Resumo. Foi realizado um estudo epidemiológico para avaliação dos fatores determinantes para a transmissão da LTA. O estudo foi realizado na área urbana, periurbana e rural da cidade de Itambaracá, incluindo a Vila Rural e as localidades de Porto Almeida e São Joaquim do Pontal, as duas últimas próximas à área impactada pelas hidrelétricas de Canoas I e II, no rio Paranapanema. Capturou-se de fevereiro de 2004 a junho 2006, 3.187 flebotomíneos. As espécies predominantes foram Nyssomyia neivai (34,36%), Pintomyia pessoai (32,57%), Migonemya migonei (11,61%), Nyssomyia whitmani (8,82%) e Pintomyia fischeri (2,73%) todas elas com capacidade de transmissão da doença. Para Ny neivai, houve predominância de machos e para as outras espécies vetoras, as fêmeas prevaleceram, com diferença estatística significante (p<0,001). As espécies mais abundantes, segundo o índice de abundância das espécies padronizado, foram Ny neivai, Pi. pessoai, Ny whitmani, Br. brumpti, Mg migonei e Pi fischeri. As maiores freqüências e diversidade das espécies foram encontradas na localidade de Porto Almeida (PA), seguida por São Joaquim do Pontal (SJP). Ny neivai apresentou médias sazonais mais elevadas e na distribuição mensal, picos em fevereiro, maio e outubro. A maior média horária desta espécie foi registrada das 19:00 às 20:00 h (1,2) mas mostrou-se ativa das 23:00 às 10:00 h da manhã. A prevalência de Acs da classe IgG para LTA em RIFI, na população humana foi de 6,73%, nos caninos de 1,75% e nos equídeos de 16,0 %. Em EIE/ELISA, a prevalência para os caninos foi de 16,49%. Na PCR, todos os cremes leucocitários correspondentes à soros reagentes a Acs da classe IgG (humanos), e Ac totais (eqüinos e caninos) foram negativos para Leishmania sp. No inquérito sócio econômico, verificou-se que a população entrevistada em sua maioria pertence à etnia branca e à faixa etária de 30-50 anos, recebem em torno de dois salários mínimos, possuem ocupações voltadas à agricultura e pecuária, nível de escolaridade fundamental (1º grau), habita casas de alvenaria, possuem animais domésticos com seus abrigos próximos às casas. Realizam atividades de trabalho e lazer em áreas de risco em proximidades às matas, áreas com animais silvestres e domésticos e com presença de matéria orgânica, que são fatores atrativos aos flebotomíneos. A população entrevistada, de uma forma geral, desconhece os aspectos da transmissão da LTA. Observou-se em todas as localidades amostradas a presença de flebotomíneos, com predominância de cinco espécies com capacidade vetorial de agentes da LTA, destacando-se Ny. Neivai , incluindo os peridomicílios. Houve transmissão ativa da doença, ocorrendo dois casos notificados e autóctones, em área de baixa freqüência de espécimes. A soroprevalência na população humana (6,73%) foi considerável, embora seja uma área de baixa ocorrência da doença. Nas localidades onde havia um foco mais recente da doença, em SJP, os cães e eqüinos apresentaram sorologia positiva. A alta prevalência de reagentes na sorologia observada em eqüídeos sugere que estes animais poderiam ser usados como sentinela para a detecção precoce da circulação do agente da LTA nas áreas estudadas. / Abstract. An epidemiological study was carried out in the urban area of Itambaracá and rural areas of the same municipality, including Vila Rural, Porto Almeida and São Joaquim do Pontal, to investigate the phlebotomine fauna and behavioral aspects of its species and also some determining factors of the transmission of American cutaneous leishmaniasis (ACL). The last two localities mentioned are situated close to the areas impacted by the Canoas I and II hydroelectric plants on the Paranapanema river. A total of 3,187 phlebotomines were captured between February 2004 and June 2006. Nyssomyia neivai predominated (34.36%), followed by Pintomyia pessoai (32.6%), Migonemyia migonei (11.6%), Nyssomyia whitmani (8.8%) and Pintomyia fischeri (2.7%), all of them implicated in the transmission of the disease. Regarding Ny. neivai, males predominated over females which may indicate the proximity of its breeding places to the capture sites. As for all the other vector species, the females were predominant, with significant statistical differences (p < 0,001). Ny neivai, Pi. pessoai, Ny. whitmani, Br. brumpti, Mg. migonei and Pi. fischeri presented the highest values for the species standardized abundance index. The greatest frequencies and diversity of the species were found at Porto Almeida (PA), a locality situated close to a well preserved forest fragment and secondly at São Joaquim do Pontal (SJP), with degraded forest. Of all the species, Ny. neivai presented the highest monthly averages with the main peak occurring in successive months of April. Its greatest hourly average was registered at 19:00-20:00 hours, but the species presented activity from 23:00 p.m. to 10:00 a.m. The prevalence of Ac IgG class, serum-reagents for Leishmania obtained with RIFI from the human, canine and equine populations was 6.73% (20/297), 1.75% (5/285) and 16% (8/50), respectively. A prevalence of 16.4% was observed by the EIE/ELISA test only for the canine population. The buffy-coat of all the reagent human and animal blood samples was tested by the polymerase chain reaction (PCR) to investigate the presence of Leishmania, with negative results. In the socioeconomic survey, it was found that the majority of the people interviewed belonged to the white ethnic and 30-50 year-old groups, earning two minimum salaries, exercising occupations associated with agriculture and livestock breeding, of fundamental school level, inhabiting brick houses and keeping pets and domestic animals in and around them. They exercise their work and leisure activities in risk areas close to forest fragments, thus in areas containing both wild and domestic animals with the presence of organic matter, which attract the sandflies. The population interviewed was, in general, ignorant of the facts involved in ACL transmission. Sandflies were observed at all the sites sampled, with the predominance of five vectors of the ACL agents, with Ny. neivai, the main vector in all three areas, also being captured in the peridomiciles. Active transmission of the disease, with two cases registered, was observed at sites with very low frequency of this sandfly. The serum prevalence in the human population (6.73%) was considerable, despite this being an area of few registered ACL cases. In the localities in which there was a more recent focus of the disease, in SJP, the dogs and equines presented positive serology. The high prevalence of equine serum reagents suggests that these animals could be used as sentinels for the early detection of the presence of the ACL agent in the area studied.

Orientador: Wilma Aparecida Starcke Buzetti / Resumo: Tripanosomatídeos são protozoários parasitas flagelados que em ruminantes no Brasil incluem os pertencentes à família Trypanosomatidae, com os gêneros Trypanosoma e Leishmania. Com relação aos búfalos domésticos (Bubalus bubalis), pouco ou nada se conhece sobre estes parasitas. Este estudo teve como objetivo avaliar por meio de métodos parasitológicos (exame direto do parasita no microscópio), sorológicos (RIFI – reação de imunofluorescência indireta) e moleculares (PCR – reação em cadeia pela polimerase e sequenciamento) a presença de tripanosomatídeos em búfalos. Amostras de sangue e suabe conjuntival foram coletadas de 100 búfalos da Fazenda São Francisco, Andradina, SP e de 10 búfalos de Selvíria, MS. Dos 110 búfalos, 60,9% (67/110) apresentaram hemoflagelares tripanossomatídeos nos esfregaços sanguíneos e 90% (99/110) deles apresentaram anticorpos anti-Leishmania pela RIFI. O DNA destes parasitas foi detectado em 29,09% (32/110) dos búfalos pela técnica de PCR, sendo, 26,36% (29/110) na PCR do sangue e 3,6% (4/110) na PCR do suabe conjuntival. Das amostras positivas para PCR, sete foram enviadas para o sequenciamento gênico, e uma delas foi identificada como Leishmania infantum e três como Trypanosoma theileri, ambas as amostras apresentaram 100% de similaridade com as respectivas espécies após comparação pelo GenBank. Este estudo relata o primeiro registro de infecção por L. infantum em B. bubalis na região de Andradina, SP, e a presença de búfalos infectados por espéci... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Trypanosomatides are flagellate protozoan parasites that in ruminants include those belonging to the family Trypanosomatidae, with the genera Trypanosoma and Leishmania, but with little or nothing information about these parasite infections in domestic water buffalo (Bubalus bubalis). Tthis study was assessed through the parasitological (direct examination of the parasite under microscope), serological (IFAT – immunofluorescence antibody test), and molecular tests (PCR from blood and conjunctival swab and genic sequencing) to detect possible trypanosomatides in buffalo herds from Andradina, SP and Selvíria, MS. Thus, 60.9% (67/110) buffaloes presented trypanosomatid parasites in the blood smears, 90% (99/110) had anti-Leishmania antibodies by IFAT. The DNA of these parasites was detected in 29.09% (32/110) of buffaloes by the PCR technique; 26.36% (29/110) in blood and 3.6% (4/110) in conjunctival swab. Positive PCR samples from seven animals were sent for DNA sequencing, and one of them was identified as Leishmania infantum and three as Trypanosoma theileri, both samples showed 100% of similarity with the respective species after comparison by BenBank. This study reports for the first time the presence of parasite L. infantum in B. bubalis from Andradina, SP, and highlights the presence of buffaloes infected with T. theileri, and indicates the need for more studies on trypanosomatid parasites in buffaloes. / Mestre

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Neosporosis is an economically important disease caused the protozoan Neospora caninum and is characterized by causing reproductive problems in cattle such as abortion, return to estrus and birth of calves persistently infected. The diagnosis is based mainly on detection of antibodies anti-N.caninum by serological tests, from samples of blood serum and also through milk. The control of this disease is related to the culling of positive animals that showing reproductive disorders, since no commercially available vaccine induces immune response able of preventing transplacental transmission and thus, the parasite remains in the herd. In this study, we performed studies involving the humoral response against the parasite and the detection of antibodies in individual and bulk milk samples for the indirect immunofluorescence assay (IFA). The results are presented in three manuscripts. In chapter one, the aim was to compare serum immunoglobulin G and M, in animals experimentally infected with tachyzoites of NC-1 strain, and animals vaccinated with an inactivated vaccine. The results showed a clear oscillation in antibody titers, revealing that the heifers inoculated immune response was more durable than in those vaccinated. In the second chapter, it was performed a diagnostic test of the anti-N.caninum antibodies from milk samples, using as a test, IFA. When analyzing individual samples of milk, there was a good correlation for samples of blood serum. The higher the serum titer, the greater the probability of detecting antibodies in milk samples, both individual and bulk milk. In chapter three, the aim it was to evaluate the use of bulk milk sample for herd diagnostic or for epidemiological studies, by detecting antibodies. Similar to results obtained in chapter two, the bulk milk sample, when analyzed by IFA demonstrated to be correlated with the number of positive animals in each herd as well as with the titles presented by these animals. Thus, through this study we emphasize that with regard to vaccination, more work needs to be better conducted in order to get an immune response able to protect the fetus longer more time and more importantly, that will prevent or reduce transplacental transmission. Regarding the diagnosis by using the milk samples it was observed that both samples in individual and bulk milk, the IFA can be used safely and is considered an easier way to carry out epidemiological studies in herd cattle. / Neosporose é uma doença economicamente importante causada pelo protozoário Neospora caninum e caracteriza-se por causar problemas reprodutivos em bovinos, como aborto, retorno ao cio e nascimento de bezerros persistentemente infectados. O diagnóstico é baseado, principalmente, na detecção de anticorpos anti-N. caninum através de testes sorológicos, a partir de amostras de soro sanguíneo e também através do leite. O controle dessa enfermidade está relacionado com o descarte dos animais positivos que apresentam desordens reprodutivas, uma vez que a vacina disponível comercialmente não induz resposta imune capaz de prevenir a transmissão transplacentária e assim, o protozoário se mantém no rebanho. Neste estudo, foram realizados trabalhos envolvendo a resposta humoral frente ao protozoário bem como a detecção de anticorpos em amostras individuais e coletivas de leite pela técnica de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Os resultados estão apresentados em três artigos. No capítulo um, o objetivo foi comparar a concentração sérica de imunoglobulinas G e M, em animais infectados experimentalmente com taquizoítos da cepa NC-1 e, em animais vacinados com uma vacina inativada. Os resultados obtidos demonstraram uma evidente oscilação no título de anticorpos, sendo possível observar que nas novilhas inoculadas a resposta imune foi mais duradoura que nas vacinadas. No segundo capítulo, buscou-se diagnosticar anticorpos contra o N.caninum a partir de amostras de leite, utilizando como teste, a RIFI. Quando analisadas amostras individuais de leite, observou-se uma boa concordância em relação às amostras de soro sanguíneo. Quanto maior o título sérico, maior é a probabilidade de detectar anticorpos em amostras de leite, tanto individuais, como coletivas. No capítulo três, o objetivo foi avaliar a utilização de amostras coletivas de leite para diagnóstico de rebanho ou para estudos epidemiológicos, através da detecção de anticorpos. Semelhante aos resultados obtidos no capítulo dois, as amostras coletivas de leite, quando analisadas demonstraram estarem correlacionadas com o número de animais positivos de cada rebanho, assim como, com os títulos apresentados por esses animais. Assim, através desse estudo podemos ressaltar que em relação à vacinação, outros trabalhos precisam ser melhor conduzidos, visando buscar uma resposta imune capaz de proteger o feto por mais tempo e o mais importante, que consiga evitar ou reduzir a transmissão transplacentária. Com relação ao diagnóstico através do leite, pode-se determinar que tanto em amostras individuais como coletivas, a RIFI pode ser utilizada com segurança, sendo considerada uma maneira mais fácil de realizar estudos epidemiológicos em nível de rebanho.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA10MA077.pdf: 251261 bytes, checksum: 659afb14e9609405d069749d1029eb68 (MD5) Previous issue date: 2010-08-09 / This study evaluated the prevalence of antibodies against Toxoplasma gondii in sheeps in the municipality of Lages, in the state of Santa Catarina, Brazil, and identified possible risk factors for infection. Blood samples of 360 animals from 13 properties were collected by puncturing of the jugular vein, stored in sterile tubes and carried to the Laboratory of Parasitology and Parasitic Diseases CAV / UDESC, for later processing. Each creator answered a questionnaire with data of the propertie and each individual animal for identification of risk factors for infection. Indirect Immunofluorescence Assay (IFA) where serum samples were considered positive at dilutions &#8805;1:64 and Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) were used to detect IgG anti Toxoplasma gondii antibodies. 100% of properties were found positive animals. By IFA, 205 (56.94%) sheeps had antibodies against Toxoplasma gondii and by ELISA, 153 (42.50%) sheeps were positive. Considering the serological techniques and statistical analysis, were risk factors by ELISA: the age, the water source and the animal category; and by IFA, the racial type. It has been found sensitivity of 61%, specificity of 82% and Kappa of 0.7 between the ELISA and the IFA (1:64), considered good, allowing to indicate the ELISA as technique adjusted for the diagnosis of Toxoplasma gondii in the ovina species / Com os objetivos de estimar a prevalência de ovinos portadores de Toxoplasma gondii no município de Lages, Santa Catarina, Brasil, e de identificar possíveis fatores de risco para a infecção, foi coletado sangue por punção da veia jugular externa de 360 animais, de 13 propriedades, armazenado em tubos estéreis e transportado ao Laboratório de Parasitologia e Doenças Parasitárias CAV/UDESC, para posterior processamento. Cada criador respondeu a um questionário com dados da propriedade e individuais de cada animal para permitir a identificação dos fatores de risco da infecção. A pesquisa de anticorpos foi realizada por meio da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) utilizando como ponto de corte a titulação 1:64 e do Ensaio Imunoenzimático Indireto (ELISA). Em 100% das propriedades foram encontrados animais positivos. Pela RIFI, 205 (56,94%) ovinos apresentaram anticorpos contra Toxoplasma gondii e pelo ELISA, 153 (42,50%). Considerando-se as técnicas sorológicas e a análise estatística, foram fatores de risco pelo ELISA: a idade, a fonte de água e a categoria animal; e pela RIFI, o tipo racial. Foi constatada sensibilidade de 61%, especificidade de 82% e concordância Kappa de 0,7 entre o ELISA e a RIFI (1:64), considerada boa, permitindo indicar o ELISA como técnica adequada para o diagnóstico de Toxoplasma gondii na espécie ovina

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-09-09T11:44:34Z No. of bitstreams: 1 hugovieirafajardo.pdf: 1531404 bytes, checksum: f5fe49445c6f2c8dfc323eea58325b41 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-09-13T15:40:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 hugovieirafajardo.pdf: 1531404 bytes, checksum: f5fe49445c6f2c8dfc323eea58325b41 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T15:40:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 hugovieirafajardo.pdf: 1531404 bytes, checksum: f5fe49445c6f2c8dfc323eea58325b41 (MD5) Previous issue date: 2011-03-01 / A toxoplasmose é uma zoonose mundialmente disseminada causada pelo protozoário intracelular obrigatório Toxoplasma gondii. Os felídeos são os únicos hospedeiros definitivos, pois neles ocorre a reprodução sexuada e eliminação de oocistos pelas fezes, enquanto que o homem, outros mamíferos e as aves são hospedeiros intermediários e não possuem esta característica, transmitindo a doença por via congênita ou principalmente quando sua carne é ingerida na alimentação por outros animais. O hábito alimentar do brasileiro e a grande importância econômica do país no cenário internacional da pecuária bovina de corte, objetivaram este trabalho a realizar um estudo soroepidemiológico da toxoplasmose bovina na Zona da Mata Mineira e detecção dos fatores de risco de infecção e disseminação do parasito entre os bovinos criados para o abate. Para isso, foram coletadas 1200 amostras de sangue de bovinos para análise sorológica, utilizando-se a técnica de reação de imunofluorescência indireta (RIFI); também foi feita uma visita às propriedades rurais de onde provinham estes animais abatidos, e realizado um questionário epidemiológico com os produtores rurais destes estabelecimentos, com perguntas que esclareciam algumas dúvidas sobre o manejo e condições sanitárias das propriedades em questão que poderiam influenciar e servir como fatores de risco no ciclo deste parasito. Encontramos uma prevalência de 2,68% de animais positivos analisados para anticorpos anti-T.gondii da classe IgG, e com relação aos fatores de risco, os que envolvem a atuação de um médico veterinário na criação, sinais clínicos da doença e presença de felinos nas propriedades obtiveram um destaque nos resultados encontrados como fatores com consideráveis níveis de significância estatística e correlação positiva com a soropositividade dos animais. / The toxoplasmosis is a zoonose worldwide disseminated, caused by the obligatory intracellular protozoan Toxoplasma gondii. The felines are the only definitive hosts, because in this host the parasites can reproduce sexually and eliminate oocistos through the host feaces. The man kind, like other mammals, and also the birds are intermediary hosts, transmitting the toxoplasmosis congenitally or mainly when its meat is ingested by other animals. Brazilian’s food habit and the great economical importance of the country in the international cattle field are important factors that justify the investigation about the prevalence of toxoplasmosis in cattle. Therefore, the purpose of this work was to realize a seroepidemiologic study of the bovine toxoplasmosis at the Zona da Mata, in Minas Gerais. Looking forward to elucidate the risk factors of infection and insemination from the parasite in between the cattle designated to slaughter. For that, 1200 samples of cattle blood were collected for the serological analysis, using the indirect reaction of imunofluorescence technique (IRIF); visits to the rural properties where those animals came were also realized and on those occasions the rural producers from these properties responded to a epidemiological questionnaire with questions about the properties managing and sanitary conditions, that could act as risk factors of infection by T. gondii. Among the 1195 animals tested for IgG anti-T. gondii, using the IRIF technique 32 presented themselves seropositives, which means 2,68% of prevalecence. Bovines from 53 properties located in the Zona da Mata Mineira were analized. From these 53 properties, 17 (30,07%) showed one or more serologically positives animals for T. gondii. With respect to risk factors, the ones that involve the actuation of a Veterinary Doctor in the raising, clinical signs of the disease and the presence of felines in the properties got a highlight on the results found as factors with considerable levels of statistic significance and positive relations to the seropositivity of the animals.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-03-13 / Serum samples from 1840 sheep from Rio Grande do Sul south (area region), Brazil, were tested to verify the prevalence of IgG antibodies against Toxoplasma gondii by Immunofluorescent Antibody Test (IFAT), using sera dilution 1:64 as cut-off value. Four age groups were studied: one year old, two years old, three years old and > four years old sheep. The prevalence rate for T. gondii infection was 20,2% (450/1840) (15,2% < IC < 26,2%) in sheep, with titers ranging from 1:64 to 1:4096. The prevalence rate of sheep farms, that had at least one positive sheep, was 87,4% (83/95) (78,9% < IC < 92,8%). There was association between antibodies seroprevalence to T. gondii and sheep age, once the one year old group s prevalence was 9,7% (95/687) (6,2%<IC95%<15,0%) and > four years old group s was 35,3% (255/681) (27,5%<IC95%<43,8%). Multivariate logistic regression did not reveal any significant seroprevalence association between sex and other risk factors. The univariate analysis showed presence of housed cats (p=0,17) and not carcasses remotion (p=0,20) as variables with some epidemiological importance. Toxoplasma gondii infection occurs in almost every sheep farms and thus, can be responsable for ovine reproductive losses and human health problems in this region. / As amostras de soro sanguíneo de 1840 ovinos do sul do Rio Grande do Sul, foram testadas para determinar a prevalência de anticorpos da classe IgG para Toxoplasma gondii através do uso da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), com ponto de corte de 1:64. Os animais experimentais foram divididos em quatro grupos de acordo com a idade: um ano, dois anos, três anos e quatro anos ou mais. A soroprevalência para T. gondii foi 20,2% (450/1840) (15,2% < IC < 26,2%) nos ovinos, com variação de títulos de 1:64 até 1:4096. A prevalência das propriedades foco (com pelo menos um animal positivo) foi 87,4% (83/95) (78,9% < IC < 92,8%). Foi observada associação entre soroprevalência para T. gondii e idade dos ovinos, já que a prevalência no grupo de um ano de idade foi 9,7% (95/687) (6,2%<IC95%<15,0%) e no grupo dos animais com quatro anos ou mais foi 35,3% (255/681) (27,5%<IC95%<43,8%). Não foi observada associação significativa entre soroprevalência e sexo, assim como com nenhum dos fatores de risco avaliados na análise multivariada (regressão logística). Entretanto, na análise univariada, duas variáveis se mostraram com maior intensidade de associação com a soroprevalência que as outras: presença de gatos domésticos (p=0,17) e o não recolhimento de carcaças nas propriedades (p=0,20). Os resultados indicam que a infecção por T. gondii está amplamente distribuída entre os rebanhos ovinos da região sul do Rio Grande do Sul, podendo causar perdas reprodutivas nesses animais e representar riscos à saúde humana.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_andreia_lucas.pdf: 441722 bytes, checksum: dac4b1a81e107c0d74f5c96cdf4078ac (MD5) Previous issue date: 2007-06-25 / The seroprevalence of Neospora caninum and the associated risk factors in dairy properties were verified in Pelotas region. Blood serum of 1046 six months older females from 92 properties were analysed by indirect immunofluorescence Assay (IFA &#8805;100). Canine seroprevalence from 67 properties was also verified (IFA &#8805; 50). An epidemiological questionnaire with neosporosis related issues was also applied to evaluate risk factors and statistical associations between the serological status of the livestock and the possible variables related to environment and handling, were evaluated by logistic regression (Statistx 8.0). The prevalence in bovines was 12,04%, in 47,6% of the analysed properties. Although at least one seropositive dog was found in 26,8% of the properties, none association was found between canine and bovine seroprevalences . The variables that presented statistic relation with the seropositivity to N. caninum in the studied were: access of others domestic animals to the bovine food (OR: 13,34; IC 95%: 1,60-111,57, P=0,0168), and monthly milk production until 5000l (OR: 2,77; IC 95%: 1,07-7,18, P= 0,0362). / Para verificar a prevalência de anticorpos para Neospora caninum e os fatores de risco associados em bovinos leiteiros provenientes de 92 propriedades localizadas na bacia leiteira da região de Pelotas, Rio Grande do Sul, foram coletadas 1046 amostras de soro sanguíneo de fêmeas com mais de seis meses de idade e aplicado um questionário epidemiológico, contendo questões ligadas a neosporose aos responsáveis pelas propriedades. As amostras foram avaliadas pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI &#8805; 100). As associações estatísticas entre o status sorológico do rebanho e as possíveis variáveis ligadas ao ambiente e manejo, foram avaliadas por regressão logística (Statistx 8.0). Também foi verificada a soroprevalência dos cães (RIFI &#8805; 50) em 67 propriedades. Em 26,8% (18/67) destas propriedades existia pelo menos um cão soropositivo para N. caninum. A prevalência entre os bovinos foi de 12,04%, distribuídos em 47,6% (43/92) das propriedades analisadas. A porcentagem de fêmeas soropositivas, por propriedade, variou de 2,6 a 100%. As variáveis: acesso de outros animais doméstico à comida dos bovinos (OR: 13,34; IC 95%: 1,60-111,57, P=0,0168) e produção leiteira até 5000 l/mês (OR: 2,77; IC 95%: 1,07-7,18, P= 0,0362) apresentaram associação estatística com a soropositividade para N. canium. Não foi observada associação entre a soropositividade dos cães e dos bovinos nos rebanhos estudados.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-10-18T16:07:55Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InfeccaoHumanaLeishmania.pdf: 1290203 bytes, checksum: 6da944f9d94deadb397ed06c6ab44357 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-12-01T14:02:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InfeccaoHumanaLeishmania.pdf: 1290203 bytes, checksum: 6da944f9d94deadb397ed06c6ab44357 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-01T14:02:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_InfeccaoHumanaLeishmania.pdf: 1290203 bytes, checksum: 6da944f9d94deadb397ed06c6ab44357 (MD5) Previous issue date: 2010 / Foi realizado um estudo transeccional em um coorte de 946 indivíduos de ambos os sexos, acima de um ano de idade, residentes em área endêmica de leishmaniose visceral americana(LVA), no município de Barcarena, nordeste do Pará,Brasil.O objetivo deste estudo foi identificar indivíduos com a infecção sintomática e/ou assintomática causada pela Leishmania(L.) chagasi e estudar clinica e imunologicamente os dois tipos de infecção. Para o diagnóstico da infecção foi usado a reação de imunofluorescência indireta(RIFI) e a reação intradérmica de Montenegro(RIM), com amastigotas e antígenos de promastigotas de Leishmania(L.) chagasi , respectivamente. Os resultados foram marcados com + a ++++: Para a RIFI, os títulos sorológicos de 80-160 e de 320-640 foram dados de + a ++; em relação aos títulos de 1.280-2.560 e de 5.120-10.240 como +++ e ++++, respectivamente. Para a RIM, as reações exacerbadas (acima de 16mm) como ++++; as reações fortemente: positivas(13-15mm) como +++; moderadamente positivas (9-12mm) como ++, e fracamente positiva (5-8mm) como +. A análise da diferença entre os perfis clínico-imunológicos da infecção foi baseada no programa BioEstat 4.0 e os testes Quiquadrado e Binomial com confiança de 95%. Durante o estudo, 12 pessoas infectadas mostraram os títulos sorológicos elevados (1.280 a 10.240 IgG) com reações negativas de RIM: 5 crianças e 2 adultos desenvolveram LVA com títulos de RIFI do 2.560 (IgG) e RIM negativa. Foram detectadas 2 crianças e 3 adultos que desenvolveram infecções sub-clínicas com títulos de RIFI de 1.280 (IgG) e RIM negativa. Além disso, os dois testes permitiram a identificação de 5 perfis clínico-imunológicos diferentes entre os 231 casos da infecção diagnosticados, como se segue: 1. 77% com infecção assintomática(IA), com a RIM que varia de +/++++ e RIFI negativa; 2. 2% com infecção sintomática(IS = LVA) e 3. 1,3% com infecção sub-clínica oligossintomática (IOS), grupos com RIM negativa e RIFI que varia de +++/++++; 4. 9.9% com uma infecção sub-clínica resistente (ISR), mostrando RIM e RIFI com +/++, e 5. 9.8% com uma infecção inicial indeterminada (III), com RIM negativa e RIFI +/++. A respeito da evolução da infecção, a observação principal era que somente um único caso IS( =AVL) evoluiu do perfil III(infecção inicial indeterminada), de uma amostra de 23 casos, enquanto a maioria das infecções evoluíram aos perfis ISR(9 casos) ou ISO(5 casos), sendo que os últimos 8 casos permaneceram como perfil III. / A transeccional study was carried out in a cohort of 946 individuals of both sexes, from one year old and upwards, living in endemic area of American visceral leishmaniasis (AVL), municipality of Barcarena, northeast Pará, Brazil. The major aim of this study was to identify individuals with the symptomatic and/or asymptomatic infection due to Leishmania (L.) chagasi, and to study the two types of infection, both clinically and immunologicall. For diagnosis of infection there were used the indirect fluorescent antibody test (IFAT) and the leishmanin skin test (LST) with amastigotes and promastigotes antigens of Leishmania (Leishmania) chagasi, respectively. Results were scored as + to ++++: for the IFAT, serological titres (IgG) of 80-160 and 320-640 were given + and ++, with those of 1.280-2.560 and 5.120- 10.240 as +++ and ++++ respectively. For the LST, exacerbated reactions (³16mm) were regarded as ++++, strongly positive (13-15mm) as +++, moderately positive (9- 12mm) as ++, and weakly positive (5-8mm) as +. Analysis of the difference among the clinical-immunological profiles of infection was based on the programme BioEstat 4.0 and the X2 and Binomial tests with confidence of 95%. During the study, 12 infected persons showed high serological titres (1.280 to 10.240 IgG) with negative LST reactions: 5 children and 2 adults developed of AVL with IFAT titres ³ 2.560 (IgG) and a negative LST, and 2 children and 3 adults developed subclinical infections with IFAT titre of 1.280 (IgG) and a negative LST. In addition, the two tests enabled the identification of 5 different clinical-immunological profiles within the total of 231 cases of infection diagnosed, as follows: 1. 77% with asymptomatic infection (AI), with LST ranging from +/++++ and a negative IFAT; 2. 2% with symptomatic infection (SI = AVL) and 3. 1.3% with subclinical oligosymptomatic infection (SOI), both groups with a negative LST and IFAT ranging from +++/++++; 4. 9.9% with a subclinical resistant infection (SRI), showing both LST and IFAT with +/++, and 5. 9.8% with an indeterminate initial infection (III), with a negative LST and IFAT +/++. Regarding evolution of infection, the major observation was that only a single case of SI (= AVL) evolved from the profile III (23 cases), from which most infections evolved to the profiles SRI (9 cases) or SOI (5 cases) while the lastly 8 cases remained as III.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA14MA154.pdf: 1313169 bytes, checksum: 4095d82961e0759ed84999755c5e444b (MD5) Previous issue date: 2014-11-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Ovine toxoplasmosis has important implications by causing reproductive disorders in this species and for being a zoonosis. This study aimed to determine the occurrence of antibodies against Toxoplasma gondii and to detect the agent in the dairy sheep flocks in western of state of Santa Catarina. From March to July 2013, 298 blood samples were collected from dairy sheep on two farms in Chapecó, SC. Samples were processed by IFI (&#8805;1: 64). From the total, 37 (12.4%) were positive for T. gondii with titers of 1:64 (32) and 1: 256 (five). For the animals selection, which were studied looking for the presence of the agent in the milk, 128 blood samples from sheep in lactation period were collected, which were processed by IFI (&#8805;1: 64) of which 42 (32.8%) were positive, with titers 1:64, (26) 1 256 (12), 1: 1024 (three) and 1: 4096 (one). For the detection of parasites in milk, techniques of mouse bioassay were employed (22 milk samples from eight sheep with antibody titers against T. gondii &#8805;256) and PCR, for the detection of T. gondii in the brains of mice inoculated bioassay and also directly from milk (108 samples from 42 seropositive sheep (&#8805;64) in different lactation periods - 40, 90 and 120 days). SAG2R4 SAG2F4 primers were used. In 42 ewes in lactation period and seropositive for T. gondii it was possible to detect DNA of the parasite in the milk of 30.95% (13/42) of the animals. The isolation was impossible in bioassay, however the agent DNA was detected in mice brains inoculated with milk from eight sheep (a sample of the 45th day of lactation and seven in the collection of 90th day). The parasite DNA was detected directly from the milk in samples of the second collection (90 days of lactation) in five animals. Positive PCR samples were sequenced and the results confirmed &#8805;97% identity with the membrane antigen P22 gene of T. gondii. The results showed that the occurrence of antibodies against T. gondii in dairy sheep in western of state of Santa Catarina is lower when compared with that observed in steak sheep in the state and that the DNA of T. gondii is present in the milk of sheep, representing a possible source of infection to humans through the consumption of milk "in natura" and / or derivatives, besides the possibility of lactogenic transmission to lambs / A toxoplasmose ovina apresenta implicações sanitárias importantes por causar desordens reprodutivas nesta espécie e por ser uma zoonose. Os objetivos do presente trabalho foram determinar a ocorrência de anticorpos contra Toxoplasma gondii e detectar o agente no leite de rebanhos ovinos leiteiros na região Oeste de Santa Catarina. De março a julho de 2013, foram colhidas 298 amostras de sangue de ovinos leiteiros em duas propriedades em Chapecó, SC. As amostras foram processadas pela RIFI (&#8805;1:64). Do total, 37 (12,4%) foram positivas para T. gondii com títulos de 1:64 (32) e 1:256 (cinco). Para a pesquisa da presença do agente no leite, foram coletadas 128 amostras de sangue das ovelhas em período de lactação, que foram processadas pela RIFI (&#8805;1:64) das quais 42 (32,8%) foram positivas, com títulos 1:64 (26), 1:256 (12), 1:1024 (três) e 1:4096 (um). Para a pesquisa do parasito no leite foram empregadas as técnicas do bioensaio em camundongos (22 amostras de leite de oito ovelhas com títulos de anticorpos contra T. gondii &#8805;256) e da PCR, para a 12 13 pesquisa de T. gondii nos cérebros dos camundongos inoculados no bioensaio e também diretamente do leite (108 amostras obtidas de 42 ovelhas soropositivas (&#8805;64) em diferentes períodos de lactação - 40, 90 e 120 dias). Foram utilizados os primers SAG2R4 e SAG2F4. Das 42 ovelhas lactantes e soropositivas para T. gondii foi possível detectar DNA do parasito no leite de 30,95% (13/42) dos animais. No bioensaio não foi possível o isolamento, entretanto DNA do agente foi detectado no cérebro dos camundongos inoculados com leite de oito ovelhas (uma amostra do 45º dia de lactação e sete na coleta do dia 90). Diretamente do leite, DNA do parasito foi detectado em amostras da segunda coleta (90 dias de lactação) em cinco animais. As amostras positivas na PCR foram sequenciadas e os resultados confirmaram identidade &#8805;97% com o antígeno de membrana gene P22 de T. gondii. Verificou-se que a ocorrência de anticorpos contra T. gondii em ovinos com aptidão leiteira, do Oeste de Santa Catarina é menor quando comparada com a observada em ovinos de corte no Estado e que o DNA de T. gondii está presente no leite de ovelhas, representando uma possível via de transmissão para o ser humano, por meio do consumo do leite in natura e/ou derivados, além da possibilidade da transmissão via lactogênica para cordeiros

Orientador: Silmara Marques Allegretti / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-17T21:52:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barichello_FabianaFarinelloGrecco_M.pdf: 2472984 bytes, checksum: 2d89f144c96b66ee33bfdbb3f77ce1ee (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A Leishmaniose Visceral Canina, doença grave e fatal, tem o cão como o principal reservatório do seu agente etiológico no meio urbano. Devido ao alto parasitismo cutâneo nestes animais, da quantidade de cães infectados, e do próximo convívio com o homem, as ações desenvolvidas pelo Programa Brasileiro de Controle da Leishmaniose Visceral são centradas no reservatório canino, através da identificação e eutanásia dos animais soropositivos. Sendo assim, a adoção de ações profiláticas, com a utilização de vacinas nos cães, constituiria uma importante ferramenta para a diminuição da doença nestes animais, e consequentemente, da infecção do vetor e da transmissão do agente. Além disso, a adoção de medidas profiláticas, como o uso de coleiras impregnadas com deltametrina, repelentes de uso tópico e vacinas, são as únicas alternativas disponíveis atualmente para os cães, pois no Brasil, o tratamento de cães está proibido desde a publicação da Portaria Interministerial nº 1.426, de 11 de julho de 2008. Apesar de disponível desde 2004, a vacina Leishmune® ainda não é amplamente utilizada no Brasil, principalmente devido à possibilidade dos cães vacinados apresentarem sorologia positiva em inquéritos epidemiológicos, não sendo possível diferenciá-los dos infectados. Este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar o perfil sorológico de cães vacinados e saudáveis que residem em áreas endêmicas, e de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum/ chagasi, e avaliar a possibilidade de diferenciação sorológica a partir dos métodos utilizados atualmente nos inquéritos epidemiológicos oficiais e nos laboratórios de diagnóstico particulares: ELISA e RIFI com antígenos L. major-like, produzidos pelo Laboratório Bio-Manguinhos e ELISA S7, produzido pelo Laboratório Biogene. Todos os soros de cães foram testados nos três métodos, e os resultados demonstraram que nenhum cão vacinado apresentou resultado positivo em mais de um teste. Apenas um cão vacinado (1/39) apresentou resultado de 1:40 na RIFI, e quatro cães (4/39) apresentaram resultado positivo no ELISA L. major-like. Nenhum soro de cão vacinado apresentou resultado positivo no ELISA S7. O único resultado positivo na RIFI foi negativo nos outros dois métodos, e os quatro soros positivos no ELISA L. major-like foram negativos tanto na RIFI quanto no ELISA S7. Estes resultados sugerem reações falso-positivas, e demonstram que, de acordo com o Manual de Vigilância Epidemiológica, se os soros de cães vacinados forem testados em dois métodos (ELISA e RIFI), a possibilidade de um cão vacinado apresentar resultado positivo será remota. Desta maneira, a vacinação da população canina não dificultaria as ações atualmente empregadas para o controle da Leishmaniose Visceral, mas poderia, no futuro, ser somada as medidas já adotadas, evitando assim a eutanásia de cães / Abstract: Canine Visceral Leishmaniasis, serious and fatal disease, has the dog as main reservoir of the agent Leishmania infantum in urban environment. The control actions developed by the Brazilian Program of Visceral Leishmaniasis Control are focused on the canine reservoir through identification and euthanasia of seropositive animals, due to high cutaneous parasitism in these animals, the amount of infected dogs and the closeness to the human being. Therefore, the adoption of prophylactic measures like dog vaccination would be an important tool to reduce the number of infected dogs and consequently the vector infection and the disease transmission. Besides that, the adoption of prophylactic measures in these animals, like the usage of deltametrin embedded collars, topic usage repellent and vaccines are the only available alternatives for these animals, since dogs treatment has been forbidden by law in Brazil since 2008. Although it has been available since 2004, the Leishmune® vaccine is not widely used in Brazil yet, especially due to the possibility of vaccinated dogs showing positive serology, being impossible to differentiate them from infected dogs. The objective of this work was to evaluate the serologic profile of healthy and vaccinated dogs who live in endemic areas and of naturally infected dogs with Leishmania Infantum/ chagasi, and also evaluate the possibility of serologic differentiation using the same methods nowadays adopted by official epidemiological surveys and in private diagnosis laboratories: ELISA and IFA with L. major-like antigens, produced by Bio-Manguinhos Laboratory and ELISA S7, produced by Biogene Laboratory. All the dogs sera were tested in the three methods, and the results showed that no vaccinated dog presented a positive result in more than one test. Only a vaccinated dog (1/39), presented 1:40 in IFA, and 4 dogs (4/39) presented a ELISA L. major-like positive result. No vaccinated dog sera presented positive result in ELISA S7. The only IFA positive result was negative in the other two methods and the four positive sera in ELISA L. major-like were negative either in IFA, as in ELISA S7. These results suggest false positive reactions and demonstrate that according to the Epidemiological Surveillance Manual, if the vaccinated dogs sera are tested in two methods (ELISA and IFA), the possibility of a vaccinated dog to present a positive result is remote. Thus, the vaccination of a big quantity of dogs would not disturb the presently adopted actions for Visceral Leishmaniasis control, but could in the future be added to the already adopted measures, therefore avoiding the dog's euthanasia / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Parasitologia