Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / El objetivo de este trabajo fue demostrar que la glutatión transferasa M2-2 humana (GST M2-2), protege a los astrocitos de los efectos tóxicos del aminocromo, ya que en estudios in vitro utilizando la enzima recombinante, se demostró que esta enzima conjuga aminocromo con glutation reducido (GSH), formando un metabolito resistente a agentes oxidativos biológicos, bloqueando de esta forma los efectos neurotoxicos generados por aminocromo. GST M2-2 está presente en la sustancia nigra y en astrocitos. Para demostrar la función protectora de esta enzima, se infectó la línea celular de astrocitos humanos U373MG con retrovirus (Gammaretroviridae), los cuales llevan en su genoma un plasmidio con los RNA interferentes (siRNA), necesarios para generar una disminución total o parcial de la expresión de esta enzima. Se utilizaron tres siRNA, los cuales van dirigidos a distintas zonas del RNAm, con el fin de producir secuencias erróneas que impidan la síntesis de la proteína funcional. De los tres interferentes utilizados, todos ellos generaron una disminución de la expresión de la enzima GST M2-2 en diferente magnitud, uno de ellos, el denominado arbitrariamente siGST 6, logró una disminución de la expresión de la enzima de un 82%, siendo éste el mayor nivel alcanzado. Para los ensayos de toxicidad se sintetizó y purificó aminocromo y se agregó a la línea celular de astrocitos humanos U373MG. Se realizó una curva de toxicidad utilizando diferentes concentraciones de aminocromo, (0, 50, 100, 200, 300 y 500 uM) y se evaluó su toxicidad tanto en la línea celular U373MG wild type como en la línea celular U373MG infectada con los distintos interferentes. Los resultados sugieren que la línea celular U373MG wild type es más resistente a los efectos tóxicos generados por aminocromo, debido principalmente a la presencia de la enzima GST M2-2. En aquellas células infectadas con los interferentes se produjo una mayor mortalidad, directamente proporcional al grado de inhibición de la enzima GST M2-2, lo que demuestra y comprueba que esta enzima conjuga aminocromo y bloquea los efectos tóxicos de este / Proyecto FONDECYT 1061083 y Beca Fogarty Internacional Research Collaboration Award (FIRCA), RCA R03 TW07044-1

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / El documento digital no refiere un asesor / Estudia los efectos perjudiciales que tienen el TiO2, SiO2 y ZnO a nivel celular (citotoxicidad) como a nivel de DNA (genotoxicidad) y de expresión de genes estratégicos de proliferación y maduración celular, empleado como modelo la médula ósea roja del ratón albino Mus musculus. Para tal fin se evalúa 90 ratones a los cuales se inocula vía intraperitoneal (IP) nanoparticulados de cada óxido dispersado en agua ultrapura en dosis aproximadas de ZnO (0,5 ; 1,0; 2,5; 5,0 y 10 μg/kg); TiO2 (5 ; 10; 15; 20 y 25 μg/kg), y SiO2 (0,5; 1,0; 2,5; 5,0 y 10 μg/kg). / Innóvate Perú / Tesis

Determina los niveles de genotoxicidad generados por la hiperglicemia aguda y la hiperglicemia crónica en pacientes con diabetes mellitus tipo 2. Estuvo conformado por 50 individuos que padecían de diabetes mellitus tipo 2 y por 24 controles sanos, de ambos sexos, todos comprendidos entre los 45 y 74 años de edad y agrupados en tres grupos con intervalos de 10 años cada uno. Se tomó muestras de mucosa bucal a cada paciente y mediante el ensayo de micronúcleos se evaluó la genotoxicidad. Los niveles de genotoxicidad se evaluaron por medio de los intervalos generados por la frecuencia de micronúcleos. Estos resultados fueron correlacionados con la hiperglicemia aguda, la hiperglicemia crónica, así como por la edad y el sexo. El número de micronúcleos presentó una media de 7,5200 ± 0,71385 MN y los controles 1,3750 ± 0,87539 MN. La genotoxicidad fue cinco veces mayor en los pacientes con diabetes mellitus tipo 2 en comparación con el grupo control sano. Asimismo, nuestros resultados mostraron una relación significativa, entre los niveles de genotoxicidad y la hiperglicemia aguda (p <0.05) lo que generó niveles medios y altos de genotoxicidad; a su vez se mostró una relación altamente significativa, entre los niveles de genotoxicidad y la hiperglicemia crónica (p <0.001), generándose todos los niveles de genotoxicidad. Por otro lado, la edad y el sexo, no tuvieron relación con los niveles de genotoxicidad. Por lo tanto, consideramos que, la hiperglicemia aguda condiciona niveles medios y altos de genotoxicidad a valores superiores de 140 mg/dl y que la hiperglicemia crónica condiciona todos los niveles de genotoxicidad a valores iguales o mayores a 7% de HbA1c, lo cual podría producir daño severo en el ADN y por tanto riesgo a padecer cualquier tipo de cáncer. A mayor valor de la hiperglicemia aguda y crónica más altos serán los niveles de genotoxicidad generados en el paciente con diabetes mellitus tipo 2. / Tesis

Determina la dosis letal media (DL50) y el tiempo letal medio (TL50) que tienen dos extractos etanólicos; Lantana camara y Tagetes minuta sobre la plaga Spodoptera frugiperda procedente de Trujillo, La Libertad. El ensayo consistió en dos partes. La primera, en la que se llevó a cabo el tamizaje fitoquímico de Lantana camara y Tagetes minuta. Y la segunda parte, la inmersión de hojas de Zea mays en extracto etanólico seco de Lantana camara (4 000 ppm, 6 000 ppm, 8 000 ppm, 10 000 ppm y 12 000 ppm), y en extracto etanólico seco de Tagetes minuta (700 ppm, 800 ppm, 850 ppm, 900 ppm y 950 ppm) y en el testigo (Metomyl –9 mg/mL) para luego ser acondicionadas en placas petri junto con la Spodoptera frugiperda larvas de segundo estadio y determinar la mortalidad en el tiempo (1, 4, 12, 24 y 48 horas). Resultó que a una dosis de 7.800 x 10-4 mg/kg a las 12 horas se visualizó la muerte del 50 % de la muestra para Tagetes minuta, y a una dosis de 9.75 x 10-3 mg/kg a las 12 horas se visualizó la muerte del 50 % de la muestra para Lantana camara. Luego de analizar los resultados y realizar el análisis PROBIT se concluyó que Lantana camara presentó una DL50 de 9.533 x 10-3 mg/kg a las 12 horas mientras que para Tagetes minuta se obtuvo una DL50 de 7.387 x 10-4 a las 12 horas. / Tesis

Los objetivos del presente trabajo han sido: 1.- Desarrollar una matriz biopolimérica mediante métodos de gelificación con capacidad de almacenar enrofloxacina. 2.- Realizar ensayos de encapsulación en distintas condiciones experimentales (Ej. pH, temperatura). 3.- Estudiar los perfiles de liberación de la droga a partir de la formulación matricial elegida en condiciones de simulación gastrointestinal, a saber: pHs 1.2 y 7.4; Temperatura 37ºC en ambos pHs. La finalidad de este trabajo es poder reducir los efectos secundarios y los niveles de toxicidad de la enrofloxacina mediante un sistema efectivo de liberación controlada de la droga basado en biopolímeros inteligentes y mediante la aplicación de un mecanismo de autoensamblado.

Evalúa las actividades antimicrobiana, antioxidante y citotoxicidad de los extractos etanólico y acuoso de Tagetes multiflora Kunth. La actividad antimicrobiana se evalúa mediante el método de difusión de pozo en agar frente a Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 8739, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Bacillus subtilis ATCC 6633, Candida albicans ATCC 14053 y Aspergillus niger ATCC 16404. La actividad antioxidante se evalúa por el método de DPPH y la actividad citotóxica se evalúa mediante el bioensayo de citotoxicidad en Artemia salina (CYTED). En el extracto etanólico presenta formación de halos frente a las cepas Escherichia coli (11,33 mm + 0,58), Pseudomonas aeruginosa (13 mm + 1,0) y Staphyloccocus aureus (15,67 mm + 1,15); y el extracto acuoso frente a la cepa Aspergillus niger (13,67 mm + 0,58). El extracto etanólico presenta un IC50 de 60,93 μg/mL + 0,40; y el extracto acuoso 40,42 μg/mL + 0,24. El extracto etanólico presenta un CL50 de 35,568 μg/mL y el extracto acuoso 386,048 μg/mL. El extracto etanólico presenta actividad antimicrobiana (frente a Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y Staphyloccocus aureus), actividad antioxidante y alta actividad citotóxica; mientras que el extracto acuoso presenta actividad antimicrobiana (frente a Aspergillus niger), actividad antioxidante y moderada actividad citotóxica. / Tesis

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / El cobre es un elemento traza esencial, necesario e indispensable para numerosos e importantes procesos vitales, como metabolismo energético, modulación de la respuesta inmune y neurotransmisión, entre muchos otros. El cobre, juega un importante rol como cofactor enzimático de distintas proteínas de gran importancia biológica como la citocromo c oxidasa, implicada en el transporte de electrones en la mitocondria; superóxido dismutasa, partícipe en la protección contra los radicales libres; ceruloplasmina, comprometida en el metabolismo de hierro; dopamina β-hidroxilasa, responsable de la síntesis de catecolaminas; etcétera. A pesar de la esencialidad del cobre cuando está presente en concentraciones fisiológicas, también puede ser perjudicial si se ingiere en exceso ya sea en forma aguda o crónica. Esta última, lleva a la acumulación de cobre principalmente en el hígado, pudiendo afectar también otros órganos como riñón y cerebro. La acumulación gradual de cobre en el hígado, puede producir un daño hepático irreversible y en casos extremos la muerte. Desgraciadamente, no existen biomarcadores capaces de revelar efectos tempranos derivados de la acumulación de cobre en el organismo, esto permite que la toxicidad por ingesta crónica de cantidades elevadas de cobre se desarrolle hasta la manifestación de síntomas clínicamente apreciables, los cuales generalmente tienen aparición tardía y representan la exteriorización del daño hepático. Debido a esta dualidad de efecto, que posee el cobre, se hace necesaria la búsqueda de marcadores sanguíneos (poco invasivos) que den cuenta del exceso temprano de este mineral e identifiquen a los individuos en riesgo de desarrollar, en un futuro, un evento tóxico. De este modo la compleja tarea en la cual se enfoca el presente trabajo, es la búsqueda de un posible biomarcador del exceso de cobre. Para ello nos propusimos analizar el efecto de la suplementación con cobre, sobre la actividad y masa de ceruloplasmina plasmática en un modelo animal de primates Cebus apella. Lamentablemente, los resultados sugieren que la actividad y masa de ceruloplasmina no son buenos indicadores de la acumulación de cobre en este modelo animal, sin embargo, no se descarta la posibilidad de utilizar concentraciones de cobre en pelo como posible biomarcador de exposición crónica a altas concentraciones de cobre, para lo cual se requieren estudios posteriores que avalen esta hipótesis / Copper is an essential trace element, necessary and indispensable for many important life processes, such as energy metabolism, modulation of the immune response and neurotransmission, among many others. Copper also plays an important role as an enzymatic cofactor of different proteins of great biological significance as cytochrome c oxidase, involved in the electron transport in mitochondria, superoxide dismutase, which participates protecting against free radicals; ceruloplasmin in the iron metabolism; dopamine β-hydroxylase, responsible for the synthesis of catecholamines, and so on. Despite its essentiality copper can also be harmful if is ingested in excess, either in an acute or chronic manner. The latter leads to the accumulation of copper mainly in the liver and can also affect other organs such as kidneys and brain. The gradual accumulation of copper in the liver, can produce irreversible liver damage and in extreme cases, death. Unfortunately, there are no biomarkers able to reveal early effects arising from the accumulation of copper in the body; this allows that chronic toxicity derived from ingestion of large amounts of copper is not apparent or detectable until clinically significant manifestation of symptoms appear; this usually occurs late and represents the externalization of liver damage. Because of this duality, for a long time now blood markers (non invasive) are sought, such that excess of the mineral can be identified prior to developing a toxic event. Thus, the present work focuses on the complex task of looking for a possible biomarker of excess copper. To do this, we assessed animals supplemented with copper for three years; we measured the activity and mass of plasmatic ceruloplasmin in an animal model of primates Cebus apella. Unfortunately, the results suggest that activity and mass of ceruloplasmin are not good indicators of accumulation of copper in this animal model, however they do not rule out the possibility of using concentrations of copper in hair as a potential biomarker of chronic exposure to high concentrations of copper. Further studies to support this hypothesis are needed

Evalúa el desempeño de la prueba rápida dual SD Bioline VIH/sífilis en población de alto riesgo en Lima, Perú y su factibilidad de uso por parte de los profesionales de salud. Un total de 415 participantes entre ellos hombres que tenían sexo con hombres, mujeres trans y trabajadoras sexuales fueron reclutados en dos centros de salud del Callao y Barranco entre julio del 2013 y marzo del 2014. Se utiliza una muestra de sangre total para la evaluación del desempeño de la prueba y suero para las pruebas de referencia para VIH y sífilis. Se entrevista a profesionales de salud sobre las características operacionales de la prueba, orientadas a su factibilidad de uso. La prueba rápida dual SD Bioline VIH/sífilis tiene una sensibilidad de 99.1% (95% IC:94.8, 100.0) y una especificidad de 99.4 % (95 % IC: 97.7, 99.9) para el serodiagnóstico del VIH y una sensibilidad de 89.2% (95% IC: 83.5, 93.5) y una especificidad de 98.78% (95% IC: 96.5, 99.8) para el serodiagnóstico de sífilis. La prueba rápida dual es bien aceptada, con instrucciones de la prueba excelentemente claras, y muy fáciles de usar. Entre los beneficios de la utilización de la prueba dual, destan el ahorro de tiempo y reducción de errores operacionales. / Tesis

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Determina la presencia de alcaloides y flavonoides, así como caracterizar sus correspondientes estructuras; la extracción se lleva a cabo por el método de maceración en metanol, a partir de las hojas en polvo. El aislamiento es monitoreado mediante cromatografía en capa delgada de silicagel 60, paro lo cual el extracto metanólico se fracciona en una columna cromatografica de exclusión en Sephadex LH-20. La purificación de los alcaloides y flavonoides se realiza por cromatografía líquida de alta performance (HPLC). / Tesis