Avaliou-se o desenvolvimento da tireóicle no período da puberdade em 96 escolares da cidade de Passo fundo, Rio Grande do Sul, nos anos 1991 e 1992 e, posteriormente, em 1995 e 1996. Estes ind ivícluos eram provenientes de um subgrupo de 164 alunos selecionados aleatoriamente entre l 096 escolares que participaram da primeira fase do . estudo sobre a prevalência de bócio. Daquele grupo, 96 estudantes foram encontrados e concordaram em participar do novo estudo. Estes tiveram suas tireóides observadas pelo exame clínico e pela ultra-sonografia, avaliados o peso, altura, grau de desenvolvimento puberal em ambos períodos. Na segunda etapa do estudo, além dessas avaliações, foram feitas dosagens laboratoriais: tiroxina total, hormônio estimulante da tireóide, somatomedina C, anticorpos antitireoperoxidase e o iodo urinário. Constatou-se que o volume tireoideano aumenta proporcionalmente mais do que a superf1cie corporal durante a puberdade. Este aumento foi maior em meninos que em meninas e não estava relacionado aos níveis de T4 total, TSH, IOF I e iodo urinário. Através da regressão linear múltipla, observou-se que o aumento do volume tireoideano permanecia associado, de forma independente e significativa, ao tamanho da tireóide no início do estudo, ao aumento ela superfície corporal e ao sexo masculino. A tireóide dos meninos é maior que a das meninas mesmo quando este volume foi ponderado pela superfície corporal. O volume da tireóide apresentou uma correlação positiva com os estágios ela puberdade nos meninos e não nas meninas. Houve um aumento das medidas antropométricas no período do estudo, porém o aumento da prega cutânea tricipital não apresentou significância estatística. A prega cutânea das meninas foi maior que a dos meninos. Os níveis de T4 total diminuíram durante o período da puberdade estudado em meninos. Os níveis de TSH, IGF-1 e a excreção uónária de iodo não apresentaram variação significativa As meninas apresentaram níveis de IGF I maior que os dos meninos. Cerca de 8% dos indivíduos apresentavam Tireoidite de Hashimoto e, nestes, a tireóide era significativamente maior do que os sem esta patologia. Os níveis de TSH médios levemente superiores, embora sem significância estatística, e todos os estudantes com Tireoidíte de Hashimoto eram eutireoideanos no momento do estudo. Houve uma proporção de seis meninas para um menino com Tireoidite de Hashimoto. O suprimento de iodo, através do sal íodado, estava sul:iciente para a população de estudantes no período do estudo. A tireóide, portanto, aumenta de forma significativa no período puberal, porém este crescimento não está associado a fatores conhecidos. Este aumento parece ser uma característica do período puberal e ocorre de forma mais acentuada nos indivíduos do sexo masculino. / Ninety and six schoolchildren in the puberal period were studied to evaluate the thyroid development in 1991-1992 and again in 1995-1996. These individuais came from a sub sample of 164 schoolchildren randomly selected among 1 096 schoolchildren studied in a goiter survey in 1991-1992. The ninety and six actually studied were those found and that agreed on participation in the second part of the study. All students had theirs thyroids examined clinically and through ultra-sonography. The weight, height and triciptal skinfold was obtained. In the second phase o f the study, in addiction to these measurements, the serum total .thyroxin, thyroid stimulating hormone, insulin like growth factor I and urinary iodine were assayed. Proportionally, the thyroid increased more than the body surface area during the period o f puberty studied. This growth was more pronounced in boys than in girls and was not related to total T4, TSH, IGF or urinary iodine excretion. According to a model of multiple regression analysis, the thyroicl growth remained associated independently and significantly to thyroid size at the beginning o f the study, to the body surface area growth and to the male gender. All the anthropometric measures increased significantly during the period of the study with exception o f thc trici ptal skinfold that di c! not reach statistical significance.

Orientador: Francisco Haiter Neto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-08T06:13:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Caldas_MariadePaula_M.pdf: 1784932 bytes, checksum: 977a95c5188b9bddd4d09a71ebe699ee (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a aplicabilidade do método de análise da idade óssea das vértebras cervicais desenvolvido por Mito et al. (2002) em meninas japonesas na população brasileira, assim como estabelecer dois novos métodos para meninas e meninos brasileiros, no intuito de determinar de forma objetiva a maturação esquelética das vértebras cervicais em radiografias cefalométricas laterais. Foram selecionadas radiografias cefalométricas laterais e radiografias carpais de 128 meninas e 110 meninos, com faixa etária variando entre 7 e 15.9 anos, pertencentes à Clínica de Radiologia da Faculdade de Odontologia de Piracicaba ¿ Unicamp. A idade óssea das vértebras cervicais foi determinada segundo o método de Mito et al. (2002). A idade óssea das crianças foi determinada pelo método de Tanner & Whitehouse (TW3) e usada como padrão ouro para determinar a confiabilidade do método japonês. Posteriormente, terceiro e quarto corpos das vértebras cervicais foram traçados e medidos e fórmulas de regressão foram criadas, no intuito de se estabelecer a idade óssea das vértebras cervicais de meninos e meninas brasileiros. Uma outra amostra composta por radiografias cefalométricas laterais e radiografias carpais de 55 meninas e 54 meninos com a mesma faixa etária foi utilizada para verificar a confiabilidade das fórmulas criadas, em comparação à idade óssea determinada pelo método TW3. Diante da análise do método japonês na população brasileira, os resultados obtidos revelaram que houve diferença estatística significante entre idade vertebral e idade cronológica e entre idade esquelética e idade cronológica para a população feminina. Ao contrário, a amostra masculina revelou diferença estatística significante entre idade vertebral e idade esquelética e entre idade vertebral e idade cronológica. A criação das fórmulas para meninas e meninos brasileiros para a análise objetiva da maturação esquelética das vértebras cervicais revelou não haver diferença estatística entre idade óssea da vértebra cervical, idade esquelética e idade cronológica. Podemos concluir que o método desenvolvido por Mito et al. (2002) pode ser aplicado somente em meninas brasileiras e que as fórmulas desenvolvidas para avaliação objetiva da idade óssea das vértebras cervicais de meninos e meninas brasileiras são confiáveis e podem ser utilizadas / Abstract: The aim of this study was to evaluate the applicability of the formula developed for Japanese people by Mito et al. (2002) in Brazilians, as well as to establish two new formulas to objectively evaluate skeletal maturation in female and male Brazilian subjects using cephalometric radiographs. The study sample was taken from patient files of the Oral Radiological Clinic, Piracicaba Dental School, Brazil. Lateral cephalometric and hand-wrist radiographs of 128 girls and 110 boys (aged 7.0 to 15.9 years) were selected. Cervical vertebral bone age was evaluated using Mito's method. Bone age was evaluated by the Tanner & Whitehouse method (TW3) and was used as gold standard to determine the reliability of the Japanese method. After that, cervical vertebral bodies of C3 and C4 were traced and a stepwise multiple regression analysis was created in order to determine formulas to obtain cervical vertebral bone age in Brazilian girls and boys. A different sample consisted of lateral cephalometric and hand-wrist radiographs of 55 girls and 54 boys (aged 7.0 to 15.9 years) was used to verify the reliability of cervical vertebral bone age in comparison with bone age by the TW3 method. Against the analysis of the Japanese method, it was possible to observe that there was a statistically significant difference between cervical vertebral bone age and chronological age and between bone age and chronological age in girls. Differently, the analysis for boys demonstrated that there was a statistically significant difference between cervical vertebral bone age and bone age and between cervical vertebral bone age and chronological age. The establishment of formulas for objectively evaluating skeletal maturation in Brazilians showed no statistically significant difference between cervical vertebral bone age, bone age, and chronological age. We concluded that the method developed by Mito et al. for objectively evaluating skeletal maturation on cephalometric radiographs can be applied to Brazilian women only and the formulas developed in this study are reliable and can be applied to both female and male Brazilian subjects / Mestrado / Radiologia Odontologica / Mestre em Radiologia Odontológica

Introdução - A puberdade precoce verdadeira ou dependente de GnRH apresenta importante morbidade: a baixa estatura, conseqüência da rápida progressão da idade óssea, além das seqüelas psico-emocionais do desenvolvimento sexual secundário precoce. Daí a importância da realização de um diagnóstico precoce e preciso, a fim de que a terapêutica adequada seja instituída o quanto antes. O uso do análogo do GnRH (aGnRH) em teste diagnóstico vem sendo utilizado com este objetivo. Neste estudo avaliou-se os valores de corte para o diagnóstico de puberdade precoce verdadeira, usando-se o teste do aGnRH. Material e métodos - Estudo prospectivo, com 44 meninas, com desenvolvimento dos caracteres sexuais secundários antes dos 8 anos de idade, atendidas no Ambulatório de Ginecologia Infanto-Puberal do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo. Realizou-se, em todos os casos, o teste do aGnRH, que consistiu na coleta de amostra sanguínea basal para dosagem de FSH e LH, seguida da aplicação subcutânea de 500µg de acetato de leuprolida (Lupron®). Novas amostras sanguíneas foram realizadas após 3 horas, para dosagem de FSH e LH, e após 24 horas da aplicação, para dosagem de estradiol Compararam-se os níveis de LH e FSH basais, de 3 horas e a relação LH/FSH obtida, além do estradiol de 24h, com a evolução clínica das pacientes. Este foi o padrão ouro utilizado para análise do teste, sendo que, após 6 meses, as pacientes foram divididas em 2 grupos: puberdade progressiva (puberdade precoce verdadeira) e não-progressiva. Para análise estatística, utilizou-se curvas ROC, estabelecendo-se sensibilidade, especificidade e melhor nível de corte para o diagnóstico de puberdade precoce verdadeira, para os diferentes critérios analisados. Além disso, avaliou-se a concordância entre os diversos tipos de análise do teste, através do coeficiente kappa. Resultados - O LH de 3 horas apresentou valor de corte > 4,5 mUI/mL, sensibilidade 59,1% e especificidade 86,4%, com área sobre a curva de 0,723. O valor de kappa foi de 0,45, com concordância de 0,73. O estradiol de 24 horas apresentou valor de corte > 40,6 pg/mL, sensibilidade 70% e especificidade 73,7%, com área sobre a curva de 0,703. O valor de kappa foi de 0,436, com concordância de 0,718. Dentre todos os critérios analisados, o melhor deles foi a relação LH/FSH de 3 horas, com valor de corte > 0,14, sensibilidade 72,7% e especificidade 77,3%, com área sobre a curva de 0,771. O valor de kappa foi de 0,5, com concordância de 0,75. Conclusões - Em nossa avaliação, a relação LH/FSH de 3 horas foi superior ao valor de LH de 3 horas ou estradiol de 24 horas, que haviam sidos os melhores critérios diagnósticos no trabalho pioneiro na utilização deste teste. / Introduction - True or GnRH-dependent precocious puberty involves important morbidity such as short stature due to the rapid progression of bone age, as well as psycho-emotional sequels of precocious secondary sexual development. Thus, it is important to make an early and precise diagnosis so that appropriate treatment can be instituted as early as possible. The GnRH analogue (aGnRH) in the diagnostic test has been used for this purpose. In the present study, the sensitivity and specificity of different laboratory criteria for the diagnosis of true precocious puberty were compared using the aGnRH test. Material and methods - This was a prospective study conducted on 44 girls with the development of secondary sexual traits before 8 years of age attended at the Childhood-Pubertal Gynecology Outpatient Clinic of the University Hospital, Faculty of Medicine of Ribeirão Preto, University of São Paulo. The aGnRH test was performed in all cases, consisting of collection of a basal blood sample for the determination of FSH and LH, followed by subcutaneous application of 500 µg leuprolide acetate (Lupron®). New blood samples were obtained after 3 hours, for the determination of FSH and LH, and after 24hours of application, for determination of estradiol. Basal LH and FSH levels and levels after 3 hours, the LH/FSH ratio obtained 3 hours after the administration of 500 µg Lupron®, and 24 hour estradiol levels were compared with the clinical course of the patients. This was the gold standard used for the analysis of the test and after 6 months the patients were divided into 2 groups: progressive puberty (true precocious puberty) and non-progressive puberty. ROC curves were used for statistical analysis, with the determination of the sensitivity, specificity and best cut-off value for the diagnosis of true precocious puberty of the different criteria analyzed. In addition, the agreement of the various types of test analysis was evaluated using the kappa coefficient. Results - Three hour LH presented a cut-off value of > 4.5 mIU/mL, 59.1% sensitivity and 86.4% specificity, with an area under the curve of 0.723. The kappa value was 0.45, with 0.73 agreement. Twenty-four hour estradiol presented a cut-off value of > 40.6 pg/mL, 70% sensitivity and 73.7% specificity, with an area under the curve of 0.703. The kappa value was 0.436, with 0.718 agreement. The best of all criteria used was the 3 hour LH/FSH ratio, with a cut-off value of > 0.14, 72.7% sensitivity and 77.3% specificity, with an area under the curve of 0.771. The kappa value was 0.5, with 0.75 agreement. Conclusions - In the present evaluation, the 3 hour LH/FSH ratio was superior to the 3 hour LH value and the 24 hour estradiol value, which had been the best diagnostic criteria in the pioneering study using this test.

Orientador: Maria Beatriz Rocha Ferreira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação Fisica / Made available in DSpace on 2018-07-19T14:08:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tavares_SergioCorrea_M.pdf: 5286791 bytes, checksum: dfd8492756d8f7b91c2d38bd4e0632d8 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: A presente pesquisa teve como meta o estudo da Reclusão Pubertária em jovens Kamayurá no Alto Xingu ¿ MT, sob o enfoque biocultural. Diferentes dimensões dos reclusos foram observadas para construir o objeto deste trabalho, a saber: crescimento físico, aspectos maturacionais, performance motora, atividade diária, alimentação, informações dos pais e representantes da Aldeia sobre Reclusão. Em suma a Reclusão Pubertária foi estudada sob a dinâmica biológica segundo o enfoque biomédico, e a dinâmica cultural da percepção dos Kamayurá sobre o assunto. È importante realçar que o grupo indígena ainda conserva em sua cultura um conjunto e símbolos e significados específicos desta fase etária. Foram utilizados procedimentos etnográficos e cinematográficos para o levantamento das informações e coleta de dados com a participação do pesquidador no cotidiano da Aldeia. Especificamente foram usadas como fontes primárias os depoimentos de informantes, observações, medidas antropométricas e testes de performance motora. È importante mencionar que todas as técnics utilizadas foram permitidas pelos pais e lideres Kamayurá. O crescimento e aspectos maturacionais foram estudados através de medidas antropométricas (peso, altura, circunferência, dobras cutâneas). Os aspectos sexuais secundários foram observados através do desenvolvimento os seios, idade da menarca para mulheres. Para os homens, a análise do desenvolvimento maturacional foi feita através de fotografias, no sentido de classificar o desenvolvimento maturacional, utilizando-se Tabela de desenvolvimento de genitais. A performance motora dói estudada através de testes motores para verificação da agilidade, potência anaeróbica, abdominal e força manual. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: : The goal of the presented research is to study the ¿pertuberty seclusion¿ of youngsters of the Kamayurá tribe in the Alto Xingu ¿ MT from a biocultural point of view. Several different aspects of seclusion were observed such as physical growth, maturation, motor performance, daily activity, food habits and information from the parents and representatives of the tribe about the seclusion. In summary, the puberty seclusion was studied from a biomedical and cultural point of view the late one as perceived by the people of the Kamayurá tribe. It should be emphasized the Kamayurá still conserves a number of symbols and specific and meaning related to this age group. The research used ethnographic procedures and kinanthropometric measures to obtain the information. To this effect be lived among the KaKamayurá tribe during ten days, period of time allowed by the leaders. The primary sources to compile the obtained data were: interviews, observations, anthropometric measurements and motor performance tests. It is important to note that all techniques used were authorized by the parents of the children studied and leaders od Kamayurá. The growth and maturation was studied by the following anthropometric measurement weight, height, circunference and skinfold thickness. The secondary sexual aspects of woman were studied by observing the breast development and the age of menarche. ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Educação Física

A idade normal para início da puberdade em meninas varia bastante, de 8 a 13 anos, e os genes envolvidos nesse controle são parcialmente conhecidos. Fatores ambientais, como alimentação e exposição a disruptores endócrinos, contribuem para essa variabilidade, de modo que genes modulados epigeneticamente podem justificar parte da complexidade desse processo. O termo epigenética se refere às modificações na expressão gênica que não são causadas por alterações na sequência do DNA. A metilação do DNA é o mecanismo epigenético mais bem estudado. Na última década surgiram evidências demonstrando a relação entre metilação do DNA e desenvolvimento puberal. Em fêmeas de roedores, a hipermetilação do DNA levou à puberdade precoce. Em humanos, a puberdade precoce central (PPC) familial causada por mutações nos genes MKRN3 e DLK1 é considerada um defeito do imprinting, fenômeno epigenético no qual apenas um dos alelos parentais é expresso, estando o outro metilado e inativo. Além disso, um conceito atual propõe que o início da puberdade requer a repressão epigenética de fatores inibidores do eixo gonadotrófico. Recentemente, genes zinc finger (ZNF) foram relacionados ao processo puberal, e muitos deles codificam repressores transcricionais. Neste trabalho, estudamos a metilação do DNA do sangue periférico de 10 pacientes do sexo feminino com PPC familial (casos índices) e 33 meninas com desenvolvimento puberal normal (15 pré-púberes e 18 púberes), usando a plataforma Human Methylation 450 BeadChip. Duas pacientes tinham PPC de causa genética (uma com mutação no MKRN3 e outra com deleção no DLK1) e oito tinham PPC idiopática, sem mutações identificadas pelo sequenciamento exômico global. Cento e vinte regiões diferencialmente metiladas foram identificadas entre as meninas saudáveis pré-púberes e púberes, estando 74% delas no cromossomo X. Apenas uma região mostrou-se hipometilada no grupo púbere e, de maneira importante, contém a região promotora do ZFP57, fator necessário para manutenção do imprinting. Uma vez que a hipermetilação nas regiões promotoras dos genes é relacionada à inibição transcricional, o achado de hipermetilação global do DNA na puberdade sugere que haja inibição de fatores inibidores do eixo gonadotrófico, o que resultaria no início do processo puberal. O receptor estrogênico destacou-se como um fator transcricional que se liga a sete genes diferencialmente metilados entre os controles pré-púberes e púberes. As pacientes com PPC apresentaram mais sítios CpG hipermetilados tanto na comparação com as meninas pré-púberes (81%) quanto púberes (89%). Há doze genes ZNF contendo sítios CpG hipermetilados na PPC. Não foram encontradas anormalidades de metilação nos genes MKRN3 e DLK1 nem em suas regiões regulatórias. Em conclusão, este estudo evidenciou hipermetilação global do DNA em meninas com puberdade normal e precoce, sugerindo que esse padrão é uma marca epigenética da puberdade. Pela primeira vez, mudanças no metiloma de pacientes com PPC foram descritas. Modificações na metilação de vários genes ZNF parecem compor a complexa rede de mecanismos que leva ao início da puberdade humana / Normal puberty initiation varies greatly among girls, from 8 to 13 years, and the genetic basis for its control is partially known. Environmental factors, such as nutrition and exposure to endocrine disruptors, contribute to this variance, and epigenetically modulated genes may justify some of the complexity observed in this process. Epigenetics refers to alterations in gene expression that are not caused by changes in DNA sequence itself. DNA methylation is the best studied epigenetic mechanism. In the last decade, evidence has emerged showing the relationship between DNA methylation and pubertal development. In female mice, DNA hypermethylation led to precocious puberty. In humans, familial central precocious puberty (CPP) caused by mutations in the MKRN3 and DLK1 genes is considered a disorder of imprinting, an epigenetic phenomenon in which only one parental allele is expressed, and the other allele is methylated and inactive. In addition, animal studies indicated that pubertal timing requires epigenetic repression of inhibitory factors of the gonadotrophic axis. Recently, zinc finger genes (ZNF) were related to pubertal development, many of which encode transcriptional repressors. In the present study, we analyzed the DNA methylation of peripheral blood samples from 10 female patients with familial CPP (index cases) and 33 girls with normal pubertal development (15 pre-pubertal and 18 pubertal), using the Human Methylation 450 BeadChip assay. Genetic CPP was diagnosed in two patients (one with a MKRN3 mutation and the other with a DLK1 deletion). The remaining eight cases with idiopathic CPP were previously evaluated by whole exome sequencing and no causative mutations were identified so far. We evidenced 120 differentially methylated regions between pre-pubertal and pubertal healthy girls, and 74% of them were located at the X chromosome. Only one genomic region was hypomethylated in the pubertal group. Of note, it contains the promoter region of ZFP57, an important factor for imprinting maintenance. As DNA hypermethylation in gene promoters is related to gene silencing, the finding of global DNA hypermethylation in puberty suggests inhibition of inhibitory factors of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis that results in puberty onset. Importantly, the estrogen receptor was identified as a transcriptional factor that binds to seven differentially methylated genes associated with pubertal process. Patients with CPP exhibited more hypermethylated CpG sites compared to both pre-pubertal (81%) and pubertal (89%) controls. Twelve ZNF genes were recognized as having hypermethylated CpG sites in CPP. The methylation analyses of MKRN3 and DLK1 genes showed no abnormalities. In conclusion, this study revealed a widespread DNA hypermethylation in girls with normal and precocious puberty, suggesting that this pattern can be an epigenetic signature of puberty. For the first time, changes in the methylome of patients with CPP were described. We highlight that alterations in methylation levels of several ZNF genes may impact the onset of human puberty

A idade normal para início da puberdade em meninas varia bastante, de 8 a 13 anos, e os genes envolvidos nesse controle são parcialmente conhecidos. Fatores ambientais, como alimentação e exposição a disruptores endócrinos, contribuem para essa variabilidade, de modo que genes modulados epigeneticamente podem justificar parte da complexidade desse processo. O termo epigenética se refere às modificações na expressão gênica que não são causadas por alterações na sequência do DNA. A metilação do DNA é o mecanismo epigenético mais bem estudado. Na última década surgiram evidências demonstrando a relação entre metilação do DNA e desenvolvimento puberal. Em fêmeas de roedores, a hipermetilação do DNA levou à puberdade precoce. Em humanos, a puberdade precoce central (PPC) familial causada por mutações nos genes MKRN3 e DLK1 é considerada um defeito do imprinting, fenômeno epigenético no qual apenas um dos alelos parentais é expresso, estando o outro metilado e inativo. Além disso, um conceito atual propõe que o início da puberdade requer a repressão epigenética de fatores inibidores do eixo gonadotrófico. Recentemente, genes zinc finger (ZNF) foram relacionados ao processo puberal, e muitos deles codificam repressores transcricionais. Neste trabalho, estudamos a metilação do DNA do sangue periférico de 10 pacientes do sexo feminino com PPC familial (casos índices) e 33 meninas com desenvolvimento puberal normal (15 pré-púberes e 18 púberes), usando a plataforma Human Methylation 450 BeadChip. Duas pacientes tinham PPC de causa genética (uma com mutação no MKRN3 e outra com deleção no DLK1) e oito tinham PPC idiopática, sem mutações identificadas pelo sequenciamento exômico global. Cento e vinte regiões diferencialmente metiladas foram identificadas entre as meninas saudáveis pré-púberes e púberes, estando 74% delas no cromossomo X. Apenas uma região mostrou-se hipometilada no grupo púbere e, de maneira importante, contém a região promotora do ZFP57, fator necessário para manutenção do imprinting. Uma vez que a hipermetilação nas regiões promotoras dos genes é relacionada à inibição transcricional, o achado de hipermetilação global do DNA na puberdade sugere que haja inibição de fatores inibidores do eixo gonadotrófico, o que resultaria no início do processo puberal. O receptor estrogênico destacou-se como um fator transcricional que se liga a sete genes diferencialmente metilados entre os controles pré-púberes e púberes. As pacientes com PPC apresentaram mais sítios CpG hipermetilados tanto na comparação com as meninas pré-púberes (81%) quanto púberes (89%). Há doze genes ZNF contendo sítios CpG hipermetilados na PPC. Não foram encontradas anormalidades de metilação nos genes MKRN3 e DLK1 nem em suas regiões regulatórias. Em conclusão, este estudo evidenciou hipermetilação global do DNA em meninas com puberdade normal e precoce, sugerindo que esse padrão é uma marca epigenética da puberdade. Pela primeira vez, mudanças no metiloma de pacientes com PPC foram descritas. Modificações na metilação de vários genes ZNF parecem compor a complexa rede de mecanismos que leva ao início da puberdade humana / Normal puberty initiation varies greatly among girls, from 8 to 13 years, and the genetic basis for its control is partially known. Environmental factors, such as nutrition and exposure to endocrine disruptors, contribute to this variance, and epigenetically modulated genes may justify some of the complexity observed in this process. Epigenetics refers to alterations in gene expression that are not caused by changes in DNA sequence itself. DNA methylation is the best studied epigenetic mechanism. In the last decade, evidence has emerged showing the relationship between DNA methylation and pubertal development. In female mice, DNA hypermethylation led to precocious puberty. In humans, familial central precocious puberty (CPP) caused by mutations in the MKRN3 and DLK1 genes is considered a disorder of imprinting, an epigenetic phenomenon in which only one parental allele is expressed, and the other allele is methylated and inactive. In addition, animal studies indicated that pubertal timing requires epigenetic repression of inhibitory factors of the gonadotrophic axis. Recently, zinc finger genes (ZNF) were related to pubertal development, many of which encode transcriptional repressors. In the present study, we analyzed the DNA methylation of peripheral blood samples from 10 female patients with familial CPP (index cases) and 33 girls with normal pubertal development (15 pre-pubertal and 18 pubertal), using the Human Methylation 450 BeadChip assay. Genetic CPP was diagnosed in two patients (one with a MKRN3 mutation and the other with a DLK1 deletion). The remaining eight cases with idiopathic CPP were previously evaluated by whole exome sequencing and no causative mutations were identified so far. We evidenced 120 differentially methylated regions between pre-pubertal and pubertal healthy girls, and 74% of them were located at the X chromosome. Only one genomic region was hypomethylated in the pubertal group. Of note, it contains the promoter region of ZFP57, an important factor for imprinting maintenance. As DNA hypermethylation in gene promoters is related to gene silencing, the finding of global DNA hypermethylation in puberty suggests inhibition of inhibitory factors of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis that results in puberty onset. Importantly, the estrogen receptor was identified as a transcriptional factor that binds to seven differentially methylated genes associated with pubertal process. Patients with CPP exhibited more hypermethylated CpG sites compared to both pre-pubertal (81%) and pubertal (89%) controls. Twelve ZNF genes were recognized as having hypermethylated CpG sites in CPP. The methylation analyses of MKRN3 and DLK1 genes showed no abnormalities. In conclusion, this study revealed a widespread DNA hypermethylation in girls with normal and precocious puberty, suggesting that this pattern can be an epigenetic signature of puberty. For the first time, changes in the methylome of patients with CPP were described. We highlight that alterations in methylation levels of several ZNF genes may impact the onset of human puberty

Orientador: José Luis Moraes Vasconcelos / Banca: Ciro Moraes Barros / Banca: Roberto Sartori Filho / Resumo: O objetivo desse experimento foi avaliar o efeito de tratamentos com progesterona (P4) na indução de estro, concepção e prenhez em novilhas Nelore prépuberes. Novilhas Nelore (n = 935) com idade média de 24,0 ± 1,13 meses, peso de 298,0 ± 1,89 Kg e ECC 3,2 ± 0,26, foram submetidas a dois exames ultrassonográficos com intervalo de sete dias (d-19 e d-12) para determinar a presença ou ausência de CL, e aquelas com presença de CL em uma ou ambas avaliações foram consideradas púberes (Grupo PGF; n = 346). No dia -12 as novilhas consideradas pré-púberes foram divididas aleatoriamente para não receberem tratamento (Grupo CIDR0; n = 113), para receberem um dispositivo intravaginal novo contendo 1,9 g de P4 (Grupo CIDR1; n = 237), ou para receberem um dispositivo utilizado previamente por 27 dias (Grupo CIDR4; n = 239). No dia zero foi retirado o CIDR das novilhas dos tratamentos CIDR1 e CIDR4, e as novilhas do tratamento PGF receberam aplicação de prostaglandina F2 . Todas as novilhas foram submetidas à palpação retal para avaliação do escore uterino (EU) e amostras de sangue foram colhidas para dosagens de P4. O diâmetro do maior folículo (ØFOL) foi mensurado em todas as novilhas no dia zero. A partir do dia um (d1) todas as novilhas foram submetidas à observação de estro durante 45 dias e inseminadas seguindo o esquema: cio manhã / IA tarde do mesmo dia e cio tarde / IA no dia seguinte de manhã e depois foram expostas a touros por mais 45 dias de estação de monta (EM). As variáveis contínuas foram avaliadas pelo PROC GLM e as binomiais pelo PROC LOGISTIC do SAS. Nas novilhas prépúberes, houve influência (P < 0,05) do tratamento nas concentrações de P4 no dia 0 (CIDR0: 0,43 ± 0,16; CIDR1: 2,26 ± 0,11; CIDR4: 1,22 ± 0,11 ng/ml), ØFOL (CIDR0: 9,41 ± 0,24; CIDR1: 9,73 ± 0,17; CIDR4: 11,37 ± 0,16 mm), EU no dia... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this trial was to evaluate the effects of treatments with progesterone (P4) on the rates of induced estrus, conception and pregnancy in pre-pubertal Nelore heifers. Nelore heifers (n = 935) with 24.0 ± 1.13 months, body weight of 298.0 ± 1.89 Kg and body conditional score (BCS) of 3.2 ± 0.26 were submitted to two ultrasound examinations 7 d apart (d -19 and -12) to determine the presence or absence of CL, and those with presence of CL in at least one examination were considered pubertal (PGF; n = 346). On d -12, the pre-pubertal heifers were randomly assigned to receive no treatments (group CIDR0; n = 113), a new intravaginal insert containing 1.9 g of P4 (group CIDR1; n = 237) or a P4 insert used previously for 27 d (group CIDR4; n = 239). On d 0, heifers from treatments CIDR1 and CIDR4 had inserts removed, and heifers from treatment PGF received a prostaglandin F2 treatment. Also, heifers were rectally palpated for uterine score (US) evaluation, blood samples were taken for P4 analysis and follicular diameter (ØFOL) was measured in all heifers on d 0. Beginning on d 1, animals were observed for estrus and inseminated during 45 d [estrus morning / artificial insemination (AI) afternoon of same day and estrus afternoon / AI on next day morning] and further exposed to natural breeding from d 46 to 90 of breeding season (BS). Continuous variables were evaluated by PROC GLM and binomial variables by PROC LOGISTIC of SAS. In pre-pubertal heifers, there were effects of treatment (P < 0.05) on serum concentrations of P4 at d 0 (CIDR0: 0.43 ± 0.16; CIDR1: 2.26 ± 0.11; CIDR4: 1.22 ± 0.11 ng/mL), ØFOL (CIDR0: 9.41 ± 0.24; CIDR1: 9.73 ± 0.17; CIDR4: 11.37 ± 0.16 mm), US at d 0 (CIDR0: 1.46 ± 0.06; CIDR1: 1.86 ± 0.04; CIDR4: 2.20 ± 0.04), means days to show estrus (CIDR0: 4.45 ± 0.28; CIDR1: 3.52 ± 0.13; CIDR4: 3.19 ± 0.14 days), estrus detection rate in 7 d of BS... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: José Luiz Moraes Vasconcelos / Banca: Pietro Sampaio Baruselli / Banca: Roberto Sartori Filho / Resumo: Quatro experimentos foram realizados para avaliar estratégias hormonais para induzir ovulação em novilhas Nelore. No experimento 1, (n = 1039) as novilhas receberam um dispositivo intravaginal contendo 1,9 g de P4 previamente utilizado por 27 dias (Quarto uso; CIDR-4) no Dia -12 ou nenhum tratamento (CIDR-0). O dispositivo foi removido no Dia 0 no tratamento CIDR-4 e a detecção de estro e IA foram realizadas nos Dias 1 a 7. No Dia 8, as novilhas não detectadas em estro foram avaliadas para determinar a presença do CL e receberam o mesmo tratamento novamente, seguido por detecção de estro e IA nos Dias 21 a 27. Todas as novilhas nos Experimentos 2 (n = 896), 3 (n = 839) e 4 (n = 948) receberam o tratamento CIDR-4 no Dia -12. No Experimento 2, as novilhas foram aleatoriamente distribuídas em um grupo Controle (sem tratamento adicional) ou para receberem 200 UI im de gonadotrofina coriônica equina (eCG) no Dia 0. No Experimento 3, as novilhas receberam os mesmos tratamentos descritos no Experimento 2 ou um tratamento que incluiu 200 UI im de eCG mais 0,5mg im de cipionato de estradiol (eCG+ECP) no Dia 0. No Experimento 4, as novilhas receberam os mesmos tratamentos descrito no Experimento 3 ou apenas 0,5mg im de ECP (ECP) no Dia 0. Nos Experimentos 2 e 3 , detecção de estro e IA foram realizadas nos Dias 1 a 7 e no Dia 8 as novilhas não detectadas em estro foram avaliadas para determinar presença de CL. No Experimento 4, as novilhas foram avaliadas para determinar a presença de CL entre os Dias 10 e 14. No Experimento 1, as novilhas tratadas com CIDR-4 tiveram maiores taxas de detecção de estro, indução de ovulação e prenhez comparadas ao Grupo CIDR-0. No Experimento 2, as novilhas tratadas com eCG tiveram maiores taxas de de detecção de estro, indução de ovulação e prenhez em... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Four experiments were conducted to evaluate hormonal strategies to induce ovulation in Nellore heifers. In Experiment 1, (n = 1039) heifers received a CIDR of fourth use (CIDR-4) on Day -12 or no CIDR (CIDR-0). The CIDR was removed on Day 0 in the CIDR-4 treatment, and estrus detection and AI were performed from Days 1 to 7. On Day 8, heifers not detected in estrus were evaluated for CL presence and received the same treatment again, followed by estrus detection and AI from Days 21 to 27. All heifers in Experiments 2 (n = 896), 3 (n = 839), and 4 (n = 948) received the CIDR-4 treatment on Day -12. In Experiment 2, heifers were randomly assigned to a Control group (no additional treatment) or to receive equine chorionic gonadotropin (eCG; 200 IU eCG im) on Day 0. In Experiment 3, heifers received the same treatments as in Experiment 2, or a treatment that included eCG and estradiol cypionate (eCG+ECP; 200 IU im of eCG plus 0.5 mg estradiol cypionate im) on Day 0. In Experiment 4, heifers received the treatments described in Experiment 3 or only ECP (ECP; 0.5 mg ECP) on Day 0. In Experiments 2 and 3, estrus detection and AI was performed from Days 1 to 7 and on Day 8 heifers not detected in estrus were evaluated for CL presence. In Experiment 4, heifers were evaluated for presence of a CL between Days 10 and 14. In Experiment 1 heifers treated with CIDR-4 had greater estrus detection, ovulation induction and pregnancy rates than in the CIDR-0 group. In Experiment 2, heifers treated with eCG had greater estrus detection, ovulation induction and pregnancy rates in 7 d than heifers in the Control group. In Experiment 3, heifers treated with eCG + ECP had greater estrus detection, ovulation induction and pregnancy rates than the Control and eCG treatments. In Experiment 4, ovulation induction was greater for... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Lindsay Unno Gimenes / Coorientador: Humberto Tonhati / Banca: Nedenia Bonvino Stafuzza / Banca: Joslaine Noely dos Santos Gonçalves Cyrillo / Resumo: O hormônio anti-Mülleriano (AMH) é uma glicoproteína de 140 kDa exclusivamente expressa nas gônadas e que pertence à família de fatores de crescimento transformantes (TGF)-ß e está relacionada ao desenvolvimento folicular ovariano. O AMH possui a importante função de evitar a depleção prematura da reserva folicular por meio do equilíbrio entre a inibição e a promoção do crescimento e desenvolvimento de folículos. Em bovinos, o gene do hormônio anti-Mülleriano está localizado no cromossomo 7 e é composto por cinco éxons. Considerando esse contexto, este trabalho inclui dois capítulos: o primeiro com uma revisão das caraterísticas ocorrência de prenhez precoce (OPP) e idade ao primeiro parto (IPP), assim como a apresentação detalhada do AMH, citando suas principais funções no aparelho reprodutor feminino e de seu respectivo gene e suas variantes em humanos e animais. No segundo capítulo, o objetivo foi caracterizar a presença de polimorfismos nas regiões codificantes do gene AMH, analisar a constituição genética da população para o gene e estudar a associação entre os polimorfismos e as características OPP e IPP em 197 novilhas da raça Nelore, com idade de 16-18 meses. Quatro polimorfismos do tipo SNP foram detectados no presente estudo, sendo um deles no íntron 2 (rs132972253) e três no éxon 5 (rs527023314, rs722016629 e rs134387246), sendo que somente o SNP rs134387246 exibiu valor significativo (p<0,1) para ambas características (OPP e IPP). A análise demonstrou superiorida... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Anti-Müllerian Hormone (AMH) is a 140 kDa glycoprotein exclusively expressed in the gonads, which belongs to the transforming growth factor (TGF)- ß family and is related to ovarian follicular development. AMH plays an important role to prevent premature depletion of the follicular reserve, by promoting balance between inhibition and promotion of follicular growth and development. In bovines, the AMH gene is located in chromosome seven and contains five exonic regions. Considering this context, the content of this work includes two chapters: the first with a review of early pregnancy occurence (EPO) and age at first calving (AFC) traits, as well as the detailed presentation of AMH, citing its main functions in the reproductive system and also its related gene and variants in both humans and animals. In the second chapter, the aim was to characterize the presence of polymorphisms in the coding region of the AMH gene, analyze the genetic constitution of the population for this gene and study the association between the polymorphisms and OPP and IPP traits in 197 Nelore heifers, aging 16 to 18 months. A total of four single nucleotide polymorphisms (SNP) were detected in the present study, being one in intron two (rs132972253) and three in exon five (rs527023314, rs722016629 and rs134387246), wherein only SNP rs134387246 showed significant value (p <0.1) for both phenotypes. The analysis revealed superiority of the A allele, and the GA genotype presented AFC 75 days lower than t... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Roberto Carvalheiro / Coorientador: Marina Rufino Salinas Fortes / Coorientador: Lucia Galvão de Albuquerque / Banca: Ricardo Vieira Ventura / Banca: Yuri Tani Utsunomiya / Banca: Henrique Nunes de Oliveira / Banca: Gerardo Alves Fernandes Júnior / Resumo: O poder estatístico de um único estudo de associação genômica ampla (GWAS) para detectar loci de características quantitativas (QTL) é esperado ser menor do que combinando resultados de GWAS independentes de múltiplas raças, isto é, de diferentes raças, especialmente para características complexas, como as de puberdade. Utilizar populações independentes e métodos para detectar novas regiões genômicas e validar regiões previamente conhecidas como associadas com a característica de interesse em populações independentes é uma estratégia viável para identificar QTLs mais acuradamente. O objetivo deste estudo foi detectar regiões genômicas controlando características de precocidade sexual em três raças de gado de corte tropical (Nelore, Brahman e Composto Tropical - CT), utilizando duas estratégias, meta-analise utilizando diferentes raças e validação cruzada de QTL entre raças. No estudo de meta-análise as características incluídas foram idade ao primeiro parto (IPP), prenhez precoce (PP), e circunferência escrotal (CEN) medida aos 18 meses de idade no Nelore, e a idade ao surgimento do primeiro corpo lúteo (IPCL), intervalo do primeiro anestro pós-parto (IPAPP) e circunferência escrotal medida aos 18 meses de idade (CE18B) para o Brahman. A meta-análise foi realizada utilizando um método multi-característica. Um total de 108 polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) significativos a um P-valor empírico de 1.39 × 10−5 (FDR < 0.05), foram encontrados neste estudo. Tais SNP signific... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The statistical power of an individual genome-wide association study (GWAS) to detect quantitative trait loci (QTL) is expected to be lower than combining independent GWAS results from multi-breed, i.e., from different breeds, especially for complex traits, as puberty traits. Using independent populations and methods to detect new genomic regions and validate in independent populations known regions associated with the trait of interest is a feasible strategy to identify QTLs more accurately. The aim with this study was to detect genomic regions controlling sexual precocity traits across three tropical beef cattle breeds (Nellore, Brahman and Tropical Composite - TC) by using two approaches, meta-analysis using different breeds and QTL validation across different breeds. In the meta-analysis study the traits included were age at first calving (AFC), early pregnancy (EP), and scrotal circumference (SCN) measured at 18 months of age for Nellore, and age at first corpus luteum (AGECL), first postpartum anoestrus interval (PPAI), and scrotal circumference measured at 18 months of age (SC18B) for Brahman cattle. The meta-analysis was performed using a multi-trait method. A total of 108 significant single-nucleotide polymorphisms (SNPs), at an empirical threshold P-value of 1.39 × 10−5 (FDR < 0.05), were found in this study. Those significant SNP were distributed over 19 out of 29 autosomes, and the major of them were located on BTA14. In the meta-analysis study we identified five association regions harbouring the majority of the significant SNP (76%), namely: BTA2 (5.55%) from 95 to 96 Mb, BTA4 (5.55%) from 94.1 to 94.8 Mb, BTA14 (59.26%) from 24 to 25 Mb and 29 to 30 Mb, and BTA21 (5.55%) from 6.7 Mb to 11.4 Mb. In the acr... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor