Zugl.: München, Techn. Univ., Diss., 2007

Zugl.: München, Techn. Universiẗat, Diss., 2007.

Th. 3e cycle--Pharm.--Paris 5, 1983. N°: 54.

Submitted by Quaresma Jamilli (jamilli.cristina@ufba.br) on 2016-11-22T14:44:20Z No. of bitstreams: 1 Tese de Professor Titular, de José Tavares-Neto.pdf: 14542079 bytes, checksum: 637c1dd9de16fba7748ae25aef81fb72 (MD5) / Approved for entry into archive by Uillis de Assis Santos (uillis.assis@ufba.br) on 2016-11-22T14:46:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese de Professor Titular, de José Tavares-Neto.pdf: 14542079 bytes, checksum: 637c1dd9de16fba7748ae25aef81fb72 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-22T14:46:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese de Professor Titular, de José Tavares-Neto.pdf: 14542079 bytes, checksum: 637c1dd9de16fba7748ae25aef81fb72 (MD5) / A evolução da esquistossomose mansônica, nos últimos 40 anos, na população de Catolândia – Bahia (Brasil). As taxas de prevalência e de incidência da infecção por Schistosoma mansoni, agente etiológico da esquistossomose mansônica (EM), tiveram grande redução com a introdução, na década 70 do Século XX, da terapêutica específica pela via oral; e, consequentemente, houve impactante redução daquelas taxas das formas mais graves da EM. O Projeto Catolândia teve início, em 1976, quando aquela terapêutica oral, com oxamniquine, havia sido recentemente introduzida no Brasil. Este trabalho avalia a evolução da esquistossomose mansônica nos moradores do município de Catolândia (Bahia), incluídos neste estudo entre os anos de 1975 a 1993, e acompanhados até o ano de 2015. Nesses 40 anos, os moradores foram acompanhados com exames clínicos e coproparasitológicos, periódicos, e introduzidas medidas de controle e preventivas. Entre 1976 a 1993, houve 10 tratamentos em massa com oxamniquine; e de 1994 a 2015, baseado no programa de vigilância clínica e parasitológica, os portadores de ovos de S. mansoni foram tratados com praziquantel. Após o 3º tratamento em massa, em 1985, não mais foram observados novos casos da forma hepatoesplênica (HE) da EM, e, a qualquer tempo, em menores de cinco anos de idade. Antes do 1º tratamento em massa, em outubro de 1976, mais de dois terços (76,3%) da população de Catolândia eram portadores de ovos de S. mansoni, enquanto entre os anos de 2014 a 2015 essa mesma frequência foi inferior a 5%, além da acentuada diminuição da carga parasitária. Nos 646 moradores matriculados entre 1975 a 1993, incluídos neste estudo, todos foram tratados três ou mais vezes com oxamniquine, e em 2015 tinham 22 ou mais anos de idade. Aqueles até 1993 com idade ≤5 anos de idade (n=137), todos em 2015 tinham a forma clínica hepatointestinal (HI) ou não foram infectados por S. mansoni. Enquanto entre aqueles maiores de 5 anos de idade (n=509), em 1993, até o ano 2015: quatro (0,8%) evoluíram da forma HI para a hepatointestinal avançada (HI-A); quatro (0,8%) com a forma HE foram esplenectomizados; 17 (3,3%) com a forma HE tiveram regressão para a forma HI; 18 (3,6%) evoluíram da forma HI-A para HI; 23 (4,5%) permaneceram ao longo do tempo com a forma HI-A; 27 (5,3%) evoluíram da forma HE para HI-A; 31 (6,1%) mantiveram-se na forma HE; e a maioria (n=385; 75,6%) desde o exame inicial (entre 1976 a 1993) até 2015 permaneceu na forma HI ou não foi infectada por S. mansoni. Não obstante estes resultados promissores, as condições de vida da população de Catolândia, mesmo com as melhorias nas duas últimas décadas, ainda não foram suficientes para tornar a infecção por S. mansoni de menor risco, bem como daquelas doenças associadas à pobreza, especialmente em decorrência das dificuldades inerentes às medidas preventivas por conta dos baixos indicadores do sistema de educação formal.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-06-19T21:27:44Z No. of bitstreams: 1 Ciro Ribeiro Filadelfo. Avaliação in vitro de farmacos pro-oxidantes sobre o Schistosoma mansoni.pdf: 35241630 bytes, checksum: cf849d389ff1e42dd8a97f71b7b817f1 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-19T21:27:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ciro Ribeiro Filadelfo. Avaliação in vitro de farmacos pro-oxidantes sobre o Schistosoma mansoni.pdf: 35241630 bytes, checksum: cf849d389ff1e42dd8a97f71b7b817f1 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Segundo a Organização Mundial de Saúde (2002), a esquistossomose é a segunda maior doença tropical, causadora de 200 a 300 mil mortes por ano. Mesmo apresentando alguns quimioterápicos eficazes para o tratamento, como o praziquantel (PZQ) e a oxamniquina (OXQ), ocorrem muitos casos refratários e efeitos colaterais. Diante deste contexto, é necessária a busca racional de novos medicamentos e combinações para o tratamento desta doença. Uma possível solução é o estudo de drogas relacionadas com o estresse oxidativo do patógeno. Dentre estas pOdem ser analisadas: a artemisinina (ART), que induz uma maior produção de radicais livres por inibição da formação da hemozoína em Plasmodium falciparum; a butionina sulfoximina (8S0), que impede a produção da glutationa; além do dietilditiocarbamato de sódio (DDC), que age como inibidor das superóxido dismutases. Portanto, o objetivo deste trabalho foi testar in vitro essas drogas, isoladas e combinadas, analisando a atividade das superóxido dismutases, alterações morfológicas e produção de hemozoína em vermes adultos, além de avaliar a toxicidade em esplenócitos. A ART apresentou efeito esquistossomicida em concentrações elevadas. O DDC mostrou um efeito esquistossomicida satifatório e inibiu as superóxido dismutases. Quanto à associação ART - DDC, esta inibiu a formação da hemozoína, apresentou danos nos tegumentos dos vermes e não apresentou citotoxicidade significativa. Estes resultados indicam que estas drogas são viáveis para estudos in vivo, podendo ser uma nova alternativa quimioterápica para esta patologia.(AU).

Made available in DSpace on 2016-04-15T13:01:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 selma_cantanhede_ioc_dout_2015.pdf: 5584268 bytes, checksum: ec561fb39a607f98c3d048ff171a6204 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Neste trabalho são apresentados os resultados do levantamento qualitativo e quantitativo da malacolofauna límnica da microrregião da Baixada Maranhense, MA, considerada de baixa endemicidade para esquistossomose. Dados da helmintofauna associada aos moluscos são também fornecidos. O estudo qualitativo ocorreu no período de novembro de 2011 a julho de 2012 abrangendo os 21 municípios da Baixada Maranhense e mais dois municípios vizinhos, enquanto que o quantitativo foi realizado em quatro desses municípios (Palmeirândia, Pedro do Rosário, São Bento e São Vicente Férrer), entre julho de 2012 e julho de 2014. No estudo qualitativo foram coletados 9.129 moluscos (Ampullariidae, Ancylidae, Planorbidae, Physidae e Succineidae): Biomphalaria glabrata; B. schrammi; B. straminea; Drepanotrema anatinum; D.cimex; D. depressissimum; D. lucidum; Gundlachia radiata; G. ticaga; Hebetancylus moricandi ; Omalonyx matheroni; Physa marmorata; Plesiophysa guadeloupensis; Pomacea maculata e Pomacea diffusa. As espécies Gundlachia radiata, G. ticaga, H. moricandi, P. guadeloupensis, P. diffusa e O. matheroni foram registradas pela primeira vez para o estado do Maranhão. Quanto aos transmissores da esquistossomose, B. glabrata foi encontrada em cinco municípios (Bacurituba, Peri-Mirim, Pinheiro, São Bento e São Vicente Férrer), enquanto B. straminea em nove (Arari, Conceição do Lago Açu, Igarapé do Meio, Monção, Pedro do Rosário, Penalva, Pinheiro, São Bento e Vitória do Mearim), sendo que em Pinheiro e São Bento, essas espécies foram observadas em sintopia No estudo quantitativo foi verificada a ocorrência de 13 espécies das 15 citadas anteriormente (com exceção de D. cimex e O. matheroni), totalizando 9.052 exemplares de gastrópodes límnicos e 111 de Omalonyx sp.. A família Planorbidae e B. straminea apresentaram maior abundância em julho, 2012 onde foi registrada a maior abundância de espécies. A temperatura e a precipitação diária influenciaram positivamente a abundância de B. glabrata e o mesmo foi observado entre a precipitação diária e a abundância de B.schrammi no município de Pedro do Rosário. A maioria das espécies foi categorizada como frequente ou constante e o teste de Kruskal-Wallis demonstrou que não houve variação significativa quanto à distribuição da frequência de gastrópodes límnicos entre os municípios e entre os grupos analisados. Com relação as estações de amostragem, a análise de aninhamento mostrou a existência de subconjuntos de espécies sugerindo que um determinado grupo de espécies mais comuns está presente em todos os ambientes. A Análise de Escalonamento Multidimensional mostrou maior semelhança entre os municípios de São Bento e São Vicente Férrer e entre Palmeirândia e Pedro do Rosário Os quatro municípios investigados apresentaram baixa diversidade, visto a dominância de algumas espécies. Quanto à helmintofauna associada aos moluscos, no período de novembro de 2011 a julho de 2014, foram identificados dez tipos cercarianos, sendo que Echinostome cercaria foi o mais frequente. Cercárias de Schistosoma mansoni foram encontradas em exemplares de B. glabrata em São Bento (outubro de 2012) e São Vicente Férrer (julho de 2014). Pomacea maculata apresentou a maior variedade de tipos cercarianos e foi reportada, pioneiramente, como o primeiro hospedeiro intermediário dos trematódeos Stomylotrema gratiosus e Travtrema stenocotyle. Os resultados mostraram que a microrregião da Baixada Maranhense é epidemiologicamente importante quanto à transmissão da esquistossomose, devido a fatores ambientais e sócio-econômicos que continuam favorecendo a transmissão dessa parasitose, além da presença de dois hospedeiros intermediários de S. mansoni. Com este trabalho, pioneiro para o estado do Maranhão, espera-se contribuir para o conhecimento da biodiversidade deste importante ecossistema do nordeste do Brasil, além de nortear futuros estudos voltados à promoção da saúde da população desse estado / This paper deals with a qualitative and quantitative survey of freshwater gastropods performed in the Baixada Maranhense Microregion, MA, considered of low endemicity for schistosomiasis. Helminths data associated with molluscs are also provided. The qualitative study was conducted from November 2011 to July 2012 covering the 21 municipalities of Baixada Maranhense microregion and two neighboring municipalities, while the quantitative was carried out in four of these municipalities (Palmeirândia, Pedro do Rosário, São Bento and São Vicente Férrer) between July 2012 and July 2014. In the qualitative study they were collected 9.129 snails (Ampullariidae, Ancylidae, Planorbidae, Physidae and Succineidae): Biomphalaria glabrata; B. schrammi; B. straminea; Drepanotrema anatinum; D.cimex; D. depressissimum; D. lucidum; Gundlachia radiata; G. ticaga; Hebetancylus moricandi; Omalonyx matheroni; Physa marmorata; Plesiophysa guadeloupensis; Pomacea maculata and Pomacea diffusa. Six species were reported for the first time to the state of Maranhão: Gundlachia radiata, G. ticaga, H. moricandi, P. guadeloupensis, Pomacea diffusa and O. matheroni. As for the schistosomiasis transmitters B. glabrata was found in five municipalities (Bacurituba, Peri-Mirim, Pinheiro, São Bento and São Vicente Férrer), whereas B. straminea in nine (Arari, Conceição do Lago Açu, Igarapé do Meio, Monção, Pedro do Rosário, Penalva, Pinheiro, São Bento and Vitória do Mearim) These snail vectors were found in sintopy in Pinheiro and São Bento. In the quantitative study 13 species out of the 15 listed above were collected (excepting D. cimex and O. matheroni), totaling 9.052 specimens of freshwater gastropods and 111 Omalonyx sp.. The family Planorbidae and B. straminea had higher abundance in July 2012 where was recorded the highest abundance of species. The temperature and daily precipitation positively influenced the abundance of B. glabrata and the same was observed between daily precipitation and abundance of B.schrammi in Pedro do Rosário. Most species was categorized as frequent or constant and the test Kruskal-Wallis showed no significant variation in the distribution of frequency freshwater gastropods between municipalities and between the collecting sites groups. Regarding sampling stations, the nesting analysis showed the presence of subsets of species suggesting that a certain group of most common species is present in all environments.The Multidimensional Scaling Analysis showed greater similarity among the municipalities of São Bento and São Vicente Férrer and among Palmeirândia and Pedro do Rosário The four investigated municipalities showed low diversity, due to the dominance of some species. As for the associated helminths, from November 2011 to July 2014, ten cercarian types were identified and Echinostome cercaria was the most frequent. Cercariae of Schistosoma mansoni were found in samples of B. glabrata in São Bento (October, 2012) and São Vicente Férrer (July, 2014). Pomacea maculata showed the greatest variety of cercaria types and it was reported, for the first time, as the first intermediate host of the trematodes Stomylotrema gratiosus and Travtrema stenocotyle. The results showed that the Baixada Maranhense microregion is epidemiologically important for schistosomiasis transmission, due to environmental and socio-economic factors that continue to favor the transmission of this disease, in addition to the occurrence of two intermediate hosts S. mansoni. This work, pioneer in the state of Maranhão, is expected to contribute to the knowledge of the biodiversity of this important ecosystem of northeastern Brazil, and guide future studies aiming to promoting the health of the population of that state

Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Maurílio Figueiredo (maurilioafigueiredo@yahoo.com.br) on 2014-09-19T22:13:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AnálisePerfilExpressão.pdf: 2789555 bytes, checksum: 3ca47b9100f7ac2ba4c0f11d49c5c832 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-11-07T12:23:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AnálisePerfilExpressão.pdf: 2789555 bytes, checksum: 3ca47b9100f7ac2ba4c0f11d49c5c832 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-07T12:23:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AnálisePerfilExpressão.pdf: 2789555 bytes, checksum: 3ca47b9100f7ac2ba4c0f11d49c5c832 (MD5) Previous issue date: 2013 / Análises pós genômicas têm propiciado avanços significativos sobre a biologia do parasito Schistosoma mansoni. Particularmente, experimentos de transcrissômica em larga escala apontaram genes essenciais, ligados a vias de degradação proteica intracelular, com expressão diferencial ao longo do ciclo de vida do parasito. Tais achados corroboram com as marcantes alterações fenotípicas observadas após a penetração no hospedeiro vertebrado e o extenso remodelamento corporal necessário para a instalação e maturação do verme adulto no sistema porta-hepático.A presente investigação objetivou determinar o perfil de expressão de subunidades constituintes do proteassoma 26S, em fases larvais e adultas do verme. Neste intuito, oligonucleotídeos específicos para amplificação parcial das subunidades Rpn10 e alfa 7 foram confeccionados. Após a extração de RNA total de vermes adultos seguido de RT-PCR, observou-se amplificação de produtos de aproximadamente 251 e 753 pb, de massas moleculares esperadas para os amplicons relacionados às subunidades Rpn10 e alfa 7, respectivamente. Os produtos de amplificação foram purificados do gel e clonados utilizando o sistema Gateway®. Novos ciclos de amplificação demonstraram a obtenção de plasmídeos recombinantes para as duas subunidades. Entretanto, experimentos de expressão heteróloga em bactérias BL21 não permitiram a detecção epurificação das subunidades alfa 7 e Rpn10 recombinantes no lisado celular. Como proposta alternativa, utilizou-se o plasmídeo PET28a® recombinante contendo a região codificadora da subunidade Rpn10 de S. mansoni, gentilmente cedido pela Dra. Enyara Rezende Morais (Laboratório de Biologia Molecular de Parasitos - Universidade de São Paulo). Após transformação em BL21, seleção de clones recombinantes e indução com IPTG, análises por SDS-PAGE e coloração do gel por Coomassie revelaram a expressão de uma proteína recombinante de massa molecular em torno de 55 kDa. Uma preparação de Rpn10 em alto grau de homogeneidade foi obtida após purificação por afinidade em resina de níquel. Anticorpos policlonais anti-SmRpn10 recombinante foram gerados em camundongos Swiss e utilizados para avaliação do perfil de expressão de Rpn10 em extratos solúveis de cercárias, esquistossômulos (de 3h e 3 dias), vermes adultos, ovos e miracídios. A partir de eletroforese bidimensional, utilizando separação isoelétrica em gel de gradiente linear (pH 3-10) e Western blotting, foram detectadas 3 isoformas para Rpn10 em todos os estágios investigados. Essas apresentaram aumento de expressão no estágio de cercária, o qual foi novamente confirmado por Western blotting 1D comparando as fases analisadas. Este achado refere-se ao primeiro relato da existência de isoformas para a subunidade Rpn10 constituinte do proteassoma 26S e agrega diversidade ao perfil de subpopulações possíveis e alternativas deste complexo proteolítico em S. mansoni __________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: Post-genomic analyses have allowed significant advances towards understanding the biology of the human parasite Schistosoma mansoni. In particular, large scaletranscriptome experiments highlighted essential genes related to proteolytic pathways exhibiting differential expression profiles throughout the parasite´s life cycle. Such findings corroborate with the marked phenotypic alterations observed after penetration into the vertebrate host and the extensive body remodeling required for maturation of the adult stage in the hepatic portal system. The present investigation aimed to determine the expression profile of 26S proteasome constituent subunits in both larvae and adult stages. Specific oligonucleotides were first designed for amplification of the subunits Rpn10 and alpha 7. After RNA extraction from adult worms and RT-PCR, amplification products at the expected molecular size (~250 and 750 bp) related to Rpn10 and alpha 7 subunits, respectively, were obtained. The amplification products were purified from the agarose gel and cloned using the Gateway® system. New amplification cycles demonstrated the production of recombinant plasmids for the two subunits under investigation. However, heterologous expression in Escherichia coli (BL21 strain) did not allowed detection and,purification of the respective recombinant proteins from cell lysates. As an alternative, the PET28a® recombinant plasmid containing the full length Rpn10 subunit of S. mansoni was kindly provided by Dr. Enyara R. Morais (Laboratório de Biologia Molecular de Parasitos – Universidade de São Paulo) and employed in this study. After transformation of BL21 E. coli cells, selection of recombinant clones and induction of expression using IPTG, SDS-PAGE analysis revealed the expression of a recombinant protein exhibiting molecular mass around 55 kDa. A homogenous fraction of His-tagged recombinant Rpn10 was obtained after its purification from the cell lysate using a nickel column. Polyclonal antibodies anti-Rpn10 were raised in Swiss mice and used for evaluation of the expression profile of this subunit in soluble extracts from cercariae, 3h schistosomula, adult worms, eggs and miracidia. A two dimensional gel approach (2-DE), using linear pH3-10 gradient for the first dimension, coupled to Western blotting revealed the existence of at least 3 isoforms for Rpn10 subunit in all investigated stages. Such isoforms exhibited upregulation in the cercariae, which was later confirmed by a comparative 1D Western blotting experiment. To our knowledge, this finding refers to the first report for the existence of Rpn10 isoforms and contributes adding further complexity to alternative possibilities of 26S proteasome assembly in S. mansoni.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:32:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6401_1.pdf: 1400976 bytes, checksum: f141eeb4eb97a9f155b864302cdd575b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / O objetivo do trabalho foi avaliar a atividade esquistossomicida de lipossomas contendo 3-(4-chloro-benzil)-5-(4-nitro-benzilidene)-imidazolidine-2,4-dione FZ4-LPSF (Lipo-FZ4). A solubilidade do FZ4 foi avaliada em diferentes valores de pH. Lipossomas contendo FZ4 foram preparados pelo método de hidratação do filme lipídico com posterior sonicação. A atividade do Lipo-FZ4 foi avaliada em camundongos Swiss infectados com Schistosoma mansoni e tratados com FZ4 livre ou encapsulado em lipossomas com doses de 50, 125 e 200 mg/kg, fracionadas em cinco dias. Os animais foram sacrificados 64 dias após a infecção e o sistema porta-hepático e mesentérico foi perfundido para a recuperação dos vermes adultos A taxa de encapsulação do FZ4 foi determinada pelo método de ultracentrifugação (95.9 ± 1,4 %). Foi verificada uma redução no número de vermes adultos de 24,65 % e 42,4 % para os grupos tratados com FZ4 e Lipo-FZ4, respectivamente. Todos os grupos tratados apresentaram 100 % de alteração no oograma, constatando a redução na ovoposição pelas fêmeas do Schistosoma mansoni. A atividade do FZ4 no tratamento de animais com Schistosoma mansoni foi evidenciada

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-05T17:45:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Thiago José Matos Rocha 2016.pdf: 10877486 bytes, checksum: 16ee48ad5aafb9dedb021cff67654530 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-05T17:45:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Thiago José Matos Rocha 2016.pdf: 10877486 bytes, checksum: 16ee48ad5aafb9dedb021cff67654530 (MD5) Previous issue date: 2016-02-05 / FACEPE / A esquistossomose mansoni é uma parasitose grave causada pelo trematódeo Schistosoma mansoni. A justificativa para novas alternativas terapêuticas está pautada no fato de que no Brasil, atualmente, praziquantel é o único medicamento empregado para tratamento da esquistossomose, mas seu extensivo uso inevitavelmente culminou em baixas taxas de cura, aparecimento de isolados de Schistosoma mansoni refratários, além de terem sido observados efeitos adversos causados por esse medicamento. Assim, torna-se relevante a busca por novas moléculas esquistossomicidas e, nesse contexto, pesquisas com compostos sintéticos consistem numa alternativa viável. As imidazolidinas são representadas por um grupo de substâncias heterocíclicas pentagonais possuidoras de diversas atividades biológicas, inclusive atividade esquistossomicida. Neste sentido, esse trabalho teve como objetivo investigar a atividade esquistossomicida de novos derivados tioxo-imidazolidínicos. As moléculas sintetizadas foram caracterizadas através de métodos espectroscópicos no infravermelho e ressonância magnética nuclear de hidrogênio e de carbono. Casais de vermes adultos de Schistosoma mansoni foram obtidos por perfusão do sistema porta-hepático e mantidos em cultura no meio RPMI 1640 suplementado com 10% de soro bovino fetal, penicilina (100U/mL) e estreptomicina (100μg/mL). As culturas foram mantidas a 37°C com atmosfera de 5% CO2, e, após 2 horas de adaptação ao meio de cultura, foram adicionados os derivados tioxo-imidazolidínicos. Os parasitos foram mantidos durante cinco dias sendo monitorados a cada 24 horas para avaliação da motilidade, oviposição, acasalamento e mortalidade. Por fim, foi avaliada a ação de LPSF/PTS23 sobre o tegumento dos vermes recuperados nos testes in vitro por microscopia eletrônica de varredura. Os compostos LPSF/PTS5, LPSF/PTS6, LPSF/PTS18, LPSF/PTS19 demonstraram citotoxicidade quando avaliadas (até uma concentração de 10μM) sobre Células Mononucleares de Sangue Periférico, já os derivados LPSF/PTS2, LPSF/PTS4, LPSF/PTS10, LPSF/PTS23 e LPSF/PTS24 se apresentaram atóxicos até 100 μM. Na atividade esquistossomicida os compostos LPSF/PTS2, LPSF/PTS4, LPSF/PTS10 e LPSF/PTS23 foram os mais ativos, sendo que LPSF/PTS23 demonstrou atividade em todas as concentrações avaliadas e mortalidade em menor tempo. Os outros compostos, embora não tenham causado mortalidade, foram capazes de causar alteração de motilidade, inibição de oviposição e separação de vermes. Com relação as alterações tegumentares induzidas após incubação com LPSF/PTS23, foi possível observar alterações como destruição de tubérculos com perda de espinhos e formação de vesículas nos vermes machos e erosão do tegumento nos vermes fêmeas. A partir dos resultados obtidos através da avaliação in vitro frente aos vermes adultos do S. mansoni foi possível concluir que dentre todos derivados tioxo-imidazolidínicos avaliados, LPSF/PTS23 pode ser apontado como uma molécula promissora nos estudos de atividade esquistossomicida. / Schistosomiasis mansoni is a serious parasitic disease caused by Schistosoma mansoni. The rationale for new therapeutic alternatives is based on the fact that in Brazil, currently, praziquantel is the only drug used for treatment of schistosomiasis, but its extensive use inevitably resulted in low rates of cure, appearance of isolates of Schistosoma mansoni refractories, besides having been observed adverse effects caused by this drug. So, it becomes relevant to search for new schistosomicidal molecules and, in this context, research on synthetic compounds consists of a viable alternative. The imidazolidines are represented by a group of heterocyclic substances having different pentagonal biological activities, including schistomicidal activity. In this sense, this work aimed to investigate the schistosomicidal activity of new tioxo-imidazolidinic derivatives. The synthesized molecules have been proven through spectroscopic methods in infrared and nuclear magnetic resonance of hydrogen and carbon. Pairs of adult worms of Schistosoma mansoni were obtained by perfusion of hepatic system and maintained in RPMI 1640 medium culture supplemented with 10% of fetal bovine serum, penicillin (100UmL) and streptomycin (100 μ gmL). The cultures were maintained at 37° C with 5% CO2 atmosphere, and, after 2 hours of adaptation to the culture médium, tioxoimidazolidinic derivatives were added. The parasites were held during five days being monitored every 24 hours to assess the motility, oviposition, mating and mortality. Finally, it was evaluated the action of LPSF/PTS23 on the integument of the worms recovered in tests in vitro by scanning electron microscopy. The compounds LPSF/PTS5, LPSF/PTS6, LPSF/PTS18, LPSF/PTS19 demonstrated cytotoxicity when evaluated (up to a concentration of 10 μM) on peripheral blood mononuclear cells; LPSF/PTS2, LPSF/PTS4, LPSF/PTS10, LPSF/PTS23 and LPSF/PTS24 presented low toxicity until the dosis of 100 μM. Considering the schistosomiasis activity, LPSF/PTS2, LPSF/PTS4, LPSF/PTS10 and LPSF/PTS23 compounds had major activity (LPSF/PTS23 demonstrated activity in all concentrations evaluated and mortality in less time). Although the other compounds had not caused mortality, they were able to cause change of motility, inhibition of oviposition and separating of worms. Regarding the tegumentary induced changes after incubation with LPSF/PTS23, it was possible to observe changes as destruction of tubers with loss of thorns and formation of vesicles in male worms and erosion of the integument in female worms. From the results obtained by evaluating in vitro activitie against adult S. mansoni worms, it was concluded that of all tioxo-imidazolidinic derivatives evaluated, LPSF/PTS23 can be pointed as a promising molecule in the studies of schistosomicidal activity.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-06-01T16:59:19Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Hallysson Douglas Andrade de Araújo.pdf: 2960301 bytes, checksum: 97baeea551ea35079bca0b1ab7a1123d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-01T16:59:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Hallysson Douglas Andrade de Araújo.pdf: 2960301 bytes, checksum: 97baeea551ea35079bca0b1ab7a1123d (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / CNPQ / No Brasil, Pernambuco é um dos estados com maior prevalência em esquistossomose mansônica, doença cujo principal vetor é a Biomphalaria glabrata. Niclosamida é o principal produto usado de controle da B. glabrata, mas devido a sua toxicidade o seu uso compromete o ecossistema aquático, tornando importante a busca por moluscicidas alternativos e de menor toxicidade ambiental, como por exemplo o ácido úsnico (AU) purificado de Cladonia substellata e o seu derivado o usnato de potássio (USNP). Este trabalho objetivou avaliar a atividade moluscicida do UA e do USNP, sobre estádios embrionários de B. glabrata e moluscos adulto. O AU foi obtido a partir de talos de C. substellata extraído com éter dietílico e purificado em coluna de sílica Gel eluída com clorofórmio:hexano (80:20 v/v). O USNP foi obtido a partir de AU dissolvido em água, a 40°C, seguido por gotejamento KOH (10%) até a completa solubilização da amostra, e em seguida liofilizado e mantido a -80 °C. A estrutura das moléculas foi confirmada por análises de Infra Vermelho (IV) e Ressonância Magnética Nuclear de Prótons (RMN H+). Os embriões (n=100) foram expostos em soluções contendo 1 a 6 μg/mL de AU solubilizados em DMSO (0,5%), bem como USNP em água filtrada e declorada, por 24 h. Após a exposição os embriões foram lavados com água filtrada declorada e observados após 7 dias para verificação da viabilidade (eclosão) e inviabilidade (mortos e malformados). Os grupos controles continham água filtrada declorada, água com DMSO a 0,5% e água com niclosamida (1μg/mL). O teste de toxicidade do AU foi realizado sobre Artemia salina nas concentrações de 1 a 4 μg/mL, por 24 h de exposição. Os resultados mostraram que o AU para os estádios de blástula ocasionou 51% de inviabilidade na concentração de 1,5 μg/mL e em gástrula de 72% na concentração de 4 μg/mL. Para os estádios de trocófora e véliger na concentração de 5 μg/mL foram observados 29 e 93% de inviabilidades respectivamente. Todos os estádios mostraram 100% de inviabilidade para o AU nas concentrações 2, 4,5, 6 e 6 μg/mL respectivamente. Enquanto que para o USNP o estádio de blástula na concentração de 5 μg/ml ocasionou 48% de inviabilidade, sendo resultado semelhante no estádio de gástrula na concentração de 3 μg/mL. Os estádios de trocófora e véliger apresentaram 27 e 26% de inviabilidade para a concentração de 2,5 μg/mL respectivamente. Os seguintes estádios mostraram 100% de inviabilidades para o USNP nas concentrações 6, 4, 4.5 e 4.5 μg/mL respectivamente. Para moluscos adulto o AU apresentou 53 e 87% de mortalidade nas concentrações de 2 e 3 μg/mL após 24 h de exposição e 90 e 100% nas concentrações de 2,5 e 3 μg/mL observados após 7 dias. A toxicidade para A. salina o ácido úsnico apresentou a partir da concentração de 2,5 μg/mL. Portanto, o estudo mostrou que o AU e o USNP demonstraram ser moléculas promissoras no controle ou eliminação da B. glabrata. / In Brazil, Pernambuco is one of the states with the highest prevalence of schistosomiasis, a disease whose main vector is the Biomphalaria glabrata. Niclosamida is the main product used in Control B. glabrata, but due to toxicity its use compromises the aquatic ecosystem, making it important to search for alternative molluscicides and lower environmental toxicity such as usnic acid (UA) purified Cladonia substellata and its derivative potassium usnate (USNP). This study aimed to evaluate the embryotoxic activity UA and USNP on embryonic stages of B. glabrata. The UA was obtained from C. substellata extracted with diethyl ether and purified on silica gel column eluted with chloroform: hexane (80:20 v/v). The USNP was obtained from UA dissolved in water at 40 °C, followed by dropwise KOH (10%) until complete solubilization of the sample, and then lyophilized and kept at -80 °C. The structure of the molecules was confirmed by Infra-red (IR) and Proton Nuclear Magnetic Resonance (1H NMR). The embryos (n = 100) were exposed to solutions containing 1 to 6 μg/mL UA solubilised in DMSO (0.5%) and in USNP filtered and dechlorinated water for 24 h. After exposure the embryos were washed with filtered dechlorinated water and observed for 7 days to verify the viability (hatch) and unviable (death and malformed). The control groups contained filtered dechlorinated water, water with 0.5% DMSO and water with niclosamide (1μg/mL). The UA toxicity test was conducted on Artemia salina environmental bioindicator in concentrations from 1 to 4 (μg/mL) for 24 h of exposure. The results showed that the UA to the blastula stage resulted in the unviable of 51% concentration 1.5 μg/mL and the percentage of gastrula 72% at a concentration of 4 μg/mL. To trochophore and veliger stages in the concentration of 5 μg/mL were observed 29 and 93% unviable respectively. All stages showed 100% unviable for the UA in concentrations 2, 4.5, 6 and 6 μg/mL respectively. While the USNP to the blastula stage at a concentration of 5 μg/mL resulted in 48% of unviable, with similar result in the gastrula stage in the concentration of 3 μg/mL. To the trochophore and veliger stages 27 and 26% have unviable to concentration of 2.5 μg/mL respectively. The following stages showed 100% unviable USNP concentrations for 6, 4, 4.5 and 4.5 μg/mL respectively. For adult mollusks UA showed 53 and 87% mortality at concentrations of 2 and 3 μg/mL after 24 h exposure to 90 and 100% at concentrations of 2.5 and 3 μg/mL observed after 7 days. Regarding toxicity to A. salina UA showed significant toxicity values from the concentration of 2.5 μg/mL. Therefore, the study showed that the UA and USNP proved promising molecules in the control or elimination of B. glabrata.