FROTA, Sabrina Menezes da. Utilização de métodos coproscópico e sorológico na detecção de casos de esquistossomose mansônica em área de baixa endemicidade no estado do Ceará-Brasil. 2008. 85 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-01-02T13:28:11Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_smfrota.pdf: 774673 bytes, checksum: ddd7f153d2e5b247548fd1db3bbc0148 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T16:27:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_smfrota.pdf: 774673 bytes, checksum: ddd7f153d2e5b247548fd1db3bbc0148 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T16:27:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_smfrota.pdf: 774673 bytes, checksum: ddd7f153d2e5b247548fd1db3bbc0148 (MD5) Previous issue date: 2008 / Schistosomiasis is a disease caused by parasites of the genus Schistosoma, killing hundreds of thousands of people each year worldwide.. The Schistosoma has several species of clinical interest. In our country the cause of Schistosomiasis is the S. mansoni and the main reservoir host and the parasite is starting with the man that the eggs are removed in feces. The snails are the intermediate host. The main species of snails host of Schistosoma mansoni in Brazil are: Biomphalaria glabrata, Biomphalaria tenagophila and Biomphalaria straminea. The third kind in the predominant in Ceará. The disease has presence in over 74 countries (virtually all underdeveloped). Around state 500 to 600 million people are at risk of being affected and more than 200 million are infected every year, and this is mainly due to lack of sanitation and health education. To the best prevention of this disease is to be made the diagnosis and treatment of the population to avoid targeting comes in contact with water containing snails (ponds, lakes, rivers etc). It is a disease that can develop into serious complications, possibly leading to death according to extensive fibrosis caused by the presence in liver parenchyma of the Schistosoma mansoni eggs, forming granulomas. So the main objective of this study was to develop a strategy to increase effectiveness in identifying patients positive for Schistosomiasis in areas of low endemic in the state of Ceara, using a protocol combining a technique in which antibodies (IgG - ELISA) with examinations of sequential stool. This work was followed by steps, in which the first of the 287 patients who underwent the method of Kato-Katz, 11 (3.8%) showed positive results for S. mansoni. On the other helminths are: Trichuris trichiura 25 (8.7%), A. lumbricoides 19 (6.6%) and Hookworms 15 (5.2%). For the tests, ELISA, 97 (33.8%) were positive. All patients who had eggs in the feces were positive in the serologic test. In this group are included the 11 that were positive in feces analysis (Figure 1). From patients with Elisa positive and negative Kato-Katz, only 56 handed the three samples of stool for a second analysis Of these, 14 (25%) were positive for Schistosoma mansoni. Of the 42 patients who remained negative, 22 responded in the questionnaire that had never schistosomiasis but never received treatment for the disease. Our present study was to not only determine the prevalence of the disease in the municipality, and to identify the largest possible number of infected individuals, the serological method was applied in order to accommodate the population living in those areas of risk of transmission or at risk of infection, mainly by domestic and leisure activities. In view of our results, we believe, in agreement with other authors, that using the ELISA technique combined with repeated analysis of at least 5 simples of feces, it becomes easier to diagnose patients positive for schistosomiasis, thus improving the hypothesis that probably in the near future, being able to combine parasitological and sorological in the programme for the control of schistosomiasis, an important factor for detection of new carriers of the disease. / A Esquistossomose é uma doença causada por parasitos do gênero Schistosoma matando centenas de milhares de pessoas por ano no mundo. O Schistosoma tem várias espécies com interesse clínico. No Brasil o causador da Esquistossomose é o S. mansoni e o principal hospedeiro e reservatório do parasito é o homem sendo a partir desse que os ovos são eliminados nas fezes. Os hospedeiros intermediários são os caramujos. As principais espécies de caramujos hospedeiros do Schistosoma mansoni no Brasil são: Biomphalaria glabrata, Biomphalaria tenagophila e Biomphalaria straminea. Sendo a terceira espécie a predominante no Ceará. A doença tem presença constante em mais de 74 países (praticamente todos subdesenvolvidos). Cerca de 500 a 600 milhões de pessoas correm riscos de serem atingidas e mais de 200 milhões são infectadas a cada ano, e isso se deve principalmente a falta de saneamento básico e educação sanitária. Para a melhor profilaxia desta doença, deve ser feito o diagnóstico e o tratamento da população, orientando para evitar entrar em contato com águas que contenham caramujos (açudes, lagos, lagoas, rios etc). É uma doença que pode evoluir para complicações graves, eventualmente levando ao óbito em função de extensa fibrose decorrente da presença em parênquima hepático de ovos do Schistosoma mansoni, formando granulomas. O principal objetivo desse estudo foi desenvolver uma estratégia para aumentar a eficácia na identificação de pacientes infectados com S.mansoni, em área de baixa endemicidade, no Estado do Ceará, usando um protocolo combinando uma técnica sorológica (IgG – ELISA) com exames de fezes seqüenciais. Esse trabalho foi realizado em etapas, no qual na primeira, dos 287 indivíduos que realizaram o método de Kato-Katz, 11 (3,8%) apresentaram resultados positivos para S. mansoni. Com relação aos outros helmintos foram encontrados: Trichuris trichiura 25 (8,7%), Ascaris lumbricoides 19 (6,6%) e Ancilostomideos 15(5,2%). Em relação ao testes de ELISA, 97 (33,8%) foram positivos. Todos os pacientes que apresentaram ovos nas fezes foram positivos no teste sorológico. Neste grupo estão inclusos os 11 que foram positivos na coproscópia. Dos pacientes com ELISA positivo e Kato-Katz negativos, apenas 56 entregaram as três amostras de fezes para uma segunda análise coproscópica. Desses, 14 (25%) foram positivos para Schistosoma mansoni. Dos 42 pacientes que continuavam negativos, 22 responderam no questionário que nunca tiveram esquistossomose como também nunca receberam tratamento para a doença. O presente estudo não trata só de determinar a prevalência da doença no município, e sim de identificar o maior número possível de indivíduos infectados, usando o método sorológico que foi aplicado de forma a contemplar a população residente em áreas de risco de transmissão ou expostas ao risco de infecção, principalmente por atividades domésticas e de lazer. Diante destes resultados, acredita-se, em concordância com outros autores, que utilizando a técnica de ELISA combinado com análises repetidas de no mínimo 5 lâminas de fezes, torna-se mais fácil diagnosticar pacientes com a esquistossomose, melhorando assim a hipótese que provavelmente em um futuro próximo, seremos capazes de combinar métodos parasitológicos e sorológicos no programa de controle da esquistossomose, um fator importante para detecção de novos portadores da doença.

LEAL, Joames Kauffimann Freitas. Diagnóstico da esquistossomose mansoni em área de baixa endemicidade através do POC-CCA : comparação com outros métodos e avaliação pós-tratamento. 2014. 94 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-09T15:31:37Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_jkfleal.pdf: 1375247 bytes, checksum: 86a7095d3b51d1061a42cbd65c20b9fa (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-09T15:48:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_jkfleal.pdf: 1375247 bytes, checksum: 86a7095d3b51d1061a42cbd65c20b9fa (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-09T15:48:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_jkfleal.pdf: 1375247 bytes, checksum: 86a7095d3b51d1061a42cbd65c20b9fa (MD5) Previous issue date: 2014 / The detection of circulating antigens has been an alternative to the problems with the diagnosis of schistosomiasis, the disease that affects approximately 200 million people in 74 countries, worldwide. A newly developed immunoassay to detection of CCA (POC-CCA, point- of-care) in urine have shown high sensitivity and specificity for the schistosomiasis study . However, the most of all studies was carryed in areas of high endemicity in Africa, and there is a need for more studies to verify this test’s diagnostic accuracy in low endemic areas and their geographical differences. Our aim was to evaluate the effectiveness of POC-CCA as diagnostic of schistosomiasis, comparing it with a parasitological method and a linked immunosordent method and to evaluate how the POC-CCA behaves after chemotherapy, in residents of an area of low endemicity. The study was conducted for six months in Banananeiras, a village in Capistrano, Ceará, Brazil. Stool (Kato-Katz), blood (SWAP-ELISA) and urine (POC-CCA) were used to perform the tests. The community had 297 inhabitants, 285 of these agreed to participate in the study, and 258 (190 adults and 68 children) gave the three samples. Before treatment, the prevalence of S. mansoni, as determined by triplicate Kato-Katz, POC-CCA considering “P=trace”, POC-CCA considering “N=trace” and SWAP-ELISA was 1,6%, and 40,7%, respectively. The Kato-Katz method had a sensitivity lower than was expected and SWAP-ELISA showed up discordant results. Nevertheless, the results of our study show high sensitivity and specificity of POC-CCA, however, the gold standard chosen for the comparisons may have influenced the results. The patients were treated and re-evaluated by immunoassay, three and six weeks after treatment. POC-CCA used in the post-treatment evaluation and when we compared “P=trace” against “N=trace”, we found a higher percentage of individuals that became negative, considering “P=trace”; although all adults had negated, considering N=trace. Although, six weeks proved to be the best time for reassessment after treatment. / A detecção de antígenos circulante vem se mostrando uma alternativa para os problemas com o diagnóstico da esquistossomose, doença que acomete cerca de 200 milhões de pessoas em 74 países. Um teste imunocromatográfico recém-desenvolvido para a detecção de CCA (POC-CCA, point-of-care) na urina mostrou-se de alta sensibilidade bem como de alta especificidade para o estudo da esquistossomose. A maioria dos estudos ocorreu em zonas de alta endemicidade, na África, e há a necessidade de mais trabalhos para se verificar a precisão diagnóstica do teste em zonas de baixa endemicidade para a esquistossomose e suas diferenças geográficas. Nosso objetivo foi avaliar a eficácia deste kit de diagnóstico para esquistossomose mansoni que detecta o CCA (antígeno Catódico Circulante), em comparação com um método parasitológico e um imunológico, e avaliá-lo como diagnóstico após tratamento quimioterápico, em moradores de uma área de baixa endemicidade. O estudo foi realizado na localidade de Bananeiras, Capistrano, Ceará num período de cerca de seis meses desde a entrada na comunidade até o resultado da 2ª reavaliação. Para a realização dos testes foram usados fezes (Kato-Katz), sangue (SWAP-ELISA) e urina (POC-CCA). A comunidade é composta por 297 habitantes, 285 destes aceitaram participar do estudo e 258 entregaram as três amostras - 118 indivíduos do sexo masculino e 140 do sexo feminino. enquanto que 4 indivíduos (1,6%) se apresentaram positivos segundo o método de Kato-Katz e 105 (40,7%) reativaram no ELISA-SWAP. A técnica POC-CCA é um método prático e rápido, assim se tornando uma ferramenta útil em campo. Os resultados obtidos em nosso estudo mostram alta sensibilidade e especificidade do método, entretanto o padrão-ouro escolhido para as comparações pode ter influenciado os resultados. Os pacientes foram tratados e reavaliados pelo teste imunocromatográfico, três e seis semanas após o tratamento. Utilizado o POC-CCA na avaliação pós-tratamento e comparando T=P com T=N, verificamos que um maior percentual de indivíduos negativou, quando T=P; embora todos os adultos tenham negativado, quando T=N.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:49:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4428_1.pdf: 1859764 bytes, checksum: f95857a109be3e58cbeb1a51410257ae (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Foram obtidos oito novos derivados bioisósteros das séries 5- benzilideno-3-(4-nitro-benzil)-2-tioxo-imidazolidin-4-ona 10a-d e 5-benzilideno- 3-[2-oxo-2-(4-nitro-fenil)-etil]-2-tioxo-imidazolidin-4-ona 12a-d. A síntese foi realizada a partir da 2-tioxo-imidazolidin-4-ona, constando de reações de adição do tipo Michael na posição cinco do anel imidazolidínico com os ésteres 2-ciano-fenil-acrilatos de etila, posteriormente foram submetidos à reação de substituição na posição três do anel imidazolidínico, utilizando cloretos ou brometos de benzila ou fenacila substituídos. As respectivas estruturas químicas de todos os compostos, inclusive intermediários, foram comprovadas por espectroscopia de infravermelho e de ressonância magnética nuclear de hidrogênio. Foram realizados testes para a avaliação da atividade esquistossomicida frente a vermes adultos de Schistosoma mansoni (Cepa BH) dos compostos sintetizados, os quais não apresentaram atividade

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:49:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4430_1.pdf: 1889296 bytes, checksum: d98f903bcb7108255f9e62b636ba0fe7 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Aos núcleos imidazolidínico e tiazolidínico, devido à sua reatividade química e conseqüente afinidade, são atribuídos diversas atividades biológicas, inclusive antiparasitário, fato que direcionou nossas pesquisas na busca de novos agentes esquistossomicidas. Assim, preparou-se novos derivados 5-arilazo-3-benzil-4-tioxoimidazolidin- 2-ona 8a-d e 5-arilideno-3-(4-bromo-benzil)-tiazolidina-2,4-diona 15a-b. A substituição em posição três do anel heterocíclico, em meio alcalino, foi realizada pela utilização do cloreto de benzil substituído para o núcleo imidazolidínico e do brometo de 4-bromo-benzil para o núcleo tiazolidínico. A 3-benzil-imidazolidina-2,4- diona sofreu uma tionação na carbonila da posição quadro. Em seguida, a substituição em posição cinco dos derivados tiazolidínicos foi realizada por uma adição do tipo Michael da 3-(4-bromo-benzil)-tiazolidina-2,4-diona com derivados 3- aril-2-ciano-acrilatos de etila substituídos. Por sua vez, a 3-benzil-4-tioxoimidazolidin- 2-ona sofreu uma reação de acoplamento diazo com anilinas substituídas. As estruturas químicas dos compostos sintetizados foram devidamente comprovadas por espectroscopia de infravermelho e de ressonância magnética nuclear de hidrogênio. Os derivados testados arilazo-imidazolidínicos 8a, 8b e 8c apresentaram atividade biológica frente a vermes adultos de Schistosoma mansoni (Cepa BH), destacando-se o derivado 5-(4-flúor-arilazo)-3-benzil-4-tioxo-imidazolidin- 2-ona 8b, nas doses compreendidas entre 10 a 80 μg/mL, que levou a uma taxa de 100% de mortalidade em 24 horas após o inicio do tratamento, sendo o melhor resultado em relação aos outros derivados

Silva, Silvana de Fátima Ferreira da, também é conhecida em citações bibliográficas por: FERREIRA, Silvana. SANTANA, Elisabeth Malagueño, também é conhecido(a) em citações bibliográficas por: MALAGUEÑO, Elisabeth / Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-27T21:25:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Silvana de Fátima Ferreira da Silva.pdf: 2029625 bytes, checksum: d3cec5ea23400e5de6bfe23f551e7a4c (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-05T18:57:26Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Silvana de Fátima Ferreira da Silva.pdf: 2029625 bytes, checksum: d3cec5ea23400e5de6bfe23f551e7a4c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-05T18:57:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Silvana de Fátima Ferreira da Silva.pdf: 2029625 bytes, checksum: d3cec5ea23400e5de6bfe23f551e7a4c (MD5) Previous issue date: 1995-05-02 / CAPES / Células da hemolinfa de molusco da espécie Biomphalaria straminea (B. straminea), não infectados (controle) e infectados (amostra) com miracídio de Schistosoma mansoni da linhagem SLM (São Lourenço da Mata – Pernambuco, Brasil), foram analisadas pela sua morfologia e composição química. Moluscos B. straminea foram submetidos à punção céfalo-podal para coleta da hemolinfa, e o número de células circulantes foi avaliado. Em Biomphalaria straminea não infectado foram encontrandas 141±56,19 células/mm³, enquanto em moluscos submetidos à infecção foi verificado um aumento para 357±170,05 células/mm³ duas horas após exposição aos miracídios, número este significativamente superior ao controle, conforme testes estatísticos realizados. A morfologia celular foi analisada pela microscopia ótica e eletrônica de transmissão, e foram encontrados dois tipos celulares: tipo I – hialinócitos e tipo II – granulócitos. A composição química da célula para detectar a presença de glicogênio foi revelada pela técnica do PAS (Periodic acid-Schiff ) e microscopia eletrônica de transmissão, apresentando resultado positivo. As substâncias secretadas foram analisadas pela técnica do Alcian Blue, apresentando resultado negativo. / Hemolymph cells of the mollusk of the Biomphalaria straminea (B. straminea) species, uninfected (control) and infected (sample) with Schistosoma mansoni miracidium of the SLM lineage (São Lourenço da Mata – Pernambuco, Brazil), were analyzed for their morphology and chemical composition. B. straminea mollusks were submitted to a cephalopodal puncture to collect hemolymph, and the number of circulating cells was evaluated. In uninfected Biomphalaria straminea 141±56,19 cells/ mm³ were found, while in mollusks submitted to infection an increase to 357±170,05 cells/mm³ was observed two hours after exposure to miracidia, a number significantly higher than the control number, according to statistical tests. Cell morphology was analyzed by optical and transmission electron microscopy, and two cell types were found: type I – hyalinocytes, and type II – granulocytes. The chemical composition of the cell to detect the presence of glycogen was revealed by the Periodic acid-Schiff (PAS) method and transmission electron microscopy, presenting a positive result. The secreted substances were analyzed using the Alcian Blue method, presenting a negative result.

Orientador: Eliana Maria Zanotti-Magalhães / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T21:53:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bruno_TreziaIedaBallerini_M.pdf: 1532084 bytes, checksum: 5368f597f8d6c02acebeb7a1068b72f9 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Com o objetivo de verificar ocomportamento do s. manson_ das linhagens BH eSJ em B.glabrata eB. Tenagophila tratadas com açúcar foram constituídos 2grupos experimentais BH e SJ, subdivididos em subgrupos que receberam os seguintes tratamentos: A - moluscos tratados com açúcar e expostos ao s. manson_; Bmoluscos tratados com açúcar enão expostos ao S. mansoni; Cmoluscos tratados com água declorada eexpostos ao S. mansoni; D - moluscos tratados com água declorada e não expostos ao S. mansoni. Os moluscos dos subgrupos A e B foram tratados com solução de açúcar UNIÃO à0,01% eos moluscos dos subgrupos C e D com água declorada. Após uma semana de tratamento foram submetidos à infecção com as respectivas 1 inhagens de S. mansoni BH e SJ. Os seguintes parâmetros foram observados: Taxa de penetração de miracídios; Período pré-patente de eliminação de cercárias; Taxa de infecção dos moluscos; Taxa de mortalidade dos moluscos; Produtividade de cercárias; Capacidade de penetração das cercárias em camundongos.De acordo com a análise estatística dos dados, observamos que a sacarose não mostrou efeito significante na taxa de infecção dos moluscos B. glabrata eB. tenagophila e na produção de cercárias. Em contrapartida asacarose mostrou efeito significante em diminuir asobrevi da dos moluscos infectados, sendo que a mortalidade foi mais acentuada no período que antecedeu a eliminação de cercarias ou durante este período, oque pode ter interferido nas taxa de infecção e produção de cercárias. A sacarose teve um papel marcante em contribuir para uma maior capacidade de penetração das cercarias em camundongos Swiss / Mestrado / Parasitologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Eliana Maria Zanotti-Magalhães / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T11:57:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_MariaLecticiaPereiraSiqueirade_M.pdf: 8895119 bytes, checksum: d492f3563725d74e2b72646217afc80e (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: A suscetibilidade de moluscos hospedeiros do Schistosoma mansoni é controlada geneticamente. O objetivo deste trabalho foi avaliar a resposta imune celular em Biomphalaria tenagophila selecionada geneticamente para o caráter resistência ao Schistosoma mansoni da linhagem SJ procedente do Vale do Rio Paraíba do Sul. Avaliamos nas gerações parental, FI e F2 as taxas de infecção e mortalidade, o número de amebócitos na circulação lacular, a atividade fagocitária dos amebócitos frente à hemácias formolisadas de carneiro e a reação amebocitária nos tecidos em tomo das larvas do trematódeo. O processo de seleção por autofecundação de moluscos resistentes, não implicou em alteração significativa da taxa de infecção, entretanto nossos resultados mostraram que a seleção genética para o caráter resistência aumentou os índices de sobrevivência dos moluscos infectados (P > 0.0001). Uma forte proliferação celular ocorreu para neutralizar a presença das larvas que se caracterizou pelo aumento significativo do número de amebócitos na circulação tanto de granulócitos como hialinócitos (P > 0.0001). A atividade fagocitária dos amebócitos não foi diferente nas três gerações. Uma intensa reação amebocitária ocorreu nos tecidos da região céfalo podal nas primeiras horas pós infecção demonstrando a resistência do hospedeiro à infecção pelo Schistosoma mansoni. Concluímos que no processo de resistência apresentado por Biomphalaria tenagophila ao Schistosoma mansoni da linhagem SJ, o aumento do número de amebócitos na circulação foi fator decisivo, assegurando maior sobrevivência dos planorbídeos / Mestrado / Mestre em Ciências

Orientadores : Vanderlei Rodrigues, Luiz Candido de Souza Dias / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T23:40:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melo_ClaudiaMourade_D.pdf: 21271243 bytes, checksum: e521441608321ceb6dde5db11e7107b2 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo / Resumo: Variações fenotípicas intra e inter-populacionais de Schistosoma mansoni ocorrem em várias áreas geográficas. A heterogeneidade genética do parasita contribui para a observada variação fenotípica na interação parasita-hospedeiro, desempenhando um importante papel na epidemiologia da doença. A diferença fenotípica mais estudada, no entanto, é a resposta a quimioterapia, visto que ela é bastante relevante para o controle da esquistossomose. Com o objetivo de observar e avaliar a variabilidade genética entre linhagens brasileiras com características distintas e inferir relações filogenéticas entre elas, o DNA foi isolado de um " pool " de vermes das linhagens BH, SJ1, SJ2, 000, LE e MAP. O RAPD foi processado com 5 iniciadores com seqüências de nucleotídeos aleatórias. O RAP-PCR , por sua vez, foi realizado com o intuito de observar a variabilidade em regiões codificadoras do genoma. Os dois métodos se mostraram capazes de distinguir linhagens gerando marcadores moleculares intra-específicos. Um desses marcadores foi seqüenciado e mostrou alta homologia de nucleotídeo (99%) com uma sequência humana e 89% com gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase humana, proteína já correlacionada com a indução de resistência a reinfecção com S. mansoni e S. haematobium. O marcador G400-9 mostrou alta homologia de nuc1eotídeo, confirmada pela alta homologia de aminoácido com transposase de TNIO. Outro marcador sequenciado foi o CBH300-IO que apresentou alta homologia de nucleotídeo com o gene do ribossomo 28S. Outros marcadores interessantes foram observados na linhagem tolerante 000: 0uh250-IO e 0uh200-II, com os iniciadores RdIO (GGGTAACGCC) e RdII (GTGACTGCAG). Não detectamos marcadores específicos para a linhagem MAP, resistente ao oxamniquine, e sim um perfil eletroforético distinto com o iniciador Rd7 (TGCCGAGCTG). Na construção de árvores filogenéticas Neighbor-joining, quando foram inferidas as áreas geográficas das linhagens, obteve-se um dendograma formado por dois grupos distintos, um de linhagens paulistas e outro de mineiras. O dendograma obtido quando inferiu-se o tipo de hospedeiro intermediário revelou a formação de 3 grupos. A linhagem LE, mantida em laboratório sem retro-alimentação, pertence a um grupo externo bastante diferente dos demais. As linhagens BH, SJ1 e SJ2 foram agrupadas entre si, possivelmente em função do fluxo gênico existente entre elas, e a linhagem 000 foi estabelecida em um terceiro grupo. Estes dois últimos grupos (um formado pelas linhagens BH, SJ1 e SJ2, e outro pela linhagem 000), com linhagens de manutenção recente em laboratório ou com retroalimentação, são mais relacionadas entre si que com a LE. Acreditamos que a maior distância genética desta linhagem em relação as outras se deva a sua longa manutenção em laboratório com fixação de determinados alelos. As relações filogenéticas observadas nas árvores Neighborjoining corroboram as características fenotípicas distintas das linhagens e estas podem ser distinguidas e diagnosticadas por marcadores moleculares obtidos por RAPD e RAP-PCR / Abstract: Phenotypical variation intra and inter-populational of Schistosoma mansoni ocurred in several geographic areas. The genetic heterogenicity of the parasite contributes for phenotypic variation in the parasite-host interaction, representing an important role in the disease epidemiology. The more studied phenotypic difference, however, is the response to chemotherapy, so that is very relevant in the schistosomiasis contro!. The DNA was isolated fiom a pool of worms of the strains: BH, SJ1, SJ2, 000, LE and MAP, with the finality to observe and evaluate the genetic variability among brazilian strains, with different characteristics, and infer phylogenetic relations among them. The RAPD was processed with 5 random primers. The RAPD-PCR was realized with the fmality to observe the variability in codificators regions of genome. The two methods showed to be able to distinguish, generating molecular markers of strains. One of this markers was sequenced and showed high homology of nucleotides (99%) comparing to a human sequence and 89% with human glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, protein already relationed to the induction of resistance to the reinfection with S. mansoni and S. haematobium. The marker G400-9 showed high homology of nucleotides confirmaded for high homology of amino acid with transposase of TNI0. Other marker (CBH300-l0) was sequenced and apresented high homology with ribosomal 28 S gene Other interesting markers were observed in tolerant strain 000: 000250-10 and 000200-11, with the primers RdlO (GGGTAACGCC) and Rdll (GTGACTGCAG). Specific markers were not detected by us for MAP strain, resistant to oxamniquine, and a distinct PCR product profile with the primer Rd7 (TGCCGAGCTG). In the construction of phylogenetic trees Neighbor-joining, afier the geographic areas of strains were infered, a dendogram was obtained formed by two differents groups, one of paulistas strains and another of mineiras. When the type of intermediate host was infered the obtained dendogram revealed the formation of three groups. The LE strain kept in laboratory without retro-feed, belong to a external group very different fiom the others. The BH, SJ1 and SJ2 strains were grouped among them, possibly, in fimction of the genic flux existent among them, and the strain 000 was established in other group. This last two groups, with recent laboratory maintenance strains or with retro-feed, are more related among them, than to LE strain. We believed that the major genetic distance from this strain in relation to the others should be because the long maintenance in laboratory with the establishment of the allels. The phylogenetic relations observed in trees Neighbor-joining corroborate the different phenotypic characteristics of strains and this should be distinguished and diagnosed by molecular markers obtained by RAPD and RAP-PCR / Doutorado / Doutor em Parasitologia

Orientador : Luiz Candido de Souza Dias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T14:43:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soares_LannyCristinaBurlandy_M.pdf: 679101 bytes, checksum: d1ba7ad762471ada25462b2d10c06367 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O controle da esquistossomose mansoni, iniciado em 1980 no município de Pedro de Toledo, área de baixa endemicidade no Estado de São Paulo, foi avaliado em 1998 por meio deste estudo. Têm-se demonstrado que nesta área, com pequenos índices de infecção, a sensibilidade dos métodos parasitológicos é falha devido ao reduzido número de ovos nas fezes, subestimando a prevalência. Os métodos sorológicos de alta sensibilidade e especificidade permitem obter coeficientes de prevalência mais próximos do real. Por amostragem aleatória, 12% (894) dos moradores do município forneceram amostras clínicas, sendo 749 amostras de fezes e 591 de sangue da polpa digital, em papel de filtro. As técnicas utilizadas para diagnóstico de infecção pelo Schistosoma mansoni foram o método parasitológico de Kato-Katz para exame de fezes e o método sorológico de imunofluorescência indireta para detecção de anticorpos IgG (RIF-IgG) e IgM (RIF-IgM). O coeficiente de prevalência do método parasitológico foi de 1,6%, com intensidade de infecção média de 40,9 ovos por grama de fezes (opg). As reações sorológicas apresentaram entre si um coeficiente de concordância considerado bom (Kappa = 0,84), com prevalências de 33,2% para a RIF-IgG e de 33,5% para a RIF-IgM. A RIF-IgM se mostrou um teste sorológico seguro e prático, constituindo importante instrumento na avaliação do perfil epidemiológico de populações em área de baixa endemicidade. Existiu uma acentuada discrepância entre a prevalência pelo método parasitológico em relação aos imunológicos, sendo a prevalência sorológica cerca de 20 vezes maior. Estes resultados sugerem a importância da inclusão dos métodos sorológicos em inquéritos epidemiológicos, na complementação dos achados parasitológicos, no diagnóstico e tratamento da parasitose. Com estas medidas, os indivíduos falso-negativos para o exame de fezes poderiam ser diagnosticados e tratados, diminuindo fontes de infecção em potencial. Comparando-se os dados de 1980 com os obtidos no presente estudo (1998) verifica-se um deslocamento na curva de distribuição das prevalências quanto à faixa etária, de maior prevalência no grupo de 10 a 19 anos em 1980 para 25 a 29 anos em 1998. Os coeficientes obtidos em 1980 de 22,8% (58,5 opg de fezes) e 55,5%, respectivamente pelo método de Kato-Katz e RIF-IgG, em relação aos resultados deste estudo, demonstram queda significativa nos coeficientes de prevalência, indicando efetividade das medidas de controle. Todavia, existe um residual de transmissão, demonstrando a necessidade de um esforço conjunto na ampliação das medidas de controle e vigilância da esquistossomose mansoni / Abstract: In 1980, schistosomiasis mansoni control measures were introduced in the municipality of Pedro de Toledo, a low endemic region in the State of Sao Paulo and this study was conducted, in 1998, to evaluate the program. Flaws were detected in the sensitivity of the parasitological methods used in this area of low infection indices due to the reduced number of eggs in the feces, which resulted in underestimated prevalence indices. Highly sensitive-specific serological methods provide prevalence indices that are closer to reality. A random sample of 12% of the residents in the municipality provided clinical samples that consisted of 749 stool samples and 591 blood samples from the finger on filter paper. The Kato-Katz parasitological technique for stool examinations and the serological techniques of indirect immunofluorescence for the detection of IgG (RIF-IgG) and IgM (RIF-IgM) antibodies were used in the diagnostics of mansoni schistosomiasis. The prevalence index obtained by the parasitological method was 1.6% with an infection intensity of 40.9 eggs per gram of feces (epg). Good concordance was shown by the serological reactions (Kappa = 0.84) with a prevalence of 33.2% for the RIF-IgG and 33.5% for RIF-IgM. The serological test RIF-IgM proved to be safe, practical and an important tool for assessing the epidemiological profile of a population in a low endemic area. A clear discrepancy was observed between the prevalence indices obtained by the parasitological and immunological methods, as the serological prevalence was 20 times greater than the parasitological prevalence. These results demonstrated the importance of incorporating serological techniques in epidemiological surveillance, for complementing parasitological findings and in the diagnosis and treatment of parasitoses. These techniques help in diagnosis and treatment of individuals who are false negative for stool examinations, which in turn reduces potential infection foci. When the prevalence distribution curve according to age group for 1980 was compared with that of this study (1998), a transference was observed of the highest prevalence, which was in the 10 -19 year old age group (190) to the 25 - 29 year old age group (1998). In 1980, the indices obtained by the Kato- Katz and RIF-IgM methods were 22.8% (58.5 epg of feces) and 55.5%, respectively. When compared with the results obtained by this study, a significant fall was observed in prevalence indices that indicated the effectiveness of the control measures. Nevertheless, the occurrence of residue transmission demonstrates the need for a joint effort in extending control and surveillance measures related to schistosomiasis mansoni / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Luiz Candido de Souza Dias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:10:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_RosanaAparecidaTrevisan_M.pdf: 29716650 bytes, checksum: 98dd518aeb2565fc09166e5ef8722ea0 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O estudo foi realizado no município de Pedro de Toledo, situado no Vale do Rio Ribeira de Iguape, São Paulo. A população estudada foi escolhida de forma aleatória e depois caracterizada quanto à área de moradia, sexo e idade. Tive-se o interesse em estimar a soroprevalência para toxocaríase e esquistosomose mansoni e prevalência de parasitos intestinais. A toxocaríase é uma zoonose comum em cães e gatos e é causada por Toxocara canis. A prevalência para toxocaríase foi revelada pela técnica imunoenzimática de ELISA, com uso de antígeno proveniente de larvas de Toxocara canis contra anticorpos anti-Toxocara canis IgG. A coleta de sangue foi realizada em papel de filtro, pela técnica de puntura digital, sendo todas as amostras testadas em duplicata. A técnica utilizada para diagnóstico da infecção por Schistosoma mansoni foi a reação de imunofluorêscencia indireta IgM para a detecção de anti- Schistosoma mansoni. As amostras de fezes foram examinadas pelos métodos parasitológicos de Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ e Kato-Katz. A análise de dados indicou que a prevalência para Toxocara canis foi mais elevada (26,8%) em indivíduos mais jovens. Também estava mais associada em moradores da área urbana (50,7%). Quanto ao sexo dos examinados a toxocaríase mais prevalente nos homens (43,2%). Neste estudo, a prevalência sorológica para a esquistOssomosefoi de 19,3%. Nos exames de fezes foram registrados índices de 2,0% no Kato-Katz e 0,9% Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿. A média geométrica foi de 24 ovos por grama de fezes, indicando intensidade leve de infecção. Houve diferença acentuada entre as prevalências sorológica e parasitológica. A análise de dados encontrou que a prevalência geral para helmintos intestinais foi de 43,6% e de 44,3% respectivamente para as técnicas de Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ e Kato-Katz. Os helmintos mais prevalentes foram Ascaris lumbricoides (37,6%), Trichuris trichiura (17,3%) e ancilostomatídeos (10,4%). As helmintíases foram mais freqüentes na zona rural. Neste estudo relatou-se diferença significativa no diagnóstico da infecção causada por Trichuris trichiura pelos métodos de Kato-Katz 17,3% e 7,8 no Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿. Devido a essa diferença, compararam-se amostras positivas e negativas do método Coprotes 'MARCA REGISTRADA¿ com o número de ovos por grama de fezes (opg) obtido pelo Kato-Katz. Quando o Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ era negativo foi verificado que a intensidade de infecção foi leve. Quanto aos protozoários intestinais o índice registrado foi de 26,1%, segundo técnica de Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿. Porém quando consideradas apenas as espécies patogênicas (Giardia intestinalis 10,4%, Blastocystis hominis 4,8% e Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar, 1,3%) a prevalência foi menor (14%). O protozoário intestinal mais prevalente foi a Entamoeba coli 12,6%. Desde 1980 é desenvolvido na região programa de controle para a infecção causada por Schistosoma mansoni, visto que a região ainda é considerada de baixa endemicidade. Apesar da não erradicação da infecção os coeficientes de prevalência tem se mostrado cada vez menores, embora exista um residual de transmissão senso confirmado pelo exame parasitológico. Neste estudo encontram-se altos índices para toxocaríase e parasitoses intestinais o que comprova a necessidade de medidas de controle e vigilância sanitária. Também seria importante alertar a população com medidas de prevenção contra as infecções / Abstract: This study was conducted in Pedro Toledo, Vale do Rio Ribeira de Iguape, State of Sao Paulo. The population sample was randomly chosen and then classified according to the residential area, sex and age. Our purpose was to estimate the seroprevalence of toxocariasis and schistosomiasis mansoni as well as the prevalence of intestinal parasites. Toxocariasis is a zoonosis caused by Toxocara canis and is commonly found in cats and dogs. The immunoenzymatic ELISA technique, which utilizes the antigen from the Toxocara canis larvae against anti-Toxocara canis IgG antibodies, was applied to obtain toxocariasis prevalence. Blood samples were collected on filter paper using the finger puncture technique and duplicate samples were tested. The indirect IgM immunofluorescence test technique for detection of anti- Schistosoma mansoni was utilized in the diagnosisof infections caused by Schistosoma mansoni The stool samples were examined by the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ and the Kato-Katz parasitological methods. Data analysis indicated that Toxocara canis prevalence was higher (26.8%) in young individuals and demonstrated a higher relationship with residents of urban areas (50.7%). Toxocariasis was also found to be more prevalent in males (43.2%). In our study, the serological tests revealed that the prevalence of schistosomiasis was 19.3%. The stool examination results registered 2.0% for the Kato-Katz test and 0.9% for the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿. The geometric mean was 24 eggs per gram of fecal matter, indicating a slight infection leveI. The difference between results of the serological and parasitological tests was very clear. Data analysis revealed that the general prevalence of intestinal helminthes using the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ and Kato-Katz tests was 43.6% and 44.3%, respectively. The most prevalent helminthes were: Ascaris lumbricoides (37.6%), Trichuris trichiura (17.3%) and ancylostomatidae (10.4%). Helminthiases were more common in the rural area. This study exposes a significant difference in diagnoses of infections caused by the Trichuris trichiura utilizing the Kato-Katz (17.3%) and the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ (7.8%) methods. Therefore, the positive and negative samples of the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ method were compared with number of eggs per gram (epg) of fecal matter obtained by the Kato-Katz. When the Coprotest 'MARCA REGISTRADA¿ results were negative, the leveIof infectionwas found to be low. According to the Coprotest@ technique, the leveI of intestinal protozoa was 26.1%. However, when only the pathogenic species were considered (Giardia intestinalis 10.4%, Blastocystis hominis 4.8% and Entamoeba histolytica / Entamoeba dispar 1.3%) the prevalence was lower (14%). The most prevalent intestinal protozoa were Entamoeba coli 12.6%. The control program, initiated in this area in 1980, of infections caused by Schistosoma mansoni, has been continued as this area is still considered as a region of low endemicity. Although the infection has not been eradicated, prevalence coeflicients have been steadily decreasing, despite the fact that residual transmission has been confirmed by parasitological exams. Our study revealed high parasitic infection rates that prove the need for control measures and sanitary surveillance,as well as the importance of warning the population and implementingpreventive actions against these infections / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas