A mastite é uma doença complexa que pode ter diferentes causas, graus de intensidade e variações de duração e de conseqüências. Os processos inflamatórios na glândula mamária são especialmente freqüentes e importantes em bovinos leiteiros. A mastite infecciosa é a mais importante sob os pontos de vista econômico e de saúde pública. A forma subclínica é a mais onerosa e prevalente com um comprometimento mundial de 40% do rebanho leiteiro e perdas econômicas entre 5% e 25% da produção leiteira. No Brasil, a mastite subclínica caracteriza-se pela alta incidência, com índices variando de 44,88% a 97,0%, e a redução da produção leiteira situa-se entre 25,4% e 43,0%. Dentre os agentes etiológicos mais isolados em casos de mastite subclínica destacam-se os Staphylococcus spp., os Streptococcus spp. e o Corynebacterium bovis. A quantidade de UFC/mL no leite proveniente diretamente da glândula mamária bovina com infecção permitiria o conhecimento da quantidade de microrganismos associada a uma determinada intensidade de processo inflamatório na glândula. A comparação destas informações com a contagem de células somáticas na amostra avaliaria mais acuradamente a natureza do processo inflamatório e infeccioso na glândula. Importante seria o risco que representa a presença de microrganismos no leite, sobretudo se considerar o hábito do consumo de leite in natura, verificando em um estudo quantitativo desta natureza, a carga microbiana ingerida pelo homem. Foram examinadas 80 amostras de leite de vacas mestiças ou holandesas, primíparas e multíparas, em diferentes estágios de lactação de plantéis do Estado de São Paulo. Quatro grupos foram formados de 20 animais cada: grupos com crescimento negativo, de Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. em cultura pura e grupo com a associação de ambos microrganismos. O objetivo deste trabalho consistiu em avaliação comparativa da quantidade de UFC/mL de microrganismos e CCSs no leite proveniente de glândulas mamárias bovinas, associadas com a presença dos microrganismos Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. e infecções mistas ocorridas com a presença de ambos. Tanto Staphylococcus spp. (mediana = 4,772), quanto Streptococcus spp. em cultura pura (mediana = 5,933), não apresentam diferenças significativas na contagem de UFC com seus respectivos agentes em associação (Staphylococcus spp. com mediana da associação foi de 5,048 e mediana de Streptococcus spp. da associação foi de 5,792). Nas amostras em que houve crescimento de Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. associados, a quantidade de UFC de Streptococcus spp. foi estatisticamente maior. Comparados entre si (crescimento em cultura pura de Staphylococcus spp. com mediana = 5,765 e Streptococcus spp., mediana = 5,920), mesmo apresentando um maior número na CCSs no grupo de crescimento de Streptococcus spp., este aumento não foi significativo estatisticamente. Porém, quando associados (mediana = 5,673), comparados à cultura pura de Staphylococcus spp. (mediana = 5,765), este último teve aumento significativo. Tanto em cultura pura como em associação, a presença dos microrganismos quando comparados, não induziram a um aumento significativo na CCSs ou à contagem de UFCs em amostras de leite com sinais de mastite subclínica, porém Staphylococcus spp. induziu maior contagem de células somáticas / Mastitis is a complex disease that can occur due to different causes, intensity of degrees and variation of duration and consequences. The inflammatory processes in the mammary gland are specially frequent and important in dairy producing cattle. The infectious mastitis is the most important because of the economic aspects and public health. The subclinical manifestation is the most expensive and prevailing affecting 40% of the milk producing herd and causing an economic loss between 5% and 25% of all dairy production. In Brazil, the subclinical mastitis is characterized by high incidence, with indexes varying from 44,8% to 97,0 % with the reduction of milk production between 25,4% and 43%. Among the more isolated etiological agents in subclinical mastitis, is the Staphylococcus spp., the Streptococcus spp. and the Corynebacterium bovis. The amount of CFU/mL in the milk directly originated from the infected cow mammary gland would make possible to know the amount of microorganisms associated to a determined intensity of inflammatory process in the gland. The comparison between this information with the number of body cells in the sample would evaluate more precisely the nature of the inflammatory process in the gland. The risk represented by the presence of microorganisms in the milk is very important mainly because of the habit of milk consumption in natura, checked in a quantitative study of this nature, based on the amount of microbes intake by man. Eight milk samples of half-breed cows and Dutch cows were examined as well as those in first or after various calving, in different lactation stages in breeding stocks in São Paulo State. Four groups were organized, with 20 animals in each with negative Staphylococcus spp. growth and Streptococcus spp. in pure culture and group, with the association of both microorganisms. The purpose of this study is the comparative assessment of the amount of CFU/mL of microorganisms and CCSs in the milk from the mammary bovine glands, associated with the presence of microorganisms Staphylococcus spp. and Streptococcus spp. and a mixed infection that occurred with the presence of both. The Staphylococcus spp. (median = 4,772) as well as the Streptococcus spp. in pure culture (median= 5,933) did not show significant differences in the CFU count, with their respective agents in association (Staphylococcus spp. with median of association was of 5,048 and median of Streptococcus spp. of the association was of 5,792). On the samples in which there was a growth of Staphylococcus spp. and Streptococcus spp. associated, the amount of CFU of Streptococcus spp. was statistically larger. Compared between themselves (growth in pure culture of Staphylococcus spp., median = 5,920, this increase wasnt statistically significant. Although when associated (median=5,673), compared to the pure culture of Staphylococcus spp. (median=5,765), the latter had a significant increase. In pure culture as well as in association, the presence of microorganisms when compared to a significant increase in CCSs or to the CFUs count in milk samples with indication of subclinical mastitis, but the Staphylococcus spp. induced a larger count of somatic cells

Optimizar un medio de cultivo para un linaje nativo Aspergillus niger Para-3 para demostrar la actividad β-fructofuranosidasa. Métodos: Investigación exploratoria- correlativa, de tipo básica y de diseño experimental de post prueba y factorial simple. El método específico estuvo basado en el análisis observacional. Se analizaron 167 especies nativas Aspergillus spp. la recolección de datos fue a partir de la colectas de especies en muestras de suelo por la técnica de aislamiento, identificación morfológica y aplicando protocolos de microbiología. Resultados: La identificación de dos cepas Aspergillus niger y phoenicis que demostraron tener actividad β-fructofuranosidasa intracelularmente con un aproximado de 613,31 y 390,16 U/g respectivamente. Mejorando la concentración de la sacarosa inicial y las condiciones para la activación de la enzima del linaje que mostró el mayor rendimiento entres las especies nativas Aspergillus spp. se obtuvo una actividad β-fructofuranosidasa de 1146,76 U/g. Conclusiones: Se identificó que la cepa nativa Aspergillus niger Para-3 es un potencial productor β-fructofuranosidasa y por ende de síntesis de fructooligosacáridos, así mismo que la activación de esta enzima se ve relacionada directamente al pH, temperatura e inducción de su fuente de carbono / Tesis

Las enfermedades virales constituyen uno de los principales factores limitantes del cultivo de Lilium spp. Los virus más comunmente encontrados en Lilium spp. en diferentes países son Lily symptomless virus (LSV), Lily mottle virus (LMoV) y Cucumber mosaic virus (CMV). El objetivo de esta tesis fue evaluar la presencia de LSV, LMoV y CMV en Lilium en Argentina, y en el caso de que estos virus estuvieran presentes se planteó estimar su incidencia en diferentes híbridos cultivados y localidades de producción, así como evaluar diferentes alternativas para obtener plantas de sanidad controlada. Se trabajó con híbridos de Lilium longiflorum (Ll), Asiáticos (As), Orientales (Or), Longiflorum × Asiáticos (LA), Longiflorum × Orientales (LO) y Orientales × Trompeta (OT). Se llevó a cabo el reconocimiento de la sintomatología asociada a la infección viral y se identificaron áfidos posibles vectores de virus en parcelas de producción de Lilium. Se evaluaron plantas sintomáticas y asintomáticas mediante DAS-ELISA y RT-PCR. Para esto se utilizaron anticuerpos policlonales específicos contra las proteínas de la cápside de LSV, LMoV y CMV, así como primers degenerados y específicos, respectivamente. Se pudo detectar la presencia de los tres virus. Las secuencias del gen de la proteína de la cápside (CP) y de aminoácidos de la CP de LSV, LMoV y CMV, aislados desde plantas cultivadas en Argentina, presentaron una elevada similitud con las de otras cepas de los mismos virus registradas en el GenBank. Asimismo, se detectaron infecciones virales en bulbos provenientes de Holanda, lo cual indica una posible vía de entrada de los virus. La incidencia de virosis fue evaluada por medio de DAS-ELISA en plantas de bulbos provenientes de siete localidades de Argentina entre las latitudes 26° 56′ S y 43° 03′ S, y longitudes 65° 21′ O y 71° 29′ O. Los virus detectados en órden decreciente fueron LSV (42,1%), LMoV (35,6%) y CMV (20,0%) y se encontraron en infecciones simples o mixtas. La incidencia de virus varió entre los híbridos desde 36% (O ‘Montecristo’) a 94,7% (Ll ‘Avita’) en 2006, y desde 38,9% (OT ‘Yelloween’) a 82,1% (LO ‘Triumphator’) en 2007, con una incidencia total de 64,1% y 70,7% en 2006 y 2007, respectivamente. También se encontró una variación en la incidencia entre localidades. La mayor incidencia de virus (89,6 y 87,6% en 2006 y 2007, respectivamente) se observó en Bahía Blanca, y la menor incidencia fue detectada en Trevellin (47,4%) en 2006 y en Malargüe (48,6%) en 2007. La alta incidencia de virus en el cultivo de Lilium puede estar asociada a la utilización de bulbos infectados para la propagación y a la falta de medidas de control de vectores. Para ajustar un sistema de obtención de bulbos de sanidad controlada se utilizó material infectado con virus de híbridos cultivados en Argentina. Los bulbillos fueron producidos por scaling ex vitro o por multiplicación in vitro con o sin tratamiento de termoterapia y/o quimioterapia. Posteriormente, se extrajeron y cultivaron los ápices meristemáticos. La obtención de plantas sanas fue dependiente de los híbridos, de los virus presentes y de los tratamientos aplicados. La aplicación de termoterapia ex vitro en escamas de bulbos durante la diferenciación de bulbillos (scaling) y la obtención de meristemas desde dichos bulbillos se propone como una innovación para un protocolo exitoso de obtención de bulbos de Lilium spp. de sanidad controlada. / Viral diseases are one of the main limiting factors in lily production. The viruses most commonly found in lilies worldwide are Lily symptomless virus (LSV), Lily mottle virus (LMoV) and Cucumber mosaic virus (CMV). The aim of this thesis was to evaluate the presence of LSV, LMoV and CMV in Lilium in Argentina, and when present, to estimate their incidence in different hybrids and localities, and also to evaluate different alternatives to produce virus-free plants. Hybrids evaluated belong to six groups: Lilium longiflorum (Ll), Asiatics (As), Orientals (Or), Longiflorum × Asiatics (LA), Longiflorum × Orientals (LO) and Orientals × Trumpet (OT). Different symptoms associated to viral infection were recognized and aphid species with potential capacity to transmit viruses were identified in Lilium production plots. Symptomatic and asymptomatic plants were evaluated by DAS-ELISA and RT-PCR using polyclonal antiserum against the capsid protein of LSV, LMoV and CMV, and with degenerate and specific primers, respectively. The gene nucleotide and amino acid sequences of the coat protein of LSV, LMoV and CMV were highly similar to those from other isolates of the same viruses registered in the GenBank. Infections were detected in bulbs imported from the Netherlands, which indicates a possible way of entry of viruses into our country. Virus incidence was evaluated by DAS-ELISA in bulbs coming from seven Argentinean localities. The areas surveyed were between latitude 26° 56′ S and 43° 03′ S, and longitude 65° 21′ W and 71° 29′ W. Virus infection in decreasing order were LSV (42.1%), LMoV (35.6%), and CMV (20.0%) and single or mixed infections were detected. Virus infection varied among hybrids from 36.0% (Oriental ‘Montecristo’) to 94.7% (Lilium longiflorum ‘Avita’) in 2006, and from 38.9% (OT ‘Yelloween’) to 82.1% (LO ‘Triumphator’) in 2007, with an overall infection incidence of 64.1 and 70.7% in 2006 and 2007, respectively. A variation in virus infection incidence among localities was also detected. The highest virus infection incidence (89.6 and 87.6% in 2006 and 2007, respectively) was observed in Bahía Blanca (38° 44′ S, 62° 16′ W). The lowest virus infection incidences, were 47.4% in Trevellin (43° 03′ S, 71° 29′ W) in 2006, and 48.6% in Malargüe (35° 28′ S, 69° 35′ W) in 2007. The high occurrence of viruses infecting lily crops in Argentina could be due to the use of infected bulbs during propagation and also to the absence of preventive virus vector control measures. The starting material to set a system for obtaining virusfree plants were infected hybrids grown in Argentina. For bulblet production, scales or scale sections were cultured ex vitro or in vitro, with or without thermotherapy and /or chemotherapy. Then, meristem-tips were cultured in vitro. Different percentages of virus-free plants were obtained depending on the hybrid, the treatment and the viruses present in infected tissues. The application of thermotherapy to bulb scales during the differentiation of bulblets (scaling) and the extraction of meristem-tips from these bulblets is an innovative proposal for a successful protocol for obtaining virus- free Lilium spp plants.

The aim of this work was to evaluate the behavior of varieties RB (Republic of Brazil) of sugar cane in relation to the attack of Diatraea spp. (Lepidoptera: Crambidae), Mahanarva spp. (Hemiptera: Cercopidae) and Telchin licus licus (Drury, 1770) (Lepidoptera: Castniidae). Two systems of cultivations were used, rainfed and irrigated. The varieties studied in the rainfed cultivation were as follows: RB72454, RB867515, RB971755, RB951541, RB931003, RB92579, RB863129, and RB93509. For the irrigated system, the variety RB98710 was also included. In the rainfed system, with all varieties in combined analysis, the results showed that the damages were not significantly different. In the irrigated system the variety RB971755 was externally more damaged. Concerning to the complex borer/rottenness for occasion of the harvest, in both systems, all varieties showed similar behavior in relation to the attack of Diatraea spp, It was not possible to identify any variety with a remarkable preference for Mahanarva spp., in both systems. Again, in both systems, the results showed that the studied varieties did not differ statistically in relation to the attack of T. licus licus. Finally, the values of internal damages of Diatraea spp. and T. licus licus did not show any significantly correlations with the agroindustrial parameters evaluated. / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Alagoas / O objetivo deste trabalho foi avaliar o comportamento de variedades RB (República do Brasil) de cana-de-açúcar em relação ao ataque de Diatraea spp. (Lepidoptera: Crambidae), Mahanarva spp. (Hemiptera: Cercopidae) e Telchin licus licus (Drury, 1770) (Lepidoptera: Castniidae). Foram utilizados os sistemas de cultivo de sequeiro e irrigado. As variedades estudadas no cultivo de sequeiro foram: RB72454, RB867515, RB971755, RB951541, RB931003, RB92579, RB863129, e RB93509. No cultivo irrigado, além das variedades já citadas, incluiu-se a RB98710. Os resultados de Diatraea spp., no sistema de cultivo sequeiro mostraram que, ao avaliar as variedades de forma conjunta, verificou-se que os danos causados pela praga foram estatisticamente semelhantes. No sistema irrigado constatou-se que a variedade RB971755 destacou-se com a maior porcentagem de dano externo. Nos dois sistemas de cultivo, com base no complexo broca/podridão, por ocasião da colheita, as variedades apresentaram comportamento semelhante em relação à porcentagem de dano interno de Diatraea spp. Os resultados de Mahanarva spp., em ambos os sistemas de cultivo, mostraram que não foi possível identificar uma variedade com característica marcante de preferência pela praga. Os resultados de T. licus licus indicaram que, nos dois sistemas de cultivo, as variedades não diferiram estatisticamente quanto à % de infestação. Em ambos os sistemas de cultivo, os valores de % de dano interno de Diatraea spp. e de % de infestação de T. licus licus, não apresentaram correlações significativas com os parâmetros agroindustriais avaliados.

In this work, several varieties RB (Republic of Brazil) of sugar cane were compared in relation to the attack of Diatraea spp. (Lepidoptera: Crambidae) Mahanarva spp. (Hemiptera: Cercopidae) and Telchin licus licus (Drury, 1773) (Lepidoptera: Castniidae). Two systems of cultivation were used, rainfed and irrigated. The varieties studied in the rainfed cultivation were as follows: RB72454, RB867515, RB971755, RB951541, RB931003, RB92579, RB863129, and RB93509. For the irrigated system, the variety RB98710 was also included. In the rainfed system, with all varieties in combined analysis, it was found that the varieties RB867515, RB863129, RB93509, RB92579 and RB931003 showed the lowest percentage of external damage by Diatraea spp. In the irrigated system, the varieties RB72454, RB92579 and RB93509 were the least infested. In both cropping systems, the complex borer/rottenness, assessed at harvest, indicated no significant differences between the varieties in respect of damages by Diatraea spp. The results for Mahanarva spp. in the rainfed cultivation, indicated the varieties RB72454, RB863129 and RB951541 as the least infested. For irrigated crop, the results were statistically similar, it was not possible to identify a variety with striking characteristic of preference by the pest. The results of % infestation of T. licus licus indicated that, in the two cropping systems, the varieties did not differ statistically. In both cropping systems, the values o f % of internal damage by Diatraea spp. and % infestation by T. licus licus did not show any significantly correlation with the agroindustrial parameters evaluated. / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Alagoas / Neste trabalho, compararam-se diferentes variedades RB (República do Brasil) de cana-de-açúcar quanto ao ataque de Diatraea spp. (Lepidoptera: Crambidae), Mahanarva spp. (Hemiptera: Cercopidae) e Telchin licus licus (Drury, 1773) (Lepidoptera: Castniidae). Foram utilizados dois sistemas de cultivo: sequeiro e irrigado. As variedades estudadas foram: RB72454, RB867515, RB971755, RB951541, RB931003, RB92579, RB863129 e RB93509. No sistema de cultivo irrigado além das variedades citadas, incluiu-se a RB98710. Ao se avaliar as variedades de forma conjunta, no sistema de cultivo sequeiro, verificou-se que as variedades RB867515, RB863129, RB93509, RB92579 e RB931003 apresentaram a menor porcentagem de dano externo de Diatraea spp. Para o cultivo irrigado, as variedades RB72454, RB92579 e RB93509 foram as menos infestadas. Em ambos os sistemas de cultivo, o complexo broca/podridão, avaliado por ocasião da colheita, não indicou diferenças significativas entre as variedades em relação aos danos de Diatraea spp. Os resultados encontrados para Mahanarva spp., no cultivo sequeiro, apontaram as variedades RB72454, RB863129 e RB951541 como as menos infestadas. Para o cultivo irrigado, os resultados foram estatisticamente semelhantes, não sendo possível identificar uma variedade com característica marcante de preferência pela praga. Os resultados da % de infestação de T. licus licus indicaram que, nos dois sistemas de cultivo, as variedades não diferiram estatisticamente entre si. Em ambos os sistemas de cultivo, os valores de % de dano interno de Diatraea spp. e de % de infestação de T. licus licus, não apresentaram correlações significativas com os parâmetros agroindustriais avaliados.

De acordo com a Food and Agriculture Organization of the United Nations (FAO, 2013), o consumo mundial de carne de frango tem aumentado de maneira significativa nas últimas décadas. Por outro lado, a preocupação dos produtores de alimentos, com a inocuidade de seus produtos também tem aumentado na mesma proporção. Durante as etapas da operação de abate de maneira geral, as contaminações cruzadas são as principais causas de disseminação de microrganismos patogênicos nos produtos obtidos e causadores de gastroenterites no consumidor. Espécies da enterobactéria Salmonella se enquadram como um dos maiores riscos desse tipo de doença devido a sua associação com os inúmeros surtos ocorridos a nível mundial, após o consumo desses produtos. Algumas enterobactérias possuem um gene blaKPC, que codifica a enzima carbapenemase, que confere resistência a antibióticos carbapenêmicos, agravando mais a situação. Alguns fatores de virulência encontrados nesse gênero de bactéria podem ainda estar associados a capacidade de adesão e formação de biofilmes em superfícies inertes, dificultando operações de higienização nas linhas de processamento. Assim sendo, a presente pesquisa objetivou a verificação da capacidade de estirpes de Salmonella spp isoladas de aviário e linha de abate de frangos de um frigorífico no estado do Rio Grande do Sul produzirem biofilmes e apresentarem resistência a antibióticos carbapenêmicos. Na avaliação da produção de biofilme, foi empregada a técnica de microplacas de polietileno e produção de cápsula segundo Stepanovic et al. (2004) e Rodrigues et al. (2006), respectivamente.Foram pesquisados os fatores de virulência de salmonelas, representados pelos genes IpfA, agfA, sefA, invA, hilA, avrA, sopE, sivH,e spvC, utilizando o método de Reação de cadeia de Polimerase (PCR), descrita por Borges et al. (2013). As estirpes foram submetidas ao teste de resistência a antibióticos carbapenêmicos pelo método de disco difusão com carbapenêmicos segundo Clinical and Laboratory Standards Institute-CLSI (2010) e pesquisa do gene de resistência a carbapenêmicos blaKCP, pela técnica de PCR, segundo NAAS et al. (2007). Obteve-se quatro perfis genéticos das estirpes de Salmonella spp.: perfil 1: genes ifpA, agfA, invA e avrA; perfil2: genes ifpA, agfA, sefA, invA e avrA; perfil 3: genes invA e avrA; perfil4: genes ifpA,agfA e invA. Observou-se a resistência das estirpes somente ao antibiótico imipenen. Entre as 36 estirpes de Salmonella spp. isoladas, todas foram consideradas produtoras de biofilme in vitro, sendo que 69% destas, apresentaram-se como fortes produtoras, 25% como moderadas, e apenas 6% como fracas produtoras. O método Agar Vermelho Congo não se mostrou eficiente para teste presuntivo de produção de biofilme para estirpes de Salmonella spp. Não foi evidenciado o gene blaKPC nas estirpes de Salmonella spp. isoladas na presente pesquisa. / According to Food and Agriculture Organization of the United Nations (FAO, 2013), the world consumption of meat of chicken has been higher significantly in the last decades. On the other hand, the concern of the food producers with the safety of their products also has increased in the same proportion. During the steps of the slaughter operation in general, cross contamination are the main causes of pathogenic microorganisms dissemination in the obtained products and the causes of gastroenteritis in the consumer. Species of the Enterobacter Salmonella fall as the highest risks of this kind of disease, due to their association with countless outbreaks which occurred worldwide, after the consumption of these products. Some enterobacter have a blaKPC gene, which codes for the carbapenemase enzyme that confers resistance to carbapenems antibiotics, aggravating the situation. Some virulence factors found in this bacteria genes can also be associated to the ability of adherence and the formation of biofilms in inert surfaces, making it difficult the operations of sanitation in the processing lines. Thus, the present research aimed to verify the capacity of Salmonella spp. strains isolated from aviary and slaughter line of chicken in a fridge of Rio Grande do Sul state to produce biofilms and be resistant to carbapenems antibiotics. In the evaluation of biofilm production, it was used the polyethylene microplates and capsule production technique according to Stepanovic et al. (2004) and Rodrigues et al. (2006), respectively. The virulence factors of salmonella were researched, represented by the genes IpfA, agfA, sefA, invA, hilA, avrA, sopE, sivH, e spvC, using the Polymerase Chain Reaction (PCR) method described by Borges et al. (2013). The lineages were submitted to the carbapenems antibiotic resistence test by the disk diffusion method with carbapenems according to the Clinical and Laboratory Standards Institute-CLSI (2010), and the research of the resistance to carbapenems gene blaKCP, by the strains Salmonella spp.: profile 1: genes ifpA, agfA, invA and avrA.; profile 2: genes ifpA, agfA, sefA, invA and avrA; profile 3: genes invA and avrA; profile 4: genes ifpA, agfA and invA. It was observed the resistance of the strains only to the imipenen antibiotic. Among the other 36 cultures of Salmonella spp. isolated, all were considered to produce biofilm in vitro, of which 69% were strong producers, 25% moderate, and only 6% were low producers. The method Congo Red Agar was not efficient to the presumptive test of biofilm production for the Salmonella spp. strains. It was not evidenced the gene blaKPC in Salmonella spp. strains isolates in this research.

As doenças denominadas como negligenciadas têm causado nos últimos anos uma preocupação muito acentuada na comunidade científica e para as autoridades de saúde, relacionada às suas terapêuticas, no sentido de que os medicamentos existentes não se apresentam totalmente eficazes, além de determinarem efeitos colaterais extremamente elevados. Nesse perfil se encaixam a doença de Chagas e as Leishmanioses, etiologias determinadas respectivamente por Trypanosoma cruzi e parasitas do gênero Leishmania. Como proposta de encontrarmos uma alternativa para o tratamento dessas parasitoses, avaliamos o potencial terapêutico de três estatinas (sinvastatina, pravastatina e mevastatina), comercialmente encontradas para o tratamento de níveis elevados de colesterol e triglicérides, baseado no princípio de que a rota bioquímica para a formação de colesterol é semelhante à do ergosterol, componente da membrana plasmática desses protozoários. Foram realizadas avaliações in vitro e in vivo das estatinas puras e de suas associações com o benzonidazol, medicamento de referência no tratamento da doença de Chagas e com a anfotericina B, medicamento de referência no tratamento das leishmanioses, partindo do pressuposto que a substituição do benzonidazol / anfotericina B ou a diminuição de suas doses em combinação com as estatinas, atuando como coadjuvantes, pudessem auxiliar no tratamento e diminuir os efeitos colaterais provocados pela medicação. Observou-se nos ensaios com T. cruzi in vitro boa atividade antiparasitária, com valores de porcentagem de lise celular mais altos ou comparados aos encontrados para o benzonidazol, já in vivo, apenas a mevastatina apresentou redução da parasitemia em relação ao controle positivo e às outras estatinas testadas. Nos ensaios com L. braziliensis e L. major não foi observado resultado significante, tanto in vitro como in vivo, apesar de em algumas situações encontrarmos resultados próximos ao controle positivo. / Over recent years, neglected diseases has been a problem to the scientific community and health associations due the absence of total efficacy of drugs, and by their potential side effects. Chagas\' disease and Leishmaniasis - both caused respectively by Trypanosoma cruzi and by parasites the genus Leishmania fit on this profile. Aiming to find an alternative treatment of these parasitosis we evaluated the potential therapeutic of three statins (simvastatin, pravatatin, and mevastatin) which are commercially employed for treatment of high levels of cholesterol and triglycerides, based on the similarity of the biochemical route of cholesterol and ergosterol formation, being the ergosterol a component of plasmatic membrane of these protozoa. In vitro and in vivo evaluation were made by the association of these statins with benznidazole and amphotericin B used for Chagas\' disease and Leishmaniasis treatment respectively, hypothesizing that the replacement of benznidazole/amphotericin B or the reduction of the doses in combination with statins as coadjuvants could provide better treatment and side effects reduction caused by the commercial drugs. In vitro assays under T. cruzi showed significant antiparasitic activity when compared with benzonidazole to all statins. On the other hand in vivo assays showed parasitic reduction only by mevastatin when it was compared with positive control. L. braziliensis and L. major in in vivo assay didn´t show significant results despite the results have been similar to the positive control.

O desenvolvimento das atividades humanas está ocorrendo a um alto custo ambiental. A elevação das concentrações atmosféricas de CO2 e as mudanças no uso do solo estão desencadeando mudanças relevantes no clima global. O objetivo deste trabalho é determinar, por meio da largura dos anéis de crescimento, áreas de vasos e isótopos estáveis de carbono, como as espécies de jatobá: Hymenaea courbaril L. (de mata) e Hymenaea stigonocarpa Mart ex. Hayne (de cerrado) estão respondendo às mudanças do clima. Foram coletadas amostras do tronco principal de 12 indivíduos de H. stigonocarpa e 11 de H. courbaril. As amostras foram polidas e os anéis de crescimento foram identificados, datados e medidos. As cronologias foram construídas utilizando os programas COFECHA e ARSTAN. Com os anéis datados, foram medidas as áreas de vaso do lenho inicial de cada anel e também foram obtidas amostras de αcelulose dos anéis de crescimento para a análise de ∂13C e cálculo da eficiência intrínseca do uso da água (Wi). Os resultados mostram que, a largura dos anéis de H. courbaril sofre influencia positiva da precipitação, e negativa da temperatura, no final da estação de crescimento. Já as áreas de vaso são influenciadas positivamente pela precipitação do meio da estação de crescimento e negativamente pela temperatura da estação seca antes do início do crescimento. Para H. stigonocarpa, a largura do anel de crescimento sofre influência positiva da precipitação, e negativa da temperatura, durante a estação seca anterior ao início do crescimento. Já as áreas de vaso são influenciadas positivamente pela precipitação do início da estação seca anterior à estação de crescimento e negativamente pela temperatura no início do crescimento. Em relação ao ∂13C, as duas espécies mostraram uma influência do clima da estação de crescimento corrente e também da imediatamente anterior. Além disso, H. stigonocarpa possui uma tendência de elevação do Wi nas últimas cinco décadas que não foi encontrada em H. courbaril. Os resultados mostram que as espécies respondem a diferentes pressões ambientais, e isso levará a respostas diferentes em cenários de mudanças climáticas. Nesses cenários, as duas espécies podem ser prejudicadas, mas H. courbaril, possivelmente, sofrerá mais. Porém, existe outra pressão imediata sobre as espécies, que é o desmatamento. A análise das taxas de crescimento pode auxiliar as tomadas de decisão em projetos que envolvam supressão das matas e cerrados. Nesse contexto, H. stigonocarpa possui uma taxa de crescimento média 2.4x menor que a de H. courbaril, mostrando o maior tempo que essa espécie leva para atingir um tamanho maduro. / The development of human activities is taking place at a high environmental cost. The increasing atmospheric CO2 concentrations and changes in land-use are unleashing relevant changes in global climatic. The objective of this study is to determinate how H. courbaril L. (from forest) and H. stigonocarpa Mart ex. Hayne (from cerrado) are responding to the climatic change through tree-ring width, vessel area and stable carbon isotope analysis. Twelve specimens of H. stigonocarpa and eleven of H. courbaril were sampled. Then, samples were polished and tree-rings were identified, dated, measured and chronologies were built using COFECHA and ARSTAN softwares. With tree-rings dated, early wood vessel areas were measured and α-celluloses were sampled from wood of each tree-ring to ∂13C analysis and intrinsic water-use efficiency estimation (Wi). The results shows that tree-ring width in H. courbaril are positively related with the precipitation, and negatively related to temperature, during the end of growth period. Also, vessel areas are positively related to precipitation during the middle growth period and negatively related with temperature during the dry season previous to growth period. Tree-rings width in H. stigonocarpa were positively related to precipitation during dry season previous to growth period and were negatively related to temperature during the same period. Also, vessel areas were positively related to precipitation during the beginning of dry season, previous to the current growth period, and negatively related to temperature during the beginning of growth period. In relation to ∂13C, climate signals were found during the current growth period and the previous one. Beyond that, H. stigonocarpa showed a clear increasing trend on i during the last five decades, that was not found in H. courbaril. The results indicate that these species respond to different environmental demands, and that shall lead to different responses regarding the climatic change scenarios. In these scenarios, both species shall be negatively influenced, which will be probably worse in H. courbaril. But, there is another immediate pressure on both species that is related with deforestation. The growth ratio analysis can help policy-makers in projects that have forest and cerrado suppression. In this context, H. stigonocarpa has a mean growth ratio 2.4x smaller than H. courbaril, what implicates longer time for those species reach a mature size.

Acinetobacter baumannii, microorganisme responsable d’infections nosocomiales survenant le plus souvent par épidémies, pose un problème émergent de multi-résistance aux antibiotiques, notamment aux carbapénèmes. Cette résistance aux carbapénèmes est le plus souvent liée à l’acquisition et à l’expression de gènes codant pour des b-lactamases de classe D à activité de carbapénèmase (CHDLs). Le réservoir de ces gènes de résistance est inconnu.Nous avons montré que l’espèce bactérienne Acinetobacter radioresistens, espèce proche de A. baumannii, est le progéniteur du déterminant de résistance aux carbapénèmes le plus prévalent dans le monde chez A. baumannii : le gène blaOXA-23. Nous avons identifié l’espèce Acinetobacter lwoffii comme progéniteur d’un gène codant pour une nouvelle CHDL : OXA-134. Nous avons identifié les CHDLs naturelles des espèces Acinetobacter johnsonii, Acinetobacter calcoaceticus et Acinetobacter haemolyticus, dénommées respectivement OXA-211, OXA-213 et OXA-214. Nous avons ensuite étudié l’expression des gènes codant pour ces CHDLs naturelles en prenant l’exemple du gène naturel blaOXA-51/-66 de A. baumannii et nous avons démontré que ce gène était impliqué dans la réduction de sensibilité aux carbapénèmes chez A. baumannii, notamment lorsque la séquence d’insertion (IS) ISAba1 était présente en amont de ce gène. Nous avons ensuite identifié une nouvelle IS, ISAba9, à l’origine de la surexpression du gène blaOXA-51 naturel de A. baumannii. Enfin, nous avons identifié VIM-4, b-lactamase de classe B capable d’hydrolyser les carbapénèmes, dans une souche de Acinetobacter non-baumannii, Acinetobacter genomic species 16. / Carbapenem resistance in Acinetobacter baumannii is increasingly reported and leads to difficult-to-treat nosocomial infections. Carbapenem-hydrolyzing class D b-lactamases (CHDLs) represent the main mechanism of resistance to carbapenems in Acinetobacter spp. The origin (reservoir) of those CHDL genes remains unknown. We identified Acinetobacter radioresistens as the reservoir of the blaOXA-23-like genes currently emerging as the sources of carbapenem resistance in A. baumannii worldwide. Acinetobacter lwoffii was found to be a reservoir of a novel type of CHDL-encoding gene: blaOXA-134. We described the naturally-occurring CHDLs from Acinetobacter johnsonii, Acinetobacter calcoaceticus and Acinetobacter haemolyticus, respectively named OXA-211, OXA-213 et OXA-214. We reported an in vivo selection of reduced susceptibility to carbapenems in A. baumannii. This reduced susceptibility to carbapenems was related to selection of the ISAba1-related overexpression of the naturrally-occurring blaOXA-51/-69 gene from A. baumannii. We identified the novel insertion sequence ISAba9 as being involved in blaOXA-51/-69 gene overexpression, thus contributing to carbapenem resistance in A. baumannii.We reported the first identification of the metallo-b-lactamase VIM-4 determinant in Acinetobacter spp.

Orientador: Angela Cleusa de Fatima Banzatto de Carvalho / Banca: Eliana Scarcelli Pinheiro / Banca: Vera Cecilia Annes Ferreira / Banca: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Banca: Luís Antonio Mathias / Resumo: Os objetivos do presente trabalho foram verificar a ocorrência de Campylobacter jejuní, Campylobacter calí, Salmonella spp., Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium em abatedouros de aves e avaliar a resistência das amostras de Salmonella spp. isoladas frente a antimicrobianos de uso comum. Foram colhidas amostras de fezes; penas; água de escaldamento, evisceração e resfriamento; e amostras de carcaça não eviscerada, eviscerada e resfriada em seis abatedouros de aves. Campylobacter jejuni foi detectada em 14 amostras (5%), a maior porcentagem foi em amostras de fezes oito amostras (22%), e C. calí em foi isolada em uma amostra de pena (0,35%). Salmonella spp. foi detectada em 18% (52/288) dos isolados, enquanto os sorotipos S. Enteritidis em 5,6% (16/288) e S. Typhimurium em 2,4% (7/288). Os testes de resistência aos antimicrobianos apontaram 25 amostras resistentes ao aztreonam e à ampicilina (86,2%), 21 à tetraciclina (72,4%) e 16 à amoxicilina/ácido clavulânico e sulfazotrim (55,2%). Nenhum dos isolados testados apresentou 100% de resistência ou sensibilidade aos antimicrobianos utilizados. Os resultados indicam que há uma necessidade de melhorar a qualidade higiênico-sanitária em linhas de abate de aves e o cuidado com o uso indiscriminado de antibióticos na avicultura, oferecendo aos consumidores produtos livres de agentes zoonóticos. / Abstract: The present study was carried out to report the occurrence of Campylobacter jejuní, Campylobacter calí, Salmonella spp., Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium in chicken abattoirs and to evaluate the resistance of Salmonella spp. isolated to antibiotics of common use. Samples of feces; feathers; scald, evisceration, and chiller water; and non-eviscerated, eviscerated, and chilted carcasses were coUeded from six chicken abattoirs. Campylobacter jejuni was isolated in 14 samples (5%), isolation was greater in feces, eight samples (22%), one feather sample was positive for the species C. calí (0.35%). Salmonella spp. was detected in 18% (52/288) of the isolates, whereas serotypes S. Enteritidis were identified in 5.6% (16/288) and S. Typhimurium and 2.4% (7/288). Antibiotic tests indicate 25 resistant samples to aztreonam and to ampicilin (86.2%), 21 to tetracycline (72.4%) and 16 to amoxicilin/clavulanic acid and to sulfazotrim (55.2%). None sample tested were 100% resistant or sensitive to ali the antibiotics tested. The results exhibit the need to improve hygiene and sanitary standards in poultry sfaughter fines, and care with the indiscriminate use of antibiotics in avicultura, offering to the consumers products free of zoonotic agents. / Doutor