Orientador: Ana Silvia Alves Meira Tavares Moura / Banca: Sueli Blanes Dami / Banca: Valderez Bastos Valero Lapchik / Banca: José Luiz Moraes Vasconcelos / Banca: Denise Rangel da Silva Sartori / Resumo: O objetivo deste estudo foi analisar o efeito da restrição alimentar quantitativa nas fases pré e pós acasalamento, sobre o desempenho de ratas Wistar no primeiro ciclo reprodutivo. Três experimentos foram realizados, envolvendo um total de 220 fêmeas nulíparas. No Experimento 1, 60 fêmeas foram distribuídas em quatro grupos de acordo com a disponibilidade quantitativa de ração, 15 dias antes e 15 dias depois do acasalamento que ocorreu, sempre, aos 90 dias de idade. O primeiro grupo recebeu ração ad libitum dos 75 aos 105 dias de idade. O segundo, seguiu um programa de restrição alimentar quantitativo, recebendo 70% do consumo voluntário de ração no mesmo período. O terceiro, recebeu ração ad libitum até o acasalamento e foi submetido ao programa de restrição alimentar pós-acasalamento. O inverso ocorreu com o quarto grupo. No Experimento 2, 120 fêmeas foram distribuídas em quatro grupos e submetidas a programas de restrição alimentar quantitativa durante o período gestacional: R7 = restrição até o dia 7, R14 = restrição até o dia 14, R21 = restrição até o dia 21 e Controle = acesso irrestrito ao alimento. O terceiro experimento envolveu 40 fêmeas distribuídas em dois grupos: o Voluntário (V) recebeu a ração ad libtum e o outro Restrito (R), seguiu um programa de restrição alimentar quantitativo, durante os 15 dias que antecederam o acasalamento. As fêmeas dos dois grupos foram eutanasiadas no dia 7 de gestação para determinação da taxa de ovulação, contagem dos sítios de implantação e pesagem da gordura abdominal. No experimento 1, houve resultados favoráveis às fêmeas do grupo com consumo voluntário na fase pré-reprodutiva (P<0,05) para as seguintes características: nascidos totais, peso nascidos, peso vivo da ninhada, nascidos vivos. No experimento 2 foi detectada diferença... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective was to evaluate the effects of a quantitative feed restriction in the pre and post mating phases on the performance of Wistar female rats in the first reproductive cycle. Three experiments were carried out involving a total of 220 young females. In the first experiment, 60 females were assigned to one of four groups according to the availability of feed 15 days before and 15 days after mating, which occurred at 90 days of age in all cases. The first group had free access to feed from 75 to 105 days of age. The second group followed a quantitative feed restriction program receiving 70% of the voluntary feed intake in the same period. The third group had free access to feed until mating and was submitted to the feed restriction program afterwards. The opposite occurred with the fourth group. In experiment 2, 120 females were assigned to one of four groups: a control which had free access to feed during gestation or three groups submitted to quantitative feed restriction programs. R7: from day 1up to day 7; R14: from day 1 up to day 14; R21: from day 1 up to day 21. The third experiment involved 40 females assigned to one of two groups: a control group which had free access to feed or a treatment group which followed a quantitative feed restriction program during the 15 days that preceded mating. The females were euthanized on day 7 of gestation when the ovulation and implantation rates as well as the abdominal fat weight were determined. In the first experiment, females from the voluntary intake group showed superior performance (P<0.05) regarding total number born, born alive and litter birth weight. In the second experiment body weights of females on days 7, 14 and 21 of gestation and at weaning differed (P<0.05) among groups. Feed consumption also differed among groups (P<0.05) in the three weeks of gestation. The mean litter birth weight tended (P<0.10) to be... (Complete abstract click electronic access) / Doutor

Orientador: Cezinande de Meira / Banca: Luciano Andrade Silva / Banca: Cássia Maria Barroso Orlandi / Banca: Fernanda da Cruz Landim e Alvarenga / Banca: Sony Dimas Bicudo / Resumo: Um grande fator limitante dos programas de transferência de embrião é o número de receptoras disponíveis durante a estação de monta. A aspiração de folículos ≥25mm promove a formação de uma estrutura lútea capaz de produzir progesterona em concentrações semelhantes ao diestro (>2ng/ml). O objetivo do presente trabalho foi avaliar a formação lútea de folículos ≥25mm aspirados, o útero e a taxa de prenhez destes animais após a inovulação. As éguas foram distribuídas aleatoriamente em três grupos: grupo controle (indução da ovulação com 2500 UI de hCG), grupo aspiração (aspiração do folículo ≥25mm) e hCG+aspiração (aplicação de 2500 UI de hCG 24h antes da aspiração de folículo ≥25mm). Cada égua foi acompanhada ultrassonograficamente para detecção da ovulação, aplicação de 7,5mg de PGF2α cinco dias após a ovulação para indução da luteólise e para determinação do momento da aspiração. O experimento foi dividido em: fase 1 - dosagens de progesterona intrafoliculares e plasmáticas e avaliação ultrassonográfica por modo B e Power Doppler das estruturas lúteas e útero; fase 2 - teste de fertilidade. As concentrações de P4 intrafoliculares foram maiores para os folículos aspirados com diâmetros maiores e a aplicação prévia do hCG aumentou estas nos folículos entre 25-29mm, bem como, a resposta ao tratamento. A aspiração folicular promoveu aumento nas concentrações de P4 plasmáticas a concentrações semelhantes ao diestro (≥2ng/mL), no entanto, as estruturas formadas a partir da aspiração apresentam luteinização mais lenta. O aumento da P4 plasmática foi capaz de promover alterações uterinas semelhantes ao diestro espontâneo e taxa de 43% de prenhez foi atingida com as éguas aspiradas. Conclui-se que a aspiração de folículos ≥25mm pode ser uma opção para... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The major limiting factor of embryo transfer programs is the number of available recipient mares during the breeding season. The aspiration of follicles ≥25 mm leads to the formation of a structure capable of producing progesterone at concentrations similar to diestrus (> 2ng/ml). The present work aims to evaluate the luteal structure from ablation of follicles ≥25mm, uterine conditions and pregnancy rates after embryo transfer. Mares were randomly assigned into three groups: control group (ovulation induction with 2500 IU hCG), ablation group (follicle ≥25mm ablation) and hCG + ablation (2500 IU of hCG injection 24h before ablation of follicle ≥25mm ). Each mare was monitored by ultrasound for detection of ovulation and the determination of the time of ablation. A 7.5 mg dose of PGF2α was administered five days post ovulation to induce luteolysis. The experiment was divided into: phase 1 - intrafollicular plasma progesterone measurement and ultrasound evaluation by B-mode and power Doppler of luteal structures and uterus; phase 2 - fertility test. Concentrations of intrafollicular P4 were greater for larger follicles and hCG was efficient on increasing these levels on follicles 25-29mm, as well as increasing its response to treatment. Follicular ablation induced an increase in P4 plasma concentrations to values similar to diestrus (≥ 2ng/ml), however, the formed structures showed a delay on the luteinisation process. The increase in plasma P4 was able also to promote changes in the uterus that were similar to diestrous and these mares showed a 43% pregnancy rate. In conclusion, ablation of follicles ≥25mm can be an option for programs with limited number of recipients, however, more studies are still needed to explain ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Frederico Ozanam Papa / Banca: Rubens Paes de Arruda / Banca: João Carlos Pinheiro Ferreira / Resumo: Dentre as biotecnologias de reprodução que visam acelerar os ganhos genéticos e econômicos dos rebanhos, a congelação de sêmen desponta como uma das principais. O sêmen congelado bovino é utilizado em larga escala há anos e não houve grandes evoluções nas técnicas de congelação visando minimizar os efeitos deletérios do processo nos espermatozóides, colaborando ativamente para o incremento da fertilidade dos rebanhos. Neste trabalho propôs inovações nas técnicas de congelação utilizando uma nova formulação de meio diluente, a introdução da centrifugação para a remoção do plasma seminal pré-congelação e a determinação do tempo ideal de estabilização do sêmen. Foram realizados três experimentos; o primeiro testou o efeito de três diferentes meios diluentes, com ou sem a remoção do plasma seminal, no ejaculado de 40 touros diferentes. Nos resultados exibidos o diluente M20 foi superior (p<0,01) aos demais diluentes na maioria das variáveis pesquisadas a remoção do plasma seminal melhorou (p<0,01) os índices de congelabilidade do sêmen. Outro experimento foi a verificação dos tempos de 60, 120, 180 e 240 min. de refrigeração do sêmen a 5ºC. O tempo de 180 minutos foi o considerado o melhor para a congelabilidade após a verificação dos resultados. No teste de fertilidade foram inseminados 418 vacas e o grupo que foi inseminado com sêmen congelado com M20 sem plasma seminal obteve uma tendência de superioridade (0,05<p<0,10) aos demais grupos. Com os resultados dos experimentos concluiu-se que as inovações propostas por este estudo incrementam os índices de congelabilidade do sêmen bovino / Abstract: Semen freezing is considered as one of the main reproduction biotechnologies that aim to accelerate genetic and economical gains of herds. Frozen bovine semen has been used in large scale for years and there were not great evolutions in freezing techniques to minimize the deleterious effects of the process in spermatozoa, actively contributing for the increase in herds fertility. Innovations in freezing techniques were proposed in this work by using a new formulation of the extenders, introducing centrifugation for the removal of prefreezing seminal plasma and determining the appropriate time for semen cooled. Three experiments were carried out: 1) the effect of three different extenders was tested, with or without the removal of seminal plasma, in the ejaculate of 40 different bulls; results showed that the extender M20 was superior (p<0,01) in relation to the other extenders in most of variables studied. The removal of the seminal plasma improved (P<0,01) semen freezability indexes. 2) verification of 60, 120, 180 and 240 min. times for semen cooling at 5ºC; after results, the time of 180 minutes was considered the most appropriate for freezability. 3) fertility test: 418 cows were inseminated and the group with frozen semen with M20 without seminal plasma obtained a superiority tendency (0,05<p<0,10) in relation to the other groups. The results of the experiments concluded that the innovations proposed in this work increase freezability indexes of bovine semen / Mestre

Orientadora: Laura Satiko Okada Nakaghi / Coorientador: Sergio Ricardo Batlouni / Banca: Gustavo Manoel Somoza / Banca: Heid Sueli Leme dos Santos / Banca: Rafael Henrique Nóbrega / Banca: Sergio Fonseca Zaiden / Resumo: O Pseudoplatystoma fasciatum é uma espécie nobre que apresenta carne sem espinhos, sabor delicado e textura firme. Nesta espécie, as fêmeas atingem maior tamanho e apresentam melhores taxas de crescimento que os machos. Assim, o objetivo desde trabalho foi descrever o processo de desenvolvimento e diferenciação gonadal do P. fasciatum e avaliar a possibilidade da feminilização com uso do hormônio 17β-estradiol. Para a descrição da diferenciação e desenvolvimento gonadal, os juvenis de P. fasciatum foram obtidos por meio de reprodução induzida de reprodutores mantidos em diversas estações de reprodução e pisciculturas de reprodução induzida (Centro de Aquicultura da UNESP "CAUNESP", piscicultura Andrade e piscicultura Mar & Terra); já para o tratamento hormonal, os juvenis foram obtidos e mantidos na piscicultura Mar & Terra. As coletas para a diferenciação e desenvolvimento gonadal foram realizadas em tempos pré-estabelecidos, iniciando a partir de 39 dias pós-fertilização (dpf) e até completarem 240 dpf. Para o tratamento hormonal os juvenis com 39dpf receberam ração incorporada com 17β-estradiol e alimentados diariamente até a saciedade. Foi utilizado um grupo controle e três grupos tratados (50, 100, 150mg/Kg de ração comercial extrusada com 40% de proteína bruta). As coletas iniciaram com 39 dpf e depois periodicamente nos seguintes tempos 45, 57, 70, 100 dpf. Aos 39 dpf observaram-se pares de gônadas indiferenciadas como estruturas simples, localizadas dorsalmente ao intestino e ventralmente ao rim. Entre 39 e 45 dpf observamos pela primeira vez evidências histológicas no início de diferenciação em gônada feminina e gônada masculina. Com 60 a 70 dpf as diferenças externas e internas das gônadas femininas e masculinas permitiam a identificação morfológica de precursores de ovários e testículos, porém, tanto a gônada feminina quanto a masculina ... / Abstract: Pseudoplatystoma fasciatum is an important species, with unspined meat, delicate flavor and firm texture. Females of this species reach larger sizes and have better growth rates than males. The objective of this study was to describe the gonad development and differentiation of P. fasciatum and evaluate the potential feminization effect of the 17β - estradiol hormone. For development and gonadal differentiation description, P. fasciatum juveniles were obtained through the hormonal induction of various breeders maintained in different reproductive stations and fish farms of inducted reproduction (Centro de Aquicultura Unesp "CAUNESP", Andrade and Mar&Terra piscicultures); for the hormonal treatment juveniles were obtained and maintained in Mar&Terra pisciculture. Samples for development and gonadal differentiation were performed on pre-set points starting from 39 days post-fertilization (dpf) until complete 240 dpf. For the hormonal treatment juveniles (39 dpf) were fed daily to satiation with artificial food incorporated with 17β-estradiol. We used a control group and three treated groups (50, 100, 150mg/kg of commercial extruded feed containing 40% crude protein). Sampling started at 39 (dpf) and periodically at the following times 45, 57, 70 and 100 dpf. At 39 dpf gonads were undifferentiated observed as simple structures, located ventrally to intestine and dorsally to kidney. From 39 to 45 dpf we observed the first histological clues of female and male gonad differentiation. At 60-70 dpf the external and internal differences of male and female gonads enabled the morphological identification of ovaries and testes precursors, however, both the male and the female gonad consisted mainly of somatic cells and rare germ cells of the undifferentiated type, referred as oogonia for female gonads and spermatogonia for male gonads. From 100 to 113 dpf, gonads from both sexes increased in size ... / Doutor

Orientador: Frederico Ozanam Papa / Banca: André Maciel Crespilho / Banca: Rubens Paes de Arruda / Banca: José Antonio Dell'aqua Junior / Banca: Fabíola Soares Zahn / Resumo: Apesar dos benefícios proporcionados pelo plasma seminal durante a cobertura, quando biotecnologias são utilizadas, como a inseminação artificial, sua função é questionável, visto que trabalhos utilizando espermatozoides da cauda do epidídimo acrescido ou não do plasma seminal não apresentaram diferença nas taxas de concepção. Além disso, estudos relataram efeito deletério das secreções das glândulas anexas sobre a viabilidade espermática e taxa de concepção, principalmente em garanhões com baixa qualidade seminal. Neste sentido, o objetivo do presente estudo é: 1) comparar os parâmetros de cinética espermática, viabilidade estrutural e fertilidade dos espermatozoides recuperados do ejaculado e da cauda do epidídimo de garanhões subférteis; 2) avaliar diferenças na composição eletrolítica do plasma seminal de animais com alta e baixa fertilidade. 3) comparar o efeito da adição de plasma seminal de garanhões de alta e baixa fertilidade sobre a congelabilidade e viabilidade dos espermatozoides do ejaculado e da cauda do epidídimo de garanhões subférteis. As avaliações das amostras seminais consistiram na análise computadorizada das características da motilidade (CASA, Thorne Research - HTM IVOS) e nas análises de citometria de fluxo da integridade da membrana plasmática, da integridade acrossomal, da peroxidação das membranas espermáticas, da fragmentação do DNA, da capacitação espermática, da translocação de fosfatidilserina da membrana e da ativação de caspase. Os espermatozoides do epidídimo após descongelação apresentaram superioridade nos parâmetros de cinética e viabilidade espermática, além de melhor fertilidade, demonstrando que estes espermatozoides são mais resistentes ao processo de congelação quando comparado aos espermatozoides do ejaculado. O plasma seminal de garanhões subférteis apresentou maiores concentrações de sódio ... / Abstract: Despite the benefits provided by seminal plasma during natural cover when biotechnology are used as artificial insemination, its function is questionable, since studies using spermatozoa from cauda epididymis with or without the addition of seminal plasma showed no difference in conception rates. Furthermore, studies have reported deleterious effects of secretions from accessory glands on sperm viability and conception rate, especially in stallions with poor semen quality. Thus the aims of this study were: 1) compare the kinetic parameters, structural viability and fertility of sperm recovered from ejaculate and cauda epididymis of subfertile stallions. 2) evaluate differences in electrolyte composition in the seminal plasma of animals with high and low fertility. 3) compare the effect of seminal plasma addition from stallions with high and low fertility on freezability and viability of sperm from the ejaculate and cauda epididymis of subfertile stallions. The assessment of each samples was determined by computer-assisted sperm analyses of motility (CASA, Thorne Research - HTM IVOS) and flow cytometry analyses of plasma membrane integrity, acrosome integrity, peroxidation of sperm membranes, DNA fragmentation index, degree of protein tyrosine phosphorylation in sperm surface and caspase activity. The epididymal sperm after thawing showed superiority in kinetic parameters and sperm viability, as well as better fertility, demonstrating that these spermatozoa are more resistant to freezing process when compared to sperm from the ejaculate. The seminal plasma of subfertile stallions has higher sodium concentrations in the seminal plasma than fertile stallions, what makes this finding a possible way to explain the deleterious effect of seminal plasma in these animals. Moreover, it was found that this deleterious effect is dose-dependent since the addition of 20% of seminal plasma from fertile and ... / Doutor

Orientador: Rafael Herrera Alvarez / Banca: Cesar Roberto Esper / Banca: Pietro Sampaio Baruselli / Resumo: Fatores como idade, dose e tipo de hormônio utilizado na superovulação, início do tratamento de superovulação, uso de progestágeno, estação do ano, propriedade e superovulação repetida foram relacionados com a produção de embriões de vacas Nelore. Os dados analisados envolveram 884 tentativas de superovulação em 318 doadoras com idade entre dois e 21 anos, manejadas em seis propriedades localizadas no Estado de Mato Grosso do Sul. Os dados foram analisados utilizando o GLM do SAS. Dos fatores analisados, somente a idade das doadoras e a propriedade afetaram a produção e a qualidade dos embriões. Vacas senis (>14 anos) produziram, em média, 5,0 l 0,2 e 3,0 l 0,1 embriões (total e viáveis, respectivamente) a menos que vacas jovens (p<0,001), enquanto que um manejo diferenciado aumentou em aproximadamente 2,0 l 0,4 o número de embriões viáveis. O tipo de hormônio (Plusetä, Super-Ovä, Ovagenä, FSH-Pä) ou dosagem (50, 75 ou 100%) utilizada na superovulação não influenciou a produção de embriões (p>0,05). Não houve diferença da resposta quando o tratamento de superovulação foi iniciado entre os dias 8 a 12 do ciclo (p>0,05). A superovulação associada a um implante com progestágenos, iniciado a qualquer momento do ciclo, foi tão eficiente (p>0,05) quanto o tratamento convencional iniciado no meio do ciclo. Finalmente, constatou-se que a superovulação repetida por 6 ou mais vez não afetou a produção ou qualidade dos embriões. Concluiu-se que o manejo e, a idade da doadora são fatores que devem ser considerados ao implementar um programa de transferência de embriões na raça Nelore, por limitar a produção de embriões nessa sub-espécie. / Abstract: Factors such as age, dose and kind of superovulatory hormone, starting point of the superovulatory treatment, use of progestagens, season, property and repetition of superovulatory treatments were related to embryo production in Nelore cows. Analysed data comprised 884 superovulation attempts on 318 donor cows, with their ages ranging between two and 21 years, managed by six different property owners, in Mato Grosso do Sul State, Brazil. Data were analysed using the General Linear Model of SAS. Among all the studied factors, only the age of donor cows and the property affected embryo production and quality. Older cows (>14 years old) produced a mean of five and three embryos (total and viable, respectively) less than younger ones (p < 0,001), and a better management (property) was responsible for a mean of two more viable embryos. The kind of superovulatory hormone (PlusetTM, Super-OvTM, OvagenTM, FSH-PTM) and its dose (50, 75 or 100%), did not affect embryo production (p > 0,05). Superovulatory response wasnþt different when treatments started on day 8, 9, 10, 11 or 12 of the cycle (p > 0,05), nor when it began with a progestagen implant at any moment of the cycle, as compared to conventional treatments, beginning at the middle of the cycle (p > 0,05). Finally, it was stated that repetition of six or more superovulatory treatments, didn't affect embryo production or quality. It is concluded that management, and specially age of the donors are factors to be taken into account when an embryo transfer program is to be performed in Nelore females, because they affect superovulatory performance in this breed of cows. / Mestre

Orientador: José Buratini Júnior / Banca: Ciro Morais Barros / Banca: Marcelo Fábio Gouveia Nogueira / Resumo: O desenvolvimento da competência oocitária ocorre de forma gradual durante a foliculogênese e é dependente da interação do oócito com as células do cumulus via fatores parácrinos. O KL é expresso pelas células do cumulus e estimula a maturação nuclear do oócito em roedores, mas suas funções no complexo cumulus-oócito (CCO) bovino não são conhecidas. Neste trabalho, avaliou-se o padrão de expressão do KL, os efeitos do KL sobre a progressão da meiose e a expansão do cumulus, bem como a regulação da expressão do KL por fatores secretados pelo oócito (FSOs; BMP15, FGF8, FGF10, FGF16 e FGF17) durante a maturação in vitro (MIV) de CCOs bovinos. Adicionalmente, os efeitos do KL sobre a expressão de BMP15, GDF9, FGF16 e c-KIT foi avaliada. As isoformas do KL (KL1 e KL2) apresentaram padrões de expressão semelhantes nas células do cumulus ao longo da MIV, com pico de expressão às 12 horas do cultivo. A adição de KL ao cultivo aumentou a porcentagem de oócitos em meiose II e diminuiu a de oócitos em meiose I ao final da MIV, mas não afetou a expansão do cumulus. O FGF8 aumentou a expressão dos RNAm do KL1 e do KL2, enquanto a BMP15 estimulou apenas a expressão do RNAm do KL1. Distintamente, a dose máxima do FGF10 diminuiu a expressão do KL2 às 22 horas do cultivo em estudo dose-resposta, embora o mesmo não tenha sido observado quando uma dose menor, porém efetiva em estimular a expansão do cumulus, foi testada ao longo da MIV (4, 12 e 22 horas). O tratamento com FGF10 e BMP15 associados aumentou a expressão do KL1 às 12 horas do cultivo em relação ao controle e aos fatores de crescimento sozinhos, sugerindo cooperação entre eles na regulação da expressão do KL. A adição de KL ao meio de cultivo não alterou a expressão dos FSOs. Em conjunto, os resultados deste estudo sugerem o... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The development of oocyte competence occurs gradually during folliculogenesis and is dependent on the interaction of the oocyte with cumulus cells via paracrine factors. The KL is expressed by cumulus cells and stimulates oocyte nuclear maturation in rodents, but its functions in cumulus-oocyte complex (COC) cattle are unknown. In this study, we evaluated the expression pattern of KL, the effects of KL on the progression of meiosis and cumulus expansion and regulation of KL expression by factors secreted by the oocyte (OSF; BMP15, FGF8, FGF10, FGF16 and FGF17) during in vitro maturation (IVM) of bovine COCs. Additionally, the effect of KL on the expression of BMP15, GDF9, FGF16 and c-KIT was evaluated. Isoforms of KL (KL1 and KL2) showed similar expression patterns in cumulus cells along the MIV, with higher expression at 12 hours of cultivation. The addition of KL increased the percentage of oocytes in meiosis II and decreased oocyte meiosis I in the end of IVM, but did not affect cumulus expansion. The FGF8 increased expression of KL1 and KL2 mRNA, while only BMP15 stimulated mRNA expression KL1. Distinctly, the maximum dose of FGF10 decreased expression of KL2 at 22 hours of cultivation in dose-response study, although the same was not observed when a lower dose, but effective to stimulate cumulus expansion was tested along MIV (4, 12 and 22 hours). Treatment with FGF10 and BMP15 associated with increased expression of KL1 at 12 hours of culture in relation to the control and growth factors alone, suggesting cooperation between them in the regulation of expression of the KL. The addition of KL to the culture medium did not alter the expression of the FSOs. Taken together, our results suggest the involvement of KL in controlling bovine oocyte nuclear maturation and expression of KL in bovine cumulus cells is... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Ciro Moraes Barros / Banca: José Buratini Junior / Banca: Gisele Zocardi Mingotti / Resumo: O fator de crescimento fibroblástico (FGF10) atua de forma parácrina no complexo cumulus-oócito, aumentando a expressão de genes relacionados à expansão das células do cumulus e à competência oócitária. Objetivou-se com o presente estudo testar se a adição do FGF10 ao meio de maturação melhora a maturação, diminui as taxas de oócitos apoptóticos e influencia na produção de embriões in vitro e na expressão de genes relacionados à competência e implantação embrionárias (COX2, CDX2 e PLAC8). Em todos os experimentos, oócitos foram obtidos de abatedouro, coletados de vacas adultas e maturados por 22 h em meio TCM 199 suplementado com: 2.5 ng/mL FGF10, 10 ng/mL FGF10, 50 ng/mL FGF10 ou na ausência de FGF10 (grupo controle). No Experimento 1, depois da maturação, os oócitos foram fixados e corados com TUNEL para determinar a porcentagem de oócitos apoptóticos e posteriormente com Hoechst-33342 para avaliação dos diferentes estágios da meiose (metáfase 1, metáfase 2 ou metáfase 2 com extrusão do primeiro corpúsculo polar). No Experimento 2, os oócitos foram fertilizados e cultivados até o estágio de blastocisto inicial. No experimento 3 avaliou-se o efeito da suplementação do FGF10 ao meio de maturação in vitro sobre a expressão dos genes COX2, CDX2 e PLAC8 em embriões bovinos. No experimento 1, os resultados demonstraram que a dose de 2,5 ng/mL FGF10 aumentou a porcentagem de oócitos com extrusão do primeiro corpúsculo polar (36%) quando comparado as doses de 10 ng/mL FGF10 (13%), 50 ng/mL FGF10 (12%) e grupo controle (19%; p≤0.05). Com relação ao número de oócitos apoptóticos, as maiores doses de FGF10 apresentaram menor quantidade de oócitos TUNEL-positivos (10 ng/mL and 50 ng/mL FGF10, 5% e 6%, respectivamente) quando comparados a menor... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Not available / Mestre

Orientador: José Maurício Barbanti Duarte / Banca: Juan Carranza Almansa / Banca: Ricardo José Garcia Pereira / Resumo: O veado-catingueiro (Mazama gouazoubira) e o veado-roxo (Mazama nemorivaga) possuem características morfológicas semelhantes e distribuição parapátrica, que colocaram em dúvida a classificação taxonômica de M. nemorivaga como espécie válida durante muitos anos. Estudos citogenéticos e morfológicos sugerem M. nemorivaga como espécie válida, porém, na maioria dos conceitos de espécie aceitos atualmente, está implícita a ideia de que duas espécies devem ser não apenas geneticamente distintas, mas reprodutivamente isoladas. Este estudo avaliou a presença de isolamento reprodutivo pós-zigótico entre M. gouazoubira e M. nemorivaga como forma de elucidar a classificação taxonômica deste último. Para tal, foram avaliadas as características seminais, histologia testicular e perfis de metabólitos fecais da testosterona de seis animais, frutos de cruzamentos intra e interespecíficos sendo três M. gouazoubira puros (PG), um M. nemorivaga puro (PN) e dois híbridos (H). Ao longo do estudo material seminal e testicular de mais dois animais puros, um M. gouazoubira e um M. nemorivaga foram acrescentados ás análises. Os resultados mostram que cinco dos seis animais puros analisados (PG1, PG2, PG4, PN1 e PN2) tiveram bom desempenho na análise reprodutiva, enquadrando-se nos parâmetros observados para suas respectivas espécies. O híbrido H1 provou-se completamente estéril enquanto que H2 apresentou severa subfertilidade, parâmetros relacionados diretamente com uma baixa secreção de testosterona e estrutura testicular hipoplásica. Acredita-se que a diferença de níveis reprodutivos entre híbridos esteja diretamente relacionada com o sexo de seus parentais. O animal PG3 apresentou péssimo potencial reprodutivo, provavelmente ligado a um defeito congênito não elucidado. Com base nos dados obtidos, é possível sugerir a existência de isolamento reprodutivo entre M. gouazoubira e M. nemorivaga, reforçando a... / Abstract: The brown brocket deer (Mazamagouazoubira) and the amazonian brown brocket deer (Mazamanemorivaga) have similar morphological features and parapatric distribution, which questioned thetaxonomic classification of M. nemorivagaas a species for many years. Cytogenetic and morphometric studies suggest M. nemorivaga as a valid species but in most species concepts currently accepted is implicit the idea that two species should not only be genetically distinct, but reproductively isolated. This study evaluated the presence of post zygotic reproductive isolation between M. gouazoubira and M. nemorivaga to elucidate the taxonomic classification of the latter. To this end, seminal characteristics, testicular histology and profiles of testosterone of six animals, intra and interespecificbreeding products were evaluated: three pure M. gouazoubira (PG), a pure M. nemorivaga (PN) and two hybrids (H). Throughout the study testicular and seminal material of two pure animals (one M. gouazoubira and one M. nemorivaga) were added in the analyzes. The results show that five of the six purebreds analyzed (PG1, PG2, PG4, PN1 and PN2) performed well in reproductive analysis, fitting the parameters observed for their respective species. The hybrid H1 was completely sterile while H2 showed severe subfertility, parameters directlyrelated with a low secretion of testosterone and testicular hypoplasia. It is believed that the difference of reproductive parameters between the hybridswas directly related to the sex of their parents. The PG3 animal showed bad reproductive potential, probably linked to a birth defect not elucidated. Based on these data it is possible to suggest the existence of reproductive isolation between M. gouazoubira and M. nemorivaga reinforcing the need for revision of these groups to define their taxonomic position / Mestre

Orientador: Classius de Oliveira / Banca: Lia Raquel de Souza Santos / Banca: Fernanda Cristina Alcantara dos Santos / Banca: Alexandre Ninhaus Silveira / Banca: Selma Maria Almeida Santos / Resumo: A reprodução pode ser descrita como o conjunto de atributos fisiológ icos, morfológicos e comportamentais que permitem o sucesso de uma espécie através da máxima descendência sob condições ambientais específicas. Em anfíbios, além de sujeito a um controle hormonal, e considerando o aporte genético, o ciclo reprodutivo é também influenciado por fatores ambientais que determinam o ciclo ga metogênico ao longo de um ano. O presente trabalho teve como objetivo estimar a di versidade genética em duas populações de P. cuvieri pertencentes aos biomas de Mata Atlânti ca e do Cerrado com o marcador molecular ISSR ( Inter Simple Sequence Repeats ). Além disso, foi caracte rizado o ciclo reprodutivo destas populações, relacionando as variações morfológicas gonadais com os fatores climáticos precipitação, temperatura, umidade relativa do ar e velocidade do vento, através de uma Análise de Correspondência Canônica, bem como relacionar a quantidade de pigmentos presente nos testículos com os períodos pré-reprodutivo, reprodutivo e regenerativo através de ANOVA. Ta mbém se analisou em indivíduos de Eupemphix nattereri a relação entre a espermiogênese e a qua ntidade de pigmentação testicular. As populações de P. cuvieri pertencentes aos dois biomas re velaram índice de diferenciação genética (FST ) > 0.288, o que mostra que es tas duas populações são altamente diferenciadas geneticamente. Foram caracter izados 7 tipos celu lares representando o epitélio germinativo. A variância total ao longo do ciclo reprodutivo foi de 23 %, com os dois primeiros eixos responsáveis, respectivamente, por 68,7% e 10,2% da variância total acumulada na média ponderada dos tipos celula res com relação às 4 variáveis ambientais analisadas. O teste de permutação de Monte Carlo indicou que os tipos celulares e a... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Reproduction can be described as the set of physiological, mo rphological, and behavioural attributes that allow for the success of a species through maximum offspring under specific environmental conditions. In amphibians, as well as being under hormonal control, and in view of their genetic constitution, the reproductive cycle is also influenced by environmental factors that determine the ga metogenetic cycle throughout the year. The aim of this study was to characterize the reproductive cycle of Physalaemus cuvieri in populations from the Mata Atlântica region and the Ce rrado region, comparing the morphological gonad variations to the climatic factors of precipita tion, temperature, relative humidity and wind speed, through a Ca nonical Correspondence Analysis, as well as comparing the quantity of pigments presen t in the testis with the pre-reproductive, reproductive and regenerative periods usi ng the ANOVA, and estimating the genetic diversity between the populations of the two biomes with genetic markers ISSR ( Inter Simple Sequence Repeats). The relationship between spermatogenesis and the quantity of testicular pigmentation in individuals of Eupemphix nattereri has also been analyzed... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor