Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-09-19T04:10:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 349735.pdf: 1321410 bytes, checksum: 50c26aad0017f1c3237573017d8885d4 (MD5) Previous issue date: 2017 / O objetivo deste estudo foi avaliar a influência dos contaminantes urina e plasma sanguíneo sobre a ativação do sêmen de suruvi, Steindachneridion scriptum, uma espécie de peixe nativa das bacias do alto rio Uruguai e do rio Paraná. Para tanto dois experimentos foram realizados, sendo que em cada um foi utilizado o sêmen de oito machos, que foram induzidos com extrato pituitário de carpa. Nos dois experimentos a qualidade do sêmen foi analisada através do volume, concentração espermática, integridade da membrana celular, motilidade espermática, analisada com o auxilio do software CASA (Computer Assisted Sperm Analysis), e pela morfologia dos espermatozoides. A concentração espermática e o espermatócrito apresentaram forte relação em ambos os experimentos (P<0,05), com alto coeficiente de determinação (R2= 0,8058 e 0,8562), sendo, portanto, possível estimar a concentração espermática a partir do espermatócrito. Para a motilidade espermática os seguintes parâmetros espermáticos foram avaliados: motilidade (MOT), velocidade curvilinear (VCL), velocidade média do deslocamento (VAP), velocidade em linha reta (VSL) e linearidade (LIN). No primeiro experimento o sêmen foi ativado com água mineral, plasma sanguíneo e urina, na proporção de 1:1000 (sêmen/solução), e avaliado durante 40 s. Após a ativação foi registrada diferença na motilidade produzida pelos diferentes ativadores (P<0,05), não tendo sido registrada ativação com o plasma sanguíneo. A VCL apresentou os maiores valores nos primeiros 30 s com diferenças significativas (P<0,05) entre os ativadores, ocorrendo uma diminuição de 136,6 a 48,0 µm/s para a água e de 158,0 para 58,0 µm/s para a urina. Para a VAP foram registradas tendências semelhantes às observadas para a VCL, sendo que no decorrer do tempo houve diferenças significativas nas velocidades a partir da ativação, que declinaram de 122,6 para 21,0 µm/s e de 148,0 para 21,0 µm/s para ativação com água e urina, respectivamente. A VSL apresentou diferenças significativas (P<0,05) entre os ativadores no decorrer do tempo, variando de 111,4 para 20,6 µm/s para água, e de 133,2 para 27,2 µm/s para a urina, respectivamente. Nos dois experimentos as amostras apresentaram altos percentuais de células viáveis, altas porcentagem de espermatozoide com morfologia normal (>88%) e baixa porcentagem com morfologia anormal (<12 %), entre as quais a mais frequente foi a anormalidade secundária sem cauda e cauda curvada. No segundo experimento foi avaliado o efeito da urina sobre a ativação do sêmen e sobre os parâmetros espermáticos o sêmen foi submetido às concentrações 10, 30, 50 e 70 %. A urina em baixa concentração (10%) não produziu ativação do sêmen, entretanto o aumento das proporções de urina produziu motilidade espermática e aumentou as velocidades analisadas. Os resultados demonstraram que a urina é um potencial ativador, recomenda-se o descarte com amostras com níveis acima de 10% de urina, para impedir a perda da qualidade do sêmen, enquanto as amostras ativadas com plasma sanguíneo não precisam ser descartadas.<br> / Abstract : The objective of this study was to evaluate the influence of urine and blood plasma contaminants on the activation of semen of suruvi, Steindachneridion scriptum. In order to do this, two experiments were carried out, and in each one the semen of eight males, induced with pituitary carp extract, was used. In the experiments the semen quality was analyzed through volume, sperm concentration, cell membrane integrity, sperm motility, analyzed with CASA software, and sperm morphology. The values of sperm concentration and spermatocrit in both experiments were significant (P<0.05), with a high coefficient of determination (R2 = 0.8058 and 0.8562), and therefore it was possible to estimate the sperm concentration from the spermatocrit. The following parameters were evaluated for the sperm motility: motility (MOT), curvilinear velocity (VCL), average path velocity (VAP), straight line velocity (VSL) and linearity (LIN). In the first experiment the semen was activated with mineral water, blood plasma and urine, in a ratio of 1: 1000 (semen/solution), and evaluated for 40 s. After activation, there was a difference in the motility produced by the activators (P<0.05), and no activation was produced with blood plasma. The VCL presented the highest values in the first 30 s with significant differences (P<0.05) between the activators, with a reduction of 136.6 to 48.0 µm/s for water and 158.0 for 58.0 µm/s for urine. For VAP, trends similar to those observed for the VCL were recorded, and in the course of time there were significant differences in velocities from activation, which declined from 122.6 to 21.0 µm/s and from 148.0 to 21.0 µm/s for water and urine, respectively. VSL showed significant differences (P<0.05) between the activators over time, varying from 111.4 to 20.6 µm/s for water, and from 133.2 to 27.2 µm/s for urine, respectively. In both experiments, the samples had a good percentage of viable cells, a high percentage of spermatozoa with normal morphology (>88%) and low percentage with abnormalities (<12%), among which the most frequent was the secondary abnormality without tail and curved tail. In the second experiment, the effect of urine on semen activation and sperm parameters was evaluated at concentrations of 10, 30, 50 and 70 %. Urine in low concentration (10 %) did not produce semen activation; however, increased urine proportions produced sperm motility and increased the velocities analyzed. The results showed that urine is a potential activator, it is recommended to discard samples with levels above 10% urine, to prevent loss of semen quality, while blood plasma activated samples need not be discarded.

O valor adaptativo do sexo em patógenos unicelulares eucarióticos é um assunto de intenso debate, e os mecanismos genéticos envolvidos na reprodução sexual desses organismos são pouco desconhecidos. Diferenças nos sistemas de reprodução podem ajudar a explicar as diferenças nos modos de transmissão, amplitude de gêneros hospedeiros e resposta às mudanças ambientais, todas estreitamente relacionadas à patogenicidade e à virulência desses patógenos. Este trabalho tem como objetivo identificar os elementos genômicos que podem estar associados aos modos de reprodução e elucidar o papel dos ciclos sexuais em um microsporídeo. Microsporídeos fazem parte de um filo de fungos patogênicos intracelulares unicelulares. Estes parasitas são encontrados em praticamente todos os tipos de animais, sendo de importância para saúde e agricultura. Hamiltosporidium tvaerminnensis é um microsporídeo assexuado que é transmitido vertical e horizontalmente ao seu hospedeiro, o microcrustáceo Daphnia magna. H. tvaerminnensis possui uma espécie irmã, Hamiltosporidium magnivora, que difere por ser sexual e apenas verticalmente transmitida Nosso trabalho usa como referência um genoma draft de H. tvaerminnensis de 2009. É um genoma considerado grande para um microsporídeo, com tamanho estimado de 25 Mb. Contamos com sequências de Illumina de duas linhagens recentemente sequenciadas de H. magnivora, uma da Bélgica e outra de Israel, bem como um resequenciamento da mesma linhagem de H. tvaerminnensis, da Finlândia, usando tecnologia mais recente que a referência. Após a montagem e anotação, os nossos resultados apontam para genes chave de meiose ausentes na linhagem assexuada, bem como um enriquecimento de elementos transponíveis e transferência genética horizontal gênica derivada do hospedeiro nas linhagens sexuais. A presença exclusiva de certos genes da meiose bem como de outros genes de reparo a danos do DNA associados à maior presença de elementos móveis sugere uma possível perda de sexo concomitante à inativação de elementos móveis na linhagem assexuada. / The adaptive value of sex in eukaryotic unicellular pathogens is a matter of intense debate, and the genetic mechanisms involved in sexual reproduction of these organisms are largely unknown. Differences in reproduction systems could help explaining differences in modes of transmission, host range amplitude and response to environmental changes, all tightly related to pathogenicity and virulence of such pathogens. This work aims to identify genomic elements that could be associated with modes of reproduction, and further elucidate the role of sexual cycles in a microsporidian parasite. Microsporidia belong to a phylum of unicellular intracellular pathogenic Fungi. These parasites are found in virtually all types of animals, being of importance to health and agriculture. Hamiltosporidium tvaerminnensis is a microsporidian shown to be asexual and being both vertically and horizontally transmited to its host, the microcrustacean Daphnia magna. H. tvaerminnensis possesses a sister species, Hamiltosporidium magnivora, which differs by being sexual and only vertically transmitted Our work uses as reference a 2009 assembled draft genome of H. tvaerminnensis. It is an unusually large genome for a microsporidian, estimated to contain 25 Mb of sequence. We rely on Illumina sequencing reads from two recently resequenced linages of H. magnivora, one from Belgium and another from Israel, as well as a set from the same H. tvaerminnensis lineage as the reference, from Finland, using technology newer than the reference. After assembly and annotation, our results point to missing key meiosis genes in the asexual lineage, as well as an enrichment in transposable elements and host derived horizontal gene transfer in the sexual lineages. The exclusive presence of certain meiosis genes as well as other DNA damage repair genes associated to the larger presence of mobile elements hint to a possible loss of sex concomitant to the inactivation of mobile elements in the asexual lineage.

Programa de Pós-Graduação em Ecologia de Biomas Tropicais. Departamento de Biodiversidade, Evolução e Meio Ambiente, Instituto de Ciências Exatas e Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Marise Leite (marise_mg@yahoo.com.br) on 2016-03-28T14:35:59Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO_AcasalarPerdaTempo.pdf: 1782966 bytes, checksum: 0df2755260e9106899b0c7b1e03fbe6e (MD5) / Approved for entry into archive by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2016-04-11T15:30:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO_AcasalarPerdaTempo.pdf: 1782966 bytes, checksum: 0df2755260e9106899b0c7b1e03fbe6e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-12T17:39:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO_AcasalarPerdaTempo.pdf: 1782966 bytes, checksum: 0df2755260e9106899b0c7b1e03fbe6e (MD5) Previous issue date: 2015 / Copular é extremamente custoso para fêmeas e machos devido ao gasto energético, ao aumento do risco de predação, às injúrias sofridas na competição por parceiros e ao tempo gasto copulando. Apesar disso, os sistemas reprodutivos poligâmicos são os mais difundidos entre os insetos. Neste estudo, avaliamos o sistema reprodutivo da abelha solitária Arhysosage cactorum (Hymenoptera, Andrenidae) a fim de checar a poliandria na espécie. Estimamos o custo das cópulas múltiplas e da guarda de parceira para as fêmeas, em termos de tempo, e testamos as previsões de que (1) fêmeas em cópula dispendem mais tempo forrageando que sozinhas e de que (2) fêmeas evitam flores contendo machos. O estudo foi realizado durante duas estações reprodutivas da espécie, numa área dos pampas no sul do Brasil. Quantificamos as cópulas realizadas por machos e fêmeas e a duração da associação dos machos com suas parceiras após a cópula. Para avaliar se a presença dos machos altera o comportamento de forrageio das fêmeas, em campo, contabilizamos as visitas florais de fêmeas em flores contendo ou não um macho morto em seu interior. Nossos resultados mostraram que A. cactorum é uma espécie poligâmica. Os machos se mantêm associados às suas parceiras após a cópula, e são transportados pelas fêmeas enquanto elas forrageiam. Devido a este comportamento, fêmeas “tornaram-se” cerca de 80% mais pesadas e dispenderam o dobro do tempo de forrageio na flor quando associadas aos machos. Em A. cactorum a poliandria se mostrou custosa para as fêmeas. Fêmeas nunca rejeitam tentativas de cópula dos machos, mas a presença dos machos influencia o padrão de forrageio das fêmeas que evitam flores em que eles se encontram. Tal resposta das fêmeas pode ser uma contra adaptação ao comportamento de acasalamento dos machos. Na ausência de benefícios indiretos, o sistema reprodutivo de A. cactorum representa um caso de poliandria por conveniência. ______________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: Mating is extremely costly for females and males due to energy expense, increased risk of predation, injuries suffered in the competition for mates, and the time spent copulating. Nevertheless, polygamous mating systems are the most widespread among insects. In this study, we evaluated the mating system of solitary bee Arhysosage cactorum (Hymenoptera, Andrenidae) in order to check polyandry in the species. We estimated the cost of multiple copulations and mate guarding for females, in terms of time, and we tested the predictions that (1) females in intercourse expend more time foraging than alone, and (2) females avoid flowers containing males. The study was conducted over two breeding seasons of the species, in a pampas region of southern Brazil. We quantified the copulations performed by males and females and the duration of association of the males with their mates. In order to assess whether the presence of males changes the foraging behavior of females, in the field, we recorded the floral visits of females in flowers with or without a dead male in its interior. Our results showed that A. cactorum is a polygamous species. Males remain associated with their mate after copulation and are carried by them while they forage. In consequence to this behavior, female "became" approximately 80% heavier and expent twice the foraging time in the flower when associated with males. Polyandry proved costly for this species' females. They never reject males' copulation attempts, but their presence influences their foraging pattern. Such females' response can be a counter-adaptation to the mating behavior of males. In the absence of indirect benefits, the reproductive system of A. cactorum is a case of polyandry for convenience.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Agroecossistemas. / Made available in DSpace on 2012-10-19T11:04:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Os bovinos são animais sociais, que entre eles estabelecem uma ordem de dominância. O conjunto das relações de dominância forma uma hierarquia interna. Nos sistemas criatórios também existe uma hierarquia entre os animais, talvez a variável comportamental mais importante na criação, interferindo na alimentação, reprodução, produtividade e bem-estar dos animais. Nesta dissertação, aspectos relacionados ao comportamento social de vacas leiteiras e a relação humano-animal são estudados. Duas hipóteses foram testadas: a) nos bovinos, por serem sociais, poligâmicos, e formadores de harém, as vacas dominantes deveriam ter mais filhos machos enquanto que as subordinadas deveriam ter mais filhas fêmeas (hipótese de Trivers e Willard); b) apesar de todas as vacas distinguirem um tratador aversivo de um neutro, as vacas dominantes teriam uma resposta diferente das subordinadas, apresentando uma maior aversão aos humanos, implicando em menor produção leiteira e prejuízo ao bem-estar. Para testar estas hipóteses foram realizados 2 experimentos. No primeiro, em relação à posição social da vaca e o sexo de sua cria, foi determinada a hierarquia social existente de 4 rebanhos. Após, as vacas foram agrupadas em dominantes, intermediárias e subordinadas. O sexo de suas crias foi anotado e através do teste do Chi-quadrado, encontramos que as vacas dominantes apresentaram um número significativamente maior (p =0,014) de filhos machos do que as subordinadas, que apresentaram um número maior de filhas fêmeas. O segundo experimento, para testar a hipótese de que vacas dominantes teriam mais aversão aos humanos do que as subordinadas, foi realizado em um rebanho de 11 vacas. Durante este experimento o tratador aversivo dava um tapa na garupa e um grito, diariamente, em cada vaca. Foram efetuados testes de distância de fuga a um tratador neutro e a um aversivo, antes, durante e ao final do experimento. Também foi realizada a medição do leite residual na presença e na ausência do tratador aversivo. A distância de fuga das vacas dominantes ao tratador aversivo, ao final do experimento, foi significativamente maior (p<0,05) do que das vacas subordinadas. Além disso, as vacas dominantes apresentaram, em média, mais leite residual do que as subordinadas, independentemente do tratador aversivo estar presente ou não. Estes resultados demonstram que vacas dominantes sentem mais medo de humanos do que as vacas subordinadas. A confirmação de nossas hipóteses nos leva a afirmar que as estratégias comportamentais que evoluíram no ambiente natural ao longo de muitas gerações continuam a se manifestar na criação animal, mesmo após anos de intensa seleção artificial, afetando direta ou indiretamente a produção. O conhecimento destes comportamentos é de extrema importância para a elaboração de sistemas de manejo que promovam o bem-estar, a produtividade e a sustentabilidade dos sistemas criatórios.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T19:01:37Z : No. of bitstreams: 1 vianna_lc_dr_botfmvz.pdf: 207510 bytes, checksum: 765058f20a9940466f0597de3fed2c28 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Com o objetivo de determinar a ocorrência da transmissão vertical de Neospora caninum 518 novilhas prenhes tiveram o sangue materno e fetal analisados pelo método sorológico de ELISA e pela reação da polimerase em cadeia (PCR). Das novilhas testadas 103 (19,88%) possuíam anticorpos contra Neospora caninum, e 38 (7,34%) fetos foram positivos enquanto que 65 (12,55%) foram negativos. Os 415 (80,11%) animais restantes não apresentaram anticorpos anti-Neospora caninum tanto as mães quanto os fetos. A detecção de anticorpos fetais ocorreu a partir dos quatro meses de gestação. A técnica da reação da PCR convencional não apresentou amplificação de pares de bases em nenhum tecido fetal analisado. Esse fato, sugere a utilização da PCR de duas amplificações. / In order to determine occurrence of vertical transmission of Neospora caninum in bovine (Bos taurus indicus), we have analized maternal and fetal blood samples obtained from 518 pregnant heifers by either ELISA and polymerase chain reaction (PCR). We have found a total of 103 heifers (19,88%) with antibodies against Neospora caninum, from which 38 fetuses (7,34%) showed positive results. Animals remaining (415/80,11%) neither presented anti-Neospora caninum antibodies in heifers or fetuses. Fetal antibodies detection were detected from the fourth month of gestation. There was not amplification of N. caninum sequence in fetal tissue samples, what could suggest employment of nested-PCR.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-16Bitstream added on 2014-06-13T19:02:38Z : No. of bitstreams: 1 piffer_rc_dr_botfm.pdf: 1433858 bytes, checksum: 0b4876bf7f03faeb50a5129b53d87275 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A corticoterapia vem sendo muito utilizada na prática obstétrica, em gestantes com risco de parto prematuro, no intuito de promover a aceleração da maturidade pulmonar fetal. Entretanto, altos níveis de corticosteróides podem interferir com o pico de testosterona perinatal, importante para a diferenciação sexual do hipotálamo. Este processo é mediado por hormônios gonadais durante o período perinatal e responsável pelas diferenças fisiológicas, morfológicas, comportamentais e neuroanatômicas entre machos e fêmeas adultos. O hipotálamo de mamíferos, antes da diferenciação sexual, está organizado do tipo feminino . No macho, o hipotálamo precisa ser masculinizado e defeminizado para que apareça o padrão tônico de secreção de gonadotrofinas e o comportamento de monta. Desta maneira, objetivouse investigar através de parâmetros reprodutivos, metabólicos, farmacológicos e de biologia molecular, possíveis alterações resultantes da terapia com betametasona no período pré-natal em ratos, avaliando o desenvolvimento dos descendentes machos, do nascimento até a vida adulta reprodutiva. Ratas Wistar prenhes receberam 0,1mg/kg de betametasona (grupo Betametasona) ou salina (grupo Controle) no 12º, 13º, 18º e 19º dias de prenhez (IM). A exposição pré-natal à betametasona reduziu ao nascer a massa corporal e a distância anogenital; o peso úmido da glândula adrenal e a corticosterona plasmática também estavam reduzidos ao nascer em relação ao grupo Controle, indicando comprometimento do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal. No entanto, esta terapia não alterou o desenvolvimento físico da prole, exceto pelo atraso na descida testicular. Na vida adulta, a exposição pré-natal à betametasona reduziu o peso úmido do testículo e da secreção da vesícula seminal, bem como a... / Corticosteroids are used widely in obstetric clinical practice in pregnant women at risk for preterm delivery. This therapy promotes fetal lung maturation, thus reducing the incidence of respiratory distress syndrome, which in turn decreases neonate mortality and morbidity. In spite of this, much less is known about the interference of high corticosteroid levels at the testosterone peak during the critical period of brain sexual differentiation. Thus, the aim this study was to investigate reproductive, metabolic, pharmacologycal, and molecular biology parameters in male rats exposed prenatally to betamethasone. Pregnant rats received 0.1mg/kg of betamethasone (Betamethasone group) or saline (Control group) on the 12th, 13th, 18th, and 19th days of pregnancy (IM). The prenatal treatment with betamethasone reduced the body weight, the anogenital distance, the wet weight of adrenal, and plasmatic corticosterone level of male pups at birth. However, this terapy did not alter the physical development, but there was retardation in the age of testicular descent. In adulthood, there were reductions in the wet weight of testis, in the seminal vesicle secretion, in the adrenal wet weight and as well as plasmatic corticosterone level. The fertility reduction observed in the Betamethasone group probably was caused by decreased sperm quality, sperm production, and plasmatic testosterone level, and not for alterations in contraction response of seminal vesicle and vas deferens, to autonomic drugs, so important for ejaculatory process. Prenatal exposure to betamethasone also damaged sexual behavior. There was a delay in the latency to first ejaculation, as well as a decrease in the numbers of postejaculatory intromissions, total intromissions and total ejaculations. Although 80% of the betamethasone-treated animals exhibited male sexual behavior, ...(Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-02Bitstream added on 2014-06-13T21:03:44Z : No. of bitstreams: 1 hashimoto_dt_dr_botib.pdf: 2061965 bytes, checksum: c1eb35097c6e8f5b9f4aa42b8015d5d5 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Híbridos de peixes produzidos em pisciculturas são considerados eminentes ameaças biológicas às populações naturais e estoques cultivados. Podem apresentar fertilidade e contaminar geneticamente os estoques através de introgressão. Neste trabalho, estabelecemos e utilizamos marcadores de PCR-Multiplex e PCR-RFLP com genes nucleares e mitocondriais para a identificação de híbridos entre espécies Neotropicais atualmente produzidos nas pisciculturas brasileiras. Entre estes, estão cruzamentos envolvendo espécies de Anostomidae (Leporinus macrocephalus e L. elongatus), Serrasalmidae (Colossoma macropomum, Piaractus mesopotamicus e P. brachypomus) e Pimelodidae (Pseudoplatystoma reticulatum, P. corruscans, Phractocephalus hemioliopterus e Leiarius marmoratus). A identificação molecular foi realizada em 23 lotes de juvenis de peixes (cerca de 1850 amostras), comprados vivos (de 2 a 18 cm) em oito diferentes pisciculturas brasileiras. Foram adquiridos tanto indivíduos de espécies puras quanto produtos híbridos. Os resultados indicaram que 15 lotes apresentaram-se irregulares e não foram vendidos conforme especificado, pois não correspondiam ao que foi comercializado pelos produtores. Nestes lotes, amostras de diferentes híbridos e espécies estavam misturadas, com casos de até cinco diferentes produtos no mesmo estoque. Além disso, os lotes foram vendidos com rótulos inadequados, observando produtos híbridos comercializados como espécies puras de forma não discriminada. A situação é preocupante em relação aos híbridos provenientes de espécies de Serrasalmidae e Pimelodidae, pois foram comercializados erroneamente em alta proporção. Além do mais, quatro lotes foram identificados como linhagens pós-F1, provenientes de retrocruzamentos envolvendo... / Fish hybrids produced in fish farms are considered eminent biological threats to natural populations and cultivated stocks. If fertile, they can cause genetic contamination of the stocks through introgression. In this work, we established and used molecular markers of PCR-Multiplex and PCR-RFLP with nuclear and mitochondrial genes for the identification of hybrids between Neotropical species currently produced in fish farms in Brazil. The crosses were performed between species of Anostomidae (Leporinus macrocephalus and L. elongatus), Serrasalmidae (Colossoma macropomum, Piaractus mesopotamicus and P. brachypomus) and Pimelodidae (Pseudoplatystoma reticulatum, P. corruscans, Phractocephalus hemioliopterus and Leiarius marmoratus). Molecular identification was carried out in 23 stocks of juvenile fish (about 1850 samples), purchased live (2-18 cm) in eight different fish farms in Brazil. Both individuals of pure species and hybrid products were acquired. The results indicated that 15 stocks were irregular and mislabeled, because they did not correspond to what was marketed by the producers. In these stocks, samples of different hybrids and species were mixed, with cases up to five different products in the same stock. Furthermore, the stocks were sold with inadequate labels, with hybrids traded as pure species indiscriminately. Particular concerns are revealed in relation to hybrids from species of Pimelodidae and Serrasalmidae, because they were incorrectly commercialized in high proportion. Moreover, four stocks were identified as post-F1 lineages, resulting from backcrosses of the hybrid products “Patinga” and “Cachapinta”. These animals are fertile and can be found in natural environments, probably originated from escapes of farming systems. Additionally, the molecular analysis showed that fish hybrids are being... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-05-19Bitstream added on 2014-06-13T20:26:09Z : No. of bitstreams: 1 ereno_rl_dr_botfmvz.pdf: 240214 bytes, checksum: e0013dd0770e04e468d38b245d2276d1 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Objetivou-se com o presente trabalho, avaliar a expressão das isoformas do LHR nas células da granulosa de novilhas da raça Nelore (Bos taurus indicus), antes, durante e após o desvio folicular. Para caracterizar o momento do desvio folicular (Experimento 1, primeira etapa), novilhas Nelore (n=20) foram submetidas ao seguinte protocolo de sincronização da ovulação: no D-10 receberam um dispositivo intravaginal liberador de progesterona (1,0 g, DIB®,), associado a aplicação de benzoato de estradiol (BE, 2,5 mg, Estrogin®, via IM). O dispositivo intravaginal foi removido no D-3 e os animais receberam uma aplicação de PGF2a (d-cloprostenol, 500 mg, Prolise®, IM). Vinte e quatro horas mais tarde administrou-se 1,0 mg de BE (via IM) e a partir deste momento, o crescimento do folículo dominante foi acompanhado através de exame ultrasonográfico (US, Aloka SSD 900; transdutor de 7,5 a 9,0 MHz, Japan), realizado a cada 12 horas até 144 horas após a ovulação. Na segunda etapa deste experimento avaliou-se a expressão das isoformas do LHR (M1, M2, M3 e M4) nas células da granulosa de folículos obtidos antes, durante e após o momento esperado para ocorrência do desvio folicular. As mesmas novilhas utilizadas anteriormente foram submetidas ao protocolo de sincronização da ovulação descrito acima e separadas em 3 grupos (segunda etapa): Grupo 2 (G2, 2 dias após a ovulação, n=7), Grupo 2,5 (G2,5, 2,5 dias após a ovulação, n=7) e Grupo 3 (G3, 3 dias após a ovulação, n =7). Os animais foram abatidos 2,0, 2,5 e 3 dias após a ovulação para remoção dos ovários e as células da granulosa, coletadas dos folículos ovarianos, foram separadas para a extração do RNA total com Trizol. A expressão gênica das isoformas de LHR foi mensurada por RT-PCR semi-quantitativo. No experimento 2, um outro lote de novilhas Nelore (n=21) foi submetidos aos procedimentos,... / The main objective of the present work was to evaluate the expression of LHR isoforms in granulosa cells from Nelore heifers, before, during and after follicule deviation. To characterize the time of follicle deviation (Experiment 1, phase 1), Nellore heifers (n=20) were submitted to the following synchronization protocol: at Day -10 (D -10) they received an intravaginal progesterone releasing device (1.0 g, DIB®) and estradiol benzoate (BE, 2.5 mg, Estrogin®, i.m.). Intravaginal device was removed on D -3 and animals received PGF2a (d-cloprostenol, 500 mg, Prolise®, i.m.). Twenty four hours afterwards 1.0 mg de BE (i.m.) was administered and follicular growth of the dominant follicle was registered by ultrasonography (US, Aloka SSD 900; 7.5 to 9.0 MHz probe) performed every 12 h until 144 h after ovulation. In the second phase of this experiment expression of isoforms of LH receptors (M1, M2, M3 and M4) from granullosa cells obtained from follicles before, during and after the expected time of follicle deviation, were evaluated. The same heifers used on phase 1 were submitted to the protocol described above to synchronize ovulation, and randomly allocated in three groups (phase 2): Group 2 (G2, 2 days after ovulation, i.e., before the expect time of deviation, n=7), Group 2.5 (G2.5, 2.5 days after ovulation, i.e., during deviation, n=7) and Group 3 (G3, 3 days after ovulation, i.e., after deviation). The animals were slaughtered 2.0, 2.5, and 3 days after ovulation to remove the ovaries, and granullosa cells from ovarian follicles were separated for total RNA extraction with Trizol. Gene expression of LHR isoforms were determined by RT-PCR. In experiment 2, another group of Nellore heifers (n=21) was exposed to the same procedures described in the second phase of experiment 1, to increase the number of samples from granullosa cells that expressed LHR isoforms. In experiment 1 (phase 1),...(Complete abstract, click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006Bitstream added on 2014-06-13T20:06:44Z : No. of bitstreams: 1 pinto_mgl_dr_botfmvz.pdf: 640979 bytes, checksum: 3ae39afaf3158d48637926dcf3c50a95 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Estudos recentes têm evidenciado o envolvimento de diferentes FGFs no controle do desenvolvimento folicular ovariano, entre eles o FGF-7. O FGF- 10 apresenta alta similaridade ao FGF-7, expresso em células da teca, e ambos atuam através do mesmo receptor FGFR-2b, expresso em células da granulosa. O FGF-10 modula a atividade celular em uma série de tecidos, mas ainda não foi investigado no ovário. O objetivo principal deste trabalho foi avaliar a participação do FGF-10 no controle do desenvolvimento folicular mediante investigação da expressão do seu RNAm em folículos ovarianos bovinos. A expressão do FGF-7 também foi investigada paralelamente. Além disso, a expressão gênica do FGF-10 e FGF-7 foi investigada numa variedade de tecidos bovinos fetais e adultos. “Pools” de folículos pré-antrais e oócitos, folículos inteiros com diâmetro entre 2 e 4mm, células da teca e da granulosa de folículos maiores que 5mm e amostras de tecidos tiveram seu RNA total extraído. Dos folículos maiores que 5mm, o fluído folicular foi coletado e as concentrações de estradiol e de progesterona foram determinadas por radioimunoensaio. Folículos com progesterona acima de 100ng/mL foram considerados atrésicos e excluídos da análise. Os folículos restantes foram agrupados de acordo com a concentração de estradiol (<5; 5-20; >20-100 e >100ng/mL) e de acordo com o diâmetro (5-7; 8-10 e >10mm). A expressão gênica do FGF-7 e do FGF-10 foi examinada por RT-PCR. Os efeitos da concentração intrafolicular de estradiol e do diâmetro foram investigados por RT-PCR semiquantitativo. A expressão do FGF-10 foi detectada em folículos pré-antrais primordiais, primários e secundários, oócitos e células da teca, mas não em células da granulosa. Adicionalmente, o RNAm do FGF-7 foi pela primeira vez detectado... / Recent studies have evidenced the involvement of different FGF on ovarian follicular development control, among them FGF-7. FGF-10 exhibits high similarity to FGF-7, which is expressed in theca cells, and both act through the same receptor FGFR-2b, expressed in granulosa cells. FGF-10 modulates cellular activities in several tissues, but it has not been investigated in ovary yet. The main objective of this work was to evaluate FGF-10 participation in controlling follicular development, through the investigation of its mRNA expression in bovine ovarian follicles. In parallel, FGF-7 gene expression was also investigated. Furthermore, FGF-10 and FGF-7 gene expression was assessed in a variety of bovine adult and fetal tissues. Pools of preantral follicles and oocytes, whole follicles at 2-4mm in diameter, granulosa and theca cells from follicles larger than 5mm and tissue samples were submitted to total RNA extraction. Follicular fluid from follicles larger than 5 mm was collected and estradiol and progesterone concentrations were measured by RIA. Follicles with progesterone levels above 100ng/mL were considered atretic and excluded from the analysis. Remaining follicles were grouped according to intrafollicular estradiol concentration (<5; 5-20; >20-100; and >100ng/mL) and according to diameter (5-7; 8-10 and >10mm). FGF-7 and FGF-10 gene expression was examined by RT-PCR. Effects of intrafollicular estradiol concentration and diameter were assessed by semiquantitative RT-PCR. FGF-10 gene expression was detected in primordial, primary and secondary preantral follicles, oocytes and theca cells, but not in granulosa cells. In addition, FGF-7 mRNA was detected for the first time in bovine preantral follicles and investigated in oocytes, where it was absent. FGF-10 expression in theca cells decreased as intrafollicular... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T19:05:30Z : No. of bitstreams: 1 machado_lha_dr_botfmvz.pdf: 559975 bytes, checksum: c67694bef1bd87e9ce85ee1bef52625d (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente projeto pretendeu estudar o ciclo hormonal e o metabolismo de cálcio das cadelas durante a gestação e puerpério e testar a eficiência do método da quimioluminescência como uma alternativa ao RIA. Foram utilizadas 10 cadelas adultas com tamanho e peso semelhantes, mantidas sob as mesmas condições de manejo e alimentadas com ração de boa qualidade, sem qualquer suplementação até os 40 dias de gestação, após isto a ração foi substituída por ração de filhote até o final da lactação. As colheitas de sangue foram realizadas durante as fases gestacional e puerperal, nos momentos: M0 (início do diestro citológico), M1 (20 dias pós-M0), M2 (40 dias pós-M0), M3 (momento do parto), M4 (15 dias pósparto), M5 (45 dias pós-parto) e M6 (30 dias pós-desmame). O PTH, osteocalcina, calcitonina, progesterona, estradiol, T3 total, T4 total, T4 livre e calcitriol foram analisados pelo radioimunoensaio; T4 canino, T3 total, T3 livre, T4 total e T4 livre foram analisados pela quimioluminescência e o cálcio, fósforo, proteína total, albumina e fosfatase alcalina foram analisados pelo método colorimétrico. A osteocalcina e calcitonina foram testadas pelo método do RIA e não foram observadas diferenças entre os momentos. O T3 Livre testado pelo método de quimioluminescência e apresentou todos os valores abaixo do limite de detecção. As demais variáveis apresentaram diferenças significativas entre os momentos. Não foram observadas correlações que demonstrem envolvimento dos hormônios dosados com o metabolismo do cálcio e fósforo. Não houve correlação entre o número de filhotes e as demais variáveis estudadas; os resultados demonstram não ter havido tendência a hipocalcemia e correção hormonal; o estudo de correlações não demonstrou um padrão de acontecimento entre as diversas variáveis, principalmente entre o cálcio e as demais variáveis... . / The present project intended to study hormone cycle and calcium metabolism of bitches during gestation and the puerperal period and to test the efficiency of chemoluminescent immune assay as an alternative to RIA. Ten adult bitches of similar size and weight, maintained under the same environmental conditions and fed with high quality dry food without any supplementation until the fortieth day of gestation, then changed to puppy dry food until the end of lactation. Blood samples were collected during gestation and the puerperal period, on moments M0 (beginning of cytologic diestrus), M1 (20 days after M0), M2 (40 days after M0), M3 (at the time of parturition), M4 (15 days after parturition), M5 (45 days after parturition) and M6 (30 days after weaning). PTH, osteocalcin, calcitonin, progesterone, estradiol, total T3, total T4, free T4 and calcitriol were analyzed by RIA; canine T4, total T3, free T3, total T4 and free T4 were analyzed by chemoluminescence and calcium, phosphorus, total protein albumin and alkaline phosphatase were analyzed by colorimetric method. There was no difference between moments on values of osteocalcin and calcitonin. All values of free T3 were below the limit of detection of the test. The other variables studied presented no difference between moments. There was no correlation demonstrating the involvement of tested hormones on calcium and phosphorus metabolism. There was no correlation between litter size and the other parameters studied; the results showed no tendency to hypocalcaemia and hormone correction; the study of correlations did not suggest a pattern of happening among variables, specially between calcium and the other variables; osteocalcin is more specific as bone maker that alkaline phosphatase; nutritional correction may have been the responsible for the quiescence of minerals and related hormones, the same occurring to the values of total protein... (Complete abstract, click electronic address below).