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Micropropagação de cana-de-açúcar cultivar RB966928

Franca, Mariana Almeida January 2016 (has links)
Orientador : Prof. Dr. João Carlos Bespalhok Filho / Co-orientador : Profª. Drª. Giovana Bomfim de Alcantara / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Agronomia. Defesa: Curitiba, 23/02/2016 / Inclui referências : f. 24-30-51-53-62-63 / Área de concentração: Produção vegetal / Resumo: A cana-de-açúcar foi trazida para o Brasil para quebrar o monopólio de produção de açúcar do Oriente Médio e, desde então, passou a ser uma cultura de grande importância econômica para o país. Atualmente o Brasil é o maior produtor de cana e de açúcar do mundo. Isto é devido ao somatório de variáveis favoráveis como: o clima adequado para a produção, o desenvolvimento de cultivares elite e o manejo da cultura. O desenvolvimento de cultivares de excelência é um ponto chave na produção. A cultivar RB966928 foi desenvolvida pela RIDESA e lançada no mercado em 2010. Ela possui boa brotação em cana planta e cana soca, resistência às principais doenças e excelente adaptabilidade fenotípica. O censo varietal realizado pela RIDESA em 2015 mostrou que a cultivar RB966928 foi a mais plantada nos estados de São Paulo e Mato Grosso do Sul. Aliado ao uso de boas cultivares está o uso de mudas de qualidade, que ajudam a reduzir perdas, uniformizam a plantação e elevam a fitossanidade. Neste contexto a micropropagação tem um importante papel na produção de mudas, já que é possível produzir mudas de excelência em espaço e tempo reduzidos, além de garantir um alto grau de fitossanitarismo. Desta forma é importante desenvolver e otimizar protocolos de micropropagação para a produção massal de mudas. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um protocolo de micropropagação para a cultivar de cana-de-açúcar RB966928. Para a brotação de meristemas foram testados dois tratamentos: meio de cultura MS com O mg L-1 de cinetina e O mg L-1 de BAP e meio de cultura MS com 0,1 mg L-1 de cinetina e 0,2 mg L-1 de BAP. Para a multiplicação avaliou-se as concentrações de O; 0,2; 0,5 e 1 mg L-1 de BAP em meio MS. Para a multiplicação em biorreator de imersão temporária avaliou-se as frequências de imersão de 1 vez ao dia, 4 vezes ao dia e 8 vezes ao dia e os tempos de imersão de 5, 10 e 25 minutos. Para o enraizamento utilizou-se os meios de cultura MS, MS com redução dos sais pela metade, MS com 0,5 mg L-1 de AIB e MS com 70 g L-1 de sacarose. Para a aclimatização variou-se a presença e ausência de urna cobertura com saco plástico para o crescimento das plantas e os locais de acondicionamento: sala de crescimento e casa de vegetação. Foi testado, também, a influência de concentrações de sacarose no enraizamento da cultivar RB966928 in vitro. Foram realizados cinco tratamentos com as seguintes concentrações de sacarose O; 20; 40; 60 e 80 g L-1 o A maior porcentagem de meristemas brotados foi obtida utilizando meio de cultura suplementado com citocininas. As concentrações crescentes de BAP elevaram as taxas de brotações adventícias, porém as concentrações mais altas reduziram o crescimento da parte aérea, assim a melhor dosagem para multiplicação da cultivar foi a de 0,2 mg L-1 de BAP. No biorreator a melhor frequência de imersão foi de 4 vezes ao dia e o tempo de 5 minutos de imersão. Para o enraizamento as plantas suplementadas com 70 g L-1 de sacarose apresentaram maior crescimento de raízes e na aclimatização as plantas podem ser mantidas sem a cobertura do saco plástico e em casa de vegetação sem grandes prejuízos. O aumento crescente nas concentrações de sacarose elevou o comprimento da parte aérea, raízes, número de raízes, peso seco e fresco. A concentração de 60 g L-1 de sacarose foi a que apresentou os melhores resultados. Desta forma foi possível desenvolver um protocolo de micropropagação para a cultivar de cana-de-açúcar RB966928. Palavras-chave: Saccharum spp., biorreator de imersão temporária, meristema, sacarose. / Abstract: The sugarcane was brought to Brazil to break the sugar production monopoly in lhe Middle East and since then the sugarcane has become a very important crop for the economic in the country. Currently Brazil is the largest producer of sugarcane and sugar in the world. This is due to the sum of favorable variables such as climate for the production, development of elite cultivars and crop management. The development of excellent cultivars is a key point for producing. The cultivar RB966928 was developed by RIDESA released on the market in 2010. lt has good plant cane and ratoon cane sprouting, resistance to major diseases and great phenotypic adaptability. The varietal census conducted by RIDESA in 2015 showed that RB966928 was the most planted cultivar in the states of São Paulo and Mato Grosso do Sul. Coupled with the use of good cultivars is the use of quality seedlings, which assist to reduce losses, standardize planting and increase plant health. In this context micropropagation has an important role in the production of seedlings since it is possible to produce seedlings of excellence on reduced space and time in addition to ensuring a bigh levei of plant health. Thus it is important to optimize micropropagation protocols for mass production of seedlings. The objective of tbis study was to develop a micropropagation protocol for sugarcane cultivar RB966928. For regeneration meristems two treatments were tested: culture media MS with O mg L-1 kinetin and O mg L-1 BAP and culture media MS with 0.1 mg L-1 kinetin and 0.2 mg L-1 BAP. For multiplication were tested concentrations ofO, 0.2, 0.5 e l mg L-1 BAP in culture media MS. For multiplication in temporary immersion bioreactor the following aspects were evaluated: lhe immersion of l time a day, 4 times a day or 8 times a day and dipping frequency of 5, 10 and 25 minutes. For rooting it was compared the MS culture media, MS with salts reducing by half, MS with 0.5 mg L-1 de AIB and MS with 70 g L-1 sucrose. For acclimatization it was varied the presence and absence of a plastic cover for the growth of plants and acclimatization site: growth chamber and greenhouse. It was tested also the influence of sucrose concentration in growth ofRB966928 in vitro. Five treatments were performed with the sucrose leveis of O, 20, 40, 60 and 80 g L-1 o The highest percentage of regenerated meristems was obtained using culture media supplernented with cytokinins. Increasing doses of BAP raise the adventitious shoots rates, however the higher concentrations reduced the shoot increase, thus the better dosage for multiplication of cultivar was 0.2 mg L-1 BAP. ln bioreactor the best immersion frequency was 4 times a day and immersion time of 5 minutes. For rooting plants supplernented with 70 g L-1 sucrose showed greater growth of root and acclimatization plants can keep without plastic cover and in greenhouse with no major losses. The increase in sucrose doses increased the length of shoots, roots, number of roots, dry and fresh weight.. The levei of 60 g L-1 sucrose showed the best results. Therefore was possible develop a micropropagation protocol for sugarcane cultivar RB966928. Keywords: Saccharum spp, temporary immersion bioreactor, meristem, sucrose.
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Propagação vegetativa "in vitro" de Imbuia(Ocotoa porosa Nees) e Sassafras(Ocotea odorifera Vellozo)

Vicentini,Luciene Soares 14 June 2013 (has links)
Este experimento teve como objetivo principal o estudo da propagação vegetativa de mudas de Ocotea porosa e Ocotea odorífera através da micropropagação. O isolamento e a transferência para as demais etapas in vitro foram feitas em câmara de fluxo laminar e os explantes foram mantidos em sala de incubação, com temperatura de 25±2°C, fotoperíodo de 16 horas e luminosidade de 2000 lux. 0 meio de cultura utilizado foi o de MURASHIGE e SKOOG (MS). Segmentos nodais de imbuia e sassafrás com aproximadamente 2 cm de comprimento, obtidos de mudas de 2 anos de idade foram desinfestados em soluções de hipoclorito de sódio (5% de cloro livre) cujas concentrações variaram de 5 a 15% e cultivados em meio MS. A oxidação dos explantes foi controlada utilizando-se solução de ácido ascórbico com concentrações de 0,05 e 0,1 g/l e adição de 0,01 g/l de polivinilpirrolidone ao meio de cultura. Após 4 semanas, as brotações obtidas foram transferidas para meio de multiplicação, onde foram testadas diversas concentrações de BAP e AIB e suas interações em meio MS. Para a obtenção do alongamento das brotações utilizou-se meio MS com BAP (1,62 e 3,23 uM) . Na fase de enraizamento foram testados o meio MS e o meio MS/2 (com metade da concentração de sais) com diferentes concentrações de AIB (2,46 e 4,90 uM) . O melhor tratamento para a assepsia dos explantes de imbuia (73,3% de sobrevivência) foi o que utilizou hipoclorito de sódio a 10% durante 10 minutos, para o sassafrás (72% de sobrevivência) o melhor tratamento foi o que utilizou hipoclorito de sódio 15% por 10 minutos. O controle da oxidação foi obtido utilizando-se 0,1 g/l de ácido ascórbico e adicionando-se polivinilpirrolidone ao meio de cultura para ambas as espécies. A maior taxa de multiplicação obtida para a imbuia foi com a adição de 3,23 uM de BAP e para o sassafrás com a adição de 9,69 uM de BAP. 0 melhor tratamento para o alongamento das brotações de imbuia foi o que utilizou BAP a 1,62 uM; as brotações de sassafrás não tiveram nenhum incremento em sua altura em todos os tratamentos testados. 0 meio MS/2 proporcionou maior índice de enraizamento para a Ocotea porosa, sendo a concentração de 2,46 uM de AIB em meio MS/2 o melhor tratamento, com 64% de enraizamento das brotações. A Ocotea pretiosa não formou nenhuma raiz em quaisquer tratamentos.
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Aspectos multiplos da cultura in vitro da Araucaria angustifolia (Bert) O. Ktze

Iritani, Cecília, 1942- 21 May 2013 (has links)
Visando o desenvolvimento de um protocolo para a regeneração dos genótipos superiores da Araucaria angustífolia (Bert) O. Ktze, procurou-se verificar os aspectos básicos envolvidos e o comportamento da espécie quanto à micropropagação, através do cultivo dos segmentos caulinares de mudas de 30 a 60 dias, com a obtenção de brotos axilares ortotrópicos. Dos oito a 10 meristemas axilares presentes nestes segmentos, em cultivos no meio MS/2, desenvolveram-se em média dois a três brotos, dos quais, um a dois dominantes. Das citocininas utilizadas para a obtenção de maior número de brotos, verificou-se que a espécie é sensível à zeatina, mas em combinação com o meio MCM. As gemas apicais e os brotos dominados somente cresceram no meio básico MS/2, com o acréscimo de carvão ativado (5g, lOg ou 20 gil), e ácido giberélico (2 mg/l). O enraizamento (60% a 80%) dos brotos dominantes, foi obtido mediante o tratamento indutivo prévio por seis ou 12 dias, com o ácido indol-3-butírico (6 e 12 mg/I) em meio básico simples, contendo somente 30 g/l de sacarose e 6 g/l de ágar. A emergência e o desenvolvimento das raizes ocorreram nos meios MS/2 ou M514, com duas fases: uma superior com vermiculita e 4,5 g/l de ágar, na qual foram inseridas as bases dos brotos, e a inferior com 6 g/l de ágar, sem vermiculita. Embriões maduros da espécie não mostraram competência para a organogênese, face aos tratamentos testados, mas mostraram que é possível a multiplicação do meristema apical, por meio de tratamentos citocininicos indutivos com altas concentrações e curto prazo (duas-três horas). Para se contornar a limitação da pesquisa a três-quatro meses por ano, imposta pela periodicidade da frutificação, foram testados, com sucesso, dois tipos de armazenamento a frio: o dos pinhões, a -2°C, com 80% de germinação após seis meses; das mudas de 30 a 60 dias, a 4°C, com inibição total do crescimento; também por seis meses. Verificou-se ser viável o rejuvenescimento ex vitro dos indivíduos adultos da espécie, mediante enxertias sucessivas em mudas de 4-6 cm de altura, e em condições ambientais controladas (17 °C ± 2 °C, 60 a 90% de umidade relativa). Os estudos anatômicos mostraram que a Araucária tem grande poder de regeneração, pela rapidez (15 dias) da organização dos meristemas axilares em brotos; capacidade de desdiferenciação das células parenquimáticas do córtex, para a formação do tecido pró-vascular para a conexão dos brotos e segmento caulinar de origem e formação das raizes a partir de células pró-vasculares do calo basal dos brotos. As raízes formadas provaram ser funcionais pela boa sobrevivência das mudas obtidas e transplantadas para o solo. O desenvolvimento do protocolo da multiplicação da espécie via microestacas de mudas é possível, havendo no entanto a necessidade de se ampliar os estudos relativos à obtenção de brotos multiplos a partir dos meristemas axilares do caule.
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Propagação da espécie Trichilia catigua A. Juss (Catiguá)

Valmorbida, Janice [UNESP] 21 May 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-05-21Bitstream added on 2014-06-13T20:43:33Z : No. of bitstreams: 1 valmorbida_j_dr_botfca.pdf: 653023 bytes, checksum: 354f212c2d30f294ce34c4e7b5512709 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Pertencente à família Meliaceae, a espécie Trichilia catigua A. Juss é conhecida popularmente como catigua, cataguá, argelim-rosa e mangalto-catingam. Sua casca apresenta propriedades adstringente, inseticida, purgativa, tônica, bactericida, antiinflamatória e antidepressiva. Com o objetivo de propagar a espécie T. catigua foram desenvolvidos experimentos testando o enraizamento de estacas e a micropropagação com explantes de matrizes e sementes. Os experimentos de enraizamento de estacas foram realizados na primavera 2004, verão 2004/2005, outono, inverno e primavera 2005 e primavera 2006. Em todos os experimentos, estacas com aproximadamente 15 cm de comprimento foram coletadas de árvores adultas e preparadas da parte apical e mediana dos ramos. A seguir, foram submetidas aos reguladores vegetais IBA (ácido indolbutírico), NAA (ácido naftalenoacético) e IAA (ácido 3-indolacético), variando as dosagens. Para a avaliação dos experimentos determinou-se a percentagem de estacas enraizadas, não enraizadas e mortas e quando enraizadas, seu comprimento e diâmetro. No experimento primavera de 2004 foram testadas as concentrações de 1000 e 2000 mg L-1 dos reguladores vegetais IBA, NAA e IAA. As avaliações aos 90 dias após sua instalação revelaram maiores percentagens de enraizamento e iguais a 33,33, 25,00, 22,91 e 23,43 % para estacas submetidas a IBA 1000, 2000 mg L-1 e NAA 1000 e 2000 mg L-1, respectivamente. No verão 2004/2005, outono, inverno e primavera 2005 os experimentos foram conduzidos com as concentrações dos reguladores IBA, NAA e IAA iguais a 1000, 2000 e 3000 mg L-1 e as avaliações foram realizadas após 120 dias. Não houve enraizamento no outono e inverno. A análise conjunta dos resultados obtidos na primavera e no verão mostrou percentagem de enraizamento superior na primavera. A maior percentagem de enraizamento, igual a 19,17%... / The Trichilia catigua A. Juss from the Meliaceae family is popularly known as catigua, cataguá, argelim-rose and mangalto-catingam. Its bark has astringent, insecticide, purgativa, tonic, bactericide, anti-inflammatory and antidepressant properties. With the aim of propagate T. catigua, experiments of rooting with stem cuttings and of micropropagation with explants of trees and seeds were carried out. In all the rooting experiments the stem cuttings with approximately 15 cm of length were collected from adult trees and prepared from the apical and intermediate parts. The cuttings were immersed in the vegetable regulators IBA (Indole-3- butyric acid), ANA (Naphthalene acetic acid) and IAA (Indole-3 acetic acid). The rooted stem cutting and not rooted stem cutting percentage and, when rooted, the length and diameter of roots, were evaluated. In the experiment spring 2004 the concentrations of 1000 and 2000 mg L-1 of IBA, ANA and IAA were tested, with evaluations 90 days after installation. The highest rooting percentage were 33,33, 25,00, 22,91 and 23,43% for IBA 1000, 2000 mg L-1 and ANA 1000 and 2000 mg L-1, respectively. In the summer of 2004/2005, autumn, winter and spring of 2005 IBA, ANA and AIA, with concentration of 1000, 2000 and 3000 mg L-1, were tested. The evaluation was carried out at 120 days. No rooting was observed in autumn and winter. The analysis of data from summer and spring showed higher rooting percentage in spring. The highest rooting percentage was obtained with IBA 3000 mg L-1 (19,17%). In the spring 2006 IBA (1000, 2000, 3000, 4000 and 5000 mg L-1) and ANA (1000, 2000, 3000 mg L-1) were tested. The highest rooting percentage (41,67%) was obtained with IBA 5000 mg L-1. In the in vitro cultivation, explantes obtained from trees were submitted to asepsis treatments with HgCl2, CaOCl2 and NaOCl and inoculated in Murashige & Skoog culture medium (MS) with 25%... (Complete abstract click electronic access below)
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Propagação da espécie Trichilia catigua A. Juss (Catiguá) /

Valmorbida, Janice, 1968- January 2007 (has links)
Orientador: Carmen Silvia Fernandes Boaro / Banca: João Domingos Rodrigues / Banca: Giuseppina Pace P. Lima / Banca: Marcos Roberto Furlan / Banca: Antonio Natal Gonçalves / Resumo: Pertencente à família Meliaceae, a espécie Trichilia catigua A. Juss é conhecida popularmente como catigua, cataguá, argelim-rosa e mangalto-catingam. Sua casca apresenta propriedades adstringente, inseticida, purgativa, tônica, bactericida, antiinflamatória e antidepressiva. Com o objetivo de propagar a espécie T. catigua foram desenvolvidos experimentos testando o enraizamento de estacas e a micropropagação com explantes de matrizes e sementes. Os experimentos de enraizamento de estacas foram realizados na primavera 2004, verão 2004/2005, outono, inverno e primavera 2005 e primavera 2006. Em todos os experimentos, estacas com aproximadamente 15 cm de comprimento foram coletadas de árvores adultas e preparadas da parte apical e mediana dos ramos. A seguir, foram submetidas aos reguladores vegetais IBA (ácido indolbutírico), NAA (ácido naftalenoacético) e IAA (ácido 3-indolacético), variando as dosagens. Para a avaliação dos experimentos determinou-se a percentagem de estacas enraizadas, não enraizadas e mortas e quando enraizadas, seu comprimento e diâmetro. No experimento primavera de 2004 foram testadas as concentrações de 1000 e 2000 mg L-1 dos reguladores vegetais IBA, NAA e IAA. As avaliações aos 90 dias após sua instalação revelaram maiores percentagens de enraizamento e iguais a 33,33, 25,00, 22,91 e 23,43 % para estacas submetidas a IBA 1000, 2000 mg L-1 e NAA 1000 e 2000 mg L-1, respectivamente. No verão 2004/2005, outono, inverno e primavera 2005 os experimentos foram conduzidos com as concentrações dos reguladores IBA, NAA e IAA iguais a 1000, 2000 e 3000 mg L-1 e as avaliações foram realizadas após 120 dias. Não houve enraizamento no outono e inverno. A análise conjunta dos resultados obtidos na primavera e no verão mostrou percentagem de enraizamento superior na primavera. A maior percentagem de enraizamento, igual a 19,17%... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Trichilia catigua A. Juss from the Meliaceae family is popularly known as catigua, cataguá, argelim-rose and mangalto-catingam. Its bark has astringent, insecticide, purgativa, tonic, bactericide, anti-inflammatory and antidepressant properties. With the aim of propagate T. catigua, experiments of rooting with stem cuttings and of micropropagation with explants of trees and seeds were carried out. In all the rooting experiments the stem cuttings with approximately 15 cm of length were collected from adult trees and prepared from the apical and intermediate parts. The cuttings were immersed in the vegetable regulators IBA (Indole-3- butyric acid), ANA (Naphthalene acetic acid) and IAA (Indole-3 acetic acid). The rooted stem cutting and not rooted stem cutting percentage and, when rooted, the length and diameter of roots, were evaluated. In the experiment spring 2004 the concentrations of 1000 and 2000 mg L-1 of IBA, ANA and IAA were tested, with evaluations 90 days after installation. The highest rooting percentage were 33,33, 25,00, 22,91 and 23,43% for IBA 1000, 2000 mg L-1 and ANA 1000 and 2000 mg L-1, respectively. In the summer of 2004/2005, autumn, winter and spring of 2005 IBA, ANA and AIA, with concentration of 1000, 2000 and 3000 mg L-1, were tested. The evaluation was carried out at 120 days. No rooting was observed in autumn and winter. The analysis of data from summer and spring showed higher rooting percentage in spring. The highest rooting percentage was obtained with IBA 3000 mg L-1 (19,17%). In the spring 2006 IBA (1000, 2000, 3000, 4000 and 5000 mg L-1) and ANA (1000, 2000, 3000 mg L-1) were tested. The highest rooting percentage (41,67%) was obtained with IBA 5000 mg L-1. In the in vitro cultivation, explantes obtained from trees were submitted to asepsis treatments with HgCl2, CaOCl2 and NaOCl and inoculated in Murashige & Skoog culture medium (MS) with 25%... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Efeito de varias fontes de nitrogenio na multiplicacao in vitro de clones de eucalyptus grandis hill ex maiden / Effect of different sources of nitrogen in the "in vitro" multiplication of clones of Eucalyptus grandis Hill ex Maiden

Grothge, Maria Therese 16 September 1992 (has links)
O objetivo do experimento foi estudar o efeito de várias fontes de nitrogênio na multiplicação e desenvolvimento dos clones de Eucalyptus grandis Hill ex Maiden GO269, GO694 e GO246, os quais vinham sendo mantidos ”in vitro” por cerca de 2 anos em meio contendo a proporção 3 : 1 de NOa- / NH4+, outros sais, vitaminas e adição 0,2mg/l de BA (benziladenina). Os tratamentos realizados constituíram alteração na fonte de nitrogênio e não na quantidade deste, com exceção dos tratamentos com aminoácidos onde adicionou-se 60 mg/l Glu; 30 mg/l Cys; 60mg/l Glu + 30mg/l Cys ao meio MG2. Como outras formas de nitrogênio utilizou-se uréia (100 mg/l; 200 mg/l e 300 mg/l), cloreto de amônio (800 mg/l, 1000 mg/l, 1200 mg/l) havendo sempre um balanceamento das formas iônicas, mantendo-se o teor total de nitrogênio. Os resultados mostraram que o meio MG2 pode ser melhorado com adição de uréia (300mg/l) onde ocorreu maior alongamento dos clones (principalmente GO694) e enraizamento dos clone GO269. Os tratamentos com cloreto de amônio não tiveram um efeito positivo, na multiplicação de gemas, enquanto que a adição de aminoácidos provocaram uma melhoria nesta, especialmente para p clone GO269. Quando foi adicionada somente Cys ao meio MG2, os resultados foram negativos em relação a todos os parâmetros fisiológicos analisados / The objective of this experiment was o study the influence of different sources of nitrogen in the multiplication and development of clones of EucaLyptus grandis. Hill ex Maiden GO269, GO694 and GO246 which were maintaned ”in vitro" for 2 years in medium containing 3: 1 NO3 / NH4+ ratio, other salts, vitamins and the addition of 0.2 mg/l of BA. The treatments were an alteration in the source of nitrogen and not in its quantity, with the except of the treatments in which the following amino acids were added to MG2 medium: Glu (60 mg/l); Cys (30 mg/l); Glu (60 mg/l) + Cys (30 mg/l) (no alteration in the salts was made). Other forms of nitrogen were utilized such as: urea (100 mg/l, 200 mg/l and 300 mg/l) and ammonium chloride (800 mg/l; 1000 mg/l and 1200 mg/l) , with adjustment in the total content of the nitrogen salts. The results showed that the MG2 medium can be improved with the addition of urea (specially 300 mg/l) in terms of shoot ellongation (mainly in the clone G0694) and rooting of clone G0269. The treatments with ammonium chloride did not show a positive effect shoot multiplication, whereas the addition of amino promoted an improvement specially in the clone GO269. Addition of Cys as nitrogen was negative relative to all physiological parameters analysed
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Embriogênese somática do mamoeiro hermafrodita UENF/CALIMAN 01

GOUVEA, D. S. 28 June 2016 (has links)
Made available in DSpace on 2018-08-01T23:26:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10243_66-Drielly Stephania Gouvea.pdf: 1399699 bytes, checksum: e6b26f6146f35ffd98e203f6bc0a8018 (MD5) Previous issue date: 2016-06-28 / A embriogênese somática é o processo de desenvolvimento de embriões a partir de células somáticas. Objetivou-se com este trabalho analisar a eficiência de reguladores de crescimento nas diferentes fases da embriogênese somática indireta a partir de plantas in vitro do mamoeiro hermafrodita hibrido UENF/Caliman 01. Discos foliares destas brotações foram inoculadas em meio de indução (MI): meio MS (Murashige; Skoog, 1962), com concentração total de sais, e suplementado com auxinas, ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D)(6; 9; 12; 15 e 18 μM) e ácido 4- clorofenoxiacético (4-CPA)(19; 22; 25; 28 e 31 μM). Os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente casualizados (DIC), com cinco repetições, e cinco explantes por repetição. Os dados foram submetidos à análise de variância pelo teste F e as médias comparadas pelo teste de Skott-Knott em nível de 5% de significância. Ao transcorrer, 90 dias da indução, visualizou-se a formação de alguns embriões somáticos nos calos friáveis formados. As concentrações da auxina 2,4-D, foram inibitórias, ocorrendo somente a formação de calos de coloração marromclara, os quais tiveram resultados inferior a 20% na formação de embriões somáticos, enquanto a suplementação com 4-CPA resultou em 96% de calos embriogênicos para a concentração de 25 μM. Os calos embriogênicos, foram ix transferidos para o meio de maturação (MM): MS sem regulador de crescimento; ABA ácido abiscísico (0,5 μM); ABA (0,5 μM) + CA carvão ativo (15 g L-1); ABA (0,5 μM) + CA (30 g L-1); ABA (0,5 μM) + PEG polietilenoglicol (60 g L-1) durante 30 dias. Foram observadas diferenças significativas entre os meios de maturação testados, uma reação positiva em relação a quantidade de embriões desenvolvidos e os efeitos de cada tratamento. O meio de maturação constituído de ABA 0,5 μM + CA 30 g L-1 foi o mais eficiente no desenvolvimento de embriõessomáticos cotiledonares. Estes embriões cotiledonares maduros, foram inoculados em meio de germinação (MG): MS sem regulador de crescimento; GA3 (0,5 mg L-1); GA3 (1,0 mg L-1) e GA3 (1,5 mg L-1).
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Desenvolvimento de protocolos para propagação in vitro de três espécies de bromeliaceae nativas do Brasil / Development of protocols for in vitro propagation of three species of bromeliaceae native from Brazil

Figueiredo, Maria de Lourdes 23 August 2003 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-05-09T13:12:43Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 473798 bytes, checksum: 36309cb46ce305a2a74b1c1b0f6ef96d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-09T13:12:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 473798 bytes, checksum: 36309cb46ce305a2a74b1c1b0f6ef96d (MD5) Previous issue date: 2003-08-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A destruição dos ambientes naturais das bromeliáceas, aliada à coleta indiscriminada, tem levado muitas espécies nativas à extinção. No Estado de Minas Gerais já se encontram listadas 48 espécies ameaçadas. Diante disso foram selecionas três espécies nativas deste Estado (Acanthostachys strobilacea, Aechmea bambusoides e Quesnelia quesneliana) para o desenvolvimento de protocolos de propagação in vitro. No laboratório, as sementes passaram por um processo de desinfestação e foram estabelecidas in vitro. Na fase de multiplicação in vitro, para cada espécie foi feito um experimento, testando-se cinco concentrações de BAP (0, 10, 20, 40 e 80 μM) e duas concentrações dos sais minerais de MS (50% e 100%). Avaliou-se o número de brotações formadas, a altura média das brotações e a presença de raízes nas brotações. Em seguida, as brotações foram transferidas para meio de alongamento e enraizamento. Na fase de aclimatização, as plântulas foram submetidas a experimentos distintos. No caso de A. strobilacea as plântulas tiveram as raízes removidas e foram separadas em três grupos: 1 (10 a 20 mm), 2 (30 a 40 mm) e 3 (50 a 60 mm). As plântulas de A. bambusoides foram separadas em dois grupos: 1 (20 a 40 mm) e 2 (acima de 4,1 a 60 mm). Testou-se como substrato xaxim (Dicksonia sellowiana) e aguapé (Eichhornia crassipes) nessas duas espécies. Para Q. quesneliana, selecionadas com 20 a 30 mm de altura, testou-se xaxim, aguapé e a mistura destes (1:1). Verificou-se que o tratamento de desinfestação das sementes propiciou percentagem de contaminação menor que 1%, para as três espécies. O número de brotações formadas, na etapa de multiplicação, foi maior na concentração estimada de 26,8 μM de BAP para A. strobilacea; 26,11 μM para A. bambusoides e 22,15 μM para Q. quesneliana. No entanto, a altura média das brotações diminuiu com o aumento da concentração de BAP. A formação de raízes só foi observada na ausência de BAP, para todas as espécies estudadas. O meio MS com a metade da concentração dos sais foi eficiente na multiplicação, no alongamento e no enraizamento de A. strobilacea e Q. quesneliana. Para A. bambusoides melhores resultados foram conseguidos com o meio MS não modificado. O aguapé pode ser utilizado como substrato para aclimatização das três espécies, sendo que, para Q. quesneliana, o aguapé deve ser misturado com areia na proporção 1:1. / The destruction of the habitats of the bromeliaceae, together with the indiscriminate gathering, has threatened many native species to extinction level. Today In the state of Minas Gerais 48 species are listed as endangered. Considering this, three species (Acanthostachys strobilacea, Aechmea bambusoides and Quesnelia quesneliana) native to this state were selected for the establishment of in vitro propagation protocols. In the laboratory, the seeds underwent a disinfestation process and were established in vitro. In the in vitro multiplication phase an experiment was carried out with each one of the selected species for testing five BAP concentrations (0, 10, 20, 40 e 80 μM) and two concentrations of mineral salts in the MS culture medium (50% e 100%). Evaluations were made through the produced axillary shoots, considering their number, mean height and rooting. After these evaluations, the shoots were transferred to the elongation and rooting medium. In the acclimatization phase the plantlets underwent different experiments. In the case of A. strobilacea the plantlets had their roots removed, then separated in three groups: 1 (10 to 20 mm), 2 (30 to 40 mm) and 3 (50 to 60 mm). The plantlets of A. bambusoides were separated in two groups: 1 (20 to 40 mm) and 2 (41 to 60 mm). These two species were tested on two substrates: xaxim (Dicksonia sellowiana) and water- hyacinth (Eichhornia crassipes). For the experiment with Q. quesneliana, the plantlets utilized had 20 to 30 mm of height and the substrates tested were xaxim, water-hyacinth and a mix of these (1:1). It was verified that the disinfestation treatment of the seeds provided contamination less than 1%, in all species. The numbers of axillary shoots produced in the multiplication phase were greater in the estimated concentrations of BAP: 26,8 μM in A. strobilacea; 26,11 μM in A. bambusoides and 22,15 μM in Q. quesneliana. However, the mean height of axillary shoots decreased with increasing BAP concentration. In all species rooting occurred only in the absence of BAP. The MS medium with half of the salt concentrations was efficient in the multiplication, elongations and rooting of A. strobilacea and Q. quesneliana. For A. bambusoides the best results were obtained with the unmodified MS medium. The water-hyacinth may be utilized as substrate in the acclimatization of the three species, but in the case of Q. quesneliana this substrate must be mixed with sand in an 1:1 proportion.
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Propagação, tuberização in vitro e produção de 20-hidroxiecdisona em acessos de Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen sob cultivo em fonte de carbono e fitorreguladores / Propagation and in vitro tuberization and production of 20- hydroxyecdysone in Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen accessions under cultivation on carbon source and growth regulators

Vasconcelos, Jaqueline Martins 08 March 2012 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-05-18T16:45:23Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1608119 bytes, checksum: 4bfe7cf50a62d7c65e4e1a64b88c1ac7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-18T16:45:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1608119 bytes, checksum: 4bfe7cf50a62d7c65e4e1a64b88c1ac7 (MD5) Previous issue date: 2012-03-08 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Plantas do gênero Pfaffia estão entre as principais espécies medicinais comercializadas no Brasil, sendo suas propriedades medicinais atribuídas a substâncias presentes nas raízes. É grande a necessidade o desenvolvimento de protocolos que viabilizem a propagação em larga escala dessa espécie para garantia de suprimento de material propagativo, em qualidade e quantidade. Sendo assim, esse trabalho objetivou o desenvolvimento de protocolos para a produção rápida e em larga escala da espécie e promover a tuberização das raízes de plantas cultivadas in vitro, uma vez que esse é o principal órgão comercializado. Para a promoção de multibrotações axilares in vitro, segmentos nodais dos acessos 04 e 13 foram inoculados em frascos com meio MS acrescido com 0,5 mg L -1 de BA + ANA, em diferentes fontes de carbono (0,1M, 0,2 M ou 0,3 M de glicose ou sacarose), por 30 dias de cultivo. Foi avaliado o número de brotos produzidos, sendo observado a formação e coloração dos calos. Para viabilização da produção in vitro de 20-E, segmentos nodais dos acessos 4 e 13 foram inoculados em recipientes tipo Magentas ® contendo meio MS com diferentes fontes de carbono (glicose a 0,1 M e 0,2 M; sacarose a 0,1 M ou 0,2 M; a combinação de sacarose + glicose 0,1 M ou 0,2 M) e sem fonte de carbono (controle), e ensacados em saco plástico com filtro bacteriológico, por 30 dias de cultivo. Foram avaliados o comprimento médio das plantas, a massa seca da parte aérea e raízes, verificando-se a porcentagem de 20-E na massa seca de folhas e raízes nos diferentes tratamentos e realizou-se analise mocromorfometrica das folhas. Para promoção da tuberização in vitro, segmentos nodais dos acessos 22 e 43 foram inoculados em frascos de vidro contendo meio MS acrescido com diferentes combinação de regulador de crescimento (0,5 mg.L -1 de BA; 0,5 BA + AIB; 0,5 BA + 1,0 DE AIB; 0,5 AIB) e sem regulador de crescimento (controle) por 10 dias. Após, os explantes foram transferidos para frascos contendo 0,2 M de sacarose por 30 dias de cultivo. Foram avaliados a porcentagem de cobertura do fundo do frasco por raízes, massa seca da parte aérea e raízes. No experimento de multibrotações, foi observada a formação de calos na base dos explantes em todos os tratamentos, sendo a coloração dos calos do acesso 13 variando de branco a verde claro e dos brotos de verde claro a róseo. No acesso 4, a coloração dos calos variou de branco a verde escuro arroxeado. A característica de formação de multibrotações se mostrou genótipo-dependente, sendo o acesso 04 superior ao acesso 13 quando cultivado em glicose ou sacarose a 0,1 M (35 e 43 brotos/explantes). Para o teor de 20-E também foram observados efeitos significativos entre os acessos e as fontes de carbono, sendo do acesso 13 as maiores médias tanto para raízes quanto folhas (1,02 e 1,07%). As maiores médias para o comprimento da planta, massa seca das raízes e parte aérea foi observada para o acesso 13. Na análise micromorfométrica das folhas em ambas as faces, o número de células epidérmicas, estômatos, e densidade estomática foram superiores no acesso 13 em relação ao acesso 04. O protocolo proposto para indução de raízes tuberiformes foi ineficaz, entretanto, plantas do acesso 43 apresentaram maior massa seca da parte aérea em relação ao acesso 22 e sendo dos tratamentos com 0,5 mg.L -1 de BA as maiores médias para massa seca da parte aérea e raízes. Não houve efeito significativo nos acessos e reguladores de crescimento para porcentagem de enraizamento e dos acessos para massa seca das raízes. Em conformidade com os resultados, esses servirão para auxilio de pesquisas futuras sobre Pfaffia glomerata. / Plants of the genus Pfaffia are among the most traded medicinal species in Brazil whose medicinal properties are attributed to substances present in the roots. There is a great need for developing protocols to enable the large-scale propagation of this species and assure supply of large amounts of high quality propagation material. Thus, this study aimed to develop protocols for the rapid and large scale production of Pfaffia species and promote root tuberization of plants grown in vitro, since this is the main traded part. For in vitro axillary bud proliferation, nodal segments of the accessions 4 and 13 were inoculated in Magenta ® boxes containing MS medium supplemented with 0.5 mg L -1 BA + NAA, in different carbon sources (0.1 M, 0.2 M or 0.3 M of glucose or sucrose), for 30 days in culture. The number of shoots produced was recorded and the formation and color of calli were evaluated. To promote in vitro production of 20-E, nodal segments of accessions 4 and 13 were inoculated into Magenta ® boxes containing MS medium with different carbon sources (0.1 M and 0.2 M glucose; 0.1 M or 0.2 M sucrose; and the combination of sucrose + 0.1 M or 0.2 M glucose) and a control without carbon source, and bagged in plastic bags with bacteriological filter, for 30 days of culture. The mean length of plants, dry mass of shoots and roots, the percentage of 20-E in the dry mass of leaves and roots of the different treatments were evaluated and the micro-morphometric analysis of leaves was performed. To promote the tuberization in vitro of roots, nodal segments of accessions 22 and 43 access were inoculated in glass jars containing MS medium supplemented with different combinations of growth regulators (0.5 mg l -1 BA; 0.5 BA + AIB; 0.5 BA + 1.0 AIB; 0.5 AIB) and without growth regulators (control), for 10 days. The explants were then transferred to jars containing 0.2 M sucrose for 30 days of culture. The percentage of the bottom of the jar that was covered by roots, the dry mass of shoots and dry mass of roots were evaluated. In the experiment of axillary bud proliferation, there was formation of callus at the base of the explants in all treatments, and the color of the calli of accession 13 ranged from white to light green and the color of shoots from light green to pinkish. For accession 4, the color of the calli varied from white to dark green and purple. The characteristic axillary bud proliferation proved genotype-dependent: accession 4 was superior to accession 13 when grown on glucose or sucrose 0.1 M (35 and 43 shoots/explant). The content of E-20 also showed significant effects between the accessions and the carbon sources: accession 13 showed the highest means for both roots and leaves (1.02 and 1.07%). The highest means for plant height, dry mass of roots and shoots were recorded for accession 13. In the micromorphometric analysis of both sides of the leaves, the number of epidermal cells, stomata, and stomatal density were higher in the accession 13 compared with the accession 04. The protocol proposed for tuber induction was ineffective, however, plants of accession 43 had higher shoot dry mass in relation to accession 22. The treatments with 0.5 mg.L -1 BA provided the highest means for dry mass of shoots and roots. There was neither significant effect of accession and growth regulator on percentage of rooting nor effect of accession on root dry mass. The results of this study will serve to guide future research on Pfaffia glomerata. / Dissertação antiga
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ESTABELECIMENTO E MULTIPLICAÇÃO IN VITRO DE SAPUCAIA (Lecythis pisonis CAMBESS)

MELLO, T. 27 February 2018 (has links)
Made available in DSpace on 2018-08-01T22:35:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_11762_Dissertação TAMYRIS 2018-Final.pdf: 2531811 bytes, checksum: 9b3378aa9b2594a37ce5303345588421 (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 / A espécie Lecythis pisonis Cambess, conhecida popularmente como sapucaia, apresenta grande potencial para uso ornamental, produção de castanhas e madeira, sendo indicada para reflorestamento por ser uma espécie clímax e por atrair a fauna. Porém, apresenta baixa produção de frutos, e dificuldade na obtenção e germinação das sementes, limitando a propagação seminífera da espécie. Assim, a propagação vegetativa in vitro se apresenta como uma técnica a ser testada, visto que ela possibilita plantas livre de patógenos. Portanto, o objetivo deste estudo foi propagar in vitro segmentos caulinares de L. pisonis. O estudo foi dividido em quatro partes: i) minijardim seminal; ii) desinfestação dos segmentos caulinares; iii) indução de brotações in vitro; e iv) enraizamento in vitro. Para a montagem do minijardim seminal, as mudas com dois anos de idade foram transplantadas para vasos e feito o processo de revigoramento. Foram realizadas coletas mensais e contabilizada a produtividade das minicepas. No desenvolvimento do protocolo de desinfestação foram feitos três experimentos, onde foram testadas diferentes concentrações e tempo de exposição ao hipoclorito de sódio (NaOCl), e diferentes concentrações e método de aplicação de amoxicilina®. No processo de indução de brotações foram montados dois experimentos, testando diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP), cinetina (CIN) e os meios de cultura WPM e MS. Para o enraizamento, foram analisadas diferentes concentrações de ácido indol-3-butírico (AIB) com diferentes tempos de exposição a um estresse térmico de 40 °C. Todos os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizados, foi realizada a análise de variância e a análise estatística pertinente a cada caso. Com os resultados obtidos do minijardim, foi possível identificar que os meses mais quentes do ano, principalmente dezembro, foram os de maior produtividade média das minicepas, com uma correlação positiva da produtividade com a temperatura mensal média da região. Para a desinfestação do material vegetativo, os melhores resultados foram a imersão dos explantes em NaOCl a 3% e em amoxicilina® a 3000 mg L-1, por 20 minutos cada. Quanto a indução de brotações, o meio de cultura MS suplementado com BAP (0,25 mg L-1) diferenciaram dos demais, obtendo as melhores médias nas características avaliadas. E o enraizamento ocorre com AIB (1 mg L-1), não sendo necessário adotar estresse térmico. A propagação in vitro de sapucaia é possível com as técnicas utilizadas nesse trabalho. Porém, necessita de mais estudos e aprimoramento das técnicas na espécie para produção de mudas em larga escala, além de estudos quanto a aclimatação das plântulas. Palavras-chave: sapucaia, cultivo in vitro, micropropagação, desinfestação, minijardim seminal, regulador de crescimento.

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