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Determinação de puberdade em cutias (Rodentia:Dasyproctidae) criadas em cativeiro, através da quantificação das células espermatogênicas / Puberty determination in agoutis (Rodentia:Dasyproctidae) maids in captivities, through the quantification of the spermatogenic cells

FERREIRA, Ana Cássia Sarmento 05 February 2002 (has links)
Made available in DSpace on 2011-03-23T21:19:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Item created via OAI harvest from source: http://www.bdtd.ufpa.br/tde_oai/oai2.php on 2011-03-23T21:19:45Z (GMT). Item's OAI Record identifier: oai:bdtd.ufpa.br:284 / The main objective of this work is to determine the period when puberty and sexual maturity occurs, thus classify the stages of seminiferous epithelium cycles (SEC), the relative frequency of the stages and compute the spermatogenesis efficiency. 7 groups with ages ranging from 4 to 17 months old were used, divided in the following way: G1 (4 and 5 months, n= 4), G2 (6 and 7 months, n= 4), G3 (8 and 9 months, n= 4), G4 (10 and 11 months, n= 3), G5 (12 and 13 months, n= 4), G6 (14 and 15 months, n= 3) and G7 (16 and 17 months, n= 2). The Testis samples were obtained by castration under anesthesia and their Testis samples, after biometrics, were fixed in ALFAC during 24 hours; after that, the samples were submitted to routine histological processing, the tissues obtained then stained in HE. The phases of reproductive development were determined by qualification of spermatogenic cells from 10 cross sections of the seminiferous circular boundary tubular/animal, which were in the stage 1 of SEC, previously characterized by the tubule morphology method, and which presented eight SEC stages. From 20 cross sections of the seminiferous circular tubules/animal that did not present complete spermatogenesis. To determine the relative frequency, 100 cross sections of the seminiferous tubules per animal, that had attained puberty were analyzed. The body and testis weights presented a high significative correlation with age and correlated significantly between themselves. The body and weights testis biometrics increases significantly (P<0.05) until the phase of beginning of sexual maturity. The analyzed groups were classified as pre-pubescent (G1), pre-puberty (G2), puberty (G3), post-pubescent 1 (G4), phase post-pubescent 2 (G5 and G6) and adult (G7). The puberty was reached with 8-9 months. Cell population observed in this phase was significant to the others (P<0.05) from the post-pubescent 1 on it was observed a non significative increase (P<0.05) until the beginning of the sexual maturity, nearby the 16 17 months. The spermatogenic cells presented high significative correlation with testis weights. The tubule diameter increases significantly (P<0.05) among the groups, corresponding to the enlargement of the cells in its interior. This result presented a high significative correlation with testis weights. After 1600 analysis of seminiferous tubules of eight stages characterized by the tubule morphology method, the most frequent inside the seminiferous tubule was 5 followed by 2 and 1, respectively, namely, these stages were founded in 21,2%, 18,8% and 16,8% of the tubules analyzed. After group of stages frequencies, the post meiotic phase, had a higher frequency, and it was not significant to the others. / A cutia (Dasyprocta spp) é um roedor de médio porte, que apresenta o hábito de enterrar parte de seus alimentos, principalmente sementes, é considerado um dispersor em potencial, pois contribui com o reflorestamento natural. Por ser uma espécie muito procurada para consumo na área rural da Amazônia, o manejo em cativeiro e o conhecimento dos seus aspectos reprodutivos são formas alternativas para a criação de programas de produção e preservação dessa espécie com potencial econômico. O objetivo do presente trabalho, foi determinar o período que ocorre a puberdade, caracterizar os estádios do Ciclo do Epitélio Seminífero (CES), determinar a freqüência relativa dos estádios, calcular o rendimento geral da espermatogênese e o índice das células de sertoli. Foram utilizados 7 grupos com idade variando de 4 a 17 meses, os animais foram divididos em G1 (4 e 5 meses, n=4), G2 (6 e 7 meses, n=4), G3 (8 e 9 meses, n=4), G4 (10 e 11 meses, n=3), G5 (12 e 13 meses, n=4), G6 (14 e 15 meses, n=3) e G7 (16 e 17 meses, n=2). Ao atingir a idade programada os animais foram castrados, sob anestesia, e as amostras testiculares após biometria foram fixadas em ALFAC por 24 horas, submetidas ao processamento histológico de rotina, foram realizados cortes de 5 mm de espessura e os tecidos obtidos corados com HE. As fases de desenvolvimento reprodutivo, incluindo a puberdade, foram determinadas através da quantificação das células espermatogênicas de 10 túbulos seminíferos/animal com o contorno circular, os quais se encontravam no estádio I do CES, previamente caracterizado pelo método da morfologia tubular, que apresentou oito estádios do CES, e de 20 túbulos seminíferos/animal que não apresentavam espermatogênese completa, o número real das células foi obtido através da correção dos números brutos pelo diâmetro nuclear/nucleolar médio e espessura do corte histológico. Para determinar a freqüência relativa, 100 túbulos seminíferos de cada animal que já havia atingido a puberdade foram analisados. Os pesos corporal e testicular apresentaram correlações significativas com a idade e entre si. O peso corporal e biometria testicular aumentaram significativamente (P<0.05) até a maturidade sexual, onde na puberdade o PC e PT foram (1.903 + 0.55 Kg; 1.8 + 1.4 g, respectivamente) e na fase adulta foram (2.825 + 0.11Kg; 6.1 + 0.37g). Os grupos analisados foram classificados como G1 impúbere (13.21 + 1.6 mm); G2 pré-puberdade (7.09 + 1.7 mm); G3 puberdade (93.82 + 58.7 mm); G4 Pós-puberdade 1 (164.03 + 10.03 mm); G5 e G6 Pós-puberdade 2 de fase longa (173.8 + 10.5 mm; 185.9 + 1.5 mm) e G7 Adulto (238.8 + 72.6 mm). As células de sertoli, diminuiram significativamente (P<0.05) da fase impúbere (21.7 + 3.5 mm) até a puberdade (9.7 + 4.2 mm) onde iniciaram sua estabilização até a fase adulta (9.03 + 0.01mm). As células espermatogênicas apresentaram correlações altas e significativas com o peso testicular. As médias das seções transversais do diâmetro tubular aumentaram significativamente (P<0.05) entre os grupos analisados, G1 (109.5 + 4.6 mm); G2 (119.7 + 10 mm); G3 (174.6 + 24.1 mm); G4 (240.9 + 14.1 mm); G5 (219.6 + 9.8 mm); G6 (221.1 + 7.9 mm) e G7 (258.1 + 55.3 mm). Após a análise de 1600 túbulos seminíferos, os oito estádios caracterizados pelo método da morfologia tubular apresentaram as seguintes freqüências relativas: I (16.8 + 2.3%); II (18.8 + 3.4%); III (7.6 + 1.3%); IV (11.1 + 1.2%); V (21.2 + 4.2%); VI (10.4 + 3.4%); VII (7.9 + 2.4%); VIII (6.4 + 1.4%). A freqüência conjunta dos estádios foi pré-meiótica (43.5%), meiótica (10.7%) e pós-meiótica (45.8%). Portanto, a puberdade em cutias é alcançada no período de 8 e 9 meses, onde se observa maior produção das células espermatogênicas e estabelecimento das células de sertoli, a partir dessa fase inicia-se uma tentativa de estabilização das células espermatogênicas, o qual é acompanhado por uma tendência a estabilização do crescimento testicular.
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Estudo do mecanismo molecular da progesterona e do estradiol no desenvolvimento  do endométrio de novilhas Nelore pré-púberes / Study of the molecular mechanism of progesterone and estradiol in the development of endometrial prepubertal Nellore heifers

Sousa, Rafael Teixeira de 21 February 2017 (has links)
A elucidação dos eventos fisiológicos, pelos quais os esteroides ovarianos atuam no desenvolvimento endometrial de novilhas pré-púberes, é fundamental para o emprego de ferramentas de manejo reprodutivo que reduzam a idade ao primeiro parto e aumentem a taxa de desfrute do rebanho Nelore. Objetivou-se com este estudo averiguar os efeitos de implante de liberação sustentada de progesterona (DIB) e da manipulação do crescimento folicular, através de aspiração folicular transvaginal (AFTV), sobre mecanismos moleculares de genes modulados pela progesterona (P4) e pelo estradiol (E2) no endométrio de novilhas Nelore pré-púberes. 60 novilhas com 13,9 &#177; 2,9 meses, peso de 273,6 &#177; 5,6 kg, escore de condição corporal 5,9 &#177; 0,7, em uma escala de 0 a 9, sem sinais de ovulação, foram aleatoriamente e equitativamente distribuídas em quatro estratégias hormonais: 1) AFTV1 sem DIB&reg;: submetidas a aspiração folicular transvaginal guiada por ultrassonografia um dia antes do abate (AFTV1), sem o emprego de DIB; 2) AFTV4 sem DIB: também sem DIB e submetidas a aspiração folicular transvaginal guiada por ultrassonografia quatro dias antes do abate (AFTV4); 3) AFTV1 com DIB&reg; submetidas a uso de dispositivo intravaginal de liberação sustentada de progesterona (DIB&reg;, MSD Saúde Animal Brasil), usado previamente por duas vezes em vacas Bos indicus e AFTV1; Grupo 4; com DIB&reg; e AFTV4. Ao final do experimento, 35 animais, que não apresentaram presença de corpo lúteo, foram abatidos e tiveram seus úteros dissecados no lado ipso e contralateral, levando-se em consideração o maior diâmetro de folículo um dia antes do abate. Para a extração do ácido ribonucleico (RNA) total foram selecionados tecidos intercarunculares, obtidos das porções do terço médio do corno uterino direito e esquerdo, de seis animais de cada tratamento, totalizando 48 amostras de RNA total. Após a extração do RNA total e síntese do ácido desoxirribonucleico complementar (cDNA), a abundância dos transcritos foi avaliada empregando PCR em tempo real. Para estudar a regulação endometrial dos receptores de esteroides, foi mensurada a expressão relativa do: receptor de estrógenos alpha (ESR1) e beta (ESR2), receptor de progesterona isoformas A (PGR1), B (PGR2) e C (PGR3), receptor componente de membrana 1 (PGRMC1) e 2 (PGRMC2). Assim como de genes envolvidos em vias de resposta a P4 e ao E2: AQP4 (transporte de água), EGFR, FGF2, FGF2R, VEGFA, WNT5A (proliferação celular), OXTR, LPL, LTF, SERPINA14, SLC2A1 (atividade secretória), MMP2, MMP9 (remodelamento de matriz extracelular) e MUC1 (adesão celular). O GAPDH foi utilizado como gene constitutivo para correção dos resultados de expressão gênica. Os dados foram submetidos a análise de variância, utilizando o PROC MIXED do SAS 9.3. Houve interação entre os efeitos de corno uterino, DIB e AFTV sobre a expressão relativa de ESR1 (P = 0,05); EGFR (P = 0,05); PGR1 (P = 0,02); FGF2 (P = 0,01); FGFR2 (P = 0,10) e LPL (P = 0,04). Também foi verificado interação AFTV x corno uterino sobre a expressão relativa de PGR3 (P = 0,07); PGRMC1 e 2 (P = 0,02; P = 0,01), respectivamente; AQP4 (P = 0,09); MUC1 (P = 0,03); SLC2A1 (P = 0,09). Ocorreu interação DIB x corno uterino sobre a expressão relativa de PGRMC1 e 2 (P = 0,05; P = 0,03), respectivamente; AQP4 (P = 0,09) e OXTR (P = 0,08). E interação AFTV x DIB sobre a expressão de VEGFA (P = 0,09); MMP9 (P = 0,09); WNT5A (P = 0,01); SLC2A1 (P = 0,01). Enquanto que a expressão relativa da SERPINA14 foi influenciada pelo DIB (P = 0,02) e localização do corno uterino (P = 0,05). Estes resultados confirmam a complexa modulação dos receptores de esteroides ovarianos pela presença de DIB&reg; e dia da AFTV, na alteração da ação biológica de genes alvos, no tecido endometrial de novilhas Nelore pré-púberes. Baixos diâmetros foliculares próximo ao abate, aumentaram a expressão relativa de MUC1 no corno contralateral, sugerindo uma menor receptividade neste. Ademais, o aumento do peso uterino em função da inclusão do DIB, possivelmente seja uma consequência da maior abundância de transcritos de SERPINA14 e AQP4, mediados principalmente pelo PGRMC1 e PGRMC2. / The elucidation of the physiological events by which ovarian steroids act on endometrial development of pre-pubertal Nellore heifers, is critical for the for the use of reproductive management tools that reduce the age of first calving and increase the slaughter rate of the Nellore herd. The objective of this study was to investigate the effects of progesterone sustained release implant (DIB) and manipulation of follicular growth, through transvaginal follicular aspiration (TFA), on molecular mechanisms of genes modulated by progesterone (P4) and estradiol (E2) in the molecular mechanisms involved in the endometrial development of pre-pubertal Nellore heifers. Sixty heifers with 13.9 &#177; 2.9 months of age, weight of 273.6 &#177; 5.6 kg, body condition score 5.9 &#177; 0.7, on a scale from 0 to 9, without signs of ovulation, were randomly and evenly distributed into four hormonal strategies: 1) TFA1 without DIB&reg;: submitted to transvaginal follicular aspiration guided by ultrasonography one day before slaughter (TFA1), without the use of DIB; 2) TFA4 without DIB&reg;: also without DIB and submitted to transvaginal follicular aspiration guided by ultrasound four days before slaughter (TFA4); 3) TFA1 with DIB&reg;: Submitted to the use of intravaginal progesterone sustained release device (DIB&reg;, MSD Animal Health Brazil), previously used twice in Bos indicus cows and TFA1; Group 4; with DIB&reg; and TFA4. At the end of the experiment, 35 animals, which did not present a corpus luteum, were slaughtered and had their uterus dissected on the ipso and contralateral sides, taking into account the largest follicle diameter one day before slaughter. For the extraction of total ribonucleic acid (RNA), intercaruncular tissues were obtained from the middle third of the right and left uterine horns of six animals from each treatment, totaling 48 samples of total RNA. After extraction of total RNA and complementary deoxyribonucleic acid (cDNA) synthesis, abundance of the transcripts was assessed using real-time PCR. To study the endometrial regulation of steroid receptors, the relative expression of: alpha (ESR1) and beta (ESR2) estrogen receptor, progesterone receptor isoforms A (PGR1), B (PGR2) and C (PGR3), membrane component receptor 1 (PGRMC1) and 2 (PGRMC2). As well as genes involved in P4 and E2 response pathways: AQP4 (water transport), EGFR, FGF2, FGF2R, VEGFA, WNT5A (cell proliferation), OXTR, LPL, LTF, SERPINA14, SLC2A1 (secretory activity), MMP2, MMP9 (extracellular matrix remodeling) and MUC1 (cell adhesion). GAPDH was used as a constitutive gene for the correction of gene expression results. The data were submitted to analysis of variance, using PROC MIXED of SAS 9.3. There was interaction between the effects of uterine horn, DIB and TFA on the relative expression of ESR1 (P = 0.05); EGFR (P = 0.05); PGR1 (P = 0.02); FGF2 (P = 0.01); FGFR2 (P = 0.10) and LPL (P = 0.04). It was also verified the TFA x uterine interaction on the relative expression of PGR3 (P = 0.07); PGRMC1 and 2 (P = 0.02, P = 0.01, respectively); AQP4 (P = 0.09); MUC1 (P = 0.03); SLC2A1 (P = 0.09). DIB x uterine interaction occurred on the relative expression of PGRMC1 and 2 (P = 0.05; P = 0.03, respectively); AQP4 (P = 0.09) and OXTR (P = 0.08). And TFA x DIB interaction on VEGFA expression (P = 0.09); MMP9 (P = 0.09); WNT5A (P = 0.01); SLC2A1 (P = 0.01). While the relative expression of SERPINA14 was influenced by DIB (P = 0.02) and location of the uterine horn (P = 0.05). These results confirm the complex modulation of ovarian steroid receptors by the presence of DIB&reg; and TFA day in the alteration of the biological action of target genes in the endometrial tissue of prepubertal Nellore heifers. Low follicular diameters close to slaughter, increased the relative expression of MUC1 in the contralateral horn, suggesting a lower receptivity. In addition, increased uterine weight as a function of the DIB&reg; inclusion is possibly a consequence of the greater abundance of SERPINA14 and AQP4 transcripts, mainly mediated by PGRMC1 and PGRMC2.
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Análise econômica da precocidade na puberdade e do diagnóstico da gestação em fêmeas bovinas da raça Nelore e Angus x Nelore / Economic analysis of sexual precocity and pregnancy diagnosis in Nelore and Angus x Nelore cows

Rodriguez, Frederich Diaz 08 March 2017 (has links)
Entre as raças bovinas utilizadas comercialmente para produção de carne no Brasil, a Nelore e o cruzamento Nelore x Angus são de destaque pela adaptação que possuem às condições tropicais. No entanto, é comum que as fêmeas da raça Nelore produzam o primeiro bezerro entre os 44 a 48 meses de idade, fato que reduz a vida útil das matrizes no sistema de produção. Pesquisas desenvolvidas no Laboratório de Nutrição e Reprodução Animal (LNRA) da Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ/USP) e no Laboratório de Fisiologia e Endocrinologia Molecular (LFEM) da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia na (FMVZ/USP), mostram que esta realidade pode ser eventualmente alterada por meio do desenvolvimento de novas técnicas que visam precocidade em alguns eventos da vida produtiva das fêmeas bovinas, como a puberdade e o diagnóstico da gestação. Objetiva-se com a presente pesquisa determinar o efeito na viabilidade econômica de unidades produtivas comerciais dedicadas à produção de bezerros de: i) reduzir o tempo ao qual as fêmeas Nelore e Nelore x Angus chegam à puberdade, oferecendo dois ritmos de crescimento (500 e 1000 g dia-1) em duas fases de crescimento (dos três aos sete meses de idade e dos sete meses de idade até a puberdade); e ii) realizar o diagnóstico da gestação de forma convencional pela ultrassonografia transretal ou de forma precoce a través da quantificação de genes ISGs em células mononucleares do sangue periférico ou utilizando ultrassom com Doppler colorido. Após realizar análise de investimento por período de 16 anos (803 semanas), foram calculados os indicadores econômicos Valor Presente Líquido (VPL), Taxa Interna de Retorno (TIR) e o tempo de recuperação do capital (payback). O VPL foi utilizado para determinar a viabilidade econômica dos sistemas, por meio de regressões múltiplas. Em tais regressões, a variável dependente foi o VPL e o conjunto de variáveis explicativas foram a genética, a nutrição, o tipo de diagnóstico da gestação e os níveis de preços relativos de insumos e produtos. O fato de algumas variáveis explicativas serem qualitativas justificou o uso de variáveis do tipo dummy (0 ou 1). De acordo com os resultados obtidos, realizar o diagnóstico da gestação uma semana antes do tempo normalmente utilizado, elevaria o VPL do empreendimento em, aproximadamente, R$ 2,7 milhões. Após confinamento das novilhas Nelore e Nelore x Angus foi observado nos cenários onde foi oferecido Alto GMD nas duas fases do confinamento melhor desempenho econômico. No entanto, entre os dois grupos genéticos, as novilhas Nelore x Angus apresentaram maior VPL. Finalmente, foi realizado um levantamento do histórico de preços pagos e recebidos pelo produtor rural nos últimos 10 anos. Esta análise permitiu observar que são os preços dos insumos os que mais influenciam a viabilidade dos sistemas. / Among the bovine breeds commercially used for meat production in Brazil, the Nelore and Nelore x Angus crosses are prominent for the adaptation that are useful to tropical conditions. However, it is common for Nelore females to produce the first calf between 44 and 48 months of age, to reduce the useful life of the matrices in the production system. (LNRA) of the Luiz de Queiroz College of Agriculture (ESALQ / USP) and not Laboratory of Physiology and Molecular Endocrinology (LFEM) of the Faculty of Veterinary Medicine and Animal Science at (FMVZ / USP)), show that this reality can be altered by Means of developing new techniques aimed at precocity in some events of life produced by females, such as puberty and diagnosis of gestation. The objective of this study is to investigate the effect of the Nelore and Nelore x Angus females on the economic viability of vegetable production units dedicated to the production of calves. Growth (500 and 1000 g day-1) in two growth stages (from three to seven months of age and two months of age until puberty); And ii) perform the diagnosis of pregnancy in a conventional manner by transrectal ultrasonography or early by quantifying ISG genes in peripheral blood mononuclear cells or using color Doppler ultrasound. After the investment analysis for a period of 16 years (803 weeks), the calculations of economic indicators Net Present Value (NPV), Internal Rate of Return (IRR) and payback time. The NPV was used to determine the economical viability of the systems, through multiple regressions. In such regressions, a dependent variable for the NPV and the set of explanatory variables for a genetics, a nutrition, a type of pregnancy diagnosis and the price levels of inputs and products. The fact that some explanatory variables are qualitative justified for the use of dummy variables (0 or 1). According to the results obtained, carry out the diagnosis of gestation a week before the time used, raise the NPV ventures in about R $ 2.7 million. After confinement of the Nelore and Nelore news x Observations on the scenarios in which the High GMD in the two phases of the confinement was carried out better economic performance. However, between the two genetic groups, such as Nelore x Angus heifers presented higher NPV. Finally, a survey of the price history paid and received by the rural producer in the last 10 years was carried out. This analysis showed that it is the input prices that most influence the systems viability.
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Emprego de diferentes doses de LH suíno na indução e sincronização da puberdade em marrãs / Use of different doses of Swine LH in puberty induction and synchronization in gilts

Rogério Dantas Gama 18 December 2003 (has links)
A pesquisa desenvolvida no Laboratório de Pesquisa em Suínos, da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo, Campus de Pirassununga, estudou os efeitos de diferentes doses de LH suíno exógeno na indução e sincronização da puberdade em marrãs. Sessenta e sete fêmeas Camborough - 22 Agroceres PIC® com 140 dias de idade e 86 kg de peso vivo foram submetidas aos seguintes tratamentos: controle T1 (n = 21) - emprego de 600 UI de eCG (gonadotrofina coriônica eqüina) (Novormon&reg) e 72 horas depois 5,0 mg de LH (hormônio luteinizante) (Lutropin® - V); tratamento 2 T2(n = 23) - 600 UI de eCG (Novormon®) e, 72 horas depois, 2,5 mg de LH (Lutropin® - V) e tratamento 3 T3(n=23) - 600 UI de eCG (Novormon®) e, 72 horas depois, 1,25 mg de LH (Lutropin® - V). O estímulo com macho adulto era feito duas vezes ao dia, sendo a ovulação detectada pela ultra-sonografia transcutânea e a taxa de ovulação, pela contagem do número de corpos lúteos (CL) ao abate. O percentual de estro foi semelhante entre T1 (42,85%), T2 (60,87%) e T3 (52,18%), não havendo diferença estatística significativa (P=0,418). O percentual de fêmeas com degenerações císticas foi de 33,33% (T1); 39,13%(T2) e 39,13%(T3), não havendo diferença significativa entre os tratamentos (P=0,9057). O melhor intervalo tratamento - ovulação (LH - OV) ocorreu no grupo de fêmeas submetidas ao T2 (38,26 ± 2,84) demonstrado pela menor dispersão dos desvios comparando com T1 (37,17 ± 4,07) e T3 (36,25± 5,69), sendo o valor do desvio padrão diferente estatisticamente do de T3, porém igual ao valor de T1 sendo ainda o valor de T1 igual ao de T3(P<0,05). O intervalo entre a aplicação de eCG e estro do T1(85,33 ± 12,64 horas), T2 (84,40 ±17,50 horas) e T3 (89,14 ± 14,66 horas) foram semelhantes não havendo diferença estatística significativa (P= 0,6954). A duração do estro foi semelhante entre os três tratamentos (P = 0,2653), sendo de 41,44 ± 16,30 horas (T1); 48,57 ± 16,29 horas (T2); 39,33 ± 11,42 horas (T3). O número de Corpos Lúteos em T1 foi de 9,61 ± 5,43 (1-25); em T2 de 9,86 ±3,32 (1-16); em T3 de 8,13 ± 5,52 (0-20), não constatando diferença significativa (P=0,4259). Os menores desvios observados no tratamento T2 sugerem que a combinação de 600 UI de eCG seguida por 2,5 mg de LH após 72 horas, foi a mais efetiva na indução e sincronização do estro e ovulação em fêmeas suínas pré-púberes, considerando a metodologia experimental empregada. Na segunda parte do experimento, foram realizadas inseminações artificiais em tempo fixo em dois esquemas (E) diferentes: O (E1) recebeu uma única dose 36 h após a aplicação de LH e, o (E2) recebeu a primeira dose 24 h e a segunda dose 36 h após a aplicação de LH. As marrãs foram abatidas com 5 dias de gestação e os embriões foram colhidos. Não verificou-se diferença estatística entre os valores obtidos na taxa de recuperação (36,81±5,21 para E1 e 36,91±4,62 para E2), taxa de viabilidade embrionária (TVE) (59,28±6,91 para E1 e 62,25±6,26 para E2), taxa de fecundação (TF) (72,60±7,06 para E1 e 79,33±6,26 para E2) e número de estruturas totais (3,41±0,57 para E1 e 3,77±0,50 para E2) entre E1 e E2. Houve interação significativa entre tratamento e número de doses de sêmen para as variáveis TVE (T1=60,51± 8,18, T2=68,64±7,94 e T3=53,14±7,8) e TF (73,50±8,36 para T1, 89,93±8,11 para T2 e 64,46±8,05 para T3) (P=0,0036). Novos estudos envolvendo aplicação dos hormônios e n° de doses de sêmen, necessitam serem repetidos. / The research carried out at the Swine Research Laboratory, of FMVZ - USP, Campus of Pirassununga, studied the effects of the use of different hormonal doses on the induction and synchronization of puberty in gilts. Sixty-seven Camborough 22 Agroceres PIC® females with 140 days of age and 86kg of body weight were submitted to the following treatments: control T1 (n=21) - use of 600 IU of eCG (equine chorionic gonadotrophin) (Novormon®) and 72 hours later 5,0 mg of LH (Luteinizing hormone) (Lutropin® - V); treatment 2 T2 (n = 23) - 600 UI of eCG (Novormon®) and 72 hours later 2,5mg of LH (Lutropin® - V) and treatment 3 T3 (n = 23) - 600 UI of eCG (Novormon®) and 72 hours later 1,25mg of LH (Lutropin® - V). Adult boar stimulation was implemented twice a day, and ovulation was detected through transcutaneous ultrasonography and ovulation rate by corpora lutea (CL) counting at slaughter. The percentage of estrus was similar in T1 (42,85%), T2 (60,87%) and T3 (52,18%), and there was no significant statistic difference (P=0,418). The percentage of females with cystic degeneration was 33,33% (T1); 39,13%(T2) and 39,13%(T3), being no significant difference between the treatments (P=0,9057). The best interval between treatment and estrus (LH - OV) occurred in the group of females submitted to T2 (38,26 ± 2,84) demonstrated by lesser dispersion of the deviations comparing to T1 (37,17 ± 4,07) and T3 (36,25± 5,69); standard deviation was statistically different from T3, but similar to T1, and T1 was also similar to T3 (P<0,05). The interval between the administration of eCG and estrus in T1 (85,33 ± 12,64 hours), T2 (84,40 ±17,50 hours) and T3 (89,14 ± 14,66 hours) were similar, and there was no significant statistic difference (P= 0,6954). The duration of estrous was similar among the three treatments (P = 0,2653), being 41,44 ± 16,30 hours (T1); 48,57 ± 16,29 hours (T2); 39,33 ± 11,42 hours (T3). The number Corpus Luteum in T1 was 9,61 ± 5,43 (1-25); in T2 was 9,86 ±3,32 (1-16); in T3 was 8,13 ± 5,52 (0-20), and there was no significant difference (P=0,4259). The minor deviations observed in treatment T2 suggest that the association of 600 UI of eCG followed by 2,5 mg of LH after 72 hours, was more effective in the induction and synchronization of estrous and ovulation in pre-puberty female swine, considering the experimental methodology used. In the second part of the experiment, artificial insemination was performed at determined timing following two different programs (E). E1 received a single dose 36 hours after administration of LH and E2 received the first dose after 24 hours and the second dose 36 hours after the administration of LH. The gilts were slaughtered with 5 days of pregnancy and the embryos were collected. No statistic difference was observed among the values obtained for recovery rate (36,81±5,21 for E1 and 36,91±4,62 for E2), embryonary viability rate (TVE) (59,28±6,91 for E1 and 62,25±6,26 for E2), fecundation rate (TF) (72,60±7,06 for E1 and 79,33±6,26 for E2) and number of total structures (3,41±0,57 for E1 and 3,77±0,50 for E2) among E1 and E2. There was significant interaction between treatment and the number of doses of semen for the values TVE (T1=60,51± 8,18, T2=68,64±7,94 and T3=53,14±7,8) and TF (73,50±8,36 for T1, 89,93±8,11 for T2 and 64,46±8,05 for T3) (P=0,0036). New research involving the use of hormones and the number of doses of semen need to be repeated.
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Emprego de progesterona injetável de longa ação para pré-sincronização da ovulação em novilhas Nelore / Long-acting injectable progesterone for pre-synchronization of ovulation in Nelore heifers

Rafaela Sanchez de Lima 15 December 2017 (has links)
O objetivo desse estudo foi avaliar a eficiência do protocolo de pré-sincronização da ovulação com progesterona (P4) injetável de longa ação em novilhas e a influência de seus efeitos sobre a taxa de prenhez do protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) J-Synch adaptado. Novilhas Nelore (n=638; 21,5&#177;3,1 meses e 295&#177;23,3 kg) foram classificadas por ultrassonografia nos D22 e D12 em púberes (presença de corpo lúteo (CL) no D22 e/ou D12) ou pré-púberes (ausência de CL em ambas avaliações) e receberam 150 mg de P4 de longa ação I.M. no D22 (tratadas) ou não (controle), perfazendo arranjo fatorial 2X2. No D12, apenas as novilhas tratadas, receberam 150 &micro;g de D-cloprostenol (PGF, I.M.) e 1 mg de benzoato de estradiol (BE, I.M.). No D0, avaliou-se a ciclicidade das novilhas e todas foram sincronizadas de acordo com protocolo J-Synch adaptado: D0: dispositivo intravaginal de P4 (1 g) + 2 mg BE e 75 &micro;g PGF; D6: remoção do dispositivo + 150 micro;g PGF. Uma detecção de estro foi realizada 48 h após a retirada dos dispositivos e as detectadas em estro foram inseminadas 12 h depois, ou em tempo fixo no D9, com aplicação I.M. de 10,5 &micro;g acetato de buserelina. Exames ultrassonográficos foram realizados para mensurar o diâmetro do maior folículo e foi determinado um escore uterino (EU=1-6). O diagnóstico de gestação foi realizado no D39. Após 12 dias do tratamento (D0), menor proporção de novilhas, apresentando CL, foi verificada no grupo controle, quando comparada à de novilhas tratadas. Esta diferença foi mais acentuada nas pré-púberes (controle: 11,4% (23/199) vs. tratamento: 63,7% (136/215); P&lt;0,0001), quando comparada às púberes (controle: 79,5% (92/113) vs. tratamento: 91,2% (102/111); P=0,002). A taxa de prenhez geral foi de 42,2% e tendeu a ser influenciada por tratamento (P=0,07). Novilhas do grupo controle apresentaram menor taxa de prenhez, de manifestação de estro 48 h após a retirada do dispositivo (P=0,02) e de ovulação antecipada (P=0,007), quando comparadas às novilhas tratadas (37,3% (119/312) vs. 44,7% (150/326); 15,9% (48/312) vs. 23,3% (52/224); 7,5% (23/258) vs. 15,4% (42/244), respectivamente). Para o diâmetro do folículo dominante, no momento da IATF (D9), houve interação entre status puberal e tratamento (P&lt;0,05), sendo que as novilhas tratadas não diferiram entre si (pré-púberes: 11,1&#177;0,13 mm vs. púberes: 11,1&#177;0,17 mm; P=0,99). Para as novilhas do controle, as pré-púberes apresentaram menores diâmetros foliculares (10,9&#177;0,13 mm), quando comparados aos das púberes (11,5&#177;0,17 mm, P=0,03). A probabilidade de ciclicidade foi influenciada pelo diâmetro do folículo no D22 e no D12, para as novilhas pré-púberes tratadas (P&lt;0,05). O uso da P4 aumentou o diâmetro folicular e o EU, no D12, para as novilhas pré-púberes tratadas, quando comparadas às controles (P&lt;0,05). A taxa de prenhez foi maior nas novilhas que manifestaram estro 48 h após a retirada do dispositivo e foram inseminadas com 60h (60h: 66,1% (85/124); IATF: 34,8% (185/515)), e nas novilhas que apresentaram CL no D0 (com CL: 51,5% (181/353); sem CL: 30,5% (89/286)). Conclui-se que o protocolo de pré-sincronização com P4 injetável aumenta a porcentagem de novilhas ciclando e tende a aumentar a taxa de prenhez apresentada pelo protocolo J-Synch adaptado. / The objective of this study was to evaluate the effect of long-acting injectable progesterone (P4) pre-synchronization protocol and the influence of its effects on the pregnancy rate of the timed artificial insemination (TAI) J -Synch adapted protocol. Nelore heifers (n=638; 21.5&#177;3.1 months and 295&#177;23.3 kg) were classified by ultrasonography on D22 and D12 in pubertal (with corpus luteum (CL) on D22 and/or D12) or prepubertal (absence of CL in both evaluations), and received 150 mg of long-acting P4 I.M. on D22 (treatment) or not (control), making a factorial arrangement 2X2. On D12, only heifers treated with P4 received 150 &micro;g of D-cloprostenol (PGF, I.M.) and 1 mg of estradiol benzoate (EB, I.M.). On D0, presence of CL was evaluated and all heifers were synchronized according to the adapted J-Synch protocol: D0: intravaginal release P4 device (1 g) + 2 mg EB and 75 &micro;g PGF; D6: removal of the P4 device + 150 &micro;g PGF. Animals detected in estrus at 48 hours after device removal were inseminated 12 h after or at fixed time on D9, with application of 10,5 &micro;g buserelin acetate I.M. The largest follicular diameter was evaluated by ultrasound and was determined a uterine score (US= 1-6). The pregnancy diagnostic was performed on D39. After 12 days of treatment (D0), lowest proportion of heifers presenting CL was verified in control group, when compared to treated heifers. This difference was more pronounced in the prepubertal (control: 11.4% (23/199) vs. treatment: 63.7% (136/215); P&lt;0,0001), when compared to pubertal (control: 79.5% (92/113) vs. treatament: 91.2% (102/111); P=0,002). The pregnancy rate was 42.2% and tended to be influenced by treatment (P=0.07). Control heifers had lower pregnancy rate, estrus manifestation 48 h after device remotion (P = 0.02) and early ovulation (P = 0.007), when compared to treated heifers (37.3% (119/312) vs. 44.7% (150/326); 15.9% (48/312) vs. 23.3% (52/224); 7.5% (23/258) vs. 15.4% (42/244), respectively). For diameter of the dominant follicle at TAI (D9) there was interaction between pubertal status and treatment (P&lt;0,05), and the two treated groups did not differ (prepubertal: 11.1&#177;0.13 mm vs. pubertal: 11.1&#177;0.17 mm; P=0,99). For control heifers, follicular diameter was smaller for prepubertal (10.9 &#177; 0.13 mm) than for pubertal (11.5 &#177; 0.17 mm, P = 0.03). Probability of cyclicity was influenced by follicular diameter on D22 and D12, for treated prepubertal heifers (P &lt;0.05). Use of P4 increased the follicular diameter and US on D12 for prepubertal heifers treated, when compared to controls (P &lt;0.05). Pregnancy rates was greater in heifers that showed estrus 48 h after the device was removed and were inseminated with 60h (60h: 66.1% (85/124); TAI: 34.8% (185/515)), and in heifers with CL on D0 (with CL: 51.5% (181/353); without CL: 30.5% (89/286)). In conclusion, pre-synchronization protocol with long-acting P4 increases the percentage of cyclic heifers and tends to increase the pregnancy rate after J-Synch adapted protocol.
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Análise da expressão diferencial de genes do folículo ovariano de fêmeas pré-púberes e púberes Bos primigenius indicus (Nelore) por meio da Análise Serial de Expressão Gênica (SAGE) / Analysis of differential gene expression of ovarian follicle from prepubertal and pubertal Bos primigenius indicus (Nelore) females by Serial Analysis of Gene Expression (SAGE)

Lucia Helena Sider 28 March 2005 (has links)
A puberdade é o momento quando um mamífero, macho ou fêmea, se torna capaz de produzir gametas viáveis e exibir comportamento sexual completo. Trata-se do resultado do ajuste gradativo entre o aumento da atividade gonadotrófica e a habilidade das gônadas em assumir simultaneamente a esteroidogênese e a gametogênese. Um dos principais fatores que influenciam o início à puberdade é o genético. A puberdade é uma característica fisiológica originada por muitos fatores (orgânicos e ambientais), que relacionam-se com a expressão de diversos genes, muitos dos quais ainda com funções desconhecidas. Metodologias para a análise da expressão gênica diferencial em tecidos, em particular a Análise Serial de Expressão Gênica (SAGE), incluem ferramentas que permitem a análise global e simultânea de vários transcritos de um determinado tecido, sejam eles conhecidos ou não, fornecendo informações sobre o padrão de expressão gênica de um determinado tipo celular de maneira qualitativa e semi-quantitativa. O objetivo do presente projeto foi analisar, por meio da técnica de SAGE, a expressão gênica diferencial no folículo ovariano de fêmeas bovinas da raça Nelore púberes e pré-púberes, segundo o critério da apresentação ou não de ondas de crescimento folicular que culminavam com a ovulação.. Um total de 14.531 e 14.285 tags tiveram sua seqüência de DNA determinada, revelando a existência de 6.840 e 6.386 genes únicos (biblioteca das novilhas pré-púberes e púberes respectivamente). A comparação entre as duas bibliotecas revelou um total de 127 tags diferencialmente expressos (P<0,05). Os folículos ovarianos de novilhas púberes apresentaram expressão mais elevada de algumas enzimas esteroidogências (CYP11A1 e CYP19) e do transportador de colesterol para a mitocôndria (StAR) indicando intensa atividade esteroidogência (produção de estrógeno) quando comparada ao folículo das bezerras pré-púberes. Além disso, o CTGF (fator de crescimento do tecido conectivo) e o TIMP2 (inibidor tecidual de metaloproteinases) foram mais abundantes nos folículos dos animais púberes, indicando que os mesmos já iniciaram o processo de luteinização, sem entrentanto iniciar o processo de ruptura da matriz extracelular que ocorre na ovulação. A maior expressão de genes relacionados ao metabolismo da matriz extracelular e do citoesqueleto (como por exemplo a osteonectina, a actina e proteínas relacionadas à actina) sugere que os folículos dos animais púberes estão se preparando para a remodelação tecidual. A maior expressão de conexina 43 (gap junction protein) nos folículos dos animais púberes sugere uma intensa comunicação das células da granulosa entre si e com o oócito quando comparadas aos folículos das bezerras pré-púberes. Dentre os genes diferencialmente expressos e mais abundantes no folículo das bezerras pré-púberes, destacou-se o gene da proopiomelanocortina (POMC), que codifica vários fatores hipofisários. Os conhecimentos gerados por este trabalho poderão ser úteis para a identificação de marcadores genéticos para aplicação em programas de seleção assistida por marcadores / Puberty is the stage where any mammal, male or female, becomes able to produce viable gametes and manifest complete sexual behavior. These are results from the gradative adjustment between the increase in gonadotrophic activity and the ability of gonads in undergoing simultaneously both steroidogenesis and gametogenesis. One of the major factors interferring with puberty initiation is the genetics. Puberty is a physiological process controlled by several factors (organic and environmental) related with the expression of several genes, most of them with unknown function. Differential gene expression approaches, in particular the Serial Analysis of Gene Expression (SAGE), include tools that allow the global and simultaneous analysis of several transcripts from a given tissue, being known or unknown, providing qualitative and semi-quantitative information about the genetic profiles of any cellular type of interest. Using the SAGE approach, the aim of the present study was to analyse the differential gene expression profiles of ovarian follicles from pubertal and pre-pubertal Nelore breed females, observed for the presence or not of follicular growth waves ending in an ovulation, A total of 14,531 and 14,285 tags had their DNA sequences determined, revealing the existence of 6,840 and 6,386 unique tags (pre-pubertal and pubertal follicle libraries respectively). Comparison between the two SAGE libraries revealed 127 differentially expressed genes (P<0,05). Follicles from pubertal heifers showed increased expression of some steroidogenic enzymes (CYP11A1 and CYP19) and StAR, the mitochondrial cholesterol transporter, which together indicates a marked steroidogenic activity (oestrogen production), when compared with follicles from pre-pubertal heifers. Furthermore, connective tissue growth factor (CTGF) and TIMP2 (tissue inhibitor of metalloproteinases 2) were shown to be increased in pubertal follicles, indicating the starting of luteinization proccess, without however initiating the rupture of extracellular matrix, which takes place in ovulation. Higher levels of expression presented by extracellular matrix and cytoskeletal related genes (as examples osteonectin, actin and actin-related proteins) also indicate that the follicle from pubertal heifers is at the verge of tissue remodelation. The higher expression of connexin 43 (gap junction protein) indicated that this follicle shows a more intense communication among granulosa cells and between these and the oocyte, as compared to the pre-pubertal calves follicle. Among the differentially expressed genes more abundant in the pre-pubertal follicle is the proopiomelanocortin gene (POMC), which codifies to some hypophiseal factors. The knowledge generated by this study may contribute to the identification of genetic markers to be used in marker assisted selection programmes
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Mecanismos neuroendócrinos envolvidos na puberdade de novilhas da raça Nelore / Neuroendocrine mechanisms evolved in Nellore Heifer\'s puberty

Daniel de Jesus Cardoso de Oliveira 13 December 2006 (has links)
O presente trabalho teve por objetivo investigar a variação na secreção de LH em resposta ao tratamento com neurotransmissores, na presença ou não de esteróides gonadais e desta forma gerar informações sobre os mecanismos neuroendócrinos envolvidos na maturação sexual de novilhas da raça Nelore. A concentração de LH foi quantificada por radioimunoensaio e as novilhas ovariectomizadas (OVX) apresentaram maior concentração basal de LH (P&le;0,05), que as novilhas inteiras (INT). A administração de um antagonista gabaérgico (picrotoxina, 0,18 mg/kg, iv, amostras 15 min por 10 h) aos 8, 10, 14 e 17 meses de idade, aumentou (P&le;0,05) a concentração média e área total de secreção de LH nas novilhas INT tratadas aos 14 meses, a área total dos picos e área do maior pico de secreção de LH foi maior (P&le;0,05) nas novilhas OVX aos 14 e 17 meses de idade . A administração de um antagonista dopaminérgico (sulpiride, 0,59 mg/kg, sc, amostras 15 min por 10 h) aos 8, 12 e 16 meses de idade diminuiu (P&le;0,05) a secreção de LH (concentração média, área total, área total dos picos e área do maior pico secreção de LH) nas novilhas OVX aos 8 meses de idade. A administração de um estimulador alfa-adrenérgico (clonidina, 10 µg/kg, iv, amostras 15 min por 4 h) aos 8, 12 e 15 meses de idade, diminuiu (P&le;0,05) o número de picos nas novilhas OVX com 8 meses de idade. A administração do 17&beta;-estradiol (2 µg/kg, iv, amostra 15 min por 3 h, 1 h por 7 h e 3 h por 22 h) aos 10, 13 e 17 meses de idade diminuiu a diferença (P&ge;0,05) entre os grupos OVX e INT em relação ao número de picos, área total de picos, área do maior pico e tempo necessário para acontecer o maior pico. Foi avaliada a secreção de LH da desmama à primeira ovulação em novilhas INT e OVX. A concentração de LH aumentou durante a maturação sexual, tanto nas novilhas INT quanto nas OVX. O número de picos de secreção de LH e amplitude máxima de secreção de LH foi maior (P&le;0,05) nas novilhas OVX com o aproximar da primeira ovulação. Os resultados indicam uma diminuição da sensibilidade do hipotálamo aos esteróides gonadais durante o processo de maturação sexual nas novilhas da raça Nelore e a participação alternada de neurotransmissores, inibindo e estimulando a secreção de LH. Concluímos que, em novilhas pré-púberes da raça Nelore o desenvolvimento da retroalimentação positiva aos esteróides gonadais no hipotálamo foi importante para aumentar a secreção de LH antes da primeira ovulação, com a participação de neurotransmissores estimulando ou inibindo a secreção de LH. / The variation on LH secretion after neurotransmitter administration, on the presence or absence of gonadal steroid, was investigated, generating information about the mechanisms evolved on sexual maturation in Nellore heifers. LH concentration was quantified by RIA. As expected ovariectomized heifers higher basal LH concentration (P&le;0,05) than intact heifers. The picrotoxin administration (GABA antagonist, 0,18 mg/kg, iv, samples 15 min for 10 h) at 8, 10, 14 and 17 months of age increased (P&le;0,05) average concentration and total secretion area on intact treated heifers at 14 months and peak total area and area of highest peal on ovariectomized heifers at 14 and 17 months of age. The dopaminergic antagonist (sulpiride, 0.59 mg/kg, sc, sample 15 min for 10 h) administrated at 8, 12 and 16 months of age decreased (P&le;0,05) LH secretion (average levels, total peak area and area of the highest secretion peak) on ovariectomized heifers at 8 months of age. The administration of an alfa-adrenérgic stimulatory (clonidine 10 µg/kg, iv, samples 15 min for 4 h) at 8, 12 and 15 months of age decreased (P&le;0,05) decreased the number of peaks at 8 months of age. 17&beta;-estradiol administration (2 µg/kg, iv, samples every 15 min for 3 h, every 1 h for 7 h and every 3 h for 22 h) decreased the differences between ovariectomized and intact heifers on number of peaks, total peak area, highest peak area and time to highest peak occurrence. The LH secretion from weaning to first ovulation in non treated intact and ovariectomized heifers was also evaluated. LH concentration increase during sexual maturation in both ovariectomized and intact heifers. The number of peaks, and maximum LH secretion amplitude was higher in ovariectomized heifer closest to first ovulation, when compared to intact heifers. The results suggested a decrease on hipothalamus sensitivity to gonadal steroid during the sexual maturation in Nelore heifer associated with neurotransmitter participation either stimulating or inhibiting LH secretion. It was possible to conclude that the decrease of negative feedback associated with the increase on positive feedback of gonadal steroids over hipothalamus was necessary to increase LH secretion before first ovulation, that was associated with neurotransmitter participation on LH secretion.
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Efeito do escore do trato reprodutivo na dinâmica folicular e dopplerfluxometria útero-ovariana em novilhas nelore (Bos indicus) / Effect of reproductive tract score on follicular dynamics and uterus-ovarian Doppler flow in nellore heifers (Bos indicus)

França, Itamara Gomes de 31 August 2016 (has links)
Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-06-26T17:30:38Z No. of bitstreams: 1 ItamaraFranca.pdf: 611104 bytes, checksum: 4827358f1120e6b66cf862bb0635763f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-26T17:30:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ItamaraFranca.pdf: 611104 bytes, checksum: 4827358f1120e6b66cf862bb0635763f (MD5) Previous issue date: 2016-08-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão (FAPEMA) / The objective of this study was to evaluate the effect of the reproductive tract scoring (RTS) on follicular dynamics and utero-ovarian doppleflowmetry in Bos indicus heifers of nelore. Were used 34 females cattle the females were classified into three categories, according to RTS: RTS 1 (diameter of the uterine horns <15 mm and diameter of follicles <8 mm; RTS 2 (diameter of the uterine horns ≥ 15mm and follicles ≥8 mm; RTS3 (diameter of the uterine horns ≥15mm and presence of CL). Then, were synchronized with progestin/estradiol-based protocol, plus prostaglandin, for padronization of the follicular and luteal status. The monitoring of the follicular dynamics and utero-ovarian flowmetry was performed by B-mode, color doppler and spectral doppler ultrasonography during three times: Day 0 (D0; ear implant insertion); Day 10 (D10, detection preovulatory follicles) and; Day 18 (D18; determination of ovulation by detection of corpora lutea). The uterine diameter showed a significant increase between D0 and D10 in both categories. The ovulation rate was higher in the RTS 3 (P<0.05). There was no effect of RTS nor of examination day on vascularity and number of pixels of the the ovary (P>0.05). In the follicular dominance phase (D10), the higher vascularization occurred in RTS2, followed by RTS 1 and 3, respectively (P<0.05). The uterine PI and RI were not affected by RTS nor by the examination day (P>0.05). However, when these same rates were evaluated in the ovary, the RI showed significant effect of RTS and RTS x day (P=0.02). Progesterone concentrations at the beginning of trial (D0) were higher in the RTS 3 (P<0.05) and estradiol did not differ significantly between categories (P<0.05) at day of follicular dominance (D10). It was concluded that RTS influences the follicular growth, ovulation rate and vascularization of the uterine horns. / Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito do escore do trato reprodutivo (ETR) na dinâmica folicular e dopplerfluxometria útero-ovariana em novilhas da raça nelore (Bos indicus). Utilizou-se 34 fêmeas que foram classificadas em três categorias, de acordo com o ETR: ETR 1 (novilhas com diâmetro dos cornos uterinos <15mm e com folículos de diâmetro <8mm; ETR2 (novilhas com diâmetro dos cornos uterinos ≥ 15mm e folículos ≥8 mm e; ETR3 (novilhas com diâmetro dos cornos uterinos ≥15mm e presença de corpo lúteo (CL). Em seguida, foram sincronizadas com protocolo à base de progestágeno/estradiol/prostaglandina para padronização do status folicular e luteínico. O acompanhamento da dinâmica folicular e fluxometria útero-ovariana foram realizadas por ultrassonografia (US) nos modos bidimensional, color doppler e espectral doppler em 3 períodos pré-determinados: Dia 0 (D0; inserção do implante auricular); Dia 10 (D10; detecção folículo pré-ovulatório) e; Dia 18 (D18; determinação da ovulação por meio da detecção do corpo lúteo). O diâmetro uterino apresentou um aumento significativo entre o D0 e D10 em ambas as categorias. A taxa de ovulação foi maior no ETR 3 (P<0,05). Não houve efeito de ETR ou dia de exame na área de vascularização e número de pixels no ovário (P>0,05). Na fase de dominância folicular (D10), a maior perfusão ocorreu no ETR2, seguida pelos ETRs 1 e 3, respectivamente (P<0,05). O IP e o IR uterinos não foram influenciados pelo ETR nem pelo dia do exame (P>0,05). Entretanto, quando estes mesmos índices foram avaliados no ovário, nota-se que o RI manifestou efeito significativo do ETR e interação ETR x dia do exame (P=0,02). As concentrações plasmáticas de progesterona ao início do experimento (D0) foram maiores no ETR 3 (P<0,05) e o estradiol não diferiu significativamente entre as categorias (P<0,05) na fase de dominância folicular sincronizada (D10). Conclui-se que o ETR influencia no crescimento folicular, na taxa de ovulação e na vascularização dos cornos uterinos.
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Gene expression analyses on adipose tissue of Nellore peripubertal heifers reveal genes that have an impact on reproductive physiology / Análise da expressão gênica do tecido adiposo em novilhas Nelore púberes revela interação entre tecidos reprodutivos

Paula Suarez Henriques 14 February 2017 (has links)
Pubertal development is an outcome of genes\' interaction producing molecular signals that rule physiological mechanisms. Understanding the genetic changes surrounding the peripubertal period in Nellore heifers could unveil certain differences in age at puberty because they reach sexual maturity much later than European heifers. The adipose tissue regulates energy metabolism and is an endocrine organ with active participation in reproductive processes .The present study aimed at understanding the functions of the adipose tissue around pubertal time in Nellore heifers. Our strategy was to search for differences in gene expression between prepubertal and pubertal animals. We quantified gene expression in the adipose tissue for Nellore heifers who reached puberty according to either the early or late pattern. This research was done on 30 Nellore heifers monitored weekly from 230 kg bodyweight until the onset of puberty through gynaecological ultrasound examination. The onset of puberty was defined by the presence of corpus luteum in the ovary and blood progesterone > 1 ng/ml. Adipose tissue was collected through subcutaneous biopsy; the first biopsy was done when heifers reached 230 kilos bodyweight and subsequently once a month until they entered puberty. Biopsies were collected of each heifer that reached puberty alongside its half-sister who had not reached puberty. We analysed samples of six early pubertal heifers and their six late pubertal sisters at two different stages: at the time of ovulation and approximately 50 days before ovulation. The RNA was extracted from the biopsies\' tissue and gene expression quantified through RNA sequencing. There were nine genes differentially expressed in pubertal heifers that have been found previously correlated with reproductive traits and/or processes in mammals on other studies. These genes were APOD, CYP17A1, DNMT3B, AKR1C4, TENM1/ODZ3, HPSE, SMPD3, FAM134B and CYP26B1, already found expressed in adipocytes, hypothalamus, ovaries and uterus, corroborating previous knowledge of a link among energy metabolism, reproductive organs and neural influence. By measuring the genetic changes and correlating them with known physiological mechanisms on the nervous system and reproductive organs during puberty, we detected genes expressed here that are related to modifications in the organism as a whole. Therefore the adipose tissue may be regarded as an instrument to indicate what is going on during reproductive processes. The results presented here may aid in a better understanding of genetic changes happening during peripubertal period. / O desenvolvimento púbere é o resultado da interação de genes que produzem sinais moleculares regulando os mecanismos fisiológicos. A compreensão das mudanças genéticas que permeiam o período peripuberal em novilhas Nelore (Bos indicus) poderia desvendar o porquê das diferenças em idade a puberdade, pois elas atingem a maturidade sexual mais tarde que o gado europeu (Bos taurus). O tecido adiposo regula o metabolismo de energia e é um órgão endócrino que tem participação ativa em processos reprodutivos. O presente estudo teve como objetivo entender as funções do tecido adiposo na época peripubertal em novilhas Nelore. Nossa estratégia foi procurar diferenças em expressão gênica entre animais pré-púberes e púberes. Nós quantificamos a expressão gênica no tecido adiposo de novilhas Nelores precoces ou tardias. A pesquisa foi feita em 30 novilhas Nelore, monitoradas semanalmente a partir do momento em que atingiram 230 kg de peso até a manifestação da puberdade por exame de ultrassom ginecológico. O momento da puberdade foi definido pela presença de corpo lúteo no ovário e concentração sanguínea de progesterona maior que > 1 ng/ml. O tecido adiposo foi coletado por biópsia subcutânea; a primeira biópsia foi feita quando as novilhas alcançaram 230 quilos de peso e subsequentemente uma vez por mês ate que elas entrassem em puberdade. As biópsias foram coletadas de cada novilha que atingiu a puberdade e de sua meia-irmã que não tinha atingido a puberdade. Nós analisamos amostras de seis novilhas púberes precoces e de seis novilhas púberes tardias em dois estágios diferentes: no momento da ovulação e aproximadamente 50 dias antes da ovulação. O RNA foi extraído do tecido das biopsias e a expressão genica quantificada através de sequenciamento de RNA. Encontramos nove genes diferencialmente expressos em novilhas púberes que foram previamente relacionados com características e/ou processos reprodutivos de mamíferos em outros estudos. Esses genes foram APOD, CYP17A1, DNMT3B, AKR1C4, TENM1/ODZ3, HPSE, SMPD3, FAM134B e CYP26B1, já encontrados expressos em adipócitos, hipotálamo, ovários e útero, comprovando conhecimento prévio da conexão existente entre metabolismo de energia, órgãos reprodutivos e influencia neural. Ao medir as mudanças genéticas e correlacioná-las com mecanismos fisiológicos conhecidos em sistema nervoso e órgãos reprodutivos durante a puberdade, nós conseguimos identificar genes expressos em adiposo que são relacionados a modificações no organismo como um todo. Sendo assim, o tecido adiposo pode ser considerado um instrumento para indicar o que está acontecendo durante os processos reprodutivos. .Os resultados apresentados aqui podem ajudar na melhor compreensão de mudanças genéticas durante o período peripuberal.
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Efeitos da exposição materna ao Triclosan, durante a prenhez e lactação, no desenvolvimento físico, sexual inicial e função testicular da prole masculina de rato / Effects of maternal exposure to Triclosan during pregnancy and lactation in the development physical, initial sexual and testicular of function in male offspring rats

Machado, Camila Stacheski 14 March 2016 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-10T14:57:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 camila_ machado.pdf: 1503244 bytes, checksum: 361dda1eae6076e04495b3c6a4455f6e (MD5) Previous issue date: 2016-03-14 / The triclosan (TCS) is a bactericidal agent widely used in personal hygiene products, in the context of odontology, this substance has been showing itself efficient in reducing the dental plaque and gingivitis, besides controlling the progression of periodontal disease. However, it's questionable the real benefits of using the TCS in large scale in different products, once this compound has been included on the list of endocrine disrupters. The growing observation of the prevalence of environmental contaminant with properties for the endocrine disrupting has been generating a considerable debate between the scientists, regulatory agencies and general public, about the potential risks which these substances represent to the man's and animal's productive health. Many of these compounds are present in our daily routine. The objective of this study was to evaluate the effects resulted from the exposure to TCS bactericidal, during pregnancy and lactation of mother rats, on the physical development, initial sexual and testicular function of the male son on the following phase of the development: puberty and sexual maturity. For this, 16 rats Wistarprenhes were used, separated in four experimental groups, with 4 animals each one: GI- received corn oil daily by gavage; GII - received TCS, at a dose of 75 mg/kg/day. GIII- received TCS, at the dose of 150 mg/kg/day and GIV - received TCS, at the dose 300 mg/kg/day. The rats where weighed in alternate days throughout the experimental period, to the adjustment of the dose and monitored about the birth of the offspring. At birth, the offspring was weighed and evaluated about the initial physical development: age of the ears' detachment, hair onset, and eruption of incisors and eyes opening. The male offspring were kept and monitored about the external physical parameter of initial sexual development (descended testicles age and prepuce separation). When they're 60 (puberty) days and 90 (sexual maturity) years old, they were weighed and sacrificed to the organs collecting and weighing and histological analysis of the spermatogenesis stages and Sertoli cells counting. The results showed that the gain of body weight of the female rats during the pregnancy was similar to the experimental groups. However, there was a body weight-loss in the end of the experimental period, of the rats of group GIV in comparison to 14 group GI. The pregnancy average time and size of the offspring were similar between the groups. The average weigh of the offspring treated with TCS, in different doses was smaller (p<0,05), in comparison to group GI. The initial physical development and the descended testiscles were similar between the experimental groups. The offspring exposed to TCS, during pregnancy and lactation, it was observed a delay (days) on the prepucial separation. In puberty (60 days), it was observed a meaningful weight-loss of the seminal gland on groups GIII and GIV, in comparison to group GI. When they were 90 days old, it was observed liver weight-loss and a weight gain of the prostate of the animals of group GIV, in comparison to the animals of group GI. The analysis of the stages of the seminiferous epithelium cycle of the 60 days animals showed an increase of the stages I-VI on the animals treated with TCS 300mg/kg/day in comparison to group GI (p<0,01). The 90 days animals showed an increase of the stages VII-VIII, IX-XIII and decrease on the frequency of the stage XIV of the animal spermatogenesis treated with different doses of TCS when compared to group GI (p<0,01). There was no difference on the number counting of Sertoli cells between the animals of the different experimental groups. We concluded that the maternal exposition to TCS during the gestation period and lactation causes on the male offspring, intrauterine development restriction, delay on the puberty installation, change the weight of the seminal gland in animals at 60 days, as well, changes in liver weight and prostate in animals with 90 days, and disrupting the seminiferous epithelial cycle in both age. / O triclosan (TCS) é um agente bactericida amplamente utilizado em produtos de higiene pessoal. No contexto da odontologia, esta substância tem se mostrado eficaz em reduzir a placa dentária e gengivite, além de controlar a progressão da doença periodontal crônica. Entretanto, questiona-se o real benefício da utilização em larga escala do TCS em diferentes produtos, uma vez que este composto tem sido incluído na lista dos desreguladores endócrinos (DE). A crescente observação da prevalência de contaminantes ambientais com propriedades para a desregulação endócrina tem gerado considerável debate entre os cientistas, agências regulatórias e público em geral, sobre os potenciais riscos que estas substâncias representam para a saúde reprodutiva do homem e dos animais e muitos destes compostos estão presentes em nosso cotidiano. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos decorrentes da exposição ao TCS, durante a prenhez e lactação das ratas mães, no desenvolvimento físico, sexual inicial e função testicular da prole masculina na puberdade e vida adulta. Para tanto, foram utilizadas 16 ratas Wistar prenhes separadas em quatro grupos experimentais, com 4 animais em cada: GI- receberam óleo de milho diariamente por gavage; GII - receberam TCS, na dose de 75 mg/kg/dia; GIII- receberam TCS, na dose de 150 mg/kg/dia e GIV- receberam TCS, na dose de 300 mg/kg/dia. As ratas foram pesadas em dias alternados ao longo de todo o período experimental, para ajuste da dose, e monitoradas quanto ao nascimento dos filhotes. Ao nascimento, a ninhada foi pesada e avaliada quanto ao desenvolvimento físico inicial: idades de descolamento das orelhas, nascimento de pêlos, erupção dos incisivos e abertura dos olhos. Os filhotes machos foram mantidos e monitorados quanto aos parâmetros físicos externos do desenvolvimento sexual inicial (idades da descida testicular e separação prepucial). Aos 60 dias de idade (puberdade) e 90 dias de idade (maturidade sexual), foram pesados e sacrificados para a coleta e pesagem de órgãos e análise histológica dos estágios da espermatogênese e contagem de células de Sertoli. Os resultados indicaram que o ganho de peso corporal das ratas ao longo da gestação foi semelhante entre os grupos experimentais. Entretanto, houve diminuição do peso corporal, ao final do período experimental, das ratas do grupo GIV, 12 quando comparado ao grupo GI. O tempo médio da gestação e tamanho da ninhada foi semelhante entre os grupos. O peso médio das ninhadas das ratas tratadas com TCS, nas diferentes doses, foi menor (p<0,05), quando comparado ao grupo GI. O desenvolvimento físico inicial e as idades de descida testicular foram semelhantes entre os grupos experimentais. Na prole exposta ao TCS, durante a gestação e lactação, foi observado um atraso no tempo (dias) da separação prepucial. Na puberdade (60 dias), foi observada uma diminuição significativa no peso da glândula seminal nos grupos GIII e GIV, quando comparado ao grupo GI. Aos 90 dias de idade, foi observada diminuição do peso do fígado e um aumento no peso da próstata dos animais do grupo GIV, quando comparado aos animais do grupo GI. A análise dos estágios do ciclo do epitélio seminífero dos animais de 60 dias mostrou aumento dos estágios I-VI nos animais tratados com TCS 300mg/Kg/dia quando comparado ao grupo GI (p<0,01). Aos 90 dias de idade os animais mostraram aumento dos estágios VII-VIII, IX-XIII e diminuição na frequência do estágio XIV da espermatogênese nos animais tratados com diferentes doses de TCS quando comparado ao grupo GI (p<0,01). Não houve diferença na contagem do número de células de Sertoli entre os animais dos diferentes grupos experimentais. Foi possível concluir que, a exposição materna ao TCS durante a gestação e lactação causa efeitos na prole masculina, tais como: Restrição de desenvolvimento intrauterino, atraso na instalação da puberdade, alteração do peso da glândula seminal nos animais com 60 dias, como também, alteração no peso do fígado e da próstata nos animais com 90 dias e desregulação no ciclo do epitélio seminífero em ambas as idades.

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