Synaptic transmission is a mechanism that makes life possible for many organisms. Damaging this crucial process, such as with a buildup of Reactive Oxygen Species (ROS), is extremely detrimental for the entire organism. Previously, the Dawson-Scully lab has determined that exposure of the Drosophila melanogaster neuromuscular junction (NMJ) to ROS accumulation can result in synaptic failure at a faster rate than saline controls (Caplan et al., 2013). To combat such effects, novel three-dimensional Resveramorph compounds were created to act as a neuroprotective agent against the harmful effects of acute oxidative stress (Bollinger et al., 2019; Sial et al., 2019). With the initial Resveramorph compounds demonstrating neuroprotective effects, additional analysis of other Resveramorph compounds were of interest to better understand their role in neuroprotection. Further testing of these compounds allows for the investigation of how chemical structure affects a compound’s neuroprotective activity. / Includes bibliography. / Thesis (MS)--Florida Atlantic University, 2021. / FAU Electronic Theses and Dissertations Collection

Current equine sperm cryopreservation methods fail to reliably prevent damages to important cellular structures such as the cell membrane and DNA. The objective of this study was to determine the effects of supplementing a stallion semen extender with 1 or 10 mM resveratrol on post-thaw sperm characteristics. Results showed that sperm death was increased with 10 mM compared to both the control and 1 mM (P < 0.05). DNA fragmentation was increased in the 1 mM treatment compared to the control (P < 0.05). ROS activity was reduced the most in the 10 mM with differences between all groups (P < 0.05). Membrane integrity was not different between groups (P > 0.05). Motility of the control was higher than the treatment groups (P < 0.05). Resveratrol was able to reduce ROS but was unable to preserve motility or viability at the concentrations tested.

A hidrocefalia é uma condição neurológica complexa, em que ocorre o desequilíbrio na dinâmica do líquido cefalorraquidiano (LCR) provocando um distúrbio na produção, circulação e reabsorção do mesmo, o que pode levar a uma redução e/ou bloqueio do fluxo sanguíneo. Apesar do tratamento com derivação liquórica ser eficiente na redução da ventriculomegalia, muitos danos neurológicos não são revertidos com a cirurgia. Estudos demonstram que o estresse oxidativo está envolvido na gênese das lesões da hidrocefalia. O objetivo deste trabalho foi avaliar a resposta neuroprotetora do Resveratrol, reconhecido como um potente antioxidante, na hidrocefalia experimental induzida em ratos Wistar jovens. Foram utilizados ratos machos, com sete dias de vida, que receberam uma injeção de caulim a 15% na cisterna magna para indução da hidrocefalia. Esses animais foram divididos em grupo hidrocefálico sem tratamento (n=20), grupo hidrocefálico tratado com Resveratrol através de aplicação de injeção intraperitoneal (20mg/kg/dia) (n=20) e um grupo de animais que não receberam a injeção de caulim para ser usado como controle (n=10). Foram realizadas avaliações comportamentais e estudos de ressonância magnética. Duas semanas após, os animais foram eutanasiados para coleta dos encéfalos, e realizados testes histológicos, imunoistoquímicos e bioquímicos. Os resultados obtidos neste trabalho mostraram que os animais hidrocefálicos, que receberam diariamente injeção de Resveratrol, apresentaram efeito benéfico nos testes comportamentais mostrando mais agilidade e melhor exploração do ambiente, melhor desenvolvimento sensoriomotor, aprendizagem e capacidade de memorização, apresentaram também discreta diminuição da atividade astrocitária evidenciada pela imunomarcação do GFAP no corpo caloso e exibiram aumento significativo na quantidade de antioxidantes totais no plasma. Conclui-se que o uso do Resveratrol diminuiu a atividade astrocitária, aumentou a quantidade de antioxidantes e melhorou a memória e o desenvolvimento motor dos ratos / Hydrocephalus is a neurological condition complex, wherein the imbalance occurs in the dynamics of cerebrospinal fluid (CSF) causing a disturbance in the production, circulation and absorption thereof, which can lead to a reduction and / or blockage of blood flow. Despite treatment with CSF shunt be effective in reducing ventriculomegaly, many neurological damage is not reversed with surgery. Studies have shown that oxidative stress is involved in the genesis of hydrocephalus injuries. The objective of this study was to evaluate the neuroprotective response Resveratrol, recognized as a potent antioxidant in experimentally induced hydrocephalus in young Wistar rats. male rats were used with seven days of life, which received a 15% kaolin injection into the cisterna magna induction of hydrocephalus. These animals were divided into hidrocefálico untreated group (n = 20), hidrocefálico group treated with resveratrol by intraperitoneal injection application (20 mg / kg / day) (n = 20) and a group of animals that received the kaolin injection to be used as control (n = 10). behavioral assessments and magnetic resonance studies were performed. Two weeks later, the animals were euthanized to collect the brains and performed histological, immunohistochemical and biochemical tests. The results of this study showed that hidrocefálicos animals that received daily injection of Resveratrol showed beneficial effect on behavioral tests showing more agility and better exploitation of the environment, better sensorimotor development, learning and memory capacity, also showed a slight decrease of astrocyte activity evidenced by immunostaining of GFAP in the corpus callosum and exhibited a significant increase in the total amount of antioxidants in plasma. We conclude that the use of Resveratrol decreased the astrocyte activity, increased the amount of antioxidants and improved memory and motor development of mice

Introdução: O câncer se tornou um grande problema de saúde pública mundial, sendo o câncer de mama o mais incidente em mulheres. A terapia endócrina com o tamoxifeno, um modulador seletivo do receptor de estrógeno (SERM), é aplicada em câncer de mama receptor de estrógeno (RE) positivo, porém, pacientes tratadas por um longo período podem desenvolver resistência ao medicamento. O tratamento padrão para o câncer de mama triplo negativo é a quimioterapia com antraciclinas e taxanos, individual ou em combinação com cirurgia e/ou radioterapia, porém muitos fatores devem ser considerados. Assim, aumenta a necessidade por novas estratégias terapêuticas para o tratamento do câncer de mama, especialmente para o fenótipo triplo-negativo e, consequentemente, abre-se uma grande área para a aplicação de produtos naturais, como o resveratrol. Estudos tem demonstrado que fitoquímicos, como o resvetatrol, podem ser usados em combinação com agentes quimioterapêuticos, aumentando sua eficácia e diminuindo sua toxicidade. Objetivos: Avaliar os efeitos citotóxicos do resveratrol e dos metabólitos do tamoxifeno (N-desmetiltamoxifeno e 4-hidroxitamoxifeno), em tratamentos isolados e em associação, na proliferação e apoptose de células de câncer de mama RE-positivo (MCF-7) e células de câncer de mama triplo negativo (MDA-MB-231). Materiais e Métodos: A avaliação dos efeitos citotóxicos de resveratrol e metabólitos do tamoxifeno na proliferação e apoptose das células de câncer de mama foi realizada a partir do Ensaio de Viabilidade Celular (método de análise colorimétrica utilizando o Metil Tiazol Tetrazolium - MTT), cálculo de Coeficiente de Interação entre Drogas (CID) para avaliar o grau de sinergia entre os tratamentos, marcação celular com anexina V e iodeto de propídeo, Hypotonic Fluorescent Solution e western-blot (caspase 3, 8 e 9). Resultados: O tratamento associado de resveratrol 165 ?M + desmetiltamoxifeno 30 ?M e resveratrol 165 ?M + hidroxitamoxifeno 40 ?M mostrou diminuir significativamente a viabilidade celular de MCF-7 e MDA-MB-231, quando comparado com o tratamento isolado de desmetiltamoxifeno 30 ?M e hidroxitamoxifeno 40 ?M, respectivamente. Os tratamentos associados também mostraram aumento de células MCF-7 e MDA-MB-231 marcadas com anexina V e iodeto de propídeo e aumento de núcleos hipodiplóides, porém, a maior ativação de caspase 3, 8 e 9 ocorreu apenas em MCF-7. Conclusões: Os resultados obtidos indicam que os tratamentos associados reduziram a viabilidade de células MCF-7 e MDA-MB-231 e induziram ativação de apoptose somente em MCF-7. Assim, sugere-se que a redução na viabilidade de MDA-MB-231 deve estar relacionada com mecanismos independentes de ativação de caspases. / Introduction: Cancer has become a major public health problem worldwide, with breast cancer being the most common in women. Endocrine therapy with tamoxifen, a selective estrogen receptor modulator (SERM), is used in estrogen receptor (ER)-positive breast cancer, but patients treated over a long period may develop resistance to the drug. The standard treatment for triple negative breast cancer is chemotherapy with anthracyclines and taxanes, either alone or in combination with surgery and / or radiotherapy, but many factors must be considered. Thus, there is a growing need for new therapeutic strategies for the treatment of breast cancer, especially for the triple-negative phenotype and, consequently, opens up a great area for the application of natural products, such as resveratrol. Studies have shown that phytochemicals, such as resvetatrol, can be used in combination with chemotherapeutic agents, increasing their efficacy and decreasing their toxicity. Objectives: To evaluate the cytotoxic effects of resveratrol and the metabolites of tamoxifen (N-desmetiltamoxifen and 4-hydroxytamoxifen) in isolated and combined treatments on the proliferation and apoptosis of ER-positive breast cancer cells (MCF-7) and cancer cells of triple negative breast (MDA-MB-231). Materials and methods: The evaluation of the cytotoxic effects of resveratrol and metabolites of tamoxifen on the proliferation and apoptosis of breast cancer cells was performed from the Cell Viability Assay (colorimetric analysis using Methyl Thiazole Tetrazolium - MTT), Coefficient of Drug Interaction (ICD) to assess the degree of synergy between treatments, cell marking with annexin V and propidium iodide, Hypotonic Fluorescent Solution and western blot (caspase 3, 8 e 9). Results: The associated treatment of resveratrol 165 ?M + desmethyltamoxifen 30 ?M and resveratrol 165 ?M + hydroxytamoxifen 40 ?M showed a significant decrease in the cellular viability of MCF-7 and MDA-MB-231 when compared to the isolated treatment of desmethyltamoxifen 30 ?M and hydroxytamoxifen 40 ?M, respectively. Associated treatments also showed increase of MCF-7 and MDA-MB-231 cells labeled with annexin V and propidium iodide and increase of hypodiploid nuclei, but the greater activation of caspase 3, 8 and 9 occurred only in MCF-7. Conclusions: The results indicate that the associated treatments reduced the viability of MCF-7 and MDA-MB-231 cells and induced activation of apoptosis only in MCF-7. Thus, it is suggested that the reduction in the viability of MDA-MB-231 should be related to independent mechanisms of caspase activation.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jessica Bitencourt Emilio Mendes.pdf: 1572029 bytes, checksum: 2b2c9dc7481232e1bca34cb744c1ab6d (MD5) Previous issue date: 2011-09-17 / Resveratrol is a potent antioxidant, anti-inflammatory, anticancer, and chemoprotective agent. However, it is sensitive to some external agents such as air, light and oxidative enzymes that can reduce its viability and bioavailability for clinical use. In order to provide a controlled release, the aim of this study was to obtain resveratrol-loaded polyester microparticles and to evaluate their physicochemical properties, antioxidant potential and effect on hemolysis of human erythrocytes. Microparticles of poly(3-hydroxybutyrate-co -3-hydroxyvalerate) (PHBV) and poly(-caprolactone) (PCL) containing resveratrol were successfully prepared by simple emulsion/solvent evaporation. All formulations showed suitable encapsulation efficiency values higher than 80%. PHBV microparticles revealed spherical shape with rough surface and presence of pores. PCL microparticles were spherically shaped with smooth surface. Fourier-transformed infrared spectra demonstrated no chemical bond between resveratrol and polymers. X-ray powder diffraction patterns and differential scanning calorimetry analyses indicated that microencapsulation led to a drug amorphization. These PHBV/PCL microparticles delayed the dissolution profile of resveratrol. Release profiles were better fitted to biexponential equation. The hypochlorous acid scavenging activity and 2,2-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) radical cation decolorization assay confirmed that the antioxidant activity of resveratrolloaded into PHBV/PCL microparticles was kept, but was dependent on the microparticle morphology and dissolution profile. Resveratrol-loaded PHBV/PCL microparticles showed no cytotoxic effect on red blood cells. These results support an experimental basis for the use of resveratrol-loaded PHBV/PCL microparticles as a feasible oral drug delivery carrier for controlled release of resveratrol, being an attractive alternative in chronic diseases prevention. / O resveratrol é um potente agente antioxidante, anti-inflamatório, anticancerígeno e quimiopreventivo. No entanto, é sensível a algumas condições externas e ambientais, tais como: ar, luz e enzimas oxidativas, que podem reduzir a sua viabilidade e a sua biodisponibilidade para o uso clínico. Com o propósito de se elaborar sistemas de liberação modificada, o objetivo deste estudo foi a obtenção de micropartículas baseadas em poliésteres, contendo resveratrol, e a avaliação das características físico-químicas, do potencial antioxidante e do efeito sobre a hemólise de eritrócitos humanos desses materiais. As micropartículas de poli(3-hidroxibutirato-co-3 hidroxivalerato) (PHBV) e poli(-caprolactona) (PCL) contendo resveratrol foram preparadas com sucesso pelo método de emulsão simples/evaporação do solvente. Todas as formulações mostraram valores de eficiência de encapsulação adequados, superiores a 80%. As micropartículas de PHBV revelaram formato esférico com superfície rugosa e presença de poros. As micropartículas de PCL apresentaram formato esférico com superfície lisa. Os espectros de infravermelho com transformada de Fourier não demonstraram nenhuma ligação química entre o resveratrol e polímeros após a microencapsulação. As análises de difração de raio-X e de calorimetria exploratória diferencial indicaram que a microencapsulação conduziu a uma amorfização do fármaco. As micropartículas de PHBV e de PCL foram efetivas no controle da liberação do resveratrol. Os perfis de dissolução apresentaram o melhor ajuste para a equação biexponencial. Os ensaios de inibição do ácido hipocloroso e de descolaração do radical catiônico 2,2-azinobis(3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfônico) confirmaram a manutenção da atividade antioxidante do resveratrol presente nas micropartículas de PHBV e de PCL, mas dependente da morfologia das micropartículas e do perfil de dissolução. As micropartículas de PHBV e de PCL contendo resveratrol não apresentaram efeitos citotóxicos sobre os eritrócitos humanos. Esses resultados sugerem que as micropartículas poliméricas elaboradas a partir do PHBV e da PCL, contendo o fármaco, têm viabilidade como sistemas de liberação controlada por via oral do resveratrol, sendo uma alternativa interessante na prevenção de doenças crônicas.

A busca pelo homem por uma vida saudável tem impulsionado pesquisas por novas substâncias capazes de atender tal desejo. O composto fenólico resveratrol (3, 4\', 5- trihidroxiestilbeno) é uma dessas substâncias que apresenta uma variedade de ações farmacológicas, como potencial antioxidante, capacidade antiinflamatória, proteção contra doenças cardíacas e câncer. Apesar dos inúmeros estudos sobre os benefícios do resveratrol à saúde, há poucos dados na literatura sobre sua toxicidade em organismos aquáticos, e principalmente sua concentração no ambiente, tornando o presente estudo fundamental para a contribuição de informações sobre a ecotoxicidade do resveratrol no ambiente aquático. O presente estudo avaliou a toxicidade do resveratrol em embriões e larvas de Danio rerio (zebrafish). Para isso foi realizado o ensaio in vitro de citotoxicidade do resveratrol, ensaios de ecotoxicidade e ensaio de biomarcadores enzimáticos. A avaliação do resveratrol por cromatografia líquida de alta pressão (HPLC) também foi realizada. De acordo com os resultados obtidos, o índice de citotoxicidade (IC50), concentração do resveratrol que causou a morte de 50% das células da linhagem NCTC-L929 foi de 39 mg L-1. A concentração de resveratrol que causa mortalidade em 50% dos organismos expostos (CL50), nos ensaios de ecotoxicidade crônica de curta duração com larvas do peixe Danio rerio foi de 51,37 mg L-1. A CL50 obtida no ensaio de ecotoxicidade aguda no estágio embriolarval do peixe Danio rerio com 96 h de duração foi de 75,33 mg L-1 e a CL50 obtida no ensaio de ecotoxicidade aguda no estágio embriolarval do peixe Danio rerio com 168 h de duração foi de 50,87 mg L-1. Nas concentrações mais elevadas de resveratrol foram observadas deformidades em embriões e larvas. O resveratrol alterou as atividades das enzimas LDH e ChE no estágio embriolarval de Danio rerio. Na análise do resveratrol por HPLC não foi observado degradação do composto. / The concern about human being healthy life has driven researchers to study new compounds capable of reaching that desire. Resveratrol (3, 4\', 5 trihydroxystilbene) a phenolic compound, is one of these substances which presents a variety of pharmacological actions, as antioxidant potential, antiinflammatory capacity, protection against heart and cancer diseases. Despite the numerous studies on the benefits of resveratrol to health, there is little evidence in the literature of its toxicity to aquatic organisms, and especially its concentration in the environment, making the present study fundamental for the contribution of information on the ecotoxicity of resveratrol in the aquatic environment. The present study evaluated the toxicity of resveratrol in embryos and larvae of Danio rerio (zebrafish). For this purpose the in vitro cytotoxicity of resveratrol assay, ecotoxicity assays and enzyme biomarker assay were performed. The evaluation of resveratrol by high pressure liquid chromatography (HPLC) was also performed. According to the results, the cytotoxicity index (IC50), concentration of resveratrol that caused the death of 50% of the cells of the NCTC-L929 lineage was 39 mg L-1. The concentration of resveratrol that causes mortality in 50% of exposed organisms (LC50) in the short-lived chronic ecotoxicity assays with larvae of the Danio rerio fish was 51.37 mg L-1. The LC50 obtained in the embryo-active acute ecotoxicity test of the Danio rerio fish with 96 h duration was 75.33 mg L-1 and the LC50 obtained in the embryo-active acute ecotoxicity assay of the Danio rerio fish with 168 h duration was 50.87 mg L-1. At higher concentrations of resveratrol deformities were observed in embryos and larvae. Resveratrol altered the activities of LDH and ChE enzymes in the embryonal stage of Danio rerio. No degradation of resveratrol was observed in the HPLC analysis of compound.

Resveratrol (RESV), um polifenol presente em diversos compostos naturais, incluindo o vinho, tem sido associado a um efeito quimiopreventivo em diversos tipos de câncer, inclusive no câncer colorretal (CCR). Esse efeito benéfico observado em diversos estudos vem sendo atribuído, sobretudo, à sua ação anti-oxidante; muito embora o RESV também esteja envolvido em diversos outros mecanismos celulares, incluindo a apoptose. Não obstante, uma análise mais acurada sobre a potencial ação antineoplásica do RESV na promoção do CCR ainda se faz necessária. O CCR é um dos tipos de câncer mais frequentes no mundo ocidental, cuja incidência vem aumentando nos países em desenvolvimento e apesar dos esforços dos cientistas e do surgimento de novas drogas, esse tipo de câncer ainda possui altas taxas de morbidade e mortalidade. O presente estudo avaliou a potencial ação anti-neoplásica do RESV, puro e associado ao etanol (EtOH), na carcinogênese do câncer de cólon induzido por Nmetil-N\'-nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG) em ratos através da análise de estresse oxidativo com malondialdeído (MDA) e imunoexpressão de Caspase-3 (Casp-3), gamma-H2AX (H2AX), iPCNA (PCNA) e Caveolina-1 (CAV-1). O experimento foi realizado com 48 ratos wistar, os quais foram submetidos à indução da carcinogênese (0.5 ml de solução de MNNG (5 mg/ml) e tratados com placebo, RESV (1mg/kg/dia) e RESV (1mg/kg/dia) associado com EtOH (0,377g/kg/dia). Os ratos foram subdivididos em 6 grupos: controle (G1), MNNG (G2), RESV (G3), RESV+MNNG (G4), RESV + EtOH (G5) e RESV + EtOH + MNNG (G6). Como resultado, o RESV diminuiu a produção de MDA em todos os grupos tratados, evidenciando seu efeito antioxidante sistêmico. RESV aumentou o número de corpúsculos apoptóticos e da apoptose nas criptas displásicas, levando ao aparecimento de espaços criptais acelulares (ECA) e, consequentemente, a uma redução estatisticamente significativa no número de criptas displásicas nos grupos tratados. Através da diminuição da expressão de H2AX, PCNA e CAV1, observamos que o RESV apresentou um efeito protetor no desenvolvimento de lesões pré-neoplásicas na carcinogênese induzida por MNNG. Atribuímos esse efeito à sua ação pró-apoptótica que demonstrou ser um mecanismo efetivo na carcinogênese colônica em ratos, diminuindo o número de criptas displásicas e levando a formação de ECA\'s, um fenômeno ainda não descrito na literatura. Diferente da hipótese inicial, o EtOH mitigou os efeitos pró-apoptóticos do RESV, sem, contudo, diminuir sua ação antioxidante. Assim, concluímos que a ação anti-neoplásica e quimiopreventiva do RESV é efetiva na fase de promoção da carcinogênese colônica induzida por MNNG e que a associação entre RESV + EtOh, a mesma encontrada nos vinhos, não demonstrou ser tão efetiva quanto ao RESV isolado / Resveratrol (RESV), a polyphenol present in several natural compounds, including wine, has been associated with a chemopreventive effect in different types of cancer, including colorectal cancer (CRC). This beneficial effect observed in several studies has been attributed especially due to its anti-oxidant action; more than that, RESV also is involved in several other cellular mechanisms, including apoptosis. Despite of it, a more accurate analysis of a potential anti-neoplastic action of RESV in the promotion phase of CRC is still ongoing. CRC is one of the most frequent types of cancer in the Western world, with incidence increasing in developing countries and despite the efforts of scientists and the development of new drugs, this type of cancer still has high rates of morbidity and mortality. The present study evaluated a potential anti-neoplastic action of RESV, pure and associated with ethanol, on the carcinogenesis of colorectal cancer induced by Nmethyl-N\'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) in rats through the analysis of oxidative stress with malondialdehyde (MDA) and immunoexpression of Caspase-3 (Casp-3), gamma-H2AX (H2AX), iPCNA (PCNA) and Caveolina-1 (CAV-1). Our experiments were performed with 48 wistar rats, which were subjected to carcinogenesis (0.5 ml of MNNG solution (5 mg / ml) and treated with placebo, RESV (1 mg / kg / day) and RESV (1 mg / kg / (G1), RESV + EtOH (G5), RESV + MNNG (G4), RESV + EtOH (G5) and RESV + EtOH + MNNG (G6). As a result, RESV decreases the production of MDA in all treated groups, evidencing its systemic antioxidant effect. RESV increased the number of apoptotic corpuscles and apoptosis in dysplastic crypts, leading to the appearance of acellular cryptic spaces (ACE) and, consequently, to a statistically significant reduction in the number of dysplastic crypts in the treated groups. By decreasing expression of H2AX, PCNA and CAV1, we observed that RESV had a protective effect on the development of pre-neoplastic lesions in MNNG-induced carcinogenesis. We attributed this effect to its pro-apoptotic action, which has been shown to be an effective mechanism in colonic carcinogenesis in rats, decreasing the number of dysplastic crypts and leading to the formation of ACE\'s, a phenomenon not yet described in the literature. Unlike the initial hypothesis, EtOH mitigated the pro-apoptotic effects of RESV, but did not diminish its antioxidant action. Thus, we conclude that the anti-neoplastic and chemopreventive action of RESV is effective in the promotion phase of MNNG-induced colonic carcinogenesis and that the association between RESV + EtOh, the same as that found in wines, has not been shown to be as effective as isolated RESV.

Resveratrol (3,4,5-trihidroxiestilbeno), um polifenol pertencente ao grupo de compostos denominados fitoalexinas, é sintetizado por uma ampla variedade de plantas, tais como as videiras, em resposta a infecções fúngicas e a exposição à radiação UV. Nos vinhos este composto está presente em elevadas concentrações, sendo considerado um dos constituintes com maior potencial antioxidante. Esta elevada capacidade de absorver os radicais livres presentes em diversos processos biológicos permite ao resveratrol previnir doenças cardiovasculares e diversos tipos de câncer. O principal objetivo do presente estudo foi determinar in vitro o efeito radioprotetor do resveratrol em cultura celular com auxílio dos testes de citotoxicidade do resveratrol (IC50%) e da dose letal 50% da radiação gama (DL50). Os estudos in vitro do nível de toxicidade do resveratrol, verificado pelo ensaio de citotoxicidade utilizando-se o método de incorporação do vermelho neutro, e da determinação da dose letal 50% (DL50) da radiação gama, oriunda de uma fonte de Cobalto-60 (Co-60), foram realizados em cultura de células da linhagem NCTC Clone 929 da ATCC. O IC50% do resveratrol foi de aproximadamente 50 M/L. A DL50 da radiação gama apresentou um valor de aproximadamente 354 Gy. Baseando-se nestes resultados biológicos foram realizados estudos do efeito radioprotetor do resveratrol nas mesmas condições experimentais, constatando-se que o resveratrol nas concentrações entre 12,5 M/L e 25 M/L apresentou um efeito radioprotetor mais acentuado. / Resveratrol (3,4,5 trihydroxystilbene), a phenolic phytoalexin occurring naturally in a wide variety of plants, such as grapevines, in response to injury as fungal infections and exposure to ultraviolet light. In the wines this compound is present at high levels and is considered one of the higest antioxidant constituents. This high capacity to scavenge the free radicals generated by several biologic processes by resveratrol can provide a prevention of human cardiovascular diseases and several types of cancer. The main objective of this study was to determine the in vitro radioprotective effect of resveratrol in cell culture with the aid of the tests of cytotoxicity of resveratrol (IC50%) and lethal dose 50% of gamma radiation (LD50). Studies of the level of resveratrol toxicity, found by cytotoxicity test performed by neutral red uptake assay, and lethal dose 50% (LD50) of gamma radiation from source of Cobalt-60 (Co-60) was performed in cell culture NCTC Clone 929 from ATCC. The IC50% of resveratrol was about 50M/L. The DL50 of gamma radiation showed a value of about 354Gy. On the basis of these biological results, it was performed studies of radioprotective effect of resveratrol on the same experimental conditions, verifying that the resveratrol in concentrations between 12.5M/L and 25M/L showed a more pronounced radioprotective effect.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O resveratrol à um polifenol antioxidante natural encontrado especialmente na epicarpo da uva, em nozes e na romà o qual pode inibir a ativaÃÃo de mediadores prÃ-inflamatÃrio e citocinas na fase precoce de expressÃo do gene. Jà à bem conhecido que as lectinas sÃo proteÃnas de ligaÃÃo de aÃÃcares que atuam tanto como molÃculas prÃ- e anti-inflamatÃrias. Assim, o objetivo do presente trabalho foi o de verificar a ligaÃÃo de um composto de polifenol com uma lectina de Canavalia maritima (ConM) com base na sua capacidade para inibir processos prÃ-inflamatÃrios. Para alcanÃar este objetivo, a ConM foi purificada e cristalizada, uma soluÃÃo de 5 mM de resveratrol 5 mM foi utilizada para soaking durante 2 horas de incubaÃÃo. Os cristais obtidos pertencem ao grupo espacial monoclÃnico C2, o refinamento final resultou em um Rfactor de 16,0% e uma Rfree de 25,5%. Resveratrol se liga na rÃgida atravÃs de pontes de hidrogÃnio e interaÃÃo hidrofÃbica com aminoÃcidos que compÃem a quinta e sexta fita-&#946; da folha-&#946; rÃgida da ConM. A ConM complexada com o resveratrol inibiu a oxidaÃÃo do DPPH, mostrando atividade sinÃrgica entre a proteÃna e o ligante com a relaÃÃo mais eficaz de 2:3. Foi verificado ainda que o sÃtio de ligaÃÃo a carboidratos nÃo està diretamente relacionado à atividade antioxidante. à a interaÃÃo entre ConM e resveratrol, que indica o sinergismo destas duas molÃculas em agir como agentes sequestrantes de radicais livres que podem estarem relacionados a capacidade de reduÃÃo do processo inflamatÃrio atravÃs da inibiÃÃo de muitos mediadores prÃ-inflamatÃrios por lecitinas. / Resveratrol is a natural antioxidant polyphenol found especially in grape epicarp, walnuts, and pomegranates, which can inhibit the activation of proinflammatory mediators and cytokines at the early gene expression stage. It is well known that lectins are sugar-binding proteins that act as both pro- and anti-inflammatory molecules. Thus, the objective of this work was to verify the binding of a polyphenol compound with a lectin of Canavalia maritima (ConM) based on their ability to inhibit pro-inflammatory processes. To accomplish this, ConM was purified and crystallized, and resveratrol was soaked at 5 mM for 2 hours of incubation. The crystal belongs to the monoclinic space group C2, the final refinement resulted in an Rfactor of 16.0% and an Rfree of 25.5%. Resveratrol binds in the rigid &#946;-sheet through H-bonds and hydrophobic interaction with amino acids that compose the fifth and sixth &#946;-strands of the rigid &#946;-sheet of ConM. The ConM and resveratrol inhibited DPPH oxidation, showing synergic activity with the most effective ratio of 2:3 and carbohydrate binding site is not directly related to antioxidant activity. It is the interaction between ConM and resveratrol that indicates the synergism of these two molecules in acting as free radicals scavengers and in reducing the inflammatory process through the inhibition of many pro-inflammatory events.

Resveratrol (RESV), um polifenol presente em diversos compostos naturais, incluindo o vinho, tem sido associado a um efeito quimiopreventivo em diversos tipos de câncer, inclusive no câncer colorretal (CCR). Esse efeito benéfico observado em diversos estudos vem sendo atribuído, sobretudo, à sua ação anti-oxidante; muito embora o RESV também esteja envolvido em diversos outros mecanismos celulares, incluindo a apoptose. Não obstante, uma análise mais acurada sobre a potencial ação antineoplásica do RESV na promoção do CCR ainda se faz necessária. O CCR é um dos tipos de câncer mais frequentes no mundo ocidental, cuja incidência vem aumentando nos países em desenvolvimento e apesar dos esforços dos cientistas e do surgimento de novas drogas, esse tipo de câncer ainda possui altas taxas de morbidade e mortalidade. O presente estudo avaliou a potencial ação anti-neoplásica do RESV, puro e associado ao etanol (EtOH), na carcinogênese do câncer de cólon induzido por Nmetil-N\'-nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG) em ratos através da análise de estresse oxidativo com malondialdeído (MDA) e imunoexpressão de Caspase-3 (Casp-3), gamma-H2AX (H2AX), iPCNA (PCNA) e Caveolina-1 (CAV-1). O experimento foi realizado com 48 ratos wistar, os quais foram submetidos à indução da carcinogênese (0.5 ml de solução de MNNG (5 mg/ml) e tratados com placebo, RESV (1mg/kg/dia) e RESV (1mg/kg/dia) associado com EtOH (0,377g/kg/dia). Os ratos foram subdivididos em 6 grupos: controle (G1), MNNG (G2), RESV (G3), RESV+MNNG (G4), RESV + EtOH (G5) e RESV + EtOH + MNNG (G6). Como resultado, o RESV diminuiu a produção de MDA em todos os grupos tratados, evidenciando seu efeito antioxidante sistêmico. RESV aumentou o número de corpúsculos apoptóticos e da apoptose nas criptas displásicas, levando ao aparecimento de espaços criptais acelulares (ECA) e, consequentemente, a uma redução estatisticamente significativa no número de criptas displásicas nos grupos tratados. Através da diminuição da expressão de H2AX, PCNA e CAV1, observamos que o RESV apresentou um efeito protetor no desenvolvimento de lesões pré-neoplásicas na carcinogênese induzida por MNNG. Atribuímos esse efeito à sua ação pró-apoptótica que demonstrou ser um mecanismo efetivo na carcinogênese colônica em ratos, diminuindo o número de criptas displásicas e levando a formação de ECA\'s, um fenômeno ainda não descrito na literatura. Diferente da hipótese inicial, o EtOH mitigou os efeitos pró-apoptóticos do RESV, sem, contudo, diminuir sua ação antioxidante. Assim, concluímos que a ação anti-neoplásica e quimiopreventiva do RESV é efetiva na fase de promoção da carcinogênese colônica induzida por MNNG e que a associação entre RESV + EtOh, a mesma encontrada nos vinhos, não demonstrou ser tão efetiva quanto ao RESV isolado / Resveratrol (RESV), a polyphenol present in several natural compounds, including wine, has been associated with a chemopreventive effect in different types of cancer, including colorectal cancer (CRC). This beneficial effect observed in several studies has been attributed especially due to its anti-oxidant action; more than that, RESV also is involved in several other cellular mechanisms, including apoptosis. Despite of it, a more accurate analysis of a potential anti-neoplastic action of RESV in the promotion phase of CRC is still ongoing. CRC is one of the most frequent types of cancer in the Western world, with incidence increasing in developing countries and despite the efforts of scientists and the development of new drugs, this type of cancer still has high rates of morbidity and mortality. The present study evaluated a potential anti-neoplastic action of RESV, pure and associated with ethanol, on the carcinogenesis of colorectal cancer induced by Nmethyl-N\'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) in rats through the analysis of oxidative stress with malondialdehyde (MDA) and immunoexpression of Caspase-3 (Casp-3), gamma-H2AX (H2AX), iPCNA (PCNA) and Caveolina-1 (CAV-1). Our experiments were performed with 48 wistar rats, which were subjected to carcinogenesis (0.5 ml of MNNG solution (5 mg / ml) and treated with placebo, RESV (1 mg / kg / day) and RESV (1 mg / kg / (G1), RESV + EtOH (G5), RESV + MNNG (G4), RESV + EtOH (G5) and RESV + EtOH + MNNG (G6). As a result, RESV decreases the production of MDA in all treated groups, evidencing its systemic antioxidant effect. RESV increased the number of apoptotic corpuscles and apoptosis in dysplastic crypts, leading to the appearance of acellular cryptic spaces (ACE) and, consequently, to a statistically significant reduction in the number of dysplastic crypts in the treated groups. By decreasing expression of H2AX, PCNA and CAV1, we observed that RESV had a protective effect on the development of pre-neoplastic lesions in MNNG-induced carcinogenesis. We attributed this effect to its pro-apoptotic action, which has been shown to be an effective mechanism in colonic carcinogenesis in rats, decreasing the number of dysplastic crypts and leading to the formation of ACE\'s, a phenomenon not yet described in the literature. Unlike the initial hypothesis, EtOH mitigated the pro-apoptotic effects of RESV, but did not diminish its antioxidant action. Thus, we conclude that the anti-neoplastic and chemopreventive action of RESV is effective in the promotion phase of MNNG-induced colonic carcinogenesis and that the association between RESV + EtOh, the same as that found in wines, has not been shown to be as effective as isolated RESV.