O controle da hiperfosfatemia é a peça chave do tratamento do distúrbio mineral e ósseo em pacientes com doença renal crônica. O seu manejo é multifatorial e inclui a restrição dietética de fósforo (P), o uso apropriado de quelantes de P e a dose correta de terapia renal substitutiva. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da aplicação de uma tabela de contagem de fósforo com cloridrato de sevelamer nos níveis séricos de fósforo de pacientes em hemodiálise. Foram recrutados 56 pacientes, os quais foram divididos em grupo intervenção A (n=18) e B (n=19) e grupo controle C (n=19). O grupo controle (GC) teve seus dados dietéticos, estado nutricional, carga de comprimidos e percentual de adesão ao cloridrato de sevelamer, além de parâmetros laboratoriais, como o P, o cálcio (Ca), o produto cálcio-fósforo (CaxP) e o hormônio da paratireoide (PTH), observados por 4 meses (T0, T1, T2, T3 e T4). Os grupos A (GA) e B (GB) tiveram os mesmos parâmetros investigados pelo GC, entretanto os 2 primeiros meses foram apenas de observação. Após essa fase, esses dois grupos foram orientados a controlar sua alimentação por meio da tabela de contagem de fósforo que consiste em uma ferramenta que auxilia no controle da ingestão alimentar de P por meio de lista de alimentos divididos em grupos alimentares com pontuações delimitadas e proporcionais aos teores de P, pelo período de 2 meses. Nesse período, o GA foi orientado a utilizar o cloridrato de sevelamer com dose fixa de 2 comprimidos (800mg) ao dia. Já o GB, utilizou o cloridrato de sevelamer por meio do autoajuste da sua dose com o auxílio de uma tabela que determina sua dose conforme o número de porções alimentares consumidas. Ao final do estudo, observou-se níveis de P de 4,92±1,42mg/dL; 5,44±1,21mg/dL e 5,07±1,24mg/dL, para os grupos A, B e C, respectivamente, não sendo encontrada diferenças estatísticas ao longo do trabalho. O CaxP manteve-se entre o início e final do estudo em ambos os grupos, apresentando-se <55mg2/dL2. No GA, os níveis de Ca reduziram de 9,52±1,01mg/dL para 9,17±0,77mg/dL entre T0 e T4; já no GB, esse parâmetro reduziu de 9,46±1,07mg/dL em T1 para 9,04±0,86mg/dL em T4; no GC, T4 (8,6±0,58mg/dL) apresentou-se com níveis menores de Ca ao ser comparado com T1, T2 e T3. O PTH manteve-se ao longo do estudo em ambos os grupos com níveis >300pg/mL. Em relação ao consumo do quelante, houve redução significativa da carga de comprimidos ao comparar, nos grupos A e B, os tempos T1 (GA: 122,22±90,1 e GB: 170,58±109,12) e T2 (GA: 103,67±63,53 e GB: 162±71,47) com T3 (GA: 49,89±15,23 e GB: 127,11±66,65) e T4 (GA: 45,94±14,96 e GB: 109,89±58,42). Apenas no GA foi observado melhora do percentual de adesão ao quelante quando comparado T1 com 66,21% de adesão com T3 que obteve 88,96% (p=0,014), e T2 que apresentou 64,92% de adesão contra 88,96% em T3 (p=0,009). Os dados dietéticos apontaram redução do consumo de P, após intervenção, apenas no GB ao comparar T0 (1039,43±66,78mg) com T4 (857,83±65,6mg). Não foram identificados prejuízos no estado nutricional após o término do trabalho. O estudo demonstrou que a aplicação da tabela de contagem de fósforo com cloridrato de sevelamer auxilia no controle dos níveis séricos de P tanto por meio da dose mínima do quelante como pelo autoajuste da sua dose. / Control of hyperphosphatemia is the key factor of treatment of mineral and bone disorders in patients with chronic kidney disease. Its management is multifactorial and includes dietary restriction of phosphorus (P), appropriate use of phosphate binders and the correct dose of renal replacement therapy. This study aimed to evaluate an intervention with a phosphorus counting table with sevelamer hydrochloride on serum phosphorus in patients on hemodialysis. Fifty-six patients were recruited and divided into intervention group A (n = 18) and B (n = 19) and control group C (n=19). Control group (CG) had dietary data, nutritional status, dose and percentage of adherence to sevelamer hydrochloride and laboratory parameters, such as P, calcium (Ca), calcium-phosphorus product (CaxP) and parathyroid hormone (PTH), observed for four months (T0, T1, T2, T3 e T4). Groups A (AG) and B (BG) had the same parameters evaluated for CG. However, the first two months were only observation. After this period, the two groups were conducted to control their diet with a phosphorus counting table help, which it\'s a tool that assists the control of dietary P intake through a food list divided into food groups with defined and proportional scores in relation to P content, for 2 months. In this period, AG was instructed to use sevelamer hydrochloride with a fixed dose of two tablets (800mg) daily. BG used the sevelamer hydrochloride through self-adjustment of its dose with a chart helps that establish its dose according to the number of consumed servings. At the end of the study, serum levels of P were 4.92±1.42mg/dL; 5.44±1.21mg/dL and 5.07±1.24mg/dL, for groups A, B, and C, respectively, with no statistical differences throughout the study. CaxP remained stable before and after intervention in both groups, showing <55mg2/dL2. In AG, serum Ca reduced from 9.52±1.01mg/dL to 9.17±0.77mg/dL between T0 and T4; Already BG, this parameter reduced from 9.46±1.07mg/dL at T1 to 9.04±0.86mg/dL at T4; in CG, T4 (8.6±0.58mg/dL) showed reduced levels of Ca when compared to T1, T2, and T3. PTH maintained throughout the study in both groups with levels >300pg/mL. About phosphate binder, there was a significant reduction in its dose when comparing, in AG and BG, at T1 (AG: 122.22±90.1 and BG: 170.58±109.12) and T2 (AG: 103.67±63.53 and BG: 162±71.47) with T3 (AG: 49.89±15.23 and BG: 127.11±66.65) and T4 (AG: 45.94±14.96 and BG: 109.89±58.42). Only in the AG, the percentage of adherence to treatment with phosphate binder was improved when compared T1 with 66.21% of adhesion with T3 that obtained 88.96% (p = 0.014), and T2 that presented 64.92% of adhesion against 88.96% in T3 (p = 0.009). Dietary data indicated a reduction of P consumption after an intervention, only in BG when compared T0 (1039.43±66.78mg) with T4 (857.83±65.6mg). No damage to nutritional status was observed at the end of the study. Intervention with a phosphorus counting table with sevelamer hydrochloride assists in the control of serum P levels both through the minimum dose of the phosphate binder and self-adjustment of its dose.

Peptídeos antimicrobianos (PAMs) fazem parte de um dos mecanismos da imunidade inata contra infecções. A microplusina é um PAM de 10.204 Da, isolado da hemolinfa livre de células e dos ovos do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus. É um PAM aniônico em pH fisiológico, possui seis resíduos de cisteína, com formação de três pontes dissulfeto, além de sete resíduos de histidina concentrados principalmente na sua porção C-terminal. O presente trabalho teve como objetivo investigar o mecanismo de ação antimicrobiana da microplusina. A microplusina recombinante é ativa contra várias bactérias Gram-positivas e fungos, porém não apresenta atividade contra bactérias Gram-negativas. Para avaliar o seu mecanismo de ação, foram utilizados dois modelos: a bactéria Micrococcus luteus e o fungo Cryptococcus neoformans. A microplusina é bacteriostática contra M. luteus e apresenta localização intracelular na bactéria. Além disso, observamos que a microplusina liga cobre e que a adição deste metal ao meio de cultivo reduz sua atividade antibacteriana. Bactérias M. luteus pré-incubadas com microplusina retomam o seu crescimento quando cobre é adicionado ao meio. Estes dados indicam que a atividade da microplusina está relacionada à sua habilidade de depletar cobre do meio extra ou intracelular, sugerindo um efeito nutricional para o peptídeo. A microplusina apresenta estrutura terciária com cinco a-hélices e sua ligação ao cobre não induz mudanças conformacionais. Observou-se que as histidinas 1, 2 e 74 da microplusina podem estar envolvidas na formação de um sítio de ligação ao cobre. Quanto à C. neoformans, verificou-se que a microplusina inibe a melanização do fungo, um fator de virulência catalisado pela lacase, uma enzima cobre-dependente. Entretanto, a microplusina não afeta a atividade da lacase, nem sua expressão gênica. O peptídeo também não inibe a auto-polimerização de substratos fenólicos que levam à melanização. Sendo assim, mais estudos são necessários a fim de avaliar o mecanismo pelo qual a microplusina inibe a melanização. Adicionalmente, a microplusina afeta a viabilidade do fungo e reduz o tamanho de sua cápsula, outro importante fator de virulência. As atividades da microplusina sobre C. neoformans sugerem o seu potencial terapêutico. Experimentos in vivo com modelo murino, mostraram que a microplusina reduz o processo inflamatório e a viabilidade de C. neoformans nos pulmões, indicando que em condições otimizadas, o peptídeo pode atuar no controle de infecções. / Antimicrobial peptides (AMPs) take part of innate immune mechanisms against infections. Microplusin is a 10,204 Da AMP, isolated from cell-free hemolymph and eggs of the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus. It is an anionic AMP at physiological pH, with six cysteine residues forming three disulfide bridges and seven histidine residues clustered mainly at the carboxy end portion. The goal of the present work was investigate the antimicrobial action mechanism of microplusin. Recombinant microplusin is active against Gram-positive bacteria and fungi, however, no activity is detected for Gram-negative bacteria. Two models were used to evaluate the action mechanism of microplusin: the bacteria Micrococcus luteus and the yeast Cryptococcus neoformans. Microplusin is bacteriostatic against M. luteus and its localization is intracellular for these bacteria. Moreover, microplusin binds copper and the addition of this metal into the medium reduces its antibacterial activity. M. luteus bacteria pre-treated with microplusin recover its growth when copper is added. These data indicate that microplusin activity is related to its ability to deplete copper present in the extracellular or intracellular environment, suggesting a nutritional effect. Microplusin presents a tertiary structure with five a-helix and the copper binding does not induce conformation changes. In addition, it was observed that histidines 1, 2 and 74 from microplusin may be involved in the formation of a copper binding site. About C. neoformans, it was verified microplusin inhibits its melanization, a virulence factor catalyzed by laccase, a copper dependent enzyme. However, microplusin does affect neither laccase activity nor its gene expression. The melanization caused by auto-polymerazation of phenolic substrates, is also not inhibited by microplusin. Hence, additional studies are required to evaluate the mechanism by which microplusin inhibits melanization. In addition, microplusin also affects the fungi viability and reduces the capsule size, another important virulence factor.The microplusin activities against C. neoformans suggest its therapeutic potential. In vivo experiments with murine model showed that microplusin reduces the inflammation and the viability of C. neoformans in the lungs, indicating that, in optimized conditions, the peptide may act in the infection control.

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O controle da hiperfosfatemia é a peça chave do tratamento do distúrbio mineral e ósseo em pacientes com doença renal crônica. O seu manejo é multifatorial e inclui a restrição dietética de fósforo (P), o uso apropriado de quelantes de P e a dose correta de terapia renal substitutiva. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da aplicação de uma tabela de contagem de fósforo com cloridrato de sevelamer nos níveis séricos de fósforo de pacientes em hemodiálise. Foram recrutados 56 pacientes, os quais foram divididos em grupo intervenção A (n=18) e B (n=19) e grupo controle C (n=19). O grupo controle (GC) teve seus dados dietéticos, estado nutricional, carga de comprimidos e percentual de adesão ao cloridrato de sevelamer, além de parâmetros laboratoriais, como o P, o cálcio (Ca), o produto cálcio-fósforo (CaxP) e o hormônio da paratireoide (PTH), observados por 4 meses (T0, T1, T2, T3 e T4). Os grupos A (GA) e B (GB) tiveram os mesmos parâmetros investigados pelo GC, entretanto os 2 primeiros meses foram apenas de observação. Após essa fase, esses dois grupos foram orientados a controlar sua alimentação por meio da tabela de contagem de fósforo que consiste em uma ferramenta que auxilia no controle da ingestão alimentar de P por meio de lista de alimentos divididos em grupos alimentares com pontuações delimitadas e proporcionais aos teores de P, pelo período de 2 meses. Nesse período, o GA foi orientado a utilizar o cloridrato de sevelamer com dose fixa de 2 comprimidos (800mg) ao dia. Já o GB, utilizou o cloridrato de sevelamer por meio do autoajuste da sua dose com o auxílio de uma tabela que determina sua dose conforme o número de porções alimentares consumidas. Ao final do estudo, observou-se níveis de P de 4,92±1,42mg/dL; 5,44±1,21mg/dL e 5,07±1,24mg/dL, para os grupos A, B e C, respectivamente, não sendo encontrada diferenças estatísticas ao longo do trabalho. O CaxP manteve-se entre o início e final do estudo em ambos os grupos, apresentando-se <55mg2/dL2. No GA, os níveis de Ca reduziram de 9,52±1,01mg/dL para 9,17±0,77mg/dL entre T0 e T4; já no GB, esse parâmetro reduziu de 9,46±1,07mg/dL em T1 para 9,04±0,86mg/dL em T4; no GC, T4 (8,6±0,58mg/dL) apresentou-se com níveis menores de Ca ao ser comparado com T1, T2 e T3. O PTH manteve-se ao longo do estudo em ambos os grupos com níveis >300pg/mL. Em relação ao consumo do quelante, houve redução significativa da carga de comprimidos ao comparar, nos grupos A e B, os tempos T1 (GA: 122,22±90,1 e GB: 170,58±109,12) e T2 (GA: 103,67±63,53 e GB: 162±71,47) com T3 (GA: 49,89±15,23 e GB: 127,11±66,65) e T4 (GA: 45,94±14,96 e GB: 109,89±58,42). Apenas no GA foi observado melhora do percentual de adesão ao quelante quando comparado T1 com 66,21% de adesão com T3 que obteve 88,96% (p=0,014), e T2 que apresentou 64,92% de adesão contra 88,96% em T3 (p=0,009). Os dados dietéticos apontaram redução do consumo de P, após intervenção, apenas no GB ao comparar T0 (1039,43±66,78mg) com T4 (857,83±65,6mg). Não foram identificados prejuízos no estado nutricional após o término do trabalho. O estudo demonstrou que a aplicação da tabela de contagem de fósforo com cloridrato de sevelamer auxilia no controle dos níveis séricos de P tanto por meio da dose mínima do quelante como pelo autoajuste da sua dose. / Control of hyperphosphatemia is the key factor of treatment of mineral and bone disorders in patients with chronic kidney disease. Its management is multifactorial and includes dietary restriction of phosphorus (P), appropriate use of phosphate binders and the correct dose of renal replacement therapy. This study aimed to evaluate an intervention with a phosphorus counting table with sevelamer hydrochloride on serum phosphorus in patients on hemodialysis. Fifty-six patients were recruited and divided into intervention group A (n = 18) and B (n = 19) and control group C (n=19). Control group (CG) had dietary data, nutritional status, dose and percentage of adherence to sevelamer hydrochloride and laboratory parameters, such as P, calcium (Ca), calcium-phosphorus product (CaxP) and parathyroid hormone (PTH), observed for four months (T0, T1, T2, T3 e T4). Groups A (AG) and B (BG) had the same parameters evaluated for CG. However, the first two months were only observation. After this period, the two groups were conducted to control their diet with a phosphorus counting table help, which it\'s a tool that assists the control of dietary P intake through a food list divided into food groups with defined and proportional scores in relation to P content, for 2 months. In this period, AG was instructed to use sevelamer hydrochloride with a fixed dose of two tablets (800mg) daily. BG used the sevelamer hydrochloride through self-adjustment of its dose with a chart helps that establish its dose according to the number of consumed servings. At the end of the study, serum levels of P were 4.92±1.42mg/dL; 5.44±1.21mg/dL and 5.07±1.24mg/dL, for groups A, B, and C, respectively, with no statistical differences throughout the study. CaxP remained stable before and after intervention in both groups, showing <55mg2/dL2. In AG, serum Ca reduced from 9.52±1.01mg/dL to 9.17±0.77mg/dL between T0 and T4; Already BG, this parameter reduced from 9.46±1.07mg/dL at T1 to 9.04±0.86mg/dL at T4; in CG, T4 (8.6±0.58mg/dL) showed reduced levels of Ca when compared to T1, T2, and T3. PTH maintained throughout the study in both groups with levels >300pg/mL. About phosphate binder, there was a significant reduction in its dose when comparing, in AG and BG, at T1 (AG: 122.22±90.1 and BG: 170.58±109.12) and T2 (AG: 103.67±63.53 and BG: 162±71.47) with T3 (AG: 49.89±15.23 and BG: 127.11±66.65) and T4 (AG: 45.94±14.96 and BG: 109.89±58.42). Only in the AG, the percentage of adherence to treatment with phosphate binder was improved when compared T1 with 66.21% of adhesion with T3 that obtained 88.96% (p = 0.014), and T2 that presented 64.92% of adhesion against 88.96% in T3 (p = 0.009). Dietary data indicated a reduction of P consumption after an intervention, only in BG when compared T0 (1039.43±66.78mg) with T4 (857.83±65.6mg). No damage to nutritional status was observed at the end of the study. Intervention with a phosphorus counting table with sevelamer hydrochloride assists in the control of serum P levels both through the minimum dose of the phosphate binder and self-adjustment of its dose.

Peptídeos antimicrobianos (PAMs) fazem parte de um dos mecanismos da imunidade inata contra infecções. A microplusina é um PAM de 10.204 Da, isolado da hemolinfa livre de células e dos ovos do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus. É um PAM aniônico em pH fisiológico, possui seis resíduos de cisteína, com formação de três pontes dissulfeto, além de sete resíduos de histidina concentrados principalmente na sua porção C-terminal. O presente trabalho teve como objetivo investigar o mecanismo de ação antimicrobiana da microplusina. A microplusina recombinante é ativa contra várias bactérias Gram-positivas e fungos, porém não apresenta atividade contra bactérias Gram-negativas. Para avaliar o seu mecanismo de ação, foram utilizados dois modelos: a bactéria Micrococcus luteus e o fungo Cryptococcus neoformans. A microplusina é bacteriostática contra M. luteus e apresenta localização intracelular na bactéria. Além disso, observamos que a microplusina liga cobre e que a adição deste metal ao meio de cultivo reduz sua atividade antibacteriana. Bactérias M. luteus pré-incubadas com microplusina retomam o seu crescimento quando cobre é adicionado ao meio. Estes dados indicam que a atividade da microplusina está relacionada à sua habilidade de depletar cobre do meio extra ou intracelular, sugerindo um efeito nutricional para o peptídeo. A microplusina apresenta estrutura terciária com cinco a-hélices e sua ligação ao cobre não induz mudanças conformacionais. Observou-se que as histidinas 1, 2 e 74 da microplusina podem estar envolvidas na formação de um sítio de ligação ao cobre. Quanto à C. neoformans, verificou-se que a microplusina inibe a melanização do fungo, um fator de virulência catalisado pela lacase, uma enzima cobre-dependente. Entretanto, a microplusina não afeta a atividade da lacase, nem sua expressão gênica. O peptídeo também não inibe a auto-polimerização de substratos fenólicos que levam à melanização. Sendo assim, mais estudos são necessários a fim de avaliar o mecanismo pelo qual a microplusina inibe a melanização. Adicionalmente, a microplusina afeta a viabilidade do fungo e reduz o tamanho de sua cápsula, outro importante fator de virulência. As atividades da microplusina sobre C. neoformans sugerem o seu potencial terapêutico. Experimentos in vivo com modelo murino, mostraram que a microplusina reduz o processo inflamatório e a viabilidade de C. neoformans nos pulmões, indicando que em condições otimizadas, o peptídeo pode atuar no controle de infecções. / Antimicrobial peptides (AMPs) take part of innate immune mechanisms against infections. Microplusin is a 10,204 Da AMP, isolated from cell-free hemolymph and eggs of the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus. It is an anionic AMP at physiological pH, with six cysteine residues forming three disulfide bridges and seven histidine residues clustered mainly at the carboxy end portion. The goal of the present work was investigate the antimicrobial action mechanism of microplusin. Recombinant microplusin is active against Gram-positive bacteria and fungi, however, no activity is detected for Gram-negative bacteria. Two models were used to evaluate the action mechanism of microplusin: the bacteria Micrococcus luteus and the yeast Cryptococcus neoformans. Microplusin is bacteriostatic against M. luteus and its localization is intracellular for these bacteria. Moreover, microplusin binds copper and the addition of this metal into the medium reduces its antibacterial activity. M. luteus bacteria pre-treated with microplusin recover its growth when copper is added. These data indicate that microplusin activity is related to its ability to deplete copper present in the extracellular or intracellular environment, suggesting a nutritional effect. Microplusin presents a tertiary structure with five a-helix and the copper binding does not induce conformation changes. In addition, it was observed that histidines 1, 2 and 74 from microplusin may be involved in the formation of a copper binding site. About C. neoformans, it was verified microplusin inhibits its melanization, a virulence factor catalyzed by laccase, a copper dependent enzyme. However, microplusin does affect neither laccase activity nor its gene expression. The melanization caused by auto-polymerazation of phenolic substrates, is also not inhibited by microplusin. Hence, additional studies are required to evaluate the mechanism by which microplusin inhibits melanization. In addition, microplusin also affects the fungi viability and reduces the capsule size, another important virulence factor.The microplusin activities against C. neoformans suggest its therapeutic potential. In vivo experiments with murine model showed that microplusin reduces the inflammation and the viability of C. neoformans in the lungs, indicating that, in optimized conditions, the peptide may act in the infection control.

In the last years, the interest by the bioactive peptides Spirulina sp. (Arthrospira) is increasing, because of its Generally Regarded as Safe (GRAS) status, and their potential health benefits. These peptides can be used in different functional foods, for medical purposes, cosmetic and nutraceuticals, due to biological properties such as antihypertensive, antioxidative, anti-hyaluronidase and others. In the present investigation, Spirulina maxima were produced through of three hydrolyses process. After, the peptides fractions were purified through tangential filtration (membrane of 2 μM and 10kDa), and the fragments obtained below 10 kDa were partially characterized and determinate their antioxidant (radical scavenging, iron-chelating), antimicrobial, anti-inflammatory, and anti- collagenase. The peptide fraction obtained from the first hydrolyzed (PHA) presented antioxidant activity by capturing the DPPH radicals with a value of IC50 21.25 μg/ml and ABTS with IC50 9.5 μg/ml and TEAC 465.7 Trolox μM/μg sample, iron-chelating showed inhibition of 97.3% and IC50 6.99 μg/ml. Meanwhile, the peptide fraction obtained from the second hydrolyzed (PHP) presented antimicrobial activity with the half maximal inhibitory concentration (IC50) and the minimum bactericidal concentration (MBC) 0.34 mg/ml and 0.63 mg/ml (Bacillus subtilis), IC50 and MBC 0.62 mg/ml and 0.63 mg/ml (Staphylococcus aureus), IC50 and MBC 0.99 mg/ml and 1.25 mg/ml (Salmonella typhi), IC50 and MBC 0.94 mg/ml 1.25 mg/ml (Escherichia coli). The peptide fraction obtained from the two enzymes (PHS) showed antioxidant activity by capturing the DPPH radicals with a value of IC50 17.93 μg/ml and ABTS with IC50 8.6 μg/ml and TEAC 540.7 Trolox μM/μg sample, anti-inflammatory with inhibition of 39% and IC50 0.92 mg/ml, and anti-collagenase with inhibition 92.5% and IC50 32.49 μg/ml. The results indicated that protein isolate from Spirulina maxima can be a source for obtaining of peptides fractions (PHA, PHP and PHS) with activity antioxidants, iron-chelating, antimicrobial, anti-inflammatories and anti-collagenase. / Nos últimos anos o interesse pelos peptídeos bioativos de Spirulina sp. (Arthrospira) tem aumentado enormemente devido a seu estado Geralmente reconhecido como seguro (GRAS) e seus potenciais benefícios para a saúde. Essa microalga pode ser utilizada em diferentes alimentos funcionais, para fins médicos, cosméticos e nutracêuticos devido às suas propriedades biológicas como anti-hipertensivas, antioxidantes, anti-hialuronidase e outras. No presente trabalho de investigação, as fracções de peptídeos de Spirulina maxima foram produzidas através de três processos diferentes de hidrólises, utilizando duas proteases diferentes. Em seguida os extratos foram submetidos a um processo de purificação pelo método de filtração tangencial (membranas de 2 μM e 10 kDa), e os fragmentos obtidos no permeado de 10 kDa foram parcialmente caracterizados e avaliadas suas capacidades antioxidantes (sequestro de radicais, atividade quelante de ferro, antimicrobiana, anti-inflamatória e anticolagenase. Fração de peptídeos obtido do primeiro hidrolisado (PHA) apresentou atividade antioxidante capturando aos radicais DPPH com um valor de IC50 21,25 μg/ml e ABTS com IC50 9,5 μg/ml e TEAC 465,7 Trolox μM/μg de amostra, e atividade quelante mostrou uma inibição de 97,3% e um IC50 6,99 μg/ml. Fração de peptídeos obtido do segundo hidrolisado (PHP) apresentou atividade antimicrobiana com concentração inibitória media (IC50) e concentração bactericida mínima (CBM) de 0,34 e 0,63 mg/ml (Bacillus subtilis), IC50 e CBM 0,62 e 0,63 mg/ml (Staphylococcus aureus), IC50 e CBM 0,99 e 1,25 mg/ml (Salmonella typhi), IC50 e CBM 0,94 e 1,25 mg/ml (Escherichia coli). Fração de peptídeos obtido das duas enzimas (PHS) apresentou atividade antioxidante capturando aos radicais DPPH com um valor de IC50 17,93 μg/ml e ABTS com IC50 8,6 μg/ml e TEAC 540,7 Trolox μM/μg de amostra, anti-inflamatória com inibição da enzima hialuronidase 39% e IC50 0,92 mg/ml, e anticolagenase com uma inibição 92,5% e IC50 32.49 μg/ml. Os resultados permitem concluir que isolado proteico de Spirulina pode ser uma fonte para obtenção de extratos peptídicos (PHA, PHP e PHS) com atividade antioxidante, quelante, antimicrobiana, anti-inflamatória, anticolagenase.

Made available in DSpace on 2017-07-21T18:53:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Francieli Kanumfre.pdf: 1078833 bytes, checksum: 7d3781e5bfb4cfe4fb4ec9e73497dfa7 (MD5) Previous issue date: 2010-02-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The phytic acid, a component of naturally occurring seeds, has a high chelating potential and depends on the pH can interact with metal ions that act as cofactors of several enzymes,interfering with essential metabolic processes. Phytic acid has antioxidant functions due to the formation of iron chelates, by suppressing the oxidative reactions catalyzed by this metal,which implies in a pronounced antioxidant function in the preservation of seeds. The price of pure phytic acid is very high, thus, techniques for extraction and purification can be improved to obtain the phytic acid with high purity degree. The purpose of this study consisted in to extract the phytic acid from pumpkin, watermelon, melon and papaya seeds, purify and characterize it by means of analytical techniques, to evaluate their chelating ability against the metal ion Fe (III), and investigate their antioxidant potential for possible use as a safe additive in food industry. Phytic acid was extracted in acid middle and mild conditions. For purification, was used a weak anion exchange resin, free base, and phytic acid elution was performed with a solution of hydrochloric acid 0.70 mol L-1. The solutions obtained had a purity of about 34 % compared to phytic acid solutions commercially available, and pumpkin seeds showed the highest content of phytic acid, 2.6325 (± 0.1994) g/100 g, dry matter. The phosphorus content in the different samples was similar and close to the amount of phosphorus found in the standard through the analytical curve. The thin-layer chromatography revealed that the extraction and purification procedures did not release phosphate from phytic acid molecule, as the inositol hexaphosphate was the main component obtained from different seeds. The data obtained from infrared and potentiometric studies revealed that phytic acid samples showed purity degree relatively high. The spectroscopic studies on UV-Vis showed that the phytic acid-Fe (III) complex, dodecassodium salt, presented an absorption band relating on the electron transfer from ligand to metal. The spectra for the phytic acid-Fe (III) complexes, obtained from seeds were similar, with high values of binding energy, suggesting that the interaction between phytic acid and the metal ion was effective. The phytic acid acts as a secondary antioxidant, thus it has not responded to trials of FRAP and DPPH, however,as evidenced by UV-Vis studies, phytic acid has a pronounced antioxidant function in preserving food due to the formation of stable chelates with Fe (III). / ácido fítico, componente de ocorrência natural em sementes, possui elevado potencial quelante e a depender do pH pode interagir com íons metálicos que atuam como co-fatores de diversas enzimas, interferindo em processos metabólicos essenciais. O ácido fítico possui funções antioxidantes em virtude da formação de quelatos com ferro, suprimindo as reações oxidativas catalisadas por este metal, o que implica em uma pronunciada função antioxidante na preservação de sementes. O custo do ácido fítico puro é muito elevado, desta forma,técnicas de extração e purificação podem ser melhoradas para obtenção do ácido fítico com elevado grau de pureza. O objetivo deste trabalho consistiu em extrair o ácido fítico de sementes de abóbora, melancia, melão e mamão, purificá-lo e caracterizá-lo por meio de técnicas analíticas, avaliar sua habilidade quelante frente ao íon metálico Fe (III), e investigar seu potencial antioxidante para possível utilização como aditivo seguro na indústria de alimentos. O ácido fítico foi extraído em meio ácido e em condições brandas. Para a purificação, foi utilizada uma resina de troca aniônica fraca, livre de base, e a eluição do ácido fítico foi realizada com uma solução de ácido clorídrico 0,70 mol L-1. As soluções obtidas apresentaram pureza de aproximadamente 34 %, comparável às soluções de ácido fítico disponíveis comercialmente, e as sementes de abóbora apresentaram o maior conteúdo de ácido fítico, 2,6325 (± 0,1994) g/ 100 g, base seca. Os conteúdos de fósforo para as diferentes amostras foram semelhantes entre si e próximos à quantidade de fósforo encontrada para o padrão através da curva analítica. A cromatografia em camada delgada revelou que os procedimentos de extração e purificação não liberaram fosfato da molécula de ácido fítico,pois o hexafosfato de inositol foi o principal componente obtido a partir das diferentes sementes. Os dados obtidos dos estudos de infravermelho e potenciométricos revelaram que as amostras de ácido fítico encontraram-se com grau de pureza relativamente elevado. Os estudos espectroscópicos no UV-Vis mostraram que o complexo ácido fítico-Fe (III), sal de dodecassódio apresentou uma banda de absorção referente à transferência de elétrons do ligante para o metal. Os espectros para os complexos ácido fítico-Fe (III), obtidos das sementes foram semelhantes, com elevados valores de energia de ligação, que sugerem que a interação entre o ácido fítico e o íon metálico foi efetiva. O ácido fítico atua como um antioxidante secundário, assim não respondeu aos ensaios de FRAP e DPPH, contudo, como evidenciado pelos estudos UV-Vis, o ácido fítico possui uma pronunciada função antioxidante na preservação de alimentos devido à formação de quelatos estáveis com Fe (III).

[pt] Os nanomateriais à base de TiO2 sensíveis à luz visível estão entre as alternativas mais promissoras para aplicações fotocatalíticas, como remediação ambiental. Os complexos de transferência de carga (CTCs) entre nano-TiO2 e ligantes bidentados, uma alternativa, têm sido amplamente estudados. No entanto, a eficiência da fotodegradação e o papel das espécies oxidantes reativas (ROS) não são totalmente compreendidos. Além disso, o desenvolvimento de CTCs baseados em TiO2 modificado com ácido malônico (MoA) ainda não foi investigado, até onde é sabido. Neste estudo, CTCs de TiO2-Acetilacetona (ACAC) e TiO2-MoA com alta área superficial foram sintetizados via sol-gel. Ambos os CTCs à base de TiO2preparados foram submetidos a testes de fotodegradação de tetraciclina e clorofenolcom e sem sequestrantes de ROS sob luz visível de baixa potência (26 W). Os CTCs TiO2-MoA foram totalmente caracterizadas por análises de DRX, MS-TGA, FTIR, adsorção-dessorção de N2, DRS, PL, EPR e XPS. A síntese sol-gel e o processo de calcinação adotado produziram CTCs de anatásio fortemente ligados (ligação covalente) com acetilacetona e ácido malônico, capazes de absorver ao longo do espectro visível quando calcinados a 300 graus C (TiO2-A300) e 270 graus C (TiO2-MoA270). Ambos os CTCs calcinados apresentam um único elétron preso na vacância de oxigênio (SETOV / centro de cores F+). Os CTCs TiO2-MoA-270 apresentaram áreas superficiais (>306 m2.g-1), volumes de mesoporos (>0,339 mL.g-1) e atividadefotocatalítica extremamente elevados, degradando aproximadamente 100 por cento de TC após 6 h. Os CTCs TiO2-MoA-270 e TiO2-A300 são uma fonte eficiente de geração de radicais *O2- e ineficientes geradores de radicais OH*. Os resultados desta pesquisa podem ser aplicados à síntese, via sol-gel, de outros CTCs, como os ácidos dicarboxílicos, e explorados em estudos posteriores sobre purificação do ar e produção de hidrogênio. / [en] Visible light-sensitive TiO2-based nanomaterials are among the most promising alternatives for photocatalytic applications, such as environmental remediation. The charge transfer complexes (CTCs) between nano-TiO2 and bidentate ligands, an alternative, have been widely studied. However, the photodegradation efficiency and role of reactive oxidizing species (ROS) are not fully understood. In addition, the development of CTCs based on TiO2 modified with malonic acid (MoA) have not yet been investigated, as far as the authors know. In this study, TiO2-Acetylacetone (ACAC) and TiO2-MoA CTCs with high surface area were synthesized via sol-gel route. Both as-prepared TiO2-based CTCs were subjected to tetracycline and chlorophenol photocatalytic degradation tests with and without ROS scavengers under low-power visible light (26 W). The TiO2-MoA CTCs were fully characterized by XRPD, MS-TGA, FTIR, N2 adsorption-desorption, DRS, PL, EPR and XPS analysis. The sol-gel synthesis and the calcination process adopted produced CTCs of nano-TiO2 anatase strongly bond (covalent bond) with acetylacetone and malonic acid, capable of absorbing along the visible spectrum when calcined at 300 degrees C (TiO2-ACAC-300) and 270 degrees C (TiO2- MoA-270). Both calcined CTCs present single electron trapped in oxygen vacancy (SETOV / F +color center). The TiO2-MoA-270 CTCs showed very high surface areas (>306 m2.g-1), mesopore volumes (>0.339 mL.g-1) and the highest photocatalytic activity, degrading approximately 100 percent of the TC after 6 h. The TiO2-MoA-270 and TiO2-A300 CTCs were an efficient source of *O2- radicals and inefficient generation of OH* radicals. The findings of this research can be applied to the synthesis, via sol-gel, of other CTCs, such as dicarboxylic acids, and explored in further studies on air purification and hydrogen production.