Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Elisa M R Azevedo.pdf: 722969 bytes, checksum: 9e335992daabd50fc7361968e93df415 (MD5) Previous issue date: 2009-08-13 / Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a chronic zoonosis caused by a protozoan called Leishmania (Leishmania) chagasi and has as vectors, the sandflies Lutzomyia longipalpis and Lutzomyia cruzi. The domestic dog is the most important reservoir in urban areas considering the zoonotic disease form and is responsible for maintaining the parasite in endemic foci. Aiming to assist the Superintendent of Policies for Comprehensive Health Care / Health State Department of Goiás (Spais / SES-GO) and the Department of Zoonosis Control from Goiânia (GO-DCZ) in epidemiological surveillance of the disease, this work investigated possible cases of CVL by using laboratory analysis. For this study, dogs seen at the Veterinary Hospital, School of Veterinary Medicine, Federal University of Goiás (HV / EV / UFG) with clinical suspicion of disease and symptomatic and asymptomatic dogs captured by DCZ-GO were analyzed. A total of 214 dogs were evaluated, and classified into three groups. Group 1 (GI): 33 dogs from DCZ with at least three clinical signs suggestive of LVC, Group 2 (GII): 141 clinically healthy dogs from DCZ and Group 3 (GIII): 40 dogs seen at the HV / EV / UFG with clinical suspicion of LVC. The frequency of animals classified as positive with different methods of diagnosis used in this study were: 5.6% (n = 12) in ELISA test, 9.35% (n = 20) in IFAT, 2.80% (n = 6) in the direct parasitological examination of skin imprints; 2.34% (n = 5) in direct parasitological examination of lymphonode, and 3.17% (n = 7) in PCR reactions of both the genderspecific protocol and the L. chagasi-specific. Considering the results and the conditions of the present study, it is concluded that there is casuistry in CVL series of symptomatic or asymptomatic dogs clinically attended in the city of Goiânia. The occurrence of Leishmania chagasi bearer dogs captured in the municipality of Goiânia were detected and the symptoms frequently observed in illness dogs carriers of L. chagasi in Goiânia are: conjunctivitis, lymphadenopathy, skin changes, cachexia and onychogryphosis. / A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) é uma zoonose crônica causada por um protozoário denominado Leishmania (Leishmania) chagasi e possui como vetores, os flebotomíneos Lutzomyia longipalpis e Lutzomyia cruzi. O cão doméstico é o reservatório mais importante nos meios urbanos, sendo responsável pela manutenção do parasita nos focos endêmicos. Este trabalho investigou laboratorialmente possíveis casos de LVC. Nesta investigação utilizou-se cães atendidos no Hospital Veterinário da Escola de Veterinária da Universidade Federal de Goiás (HV/EV/UFG) com suspeita clínica da doença e cães errantes sintomáticos e assintomáticos capturados pelo DCZ-GO. Nestes locais foram atendidos 214 cães, classificados em três grupos. Grupo 1 (G1): 33 cães do DCZ com no mínimo três sinais clínicos sugestivos para LVC; Grupo 2 (G2): 141 cães do DCZ clinicamente hígidos e Grupo 3 (G3): 40 cães atendidos no HV/EV/UFG com suspeita clínica de LVC. A frequência de animais classificados como positivos, aos diferentes métodos de diagnóstico empregados neste estudo foram: 5,6% (n=12) pelo ELISA-teste; 9,35% (n=20) à RIFI; 2,80% (n=6) ao exame parasitológico direto de imprints de pele; 2,34% (n=5) ao exame parasitológico direto de linfonodo; e 3,17% (n=7) para as reações de PCR. Este trabalho é pioneiro na investigação da Leishmaniose Visceral Canina no município de Goiânia, Goiás. Outros trabalhos devem ser conduzidos continuadamente, visando à investigação sistemática da doença neste e em outros municípios do estado.Considerando os resultados alcançados e as condições em que foi realizado o presente estudo, conclui-se que há casuística de LVC para cães sintomáticos ou assintomáticos, os quais buscam atendimento clínico-ambulatorial na cidade de Goiânia; existe ocorrência de portador de infecção por Leishmania chagasi entre cães vadios capturados no município de Goiânia; os testes de diagnóstico ELISA e RIFI apresentam resultados apenas moderadamente concordantes para o diagnóstico sorológico da LVC; os exames parasitológicos e PCR conduzidos a partir de amostras de pele e linfonodo apresentam resultados equivalentes para o diagnóstico da LVC.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Vanessa Silvestre Ferreira de Oliveira.pdf: 1341350 bytes, checksum: 9ce3345b7f150b232b983b427448e976 (MD5) Previous issue date: 2011-03-16 / Este trabalho teve como objetivos identificar os protozoários encontrados em fezes de cães, observar a ocorrência da infecção por Neospora caninum e Toxoplasma gondii em cães pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), desenvolver e validar técnicas de ELISA para o diagnóstico sorológico de N. caninum em cães, determinar a utilidade do Western Blot para esse diagnóstico e observar a ocorrência de DNA de N. caninum, T. gondii e Hammondia heydorni em tecido cerebral de cães. Para isso, foram colhidas amostras de cérebro e sangue de 251 cães, e fezes de 106 cães, provenientes do Centro de Zoonoses de Goiânia, Goiás. Foram utilizados oito soros de infecção experimental por N. caninum e quatro por T. gondii para comprovação dos resultados sorológicos. As amostras de fezes foram concentradas pelo método de Teleman seguido da flutuação com solução de Sheather, para visualização dos oocistos. Foi realizada a extração de DNA de todas as amostras, posteriormente analisadas por nested-PCR específicas para detecção de DNA de N. caninum, H. heydorni, T. gondii, Cryptosporidium spp. e Giardia spp. Uma nested-PCR foi ainda realizada nas amostras em que foram visualizados oocistos menores de 20 µm, para a detecção de DNA de coccídios e posterior seqüenciamento, para correta identificação dos mesmos. A técnica de RIFI foi realizada em todas as amostras de sangue, e técnicas de ELISA foram padronizadas, utilizando-se extrato solúvel de taquizoítos e as proteínas recombinantes rNcGRA7, rNcSAG4, rNcBSR4 e rNcSRS9 de N. caninum. Para a detecção de DNA dos parasitos nos cérebros, estes foram divididos em três partes, e de cada parte foi realizada a extração de DNA. Após a extração, foram realizadas nested-PCR específicas para cada parasito. Nas fezes dos cães, foram encontradas doze amostras contendo oocistos. Em seis, os oocistos eram maiores que 20 µm, e foram identificados como de Cystoisospora canis, e nas outras seis, oocistos menores que 20 µm foram visualizados e identificados como sendo quatro de H. heydorni, um de Cystoisospora spp. e uma amostra apresentava DNA tanto de H. heydorni quanto de Cystoisospora spp. DNA de C. canis foi identificado em quatro amostras, uma amostra foi identificada como G. duodenalis genótipo C e quatro como G. duodenalis genótipo D. Nenhuma amostra de fezes foi positiva para N. caninum e T. gondii, e quatro foram positivas para H. heydorni na PCR específica para este parasito. Nos cérebros analisados, foram encontradas seis amostras (2,4%) positivas a N. caninum e 23 amostras (9,1%) foram positivas a T. gondii. Nenhuma amostra foi positiva a H. heydorni. Anticorpos anti-N. caninum foram encontrados em 18,32% dos cães analisados, e 56,57% dos cães apresentaram sorologia positiva a T. gondii pela técnica de RIFI. Técnicas de ELISA foram padronizadas, utilizando-se extrato solúvel de taquizoítos e as proteínas recombinantes rNcGRA7, rNcSAG4, rNcBSR4 e rNcSRS9 de N. caninum. Foram encontrados valores de sensibilidade e especificidade menores que 84%, além do reconhecimento das proteínas recombinantes pelos dois parasitos, nos soros de infecções naturais e experimentais. Uma baixa concordância entre as técnicas foi observada, com valores de Kappa inferiores a 0,4. Os resultados encontrados indicam que N. caninum está menos presente em fezes de cães, enquanto H. heydorni é mais facilmente encontrada. As amostras que continham Cryptosporidium e Giardia foram identificadas como espécies-específicas. A pesquisa de DNA de parasitos em órgãos de cães pode ser utilizada como uma ferramenta para o diagnóstico post-mortem de infecções por protozoários, porém as técnicas de PCR podem apresentar baixa sensibilidade devido à pequena quantidade de tecido utilizado. Os resultados encontrados no WB indicam não haver um padrão de reconhecimento das proteínas imunodominantes, e que as técnicas sorológicas na neosporose canina têm limitações, devido aos baixos títulos encontrados e à reação cruzada com T. gondii, além da alta prevalência da infecção por T. gondii em cães, e presença de infecções mistas.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Marcio_Pereira_Martins.pdf: 660888 bytes, checksum: 070c9552e0ed53121a6615f34c32ec29 (MD5) Previous issue date: 2009-12-21 / Rocky Mountain spotted fever (FM), a zoonosis transmitted to humans through the bite of ticks infected with Rickettsia spp. Especially R. rickettsii, emerged in the United States in the late 19th century, been taking place in Brazil in the mid 20th century. Since then, in Brazil the disease, initially diagnosed in São Paulo, became identified focally in some cities, getting to the end of the 20th century restricted states in the Southeast. Already at the beginning of the 21st century FM was first identified in Southern states, focusing in Santa Catarina and also, occasionally, been observed in rare cases that occurred in states in other regions of the country: State Federal, Bahia, Rondônia and Amapá. Given the above, and aiming to collaborate with the service of Epidemiology in Goias, this unprecedented study throughout the Midwest Region, proposes and creates conditions for the first milestone for the monitoring of FM in this State, by means of serological screening with indirect immunofluorescence assay (IFA) in sera of animals and humans, in addition to the research of tick vectors. This study took place in the city of Quirinópolis-GO, and despite not having been detected in the chain reaction polymerase (PCR), ticks infected with Rickettsia spp., the principal vector of FM in Brazil, the tick Amblyomma cajennense, was observed. In previous pilot study conducted in February 2007 in Quirinópolis-GO, serology by IFAT reagents detected in 25% (7 / 28) of humans in a group of individuals cohabiting with a suspected case of FM, which was notified to the Ministry of Health (MOH) of Brazil in 2006, and in 0% (0 / 5) of dogs and 28.6% (12/42) of horses from 3 rural property where the suspect case was before the manifestation of signs of illness. There were two horses positive sera in these three farms. Unable to trace the likely source of infection, but the findings here obtained allowed to suspect that the suspected case of FM has been in one of these two farms the likely source of antigenic contact with bacteria or micro-FM group antigenically similar. Already in scale epidemiological study horses, held in March 2007 on 20 farms, found the prevalence of positive sera of 11.6% (39/335) among horses and the frequency of seropositive 36.6% (15/41 ) between the human and 16.7% (2 / 12) among the dogs from these properties to create horses. Humans here tested HIV positive were asymptomatic for FM at the time of sample collection. It was concluded that the FM, or antigenically similar disease, may be occurring in the State of Goiás, in the City of Quirinópolis / A febre maculosa (FM), zoonose transmitida ao homem por meio da picada de carrapatos infectados com Rickettsia spp., especialmente R. rickettsii, surgiu nos Estados Unidos no final do século 19, vindo a ocorrer no Brasil em meados do século 20. Desde então, no Brasil a enfermidade, inicialmente diagnosticada no Estado de São Paulo, passou a ser identificada focalmente em vários municípios, ficando até o final do século 20 restrita aos Estados da Região Sudeste. Já no inicio do século 21 a FM começou a ser identificada em Estados da Região Sul, concentrando-se em Santa Catarina e também, pontualmente, sendo observada em raros casos ocorridos em Estados das demais regiões do país: Distrito Federal, Bahia, Amapá e Rondônia. Diante do exposto, e visando colaborar com o serviço de Epidemiologia em Goiás, o presente Estudo inédito em toda a Região do Centro-Oeste, se propõe e cria condições de marco inicial para a vigilância da FM neste Estado, por meio de inquérito sorológico com a reação de imunofluorescência indireta (RIFI) em soros de animais e humanos, além da pesquisa de carrapatos vetores. O presente estudo se deu no Município de Quirinópolis-GO, e apesar de não terem sido detectados, na reação em cadeia pela polimerase (PCR), carrapatos infectados com Rickettsia spp., o principal vetor de FM no Brasil, o carrapato Amblyomma cajennense, foi observado. Em prévio estudo piloto realizado em fevereiro de 2007, em Quirinópolis-GO, a sorologia pela RIFI detectou reagentes em 25% (7/28) dos humanos de um grupo de indivíduos conviventes com um caso suspeito de FM, que foi notificado ao Ministério da Saúde (MS) do Brasil em 2006, e em 0% (0/5) dos cães e 28,6% (12/42) dos eqüinos oriundos de 3 propriedade rurais onde esse caso suspeito esteve antes da manifestação dos sinais de enfermidade. Houve eqüinos sororeagentes em duas dessas três propriedades rurais. Não foi possível rastrear a provável fonte de infecção, mas os achados aqui obtidos permitem suspeitar que o caso suspeito de FM tenha tido em uma dessas duas propriedades rurais a fonte antigênica do provável contato com bactérias do grupo da FM ou microrganismos antigenicamente semelhantes. Já no estudo dimensionado epidemiologicamente para eqüinos, realizado em março de 2007 em 20 propriedades rurais, foi encontrada a prevalência de sororeagentes de 11,6% (39/335) entre os eqüinos e a freqüência de soropositivos de 36,6% (15/41) entre os humanos e de 16,7% (2/12) entre os cães oriundos dessas propriedades de criação de eqüinos. Os humanos soropositivos aqui testados eram assintomáticos para FM no momento da coleta de amostras. Concluiu-se que a FM, ou doença antigenicamente semelhante, possa estar ocorrendo no Estado de Goiás, no Município de Quirinópolis

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