The regulatory agencies are becoming increasingly stringent as regards the quality of the food. Thus, the development of analytical methods that help monitoring of pesticide residues, and it is essential in routine laboratories. This study aimed at the development and validation of an analytical method for sample preparation and determination of multiclass pesticide residues in grape variety Isabel. The sample preparation was based on the QuEChERS procedure with determination by gas chromatography coupled to mass spectrometry. Several sorbent materials were tested in the cleaning step of the sample preparation, such as PSA, C18, Florisil, alumina and active carbon, with the sorbent with the highest efficiency in cleaning the extract was the Florisil. The method was defined as follows: 10 g of the sample, peel, pulp and seeds, processed in a blender was added 10 mL of acetonitrile with 1% acetic acid, 4 g of magnesium sulfate and 1 g of sodium acetate. This mixture was stirred manually for 1 minute, centrifuged at 3,000 rpm for 20 minutes. 2 mL of the supernatant was collected and mixed with 300 mg of magnesium sulfate and 400 mg of florisil, which were agitated and centrifuged again. 1 mL of the supernatant was pipetted and brought to a concentrator and the volume reduced to 200l. The efficiency of the method was proven through validation, with detection limits below the maximum residue limits allowed by regulators and recoveries between 70 and 120% with RSD lower than 20% for most pesticides studied, except for trifloxystrobin, tebuconazole and tetradifon. Using the technique matrix matched is extremely important, since it was observed that there was a large positive influence on the performance of the array analysis by increasing the signal chromatographic all analytes studied. / Os órgãos regulamentadores estão se tornando cada vez mais rigorosos no que se refere à qualidade dos alimentos. Assim, o desenvolvimento de métodos analíticos, que auxiliem monitoramento de resíduos de agrotóxicos, e torna-se fundamental em laboratórios de rotina. Este estudo objetivou o desenvolvimento e validação de um método analítico para o preparo da amostra e determinação multiclasse de resíduos de agrotóxicos em uva da variedade Isabel. O preparo de amostra baseou-se no procedimento QuEChERS com determinação por Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas. Diversos materiais sorventes foram testados na etapa de limpeza do preparo da amostra, como PSA, C18, Florisil, Carvão ativo e alumina, sendo que o sorvente que apresentou maior eficiência na limpeza do extrato foi o Florisil. O método ficou assim definido: a 10 g da amostra, casca, polpa e sementes, processada em liquidificador foram adicionados 10 mL de acetonitrila com 1% de ácido acético, 4 g de sulfato de magnésio e 1 g de acetato de sódio. Essa mistura foi agitada manualmente por 1 minuto, centrifugada a 3.000 rpm por 20 minutos. 2 mL do sobrenadante foram coletados e misturados com 300 mg de sulfato de magnésio e 400 mg de Florisil, que foram novamente agitados e centrifugados. 1 mL do sobrenadante foi pipetado e levado a um concentrador e o volume reduzido a 200 μL. A eficiência do método foi comprovada através da validação, apresentando limites de detecção abaixo dos Limites Máximos de Resíduos permitidos pelos órgãos reguladores e recuperações entre 70 e 120% com RSD menor que 20%, para a maioria dos agrotóxicos estudados, com exceção para trifloxistrobina, tebuconazol e tetradifona. A utilização da técnica matrix matched é de extrema importância, uma vez que foi observado que houve grande influência positiva da matriz na realização da análise, aumentando o sinal cromatográfico de todos os analitos estudados.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The application of good livestock practices in the sheep industry is a growing concern on food security due to the increase of financial transactions in this sector in Brazil, mainly due to imports. To perform the monitoring Maximum Residue Limits (MRLs) are adopted such as suitable matrices for monitoring. The deposition of residues of veterinary drugs in sheep muscle is verified by appropriate analytical methods. In this work it were developed two methods aiming to determine avermectins residues in ovine muscle by HPLC-FD using QuEChERS method and also a method for the determination of different classes of veterinary drugs using UHPLC-MS / MS. The extraction was optimized by comparing the three most common variants of QuEChERS method and also the application of experimental design to select the best composition of the clean-up stage, varying amounts of PSA and C18. Some parameters such as derivatization step, the mobile phase composition, mobile phase flow, and the conditions of ionization source and ions entrance of the system were also optimized. The developed methods were validated by reference to Decision 657 of 2002 published by the European Community. The following parameters were evaluated: selectivity; linearity and working range; matrix effect; limits of detection and quantification; decision limit and detection capability; accuracy; and precision. The results were satisfactory, with the values of recovery in the concentration ranges required for each rated level, determination coefficients for curves prepared in solvent blank extract and white matrix were above 0.99 (except for ciprofloxacin) and linear working range was from 5 to 200 μg kg-1 for UHPLC-MS / MS and 2.5 to 112.5 μg kg-1 for HPLC-FD. There were no significant matrix effects only sulfamethoxazole, trichlorfon and albendazole by determining UHPLC-MS / MS. The limits of detection for HPLC-FD ranged from 4 to 18.4 μg kg-1 and decision limits from 10.7 to 59.4 μg kg-1 for UHPLC-MS / MS detection limits ranged from 1.7 to 33.3 μg kg-1 and for decision threshold from 5 to 100 μg kg-1. The method was considered suitable for routine analysis, and the confirmation was only possible using UHPLC-MS / MS, and the method was applied for determination of veterinary drug residues in sheep muscle in 11 samples by HPLC-FD and 36 UHPLC MS / MS / A aplicação das boas práticas agropecuárias na ovinocultura é uma preocupação crescente na segurança alimentar em virtude do aumento das movimentações financeiras neste setor no Brasil, principalmente em função das importações. Para realização do monitoramento são adotados Limites Máximos de Resíduo (LMR) e matrizes adequadas para monitoramento. A deposição de resíduos de medicamentos veterinários em músculo ovino é verificada através de métodos analíticos adequados. Neste trabalho desenvolveram-se dois métodos um buscando a determinação de resíduos de avermectinas em músculo ovino por HPLC-FD, utilizando o método QuEChERS e, também, um método para determinação de diferentes classes de medicamentos veterinários utilizando UHPLC-MS/MS. A extração foi otimizada pela comparação das 3 variações mais usuais do método QuEChERS e, também, aplicação de planejamento experimental para escolha da melhor composição da etapa de clean-up, variando as quantidades de PSA e C18 aplicadas. Alguns parâmetros como etapa de derivatização, composição da fase móvel, vazão da fase móvel e condições da fonte de ionização e entrada de íons no sistema também foram otimizadas. Os métodos desenvolvidos foram validados tomando como referência a Decisão 657 de 2002 publicada pela Comunidade Europeia. Foram avaliados os seguintes parâmetros: seletividade; linearidade e faixa de trabalho; efeito matriz; limites de detecção e quantificação; limite de decisão e capacidade de detecção; exatidão; e precisão. Os resultados obtidos foram satisfatórios, tendo como valores de recuperação nas faixas de concentração exigidas para cada nível avaliado, os coeficientes de determinação para curvas preparadas em solvente, em extrato branco e matriz branco ficaram acima de 0,99 (com exceção de ciprofloxacin) e a faixa linear de trabalho foi de 5 a 200 μg kg-1 para UHPLC-MS/MS e de 2,5 a 112,5 μg kg-1 para HPLC-FD. Não foram observados efeitos de matriz significativos apenas para sulfametoxazol, triclorfon e albendazol na determinação por UHPLC-MS/MS. Os limites de detecção para HPLC-FD variaram de 4 a 18,4 μg kg-1 e os limites de decisão de 10,7 a 59,4 μg kg-1, para UHPLC-MS/MS os limites de detecção variaram de 1,7 a 33,3 μg kg-1 e para limite de decisão de 5 a 100 μg kg-1. O método foi considerado adequado para análises de rotina, sendo que a confirmação só foi possível utilizando UHPLC-MS/MS, e o método foi aplicado para determinação de resíduos de medicamentos veterinários em músculo ovino em 11 amostras por HPLC-FD e 36 por UHPLC-MS/MS.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O cajueiro (Anarcadium occidentale) à uma planta tÃpica da regiÃo do nordeste que responde por mais de 95% da produÃÃo nacional, sendo os estados do CearÃ, PiauÃ, Rio Grande do Norte e Bahia os principais produtores. Com o incremento de Ãreas plantadas com o cajueiro anÃo precoce, verificou-se que esta cultura era susceptÃvel ao ataque de pragas, causando prejuÃzos no desenvolvimento, produÃÃo e qualidade do fruto. Para evitar esses prejuÃzos, estudos foram realizados no sentido de controlar as pragas atravÃs do uso de agrotÃxicos. Estes compostos representam uma classe de compostos quÃmicos orgÃnicos que sÃo usados para aumentar a produtividade, no armazenamento e beneficiamento de produtos agrÃcolas. Os agrotÃxicos mesmo favorecendo a produÃÃo e conservaÃÃo de alimentos, sÃo nocivos ao homem e ao meio ambiente, e a determinaÃÃo e detecÃÃo de seus resÃduos tÃm exigido rigorosos mÃtodos de anÃlises. O avanÃo de tecnologias analÃticas sensÃveis e seletivas tem permitido a detecÃÃo destas substÃncias em nÃveis traÃos. Este trabalho descreve uma metodologia analÃtica empregando o mÃtodo de extraÃÃo QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Robustand Safe) e Cromatografia LÃquida acoplada à Espectrometria de Massas em sÃrie, utilizando fonte de ionizaÃÃo por eletrospray. Esta metodologia foi desenvolvida e validada para determinaÃÃo de 20 agrotÃxicos multiclasses em amostras de caju. Avaliou-se a seletividade, faixa de linearidade (6 nÃveis de concentraÃÃo), limites de detecÃÃo (LD) e quantificaÃÃo (LQ), efeito matriz, bem como a precisÃo e exatidÃo, em termos de percentual de recuperaÃÃo. Para isso, efetuou-se fortificaÃÃo dos 20 agrotÃxicos em 3 nÃveis de contraÃÃo em 10 g de caju recÃm processado. Todos agrotÃxicos estudados apresentaram boa linearidade com coeficiente de correlaÃÃo maior que 0,99. Devido à complexidade da amostra foi efetuado o estudo do efeito matriz, onde foi necessÃrio fazer a calibraÃÃo externa com superposiÃÃo na matriz. Os limites de detecÃÃo variaram entre 0,1 e 0,25Âg.L-1 e os limite de quantificaÃÃo entre 0,3 e 0,75Âg.L-1. A validaÃÃo da metodologia mostrou bons resultados de recuperaÃÃes, com taxas dentro dos limites aceitÃveis de 50% a 120%, e com RSD > 20%, estando de acordo com a faixa recomendada pela norma brasileira ABNT-NBR 14029/2005. AtravÃs do monitoramento de mÃltiplas reaÃÃes (MRM), duas transiÃÃes diferentes (Ãon precursor â Ãon produto) foram selecionadas para cada composto, uma para quantificaÃÃo e outra para confirmaÃÃo, o que aumentou a seletividade. O mÃtodo foi aplicado em amostras coletadas no comÃrcio de Fortaleza-CE e nÃo apresentaram contaminaÃÃo pelos agrotÃxicos em estudo / The cashew tree is a plant typical of the region which accounts for over 95% of national production, and the states of CearÃ, PiauÃ, Rio Grande do Norte and Bahia major producers. With the increase in areas planted with war of cashew, this culture was sensitive to pests, causing damage in the development, production and fruit quality. To avoid these losses, studies were made to control pests through the use of pesticides. These compounds represent a class of chemical compounds that are used to increase productivity, storage and processing f agricultural products. Pesticides despite favoring the production and preservation of food are harmful to humans and the environment, and the determination and detection of its residues have required rigorous analysis methods. The advancement of analytical technologies has allowed sensitive and selective detection of these substances in trace levels. This paper describes an analytical methodology employing the extraction method QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Robust and Safe) and Liquid Chromatography coupled to Mass Spectrometry in series, using electrospray ionization source was developed and validated for the determination of twenty multiclass pesticides in samples of cashew apple. It was evaluated the selectivity, linearity range (six concentration levels), limits of detection (LOD) and quantification (LOQ), matrix effect, as well as the precision and accuracy in terms of percentage of recovery. For this, we performed fortification of 20 pesticides in three contraction levels in 10g cashew newly processed. All pesticides studied showed good linearity with correlation coefficient greater than 0,99. Because of the complexity of the sample was performed to study the effect matrix where it was necessary to overlap with the external calibration matrix. Detection limits ranged from 0,1 to 0,25Âg.L-1 and the limit of quantification of 0,3 to 0,75Âg.L-1. The validation of the methodology showed good results of recoveries with rates within acceptable limits of 50% to 120%, and% RSD>20% which is consistent with that recommended by the Brazilian standard ABNT-NBR 14029/2005. By monitoring multiple reactions (MRM) two different transitions (precursor ion -product ion) were selected for each compound, one for quantitation and confirmation which increased the selectivity. The method was applied to samples collected in trade in Fortaleza-CE and not contaminated by pesticides under study

Orientadores: Isabel Cristina Sales Fontes Jardim, Sonia Cláudia do Nascimento de Queiros / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-18T09:46:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Magalhaes_LouiseLeedaSilva_D.pdf: 920587 bytes, checksum: 2181b3ef5653dc834d474ffbb6be4574 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Nos últimos anos, uma das considerações mais importantes no sistema produtivo de frutas é a capacidade de gerar produtos de qualidade e saudáveis, atendendo os requisitos de sustentabilidade ambiental, segurança alimentar e a viabilidade econômica, mediante a utilização de tecnologias não agressivas ao meio ambiente e à saúde humana. Métodos multirresíduos para determinação de agrotóxicos em frutas frescas são cada vez mais necessários, devido a sua importância em análises de rotina que envolve a saúde pública, o monitoramento ambiental e o comércio internacional. Os métodos de análise de resíduos de agrotóxicos em alimentos compreendem, basicamente, três etapas: a amostragem, o preparo de amostra e a separação e determinação dos analitos. O objetivo deste estudo consistiu no desenvolvimento de um método compreendendo o preparo de amostra, no qual foram empregadas as técnicas de extração líquido-líquido (ELL), extração em fase sólida (EFS) ou o método QuEChERS, a definição da separação, identificação e quantificação, rápida e eficiente, de alguns agrotóxicos aplicados em uva in natura, utilizando a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector por arranjo de diodos (DAD) ou por espectrometria de massas em série (EM/EM). O melhor método foi validado por meio do estudo dos parâmetros: precisão (repetibilidade e precisão intermediária), exatidão (recuperação), curva analítica, intervalo de linearidade, detectabilidade (limite de detecção, LD, e limite de quantificação, LQ), seletividade e robustez. O método de EFS seguido por CL-EM/EM mostrou-se linear em uma ampla faixa de concentração e os LQ obtidos, em nível de ng mL, permitiram que os limites máximos de resíduos (LMR) impostos pelas agências reguladoras fossem atingidos. Porém, o método que resultou em melhores recuperações, menor tempo de análise, identificações confiáveis e menor concentração detectável foi a extração pelo método QuEChERS seguida da determinação por CLEM/ EM / Abstract: In recent years, one of the most important considerations in fruit production is the ability to generate healthy products with high quality within the requirements of environmental sustainability, food security and economic viability, through the use of technologies that are not harmful to either the environment or health human. Methods for multiresidue determination of pesticides in fresh fruits are increasingly required due to their importance in routine analysis involving public health, environmental monitoring and international trade. The methods for analysis of pesticide residues in foods include three basic steps: sampling, sample preparation, and separation and determination of the analytes. The aim of this study was to develop a method of sample preparation using techniques such as liquid-liquid extraction (LLE), solid phase extraction (SPE), and the QuEChERS method, followed by separation, identification and quantification using high performance liquid chromatography (HPLC) with diode array detection (DAD) or tandem mass spectrometry (MS/MS), for a fast and efficient multiresidue method of some pesticides used in grape cultivation. The best methodology was validated through determination of the parameters: precision (repeatability and intermediate precision), accuracy (recovery), calibration curve, linearity range, detectability (detection limit (LOD) and limit of quantification (LOQ)), selectivity and robustness. The method using SPE and LC-MS/MS showed linearity over a wide concentration range and LQ at the level of ng mL, within the maximum residue limits (MRL) set by regulatory agencies. However, the method that resulted in improved recoveries, reduced analysis time, good detectability and reliable identifications was the QuEChERS method for extraction followed by LC-MS/MS / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciências

Orientador: Felix Guillermo Reyes Reyes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-15T19:05:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hashimoto_JulianaCampos_M.pdf: 16051938 bytes, checksum: 650dab34d83af879bb5279035b7aa9eb (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

O estudo objetivou desenvolver uma novo método de extração para analisar os poluentes orgânicos persistentes (POPs), no sedimento da Represa Billings em São Paulo, via cromatografia a gás com espectrometria de massas (GC/MS). O Tratado de Estocolmo realizado na Suécia em 1972, patrocinado pela ONU, possuindo 113 países participantes, inclundo o Brasil objetivou a eliminação de menos doze POPs, colaborando com a questão ambiental. Os POPs são compostos que persistem no meio ambiente e são altamente estáveis, podendo ultrapassar a barreira placentária. Neste trabalho foram abordados o Aldrin, Endrin, Dieldrin, DDT. DDE, DDD e Heptacloro. Para garantir a confiabilidade dos resultados analíticos, foram realizados ensaios de validação do método, baseados nas diretrizes do INMETRO. O método de extração dos analitos foi o Quechers, obtendo resultados de recuperação entre 40 e 120% para todos os POPs analisados neste trabalho, valores aceitáveis para matrizes complexas como o sedimento. Os limites de detecção e quantificação fora, 0,3 e 0,5 μg/kg respectivamente. As amostras analisadas não apresentaram contaminação significativa por POPs perante a Legislação Brasileira vigente. / The objective of this study was to develop a new extraction method to analyze persistent organic pollutants (POPs) in the Billings Reservoir sediment in São Paulo, using gas chromatography with mass spectrometry (GC / MS). The 1972 Stockholm Treaty, sponsored by the UN, with 113 participating countries, including Brazil, aimed at eliminating at least twelve POPs, collaborating with the environmental issue. POPs are compounds that persist in the environment and are highly stable and can overcome the placental barrier. In this work were approached: Aldrin, Endrin, Dieldrin, DDT. DDE, DDD and Heptachlor. In order to guarantee the reliability of the analytical results, validation tests of the method were carried out, based on INMETRO guidelines. The method of extraction of the analytes was Quechers, obtaining results of recovery between 40 and 120% for all POPs analyzed in this work, acceptable values for complex matrices such as sediment. The limits of detection and quantification were, respectively, 0.3 and 0.5 μg / kg. The analyzed samples did not present significant contamination by POPs before the current Brazilian Legislation.

Os pesticidas têm sido largamente empregados na agricultura para controle de pragas, doenças e ervas daninhas. O uso intensivo de pesticidas nas culturas de tomates, desrespeitando as boas práticas agrícolas, tem causado preocupações quanto à provável contaminação do produto final e muitos métodos multirresíduos têm sido empregados para avaliar e determinar os níveis de resíduos em amostras de alimentos. Para tanto, o objetivo deste estudo foi a validação do método usando QuEChERS no preparo de amostra e LC-MS/MS para a quantificação de resíduos de 61 pesticidas de diferentes classes químicas em tomate. A detecção foi realizada utilizando espectrômetro de massas no modo MRM dinâmico, o tempo de análise foi de 13 min com coluna analítica recheada com partículas de 1,8 \'mü\'m de partícula. Dos 61 pesticidas estudados, 46 estão de acordo com os parâmetros de validação da Comissão Européia e Anvisa, 15% dos pesticidas validados apresentaram efeito matriz médio e as recuperações ficaram entre 87 e 116% e coeficiente de variação de 5 a 17%. Mais de 85% dos compostos investigados apresentaram limites de detecção igual ou menor que 5 \'mü\'g kg-1 e de quantificação igual ou menor que 10 \'mü\'g kg-1. Foram analisadas 58 amostras de tomate coletadas em supermercados da cidade de Piracicaba, SP, Brasil. Doze compostos foram detectados em trinta e cinco amostras (60% do total analisado), todos abaixo do limite máximo de resíduos permitido no Brasil para acefato, acetamiprido, azoxistrobina, benalaxil, bromuconazol, diflubenzurom, imidacloprido, iprodiona, procloraz e tiametoxam, e 15 amostras positivas para metamidofós e 1 para oxamil, que não possuem uso autorizado para a cultura de tomate. Foi realizado um estudo de lavagem de tomates contaminados com produtos formulados (8 pesticidas) com água, solução com 10% de vinagre e com 10% de bicarbonato de sódio e analisada a casca e polpa, para avaliar a capacidade de remoção de cada procedimento. Todos os tratamentos de lavagens (n=3) diferiram estatisticamente para todos os pesticidas avaliados (n=8), com exceção do fipronil, para o qual as lavagens com solução de 10% de bicarbonato de sódio e água não apresentaram diferença no nível de significância de 5%. A lavagem com água ou outras soluções antes do consumo é indicada para a redução de resíduos de pesticidas em tomate e a retirada da casca também contribui para essa redução / Pesticides have been widely used in agriculture to control pests, diseases and weeds. The intensive use of pesticides in tomato crops disrespecting good agricultural practices have been causing concerns about the possible contamination of the final product and many multiresidue methods have been used in order to evaluate and determine the levels of residues in food samples. Therefore, the aim of this study was validate the method using QuEChERS sample preparation and LC-MS/MS for quantification of 61 pesticides residues from different chemical classes in tomato. Detection was performed using mass spectrometry in dynamic MRM mode, run time had 13 min and analytical column packed with 1,8 \'mü\'m particles. Of the 61 pesticides studied, 46 are in accordance with the validation parameters of the European Commission and ANVISA, 15% of the validated pesticides presented matrix effect, recoveries were between 87 and 116% and coefficient of variation 5 to 17%. More than 85% of the compounds investigated showed limits of detection less or equal than 5 \'mü\'g kg-1 and the limits of quantification less or equal than 10 \'mü\'g kg-1. 58 real samples of tomato were analyzed and collected in supermarkets in Piracicaba, SP, Brazil. Twelve compounds were detected in thirty-five samples (60% of the total analyzed), all below the maximum residue limit allowed in Brazil for acephate, acetamiprid, azoxystrobin, benalaxyl, bromuconazole, diflubenzuron, imidacloprid, iprodione, prochloraz and thiamethoxam, and 15 positive samples of methamidophos and 1 for oxamyl, which are not authorized to use at the culture of tomatoes. A wash study was conducted with spiked tomatoes using formulated products (8 pesticides) with water, 10% acetic acid, 10% sodium bicarbonate solution and analyzed concentration in the peel and pulp, in order to evaluate the capacity to remove pesticides in each procedure. All wash treatments (n= 3) differed significantly for all pesticides evaluated (n= 8), with the exception of fipronil, which the washing with 10% of sodium bicarbonate solution and water no showed difference in the level of significance 5%. The washing with water or other solutions before consumption is indicated for the reduction of pesticide residues in tomatoes and the peeling also contributes to this reduction

Este trabalho apresenta o desenvolvimento, validação e aplicação de um método analítico para a análise multirresíduo de produtos veterinários em leite bovino in natura. Para a determinação dos analitos foi utilizada cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas sequencial (LC-MS-MS). Através do método cromatográfico desenvolvido, foi possível obter, em uma única injeção, a separação e detecção de 19 produtos veterinários (de diferentes classes) com ótima sensibilidade. Para o procedimento de preparo de amostra adotou-se uma modificação de um enfoque desenvolvido recentemente denominado QuEChERS. Este enfoque engloba características necessárias a uma metodologia analítica que será empregada para análises de rotina em diversos laboratórios do país: é rápida, barata, não gera volume excessivo de descartes, é fácil de executar, não requer treinamento extenso ou e equipamentos de custo elevado e é robusta. Através do processo de preparo de amostra empregado foi possível obter boa recuperação para 14, dos 19 compostos presentes na corrida cromatográfica. O método analítico foi validado - segundo os parâmetros descritos na Commission Decision 2002/657/EC, da União Européia - e aplicado em uma amostra real de leite bovino adquirida de produtor local. / This study describes the development, validation and application of an analytical method for the multi residue analysis of veterinary products in raw bovine milk. For determination of the analytes was used liquid chromatography coupled with tandem spectrometry (LC-MS-MS). Through the developed chromatographic method, it was possible to separate and detect, with a single injection, 19 veterinary products (of different classes) with optimal sensibility. For the sample preparation procedure it was adopted a new approach: the QuEChERS procedure. This approach presents all the characteristics required for a routine analytical procedure, to be applied in several laboratories across the country: it\'s quick, cheap, doesn\'t generates large residue material, it\'s easy to execute, doesn\'t requires training or the use of expansive equipments and it\'s rugged. Through the sample preparation procedure, it was obtained good recovery to 14 of the 19 compounds in the chromatographic run. The analytical procedure was validated according to the Commission Decision 2002/657/EC, of the European Union and a real sample of raw milk, from local producer, was tested.

As Sulfonamidas (SAs) são antibióticos de uso muito comum na medicina veterinária, sendo também aplicadas na medicina humana. Os resíduos dessas substâncias, ou dos seus metabolitos na carne e outros alimentos, podem causar efeitos adversos para a saúde dos consumidores como, por exemplo, resistências a antibióticos e alergias. Este trabalho apresenta o desenvolvimento e aplicação de métodos modernos de preparo de amostra para determinação de multiresíduo de sulfonamidas em alimentos por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas e ultravioleta visível. Dentre os métodos de preparo de amostra, aplicou-se o método de extração QuEChERS (Quicky, Easy, Cheap. Effective, Rugged, Safe) modificado, em combinação com a cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas, para a análise de dez sulfonamidas em amostras de músculo de frango e bovino. No segundo estudo, seguindo a tendência de miniaturização, sintetizou-se um polímero molecularmente impresso (Sulfadimetoxina-MIP) para uso como sorbente em dispositivos de Microextração com Sorbentes Empacotado (MEPS). O método, denominado SDM-MIP-MEPS, foi otimizado e aplicado em amostras de músculo de frango usando a cromatografia liquida com detecção por ultravioleta-visivel. Embora o uso do polímero molecularmente impresso (MIP) como sorbente seletivo para o MEPS já tenha sido reportada em dois trabalhos, pela primeira vez é descrito a aplicação de um MIP impresso com sulfdimetoxina (SDM), usando MEPS para extração de sulfonamidas em músculo de frango. Portanto, a novidade neste caso, é o uso da nova técnica extração miniaturizada (MEPS) com o polímero sintetizado sulfadimetoxina-MIP como sorbente de empacotamento. As metodologias foram validadas com sucesso de acordo com as diretrizes 657/2002/EU. / Sulfonamides are widely used in veterinary and human medicine. Residues of these compounds, or their metabolites in animal meats and other foods, are toxic and can cause side effects in human\'s health, such as resistance to antibiotics and allergic reactions. This study describes the development and application of a modern sample preparation approach for sulfonamides multiresidue determination in food by chromatographic methods coupled to mass spectrometry and ultraviolet-visible spectroscopy. Among those sample preparation methods, the modified QuEChERS extraction in combination with liquid chromatography in tandem with mass spectrometric detection was applied to the analysis of residues of 10 sulfonamides in chiken and cattle muscle. In the second study, following the miniaturization trends, it was synthesized a molecularly imprinted polymer (Sulfadimethoxine-MIP), for application as sorbent in Microextraction by Packed Sorbents (MEPS). The extraction method was optimized and successfully applied to chicken muscle samples in combination with highperformance liquid chromatography by ultraviolet-visible detection. Although the use of MIPs as selective packing materials for MEPS has already been reported in two papers, is first time that application of a MIP imprinted with Sulfadimethoxine is evaluated for the extraction of sulfonamides in chicken muscle. Therefore the novelty of the present work is the use of this new miniaturization extraction technique with synthesized sulfadimethoxine-MIP polymer as packing sorbent. The methods were successfully validated according to the 2002/657/EC guidelines.

Les différentes techniques d'extraction et d'analyse existant pour étudier les insecticides contenus dans le miel ne permettent pas toujours d'atteindre de faibles limites de détection. Or, pour évaluer la toxicité des pesticides, des valeurs de limites de détection de l'ordre du ng/g doivent être obtenues. L'objectif de ce travail a été de développer des méthodes d'extraction et d'analyse compatibles avec différents types de miels (miels de nectars et de miellats, monofloraux et multifloraux) et permettant de rechercher 25 insecticides d'intérêt appartenant à 3 familles (nicotinoïdes, pyréthrinoïdes et pyrazoles,), avec des limites de détection les plus faibles possibles et en éliminant au maximum les interférences liées à la matrice. Après comparaison de différentes méthodes d'extraction, la technique retenue est basée sur la méthode QuEChERS EN 15662, qui consiste en une extraction et une purification à l'aide de sels adaptés à la matrice et aux composés à extraire. Les analyses ont ensuite été effectuées en chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse en tandem (GC-MS²), pour les pyrazoles et les pyréthrinoïdes, et en chromatographie liquide haute performance couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LC-MS²) pour les nicotinoïdes et un pyrazole, les réglages des appareils devant être optimisés pour permettre d'obtenir une limite de détection très basse. Les rendements d'extraction obtenus sont majoritairement compris entre 60 et 140%. Les méthodes développées sont spécifiques pour les miels testés. / Several extraction and analytical techniques existing to study insecticides in honey do not always allow reaching low limits of detection. However, to evaluate the toxicity of pesticides, values of limits of detection have to be close to 1 ng/g. The aim of this work was to develop extraction and analytical methods compatible with various types of honey (nectars and honeydews, monofloral and multifloral) and allowing to look for 25 insecticides belonging to 3 families (nicotinoids, pyrethroids and pyrazoles), with the lowest possible limits of detection and eliminating the maximum interference due to the matrix. After comparison of different extraction methods, the reserved technique is based on the QuEChERS EN 15662 method, which consists of an extraction and a purification with mixtures of salts adapted to the matrix and to the compounds to be extracted. Analysis were then performed using gas chromatography coupled with tandem mass spectrometry (GC-MS²) for the pyrazoles and the pyrethroids, and using high performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (LC-MS²) for the nicotinoids and one pyrazole. Device settings have to be optimized to obtain a very low limit of detection. The mean extraction yields were typically between 60 and 140%. The methods are specific for tested honeys. These methods are applicable to analyze commercial honeys and allow reaching limits of detection between 0.2 and 0.7 ng/g. In practice, the dosage of these 3 families in different types of honeys, at low concentrations can be made in routine in an analysis laboratory.