Thesis (M.S.)--University of Southern California, 1997. / Includes bibliographical references.

Thesis (Ph.D.) - University of Queensland, 2003. / Includes bibliography.

Thesis (doctoral)--Karolinska Institutet, 1985. / Added t.p. with thesis statement inserted. Includes bibliographical references.

München, Techn. Univ., Diss., 2004.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-30Bitstream added on 2014-08-13T18:01:36Z : No. of bitstreams: 1 000741596_20151231.pdf: 128176 bytes, checksum: bb8faabce5cb612e7108f388c4069a92 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-01-04T10:26:44Z: 000741596_20151231.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-04T10:28:35Z : No. of bitstreams: 1 000741596.pdf: 1788749 bytes, checksum: 850a2b026a9bca705e9c6bb1c2600555 (MD5) / As interações microrganismo-hospedeiro se iniciam pela detecção de padrões moleculares associados a microrganismos (MAMPs) por receptores semelhantes à Toll (TLR) e por proteínas com domínio de ligação à nucleotídeos e oligomerização (Nod) na resposta imune inata. No entanto, como a cavidade bucal saudável é continuamente colonizada por microrganismos não patogênicos que também apresentam MAMPs, deve haver um mecanismo endógeno de regulação negativa da resposta do hospedeiro para evitar uma resposta exagerada e desnecessária com consequências negativas ao hospedeiro. Os mecanismos associados à distinção de microrganismos comensais e patogênicos na mucosa bucal são ainda pouco compreendidos. As proteínas Nod foram inicialmente descritas como ‘TLRs intracelulares’ capazes de reconhecer MAMPs no citosol; no entanto, estudos in vitro indicam que Nod têm papel relevante na regulação da expressão de RANKL e OPG induzidas por antígenos microbianos, bem como na modulação da atividade de vias de sinalização intracelular associadas à expressão de citocinas diretamente relacionadas à regulação do turnover do tecido ósseo. Devido à escassez de informações sobre o papel das proteínas Nod na modulação das interações microrganismo-hospedeiro na mucosa oral e com base nestas informações, nossa hipótese é que as proteínas Nod tem um papel relevante na modulação da reação inflamatória e suas consequências, incluindo a reabsorção do osso alveolar. Para testar esta hipótese, os objetivos específicos propostos foram: avaliar em camundongos knockout para Nod1, Nod2 ou Rip2, através de microtomografia computadorizada e avaliações histológicas descritivas, estereométricas e imunohistoquímicas (TRAP), o papel das proteínas Nod na inflamação e reabsorção óssea associadas à doença periodontal experimental induzida por bactérias inativadas por calor... / Recognition of pathogenic bacteria by the host is initially mediated by the innate immune response through detection of microbe-associated molecular pattern (MAMPs) by Toll-like receptors (TLR) and Nucleotide-oligomerization domain (Nod) proteins. Since the oral cavity, as well as other mucosal surfaces, is continuously colonized with non-pathogenic bacteria that also present MAMPs, there has to be an endogenous negative regulatory mechanism in place to prevent an overt host response with deleterious consequences. Specifically in the oral mucosa, it is not clear how the immune system is able to quickly distinguish between commensal and pathogenic bacteria and tailor the host response. Nod proteins were initially described as ‘intracellular TLRs’ that recognize MAMPs associated with bacteria invading the cytosol; however these proteins have been shown to modulate the activation of various signaling pathways involved in the expression of inflammatory genes, including p38 MAPK and NF-κB in concert with TLR stimulation. There is paucity of information on the in vivo role of Nod proteins in the modulation of host-microbe interactions in the oral mucosa. Based on this information, our hypothesis is that Nod proteins play an important role in the modulation of the inflammatory reaction associated with periodontal diseases and its consequences, including alveolar bone resorption. To test this hypothesis, we propose the following specific aims: Assess the role of Nod proteins in the inflammation and bone resorption in experimentally-induced periodontal disease Describe the influence of Nod proteins on the cytokine and signaling networks associated with periodontal disease.

Submitted by DAYANE DE ALMEIDA BRANDÃO null (dayaneabrandao@hotmail.com) on 2016-05-16T01:24:28Z No. of bitstreams: 1 Dayane de Almeida Brandão-FINAL.pdf: 3147709 bytes, checksum: 4a2e64ad8796eb690412408acd162ec3 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-05-17T14:19:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 brandao_da_me_arafo.pdf: 3147709 bytes, checksum: 4a2e64ad8796eb690412408acd162ec3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-17T14:19:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 brandao_da_me_arafo.pdf: 3147709 bytes, checksum: 4a2e64ad8796eb690412408acd162ec3 (MD5) Previous issue date: 2016-03-18 / Curcumin é um polifenol amarelo extraído do rizoma de uma planta tropical, do tipo herbácea. Possui ações anti-inflamatória, antioxidante, antiangiogênica, imunomodulatória, citotóxica, antimicrobiana e antiapoptótica. A aplicação terapêutica do curcumin vem sendo avaliada em modelos pré-clínicos e estudos de várias doenças. As limitações da eficácia do curcumin in vivo são atribuídas à sua má solubilidade em veículos aquosos e baixa taxa de absorção no trato gastrointestinal. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito dose-resposta do composto sintético análogo ao curcumin (CMC2.24) em diferentes doses (1 mg, 3 mg, 10 mg, 30 mg) sobre o processo inflamatório e osteoclastogênese em modelo de doença periodontal in vivo e in vitro, para analisar qual é a dose mínima necessária para que o composto tenha o efeito biológico. A doença periodontal foi induzida em ratos por meio de injeção de 30 µg de LPS de Escherichia coli, realizadas 3x/semana durante 4 semanas. Os controles receberam injeções do mesmo volume do veículo de diluição do LPS (PBS). A administração de CMC2.24 (1, 3, 10 e 30mg/kg) foi feita por via intragástrica (gavagem oral) diariamente, durante 29 dias (um dia antes da primeira injeção de LPS/PBS). A expressão de fosfatase ácido tartarato resistente (TRAP), indicativa de diferenciação osteoclástica, foi avaliada por meio de imunohistoquímica, a proporção de células inflamatórias, em cortes corados com H/E, por estereometria, a presença de citocinas através do PCR em tecido gengival e a reabsorção óssea por análise de coloração por azul de metileno e microtomografia computadorizada. Nos experimentos in vitro, macrófagos foram estimulados com microrganismos e tratados com CMC2.24 em concentração de 1, 3, 10 e 30 µM. A expressão gênica foi avaliada através de PCR e ELISA, enquanto fagocitose e quantificação de espécies reativas de oxigênio foram avaliadas por atividade fagocitária e produção de ROS, respectivamente. De acordo com os resultados, CMC2.24 reduziu significativamente o infiltrado inflamatório. Além disso, CMC diminuiu significativamente a quantidade de células TRAP positiva a partir de 3 mg/kg e a perda óssea alveolar, a partir de 1 mg/kg. In vitro, experimentos utilizando macrófagos demonstraram que o CMC inibe a produção de TNF e IL-10 após estímulos microbianos. Além disso, CMC2.24 também inibiu atividade fagocitária e estimulou a produção de ROS. CMC2.24 em diferentes doses demonstrou potencial terapêutico para aplicação em doença periodontal, devido à inibição da resposta inflamatória e também foi efetivo na redução da reabsorção óssea inflamatória. / Curcumin is a yellowish polyphenol extracted from the rizome of a herbaceous tropical plant. It has multiple biological activities described, including anti-inflammatory, antioxidant, antiangiogenic, immunomodulatory, cytotoxic, antimicrobial and pro- and antiapoptotic activities. Its therapeutic application is actively evaluated in preclinical models and clinical studies of various diseases. In vivo use of curcumin is limited by its pharmacodynamic propereties, such as poor solubility in aqueous vehicles, low absorption rate in the gastrointestinal tract and short half-life in the peripheral circulation. The aim of this study was to evaluate the dose-response effect of a synthetic compound that is structurally to natural curcumin (CMC2.24) in a model of experimental periodontal disease that mimics the host-microbial interaction and the resultant inflammation and bone resorption that are hallmarks of this conditions in humans. Periodontal disease was induced in mice by injection of 30 ug LPS of Escherichia coli, carried out 3x / week for 4 weeks. Controls received injections of the same volume of vehicle (PBS). Administration of CMC2.24 (1, 3, 10 and 30mg / kg) was performed daily (starting the day before the first LPS/PBS injection) by oral gavage (1, 3, 10 and 30 mg/Kg) during the whole experimental period. Immunohistochemical detection of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) was used to identify osteoclasts in the area of interest; the inflammatory infiltrate was assessed by stereometric/morphological analysis in H/E-stained sections; expression of candidate inflammatory cytokines in the gingival tissue determined by RT-PCR and the extent of inflammatory bone resorption quantitated macroscopic analysis of the area of exposed root surface and also by computed microtomography. In in vitro experiments, murine macrophages were stimulated with periodontal diseaseassociated microorganisms in the presence and absence of CMC2.24 (1, 3, 10 and 30 uM). Gene expression was assessed by RT-PCR and ELISA; phagocytic activity was studied by immunocytofluorescence and production of reactive oxygen species was determined by a biochemical assay using a ROS-substrate that emit fluorescence upon cleavage. In vivo, administration of CMC2.24 significantly reduced the inflammatory infiltrate, and the number of osteoclasts starting at the 3 mg/Kg dosage; whereas inflammatory bone resorption was significantly inhibited already at the 1 mg/Kg dosage. In vitro, pre-treatment of macrophages with CMC2.24 markedly inhibited the production of TNF and IL-10 after microbial stimuli. CMC2.24 also inhibited phagocytic activity and stimulated production of ROS. We conclude that CMC2.24 at low doses (3 mg/Kg) has therapeutic potential for application in periodontal disease, due to inhibition of microbial-related inflammation.

Orientador: Osmar Aparecido Cuoghi / Banca: Celso Koogi Sonoda / Banca: Alberto Consolaro / Resumo: Introdução: O propósito desta pesquisa foi avaliar a reabsorção radicular após o emprego de forças contínuas e forças contínuas interrompidas. Material e Métodos: Utilizou-se 60 ratos machos da raça Wistar divididos em dois grupos nos quais foram movimentados os primeiros molares superiores direitos com uma mola helicoidal de secção fechada de 3mm - Sentalloy- GAC, liberando 50cN de força. O Grupo I (GI) foi composto por 30 animais com Forças Contínuas (FC), Grupo II (GII), composto por 30 animais, os primeiros molares superiores foram movimentados com Forças Contínuas Interrompidas (FCI). Os grupos de FC e FCI foram subdivididos conforme o tempo experimental de 8, 16 e 24 dias com 10 animais em cada subgrupo. Como Grupo Controle (GC) utilizou-se 10 hemi-maxilas sem movimentação. Avaliou-se em milímetros a quantidade de movimentação dentária pela diferença do lado movimentado e não movimentado. A quantidade de reabsorção radicular foi obtida em porcentagem para as áreas de compressão e tração. Resultados: Não apresentou diferença estatisticamente significante na quantidade de movimentação dentária ao comparar os Grupos I e II, nos mesmos tempos experimentais. A quantidade de reabsorção radicular ao avaliar entre os Grupos I e II, aos 8 dias, apresentou maior reabsorção no GI (7,07%), aos 16 dias foi maior a reabsorção no GII (17,86%) e aos 24 dias também apresentou-se maior no GII (22,83%). Conclusões: Os dentes movimentados com Força Contínua, no período de oito dias, apresentaram maior quantidade de reabsorção radicular tanto do lado de compressão como do lado de tração. Os dentes movimentados com Força Contínua Interrompida, nos períodos de 16 e 24 dias, demonstraram maior reabsorção radicular apenas no lado de compressão. As observações determinadas no período de oito dias são mais compatíveis com a realidade clínica. / Abstract: Introduction: the aim of this study was to assess the amount of tooth movement and root resorption after continuous and interrupted continuous force. Method: 60 - male Wistar rat were used to move the first upper right molar by Nickel-Titanium closed spring (Sentalloy-GAC) producing 50cN. Were divided into three groups, Group I (GI) 30 rats, with Continuous Force (CF) and Group II (GII), 30 rats, with Interrupted Continuous Force (ICF) and Control Group (CG) 10 rats without tooth movement. Group I and II were subdivided into three experimental periods of 8, 16 and 24 days, with 10 rats in each sub-group. The amount of tooth movement was measured in millimeters by the subtraction of the distance between movement and not movement sides. The amount of root resorption was obtained in percentage for compression and tension areas. Results: the amount of tooth movement was no statistical significant between GI and GII. Root resorption showed more at 8 days to GI (7,07%), 16 days to GII (17,86%) and 24 days to GII (22,83%). Conclusions: the tooth movement with CF at 8 days, showed high amount of root resorption on both, compression and tension areas. Root resorption with ICF at 16 and 24 days presented higher in compression areas. The findings at 8 days are more compatible with clinical practice. / Mestre

Orientador: Carlos Rossa Junior / Banca: Raquel Mantuaneli Scarel Caminaga / Banca: Eliete Neves da Silva Guerra / Resumo: Curcumin é um polifenol amarelo extraído do rizoma de uma planta tropical, do tipo herbácea. Possui ações anti-inflamatória, antioxidante, antiangiogênica, imunomodulatória, citotóxica, antimicrobiana e antiapoptótica. A aplicação terapêutica do curcumin vem sendo avaliada em modelos pré-clínicos e estudos de várias doenças. As limitações da eficácia do curcumin in vivo são atribuídas à sua má solubilidade em veículos aquosos e baixa taxa de absorção no trato gastrointestinal. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito dose-resposta do composto sintético análogo ao curcumin (CMC2.24) em diferentes doses (1 mg, 3 mg, 10 mg, 30 mg) sobre o processo inflamatório e osteoclastogênese em modelo de doença periodontal in vivo e in vitro, para analisar qual é a dose mínima necessária para que o composto tenha o efeito biológico. A doença periodontal foi induzida em ratos por meio de injeção de 30 µg de LPS de Escherichia coli, realizadas 3x/semana durante 4 semanas. Os controles receberam injeções do mesmo volume do veículo de diluição do LPS (PBS). A administração de CMC2.24 (1, 3, 10 e 30mg/kg) foi feita por via intragástrica (gavagem oral) diariamente, durante 29 dias (um dia antes da primeira injeção de LPS/PBS). A expressão de fosfatase ácido tartarato resistente (TRAP), indicativa de diferenciação osteoclástica, foi avaliada por meio de imunohistoquímica, a proporção de células inflamatórias, em cortes corados com H/E, por estereometria, a presença de ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Curcumin is a yellowish polyphenol extracted from the rizome of a herbaceous tropical plant. It has multiple biological activities described, including anti-inflammatory, antioxidant, antiangiogenic, immunomodulatory, cytotoxic, antimicrobial and pro- and antiapoptotic activities. Its therapeutic application is actively evaluated in preclinical models and clinical studies of various diseases. In vivo use of curcumin is limited by its pharmacodynamic propereties, such as poor solubility in aqueous vehicles, low absorption rate in the gastrointestinal tract and short half-life in the peripheral circulation. The aim of this study was to evaluate the dose-response effect of a synthetic compound that is structurally to natural curcumin (CMC2.24) in a model of experimental periodontal disease that mimics the host-microbial interaction and the resultant inflammation and bone resorption that are hallmarks of this conditions in humans. Periodontal disease was induced in mice by injection of 30 ug LPS of Escherichia coli, carried out 3x / week for 4 weeks. Controls received injections of the same volume of vehicle (PBS). Administration of CMC2.24 (1, 3, 10 and 30mg / kg) was performed daily (starting the day before the first LPS/PBS injection) by oral gavage (1, 3, 10 and 30 mg/Kg) during the whole experimental period. Immunohistochemical detection of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) was used to identify osteoclasts in the area of interest; the inflammatory... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dysregulated microRNAs in osteoclasts could cause many skeletal diseases. The therapeutic manipulation of these pathogenic microRNAs necessitates novel, efficient delivery systems to facilitate microRNAs modulators targeting osteoclasts with minimal off-target effects. Bone resorption surfaces characterized by highly crystallized hydroxyapatite are dominantly occupied by osteoclasts. Considering that the eight repeating sequences of aspartate (D-Asp8) could preferably bind to highly crystallized hydroxyapatite, we developed a targeting system by conjugating D-Asp8 peptide with liposome for delivering microRNA modulators specifically to bone resorption surfaces and subsequently encapsulated antagomir-148a (a microRNA modulator suppressing the osteoclastogenic miR-148a), i.e. (D-Asp8)-liposome-antagomir-148a. Our results demonstrated that D-Asp8 could facilitate the enrichment of antagomir-148a and the subsequent down-regulation of miR-148a in osteoclasts in vivo, resulting in reduced bone resorption and attenuated deterioration of trabecular architecture in osteoporotic mice. Mechanistically, the osteoclast-targeting delivery depended on the interaction between bone resorption surfaces and D-Asp8. No detectable liver and kidney toxicity was found in mice after single/multiple dose(s) treatment of (D-Asp8)-liposome-antagomir-148a. These results indicated that (D-Asp8)-liposome as a promising osteoclast-targeting delivery system could facilitate clinical translation of microRNA modulators in treating those osteoclast-dysfunction-induced skeletal diseases.

Although pregnant viviparous squamates are sometimes claimed to be able to resorb inviable eggs and embryos from the uterus, definitive evidence for such resorption is not available. After placing pregnant female Pseudemoia pagenstecheri into conditions under which embryonic development is terminated, we periodically harvested the gravid oviducts and examined them histologically. Females contained abnormal and degenerating eggs and embryos that had died in various stages of development. Dead embryos had undergone extensive cytolysis, dissolution, and aseptic necrosis and vitelline masses showed signs of deterioration and passage down the oviduct. The uterine mucosa lay in direct contact with the vitelline material, with no intact shell membrane intervening between them. Yolk was sometimes displaced into the exocoelom and allantoic cavity due to rupture of the extraembryonic membranes. Histological examination revealed no evidence of the uptake of yolk by the uterine epithelium or its accumulation in the subepithelial connective tissue. In many specimens, the uterine epithelium showed minuscule, apical granules. The position, appearance, and staining properties of the granules suggests them to be secretory, a manifestation of placentotrophy. Our observations indicate that P. pagenstecheri females retain dead eggs and embryos for several weeks or longer, yet do not resorb them during that period. This lizard is the second placentotrophic skink species in which resorption has been suspected, but in which abortive eggs appear to be retained or extruded instead of being resorbed by the oviducts. Researchers should not assume that squamates can digest and resorb oviductal eggs without definitive morphological evidence.