation at 37°C for 24 hours under aerobic conditions were made the readings of the halos of growth inhibition around the disks, measured in millimeters. In the microdilution assay of the microdilutions were filled with 80μL broth Muller-Hinton, 100 μL of the solution plant sample serially diluted from 1000 to 12.5 μg/mL and 20μL of bacterial culture concentration of 107 cells/mL. The microplates were incubated at 37°C for 24 hours under aerobic conditions and thereafter determined reading the absorbance in a microplate reader 595nm.The plant samples did not show any activity against the bacteria tested using agar diffusion. Microdilution bioassay the samples showed the best results against S. aureus... (Complete abstract click electronic access below)

Nanopartículas (NPs) tem ganhado notoriedade crescente em aplicações biomédicas. Podendo ser constituídas de diversos materiais, NPs tem sido empregadas como agentes de contraste, na liberação direcionada e controlada de fármacos, em terapia para tratamento de câncer, em catálise heterogênea, entre outras aplicações. As nanopartículas magnéticas de óxido de ferro (MNP) destacam-se pela multiplicidade de aplicações, apesar de serem pouco caracterizadas quanto à toxicidade celular. Outras nanopartículas com excelente potencial são as constituídas de óxido de nióbio (NbONPs), as quais merecem atenção especial, pois o Brasil é detentor de 98% das reservas comercialmente viáveis deste elemento. Neste trabalho NPs destes dois metais de transição (ferro e nióbio) foram sintetizadas, almejando entender suas interações com materiais, biomoléculas e meios biológicos. Diversas metodologias foram desenvolvidas e testadas com intuito de otimizar a morfologia e o rendimento da preparação, resultando na escolha de decomposição térmica para MNP e, para NbONPs, escolheu-se a impregnação do óxido de nióbio sobre uma matriz de MNPs recobertas com sílica. No caso das MNPs, procedeu-se ao recobrimento das mesmas com lipídeos zwitteriônicos (Dioleilfosfatidilcolina (DOPC)) e carregados positivamente (Brometo de dioctadecildimetilamônio (DODAB)). Foram inicialmente caracterizadas as suas propriedades em diversos ambientes biológicos para posteriormente realizarmos ensaios de citoxicidade em queratinócitos humanos (HaCaT). Avaliamos também a degradação das NPs em diferentes pH, bem como, a interação das mesmas com membranas miméticas de vesículas gigantes unilamelares (GUVs - Giant Unilamellar Vesicles), com visualização microscópica. As MNPs recobertas com DODAB mostraram-se mais tóxicas para os queratinócitos em cultura e também causaram lise das GUVs. No caso das NbONPs, avaliou-se a acidez proveniente do Nb2O5 e o seu potencial em catálise heterogênea, bem como a avaliação da citotoxicidade em HaCaT revelou um potencial uso biomédico. / Nanoparticles (NPs) have received increasing attention in biomedical applications. NPs can be constituted by different materials and have been used as contrast agents, in drug delivery, in cancer therapy, in heterogeneous catalysis, among other applications. Magnetic iron oxide nanoparticles (MNP) are notable for their multiplicity of applications, although they are poorly characterized for cellular toxicity. Other nanoparticles with excellent potential are made of niobium oxide (NbONPs), which deserve special attention, since Brazil holds 98% of the commercially viable reserves of this element. In this Thesis, NPs of these two transition metals (iron and niobium) were synthesized, aiming to understand their interactions with materials, biomolecules and media biological. Several methodologies were developed and tested to optimize the morphology and yield of the preparation, resulting in the choice of thermal decomposition for MNPs and, for NbONPs, the impregnation of niobium oxide on a matrix of silica-coated MNPs. In the case of MNPs, they were also coated with lipid zwitterionics (Dioleoyl phosphocholine (DOPC)) and positively charged (Dimethyldioctadecylammonium bromide (DODAB)) lipids. Its properties were initially characterized in several biological environments for later cytotoxicity assays in human keratinocytes (HaCaT). It evaluated the degradation of the NPs in different pH, as well as their interaction with giant unilamellar vesicle (GUVs) mimetic membranes, with microscopic visualization. MNPs coated with DODAB were more toxic to keratinocytes in culture and caused lysis of GUVs. In the case of NbONPs, acidity from Nb2O5 was evaluated in heterogeneous catalysis, as well as the evaluation of HaCaT cytotoxicity revealed a potential biomedical use.

Submitted by Liliane Ferreira (ljuvencia30@gmail.com) on 2018-06-21T11:51:26Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Eliângela Cristina Cândida Costa - 2017.pdf: 4155642 bytes, checksum: ecd1675c72542e283fac0527fef17f7e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-06-27T10:57:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Eliângela Cristina Cândida Costa - 2017.pdf: 4155642 bytes, checksum: ecd1675c72542e283fac0527fef17f7e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-27T10:57:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Eliângela Cristina Cândida Costa - 2017.pdf: 4155642 bytes, checksum: ecd1675c72542e283fac0527fef17f7e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-08-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Cerrado is a region whose biological richness is unique, being formed by about 10 thousand plants. The flora study, ethnobotanic stands out for understanding of the interaction of society whit plants. In this view, teacher Dr. Vanessa Pasqualotto research group’s has been carrying out ethnobotanic survey in collaboration with the Coqueiros community, with the objective of recovering and valuing the popular knowledge about medicinal plants, among which the Kielmeyera coriacea species, the focus of this study, stands out. In this group, 37 members were interviewed, of which 76% indicate K. coriacea for the treatment of infections, rheumatism, leukemia, tooth pain, among others. Thus, the chemical study of ethanolic extract of roots (EER) of this species, aiming at to characterize its secondary metabolites, since there are no chemical reports in the literature for this part of the plant. In addition antioxidant, antimicrobial and antitumor potential of K. coriacea were evaluated. From the liquid-liquid extraction of EER the hexane (FH), ethyl acetate (FAE) and hydroalcoholic (FHA) fractions were obtained; by the fractionation of FAE, the substance 3-hydroxy-2,4- dimethoxyxanthone was isolated. Additionally, a fingerprint study was performed by LC-MS technique, identifying major compounds such as δ-tocotrienol, prenylated acylphoroglucinol, 2-hydroxy-1-methoxyxanthone, quercitrin. EER, FH, FAE, FHA, its subfractions and the isolated substance were submitted to biological tests. FHA presented antioxidant action with EC50 de 201,53 μg mL-1. EER and FH-10 subfraction from FH fractionation, inhibited the bacterial growth of Streptococcus pyogenes and S. pneumoniae (Minimum Inhibitory Concentration of 6.25 and 1.56 μg mL-1, respectively); EER also inhibited the fungus Candida glabrata in 7.81 μg mL-1. Finally, FH, FAE and FH-10 presented an antitumor effect against the HeLa cells, which are related to cervical cancer (IC50 of 2.5 μg mL-1, 2.5 μg mL-1 and 0.89 μg mL-1, respectively). When correlating the chemical and biological data, it is possible that the FAE-4.7.3 subfractions, from the fractionation of FAE, and FH-10 are constituted by substances such as 4-hydroxy-2,3-methylenedioxy xanthone, 3-hydroxy-1,2-dimethoxy xanthone, lupeol, prenylated acylphoroglucinol and quercitrin, which could be associated with the biological potential found. Therefore, the knowledge acquired in this study contributed to the expansion of the chemical-biological knowledge of K. coriacea. / O Cerrado é uma região cuja riqueza biológica é singular, sendo formado por cerca de 10 mil plantas. No estudo da flora, a etnobotânica se destaca por compreeder a interação da sociedade com as plantas. Nesse contexto, o grupo de pesquisa da Profa. Dra. Vanessa Pasqualotto vem realizando estudos etnobotânicos em colaboração com a comunidade Coqueiros, visando o resgate e a valorização dos saberes populares sobre plantas medicinais, dentre as quais se destaca a espécie Kielmeyera coriacea, foco deste estudo. Neste estudo foram entrevistados 37 membros, em que 76% indicam K. coriacea para o tratamento de infecções, reumatismo, leucemia, dor no dente, dentre outras. Assim, foi realizado o estudo químico do extrato etanólico da raiz (EER) desta espécie, objetivando caracterizar seus metabólitos secundários, uma vez que não há relatos químicos na literatura para esta parte da planta. Ademais, foi avaliado os potenciais antioxidante, antimicrobiano e antitumoral de K. coriacea. A partir da extração líquido-líquido de EER foram obtidas as frações hexano (FH), acetato de etila (FAE) e hidroalcoólica (FHA); pelo fracionamento da FAE foi isolada a substância 3-hidroxi-2,4-dimetoxixantona. O estudo do perfil químico foi realizado por CLAE-EM, identificando-se compostos majoritários como δ-tocotrienol, acilforoglucinol prenilado, 2-hidroxi-1-metoxixantona e quercitrina. EER, FH, FAE, FHA e suas subfrações, bem como a substância isolada foram submetidos aos ensaios biológicos. FHA apresentou ação antioxidante com EC50 de 201,53 μg mL-1. EER e a subfração FH-10, proveniente do fracionamento de FH, inibiram o crescimento bacteriano de Streptococcus pyogenes e S. pneumoniae (Concentração Inibitória Mínima de 6,25 e 1,56 μg mL-1, respectivamente); EER também inibiu o fungo Candida glabrata na 7,81 μg mL-1. Por fim, FH, FAE e FH-10 apresentaram efeito antitumoral frente à célula HeLa, a qual está relacionada ao câncer do cólon do útero (IC50 de 2,5, 2,5 e 0,89 μg mL-1, respectivamente). Ao correlacionar os dados químicos com biológicos, tem-se que as subfrações FAE-4.7.3, proveniente do fracionamento de FAE, e FH-10 são constituídas por substâncias como 4-hidroxi-2,3-metilenodioxixantona, 3-hidroxi-1,2-dimetoxixantona, lupeol, acilforoglucinol prenilado e a quercitrina, as quais poderiam estar associadas ao potencial biológico encontrado. Portanto, o conhecimento adquirido neste estudo contribuiu para a ampliação dos saberes químico-biológicos de K. coriacea.