Orientador: Sergio Ricardo Batlouni / Banca: Carlos Alberto Vicentini / Banca: Laura Satiko Okada Nakaghi / Banca: Luis David Solis Murgas / Banca: Maria Inês Borella / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes indutores hormonais na evolução do processo de maturação final e ovulação em Leporinus macrocephalus. Os animais (n = 42) foram submetidos à reprodução induzida através de injeções intramusculares dos seguintes hormônios: extrato bruto de hipófise de carpa (EBHC) aplicado em duas doses (0,5 e 5,0 mg kg-1 com intervalo de 12 h entre as aplicações); hormônio liberador de gonadotrofina na forma líquida (mGnRHa - L) aplicado em dose única (0,5 mg kg-1); hormônio liberador de gonadotrofina na forma sólida (mGnRHa - S) aplicado em dose única (0,5 mg kg-1) e gonadotrofina coriônica humana (hCG) aplicado em duas doses (5 e 10 UI g-1 com intervalo de 12 h entre as aplicações). A administração de EBHC promoveu altas taxas de fertilização (63,57%) e eclosão (59,07%), porém apenas 71,4% das fêmeas ovularam. Por outro lado, o mGnRHa - S promoveu elevado percentual de desova (100%), taxas de fertilização (93,75%) e eclosão (89,15%). O mGnRHa - L apesar de ter causado 100% de ovulação, proporcionou baixas taxas de fertilização (6,25%) e eclosão (0%). Já o animais induzidos com hCG não ovularam (0%). A indução a desova com mGnRHa - L e hCG causou uma rápida elevação na concentração plasmática dos esteroides gonadais (E2 e 17α - OHP) após a primeira dose. Por outro lado, nos tratamentos EBHC e mGnRH - S observamos um aumento progressivo e regular nos níveis dos esteroides. O EBHC, permaneceu com um percentual elevado de ovócitos maduros com quebra da vesícula germinativa (GVBD) remanescente nos ovários (22,01%) e que não atingiram a ovulação. Por outro lado, a frequência de folículos pós - ovulatórios (FPO) nos tratamentos mGnRHa - L (26,69%) e mGnRHa - S (52,89%) aumentou após uma única dose hormonal. Assim, concluímos que a primeira dose de EBHC é responsável pela maturação .... / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of different hormonal inductors in the progress of final maturation and ovulation in Leporinus macrocephalus. The animal ( n = 42) were subjected to induced reproduction through intramuscular injections of following hormones: carp pituitary extract (CPE) injected in two doses (0,5 and 5,0 mg kg-1 with a 12 h interval between the doses); gonadotropin releasing hormone in liquid form (mGnRHa - L) injected with a single dose; gonadotropin releasing hormone in solid form (mGnRHa - S) injected with a single dose and human chorionic gonadotropin (hCG) injected in two doses (5 and 10 UI g-1 with a 12 h interval between the doses). The administration of CPE promoted high fertilization (63.57%) and hatching rate (59.07%), but only 71.4% of the females ovulated. On the other hand, mGnRHa - S promoted high spawning percentage (100%), fertilization (93.75%), and hatching (89.15%). The mGnRHa - L although it caused a 100% ovulation, resulted low fertilization (6.25%), and hatching rates (0%). The induced with hCG cannot cause the ovulation (0%). Induction spawning with mGnRHa - L and hCG caused a rapid increase in plasma concentrations of gonadal steroids (E2 and 17α - OHP) after the first dose. However, in animals induced with CPE and mGnRH - S observed a progressive increase and steady in steroid levels. The treatment CPE, despite have promoted high rates of fertilization and hatching, remained with a high percentage of mature oocytes with germinal vesicle breakdown (GVBD) remaining in the ovaries (22.01%) and who did not achieve ovulation. On the other hand, there was an increase in the frequency of follicles post - ovulatory (FPO) in the treatment mGnRHa - L (26.69%) and mGnRHa - S (52.89%) after administration of a single dose hormonal. Thus, we conclude that the first dose CPE is responsible for the final maturation and second dose by the ovulation ... / Doutor

Orientador: Luiz Ernandes Kozicki / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias / Resumo: Com o objetivo de estudar os efeitos do gossipol (CsoHaAO na gestação de ratas (Rattus norvegícus) e os consequentes efeitos nos parâmetros morfometricos testiculares de seus filhotes, 40 ratas com idade media de 120 dias e peso variando entre 200 e 250 gramas, oriundas do Bioterio Central da Universidade Federal do Paraná, foram utilizadas neste estudo. Os animais foram acompanhados diariamente ate a confirmação da cobertura através de esfregaço de lavado vaginal (esfregaço positivo - presença de espermatozoides) e separados em quatro grupos contendo dez animais em cada (G I - controle, G II - gossipol 20 mg.kg'1, G III - gossipol 40 mg.kg'1, G IV - gossipol 80 mg.kg'1) respectivamente de acordo com a concentração de gossipol presente na suspensão utilizada (somente o veiculo, gossipol 20 mg.mL'1, gossipol 40 mg.mL'1 e gossipol 80 mg.mL'1). O gossipol acido acético (GAA 97,8 % de pureza) diluído em óleo vegetal de canola (veiculo) foi administrado oralmente para todos os animais no volume de 1 mL de suspensão para cada quilo de peso vivo. A administração da droga iniciou-se no 5o dia de gestação e estendeu-se ate o 20 °. O peso das ratas foi aferido diariamente do dia da cobertura ate o dia do parto a fim de se observar possíveis efeitos tóxicos durante a gestação. No desmame (21° dia pós-parto) todas as fêmeas foram sacrificadas para a observação dos pontos de implantação uterinos, comparando-se o numero de fetos nascidos com o numero de fetos gestados. Nos filhotes machos avaliou-se o peso individual no dia do desmame, índice gonadossomático e histologia testicular (porcentagem de túbulos luminados, diâmetro e proporção volumétrica dos túbulos seminíferos). Durante o experimento sete ratas do grupo G IV e uma do G III morreram, alem de abortos e sinais de canibalismo na parturição. As proporções volumétricas tubulares não apresentaram diferença estatística entre os grupos (G I 90,38 % } 0,81; G II 90,24 % } 1,39; G III 90,70 % } 1,46). Os demais resultados obtidos estão expostos na tabela abaixo. Em função desses resultados, observou-se que o gossipol (GAA) causou intoxicação grave nos animais que receberam maior dosagem, bem como de maneira dose-dependente interferiu no ganho de peso das ratas durante a gestação. Contudo nao interferiu no processo de manutenção da gestação e no numero de filhotes nascidos quando administrado entre o 5o e 20 0 dia de gestação. Os filhotes machos filhos de ratas tratadas apresentaram dose-dependente, comparados aos controles, menor diâmetro tubular e menor quantidade de túbulos seminíferos com lúmen aos 21 dias de vida. Em virtude dos filhotes serem muito jovens, novos estudos deverão ser realizados para constatar se as alterações permanecem ao longo do tempo ou são reversíveis, bem como, para elucidar os mecanismos pelos quais estas alterações ocorrem.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-31Bitstream added on 2014-06-13T20:58:04Z : No. of bitstreams: 1 stradiotto_mm_me_botfmvz.pdf: 530763 bytes, checksum: e4530e5d16068efeff8131c5fdeac6fc (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / No Brasil, muito pouco se conhece sobre o leite ovino, pois a maioria das raças brasileiras são especializadas para a produção de carne ou lã, mas é possível encontrar animais com aptidão leiteira. O presente trabalho teve o objetivo de avaliar o efeito da gordura protegida na composição do leite, duração do anestro pós-parto, resposta às infecções parasitárias e desempenho dos cordeiros, em ovelhas da raça Bergamácia. Utilizou-se 77 ovelhas distribuídas em 2 grupos por ordem de parição e idade, em dois tratamentos: dieta Controle (C): silagem de milho e concentrado; e dieta com Gordura Protegida (GP): a mesma de C e adição de gordura ruminalmente protegida (35 g/ovelha/dia) ao concentrado. As dietas foram isoenergéticas e isoprotéicas, contendo 70% NDT e 16% PB com base na matéria seca. Os cordeiros permaneceram com suas mães até 45 dias de idade, quando foram desmamados. As ovelhas, 48 horas pós-parto, foram ordenhadas mecanicamente uma vez ao dia, às 7h 00, com produção de leite mensurada diariamente pelo período de 60 dias. Amostras de leite foram coletadas semanalmente para análise da composição centesimal e teor de caseína. O tratamento GP apresentou maior produção de leite média diária após a desmama (0,531 vs 0,489 kg/cab/dia), entretanto, a produção de todo o período experimental não foi diferente entre os tratamentos (0,453 vs 0,468 kg/cab/dia, para C e GP, respectivamente). Não foram observadas diferenças entre tratamentos para os teores de gordura do leite até a 6ª semana de lactação, sendo verificadas apenas após a desmama. Ambos teores de alfa e beta caseínas apresentaram diferenças entre tratamentos (30,00 vs 18,50 Kda para alfa caseína e 32,48 vs 25,65 Kda para beta caseína, para os tratamentos C e GP respectivamente). O sistema de produção utilizado provavelmente foi uma variável importante nos resultados... / Little is known about sheep milk in Brazil because the majority of Brazilian breeds are for meat production or wool, but is possible to find some type milk animals. The present work aimed to evaluated the effect of protected fat on milk composition, time to estrus regress after lambing, gastrointestinal nematodes infections and lamb performance of Bergamasca ewes. It were used 77 ewes allocated in 2 homogenous groups by parity and age. Diet control (C): corn silage and concentrate; diet with protected fat (GP): same of C and protected fat added (35 g/ewe/day) to the concentrate. Diets were isoenergetic and isonitrogenous with 16% of CP and 70% of TDN on dry matter basis. In both groups, lambs were kept with their mothers in pasture during the day, being separated at night. After morning milking, lambs were returned to their mothers, being weaned at 45 days of age. Ewes from both groups were mechanically milked for 60 days. Treatment GP presented higher daily average milk productionafter lambs weaning (0.5351 vs 0.489 kg/head/d), horewer, average milk production of the whole period was not different (0.453 vs 0.468 kg/head/d for C and GP, respectively). There was no found difference between treatments for fat content milk until 6th week of lactation. Alfa e beta casein content has presented differences between treatment (30,00 vs 18,50 Kda for alfa casein and 32,48 vs 25,65 Kda for beta casein, for C e GP respectively). The production system used probably was an important variable in that results due to lamb presence during a moment in the day induced milk retention during ewe machine milking.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-12-18Bitstream added on 2014-06-13T18:50:00Z : No. of bitstreams: 1 massura_tym_me_sjrp.pdf: 1008547 bytes, checksum: b980a61f93ce006e59aec73089934f7c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Atualmente são conhecidos três grupos de anfíbios: as salamandras (Caudata), as cobras-cegas (Gymnophiona) e os anuros (Anura). O Brasil é o país com a maior diversidade de anfíbios do planeta, com mais de 850 espécies de anuros, das quais 65% são endêmicas. Para anuros há muitos trabalhos que relatam o comportamento reprodutivo, mas poucos foram desenvolvidos para descrever a biologia reprodutiva com ênfase em análise morfológica testicular. Neste estudo, o objetivo geral foi descrever a morfologia testicular de Dendropsophus minutus e Dendropsophus nanus e, relacionar dados da análise biométrica das gônadas às condições climáticas do ano, verificando assim se há variação destas estruturas. Os animais foram coletados mensalmente entre maio de 2006 e abril de 2007, por meio de excursões noturnas no Município de Palestina–SP, Brasil. Dados de natureza biométrica, como comprimento (cm) e peso (g) total do indivíduo, comprimento (mm) e peso (g) total das gônadas; peso (g) do fígado, estômago e intestino, foram obtidos e correlacionados entre si e com as variáveis climáticas (temperatura do ar, pluviosidade, umidade relativa do ar e fotoperíodo). Os testículos foram fixados em solução de Bouin e posteriormente incluídos em historesina de acordo com protocolo de técnicas histológicas. Testes estatísticos foram empregados para análise e interpretação dos resultados. Os testículos das espécies em estudo são pequenos, esbranquiçados, de forma ovalada e se encontram na cavidade abdominal, localizados na região cranial dos rins. Estatisticamente não houve variação intra-individual no comprimento e peso dos animais como também não ocorreram variações na biometria testicular, corpos adiposos, fígado, estômago 8 e intestino. Todos estes parâmetros apresentaram-se correlacionados aos fatores ambientais. Em relação às células... / Currently three groups of amphibians are known: the salamanders, the chargeblind and the anurans. Brazil is the country with the biggest diversity of amphibians of the planet, with more than 850 species of anurans, of which 65% are endemic. There are many studies related to anurans reproductive behavior, but few of them had been developed to describe reproductive biology with emphasis in morphologic analysis of the testis. In this study the general objective was to describe the testicular morphology of Dendropsophus minutus and Dendropsophus nanus and to relate given of the biometric analysis of the gonads ones to the climatic conditions of the year, thus verifying has some variation of these structures. The animals had been collected monthly between May 2006 and April 2007, by means of nocturnal excursions in the City of Palestine-SP, Brazil. Data of biometric nature, as length (cm) and total weight (g) of the individual, length (mm) and total weight (g) of the gonads ones; weight (g) of the liver, stomach and intestine, had been gotten and correlated between itself and with the climatic variable (temperature of air, rainfall, relative humidity of air and photoperiod). The testicles had been fixed in solution of Bouin and later enclosed in historesin in accordance with protocol of histology techniques. Statistical tests had been used for analysis and interpretation of the results. The testicles of the species in study are small, whitish, of oval form and if they find in the abdominal socket, located in the cranial region of the kidneys. Statistical it did not have individual variation in the length and weight of the animals had as well as not occurred variations in the biometric to testicular, fatty bodies, liver, stomach and intestine... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-10-29Bitstream added on 2014-06-13T20:29:27Z : No. of bitstreams: 1 martins_ff_me_sjrp.pdf: 4083601 bytes, checksum: 3903c0f8374904e3e74694832ce880e4 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os Chiroptera constituem a segunda maior ordem dos Mammalia, possuem adaptações para o vôo e peculiares hábitos de vida, ocorrendo principalmente em regiões tropicais e temperadas. Apesar de sua ampla radiação e de avanços nos estudos com enfoques evolutivos, alguns aspectos relativos à biologia reprodutiva desses animais ainda são poucos explorados, principalmente aqueles relacionados com as glândulas acessórias do sistema genital masculino. Devido à ampla distribuição geográfica, os morcegos sofrem influências ambientais sobre suas estratégias reprodutivas, as quais são observadas através do comportamento ou da avaliação funcional das gônadas e das glândulas acessórias. Assim o objetivo deste trabalho foi traçar um panorama descritivo e detalhado das características morfológicas da próstata e das glândulas bulbouretrais de três diferentes espécies de morcegos da família Phyllostomidae. Para isso, morcegos machos adultos das espécies Carollia perspicillata (Carollinae), Glossophaga soricina (Glossophaginae), e Phyllostomus discolor (Phyllostominae) foram coletados no período de Agosto de 2010 a Julho de 2012. A próstata e as glândulas bulbouretrais foram removidas e processadas segundo técnicas histológicas de rotina. Nas três espécies essas glândulas possuem as mesmas características topográficas; a próstata está situada na cavidade pélvica, na base da bexiga urinária, onde envolve parte da uretra e as glândulas bulbouretrais são estruturas bilaterais, localizadas na raiz do pênis. As glândulas bulbouretrais apresentaram diferenças ultraestruturais entre as três espécies. No geral foi notada a presença de uma camada muscular externa envolvendo a estrutura glandular; onde o estroma é formado por tecido conjuntivo e os ácinos possuem epitélio simples colunar, dotado de células secretoras e basais. A reconstrução tridimensional... / The Chiroptera are the second order of Mamallia, have adaptations for flight and peculiar habits, occurring mainly in tropical and temperate regions. Despite its widespread radiation studies and advances in evolutionary approaches with some aspects of the reproductive biology of these animals are still poorly explored, especially those related to the accessory glands of the male genital system. Due to the wide geographical distribution, bats suffer environmental influences on their reproductive strategies, which are observed through behavior or functional evaluation of the gonads and accessory glands. Thus, the aim of this work was to give an overview and detailed description of the morphological characteristics of the prostate and bulbourethral glands of three different species of bats of the family Phyllostomidae. For this purpose, adult male bat species Carollia perspicillata (Carollinae), Glossophaga soricina (Glossophaginae) and Phyllostomus discolor (Phyllostominae) were collected between August 2010 and July 2012. In these glands three species have similar topographical features, the prostate is located in the pelvic cavity, the base of the bladder, where it surrounds part of the urethra and the bulbourethral glands are structures bilateral located at the root of penis. The bulbourethral glands, have ultrastructural differences between the three species. Overall it was noted the presence of an external muscle layer surrounding the glandular structure, were the stroma consists of a connective tissue, and acini have simple columnar epithelium, endowed with basal and secretory cells. Three-dimensional reconstruction showed that the prostate is a complex consisting of three distinct regions: ventral, dorsal and dorsolateral, and that these regions vary in size and proportion between the three species. The ventral region surrounds the urethra, which is a tube linear that crosses... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-14Bitstream added on 2014-06-13T20:10:41Z : No. of bitstreams: 1 000739343.pdf: 2203610 bytes, checksum: ac8c342ce3d51256ef5b4bf0a36feb39 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / mortalidade embrionária em bovinos, entre 15 e 19 dias de prenhez, pode ser promovida pela liberação de PGF2 endometrial. A síntese de PGF2 é inibida pela suplementação com compostos ricos em ácido linoléico, como a semente de girassol. Assim, objetivou-se avaliar o efeito e os mecanismos pelos quais a suplementação com semente de girassol atua na performance reprodutiva de fêmeas bovinas de corte. Hipotetizou-se que tal suplementação promove um incremento na taxa de concepção de receptoras de embriões produzidos in vitro submetidas à TETF e que tal efeito decorra de modificações na composição lipídica plasmática e endometrial, alterações na expressão de transcritos envolvidos na biossíntese de eicosanoides e/ou modificações no número e/ou morfometria das glândulas endometriais. No Experimento 1, novilhas mestiças zebuínas submetidas ao protocolo de TETF suplementadas com semente de girassol, por 22 dias a partir da remoção do dispositivo de progesterona, apresentaram maior taxa de concepção em relação ao grupo controle (55,66% vs. 36,94%; P < 0,01). No Experimento 2, vacas Nelore suplementadas com semente de girassol apresentaram maiores concentrações plasmáticas de colesterol total, LDL e HDL; modificações na composição lipídica endometrial e alterações na expressão de transcritos envolvidos na biossíntese de eicosanoides. Conclui-se que a suplementação com semente de girassol aumenta a taxa de concepção por modificar a composição lipídica plasmática e endometrial, a expressão de transcritos envolvidos na biossíntese de eicosanoides e número... ( / Embryonic mortality in cattle, between 15 and 19 days of pregnancy, can be promoted by the release of endometrial PGF2. Synthesis of PGF2 is inhibited by supplementation with compounds rich in linoleic acid such as sunflower seed. This study aimed to evaluate the effects and the mechanisms by which supplementation with sunflower seed acts on reproductive performance of beef cows. It was hypothesized that such supplementation promotes an increase on conception rate of in vitro-produced embryos subjected to FTET; and that this effect arises from changes in plasma lipid composition and endometrial changes in the expression of transcripts involved in the biosynthesis of eicosanoids and/or changes in the number and/or endometrial gland morphology. In Experiment 1, zebu crossbred heifers submitted to the FTET protocol supplemented with sunflower seed, for 22 days from the removal of the progesterone device, showed higher conception rate in the control group (55.66% vs. 36.94% ; P < 0.01). In Experiment 2, Nelore cows supplemented with sunflower seed showed higher plasma concentrations of total cholesterol, LDL and HDL, changes in endometrial lipid composition and changes in the expression of transcripts involved in the biosynthesis of eicosanoids. It was concluded that supplementation with sunflower seeds increases the conception rate by modifying the lipid composition of the plasma and the endometrium, the expression of transcripts involved in the biosynthesis of eicosanoids and number and morphometry of the endometrial glands / FAPESP: 09/09234-9

Resumo: Os hormônios sexuais são metabolizados e excretados nas fezes, o que permite acessar com confiabilidade a atividade ovariana através de seus metabólitos. Em primatas, a atividade sexual pode ser influenciada por alterações nos níveis destes hormônios e por fatores sócio-ambientais. Este estudo investigou em fêmeas cativas de Alouatta clamitans: (1) a descrição do ciclo ovariano por meio dos perfis de concentrações progestinas fecais, (2) a influência do ciclo ovariano no comportamento sócio-sexual e noutras atividades motoras e (3) se a atividade sexual influencia outros comportamentos. Para descrição do ciclo ovariano foram coletadas amostras fecais de oito fêmeas adultas de A. clamitans. As coletas ocorreram ao amanhecer, cinco dias por semana, durante 20 semanas (entre fevereiro e junho de 2011). As amostras foram secas, pulverizadas, extraídas e em seguida foram dosadas as progestinas (enzimoimunoensaio). Para o estudo da comunicação sexual, seis fêmeas (duas sozinhas em seus recintos e quatro em duas díades) e sete machos de recintos vizinhos (todos adultos, sozinhos), foram acompanhados durante quinze semanas (entre março e julho de 2011; 240 horas; 74 dias). Foram registradas interações sócio-sexuais e outras atividades motoras (todas as ocorrências). O comportamento sexual foi definido quanto à sua natureza (atrativo ou proceptivo) e quanto sua intensidade (atravidade não-intensa: ANI; atratividade intensa: AI; proceptividade não-intensa: PNI; proceptividade intensa: PI). De acordo com o perfil das progestinas fecais os ciclos ovarianos foram divididos em fases interluteal e luteal, e períodos periovulatórios (PPO) e não-periovulatórios (PNPO). Foram observados 35 ciclos que apresentaram duração média de 16 ± 0,52 dias (mínimo: 10; máximo: 22). A fase interluteal durou em média 4 ± 0,37 dias (mínimo: 1; máximo: 10) com concentração média de progestinas fecais de 467,98 ± 29,12 ng/g de fezes secas. Já a fase luteal durou 11 ± 0,50 dias (mínimo: 7; máximo: 17) com concentrações médias de 4283,27 ± 193,31 ng/g de fezes secas. A proceptividade dominou a atividade sexual e o comportamento sexual não se restringiu a nenhuma fase/período do ciclo ovariano, contudo o PPO se caracterizou por atividade sexual intensa (AI e PI), recepção de comportamentos afiliativos dos machos e masturbação feminina. Os machos morderam/lamberam o substrato e as fêmeas realizaram mais autocatação durante os dias de ANI e PNI respectivamente. Os períodos com presença de atividade sexual se associaram aos comportamentos de esfregação hiomandibular e emissão de comportamentos afiliativos não-sexuais para o sexo oposto em machos e fêmeas. O método não-invasivo de dosagem de progestinas fecais através do enzimoimunoensaio demonstrou ser eficaz para acessar o ciclo ovariano em fêmeas de Alouatta clamitans. Durante o período de maior fertilidade houve aumento na intensidade da atividade sexual, e a masturbação esteve ligada à libido sexual. As fêmeas foram atrativas em todas as fases de seu ciclo ovariano e alertaram comportamentalmente os machos em relação ao seu estado reprodutivo, contudo a atratividade só é intensificada em associação ao aumento da proceptividade, que por sua por sua vez esteve associada ao estado reprodutivo das fêmeas. A atividade sexual esteve associada à maior interação social.

Made available in DSpace on 2016-08-12T18:48:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-11-26. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T18:51:09Z : No. of bitstreams: 1 000864603.pdf: 999765 bytes, checksum: 44addd5ee8876eb8b895c587d7d4a5a9 (MD5) / O veado-catingueiro (Mazama gouazoubira) e o veado-roxo (Mazama nemorivaga) possuem características morfológicas semelhantes e distribuição parapátrica, que colocaram em dúvida a classificação taxonômica de M. nemorivaga como espécie válida durante muitos anos. Estudos citogenéticos e morfológicos sugerem M. nemorivaga como espécie válida, porém, na maioria dos conceitos de espécie aceitos atualmente, está implícita a ideia de que duas espécies devem ser não apenas geneticamente distintas, mas reprodutivamente isoladas. Este estudo avaliou a presença de isolamento reprodutivo pós-zigótico entre M. gouazoubira e M. nemorivaga como forma de elucidar a classificação taxonômica deste último. Para tal, foram avaliadas as características seminais, histologia testicular e perfis de metabólitos fecais da testosterona de seis animais, frutos de cruzamentos intra e interespecíficos sendo três M. gouazoubira puros (PG), um M. nemorivaga puro (PN) e dois híbridos (H). Ao longo do estudo material seminal e testicular de mais dois animais puros, um M. gouazoubira e um M. nemorivaga foram acrescentados ás análises. Os resultados mostram que cinco dos seis animais puros analisados (PG1, PG2, PG4, PN1 e PN2) tiveram bom desempenho na análise reprodutiva, enquadrando-se nos parâmetros observados para suas respectivas espécies. O híbrido H1 provou-se completamente estéril enquanto que H2 apresentou severa subfertilidade, parâmetros relacionados diretamente com uma baixa secreção de testosterona e estrutura testicular hipoplásica. Acredita-se que a diferença de níveis reprodutivos entre híbridos esteja diretamente relacionada com o sexo de seus parentais. O animal PG3 apresentou péssimo potencial reprodutivo, provavelmente ligado a um defeito congênito não elucidado. Com base nos dados obtidos, é possível sugerir a existência de isolamento reprodutivo entre M. gouazoubira e M. nemorivaga, reforçando a... / The brown brocket deer (Mazamagouazoubira) and the amazonian brown brocket deer (Mazamanemorivaga) have similar morphological features and parapatric distribution, which questioned thetaxonomic classification of M. nemorivagaas a species for many years. Cytogenetic and morphometric studies suggest M. nemorivaga as a valid species but in most species concepts currently accepted is implicit the idea that two species should not only be genetically distinct, but reproductively isolated. This study evaluated the presence of post zygotic reproductive isolation between M. gouazoubira and M. nemorivaga to elucidate the taxonomic classification of the latter. To this end, seminal characteristics, testicular histology and profiles of testosterone of six animals, intra and interespecificbreeding products were evaluated: three pure M. gouazoubira (PG), a pure M. nemorivaga (PN) and two hybrids (H). Throughout the study testicular and seminal material of two pure animals (one M. gouazoubira and one M. nemorivaga) were added in the analyzes. The results show that five of the six purebreds analyzed (PG1, PG2, PG4, PN1 and PN2) performed well in reproductive analysis, fitting the parameters observed for their respective species. The hybrid H1 was completely sterile while H2 showed severe subfertility, parameters directlyrelated with a low secretion of testosterone and testicular hypoplasia. It is believed that the difference of reproductive parameters between the hybridswas directly related to the sex of their parents. The PG3 animal showed bad reproductive potential, probably linked to a birth defect not elucidated. Based on these data it is possible to suggest the existence of reproductive isolation between M. gouazoubira and M. nemorivaga reinforcing the need for revision of these groups to define their taxonomic position

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-17. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:06Z : No. of bitstreams: 1 000864722.pdf: 2629115 bytes, checksum: 66c11f771d4567d46705749086273afb (MD5) / Os procedimentos durante a sexagem pelo citômetro de fluxo garantem a acuidade de 85%, mas causam danos na viabilidade espermática que levam a baixa taxa de prenhez após os 90 dias. Os objetivos dessa Dissertação foram: 1) caracterizar a expressão gênica diferencial em transcriptoma de espermatozoides congelados pelo método convencional, sexados por centrifugação em gradiente de densidade ou sexados por citometria de fluxo; 2) comparar as taxas de clivagem e de blastocistos produzidos in vitro de bovinos utilizando sêmen convencional, sexado por citometria de fluxo ou por centrifugação em gradiente de densidade. Os grupos experimentais para sêmen e embriões foram: 1) grupo controle: sêmen convencional submetido ao gradiente de PercollTM 45/90% e respectivos embriões produzidos com esse sêmen; 2) grupo gradiente: centrifugação em gradiente de densidade e respectivos embriões produzidos com esse sêmen; 3) grupo citometria: sêmen sexado pelo citometro de fluxo, submetido ao mini gradiente de PercollTM 45/90% e respectivos embriões produzidos com esse sêmen. O RNA total foi extraído dos espermatozoides (20 x 10 6 células) obtendo-se 400 ng RNA/ 20 x 10 6 células/ animal, ou seja, 20 fg RNA por espermatozoide. Entretanto, não foi posível a construção da biblioteca de cDNA, provavelmente, devido ao alto grau de degradação do RNA. Os Complexos cumulus oócito (COCs) classificados como graus 1, foram aspirados de folículos antrais de 3 a 8 mm de diâmetro a partir de ovários de abatedouros e maturados durante 18 horas em estufa a 38,5°C, 100% de umidade e atmosfera de 5% de CO2 em ar. Os oócitos maturados serão colocados em contato com os espermatozoides previamente preparados para fecundação e incubados por 20 horas em 5% de CO2, na temperatura de 38,5°C. Os prováveis zigotos serão lavados por três vezes em meio SOF (meio sintético de fluido de oviduto) sem SFB e sem glicose e cultivados e transferidos... / The procedures for sexing by flow cytometry guarantee the accuracy of 85%, but cause damage in sperm viability leading to lower pregnancy rate after 90 days of pregnancy. The objectives of this study were: 1) to characterize differential gene expression in transcriptome of spermatozoa frozen by conventional method, sexed by density gradient centrifugation, by flow cytometry. 2) Compare blastocyst and cleavageratesproduced in vitro by conventional semen sexed by flow cytometry and by density gradient centrifugation. The experimental groups for semen and embryos were: 1) control group: conventional semen subjected to PercollTM gradient of 45/90% and their embryos produced with this semen, 2) gradientgroup: centrifugation in density gradient and their embryos produced with this semen, 3) cytometry group: semen sexed by flow cytometer, subjected to PercollTMmini gradient 45/90% and their embryos produced with this semen. Total RNA was extracted from sperm (20 x 10 6 cells) and it was possible to extract 400 ngRNA/ 20x10 6 cells/animal or it means, 20 fg of RNA per spermatozoa. However cDNA libraries were not built, probably due a high RNA degradation. The cumulus oocyte complexes (COCs) were classified as grade 1, aspirated from antral follicles with 3-8 mm in diameter, ovariesfromslaughterhouse were used and matured for 18 hours in an incubator at 38.5°C, 100% humidity and atmosphere of 5% of CO2 in air. The matured oocytes are going to be placed in contact with the prepared spermatozoa for fertilization and incubated for 20 hours in 5% CO2 at a temperature of 38.5 °C. Presumptive zygotes are going to be washed three times in SOF (half synthetic oviduct fluid) without FBS and without glucose, cultivated and transferred to plates with four wells containing 500 ul of the same medium used for washing zygotes after fertilization. Embryonic development was evaluated 7-8 days after fertilization. The cleavage and blastocysts rates were ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-10-02Bitstream added on 2014-06-13T19:17:38Z : No. of bitstreams: 1 lima_pf_me_botfmvz.pdf: 431092 bytes, checksum: 3cea30aa873b1916f3293f49265588ad (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O desenvolvimento da competência oocitária ocorre de forma gradual durante a foliculogênese e é dependente da interação do oócito com as células do cumulus via fatores parácrinos. O KL é expresso pelas células do cumulus e estimula a maturação nuclear do oócito em roedores, mas suas funções no complexo cumulus-oócito (CCO) bovino não são conhecidas. Neste trabalho, avaliou-se o padrão de expressão do KL, os efeitos do KL sobre a progressão da meiose e a expansão do cumulus, bem como a regulação da expressão do KL por fatores secretados pelo oócito (FSOs; BMP15, FGF8, FGF10, FGF16 e FGF17) durante a maturação in vitro (MIV) de CCOs bovinos. Adicionalmente, os efeitos do KL sobre a expressão de BMP15, GDF9, FGF16 e c-KIT foi avaliada. As isoformas do KL (KL1 e KL2) apresentaram padrões de expressão semelhantes nas células do cumulus ao longo da MIV, com pico de expressão às 12 horas do cultivo. A adição de KL ao cultivo aumentou a porcentagem de oócitos em meiose II e diminuiu a de oócitos em meiose I ao final da MIV, mas não afetou a expansão do cumulus. O FGF8 aumentou a expressão dos RNAm do KL1 e do KL2, enquanto a BMP15 estimulou apenas a expressão do RNAm do KL1. Distintamente, a dose máxima do FGF10 diminuiu a expressão do KL2 às 22 horas do cultivo em estudo dose-resposta, embora o mesmo não tenha sido observado quando uma dose menor, porém efetiva em estimular a expansão do cumulus, foi testada ao longo da MIV (4, 12 e 22 horas). O tratamento com FGF10 e BMP15 associados aumentou a expressão do KL1 às 12 horas do cultivo em relação ao controle e aos fatores de crescimento sozinhos, sugerindo cooperação entre eles na regulação da expressão do KL. A adição de KL ao meio de cultivo não alterou a expressão dos FSOs. Em conjunto, os resultados deste estudo sugerem o... / The development of oocyte competence occurs gradually during folliculogenesis and is dependent on the interaction of the oocyte with cumulus cells via paracrine factors. The KL is expressed by cumulus cells and stimulates oocyte nuclear maturation in rodents, but its functions in cumulus-oocyte complex (COC) cattle are unknown. In this study, we evaluated the expression pattern of KL, the effects of KL on the progression of meiosis and cumulus expansion and regulation of KL expression by factors secreted by the oocyte (OSF; BMP15, FGF8, FGF10, FGF16 and FGF17) during in vitro maturation (IVM) of bovine COCs. Additionally, the effect of KL on the expression of BMP15, GDF9, FGF16 and c-KIT was evaluated. Isoforms of KL (KL1 and KL2) showed similar expression patterns in cumulus cells along the MIV, with higher expression at 12 hours of cultivation. The addition of KL increased the percentage of oocytes in meiosis II and decreased oocyte meiosis I in the end of IVM, but did not affect cumulus expansion. The FGF8 increased expression of KL1 and KL2 mRNA, while only BMP15 stimulated mRNA expression KL1. Distinctly, the maximum dose of FGF10 decreased expression of KL2 at 22 hours of cultivation in dose-response study, although the same was not observed when a lower dose, but effective to stimulate cumulus expansion was tested along MIV (4, 12 and 22 hours). Treatment with FGF10 and BMP15 associated with increased expression of KL1 at 12 hours of culture in relation to the control and growth factors alone, suggesting cooperation between them in the regulation of expression of the KL. The addition of KL to the culture medium did not alter the expression of the FSOs. Taken together, our results suggest the involvement of KL in controlling bovine oocyte nuclear maturation and expression of KL in bovine cumulus cells is... (Complete abstract click electronic access below)