Resumo: Neste trabalho foi desenvolvida uma metodologia de desreplicação bioguiada para Qualea grandiflora e Q. cordata, duas espécies da família Vochysiaceae presentes no Cerrado Brasileiro com potencial etnofarmacológico, através dos bioensaios in vitro de inibição da polimerização da β-hematina bovina (compostos antimaláricos), redução do radical estável DPPH (antioxidante), bioautografia para avaliação da inibição da enzima acetilcolinesterase, avaliação citotóxica em linhagens celulares, avaliação de atividade antifúngica por microdiluição em placa e avaliação tripanocida frente à cepas Y de epimastigotas de Tripanosoma cruzi e, da detecção in silico dos constituintes moleculares majoritários a partir da técnica hifenada de HPLC-DAD-HRMS(ESI). As folhas e os ramos secos de Q.grandiflora e Q.cordata foram extraídos por maceração com etanol:água (8:2) e posteriormente fracionados em extração líquido-líquido com os solventes hexano, AcOEt e n-butanol. Entre os bioensaios realizados, a avaliação de inibição do radical DPPH apresentou valores significativos para as frações AcOEt dos ramos de Q.grandiflora e das folhas de Q. cordata. A partir disto, estas frações foram analisadas através da técnica hifenada HPLC-DAD-HRMS(ESI) e permitiram a detecção das flavanonas: 4',5,7-triidroxi-3'-metoxi-6,8-dimetilflavanona e 5,6,7-triidroxi-3',4'-dimetoxi-8-metilflavanona e dos diidroflavonóis: 4',7-diidroxi-5-metoxi-6-metildiidroflavonol e 3',4'-dimetoxi-5,7-diidroxi-6,8-dimetildiidroflavonol na fração AcOEt nas folhas de Q.cordata, e das flavanonas: 8-metilnaringenina e 4',5,7-triidroxi-3',6-dimetoxi-8-metilflavanona; benzofenona: Bis(2-hidroxi-4,6-dimetoxi-3-metilfenil)metanona e diidroflavonol: 3',4',5,6,7-pentaidroxi-8-metildiidroflavonol da fração AcOEt dos ramos de Q.grandiflora. Também realizou-se a análise in silico por RMN da fração... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In this work the bioguided phytochemical studies of Qualea grandiflora and Q. cordata, two species of Vochysiaceae greatly represented in the Brazilian Cerrado and with ethnopharmacology potential, were perfomed according to in vitro bioassays from antioxidant capacity and inhibition of ß-hematin polymerization (antimalarial compounds), scavenging activity of DPPH (antioxidant capacity), inhibition of acetyl cholinesterase (anti-Alzheimer), citotoxic activity against tumoral cell lines (anticancer), antifungal activity using a microdilution assay and tripanocidal activity performed with the Y-strain epimastigote forms of Tripanosoma cruzi, as well as in silico dereplication by means of HPLC-DAD-HRMS(ESI). The leaves and stem of Q.grandiflora and Q.cordata were extracted by maceration in etanol:water (8:2) and fractionated by liquid-liquid using hexane, AcOEt and n-butanol. The bioassays showed that AcOEt stem fraction of Q.grandiflora and AcOEt leaves fraction of Q. cordata are significantly activity in DPPH reduction. According to this results, the AcOEt fraction of the stem of Q.grandiflora and the leaves of Q.cordata were evaluated using HPLC-DAD-HRMS(ESI) and allowed the detection of two flavanones: 4',5,7-trihydroxy-3-methoxy-6,8-dimethylflavanone and 5,6,7-trihydroxy-3',4'-dimethoxy-8-methylflavanone, and the dihydroflavonols: 4',7-dihydroxy-5-methoxy-6-methyldihydroflavonol and 3',4'-dimethoxy-5,7-dihydroxy-6,8-dimethyldihydroflavonol from AcOEt leaves fraction of Q.cordata, and the flavanones: 8-methyl-naringenine and 4',5,7-trihydroxy-3',6-dimethoxy-8-methylflavanone, the benzophenone: bis (2-hydroxy-4,6-dimethoxy-3-methylphenyl) metanone, and the dihydroflavonol: 3',4',5,6,7-pentahydroxy-8-methyldihydroflavonol from AcOEt stem fraction of Q. grandiflora. The AcOEt stem fraction of Q. grandiflora was analyzed through in silico NMR, comparing virtual 1H NMR standards spectra... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Ian Castro-Gamboa / Coorientador: Márcia Nasser Lopes / Banca: Leonardo Gobbo Neto / Banca: Maique Weber Biavatti / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, 2016. / Submitted by Camila Duarte (camiladias@bce.unb.br) on 2016-09-20T18:07:39Z No. of bitstreams: 1 2016_JessicaReginaMelo.pdf: 1842810 bytes, checksum: c4e626c07e1fd7d0a56eba9bbfabcc9c (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-01-05T20:49:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_JessicaReginaMelo.pdf: 1842810 bytes, checksum: c4e626c07e1fd7d0a56eba9bbfabcc9c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-05T20:49:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_JessicaReginaMelo.pdf: 1842810 bytes, checksum: c4e626c07e1fd7d0a56eba9bbfabcc9c (MD5) / O alumínio trivalente (Al+3) é altamente tóxico e é o principal fator de estresse para plantas sensíveis em solos ácidos. Contudo, muitas espécies são bem adaptadas a condições de solos ácidos e a elevadas concentrações de Al. Os mecanismos de adaptação das plantas podem ser divididos em: a) resistência: exclusão do Al a partir de células do sistema radicular e, b) tolerância: entrada e sequestro do Al para os órgãos vegetais. Algumas espécies nativas do Cerrado, além de serem acumuladoras de Al, têm baixo desempenho na ausência desse metal. O objetivo deste trabalho foi estudar as alterações fisiológicas e metabólicas em Qualea grandiflora Mart. crescidas na presença e ausência de Al+3, assim como analisar os efeitos ultraestruturais nos cloroplastos das plantas. Plantas de Q. grandiflora foram tratadas com e sem Al por 90 dias, de forma que o Al foi fornecido sob forma de AlCl3 (200 μM) em solução nutritiva 1/5 MS. Foram avaliados parâmetros de comprimento, teores de pigmentos fotossintetizantes e teores de Al, Ca, Mg, Fe e P em ambos os tratamentos. Também foi feita a comparação da ultraestrutura dos cloroplastos da lâmina foliar e a investigação do perfil metabólico foliar no tratamento com e sem Al. Plantas suplementadas com Al apresentaram maior crescimento das raízes (32,5%) e parte aérea (16,8%), bem como maiores níveis de clorofila (a e b) e carotenoides (24,73 8,27 e 6,20 mg.cm-2) comparados ao tratamento sem Al (controle). Além disso, o teor foliar de Ca, Mg e P não apresentaram diferenças significativas entre os tratamentos. Porém, a concentração de Al e Fe foram menores nas plantas suplementadas com o metal comparado ao controle. Nas análises ultraestruturais observou-se que a ausência do metal durante o desenvolvimento das plantas levou a desintegração progressiva dos cloroplastos. O perfil metabólico revelou maiores concentrações de ácidos orgânicos (citrato e oxalato) nas plantas controle, indicando que a tolerância ao acúmulo de Al em Q. grandiflora está relacionada com a participação desses ácidos na quelação ao metal. Os resultados deste estudo também demonstraram que o Al tem um papel importante no metabolismo dessa espécie acumuladora nativa do Cerrado. ___________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The trivalent aluminum (Al+3) is highly toxic and a major stress to sensitive plants in acid soils. However, many species are well adapted to conditions of acid soils and high Al concentrations. Plant Al-adaptation mechanisms are classified as following: a) resistance: it is an Al exclusion mechanism in which the root system prevents the entrance of the metal into the plant, and; b) tolerance: the Al is uptaken by the plant and its toxic effects are internally neutralized. Moreover, some native species from Cerrado, besides accumulating Al, resent its absence. Therefore, the objective of this work was to study the physiological and metabolic changes in Qualea grandiflora Mart. grown in the presence and absence of Al, as well as analyze the ultrastructural effects of Al absence on chloroplasts of Q. grandiflora plants. For that, the parameters assessed were: root and shoot lengths, photosynthetic pigments and Al, Ca, Mg, Fe, P contents in plants from both treatments. Also, it was conducted a comparison of the chloroplast ultrastructure from Q. grandiflora leaves and determined the metabolic profiles of leaves from plants grown with and without Al. Al-supplemented plants showed longer roots (32.5%) and shoots (16.8%), as well as higher contents of chlorophylls (a e b) and carotenoid (24.73, 8.27 and 6.20 mg.cm-2) compared with the control. In addition, the leaf content of Ca, Mg, P did not show significant differences between treatments. However, the concentration of Al and Fe were lower in plants supplied with metal compared with no Al treated plants. The ultrastructural analysis revealed that Al absence during plant development led to progressive disintegration of chloroplasts. The metabolic profile showed higher concentrations of organic acids (citrate and oxalate) in the control plants, indicating that tolerance to Al accumulation in Q. grandiflora is related to the involvement of these acids in Al-chelation. The results of this study also demonstrated that Al plays an important role in Q. grandiflora metabolism.

Submitted by Luiza Maria Pereira de Oliveira (luiza.oliveira@ufpe.br) on 2015-05-18T13:37:52Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Liliane Gallindo Dantas de Oliveira.pdf: 2245598 bytes, checksum: a3ac6c20b6c88bc4ea5acdc483308ec3 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-18T13:37:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Liliane Gallindo Dantas de Oliveira.pdf: 2245598 bytes, checksum: a3ac6c20b6c88bc4ea5acdc483308ec3 (MD5) Previous issue date: 2014-06-27 / CNPq; CAPES / O Cerrado é o segundo maior domínio fitogeográfico do Brasil e apresenta uma distribuição descontínua com diferentes composições florísticas e fisionomias. É rico em endemismos, mas vem sofrendo forte degradação, sendo considerado um dos 34 hotspots mundiais para conservação. O presente estudo analisou populações de duas espécies arbóreas de ampla distribuição no Cerrado, a fim de compreender suas relações filogeográficas e contribuir para sua conservação. As espécies analisadas, Alibertia edulis (Rubiaceae) e Qualea grandiflora (Vochysiaceae), mostraram diferenciação significativa entre as populações quando analisadas por sequenciamento de três regiões plastidiais (matK, psbA-trnH e ndhF). As populações de A. edulis foram divididas por uma barreira norte-sul mais a oeste que a previamente proposta para o Cerrado, sugerindo um gradiente leste-oeste na distribuição da diversidade genética. Para ambas as espécies, as populações de Cerrados considerados "marginais" não são uma expansão recente do Cerrado central, com haplótipos compartilhados ou derivados do mesmo, mas apresentaram haplótipos exclusivos, por vezes ancestrais. Para evitar a perda irreparável de parte da diversidade do Cerrado, é recomendada a implantação de UCs nos Cerrados do Piauí e Pará, mais diferenciados e sob maior risco de degradação. Adicionalmente, o presente estudo desenvolveu microssatélites (SSR) nucleares para a espécie A. edulis, a fim de fornecer marcadores polimórficos para auxiliar em estudos populacionais. Para testes de polimorfismo, indivíduos do Piauí e Mato Grosso foram utilizados, revelando valores mais altos de endocruzamento na primeira população, os quais podem estar associados ao seu longo isolamento. Tais marcadores serão importantes ferramentas para análises populacionais e filogeográficas em A. edulis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-20Bitstream added on 2014-06-13T20:59:17Z : No. of bitstreams: 1 carnevaleneto_f_me_araiq.pdf: 2909237 bytes, checksum: d5dbb04db98f4d6c5f87cfc6ae4bfcca (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Neste trabalho foi desenvolvida uma metodologia de desreplicação bioguiada para Qualea grandiflora e Q. cordata, duas espécies da família Vochysiaceae presentes no Cerrado Brasileiro com potencial etnofarmacológico, através dos bioensaios in vitro de inibição da polimerização da β-hematina bovina (compostos antimaláricos), redução do radical estável DPPH (antioxidante), bioautografia para avaliação da inibição da enzima acetilcolinesterase, avaliação citotóxica em linhagens celulares, avaliação de atividade antifúngica por microdiluição em placa e avaliação tripanocida frente à cepas Y de epimastigotas de Tripanosoma cruzi e, da detecção in silico dos constituintes moleculares majoritários a partir da técnica hifenada de HPLC-DAD-HRMS(ESI). As folhas e os ramos secos de Q.grandiflora e Q.cordata foram extraídos por maceração com etanol:água (8:2) e posteriormente fracionados em extração líquido-líquido com os solventes hexano, AcOEt e n-butanol. Entre os bioensaios realizados, a avaliação de inibição do radical DPPH apresentou valores significativos para as frações AcOEt dos ramos de Q.grandiflora e das folhas de Q. cordata. A partir disto, estas frações foram analisadas através da técnica hifenada HPLC-DAD-HRMS(ESI) e permitiram a detecção das flavanonas: 4',5,7-triidroxi-3'-metoxi-6,8-dimetilflavanona e 5,6,7-triidroxi-3',4'-dimetoxi-8-metilflavanona e dos diidroflavonóis: 4',7-diidroxi-5-metoxi-6-metildiidroflavonol e 3',4'-dimetoxi-5,7-diidroxi-6,8-dimetildiidroflavonol na fração AcOEt nas folhas de Q.cordata, e das flavanonas: 8-metilnaringenina e 4',5,7-triidroxi-3',6-dimetoxi-8-metilflavanona; benzofenona: Bis(2-hidroxi-4,6-dimetoxi-3-metilfenil)metanona e diidroflavonol: 3',4',5,6,7-pentaidroxi-8-metildiidroflavonol da fração AcOEt dos ramos de Q.grandiflora. Também realizou-se a análise in silico por RMN da fração... / In this work the bioguided phytochemical studies of Qualea grandiflora and Q. cordata, two species of Vochysiaceae greatly represented in the Brazilian Cerrado and with ethnopharmacology potential, were perfomed according to in vitro bioassays from antioxidant capacity and inhibition of ß-hematin polymerization (antimalarial compounds), scavenging activity of DPPH (antioxidant capacity), inhibition of acetyl cholinesterase (anti-Alzheimer), citotoxic activity against tumoral cell lines (anticancer), antifungal activity using a microdilution assay and tripanocidal activity performed with the Y-strain epimastigote forms of Tripanosoma cruzi, as well as in silico dereplication by means of HPLC-DAD-HRMS(ESI). The leaves and stem of Q.grandiflora and Q.cordata were extracted by maceration in etanol:water (8:2) and fractionated by liquid-liquid using hexane, AcOEt and n-butanol. The bioassays showed that AcOEt stem fraction of Q.grandiflora and AcOEt leaves fraction of Q. cordata are significantly activity in DPPH reduction. According to this results, the AcOEt fraction of the stem of Q.grandiflora and the leaves of Q.cordata were evaluated using HPLC-DAD-HRMS(ESI) and allowed the detection of two flavanones: 4',5,7-trihydroxy-3-methoxy-6,8-dimethylflavanone and 5,6,7-trihydroxy-3',4'-dimethoxy-8-methylflavanone, and the dihydroflavonols: 4',7-dihydroxy-5-methoxy-6-methyldihydroflavonol and 3',4'-dimethoxy-5,7-dihydroxy-6,8-dimethyldihydroflavonol from AcOEt leaves fraction of Q.cordata, and the flavanones: 8-methyl-naringenine and 4',5,7-trihydroxy-3',6-dimethoxy-8-methylflavanone, the benzophenone: bis (2-hydroxy-4,6-dimethoxy-3-methylphenyl) metanone, and the dihydroflavonol: 3',4',5,6,7-pentahydroxy-8-methyldihydroflavonol from AcOEt stem fraction of Q. grandiflora. The AcOEt stem fraction of Q. grandiflora was analyzed through in silico NMR, comparing virtual 1H NMR standards spectra... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:30:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 441528 bytes, checksum: 9be9f11077f57539e6290192246fd059 (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Several species of plants in the Cerrado have extrafloral nectaries (EFNs), which produce secretions consumed by diverse species of ants. Ants foraging in plants and feeding on EFNs may act as important anti herbivore agents, decreasing phytophagous insects in the plants and the herbivory in the leaves. The aim of this study was to test if ants foraging on EFNs s plants decrease the number of herbivores in these plants. For this, was tested the hypothesis that the increase on the species richness and abundance of ants, cause a decrease in the herbivory, species richness and abundance of herbivores and proportion of guilds of herbivores. Sampling was performed in Panga Ecological Station, which lies between the cities of Uberlândia and Campo Florido, and possesses vegetation of several phytophysiognomies found in Cerrado biome. Plants of Qualea grandiflora were studied in three phytophysiognomies, Cerradão, Cerrado Strictu Senso and Campo Cerrado. According to the results, richness of ants did not influence in the decreasing of the herbivores and herbivory, however, it influenced the decrease of the proportion of chewing insects. In the other hand the abundance of ants promoted significant decrease of herbivores in Cerradão and Campo Cerrado, although in Cerrado Strictu Senso the relation has been opposite. The results also indicate that the abundance of sucking herbivores was higher in the Cerrado Strictu Senso regarding Cerradão and Campo Cerrado, indicating the possibility of interaction between the ants and the hemíptera that release honeydew. Futhermore the spatial and temporal differenciation between ants and herbivores in Cerrado Strictu Senso may also explain the result in this phytophysiognomy. The rate of herbivory in leaves did not suffer influence of the presence of ants possibly because the effect of foliar herbivory occurs only in long term and the sampling were made only in January, so that herbivory was underestimated compared to herbivores. The maturity of the leaves may also have influenced the response, because the younger leaves are more vulnerable to the action of herbivores than the more mature leaves. / Muitas plantas no Cerrado possuem nectários extraflorais (NEFs), os quais produzem um néctar que é consumido por muitas espécies de formigas. As formigas que forrageiam nas plantas e se alimentam dos nectários podem atuar como importantes agentes anti-herbívoros, diminuindo a presença dos insetos fitófagos e, consequentemente, a herbivoria nas folhas. O objetivo desse estudo foi testar se as formigas que forrageiam nas plantas que contém NEFs, causam diminuição dos herbívoros e sua atividade nelas. Para isso foram testadas as hipóteses de que o aumento da riqueza e abundância de formigas causa um decréscimo na herbivoria, bem como na riqueza e abundância de herbívoros, e também na proporção de guildas de herbívoros. A coleta foi realizada na Estação Ecológica do Panga, que se situa entre as cidades de Uberlândia e Campo Florido, e possui vegetações dentro de várias fitofisionomias encontradas nos Cerrados. Foram utilizadas plantas da espécie Qualea grandiflora nesse estudo, marcadas em três fitofisionomias: Cerradão, Cerrado Strictu Senso e Campo Cerrado para a realização das coletas. De acordo com os resultados obtidos, a riqueza de formigas não influenciou na diminuição dos herbívoros e da herbivoria, entretanto, influenciou na diminuição da proporção de insetos mastigadores nas plantas. Por outro lado, a abundância de formigas acarretou um decréscimo na abundância de herbívoros no Cerradão e Campo Cerrado, embora no Cerrado Strictu Senso, a relação tenha sido inversa. Os resultados indicam também que a abundância de herbívoros sugadores foi maior no Cerrado Strictu Senso em relação ao Cerradão e Campo Cerrado, indicando a possibilidade de interação entre as formigas e homópteras que liberam honeydew nessa fitofisionomia. Além disso, a diferenciação temporal e espacial das formigas e herbívoros no Cerrado Strictu Senso também pode explicar o resultado observado nessa fitofisionomia. A taxa de herbivoria nas folhas das plantas não sofreu influências da presença de formigas nas três fitofisionomias, possivelmente porque o efeito da herbivoria foliar ocorre somente em longo prazo e as coletas foram realizadas apenas durante o mês de janeiro, de forma que a herbivoria foi subestimada em relação aos herbívoros. A maturidade das folhas também pode ter influenciado na resposta, visto que folhas mais jovens são mais vulneráveis à ação dos herbívoros do que as folhas mais maduras.

A cárie dentária é uma doença bucal de alta prevalência e impactante em países em desenvolvimento. É causada pela presença de biofilme dentário rico em bactérias acidogênicas e acidúricas, como Streptococcus mutans e Lactobacillus casei. Neste sentido, a fitoterapia tem sido aplicada na odontologia devido ao seu conhecido efeito antimicrobiano, tendo potencial para prevenir doenças como a cárie dentária. Portanto, o presente estudo tem como objetivo testar o potencial antimicrobiano de extratos bruto e etanólico das folhas de Myracrodruon urundeuva (M. urundeuva.) e Qualea grandiflora (Q. grandiflora) sobre S.mutans e L. casei. Para tal, determinaram-se a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Bactericida Mínima (CBM). A CIM foi definida como a menor concentração do agente antimicrobiano capaz de inibir 100% o crescimento microbiano (absorbância) em relação aos controles negativos. Para a CBM, alíquotas foram removidas dos poços que não apresentaram nenhuma absorbância (viabilidade, concentrações CIM) e semeadas em placas de ágar BHI, incubadas por 24 h a 37°C em estufa de CO2 5%. A CBM foi determinada considerando a menor concentração dos extratos capaz de impedir o crescimento bacteriano visível. Cepas de S. mutans (ATCC 21175) e L. casei (ATTC 334) foram ativadas em BHI e caldo Rogosa, respectivamente. A CIM foi determinada pela técnica de diluição em microplacas de 96 poços (100 l de extrato + 80 l BHI/Rogosa + 20 l da bactéria diluída em BHI/Rogosa equivalente a 5x105 UFC/mL), as quais foram incubadas por 24 h (S. mutans) e 48 h (L. casei) a 37°C em estufa de CO2 5%. Os extratos de M. urundeuva e Q. grandiflora inicialmente foram diluídos em BHI/Rogosa variando as concentrações entre 2 mg/ml a 0,00012207 mg/ml e os mesmos extratos diluídos em álcool foram avaliados nas concentrações entre 20 mg/ml a 0,00244 mg/ml para S. mutans e L. casei. Não foi possível determinar a CIM e a CBM para os extratos diluídos no BHI/Rogosa. Foram utilizados como controle positivo a clorexidina e como controles negativos BHI/Rogosa com e sem álcool a 5%. As CIMs (CBMs) da M. urundeuva e Q. grandiflora, diluídas em álcool, e clorexidina contra S. mutans foram 2,5 mg/ml (2,5 mg/ml), 5,0 mg/ml (--) e 0,00468 mg/ml (0,00937 mg/ml), respectivamente. Em relação ao L. casei, as CIMs (CBMs) da M. urundeuva e Q. grandiflora, diluídas em álcool, e da clorexidina foram 0,156 mg/ml (0,312 mg/ml), 0,156 0,625 mg/ml (0,312 0,625mg/ml) e 0,00468 mg/ml (0,3 mg/ml), respectivamente. Como conclusão, nosso estudo mostrou que L. casei (ATTC 334) é mais susceptível aos extratos que S. mutans (ATCC 21175) e o extrato M. urundeuva apresenta melhor efeito antimicrobiano que a Q. grandiflora em S. mutans (ATCC 21175), porém os dois extratos apresentam efeito similar sobre L. casei (ATTC 334) e ambos foram inferiores à CHX. / Dental caries is an oral disease of high prevalence and impact in developing countries. It is caused by the presence of a dental biofilm rich in acidogenic and aciduric bacteria, such as Streptococcus mutans and Lactobacillus casei. Accordingly, phytotherapy has been applied in dentistry due to its known antimicrobial effect, having potential to prevent diseases such as dental caries. Therefore, the present study aims to test the antimicrobial potential of crude and ethanolic extracts of Myracrodruon urundeuva (M. urundeuva) and Qualea grandiflora (Q. grandiflora) leaves on S. mutans and L. casei. For this, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) were determined. MIC was defined as the lowest concentration of the antimicrobial agent capable of inhibiting 100% the microbial growth in comparison to the negative controls. For MBC, aliquots were removed from the wells that did not show any absorbance (viability, concentrations than MIC) and seeded on BHI agar plates, incubated for 24 h at 37°C and 5% CO2. The MBC was determined considering the lowest concentration of extracts capable of preventing visible bacterial growth. Strains of S. mutans (ATCC 21175) and L. casei (ATTC 334) were activated in BHI and Rogosa broth. MIC was determined by the dilution technique in 96-wells microplates (100 l of extract + 80 l BHI/ Rogosa + 20 l of bacterium diluted in BHI/Rogosa equivalent to 5x105 CFU/ml), which were incubated for 24 h (S. mutans) and 48 h (L. casei) at 37°C and 5% CO2. The extracts were firstly diluted in BHI/Rogosa varying the concentrations between 2 mg/mL and 0.00012207 mg/ml; the same extracts were also diluted in alcohol at concentrations ranging from 20 mg/ml to 0.00244 mg/ml and both tested against S. mutans and L. casei. It was not possible to determine the MIC and MBC for the extracts diluted in BHI/Rogosa. Chlorhexidine was used as positive control, while BHI/Rogosa with or without 5% alcohol were used as negative controls. The MICs (MBCs) of M. urundeuva and Q. grandiflora diluted in alcohol, and clorexidine against S. mutans were 2.5 mg/ml (2.5 mg/ml), 5.0 mg/ml (--) and 0.00468 mg/ml (0.00937 mg/ml), respectively. In respect to L. casei, the MICs (MBCs) of M. urundeuva and Q. grandiflora, diluted in alcohol, and chlorhexidine were 0.156 mg/ml (0.312 mg/ml), 0.156 0.625 mg/ml (0.312 0.625 mg/ml) and 0.00468 mg/ml (0.3 mg/ml), respectively. In conclusion, our study showed that L. casei (ATTC 334) is more susceptible than S. mutans (ATCC 21175) to the extracts and the extract of M. urundeuva has a better antimicrobial effect than Q. grandiflora against S. mutans (ATCC 21175), but both extracts have similar effect on L. casei (ATTC 334) and they were inferior to CHX.

A cárie dentária é uma doença bucal de alta prevalência e impactante em países em desenvolvimento. É causada pela presença de biofilme dentário rico em bactérias acidogênicas e acidúricas, como Streptococcus mutans e Lactobacillus casei. Neste sentido, a fitoterapia tem sido aplicada na odontologia devido ao seu conhecido efeito antimicrobiano, tendo potencial para prevenir doenças como a cárie dentária. Portanto, o presente estudo tem como objetivo testar o potencial antimicrobiano de extratos bruto e etanólico das folhas de Myracrodruon urundeuva (M. urundeuva.) e Qualea grandiflora (Q. grandiflora) sobre S.mutans e L. casei. Para tal, determinaram-se a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Bactericida Mínima (CBM). A CIM foi definida como a menor concentração do agente antimicrobiano capaz de inibir 100% o crescimento microbiano (absorbância) em relação aos controles negativos. Para a CBM, alíquotas foram removidas dos poços que não apresentaram nenhuma absorbância (viabilidade, concentrações CIM) e semeadas em placas de ágar BHI, incubadas por 24 h a 37°C em estufa de CO2 5%. A CBM foi determinada considerando a menor concentração dos extratos capaz de impedir o crescimento bacteriano visível. Cepas de S. mutans (ATCC 21175) e L. casei (ATTC 334) foram ativadas em BHI e caldo Rogosa, respectivamente. A CIM foi determinada pela técnica de diluição em microplacas de 96 poços (100 l de extrato + 80 l BHI/Rogosa + 20 l da bactéria diluída em BHI/Rogosa equivalente a 5x105 UFC/mL), as quais foram incubadas por 24 h (S. mutans) e 48 h (L. casei) a 37°C em estufa de CO2 5%. Os extratos de M. urundeuva e Q. grandiflora inicialmente foram diluídos em BHI/Rogosa variando as concentrações entre 2 mg/ml a 0,00012207 mg/ml e os mesmos extratos diluídos em álcool foram avaliados nas concentrações entre 20 mg/ml a 0,00244 mg/ml para S. mutans e L. casei. Não foi possível determinar a CIM e a CBM para os extratos diluídos no BHI/Rogosa. Foram utilizados como controle positivo a clorexidina e como controles negativos BHI/Rogosa com e sem álcool a 5%. As CIMs (CBMs) da M. urundeuva e Q. grandiflora, diluídas em álcool, e clorexidina contra S. mutans foram 2,5 mg/ml (2,5 mg/ml), 5,0 mg/ml (--) e 0,00468 mg/ml (0,00937 mg/ml), respectivamente. Em relação ao L. casei, as CIMs (CBMs) da M. urundeuva e Q. grandiflora, diluídas em álcool, e da clorexidina foram 0,156 mg/ml (0,312 mg/ml), 0,156 0,625 mg/ml (0,312 0,625mg/ml) e 0,00468 mg/ml (0,3 mg/ml), respectivamente. Como conclusão, nosso estudo mostrou que L. casei (ATTC 334) é mais susceptível aos extratos que S. mutans (ATCC 21175) e o extrato M. urundeuva apresenta melhor efeito antimicrobiano que a Q. grandiflora em S. mutans (ATCC 21175), porém os dois extratos apresentam efeito similar sobre L. casei (ATTC 334) e ambos foram inferiores à CHX. / Dental caries is an oral disease of high prevalence and impact in developing countries. It is caused by the presence of a dental biofilm rich in acidogenic and aciduric bacteria, such as Streptococcus mutans and Lactobacillus casei. Accordingly, phytotherapy has been applied in dentistry due to its known antimicrobial effect, having potential to prevent diseases such as dental caries. Therefore, the present study aims to test the antimicrobial potential of crude and ethanolic extracts of Myracrodruon urundeuva (M. urundeuva) and Qualea grandiflora (Q. grandiflora) leaves on S. mutans and L. casei. For this, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) were determined. MIC was defined as the lowest concentration of the antimicrobial agent capable of inhibiting 100% the microbial growth in comparison to the negative controls. For MBC, aliquots were removed from the wells that did not show any absorbance (viability, concentrations than MIC) and seeded on BHI agar plates, incubated for 24 h at 37°C and 5% CO2. The MBC was determined considering the lowest concentration of extracts capable of preventing visible bacterial growth. Strains of S. mutans (ATCC 21175) and L. casei (ATTC 334) were activated in BHI and Rogosa broth. MIC was determined by the dilution technique in 96-wells microplates (100 l of extract + 80 l BHI/ Rogosa + 20 l of bacterium diluted in BHI/Rogosa equivalent to 5x105 CFU/ml), which were incubated for 24 h (S. mutans) and 48 h (L. casei) at 37°C and 5% CO2. The extracts were firstly diluted in BHI/Rogosa varying the concentrations between 2 mg/mL and 0.00012207 mg/ml; the same extracts were also diluted in alcohol at concentrations ranging from 20 mg/ml to 0.00244 mg/ml and both tested against S. mutans and L. casei. It was not possible to determine the MIC and MBC for the extracts diluted in BHI/Rogosa. Chlorhexidine was used as positive control, while BHI/Rogosa with or without 5% alcohol were used as negative controls. The MICs (MBCs) of M. urundeuva and Q. grandiflora diluted in alcohol, and clorexidine against S. mutans were 2.5 mg/ml (2.5 mg/ml), 5.0 mg/ml (--) and 0.00468 mg/ml (0.00937 mg/ml), respectively. In respect to L. casei, the MICs (MBCs) of M. urundeuva and Q. grandiflora, diluted in alcohol, and chlorhexidine were 0.156 mg/ml (0.312 mg/ml), 0.156 0.625 mg/ml (0.312 0.625 mg/ml) and 0.00468 mg/ml (0.3 mg/ml), respectively. In conclusion, our study showed that L. casei (ATTC 334) is more susceptible than S. mutans (ATCC 21175) to the extracts and the extract of M. urundeuva has a better antimicrobial effect than Q. grandiflora against S. mutans (ATCC 21175), but both extracts have similar effect on L. casei (ATTC 334) and they were inferior to CHX.

Understanding of the diverse aspects affecting the regeneration ecology of species is crucial to make decisions regarding management and conservation strategies, especially in highly fragile and threatened ecosystem as the Neotropical savanna (cerrado) formations. Available knowledge of regeneration ecology of cerrado species is too limited to attain optimal or suitable management actions. The objectives of the present study were: i) analysis of the characteristic parameters of the anemochorous seed dispersal of study species Q. grandiflora, (ii) determine the spatial distribution of tree species Q. grandiflora for growth stages (seedlings to juveniles) and interrelations between the stages, and (iii) determining variables of the spatial distribution of recruitment of tree species A. tomentosum. The present study was conducted in the cerrado Aguara Ñu of the Mbaracayú Nature Forest Reserve located in the northeast of Paraguay. The cerrado Aguara Ñu is part of the Mbaracayú Biosphere Reserve and represents one of the most important ecoregions in the world, the cerrado ecosystem. The cerrado biome encompasses areas from northeastern to southwestern Brazil, eastern Bolivia, and northern Paraguay. It is characterized by the presence of high plant and animal biodiversity and also high endemism (Myers et al., 2000). Tree species Q. grandiflora and A. tomentosum are typical species of the cerrado formation. Based on the selected investigated regeneration cycle stages of study tree species Q. grandiflora and A. tomentosum, the present thesis describes the spatial analysis of recruitment of both study species and the anemochorous diaspore dispersal of tree species Q. grandiflora. The purpose of the present investigation is to address regeneration aspects not attained so far as certain seed dispersal aspects, such as seed densities and distances from conspecific adult trees and spatial arrangements of seedlings of species A. tomentosum. Results of the present study aim to contribute to existing information and at the same time provide new knowledge on ecological aspects so far not investigated. Research results on seed dispersal of tree species Q. grandiflora revealed that dispersal can be modeled by inverse modelling considering isotropy and lognormal density function presenting mean dispersal distances of 10.69 to 62.48 m. Estimations of the fruit production of a seed tree yielded a total 50671 to 70632 (DBH = 70 cm). Results of spatial arrangement of seedlings and juveniles revealed a significant distance effect to conspecific adult trees. Moreover, results also showed: (i) highest densities or intensities (m2) of seedlings (heights <50 cm) close to the conspecific adult trees and (ii) a shift of intensity of seedlings with increase of growth stage or size for tree species Q. grandiflora. Additionally, seedlings (up to 200 cm height) of study species Q. grandiflora indicated gradual decreasing clumping patterns and juveniles (200 – 500 cm height) presented clumping patterns. Modelling results of spatial patterns of seedlings (heights ≤ 200 cm) of study tree species A. tomentosum revealed aggregation patterns. Moreover, shade effect resulted to be a statistical significant factor for the establishment of seedlings of tree species A. tomentosum (p-value = 0.0266), whereas distance effect to seed tree resulted not significant (p-value= 0.4936). Considering the findings of seed dispersal and spatial patterns analysis of tree species Q. grandiflora and A. tomentosum some management aspects to be attained for conservation purposes are avoiding fragmentation of the ecosystem, management of the spatial and time fire frequency and maintain minimum amount of seed trees per unit area in order to guarantee successful recruitment.:1. Introduction 1 References 8 2. Materials and Methods 13 2.1 Characterization of the cerrado biome 13 2.2 Description of the study area and study sites 15 2.3 Characterization of the study tree species 23 2.3.1 Qualea grandiflora (Mart.) 23 2.3.2 Aspidosperma tomentosum (Mart.) 24 2.4 Principles and selection criteria 25 2.5 Data collection 26 2.5.1 Seed dispersal 26 2.5.2 Spatial patterns of plants 27 2.6 Data analysis 28 2.6.1 Statistical analysis of data 28 2.6.2 General statistical procedures of data analysis 30 2.6.3 Spatial point process analysis – Inverse modelling and spatial point patterns 31 2.6.4 Spatial point patterns analysis procedure 33 2.6.4.1 Descriptive statistics in spatial point patterns 36 2.6.4.1.1 Distance effect of seedlings from seed trees (rhohat function) 36 2.6.4.1.2 Pair correlation function (pcf) 36 2.6.4.2 Point process modelling 38 References 43 3. Seed dispersal of Qualea grandiflora (Mart.) 49 3.1 Introduction 49 3.2 Methodology 51 3.2.1 Data collection and seed trap design 51 3.2.1 Data analysis – inverse modelling 53 3.3 Results 58 3.3.1 Seed density 58 3.3.2 Inverse modelling results – seed production, dispersal and distances 60 3.3.2.1 Isotropic modelling 61 3.3.2.2 Anisotropic modelling 63 3.3.2.3 Statistical comparison isotropy vs. anisotropy 66 3.4 Discussion 67 3.4.1 Applied methodology for seed dispersal – trap design and inverse modelling 67 3.4.2 Seed dispersal modelling 69 3.5 Conclusion 74 References 75 4. Spatial analysis of Qualea grandiflora (Mart.) 80 4.1 Introduction 80 4.2 Methodology 82 4.2.1 Data collection – Field sampling 82 4.2.2 Data analysis 85 4.2.2.1 Spatial point pattern – Explorative analysis 85 4.2.2.2 Point process modelling (Poisson and Gibbs models) 87 4.2.3 Results 89 4.2.3.1 Spatial distribution of individuals of study species 89 4.2.3.2 Modelling distance effect of recruitment to adult trees 95 4.2.4 Discussion 102 4.2.4.1 Applied methodology for spatial analysis of study species 102 4.2.4.2 Spatial arrangement of study species 103 4.2.5 Conclusion 109 References 109 5. Spatial analysis of Aspidosperma tomentosum (Mart.)115 5.1 Introduction 115 5.2 Methodology 117 5.2.1 Data collection – Field sampling 117 5.2.2 Data analysis 120 5.2.2.1 Spatial point pattern – Explorative analysis 120 5.2.2.2 Point process modelling – Replicated point patterns 120 5.3 Results 123 5.3.1 Spatial distribution of natural regeneration of study species 123 5.3.2 Modelling shade and distance to seed tree effect on natural regeneration of study species 130 5.4 Discussion 133 5.4.1 Applied methodology for data collection and analysis 133 5.4.2 Spatial distribution of natural regeneration of study species 134 5.5 Conclusion 139 References 140 5. Concluding discussion and summary 146 6.1 Regeneration ecology of Qualea grandiflora and Aspidosperma tomentosum 146 6.1.1 Inferences on relation of seed dispersal and spatial distribution of recruitment of Qualea grandiflora 146 6.1.2 Inferences on spatial patterns of recruitment of Aspidoserma tomentosum 149 6.2 Management implications for Qualea grandiflora Aspidosperma tomentosum 150 6.3 Future research 153 6.4 Concluding summary 154 References 155