Orientador : Maria Palmira Daflon Gremião / Banca: Clovis Augusto Ribeiro / Banca: Silmara Marques Allegretti / Banca: Mara Cristina Pinto / Banca: Adélia Emília de Almeida / Resumo: A esquistossomose é uma das principais doenças parasitárias nos trópicos e subtrópicos, causada pelo Schistosoma mansoni. Uma alternativa para o tratamento desta doença é a quimioterapia, especialmente com praziquantel (PZQ), o qual é altamente permeável, porém apresenta baixa solubilidade em água, o que interfere na sua biodisponibilidade. Muitas estratégias utilizam polímeros no desenvolvimento de sistemas de liberação de fármacos com intuito de modificar as propriedades farmacotécnicas e biofarmacêuticas. Dentre elas, destacam-se os hidrogéis de dextrano, que apresenta várias propriedades vantajosas, algumas delas são: baixa toxicidade, biocompatibilidade e biodegradabilidade. Em trabalho anterior, foram desenvolvidos hidrogéis de dextrano 70 (DEX-70) e 148kDa (DEX-148) contendo praziquantel por um método simples, econômico, de fácil execução, sem a utilização de reticulantes químicos, o que gerou perfis de liberação diferentes do fármaco incorporado, graças a capacidade de intumescimento dos hidrogéis formados com cada um dos polímeros. Com base no observado neste trabalho avaliamos a utilização de blendas, que pode apresentar uma vantagem tecnológica importante, desenvolvendo novos materiais com propriedades diferentes, sem perder suas características e agregando suas propriedades vantajosas que podem ser usadas no desenvolvimento de sistemas de liberação, para a modulação das propriedades farmacotécnicas e biofarmacêuticas, de forma a desenvolver uma nova plataforma tecnológica em termos de Sistemas de liberação de fármacos. Os hidrogéis foram caracterizados, empregando o RMN-H1, o qual constatou um interação entre dextrano e praziquantel no hidrogel 1:1:1 (PZQ:DEX-70:DEX-148). A difração de Raios-X, juntamente com o DSC, mostrou que parte do fármaco está disperso na matriz polimérica na forma de cristalitos, ajudando a melhorar sua solubilidade, como comprovado pelo estudo de ... / Abstract: Schistosomiasis is a major parasitic diseases in the tropics and subtropics, caused by Schistosoma mansoni. An alternative treatment for this condition is chemotherapy, especially with praziquantel (PZQ), which is highly permeable, but has a very low solubility in water, which interferes with its bioavailability. Many strategies have been use polymers in the development of systems for controlled drug release in order to modify pharmacotechnical and biopharmaceutical properties. Amongst them, highlight the dextran hydrogels, which present various advantageous properties, some of them are: low toxicity, biocompatibility and biodegradability. In previous studies, dextran 70 (DEX-70) and 148kDa (DEX-148) hydrogels containing praziquantel had been developed by a simple, economical, of easy execution, without the use of chemical crosslinking, which generated different release profiles of drug incorporated, due swelling capacity of the hydrogels formed from each one of polymers. Based on observed in this study, the utilization of blends, which can present a major technological advantage by developing new materials with different properties, without losing its characteristics and adding their advantageous properties that can be used in the development of delivery systems, was evaluated, to provide a modulation of its pharmacotechnical and biopharmaceutical propertiesin order to develop a new technological platform in terms of systems for drug delivery. Hidrogels were characterized, employing 1H-NMR, which found an interaction between dextran and praziquantel into 1:1:1 (PZQ:DEX-70:DEX-148) hydrogel. The X-ray diffraction along with DSC showed that part of drug is dispersed in the polymer matrix in the form of crystallites, helping to improve its solubility, as evidenced by solubility studies. In in vivo studies, the sample 1:2:1 and 1:2:2, were the ones that were more effective. Finally, it was found that preparation of dextran blends containing ... / Doutor

Resumo: O praziquantel (PZQ) é o fármaco de escolha para o tratamento da esquistossomose, sendo ativo contra todas as espécies de Schistosoma. Devido à sua baixa solubilidade em água e o risco de resistência ou tolerância do parasita a este fármaco, é importante desenvolver alternativas terapêuticas que possam aumentar sua eficácia e melhorar sua biodisponibilidade. As nanopartículas lipídicas sólidas (SLN) combinam as vantagens de diferentes carreadores coloidais tais como emulsões, lipossomas e nanopartículas poliméricas, e também evitam algumas das suas desvantagens em relação à estabilidade e dificuldade de produção em larga escala. Assim, o objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento e caracterização de SLN contendo PZQ (SLN-PZQ) a fim de melhorar as propriedades biofarmacêuticas deste fármaco. O ácido esteárico foi selecionado como fase lipídica para o desenvolvimento das SLN devido à capacidade de solubilização do PZQ e baixo custo. As SLN foram preparadas por um método modificado de microemulsão óleoem- água sob homogeneização a alta velocidade de cisalhamento utilizando Poloxamer 188 como tensoativo. O diâmetro médio e potencial zeta das SLN-PZQ foram 505,6 nm ± 27,2 nm e -34,0 mV ± 1,1 mV, respectivamente. As nanopartículas foram observadas por microscopia eletrônica de varredura revelando a presença de partículas esféricas. Os resultados obtidos por calorimetria exploratória diferencial indicam que as SLN se apresentam no estado sólido e o fármaco está molecularmente disperso na matriz lipídica. A eficiência de encapsulação e capacidade de carga do PZQ determinadas por cromatografia líquida de alta eficiência foram 99,06 % ± 0,3 % e 17,48 % ± 0,05 %, respectivamente. A formação das SLN foi confirmada por espalhamento de raio-X a baixo ângulo revelando a presença de uma estrutura lamelar com efetiva incorporação do PZQ nas partículas / Abstract: Praziquantel (PZQ) is a drug of choice for the treatment of schistosomiasis, being active against all species of Schistosoma. Due to its low water solubility and risk of parasite resistance or tolerance to this drug, it is would be useful to develop therapeutical alternatives that can increase its efficacy and improve the bioavailability. Solid lipid nanoparticles (SLN) combine the advantages of different colloidal carriers such as emulsions, liposomes, and polymeric nanoparticles, and also avoid some of their disadvantages in relation to the stability and difficulty of large scale production. Thus, the aim of this research was the development and characterization of PZQ-loaded SLN (SLN-PZQ) to improve the biopharmaceuticals properties of this drug. The stearic acid was selected as lipid phase to development of SLN due to solubilization capacity of the PZQ and low cost. The SLN were prepared by a modified oil-in-water microemulsion method under high-shear homogenization using Poloxamer 188 as surfactant. The mean particle size and zeta potential to PZQ-loaded SLN were 505.6 nm ± 27.2 nm and -34.0 mV ± 1.1 mV, respectively. The nanoparticles were observed by scanning electron microscopy (SEM) revealing the presence of spherical particles. The results obtained by differential scanning calorimetry indicate that the SLN are presented in the solid state and the drug is molecularly dispersed in the lipid matrix. The entrapment efficiency and loading capacity of PZQ determined by high performance liquid chromatography were 99.06 % ± 0.3 % and 17.48 % ± 0.05 %, respectively. The SLN formation was confirmed by small angle X-ray scattering revealing the presence of a lipid lamellar structure with effective incorporation of the PZQ into particles. The stability of PZQloaded SLN stored at room temperature and at 4 ºC was investigated concerning particle size, zeta potential and entrapment efficiency / Orientador: Maria Palmira Daflon Gremião / Coorientador: Victor Hugo Vitorino Sarmento / Banca: Clovis Augusto Ribeiro / Banca: Silmara Marques Alegretti / Banca: Marco Vinicius Chaud / Banca: Marlus Chorilli / Doutor

Orientador: Maria Palmira Daflon Gremião / Banca: Beatriz Stringhetti Ferreira Cury / Banca: Silmara Marques Alegretti / Resumo: A esquistossomose é uma doença que atinge cerca de 200 milhões de pessoas no mundo todo. A alta incidência desta doença está ligada à falta de condições sanitárias, ao diagnóstico tardio e, principalmente, à falta de tratamento medicamentoso eficiente. O praziquantel é o fármaco de primeira escolha para o tratamento da esquistossomose. No entanto, falhas no tratamento com este fármaco e relatos de isolamento de S. mansoni tolerantes podem comprometer a eficiência do PZQ. Assim, o PZQ representa um fármaco em que pesquisas para melhorar as suas propriedades biofarmacêuticas são necessárias, pois apresenta baixa solubilidade em meio aquoso e biodisponibilidade baixa ou errática. O presente trabalho vê como finalidade desenvolver carreadores lipídicos nanoestruturados (NLC) contendo praziquantel empregando como sistema lipídico o monoestearato de glicerila (GMS) e o ácido oléico (AO) e como sistema tensoativo a associações de monoestearato de polioxietileno sorbitano 60 (TWEEN60), fosfatidilcolina, Poloxamer (Pluronic F-127 PLU). Os NLCs foram preparados através de dois diferentes métodos, de sonicação e alta velocidade de cisalhamento a quente. Os sistemas foram caracterizados através da avaliação dos parâmetros de distribuição de tamanho, potencial zeta, índice de polidispersidade e eficiência de encapsulação. O transporte intestinal do fármaco foi avaliado através do modelo do saco intestinal invertido. Ambos os métodos de obtenção empregados mostraram-se eficazes para o preparo dos NLCs em escala nanometrica, com índice de polidispersidade homogeneo e um... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Schistosomiasis is a debilitating disease with high misfit in the quality of people life reached about 200 million people worldwide. The high incidence of this disease is linked to poor sanitary conditions, late diagnosis, and especially the lack of effective drug treatment. Praziquantel is the drug of first choice for treatment of schistosomiasis. However, treatment failures with this drug and reports of isolation of S. mansoni tolerance may compromise the efficiency of PZQ. Thus, the PZQ represents an example in which surveys to improve the biopharmaceutical properties are needed, since it has low solubility in aqueous and low or erratic bioavailability. This work aims to develop nanostructured lipid carriers (NLC) containing praziquantel employing as lipid system the glycerin monostearate (GMS) and oleic acid (OA) as a surfactant system and some combination of polyoxyethylene sorbitan monostearate 60 (TWEEN60), phosphatidylcholine and Poloxamer (Pluronic F-127 PLU) as a surfactant system. NLCs were prepared by two different methodologies, the sonication and high shear rates to warm. The systems were characterized by determination of size distribution, zeta potential, polydispersity index and encapsulation efficiency. The intestinal transport of the drug was evaluate by using the model of inverted intestinal sac. Both methods were effective for the preparation of NLCs with an average diameter in the nanometer range, the polydispersity index indicating homogeneity of particle size and a zeta... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Este trabalho demonstrou a construção de minibibliotecas de \"Expressed Sequence Tags\" (EST) com o uso de RT-PCR de baixa estringencia e \"primer\" consenso-degenerado. Através do estudo de parâmetros críticos como concentração de sais, temperatura e velocidade de ciclagem, composição dos \"primers\" e qualidade do RNA mensageiro, foi possível padronizar um protocolo. Tal protocolo permitiu um aumento do numero de seqüências por minibiblioteca em relação a protocolos similares existentes na literatura (Dias neto et al., 1997 e 2000) sem perda de características desejáveis como amplificação preferencial do centro dos genes e nomalização das mensagens. As seqüências produzidas levaram a um significativo aumento das seqüências de EST de S. mansoni disponíveis publicamente e permitiu a detecção da existência de novos fragmentos de genes expressos na fase adulta do parasita. Neste trabalho também clonamos uma apirase de S. mansoni cuja a seqüência não havia sido descrita anteriormente. O gene possui cerca de 2,7 mil pares de bases e codifica para uma proteína de 544 aminoácidos. Esta foi expressa em sistema heterologo e utilizada para obtenção de anticorpos policlonais contra esta proteína. Utilizando estes anticorpos foi possível detectar a proteína no tegumento do parasita. / This work demonstrates the construction of EST minilibraries employing low stringency RT-PCR and consensus-degenerate primers. Through the study of critical parameters such as salt concentration, cycling temperature and ramp speed, composition of primers and quality of messenger RNA a standard protocol was obtained. Such protocol allowed an increase in the number of sequences per minilibrary in relation to similar protocols in the literature (Dias Neto et al., 1997 and 2000) without no loss in desirable characteristics such as preferential amplification of the central portion of messages and normalization of messages. The sequences produced allowed a significant increase in the publicly available EST sequences of S. mansoni and permitted discovery of new gene fragments expressed in adult stage of the life cycle of the parasite. In this work we also cloned an apyrase of S. mansoni whose sequence had never been described previously. The gene has about 2.7 kilobases and codes for a protein of 544 aminoacids. This protein was expressed in a heterologous system and was used for production of a polyclonal antibody. This antibody was used for detection of this protein in the tegument of the parasite.

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-10T14:16:22Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Erica de Souza Fernandes.pdf: 1897409 bytes, checksum: 48d8e2f5d7abdb1d4240a4928d010a16 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T14:16:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Erica de Souza Fernandes.pdf: 1897409 bytes, checksum: 48d8e2f5d7abdb1d4240a4928d010a16 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Infecções maternas pelo Schistosoma mansoni modulam a imunidade dos descendentes adultos, sendo este fato relacionado com a transferência de antígenos parasitários ou anticorpos anti-parasita in utero ou através do leite materno. Observou-se que camundongos adultos, previamente amamentados em mães esquistossomóticas, apresentaram uma potencialização na produção de anticorpos anti-ovalbumina(OA), acompanhada de altos níveis de IL-2. Em contraste, a gestação levou a um potencial imunossupressivo no descendente, com produção de IL-10 e supressão na produção de anticorpos. Neste estudo, avaliamos a produção de IL-10 e IL-2 por linfócitos e macrófagos de camundongos nascidos e/ou amamentados em mães infectadas e linfócitos Treg(FoxP3+), quando imunizados com OA. Para isso, fêmeas Swiss webster não-infectadas (30 dias) ou infectadas (20 cercárias S. mansoni), no 60º dia, tiveram seus estros sincronizados e foram acasaladas. Após o nascimento, 4 grupos foram formados: MIAI: nascidos de Mães Infectadas/Amamentados em mães Infectadas imunizados com OA+adjuvante; MI: nascidos de Mães Infectadas imunizados com OA+adjuvante; AI - Amamentados em mães Infectadas imunizados com OA+adjuvante; CONTROLE – nascidos/amamentados em mães não-infectadas imunizados com OA+adjuvante; No 8º dia pós-imunização, esplenócitos foram cultivados, ou não, com OA (24hs) e marcadas com anticorpos conjugados a fluorocromos (anti-CD3, anti-CD4, anti-B220, anti-IL-10, anti-IL-2, anti-FoxP3, anti-CD14) e analisadas por FACS. Foi observado que os animais do grupo MI apresentaram alta frequência de células B220+/IL-10+ e menor de CD4+/IL-2+. No grupo AI foi baixa a frequência de células CD3+/IL-10, mas foi observada a presença de Treg (CD4+/FoxP3+). Sendo assim, tanto a gestação como a amamentação em mães infectadas favorece a ativação de células supressoras, no entanto o aleitamento materno melhora a resposta imune anti-OA.

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-10T14:57:02Z No. of bitstreams: 2 ANDRÉ_DE_LIMA_AIRES_MED_TROP_2013.pdf: 3595336 bytes, checksum: 9680bd3e04ccae9cd957fa4b9ddb0628 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T14:57:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 ANDRÉ_DE_LIMA_AIRES_MED_TROP_2013.pdf: 3595336 bytes, checksum: 9680bd3e04ccae9cd957fa4b9ddb0628 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-02-08 / FACEPE - Fundação de Amparo à Pesquisa de Pernambuco / Uma a cada trinta pessoas é portadora de esquistossomose ao redor do mundo. Atualmente, o praziquantel (PZQ) é o único medicamento recomendado para o tratamento e controle da esquistossomose. Embora seguro e eficaz, é preocupante disponibilizar apenas uma droga para o tratamento de uma doença que afeta milhões de pessoas. Além disso, o PZQ apresenta baixa atividade contra esquistossômulos, vermes jovens e vermes fêmeas adultas e diversos estudos alertam para uma possível seleção de cepas Schistosoma-resistentes e/ou tolerantes a esse fármaco. Isso nos encoraja a contribuir com novos estudos para preservar o PZQ. Inicialmente desenvolvida como droga anti-tumoral, ß-lapachona (ß-lap), orto-naftoquinona lipofílica de ocorrência natural, análogo semi-sintético do lapachol, tem recebido muita atenção da comunidade científica devido a sua ampla atividade biológica. As naftoquinonas, incluindo β-Lap, têm se mostrado ativas contra o S. mansoni bloqueando a penetração cercariana quando aplicados topicamente e também atuando como cercaricida; inibindo a glicólise aeróbica de vermes adultos; alterando a motilidade e superfície do tegumento dos vermes e atuando como moluscicida contra adulto e massas de ovos de Biomphalaria glabrata. O presente estudo fornece, pela primeira vez, conclusões sobre as propriedades esquistossomicida in vitro e in vivo de ß-lap. Nos ensaios in vitro a mortalidade, motilidade e alterações no tegumento observadas por microscopia eletrônica de varredura foram utilizadas como parâmetros esquistossomicida. Em modelo murino avaliamos os efeitos esquistossomicida da ß-lap sobre esquistossômulo de pele, esquistossômulo pulmonar, vermes jovens e vermes adultos. In vitro a morte do parasito foi precedida por progressivo dano na superfície da membrana, caracterizado por descamação do tegumento, redução dos espículos, formação de bolhas, ruptura e aparecimento de erosão na superfície tegumentar. Além disso, intenso edema generalizado, áreas de rachaduras com superfície rugosa, sulcos e aparente fibrose, também foram visualizadas na porção anterior do verme. O número de parasitos mortos foi concentração e tempo dependentes. ß-Lap reduziu significativamente (p < 0,001) a carga parasitária total em 29,78%, 37,2%, 24,2% e 40,22%, quando administrado in vivo durante as fases de esquistossômulo de pele, esquistossômulo pulmonar, vermes jovens e vermes adultos, respectivamente. Redução significativa também foi alcançada na carga de vermes fêmeas para os mesmos esquemas \terapêuticos. Em todos os grupos, houve redução significativa no número de ovos e granulomas no tecido hepático. A intervenção, realizada durante a fase de vermes adultos, reduz o tamanho dos granulomas hepático e percentual de ovos imaturos, além de aumentar a porcentagem de ovos maduros e mortos. O emprego de novas formulações contendo ß-lap abrem perspectivas de novos estudos que visem aumentar sua atividade e elucidar seu mecanismo de ação, além de utilizá-la como protótipo para a síntese de novos derivados naftoquinônicos com potencial esquistossomicida.

Submitted by Milena Dias (milena.dias@ufpe.br) on 2015-03-11T18:54:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Rafael J. R. Padilha 2013 - Biblioteca-UFPE.pdf: 1472601 bytes, checksum: 92378dee73d227bb531c33d4c68f5d1a (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T18:54:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Rafael J. R. Padilha 2013 - Biblioteca-UFPE.pdf: 1472601 bytes, checksum: 92378dee73d227bb531c33d4c68f5d1a (MD5) Previous issue date: 2013 / Uma alternativa para identificar componentes bioquímicos necessários ao estabelecimento e manutenção do parasito no hospedeiro pode ser obtida através da citoquímica. Foi realizado um estudo citoquímico ultraestrutural do verme adulto macho de S. mansoni com 25, 45 e 130 dias. Para localizar sítios de cálcio utilizamos a técnica de Hepler e para evidenciar grupamentos aniônicos empregamos a ferritina cationizada, além do tratamento enzimático com condroitinase, tripsina e neuraminidase. Para a identificação de lipídios insaturados foi utilizada, a técnica do Tampão Imidazol e para localizar proteínas básicas empregamos às técnicas do Ácido Fosfotúngstico (PTA) e da Prata Amoniacal. A localização de sítios de cálcio mostrou-se bastante uniforme, demarcando os espaços internos, principalmente, o tecido muscular do verme, independente da sua idade. As amostras tratadas com ferritina cationizada apresentaram uma forte marcação na membrana do tegumento e glicocálice a intensidade da marcação aumentou de acordo com a idade do verme. O tratamento das amostras com a neuraminidase não alterou o padrão de marcação, enquanto com a tripsina marcou moderadamente a superfície do trematóide. Já, o tratamento com a condroitinase resultou em marcação pontual na superfície do verme. Foi observada a presença de lipídios insaturados de formato globular em toda a região tegumentar e subtegumentar do verme, sendo maior a concentração de lipídios à medida que verme ficava mais velho. Através da técnica da prata amoniacal, identificamos forte marcação dos carboidratos ácidos nas regiões tegumentares e subtegumentares do verme, com marcação do glicocálice presente apenas nos vermes com 45 dias. Já com o PTA foi identificada a presença de proteínas básicas no núcleo e nucléolo de células subtegumentares para todos os vermes, além de corpos de inclusão e espículas do tegumento nos vermes com 45 e 130 dias. O esclarecimento da composição bioquímica da região tegumentar e subtegumentar do verme adulto S. mansoni fornece dados para um melhor entendimento das relações parasitohospedeiro.

Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-03-13T16:01:18Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃo Antônio Sérgio Alves de Almeida Júnior.pdf: 886764 bytes, checksum: 8a5411f5817b0d9e4652b1183674ced5 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T16:01:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃo Antônio Sérgio Alves de Almeida Júnior.pdf: 886764 bytes, checksum: 8a5411f5817b0d9e4652b1183674ced5 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-02-25 / FACEPE / A esquistossomose é reconhecida pela Organização Mundial de Saúde, como um grave problema de saúde pública, acometendo os países da África, América Latina, Caribe e Oriente Médio. No Brasil, é encontrada a espécie Schistosoma mansoni, com estimativas de 6 a 8 milhões de indivíduos infectados. O fármaco utilizado para a quimioterapia desta parasitose é o praziquantel (PZQ). Contudo, são relatados na literatura casos de possíveis cepas de S. mansoni resistentes a esse tratamento, havendo a necessidade de desenvolver novos medicamentos mais eficazes e menos tóxicos para o tratamento da esquistossomose mansônica. O núcleo imidazolidínico é um heterociclo pentagonal, farmacóforo importante presente em vários compostos biologicamente ativos, conhecido na literatura pelo seu amplo espectro de atividades biológicas, inclusive a atividade esquistossomicida. Neste trabalho foi realizada a síntese e comprovação estrutural de novos derivados imidazolidínicos das séries LPSF/FZ e LPSF/RH e a sua avaliação esquistossomicida in vitro frente a vermes adultos de S. mansoni. Assim foram sintetizados oito novos compostos finais, onde inicialmente sintetizou-se o 1º intermediário (LPSF/FZ-1) através de uma reação de N-alquilação. Em seguida, a síntese do 2º intermediário (LPSF/FZS-1) através de uma reação de tionação. A formação dos quatro compostos finais da série LPSF/FZ (5-benzilideno-3-benzil-imidazolidina-2,4-diona) se deu através de uma reação de condensação de Knoevenagel entre o 1º intermediário e os benzaldeídos substituídos em meio etanólico. Para a formação dos quatro compostos finais da série LPSF/RH (5-benzilideno-3-benzil-4-tioxo-imidazolidin- 2-ona), utilizou-se o 2º intermediário e os benzaldeídos através de uma reação de condensação de Knoevenagel. Sete derivados imidazolidínicos (LPSF/RH-38, LPSF/RH-39, LPSF/RH-40, LPSF/RH-41, LPSF/FZ-20, LPSF/FZ-21 e LPSF/FZ- 24) foram avaliados quanto ao efeito na viabilidade celular através da linhagem de células macrofágicas J774 e atividade in vitro frente a vermes adultos de S. mansoni. Os compostos sintetizados apresentaram bons rendimentos e foram caracterizados pelas técnicas espectroscópicas (IV, RMN e Massas). Os derivados imidazolidínicos demonstraram ser menos citotóxicos quando comparados ao PZQ. Dentre os compostos testados in vitro, o LPSF/RH-38 foi o que demonstrou um melhor resultado, apresentando 100% de mortalidade na concentração de 100 μg/mL no sexto dia de observação. A presença do átomo de enxofre na posição 4 da imidazolidina nos compostos da série LPSF/RH foi um fator importante para o aumento da atividade esquistossomicida, ao contrário dos compostos da série LPSF/FZ, que apresentam um átomo de oxigênio na mesma posição. Diante dos resultados obtidos, verificamos uma atividade esquistossomicida promissora dos derivados imidazolidínicos sendo ainda necessários os testes in vivo para uma melhor avaliação destes compostos.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:53:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5200_1.pdf: 2394068 bytes, checksum: 636e2547c0bd1abae3964acd903ee19e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / O insucesso surgido na terapia da esquistossomose com o praziquantel, vem acenando para uma necessidade de se buscar novas drogas para o tratamento desta doença bem como a de se monitorar sua atividade frente cepas de Schistosoma. O objetivo deste trabalho foi de avaliar a atividade esquistossomicida in vivo do Praziquantel (PZQ) e do derivado imidazolidínico 3-(4-clorobenzil)-5-(4-nitrobenzilideno)-imidazolidina-2,4-diona (FZ-4). Foram utilizados nove grupos de camundongos Swiss, com seis animais cada, que foram infectados experimentalmente com 80 cercárias de S. mansoni (cepa BH), e tratados por via oral durante cinco dias consecutivos com PZQ nas doses de 25, 50, 100 e 200 mg/Kg e com FZ-4 nas doses de 25, 50 e 100 mg/Kg, 50 dias após a infecção. Um grupo controle foi utilizado para o PZQ e outro para o FZ-4. O praziquantel mostrou-se eficaz em reduzir a carga parasitária dos animais infectados, com redução de 100 % nas doses de 100 e 200mg/Kg. A ED50 calculada foi de 14,75mg/Kg demonstrando que a cepa BH de S. mansoni utilizada foi sensível ao Praziquantel. O FZ-4 nas doses utilizadas não mostrou ser capaz de reduzir o número de vermes nem alterar o oograma nos animais infectados, todavia na dose de 25mg/Kg apresentou significativo aumento no número de ovos inviáveis com p < 0,05. Também foi capaz de reduzir o número de ovos por grama de fezes quando analisados no sexto e décimo quarto dias após o término do tratamento. A análise histopatológica indicou que o FZ-4 promoveu redução das áreas de fibrose e proteção da mucosa intestinal da reação granulomatosa, ativando nódulos linfáticos locais. na dose de 100mg/Kg. Em conclusão a atividade esquistossomicida do praziquantel foi evidenciada, mas não foi com o FZ-4, contudo este tenha reduzido o número de ovos do parasito nas fezes

Orientador: Luiz Augusto Magalhães / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T19:20:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Seta_Lucianede_D.pdf: 7041259 bytes, checksum: 63818bb271fb5ebabc71fe09ec0a175a (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Estudamos a atração miraxonal frente à moluscos Biomphalaria glabrata e Biomphalaria tenagophila infectados ou não pelo Schistosoma mansoni, sua água de condicionamento (SCW), sua hemolinfa e seu extrato da glândula do albúmen. Em síntese, pudemos observar que moluscos B. tenagophila infectados atraíram mais miracídios de S. mansoni S1 que os moluscos não infectados. O mesmo ocorreu com sua SCW, sua hemolinfa e também seu extrato da glândula do albúmen. O mesmo não ocorreu em B. glabrata infectada por S. mansoni, que apresentou uma nítida repelência aos miracídios BH. Em B. glabrata observamos que sua SCW atraiu mais miracídios de S. mansoni BH que o próprio molusco. Moluscos B. glabrata sadios atraíram mais miracídios que os moluscos infectados. Ao compararmos a atração miraxonal frente ao extrato da glândula do albúmen de moluscos sadios e infectados com sua SCW pudemos verificar que: 1) Os componentes do extrato da glândula do albúmen seriam quimioatraentes para os miracídios de S. mansoni; 2) O extrato da glândula do albúmen atraiu mais miracídios que sua SCW, independente dessa SCW ser de moluscos sadios ou infectados por S. mansoni. Paralelamente analisamos o conteúdo de aminoácidos livres da hemolinfa, da SCW e do extrato da glândula do albúmen de B. glabrata e B. tenagophila infectadas ou não pelo S. mansoni. Na hemolinfa de B. glabrata sadia (HBgS) foram encontrados 28 aminoácidos livres, e na hemolinfa de moluscos infectados (HBgI) foram encontrados 32. Na hemolinfa de B. tenagophila sadia (HBtS) foram encontrados 28 aminoácidos livres e na hemolinfa dos moluscos infectados foram encontrados 33. Na hemolinfa de B. glabrata infectada houve um aumento geral da concentração de aminoácidos livres em relação ao encontrado na hemolinfa de moluscos sadios. Na hemolinfa de B. tenagophila infectada houve uma redução da concentração de aminoácidos livres em relação aos moluscos sadios. Na água de condicionamento (SCW) de B. glabrata sadias foram encontrados 19 aminoácidos livres, enquanto que na SCW desses moluscos, infectados por S. mansoni foram encontrados 17. Na SCW de B. tenagophila sadias foram encontrados 19 aminoácidos livres, enquanto que na SCW de B. tenagophila infectados foram encontrados 16. Não houve correspondência entre o conteúdo de aminoácidos livres da hemolinfa e da SCW. No extrato da glândula do albúmen de B. glabrata sadios foram encontrados 4 aminoácidos livres e nos moluscos infectados foram encontrados 5. No extrato da glândula do albúmen de B. tenagophila sadia foram encontrados 7 aminoácidos livres e nos moluscos infectados foram encontrados 6. Analisamos o conteúdo de aminoácidos livres como possíveis quimioatraentes para os miracídios de S. mansoni. Através da eletroforese em gel de poliacrilamida da hemolinfa verificamos haver uma redução de algumas frações proteicas na hemolinfa de B. tenagophila infectadas por S. mansoni, por volta de 45 Kda. A cromatografia de exclusão molecular da hemolinfa apresentou em ambas espécies de moluscos sadios ou infectados uma característica nítida da presença da hemoglobina e as demais frações de menor peso molecular. Tal resultado foi confirmado na eletroforese (SDS-P AGE) / Abstract: We studied the miraxonal atraction in the snails Biomphalaria glabrata and B. tenagophila, both infected with Schistosoma mansoni and non infected , the snail conditioned water (SCW), the hemolymph and the albwnen gland extract. We were able to observe that infected B. tenagophila atracted more SJ S. mansoni miracidia than the non-infected snails. The same fact was observed with the SCW, the hemolymph and the albwnen gland extract. The opposite results occur with infected B. glabrata snails, wich showed a clear repellence to the BH S. mansoni miracidia. In B. glabrata snails, we observed that their SCW atracted more BH S. mansoni miracidia than snails. Non infected B. glabrata atracted more miracidia than the infected ones. The comparison of the miraxonal atraction to the albumen gland extracts of non infected and infected snails with their SCW, showed that: 1) The components of the albumen gland extract were chemoattactive to S. mansoni miracidia; 2) The albwnen gland extracts attracted more miracidia than their SCW, regardless of the SCW being from infected or non infected snails. In addition, we analysed the presence of free amino acids in the hemolymph, SCW and albumen gland extracts of infected by S. mansoni or non infected B. glabrata and B. tenagophila. In the hemolymph of non infected B. glabrata (HBgS), we found 28 free amino acids, and in the hemolymph of snails infected with S. mansoni (HBgI) we found 32. In the hemolymph of infected B. glabrata, there was a general increase in concentration of free arnino acids when compared to the values observed in the hemolymph of non infected snails. In the snail conditioned water (SCW) of non infected B. glabrata (WBgS) we found 19 free amino acids, while in the SCW of snails infected with S. mansoni, on1y 17 amino acids were found. In the SCW of non infected B. tenagophila 19 free amino acids were found, whereas in the the SCW of infected B. tenagophila 16 free amino acids were found. No relationship between the content of free amino acids of the hemolymph and SCW was detected. In the albumen gland extract of non infected B. glabrata 4 free amino acids were found and 5 in the infected snails. In the albumen gland extract of non infected B. tenagophila we found 7 free amino acids and 6 in the infected snails. Free amino acids were tested as possible chemoattratents to the S.mansoni miracidia. Through polyacrilamide gell electrophoresis (SDS-P AGE) we verified a reduction of some protein fractions with molecular weight in the range of 45 Kda, in the hemolympph of B. tenagophila infected with S. mansoni. The molecular exc1usion cromatography of the hemolymph of both species of snails showed a c1ear presence of haemoglobin and other fractions with lower molecular weights. This result was confirmed by the electrophoresis (SDS-P AGE) / Doutorado / Parasitologia / Doutor em Ciências