Orientador: Regiane Cristina Oliveira de Freitas Bueno / Banca: Simone Silva Vieira / Banca: Cristiane Müller / Resumo: A utilização dos parasitoides de ovos tem ação positiva frente a dinâmica de infestação dos insetos-praga. Entre as espécies que causam prejuízos as culturas de interesse econômico, Spodoptera frugiperda J.E. Smith (Lepidoptera: Noctuidae) tem destaque, principalmente por ser praga-chave da cultura do milho. Neste cenário, a utilização dos parasitoides de ovos das espécies Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) e Telenomus remus Nixon (Hymenoptera: Platygastridae) é uma das ferramentas que estará a disposição para auxiliar o manejo de pragas. No entanto, uma das dificuldades para a utilização dos parasitoides é a criação de forma massal e o controle de qualidade dos insetos criados, fatores que garantem a efetividade dos parasitoides em campo. Com base nisso, objetivou-se realizar a caracterização de T. remus criados em diferentes hospedeiros, quanto a morfometria dos indivíduos e dos ovos de hospedeiros, presença de endossimbiontes e determinação do número ideal para realização de liberações conjuntas com T. pretiosum para controle de S. frugiperda na cultura do milho. Foram realizados experimentos de caracterização morfométrica de T. remus criados em diferentes hospedeiros utilizando microscópio óptico com lente acoplada para captura de imagens dos parasitoides, caracterização dos ovos dos hospedeiros através de microscopia eletrônica de varredura (MEV) e caracterização dos endossimbiontes associados a T. remus e testes de laboratório e semi-campo vis... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The use of egg parasitoids has a positive action against pest insect infestation dynamics. Among the species that cause damage to crops of economic interest, Spodoptera frugiperda J. E. Smith (Lepidoptera: Noctuidae) stands out, mainly because it is a key pest of corn crop. In this scenario, the use of egg parasitoids of the species Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) and Telenomus remus Nixon (Hymenoptera: Platygastridae) is one of the tools available to assist pest management. However, one of the difficulties for the use of parasitoids is the mass breeding and quality control of insects raised, factors that guarantee the effectiveness of parasitoids in the field. Based on this, the objective was to characterize T. remus reared in different hosts, regarding the morphometry of individuals and host eggs, presence of endosymbionts and determination of the ideal number to perform joint releases with T. pretiosum for control of S. frugiperda in maize crop. Morphometric characterization experiments of T. remus reared on different hosts were performed using a lens-attached optical microscope to capture parasitoid images, characterization of host eggs by scanning electron microscopy (SEM) and characterization of T. remus associated endosymbionts and laboratory and semi-field tests to determine the optimal joint release dose of T. pretiosum combined with T. remus, and finally flight activity testing was performed to evaluate the quality of parasitoids used. The parasitoid T. remus when raised in different hosts varies with respect to morphometric characters, but all eggs of the tested hosts provide adequate development to the parasitoid, even though they have different sizes, groups and characteristics. T. remus-associated endosymbionts are from the genus Hamiltonella, Cardinium, Sodalis and Serratia and only parasitoids reared on C. cephalonica have Wolbachia endosymbionts and the... / Mestre

Resumo: Nos seringais do Brasil o percevejo-de-renda Leptopharsa heveae (Hemiptera: Tingidae), e os ácaros Tenuipalpus heveae (Tenuipalpidae) e Calacarus heveae (Eriophyidae) são as principais pragas, e Salticidae, Anyphaenidae e Theridiidae são as aranhas mais abundantes. Para avaliar as interações destes artrópodes, foram realizados experimentos laboratoriais de confronto de predadores (aranhas) e presas (ácaros e percevejos) e para estimar a co-ocorrência e densidade foram feitas amostragens nos seringais da região de São José do Rio Preto-SP. Comparativamente os maiores valores de predação, de imobilização de presas nas sedas e de dispersão, foram observados respectivamente para os seguintes tratamentos: a) Predação de L. heveae por Theridiidae (37%), b) imobilização de C. heveae (21,5%) e de L. heveae (14,5%) por sedas de Salticidae, c) dispersão de T. heveae por Salticidae (29,5%) e por Anyphaenidae (35%). A maior mortalidade total causada pelas aranhas nos percevejos-de-renda foi de 40% e nos ácaros, igual a 42% para T. heveae e 36% para C. heveae. A ocorrência simultânea dessas aranhas e fitófagos nos cultivos de seringueira predispõem confrontos, e estes causam algum tipo de prejuízo para as pragas, de forma que, medidas que favoreçam a presença das aranhas nos cultivos devem ser adotadas. / Abstract: In the rubber tree fields of Brazil the rubber tree lace bug Leptopharsa heveae (Hemiptera: Tingidae) and the mites Tenuipalpus heveae (Tenuipalpidae) and Calacarus heveae (Eriophyidae) are the main pests, and Salticidae, Anyphaenidae and Theridiidae are the most abundant spiders. To evaluate the interactions between these arthropods, laboratorial experiments by confrontation of predators (spiders) and preys (mites and tree lace bug) were carried out and to estimate the co-occurrence and density, samplings occur in rubber tree fields at São José do Rio Preto - SP. Comparatively, the highest values of predation, preys immobilization in the silks and dispersion had been observed respectively for the following treatments: a) L. heveae predation by Theridiidae (37%), b) C. heveae (21,5%) and L. heveae (14,5%) immobilization through silks by Salticidae, c) T. heveae dispersion by Salticidae (29,5%) and Anyphaenidae (35%). The highest overall mortality caused by the spiders in the tree lace bugs was 40% and for the mites, 42% for T. heveae and 36% for C. heveae. The simultaneous occurrence of these spiders and fitofagous in the rubber tree fields predicts confrontations that cause some kind of damage for the pests, so that, measures that favor the presence of spiders in the plantations must be adopted. / Orientador: Isabela Maria Piovesan Rinaldi / Coorientador: Reinaldo José Fazzio Feres / Banca: Marcel Ricardo Tanzini / Banca: Luiz Carlos Forti / Mestre

Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-04-23Bitstream added on 2015-03-03T12:06:21Z : No. of bitstreams: 1 000807233_20150423.pdf: 130707 bytes, checksum: d1216633a769f5eba4ecf88e8223de6a (MD5) Bitstreams deleted on 2015-04-23T11:39:25Z: 000807233_20150423.pdf,Bitstream added on 2015-04-23T11:39:57Z : No. of bitstreams: 1 000807233.pdf: 3171399 bytes, checksum: 12fcf4cc4f2fcf5fbdcdccd0a49cbe2e (MD5) / A família Laelapidae Berlese (Mesostigmata: Dermanyssoidea) é cosmopolita e ocupa uma diversidade de habitats, onde seus hábitos podem variar de espécies de vida-livre a espécies associadas a artrópodes, mamíferos e pássaros. Algumas espécies dessa família, bem como os nematoides entomopatogênicos (NEP) têm demonstrado bom potencial como agentes de controle biológico. Frankliniella occidentalis (Pergande), uma das espécies mais importantes de tripes-praga, causa danos a várias plantas cultivadas, atuando como praga ou vetor de patógenos. Os objetivos desse estudo foram a preparação de um catálogo taxonômico para lelapídeos de vida-livre e associados a artrópodes, o estudo taxonômico de espécies de Laelapidae coletados no Brasil, a preparação de uma chave para gêneros de Laelapidae de vida livre e associados a artrópodes até o momento conhecidos da América do Sul, e avaliar os efeitos de diferentes espécies de lelapídeos e NEP como agentes de controle de F. occidentalis. Um total de 828 espécies pertencentes a 41 gêneros são relatados no catálogo. Nove espécies novas foram descritas e uma chave para gêneros de ocorrência na América do Sul de Laelapidae foi elaborada. Em testes de laboratório, Cosmolaelaps jaboticabalensis Moreira, Klompen & Moraes e Stratiolaelaps scimitus (Womersley) predaram aproximadamente 2,5 e 3,9 pré-pupa/pupa de F. occidentalis e ovipositaram aproximadamente 2,2 e 1,4 ovos por dia, respectivamente. Heterorhabditis amazonensis GL Andaló, Nguyen & Moino Jr. foi o nematoide mais virulento, causando a mortalidade de aproximadamente 87,5% das pre-pupas/pupas oferecidas. Nenhum dos predadores avaliados mostrou preferência por este nematoide como presa e nenhum dos NEP avaliados interferiram na sobrevivência dos predadores. Para C. jaboticabalensis, a fase imatura (ovo-adulto) foi completada em 12,3 ± 5; 6,6 ± 0,6 e 7,1 ± 0,6 em F. occidentalis, Protorhabditis sp. ... / The cosmopolitan Dermanyssoidea mite family Laelapidae Berlese occupies a diversity of habitats, where their habits vary from free-living to arthropod, mammal and bird associates. Some species of this family as well the entomopathogenic nematodes (EPN) have shown good potential as biological control agents. Frankliniella occidentalis (Pergande), one of the most important thrips pests, causes major damage to several cultivated plants, acting as pest or vector of pathogens. The aims of the study reported in this document were the preparation of a taxonomic catalog of the free-living and arthropod associated laelapid mites, the taxonomic study of the laelapid species collected in Brazil, the preparation of a key for the South American free-living and arthropod associated genera, and evaluations of the effect of different laelapid and EPN species as control agents of F. occidentalis. A total of 828 species of 41 genera are reported in the catalog. Nine new species were described and a key for the separation of genera reported in South America genus was prepared. In laboratory tests, Cosmolaelaps jaboticabalensis Moreira, Klompen and Moraes and Stratiolaelaps scimitus (Womersley) preyed upon about 2.5 and 3.9 pre-pupae/pupae of F. occidentalis and laid about 2.2 and 1.4 eggs per day, respectively. Heterorhabditis amazonensis GL Andaló, Nguyen and Moino Jr. was the most virulent nematode, producing mortality of about 87.5% of exposed pre-pupae/pupae. None of the evaluated predators showed preference for that nematode as prey and none of the evaluated nematodes interfered in the survivorship of the predators. For C. jaboticabalensis, total immature development (egg-adult) was completed in 12.3 ± 5, 6.6 ± 0.6 and 7.1 ± 0.6 on F. occidentalis, Protorhabditis sp. and T. putrescentiae, respectively. Fecundity and intrinsic rate of increase were higher on Protorhabditis sp. (71.6 ± 9.1 eggs/female; 0.28 female/female/day) than ...

Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-22Bitstream added on 2015-03-03T12:07:10Z : No. of bitstreams: 1 000807109.pdf: 457835 bytes, checksum: c8b102f16b86a5f3ecea8c8ee3c9df40 (MD5) / A pesquisa objetivou analisar a suscetibilidade de duas populações distintas de Helicoverpa armigera a produtos comerciais à base de Bacillus thuringiensis (Bt) e isolados de Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae e Metarhizium rileyi. As populações foram coletadas em lavouras de soja nos municípios de Rio Verde (GO) e Luís Eduardo Magalhães (BA) e criadas em laboratório até a décima geração antes do início dos bioensaios. Os formulados utilizados foram Dipel® PM (B. thuringiensis var kurstaki), Xentari® WG (B. thuringiensis var. aizawai) e Agree® WG (B. thuringiensis var. aizawai GC91 transconjugado com B. thuringiensis var. kurstaki), com a aplicação de 50 ?L da suspensão do produto biológico, na concentração de 107 esporos viáveis/mL, sobre a superfície da dieta acondicionada em recipientes esféricos de plástico (2 cm de diâmetro x 3 cm de altura). Em cada recipiente foi inserida uma lagarta, de cada instar larval, em um total de 100 lagartas por tratamento distribuídas em 10 repetições. As avaliações referentes à mortalidade foram efetuadas a cada 24 horas, até o sétimo dia após a aplicação dos tratamentos. Os fungos B. bassiana e M. anisopliae foram obtidos a partir dos produtos comerciais biológicos Boveril® PM e Metarril® PM, respectivamente, enquanto que M. rileyi foi isolado de cadáveres de H. armigera, sendo padronizados na concentração de 108 conídios viáveis/mL. Como unidade experimental foram utilizados recipientes de plástico (2 cm de diâmetro x 3 cm de altura), com dieta artificial na qual uma alíquota de 50 ?L do fungo foi misturada ou aplicada na superfície. Em cada recipiente foi inserida uma lagarta de primeiro instar, com menos de 24 h de vida, totalizando 100 lagartas por tratamento distribuídas em 10 repetições. A mortalidade foi avaliada a cada 24 h, até o décimo dia após a aplicação dos tratamentos. Lagartas de primeiro instar de H. armigera, de ambas ... / The research aimed to assess the suscetibility of two distinct Brazilian populations of Helicoverpa armigera to commercial Bacillus thuringiensis insecticides and isolates of Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae and Metarhizium rileyi.The pest populations were collected in soybean fields located in Rio Verde (GO) and Luís Eduardo Magalhães (BA), taken to laboratory and reared until the tenth generation on artificial diet, to be used in the experiment.The bioassays were performed using spherical plastic receptacles (2-cm diameter x 3- cm height) containing artificial diet until complete the half volume. The formulated products used were Dipel® WP (B. thuringiensis var kurstaki), Xentari® WG (B. thuringiensis var. aizawai) and Agree® WG (B. thuringiensis var. aizawai GC91 with B. thuringiensis var. kurstaki), spraying 50 ?L of biological product solution at 107 viable spores/mL, on the surface of the diet. One caterpillar was inserted in each receptacle, related with larval instar, totaling 100 caterpillars per treatment and each group containing 10 caterpillars were considered a replication. Mortality were assessed each 24h, until the seventh day after the beginning of the bioassay. To perform the bioassays with entomopathogenic fungi, B. bassiana and M. anisopliae were obtained from the bio-insecticides Boveril® WP and Metarril® WP, respectively and M. rileyi was isolated from H. armigera cadavers at concentration of 108 viable conidia/mL. The bioassays were performed using spherical plastic receptacles (2-cmdiameter x 3-cm height) containing artificial diet until complete the half volume. After this step, a solution of 50 ?L containing the entomopathogenic fungi was sprayed on the diet surface. One caterpillar was inserted in each receptacle, with less than 24 h after hatch, totaling 100 caterpillars per treatment. Each group containing 10 caterpillars were considered a replication. Mortality were assessed each 24h, until ...

Orientador: Ricardo Antonio Polanczyk / Banca: Arlindo Leal Boiça Junior / Banca: Roberto Marchi Goulart / Resumo: Spodoptera albula é uma praga polifaga e cosmopolita sendo que no Brasil não existem produtos registrados para o seu controle embora recentemente alguns agricultores tenham relatados surtos desta espécie em lavouras de soja no estado do Mato Grosso. Desta forma, é de extrema importância o desenvolvimento de táticas de controle eficientes para esta praga e que ao mesmo tempo sejam pouco agressivas ao meio ambiente e à sociedade. Bacillus thuringiensis (Bt) é uma bactéria entomopatogênica altamente eficiente no controle de lepidópteros praga e apresenta toxicidade para várias espécies do gênero Spodoptera. A atividade tóxica de isolados e bioinseticidas à base de Bt foi avaliada utilizando lagartas de segundo instar de S. albula em bioensaios de mortalidade e virulência, bem com os efeitos subletais do Bt nas lagartas sobreviventes aos tratamentos. Os bioinseticidas Agree, Xentari e Dipel SC foram selecionados para os bioensaios de virulência, sendo que o primeiro foi o mais virulento e, portanto o mais promissor para o manejo desta praga. Também foi observada diferença na toxicidade entre as formulações do Dipel. Entre os isolados nenhum se destacou no controle desta praga e o isolado Bt05 afetou o desenvolvimento das lagartas resultando em menor peso de pré-pupa e pupa em relação a testemunha / Abstract: Spodoptera albula is a polyphagous and cosmopolitan pest and in Brazil there are no products registered for their control although some farmers have recently been reported outbreaks of this specie in soybean in the Mato Grosso state. Thus, it is extremely important to developing effective tactics to control this pest that are less harmful to the environment and society. Bacillus thuringiensis (Bt) is a highly efficient entomopathogenic bacterium in lepidopterous pest control and it is toxic to several species of Spodoptera genus. The toxic activity of Bt isolates and Bt biopesticides was evaluated using S. albula second instar larvae in mortality and virulence bioassays, and evaluating the sublethal Bt effects on larvae surviving to treatment. The biopesticides Agree, Xentari and Dipel SC were selected for bioassay virulence. Agree was the most virulent and therefore the most promising for the S. albula management. It was also observed differences in toxicity between Dipel formulations. All Bt isolates tested were not good for the control of this pest and the isolate BT05 affected the development of larvae resulting in lower weight of pre-pupa and pupa compared to control / Mestre

Orientador: Jaime Maia dos Santos / Banca: Nilza Maria Martinelli / Banca: Bruno Flávio Figueiredo Barbosa / Resumo: Em razão das elevadas perdas que os nematoides causam a agricultura e das limitações e impactos causados pelos defensivos químicos, assim como do cultivo sucessivo de plantas hospedeiras que propiciam o aumento das populações dessas pragas, esse trabalho teve como objetivo, isolar, identificar fungos nematófagos e avaliar o potencial como agentes de controle biológico das principais espécies de fitonematoides no Brasil. Os fungos foram isolados de amostras de solo coletadas em regiões dos estados do MS, MG e SP, de cisto e de nematoides naturalmente parasitados. Para testar a patogenicidade dos isolados fúngicos parasitas de ovos e cisto de Heterodera glycines pelos fungos Pochonia chlamydosporia, Fusarium solani e Trichoderma sp., dois experimentos in vitro foram conduzidos, compostos pela combinação das espécies de nematoides com cada isolado parasita e a testemunha: 1) capacidade de parasitismo de ovos de Meloidogyne javanica e H. glycines, e 2) capacidade de parasitismo de ovos de H. glycines dentro do cisto, totalizando 10 e 4 tratamentos, respectivamente e 3 repetições cada. Para o fungo endoparasita Catenaria sp. foram usados ovos e formas ativas de Pratylenchus brachyurus, 3 tratamentos e 3 repetições. Os ovos e cistos parasitados foram avaliados e fotomicrografados. O isolado de P. chlamydosporia se destacou, tendo parasitado mais de 80% dos ovos de H. glycines. O fungo endoparasita Catenaria sp. parasitou 89% das formas ativas de P. brachyurus, além de parasitar ovos dessa mesma espécie / Abstract: Given the high losses that nematodes cause agriculture and the limitations and impacts of agrochemicals, as well as the continuous cultivation of host plants that provide increased populations of these pests, this study aimed to isolate, identify and fungi nematophagous evaluate the potential as biological control agents of the main species of plant-parasitic nematodes in Brazil. The fungi were isolated from soil samples collected in regions of the states of MS, MG and SP, cyst and naturally infected nematodes. To test the pathogenicity of the isolated fungal parasite eggs and cysts of Heterodera glycines by fungi Pochonia chlamydosporia, Fusarium solani and Trichoderma sp, two in vitro experiments were conducted, composed by the combination of species of nematodes with every single parasite and the witness: 1 ) parasitism capacity of Meloidogyne javanica eggs and H. glycines, and 2) parasitism capacity of H. glycines eggs within the cyst, totaling 10 and 4 treatments, respectively, and 3 repetitions each. For fungus endoparasite Catenaria sp. they were used eggs and active forms Pratylenchus brachyurus, three treatments and three replications. Eggs and infected cysts were evaluated and photomicrographed. The isolate of P. chlamydosporia stood, infested with more than 80% of the eggs of H. glycines. The fungus endoparasite Catenaria sp. parasitized 89% of active forms of P. brachyurus, and parasite eggs of the same species / Mestre

Orientador: Regiane Cristina Oliveira de Freitas Bueno / Banca: José Roberto Postali Parra / Banca: Valmir Antonio Costa / Banca: Sandra Regina Magro / Banca: Pedro Takao Yamamoto / Resumo: A soja (Glycine max) é uma das culturas mais importantes no agronegócio brasileiro. Um dos principais problemas fitossanitários ocorrentes nesse cultivo é o ataque de insetos-praga, que estão presentes desde a emergência da plântula até a fase de colheita. O controle desses insetos é realizado a partir de inseticidas sintéticos. Porém, a tática de controle biológico tem sido cada vez mais utilizada no Brasil, tornando-se uma importante ferramenta no Manejo Integrado de Pragas (MIP). Entre as opções, o parasitoide de ovos Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) reduz a infestação de populações de insetos-praga da ordem Lepidoptera, propiciando menor impacto ambiental e a produção de alimentos mais saudáveis. Com isso, o presente trabalho verificou as características bioecológicas de T. pretiosum em espécies de Heliothinae, como também avaliou diferentes quantidades e formas de liberação deste parasitoide, demostrando o seu papel no manejo de lepidópteros-praga na cultura da soja. Para atingir este objetivo a tese foi dividida em quatro capítulos: (1) características biológicas e exigências térmicas de T. pretiosum em três espécies de Heliothinae; (2) capacidade de parasitismo de T. pretiosum em três espécies de Heliothinae sob diferentes temperaturas; (3) técnicas de liberação de T. pretiosum para o controle de lepidópteros-praga da soja; (4) manejo integrado de insetos-praga na cultura da soja com e sem controle biológico. No laboratório avaliou-se o pot... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Soybean (Glycine max) is one of the most important crops in Brazilian agribusiness. One of the main phytosanitary problems occurring in this crop is the attack of insect pests, which are present from the emergence of the seedling until the harvest. The control of these insects is carried out from synthetic insecticides. However, the biological control tactic has been increasingly used in Brazil, becoming an important tool in Integrated Pest Management (IPM). Among the options, the Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) is a parasitoid egg reduces the infestation of populations of insect pests of the order Lepidoptera, providing less environmental impact and the production of healthier foods. Thus, the present work verified the bioecological characteristics of T. pretiosum in Heliothinae species, as well as evaluating different amounts and forms of release of this parasitoid, demonstrating its role in the management of lepidopteran pests in the soybean crop. To achieve this objective the thesis was divided into four chapters: (1) biological characteristics and thermal requirements of T. pretiosum in three species of Heliothinae; (2) the parasitism capacity of T. pretiosum in three Heliothinae species under different temperatures; (3) techniques for the release of T. pretiosum for the control of lepidopteran pests of soybean; (4) integrated pest-insect management in soybean crop with and without biological control. In the laboratory the potential of t... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Kátia Cristina Kupper / Banca: Fabio Augusto / Banca: Alessandra Sussulini / Banca: Antonio de Góes / Banca: Jackson Antonio Marcondes de Souza / Resumo: O setor citrícola é o maior produtor de frutos no mundo, porém, encontra-se ameaçado por diversos patógenos, dentre esses, o fungo Phyllosticta citricarpa, agente causal da mancha preta dos citros. Como alternativa à utilização de fungicidas sintéticos para o controle do patógeno, o controle biológico, utilizando bactérias do gênero Bacillus, apresenta destaque. Tais microrganismos possibilitam o biocontrole pela produção de compostos orgânicos voláteis ou não voláteis. Sendo assim, este trabalho teve por objetivos: identificar os isolados de Bacillus spp. por meio de técnicas moleculares; avaliar a produção de compostos orgânicos voláteis produzidos por Bacillus spp. em diferentes meios de cultura; verificar os seus efeitos na evolução dos sintomas da doença em frutos de laranja, na morfologia de P. citricarpa em lesões de mancha preta e na indução de resistência, identificar os compostos voláteis por cromatografia gasosa unidimensional e finalmente, avaliar o efeito de diferentes meios de cultura no antagonismo e metabolismo secundário dos isolados de Bacillus. Os isolados bacterianos foram identificados como pertencentes às espécies de Bacillus subtilis, B. amyloliquefaciens e B. methylotrophicus. Os resultados mostraram que houve maior controle do patógeno, em decorrência da produção de voláteis, quando se utilizou os meios triptona de soja ágar (TSA) e caldo de triptona (TSB) para cultivo da bactéria, apresentando valores de inibição da colônia do fungo de até 73%. Com r... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The citrus sector is the largest producer of fruits in the world, but it is threatened by several pathogens, among them Phyllosticta citricarpa fungus, causal agent of the citrus black spot. As an alternative to the use of synthetic fungicides to control the pathogen, the biological control, using bacteria of the genus Bacillus, is highlighted. Such microorganisms enable biocontrol by the production of volatile or non-volatile organic compounds. Therefore, this work had as objectives: to identify the isolates of Bacillus spp. by means of molecular techniques; to evaluate the production of volatile organic compounds produced by Bacillus spp. in different culture media; to verify its effects on the evolution of orange disease symptoms, P. citricarpa morphology in black spot lesions and induction of resistance, to identify the volatile compounds by one-dimensional gas chromatography and, finally, to evaluate the effect of different culture in the antagonism and secondary metabolism of Bacillus isolates. The bacterial isolates were identified as belonging to the species of Bacillus subtilis, Bacillus amyloliquefaciens and Bacillus methylotrophicus. The results showed that there was greater control of the pathogen, due to the volatile production, when tryptone broth (TSA) and tryptone broth (TSB) were used to culture the bacteria, presenting inhibition values of the fungus colony up to 73%. With regard to the effect of volatile compounds on the evolution of disease symptoms, the best results in terms of inhibition (86%) of freckles that progressed to hard spots were obtained with ACB-65 and ACB-73, when cultured in TSB culture medium. Such antagonists have caused deformations in the hyphae of the pathogen, which may explain the non-evolution of the disease symptoms, as previously reported. The volatiles of Ba... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Ricardo Antonio Polanczyk / Coorientador: Fernando Hercos Valicente / Banca: Manoel Victor Franco Lemos / Banca: Luis Garrigós Leite / Resumo: Helicoverpa armigera é uma praga altamente polífaga e ataca culturas de grande importância agrícola em diversos países do mundo. O controle desta praga é realizado primariamente por inseticidas químicos. Porém, o uso indiscriminado do controle químico levou a resistência de populações desta praga a maioria dos inseticidas químicos usados para seu controle, dificultando o seu manejo no campo. Além do controle químico, o controle de H. armigera tem sido realizado com uso de plantas transgênicas que expressam a proteína Cry1Ac de Bacillus thuringiensis (Bt) ou por bioinseticidas que contem esta e outras proteínas. No entanto, estudos têm demonstrado uma diminuição significativa na susceptibilidade de H. armigera às proteínas Cry com o aumento de seu desenvolvimento larval. O mecanismo de resistência mais comum dos insetos às proteínas Cry é a redução de ligação da proteína aos receptores presentes na membrana, levando a uma menor afinidade de ligação da proteína aos receptores intestinais. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a susceptibilidade de lagartas de diferentes ínstares de H. armigera à Cry1Ac e correlacionar com a capacidade de ligação da proteína Cry1Ac às microvilosidades apicais das células colunares do intestino médio (BBMVs) isoladas de todos ínstares larvais. Além disso, por meio de ensaios de imunoprecipitação e análise por cromatografia líquida acoplada a espectrofotometria de massa, identificar as proteínas envolvidas na interação com a proteína ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Helicoverpa armigera is a highly polyphagous pest and attacks important crops worldwide. The control of this pest is carried out primarily by chemical insecticides. However, the indiscriminate use of chemical control, led to pest populations to develop resistance to most of the chemical insecticides used for their control, making it difficult to management in the field. In addition to chemical control, H. armigera has been done by transgenic crops expressing Cry1Ac toxin from Bacillus thuringiensis (Bt) or by biopesticides that contains Cry1Ac or other toxins. However, studies have demonstrated a susceptibility decrease of H. armigera to Cry toxins with their larval development increase. The most common mechanism of resistance used by insects against Cry toxins is the reduced toxin binding to receptors present on the membrane, leading to a lower binding affinity of the toxin to intestinal receptors. Thus, the objective of this work was to evaluate the susceptibility of different instar larvae of H. armigera to Cry1Ac toxin and to correlate with the Cry1Ac toxin binding capacity to BBMV isolated from all larval instar. Furthermore, by pull-down techniques and liquid chromatography coupled to mass spectrometry analysis, to identify the proteins involved in the Cry1Ac toxin interaction in the second and fifth instars of H. armigera. A significant reduction in the susceptibility of the late instars of H. armigera to Cry1Ac toxin was observed compared to early instars. LC50 estimated values ranged from 31.1 to 2525.7 ng of toxin/cm2 of diet in first and sixth instar larvae, respectively. These results point a difference of 80-fold in the susceptibility to Cry1Ac toxin from late to first larval instar. In the ELISA binding assays results to BBMV of the diffe... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Janete Apparecida Desidério / Banca: Vivian Boter Bergamasco / Banca: Jackson Antonio Marcondes de Souza / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito inseticida das proteínas Cry1Ia10 e Cry8 contra larvas de Anthonomus grandis Boheman (Coleoptera: Curculionidae), buscando por potencial sinérgico. Para tanto, o gene cry8 foi amplificado por PCR a partir de um clone previamente construído, obtendo-se um fragmento de aproximadamente 3531 pb e subclonado no vetor de expressão pET-SUMO. Para a expressão dos genes cry1Ia10 e cry8, os DNAs recombinantes foram inseridos em células de Escherichia coli BL21 (DE3) e induzidos por isopropil-β-D-tiogalactopiranosídeo (IPTG), resultando em proteínas de 94 kDa e 143 kDa, respectivamente, visualizadas em SDS-PAGE. As proteínas foram quantificadas através do software ImageQuant TL 8.1" (GE Healthcare), para que fosse possível a realização dos cálculos de diluição nas respectivas concentrações incorporadas à dieta artificial, a fim de estimar a CL50 e CL90 das duas proteínas testadas sozinhas e em conjunto. Com base na sequência de aminoácidos de proteínas da classe Cry8, análises filogenéticas foram realizadas para investigar proximidade evolutiva da proteína Cry8 utilizada neste trabalho com as demais proteínas na mesma classe. Através dessas análises, sugerimos que a proteína em questão pertence à subclasse Cry8Pa devido a elevada proximidade filogenética e similaridade com a proteína Cry8Pa2. Observou-se que as proteínas Cry1Ia10 e Cry8 apresentaram ação inseticida contra larvas neonatas de A. grandis, obtendo-se as CL50 de 7,232 µg ml-1 e ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of this work was to evaluate the insecticidal effect of Cry1Ia10 and Cry8 proteins against Anthonomus grandis Boheman larvae (Coleoptera: Curculionidae), searching for synergistic potential. To do so, the cry8 gene was amplified by PCR from a previously constructed clone, obtaining a fragment of approximately 3531 bp and subcloned into the pET-SUMO expression vector. For the expression of the cry1Ia10 and cry8 genes, the recombinant DNAs were inserted into Escherichia coli BL21 (DE3) and isopropyl-β-Dthiogalactopyranoside (IPTG) cells, resulting in 94 kDa and 143 kDa proteins, respectively, visualized on SDS-PAGE. The proteins were quantified using ImageQuant TL 8.1 software (GE Healthcare) to allow the calculation of dilution in the respective concentrations incorporated into the artificial diet in order to estimate the LC50 and CL90 of the two proteins tested alone and together. Based on the amino acid sequence of Cry8 class proteins, phylogenetic analyzes were performed to investigate evolutionary proximity of the Cry8 protein used in this work with the other proteins in the same class. Through these analyzes, we suggest that the protein in question belongs to the subclass Cry8Pa due to its high phylogenetic proximity and similarity to the Cry8Pa2 protein. It was observed that the proteins Cry1Ia10 and Cry8 showed insecticidal action against neonatal larvae of A. grandis, obtaining the LC50 of 7.232 μg ml-1 and 4.422 μg ml-1 for Cry1Ia10 and Cry8 respectively. When combined the proteins at LC50 is reduced to 2,664 μg ml-1 and CL90 to 13,535 μg ml1 showed synergism, potentiating the insecticidal action of the same. This study concludes that A. grandis larvae are susceptible to Cry1Ia10 and Cry8 proteins and that the combination between them increa... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre