CHOI-LIMA, K. F. Estimativa de abundância e impactos antrópicos sobre o peixeboi marinho (trichechus manatus) no estuário dos rios Timonha e Ubatuba, divisa dos estados do CE e PI. 2017. 125 f. Tese (Doutorado em Ciências Marinhas Tropicais) - Instituto de Ciências do Mar, Universidade Federal do Ceará. Fortaleza, 2017. / Submitted by Geovane Uchoa (geovane@ufc.br) on 2017-08-30T13:35:47Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_kfchoilima.pdf: 9053027 bytes, checksum: fa7f1ca67cefcd145c480461104425b9 (MD5) / Approved for entry into archive by Nadsa Cid (nadsa@ufc.br) on 2017-08-31T12:39:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_kfchoilima.pdf: 9053027 bytes, checksum: fa7f1ca67cefcd145c480461104425b9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-31T12:39:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_kfchoilima.pdf: 9053027 bytes, checksum: fa7f1ca67cefcd145c480461104425b9 (MD5) Previous issue date: 2017 / The West Indian manatee is one of the most threatened aquatic mammals of Brazil, and now has a patchy distribution from the State of Alagoas to the State of Amapá. The difficulty of observing the species, especially in estuarine waters, is a challenge for conservation. The goal of this study was to test active acoustic method of detection to estimate manatees density and abundance and to identify the areas and the frequency of occurrence of the species in the estuaries of Timonha and Ubatuba rivers, between the states of Ceará and Piauí (NE Brazil). Moreover, we tried to identify human activities that threatens the species in these estuaries. Data collection was conducted from a wooden boat with outboard motor using a side-scan sonar (SSS). Sonar images were collected along line transects in three regions within the study area. Between 2012 and 2014, a total of 21 field trips and 94 days of effort were conducted. For the estimation of density and abundance, the distance sampling method was used through Distance 6.0 software. The methodology used allowed to obtain accurate data with a low margin of error, showing that the SSS is a viable method in the detection of manatees. We recorded 77 sonar detections of manatee groups, totaling 139 individuals. The average speed of the boat during the detections was 3.8 km / h and the depth of detection varied from 2 to 10 m, with 87.1% of the depth detections of 2 to 6 meters. The manatee was distributed throughout the study area, with greater occurrence in Rio Carpina. The relative frequency of occurrence of manatees in the region was 60%, with an average of 1.85 manatees and 1.03 detections per survey. The relative abundance (maximum number of manatees detected on the same day) was 44 individuals (19 detections). The probability of occurrence of manatees per hour of effort and of recording a detection were 0.73 person / hour and 0.41 detection / hour, respectively. Of the 77 detections, in eight of them there were calves. The use of the estuary by the manatees seems to have a seasonality, having more use in the first semester of the year, with greater number of detections in the month of May. The social structure (group size) varied from solitary individuals (44.16%) to groups of up to seven animals (1.30%). There was no difference in frequency of detection related to the phases of the moon and for tides. For the estimation of density and abundance, we considered 1396 transection lines that totaled 863.6 km traveled in the study area. The observed general meeting rate was 0.089 groups detected per kilometer traveled. The probability of detection of groups of manatees during the study was estimated to be 33.7%. The best detection model resulted in an estimated density for the entire study area of 9.19 manatees per km2. The estimated density resulted in a total population of 37 manatees (CV% = 30.2, 95% CI = 21- 66). The best detection model was the Hazard-rate with no adjustments terms, resulting in a detection probability of 33.7%, and a estimated density for the entire study area of 9.19 animals per km2 , and a total population of 37 manatees (CV% = 30.2, 95% CI = 21 to 66). Among the threats we recorded vessels and fishing activities, shrimp farms and salt marshes, generating impacts such as solid waste pollution, accidental catches in catch nets, trawling and fishing corral, and destruction of feeding areas by trawl nets. It is recommended that the zoning and management of EPA Delta do Parnaíba take into account the intense use of the Carpina river by manatees, with specific restrictions to boat traffic to avoid strikes and harassment of this endangered marine animal. This study contributes with data on the distribution of manatees in the region, which are key to conservation, such as population status, and are expected to be used in the development of species conservation strategies. / O peixe-boi marinho é uma das espécies mais ameaçadas do Brasil, e atualmente ocorre de forma fragmentada de Alagoas ao Amapá. A dificuldade de observação da espécie, principalmente em águas estuarinas, é um desafio para a conservação. Este estudo visou testar a acústica ativa para detecção de peixe-boi marinho, estimar densidade e abundância e identificar as áreas de ocorrência da espécie no estuário dos rios Timonha e Ubatuba, entre os estados do Ceará e Piauí (NE Brasil), além de identificar atividades antrópicas locais que ameaçam a espécie. Os dados foram coletados utilizando um sonar de varredura lateral (SVL), a bordo de uma embarcação motorizada. Para a coleta de imagens de sonar foram realizados transectos em três trechos definidos. Entre 2012 e 2014 foram realizadas 21 expedições, totalizando 94 dias de embarque. Para a estimativa de densidade e abundância foi utilizado o método de amostragem de distâncias, com software Distance 6.0. A metodologia forneceu dados precisos com baixa margem de erro, mostrando que o SVL é viável na detecção de peixes-bois. Foram obtidas 77 detecções pelo sonar, totalizando 139 indivíduos. A velocidade média do barco durante as detecções foi de 3,8km/h e a profundidade de detecção variou de 2 a 10m. A espécie se distribuiu por toda área de estudo, com maior ocorrência no rio Carpina. A frequência relativa de peixes-bois na região foi de 60%, com média de 1,85 peixes-bois e 1,03 detecções por embarque. O número máximo de peixes-bois detectados em um mesmo dia foi de 44 indivíduos (19 detecções). As probabilidades de ocorrência de peixes-bois por hora de esforço e de registrar uma detecção foram de 0,73 indivíduo/hora e 0,41 detecção/hora, respectivamente. Das 77 detecções, em oito houve a presença de filhotes. A utilização do estuário pelos peixes-bois parece ser sazonal, havendo maior utilização no primeiro semestre, especialmente em maio. A estrutura social variou de indivíduos solitários (44,16%) a agrupamentos de até sete animais (1,30%). Não houve diferença na frequência de detecção relacionada às fases da lua e às marés. Para estimativa de densidade e abundância, foram consideradas 1396 linhas de transecção, totalizando 863.6km. A taxa de encontro geral foi de 0,089 grupos detectados por quilômetro. O melhor modelo de detecção foi “curva Taxa-derisco sem nenhum ajuste de série”, resultando numa probabilidade de detecção de 33,7%, uma densidade estimada para toda a área de estudo de 9,19 animais por km2 , e uma população total de 37 peixes-bois (CV%=30,2; IC95%=21 a 66). Entre as ameaças, houve presença de embarcações e atividades de pesca, fazendas de camarão e salinas, gerando impactos como poluição por resíduos sólidos, capturas acidentais em redes de espera, arrasto e curral de pesca, e destruição de áreas de alimentação pelas redes de arrasto. Sugere-se que o ordenamento de uso do rio Carpina seja previsto no Plano de Manejo da APA Delta, restringindo o uso por embarcações motorizadas. Este estudo contribui com dados sobre a distribuição de peixe-boi marinho na região, os quais são fundamentais para a conservação, como o status populacional, e espera-se que sejam usados no desenvolvimento de estratégias de conservação da espécie.

O objetivo deste estudo foi verificar a viabilidade da dosagem de andrógenos em amostras de saliva, secreção lacrimal, urina e fezes de peixe-boi da Amazônia realizando um desafio hormonal. Dois peixes-bois amazônicos adultos machos (A-1 e A-2) foram submetidos a um protocolo de experimentação de doze dias (D-1 a D10). No D0 os animais receberam uma injeção intramuscular de GnRH exógeno. Amostras de saliva, secreção lacrimal, urina e fezes foram coletadas diariamente (entre 08h00 e 09h00) e mantidas a -20°C até o ensaio. As amostras de fezes foram liofilizadas, extraídas com metanol 80% e diluídas em tampão antes do radioimunoensaio (RIE). As amostras de urina sofreram hidrólise ácida e foram diluídas em soro bovino depletado. As amostras de saliva e secreção lacrimal foram dosadas sem etapa de extração, porém, o ensaio foi adaptado para aumentar a sensibilidade do teste. Os ensaios hormonais foram realizados utilizando um conjunto comercial de RIE para testosterona total. Um pico de andrógenos (mediana+2DI) somente foi observado nas amostras de saliva, urina e fezes de ambos os animais. Porém, os picos de andrógenos fecais ocorreram depois (cinco dias) dos picos de andrógenos urinários e salivares. Este intervalo está correlacionado com o longo tempo de passagem da digesta pelo trato gastrointestinal na espécie. Os picos salivares e urinários ocorreram muito próximos, provavelmente com poucas horas de intervalo. Esses resultados demonstram que as concentrações de andrógenos em amostras de saliva, urina ou fezes refletem consistentemente os eventos fisiológicos e são ferramentas de grande utilidade no monitoramento reprodutivo de peixes-bois da Amazônia. / The aim of this study was to verify the viability of androgens measurement in saliva, lacrimal secretion, urine and fecal samples of Amazonian manatee by carrying out hormonal challenge. Two adult male manatees (A-1 and A-2) were submitted to an experimentation protocol of twelve days (D-1 to D10). On D0 the animals received an intramuscular injection of GnRH-analogue. Salivary, lacrimal, urinary and fecal samples were collected daily (between 08h00 and 09h00) and frozen at -20°C until assayed. Fecal samples were lyophilized, extracted with 80% methanol and diluted in buffer before the radioimmunoassay (RIA). Urine samples underwent acid hydrolysis and diluted in depleted bovine serum. Salivary and lacrimal samples were assayed without extraction step, but, the assay was adapted to improve the sensibility. Hormonal assays were carried out with a commercial testosterone RIA kit. An androgen peak (>median+2IQR) was observed only in salivary, urinary and fecal samples of both animals. However, the fecal androgens peaks occurred later than urinary and salivary androgens peaks. These intervals are correlated with the long digesta passage time in this species. The salivary and urinary peaks were very close, probably with few hours of interval. These results show that androgens concentrations in saliva, urine or feces samples reflect reliably physiological events and are powerful tool for reproductive monitoring of Amazonian manatees.

Os objetivos deste estudo foram determinar os níveis hormonais urinários e salivares durante o ciclo estral em peixes-bois da Amazônia, e verificar a existência de variação nos padrões dos hormônios reprodutivos presentes na saliva e na urina durante dois trimestres diferentes do ano. Foram utilizados 7 animais (4 machos e 3 fêmeas) adultos, alojados no LMA/INPA. As coletas ocorreram durante dois anos em dois trimestres diferentes do ano (Trimestre I e Trimestre II), onde, durante 12 semanas de cada trimestre foram colhidas amostras de saliva dos machos e urina e saliva das fêmeas. A testosterona salivar nos machos foi dosada por radioimunoensaio usando conjunto diagnóstico comercial. Os estrógenos, progestinas e LH urinários e progesterona e estradiol salivares nas fêmeas foram dosados por enzimaimunoensaio. O ciclo estral foi estimado em 39,67&plusmn;1,15 dias e 44&plusmn;2,00 dias para as matrizes urinária e salivar, respectivamente, com a presença peculiar de dois picos de estrógenos concomitantes com picos de LH urinário antes da elevação das progestinas, característica anteriormente observada somente para elefantes. Nos machos, a testosterona salivar apresentou um pico no final do Trimestre II (35,91&plusmn;5,64 pg/mL; P<0,05), sugerindo uma antecipação dos machos de T. inunguis à época reprodutiva das fêmeas. Para as fêmeas, os esteroides urinários e salivares e o LH urinário apresentaram valores significativamente maiores na maioria dos meses do Trimestre I quando comparado ao Trimestre II (P<0,05), e as fêmeas, em grande parte, apresentaram padrão hormonal cíclico no Trimestre I e padrão acíclico no Trimestre II, sugerindo, assim, a existência de sazonalidade reprodutiva na espécie mesmo em condições de cativeiro. Desta forma, foi possível concluir que as características peculiares do ciclo estral do peixe-boi da Amazônia podem ter importância biológica na estratégia reprodutiva da espécie, como ocorrem em elefantes; que aparentemente T. inunguis apresenta sazonalidade reprodutiva, e esta seria sincronizada por outro fator ambiental que não a disponibilidade de alimento; e que é possível utilizar tanto a matriz urinária quanto a salivar no monitoramento endócrino-reprodutivo de peixe-boi da Amazônia, sendo ferramentas importantes para estudos da biologia reprodutiva da espécie. / The aims of this study were to define urinary and salivary hormone levels during estrous cycle in Amazonian manatees; and to verify the existence of differences on urinary and salivary reproductive hormones during two different trimesters of the year. Seven adult animals (4 males and 3 females), kept at LMA/INPA were analyzed. Salivary samples from males and urinary and salivary samples from females were collected during 12 weeks in two different trimesters, during two consecutive years. Salivary testosterone from males was measured by radioimmunoassay kit. Urinary estrogens progestins and LH and salivary estradiol and progesterone from females were measured by enzyme immunoassay. The estrous cycle showed duration of 39.67&plusmn;1.15 days and 44.00&plusmn;2.00 days for urinary and salivary matrices, respectively, and showed two estrogens peaks accompanied by peaks of urinary LH before the rise of progestins. This hormonal pattern was previously reported only in elephants. The males showed a salivary testosterone peak at the end of Trimester II (35.91&plusmn;5.64 pg/ml; P<0.05), this fact suggest a male anticipation to the female reproductive season. The females showed high values of urinary and salivary steroids and urinary LH during most of months of the Trimester I when compared with the Trimester II (P<0.05), and the females usually showed hormonal cyclic pattern during Trimester I and acyclic pattern during Trimester II, suggesting the existence of reproductive seasonality even in captive conditions. Therefore, I conclude that the peculiar characteristics of Amazonian manatees estrous cycle may have biological importance for mating strategies, as in elephants; T. inunguis apparently shows reproductive seasonality, and it is not synchronized by food availability; it is possible to use as saliva as urine to monitor the reproductive physiology of Amazonian manatee, being important tools in studies about reproductive biology for this species.

O objetivo deste estudo foi verificar a viabilidade da dosagem de andrógenos em amostras de saliva, secreção lacrimal, urina e fezes de peixe-boi da Amazônia realizando um desafio hormonal. Dois peixes-bois amazônicos adultos machos (A-1 e A-2) foram submetidos a um protocolo de experimentação de doze dias (D-1 a D10). No D0 os animais receberam uma injeção intramuscular de GnRH exógeno. Amostras de saliva, secreção lacrimal, urina e fezes foram coletadas diariamente (entre 08h00 e 09h00) e mantidas a -20°C até o ensaio. As amostras de fezes foram liofilizadas, extraídas com metanol 80% e diluídas em tampão antes do radioimunoensaio (RIE). As amostras de urina sofreram hidrólise ácida e foram diluídas em soro bovino depletado. As amostras de saliva e secreção lacrimal foram dosadas sem etapa de extração, porém, o ensaio foi adaptado para aumentar a sensibilidade do teste. Os ensaios hormonais foram realizados utilizando um conjunto comercial de RIE para testosterona total. Um pico de andrógenos (mediana+2DI) somente foi observado nas amostras de saliva, urina e fezes de ambos os animais. Porém, os picos de andrógenos fecais ocorreram depois (cinco dias) dos picos de andrógenos urinários e salivares. Este intervalo está correlacionado com o longo tempo de passagem da digesta pelo trato gastrointestinal na espécie. Os picos salivares e urinários ocorreram muito próximos, provavelmente com poucas horas de intervalo. Esses resultados demonstram que as concentrações de andrógenos em amostras de saliva, urina ou fezes refletem consistentemente os eventos fisiológicos e são ferramentas de grande utilidade no monitoramento reprodutivo de peixes-bois da Amazônia. / The aim of this study was to verify the viability of androgens measurement in saliva, lacrimal secretion, urine and fecal samples of Amazonian manatee by carrying out hormonal challenge. Two adult male manatees (A-1 and A-2) were submitted to an experimentation protocol of twelve days (D-1 to D10). On D0 the animals received an intramuscular injection of GnRH-analogue. Salivary, lacrimal, urinary and fecal samples were collected daily (between 08h00 and 09h00) and frozen at -20°C until assayed. Fecal samples were lyophilized, extracted with 80% methanol and diluted in buffer before the radioimmunoassay (RIA). Urine samples underwent acid hydrolysis and diluted in depleted bovine serum. Salivary and lacrimal samples were assayed without extraction step, but, the assay was adapted to improve the sensibility. Hormonal assays were carried out with a commercial testosterone RIA kit. An androgen peak (>median+2IQR) was observed only in salivary, urinary and fecal samples of both animals. However, the fecal androgens peaks occurred later than urinary and salivary androgens peaks. These intervals are correlated with the long digesta passage time in this species. The salivary and urinary peaks were very close, probably with few hours of interval. These results show that androgens concentrations in saliva, urine or feces samples reflect reliably physiological events and are powerful tool for reproductive monitoring of Amazonian manatees.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-13T12:47:32Z No. of bitstreams: 1 Joao Carlos Gomes Borges.pdf: 2198512 bytes, checksum: de1f2ccf01e9496dcc35acd9a6874feb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-13T12:47:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Joao Carlos Gomes Borges.pdf: 2198512 bytes, checksum: de1f2ccf01e9496dcc35acd9a6874feb (MD5) Previous issue date: 2007-02-12 / The aim of the present study was to verify the occurrence of oocysts of Cryptosporidium spp. in Antillean manatees (Trichechus manatus) and Amazonian manatees (Trichechus inunguis) from Brazil, and also evaluate the hydric transmission of the coccidium and the influence between this pathogen and the staff involved directly in captive animal care and management. Fecal samples were collected from 34 Antillean manatees, 12 Amazonian manatees and also 21 employees involved in the management activities. Water samples, used to the manatees consumption and management were also collected. The fecal samples were processed by sedimentation in formol-ether and Kinyoun technique. Before the water samples were processed, this was submitted to a filtration process in membrane (diameter of 47 mm, porosity of 3 μm) under negative pressure. At the end of the analyzing operations, the positive samples were submitted to the Direct Immunoflorescence Test. The results obtained by light and fluorescence microscopy analysis showed alcohol-acid-resistant structures compatible with oocyst of Cryptosporidium spp. in 25% (34/136) and 4,30% (05/115) of thematerial proceeding from Antillean manatees and Amazonian manatees, respectively; 23,80% (10/42) of the material obtained from the employees; and 66,67% (04/06) of the water samples analyzed. The results showed the possibility of Antillean manatees and Amazonian manatees could become infected with Cryptosporidium spp., and participate in the epidemiology of this waterborne disease by eliminate of viable oocyst in water environment wich can infect man and a wide range of domestic and wild animals. The hand of the frequency of Cryptosporidium spp. in staff involved directly in captive animal care and management could be the way to prevent the infections the manatee’s species. / O objetivo neste trabalho foi verificar a ocorrência de oocistos de Cryptosporidium spp. em peixes-boi marinhos (Trichechus manatus) e peixes-boi amazônicos (Trichechus inunguis) no Brasil, além de avaliar a transmissão hídrica deste coccídio e a sua influência com os funcionários diretamente envolvidos no manejo dos animais mantidos em cativeiro. Para tanto foram coletadas amostras fecais provenientes de 34 peixes-boi marinhos, 12 peixes-boi amazônicos e 21 funcionários envolvidos em atividades de manejo, bem como amostras de água superficial destinada a manutenção e consumo dos animais. As amostras fecais foram processadas através da sedimentação pelo formoléter e coradas pela técnica de Kinyoun. No que concerne as amostras de água, estas foram submetidas ao processo de filtração em membranas (47 mm de diâmetro e 3 μm de porosidade) sob pressão negativa. No final das análises, as amostras positivas foram submetidas ao Teste de Imunofluorescência Direta. Os resultados obtidos namicroscopia de luz e fluorescência revelaram oocistos de Cryptosporidium spp. em 25% (34/136) e 4,30% (05/115), sendo inerentes respectivamente aos peixes-boi marinhos e amazônicos, 23,80% (10/42) do material proveniente dos funcionários e 66,67% (04/06) das análises de água. Os resultados finais apontam a possibilidade dos peixes-boi marinhos e peixes-boi amazônicos infectarem-se com Cryptosporidium spp., e participar da epidemiologia das doenças veiculadas pela água, através da eliminação de oocistos viáveis ao ambiente que podem infectar o homem e um grande número de animais domésticos e silvestres. O controle da freqüência de infecções de Cryptosporidium spp. nos funcionários diretamente envolvidos no manejo e cuidados dos animais mantidos em cativeiro pode ser um dos caminhos para prevenir a infecção nas espécies de peixes-boi.

Os objetivos deste estudo foram determinar os níveis hormonais urinários e salivares durante o ciclo estral em peixes-bois da Amazônia, e verificar a existência de variação nos padrões dos hormônios reprodutivos presentes na saliva e na urina durante dois trimestres diferentes do ano. Foram utilizados 7 animais (4 machos e 3 fêmeas) adultos, alojados no LMA/INPA. As coletas ocorreram durante dois anos em dois trimestres diferentes do ano (Trimestre I e Trimestre II), onde, durante 12 semanas de cada trimestre foram colhidas amostras de saliva dos machos e urina e saliva das fêmeas. A testosterona salivar nos machos foi dosada por radioimunoensaio usando conjunto diagnóstico comercial. Os estrógenos, progestinas e LH urinários e progesterona e estradiol salivares nas fêmeas foram dosados por enzimaimunoensaio. O ciclo estral foi estimado em 39,67&plusmn;1,15 dias e 44&plusmn;2,00 dias para as matrizes urinária e salivar, respectivamente, com a presença peculiar de dois picos de estrógenos concomitantes com picos de LH urinário antes da elevação das progestinas, característica anteriormente observada somente para elefantes. Nos machos, a testosterona salivar apresentou um pico no final do Trimestre II (35,91&plusmn;5,64 pg/mL; P<0,05), sugerindo uma antecipação dos machos de T. inunguis à época reprodutiva das fêmeas. Para as fêmeas, os esteroides urinários e salivares e o LH urinário apresentaram valores significativamente maiores na maioria dos meses do Trimestre I quando comparado ao Trimestre II (P<0,05), e as fêmeas, em grande parte, apresentaram padrão hormonal cíclico no Trimestre I e padrão acíclico no Trimestre II, sugerindo, assim, a existência de sazonalidade reprodutiva na espécie mesmo em condições de cativeiro. Desta forma, foi possível concluir que as características peculiares do ciclo estral do peixe-boi da Amazônia podem ter importância biológica na estratégia reprodutiva da espécie, como ocorrem em elefantes; que aparentemente T. inunguis apresenta sazonalidade reprodutiva, e esta seria sincronizada por outro fator ambiental que não a disponibilidade de alimento; e que é possível utilizar tanto a matriz urinária quanto a salivar no monitoramento endócrino-reprodutivo de peixe-boi da Amazônia, sendo ferramentas importantes para estudos da biologia reprodutiva da espécie. / The aims of this study were to define urinary and salivary hormone levels during estrous cycle in Amazonian manatees; and to verify the existence of differences on urinary and salivary reproductive hormones during two different trimesters of the year. Seven adult animals (4 males and 3 females), kept at LMA/INPA were analyzed. Salivary samples from males and urinary and salivary samples from females were collected during 12 weeks in two different trimesters, during two consecutive years. Salivary testosterone from males was measured by radioimmunoassay kit. Urinary estrogens progestins and LH and salivary estradiol and progesterone from females were measured by enzyme immunoassay. The estrous cycle showed duration of 39.67&plusmn;1.15 days and 44.00&plusmn;2.00 days for urinary and salivary matrices, respectively, and showed two estrogens peaks accompanied by peaks of urinary LH before the rise of progestins. This hormonal pattern was previously reported only in elephants. The males showed a salivary testosterone peak at the end of Trimester II (35.91&plusmn;5.64 pg/ml; P<0.05), this fact suggest a male anticipation to the female reproductive season. The females showed high values of urinary and salivary steroids and urinary LH during most of months of the Trimester I when compared with the Trimester II (P<0.05), and the females usually showed hormonal cyclic pattern during Trimester I and acyclic pattern during Trimester II, suggesting the existence of reproductive seasonality even in captive conditions. Therefore, I conclude that the peculiar characteristics of Amazonian manatees estrous cycle may have biological importance for mating strategies, as in elephants; T. inunguis apparently shows reproductive seasonality, and it is not synchronized by food availability; it is possible to use as saliva as urine to monitor the reproductive physiology of Amazonian manatee, being important tools in studies about reproductive biology for this species.