Il existe plusieurs méthodes de radiomarquage de protéines avec du fluor-18 utilisées en imagerie de tomographie par émission de positons (TEP). Nous travaillons sur le développement d'une méthode de radiomarquage d'Ara h 2, une protéine d'arachide responsable de réactions anaphylactiques. Actuellement, il n’existe pas de méthodes permettant l’évaluation in vivo de la pharmacocinétique des allergènes alimentaires après ingestion. Nous avons utilisé un module automatisé avec cassettes pour préparer le groupement prosthétique radiomarqué ([18F]F-Py-TFP). Le précurseur réagit avec les ions fluorure (18F-) dans une cartouche de méthylammonium quaternaire (QMA). Le [18F]FPy-TFP est élué via QMA et une cartouche d'échange de cations en mode mixte (MCX) avec de l'éther. Après l’évaporation de l'éther, le [18F]FPy-TFP réagit avec de l'albumine sérique bovine (BSA) (ou Ara h 2) dans du DMSO, de l'eau et un tampon borate. Dans une autre méthode, la BSA lyophilisée (ou Ara h 2) est dissoute avec [18F]F-Py-TFP dans le DMSO en présence de DIPEA. Dans les deux protocoles, la réaction est chauffée pendant 15 minutes à 40 °C. Le produit est analysé par chromatographie liquide de haute performance. Ces réactions en deux étapes ont été optimisées séparément pour améliorer le rendement radiochimique (RCY). Le [18F]FPy-BSA a été préparé avec succès avec un RCY de 24 % ± 4 (décroissance corrigée) et une activité molaire de 1 196 Ci/mmol. Après plusieurs tentatives, nous n'avons pas réussi le radiomarquage de l’Ara h 2, mais d’autres études de radiofluoration sont en cours de développement. / There are several methods for radiolabeling proteins with fluorine-18 for positron emission tomography (PET) imaging. We are working to develop a clinically relevant reproducible method of radiolabeling Ara h 2, an allergenic peanut protein producing anaphylactic reactions. There is currently no accurate method to assess in vivo the pharmacokinetics of food allergens after ingestion. In an automated cassette-based module, the precursor was added and reacts with dried reactive 18F within a quaternary methyl ammonium (QMA) cartridge. Fluoropyridine-tetrafluorophenyl ester ([18F]FPy-TFP) is then eluted through the QMA and a mixed-mode cation exchange (MCX) cartridges with ether. Following ether evaporation, dissolved [18F]FPy-TFP in DMSO is added to bovine serum albumin (BSA) (or Ara h 2) in a borate buffer and water. In another method, lyophilized BSA (or lyophilized Ara h 2) is dissolved with dried [18F]FPy-TFP in DMSO and DIPEA. In both procedures, the reaction mixture is heated for 15 minutes at 40°C and analyzed by analytical high performance liquid chromatography. [18F]FPy-BSA was successfully produced from [18F]FPy-TFP in a radiochemical yield (RCY) up to 24% ± 4 (decay corrected) and in molar activity higher than 1 196Ci/mmol. These two-step reactions were separately optimized to maximize the RCY and provide low toxicity in future PET imaging studies. Following similar approaches as BSA, Ara h 2 radiolabeling was unsuccessful with both methods. Work is currently in progress for labeling Ara h 2.

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