Orientador : Osvaldo Augusto Sant'Anna / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T08:39:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Stephano_MarcoAntonio_M.pdf: 5348385 bytes, checksum: cc9b6a49e17db4782e79d2f71f8449d4 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Este trabalho objetivou identificar e demonstrar a razão dos baixos títulos neutralizantes da atividade letal, do soro antiveneno de Lachesis muta, produzido pelo Instituto Butantan. O veneno de Lachesis muta é responsável por 400 acidentes anuais no Brasil e o único tratamento, comprovadamente eficaz, é a soroterapia com antiveneno específico. Os baixos títulos de anticorpos encontrados nos plasmas de equídeos levam a uma descontinuidade de produção ou a um produto com alta concentração de proteína. Estudaram-se também as possibilidades dos venenos de Bothrops jararaca e Crotalus durissus terrificus possuírem o mesmo efeito supressor. Na tentativa de elucidar a possível atividade imunossupressora do veneno de Lachesis muta, foram utilizados como modelo experimental, camundongos selecionados para boa resposta imune humoral (linhagens HQP) e um antígeno não relacionado, no caso o erítrócito de carneiro (EC). O teste de hemoaglutinação foi escolhido para se comparar o efeito do veneno de Lachesis muta na resposta imune a antígenos não relacionados. Grupos de animais receberam veneno de Lachesis muta 24h e 72h antes e concomitante ao EC. Após os primeiros ensaios, em que se verificou a presença de um fator que inibia a produção de anticorpos a um antígeno não relacionado e que este era dose-dependente, o veneno de Lachesis muta foi fracionado por cromatografia de gel filtração em Superdex® 75. Seis frações foram obtidas, porém as frações 4 e 5 apresentaram atividade imunossupressiva. Os venenos obtidos sem as frações 4 e 5 foram utilizados na imunização de equídeos e o título destes animais foi pelo menos, cinco vezes superior ao título obtido por animais imunizados com veneno total. Os resultados obtidos levam-nos às seguintes conclusões: o veneno de Lachesis muta muta apresenta um efeito imunossupressor parcial; pelo menos duas frações distintas apresentam esta atividade; a atividade imunossupressora é dose-dependente; as frações imunossupressoras quando removidas do veneno, faz com que este aumente em cinco vezes os títulos neutralizantes da atividade letal no plasma eqüino / Abstract: In order to study the effect of Lachesis muta venom on the antibody response to unrelated antigens we first made an experimental analysis on mice genetically selected for high antibodies" production (HGP lines), to determine the effect of Lachesis muta venom on the anti-sheep erythrocytes (SE) response. Groups of mice received lOOug of venom in 0,5ml by intraperitoneal (ip) route 72, 24 hs before or simultaneously with 5 X 108 SE/0,5ml ip. In a second test, we repeated the same experiment as described above with B. jararaca and C. d. terrificus venoms using 18ug/0,5ml and 0,6ug/0,5ml respectively, in order to observe wether the inhibitory effect was present in venoms of other species. To elucidate if the depletory effect was present only in a particular venom fraction, around 120mg of Lachesis muta muta venom was applied to a Superdex® 75 column. Six fractions were studied for their biological activity and biochemical aspects (polyacrilamide gel electrophoresis). The results showed that in relation to the control groups (SE only) the total Lachesis muta venom promoted a clear, significant (P < 0.001) and persistent decrease in the anti-SE antibody response, mainly in the group that received venom 72hs before. The venoms of B. jararaca and C. d. terrificus did not show any inhibitory effect. After the chromatographic separation fraction 4 (molecular mass between 24 and 30 kDa) and 5 (molecular mass between 10 and 14 kDa) showed a significant supressive effect (P < 0.001 and P < 0.01 respectively). These data showed an inhibitory effect of Lachesis muta venom on an unrelated antigen. The activity is dose dependent and is present only in this species of Crotalidae family. The experiment with select mice has got subject to be applied in antivenom production. When horses were immunized with Lachesis muta venom without supressive frations, the sera were three times more effetive than the same sera from the horses which received total Lachesis muta venom / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Márcia Gallacci / Banca: Selma Maria Michelin Matheus / Banca: Yoko Yoshima-Franco / Resumo: Os acidentes botrópicos representam cerca de 87% dos envenenamentos ofídicos registrados no Brasil e se destacam pelas graves seqüelas que limitam a vida do acidentado. O principal efeito tóxico local destes é a mionecrose, que pode levar à perda tecidual permanente e à amputação. A mionecrose pode ser decorrente da isquemia do tecido muscular, causada por fatores hemorrágicos presentes nestes venenos (metaloproteases), ou da presença de miotoxinas (PLA2s) que afetam diretamente o tecido muscular. O método mais eficaz para o tratamento dos envenenamentos ofídicos é a soroterapia passiva. No entanto, esta é limitada devido à relativa ineficácia do soro em neutralizar a mionecrose dos venenos botrópicos, além de muitas comunidades não terem acesso à soroterapia. Estes fatores conduzem a busca de métodos alternativos, como o uso de extratos vegetais. Evidências mostram que o extrato aquoso da Casearia sylvestris, conhecida popularmente como "guaçatonga, é capaz de neutralizar efeitos tóxicos de venenos brutos e de suas miotoxinas isoladas. A Casearia sylvestris apresenta diversos outros efeitos terapêuticos como: anti-séptico, antiinflamatório, anestésico local, anti-tumoral, anti-úlcera e cicatrizante. Devido à escassez de estudos experimentais para avaliar a eficácia de extratos vegetais na redução dos danos locais ocasionados pelo envenenamento botrópico, torna-se importante avaliar a potencial atividade antiofídica da Casearia sylvestris. O presente estudo teve por objetivo investigar o uso do extrato aquoso da Casearia sylvestris, como terapêutica tópica dos efeitos locais do envenenamento botrópico experimental em camundongos. Foi avaliada a capacidade do extrato bruto da planta em neutralizar a mionecrose induzida pelo veneno da Bothrops jararacussu e/ou acelerar o processo de regeneração... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Bothrops accidents represent about 87% of snakebites recorded in Brazil and account for serious the consequences that affect the life of the victim with social and economic repercussions. Its main toxic effect is myonecrosis, which can lead to permanent tissue loss and amputation. Myonecrosis may result from muscle tissue ischemia, hemorrhage caused by factors present in these venoms (metalloproteases), or the presence of myotoxins (PLA2s) that directly affect muscle tissue. The most effective treatment is passive serotherapy. However, this is limited due the relative ineffectiveness of the serum to neutralize the myonecrosis of Bothrops venoms and the lack of access to serotherapy by many communities. These factors lead to alternative methods such as the use of plant extracts. Evidence shows that the aqueous extract of Casearia sylvestris, known popularly as "guaçatonga", is able to neutralize the toxic effects of venom and their crude myotoxins isolated. Casearia sylvestris presents several other therapeutic effects such as, antiseptic, antiinflammatory, local anesthetic, anti-tumor, anti-ulcer and wound healing. Due to the scarcity of experimental studies to evaluate the efficacy of plant extracts in reducing the harm caused by Bothrops envenomation, it is important to evaluate the potential activity of antiophidic Casearia sylvestris as a complement to conventional serum therapy. The present study aimed to investigate the use of aqueous extract of Casearia sylvestris, topical therapy as complementary to local effects of Bothrops envenomation in experimental mice. We evaluated the ability of the crude extract of the plant to neutralize myonecrosis induced by the venom of Bothrops jararacussu and / or accelerate the process of muscle regeneration. The onset of myonecrosis and the regenerative process... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2008. / Submitted by Luis Felipe Souza (luis_felas@globo.com) on 2008-11-20T16:07:21Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_2007_BarbaraSidouPimentel.PDF: 1043256 bytes, checksum: 65ef75685867db084b16fb852bfea0e1 (MD5) / Approved for entry into archive by Georgia Fernandes(georgia@bce.unb.br) on 2009-02-03T17:53:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_2007_BarbaraSidouPimentel.PDF: 1043256 bytes, checksum: 65ef75685867db084b16fb852bfea0e1 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-02-03T17:53:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_2007_BarbaraSidouPimentel.PDF: 1043256 bytes, checksum: 65ef75685867db084b16fb852bfea0e1 (MD5) / Atualmente no Brasil ocorrem cerca de 20.000 acidentes ofídicos anuais, sendo 90% deles causados por serpentes do gênero Bothrops. A soroterapia ainda é o tratamento mais comum para acidentes com animais peçonhentos, apesar da toxicidade gerada pela utilização de anticorpos eqüinos. Esse tratamento pode induzir inflamação, falência renal e até choque anafilático. Entretanto atualmente vários estudos vêm sendo desenvolvidos no intuito de minimizar esses efeitos colaterais, incluindo o desenvolvimento de anticorpos mais específicos e menos imunogênicos, que poderiam substituir ou até mesmo atuar em conjunto com a soroterapia convencional. A fosfolipase A2 (PLA2) é o principal antígeno encontrado no veneno da serpente Bothrops atrox e é o responsável pela miotoxicidade, inflamação e necrose. Anticorpos monoclonais (mAbs) contra esse antígeno foram produzidos em camundongos e se mostraram capazes de neutralizar eficientemente a atividade miotóxica dessa PLA2 (Kanashiro et al., 2002). O objetivo desse trabalho foi então humanizar o anticorpo anti-PLA2 A85/9-4 produzido por Kanashiro e colaboradores (2002), visando o seu uso clínico no tratamento de envenenamentos com essa serpente. Inicialmente os genes codificadores das cadeias variáveis leve e pesada do mAb foram seqüenciadas a partir da clonagem do cDNA de imunoglobulina vindo do hibridoma. Para humanizar esse anticorpo as regiões determinantes de complementaridade (CDRs) murinas foram transferidas para arcabouços humanos germinais escolhidos em bancos de dados devido a sua alta similaridade com as seqüências murinas. A porção variável (Fv) humanizada proposta tem apenas 16 resíduos de aminoácidos não-humanos na cadeia leve e 9 na cadeia pesada. As seqüências codificadoras das porções variáveis foram sintetizadas e clonadas na forma de scFv (fragmento variável de cadeia única) em vetor de expressão em Pichia pastoris. Entretanto, durante a expressão do scFv verificou-se a formação de agregados no sobrenadante de cultura, dificultando sua purificação e comprometendo o rendimento. Para diminuir essa agregação as porções variáveis do anti-PLA2 foram então clonadas e expressas na forma de FvFc o que tornou possível a purificação e a realização dos testes de afinidade do anticorpo humanizado. O fragmento FvFc recombinante se mostrou capaz de reconhecer tanto o extrato bruto da peçonha quanto a fosfolipase purificada, além de ter sua ligação inibida pela presença do mAb original. Os testes in vitro sugerem que os FvFcs humanizados possam apresentar desempenho similar ao mAb em futuros testes de neutralização in vivo. ________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Nowadays in Brazil there are about 20000 snake accidents annualy and 90% of them are with the Bothrops species. The serotherapy is the commonest treatment to animal poison accidents, despite of the toxicity triggered by equine antibody utilization. This conduct can induce inflammation, kidney failure and anaphylactic shock. Nowadays several studies have been developed to minimize these collateral effects included the developing of more especific and less immunogenic antibodies that could be used to substitute the conventional serotheraphy or in association with this treatment. The Phospholipase A2 (PLA2) is the principal antigen found in the Bothrops atrox venom and causes miotoxicity, inflammation and necrosis. Monoclonal antibodies (mAbs) against this antigen were produced in mice and were able to neutralize the miotoxic activity of PLA2 efficiently (Kanashiro et al., 2002). The objective of this work was to develop a humanized form of the antibody anti-PLA2 A85/9-4 produced by Kanashiro et al (2002), aiming its clinical use for snake poisoning treatment. Initially the light and heavy chains of the mAb were determined by cloning Ig cDNA from mAb´s hybridoma. To humanize this antibody, the light and heavy chain’s CDRs of the murine mAb were transferred to a human framework, chose on the database of human germline V genes because their high similarity with the murine sequences. The proposed Fv has 16 non-human residues in the light chain and 9 in the heavy chain. The sequences of the variables regions were synthesized and initialy cloned as a scFv (single chain variable fragment) in expression vector for Pichia pastoris heterologous expressions. But during the expression this form induced agregation and couldn’t be purified. To minimize this agregation the variable regions of the anti-PLA2 were cloned as a FvFc fragment and in this form was possible the purification and tests of afinity of the humanized form. The recombinant FvFc antibody fragment was able to recognize the total venom and the purified PLA2. And was inhibit by the original mAb. The results of the in vitro tests suggest that the humanized FvFcs can be similar results of the original mAb in in vivo neutralization tests.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-11-06Bitstream added on 2014-06-13T19:12:06Z : No. of bitstreams: 1 cunha_rm_me_botib.pdf: 829808 bytes, checksum: 0d58883f9479527d834af5abe27ce09a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os acidentes botrópicos representam cerca de 87% dos envenenamentos ofídicos registrados no Brasil e se destacam pelas graves seqüelas que limitam a vida do acidentado. O principal efeito tóxico local destes é a mionecrose, que pode levar à perda tecidual permanente e à amputação. A mionecrose pode ser decorrente da isquemia do tecido muscular, causada por fatores hemorrágicos presentes nestes venenos (metaloproteases), ou da presença de miotoxinas (PLA2s) que afetam diretamente o tecido muscular. O método mais eficaz para o tratamento dos envenenamentos ofídicos é a soroterapia passiva. No entanto, esta é limitada devido à relativa ineficácia do soro em neutralizar a mionecrose dos venenos botrópicos, além de muitas comunidades não terem acesso à soroterapia. Estes fatores conduzem a busca de métodos alternativos, como o uso de extratos vegetais. Evidências mostram que o extrato aquoso da Casearia sylvestris, conhecida popularmente como “guaçatonga, é capaz de neutralizar efeitos tóxicos de venenos brutos e de suas miotoxinas isoladas. A Casearia sylvestris apresenta diversos outros efeitos terapêuticos como: anti-séptico, antiinflamatório, anestésico local, anti-tumoral, anti-úlcera e cicatrizante. Devido à escassez de estudos experimentais para avaliar a eficácia de extratos vegetais na redução dos danos locais ocasionados pelo envenenamento botrópico, torna-se importante avaliar a potencial atividade antiofídica da Casearia sylvestris. O presente estudo teve por objetivo investigar o uso do extrato aquoso da Casearia sylvestris, como terapêutica tópica dos efeitos locais do envenenamento botrópico experimental em camundongos. Foi avaliada a capacidade do extrato bruto da planta em neutralizar a mionecrose induzida pelo veneno da Bothrops jararacussu e/ou acelerar o processo de regeneração... / Bothrops accidents represent about 87% of snakebites recorded in Brazil and account for serious the consequences that affect the life of the victim with social and economic repercussions. Its main toxic effect is myonecrosis, which can lead to permanent tissue loss and amputation. Myonecrosis may result from muscle tissue ischemia, hemorrhage caused by factors present in these venoms (metalloproteases), or the presence of myotoxins (PLA2s) that directly affect muscle tissue. The most effective treatment is passive serotherapy. However, this is limited due the relative ineffectiveness of the serum to neutralize the myonecrosis of Bothrops venoms and the lack of access to serotherapy by many communities. These factors lead to alternative methods such as the use of plant extracts. Evidence shows that the aqueous extract of Casearia sylvestris, known popularly as guaçatonga, is able to neutralize the toxic effects of venom and their crude myotoxins isolated. Casearia sylvestris presents several other therapeutic effects such as, antiseptic, antiinflammatory, local anesthetic, anti-tumor, anti-ulcer and wound healing. Due to the scarcity of experimental studies to evaluate the efficacy of plant extracts in reducing the harm caused by Bothrops envenomation, it is important to evaluate the potential activity of antiophidic Casearia sylvestris as a complement to conventional serum therapy. The present study aimed to investigate the use of aqueous extract of Casearia sylvestris, topical therapy as complementary to local effects of Bothrops envenomation in experimental mice. We evaluated the ability of the crude extract of the plant to neutralize myonecrosis induced by the venom of Bothrops jararacussu and / or accelerate the process of muscle regeneration. The onset of myonecrosis and the regenerative process... (Complete abstract click electronic access below)

No Brasil acidentes por peixes peçonhentos como Thalassophryne nattereri, Cathorops spixii, Scorpaena plumieri e Potamotrygon gr orbygnyi vêm sendo relatados. O quadro clínico é caracterizado por efeitos locais e sistêmicos. Para esses acidentes não existe tratamento adequado e eficiente. A soroterapia é um eficiente tratamento para reverter os efeitos causados por venenos. Diante disso nosso objetivo é a obtenção de um soro poliespecifico através da junção de soros monoespecificos produzidos em camundongos e avaliar a sua capacidade de neutralização das atividades tóxicas induzidas pelos principais peixes peçonhentos brasileiros. As alterações induzidas na microcirculação foram abolidas na pré-incubação e no tratamento imediato, somente dano em fibra muscular induzido pelo C. spixii exigiu soro na proporção 1:2. Obtivemos o controle parcial da nocicepção e edema. O efeito sistêmico foi eficientemente neutralizado. Nossos dados nos permitem sugerir o uso de soro poliespecífico nos envenenamentos causados pelos peixes T. nattereri, S. plumieri, C. spixii e P. gr orbygnyi. / Envenoming induced by venomous fish represents a great cost brazilian communities. Victims develop local and systemic symptoms. The most frequent founded are Thalassophryne nattereri, Cathorops spixii, Scorpaena plumieri and Potamotrygon gr orbygnyi. The anti-inflammatory drugs used are not efficient. After the accident, the passive transfer of heterologous specific antibodies allows that immediate toxic effect can be neutralized in the victims. The aim of this work was to produce in mice polyspecific antivenom and evaluation the neutralization of the main toxic effects induced by the brazilian venomous fish. The effects induced in microcirculation were abolished by the polyspecific antiserum, except for the effects caused by C. spixii in muscular fibers where was necessary a proportion of 1:2. The polyspecific antiserum controlled the edematogenic and nociceptive activities and the airway inflammation.These data allow us to suggest the use of polyspecific antiserum in the treatment of the pathological effects provoked by the most frequent brazilian venomous fish.

Os envenenamentos por aranhas das espécies L. laeta, L. intermedia e L. gaucho, podem causar dermonecrose e efeitos sistêmicos. O principal componente tóxico do veneno destas apresenta atividade de esfingomielinase D (SMase D). O objetivo do presente estudo foi comparar o potencial neutralizante do novo soro anti-SMases D recombinantes e do soro anti-Aracnídico contra os efeitos tóxicos dos três venenos. A análise por \"Western blot\" revelou que o anti-Aracnídico reconheceu a maioria dos componentes presentes nos três venenos, enquanto o anti-SMases D reconheceu apenas os componentes de 30-35 kDa, correspondente às isoformas nativas de SMases D. Por ELISA, verificou-se que o soro anti-SMases D contém títulos superiores de IgGT, IgGa, b e c e. Nos testes de soroneutralização, o soro anti-SMases D tem melhor atividade inibitória sobre as atividades dermonecrótica, hemolítica e esfingomielinásica dos venenos de L. intermedia e L. laeta. Para o veneno de L. gaucho, o soro anti-Aracnídico teve resultados similares ou melhores. Embora o soro anti-SMases D apresente um significante potencial neutralizante é necessária a inclusão da SMase D do veneno de L. gaucho para a obtenção de um anti-soro eficaz contra estes venenos. / Envenomation by spiders of species L. laeta, L. intermedia and L. gaucho causes local dermonecrosis and systemic effects. The main toxic component is endowed with sphingomyelinase D (SMase D) activity. The aim of this study was to compare the neutralization potentials of the anti-SMases D and the anti-arachnidic sera, against the toxic effects of venoms of these three species. The analysis by western blot has revealed that the anti-arachnidic serum was able to recognize the majority of the components present on the venoms of the three species, but anti-SMases D has recognized only components of 30-35 kDa, which corresponds to natives SMases D. By ELISA, it has been determined that the anti-SMases D serum contains higher titres of IgGT, IgGa, b and c than the anti-arachnidic serum. Serum neutralization tests have showed that the anti-SMases D serum has better inhibitory shingomyelinasic, dermonecrotic and haemolytic activities of the venoms from L. intermedia and L. laeta. For L. gaucho venom, the results have been similar or better than the anti-arachnidic serum. Although the anti-SMases D serum shows a significant neutralization potential, it is necessary the inclusion of a SMase D from L. gaucho venom, to obtain a efficient antiserum against this venom.

Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2016-11-22T18:28:57Z No. of bitstreams: 1 LAYANE MARQUES DE SOUZA.pdf: 3595271 bytes, checksum: 8d01d5b4eb1f6e1875b61c882f6ac903 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-22T18:28:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LAYANE MARQUES DE SOUZA.pdf: 3595271 bytes, checksum: 8d01d5b4eb1f6e1875b61c882f6ac903 (MD5) Previous issue date: 2016-03-28 / This study had descriptive and retrospective character in order to get an overview of cases of scorpionism in the State of Goiás between 2003 and 2012, describing the possible variables that influenced the accidents. Data were obtained from the collection directly from the Toxicological Information Center notification forms of Goiás (CIT). It was analyzed a total of 6,046 cases of accidents with scorpions for the state in this time frame. In the monthly distribution of the cases found little variation in the number of accidents. Where we obtained 71.65% of cases occurring in urban areas and between genders were almost evenly distributed with most of the involvements with male with 51.88%. The scorpion sting area prevailed in hands, feet and fingers, which together add up to 72.83%. The time between the accident and medical care in the State of Goiás prevailed mostly less than 3 hours. The highest number of reported accidents was related to patients aged between 20 to 40 years old. It was found that the age groups between 0 to 10 years and above 50 years there has been a higher rate of deaths related to other age groups. In all cases, according to the clinical picture 72.42% were classified as mild. Regarding the evolution of accidents, 81.17% of the cases had healing as prognosis. As for treatment with antivenom, 37% made use of serum antiscorpion equating to 38% who did not use the serum antiscorpion as a treatment and 25% was not informed about the mode of treatment. For treatment with antivenom, it was used 2,237 ampoules including serum antiscorpion, antiarachnid and antibothropic. In cases classified as mild used at least 1 ampoule to a maximum of 10 ampoules. In moderate cases at least 1 ampoule to a maximum of 15 ampoules or in severe cases at least 1 ampoule to a maximum of 20 ampoules. By correlating the data provided by SINAN and the data collected in CIT reporting forms, there was a discrepancy in number of cases every year in both Information Systems. Regarding the rainfall, the average accident presents a discrete relation to the rainy season. We have not found a direct relation between the months with higher temperatures and the increasing number of records of the accident. The antivenom treatment revealed serious problems arising from lack of classification of cases, and consequently an exaggerated use of SAE ampoules. As it can be emphasized by the overuse of serum vials, considering that most cases were mild injury. The assimilation of cases in both genders and in the areas of largest urban agglomeration is highly suggestive of scorpion's relationship to the process of domestication. The difference in data between SINAN and CIT suggests that there is a miscommunication between both systems. / Este estudo teve caráter descritivo e retrospectivo com o objetivo de obter um panorama dos casos de escorpionismo no Estado de Goiás entre 2003 e 2012, apresentando as possíveis variáveis que influenciaram nos acidentes. Os dados foram obtidos a partir da coleta de dados das fichas de notificação do Centro de Informações Toxicológicas de Goiás (CIT). Foi analisado um total de 6.046 casos de acidentes com escorpiões para o estado neste recorte temporal. Na distribuição mensal dos casos verificou-se pouca variação no número de acidentes. Em 71,65 % dos casos foram ocorridos em áreas urbanas e entre os gêneros foram quase que uniformemente distribuídos com a maioria dos acometimentos com o sexo masculino com 51,88%. A região da picada prevaleceu em mãos, pés e dedos, que juntos somam 72,83%. O tempo entre o acidente e a assistência médica no Estado de Goiás prevaleceu em sua maioria inferior a três horas. De todos os casos, de acordo com o quadro clínico, 72,42% foram classificados como leves. Com relação à evolução dos acidentes, 81,17% dos casos tiveram a cura como prognóstico. Quanto ao tratamento com soroterapia, 37% fizeram uso do soro equiparando com 38% que não utilizaram o soro como tratamento e em 25% não foi informado o modo de tratamento. Para o tratamento com soroterapia, utilizaram 2.237 ampolas de soro incluindo antiescorpiônico, antiaracnídico e antibotrópico. Em casos classificados como leves foram utilizados no mínimo uma ampola ao máximo de dez ampolas. Nos casos moderados de no mínimo uma ampola ao máximo de 15 ampolas e nos casos graves de no mínimo uma ampola ao máximo de 20 ampolas. Ao correlacionar os dados disponibilizados pelo SINAN e os dados coletados nas fichas de notificação do CIT, houve uma discrepância de quantidade de casos em todos os anos nos dois Sistemas de Informação. Com relação à pluviosidade, a média de acidentes apresenta uma discreta relação com os meses chuvosos. Não houve uma relação direta entre os meses com temperaturas mais elevadas e o aumento do número de registros do acidente. A soroterapia revelou sérios problemas decorrentes da falta de classificação dos casos, e em consequência um uso excessivo de ampolas do SAE. Como pode ser enfatizado pelo uso exagerado de ampolas de soro, haja vista, que a maioria dos casos foi de agravo leve. A equiparação de casos nos dois gêneros e nas áreas de maior aglomerado urbano é altamente sugestiva da relação do escorpionismo com o processo de domiciliação. A diferença de dados entre SINAN e CIT sugere que existe uma falha na comunicação entre os dois sistemas.

Orientador: João Martins Pizauro Junior / Resumo: O desenvolvimento dos anfíbios é caracterizado por uma série de eventos que possibilitam a esses animais a ocupação dos ambientes aquático e terrestre. Nesse sentido, a supressão do sistema imunológico é necessária para que esses eventos ocorram de forma ordenada, evitando então, respostas autoimunes. Por outro lado essa imunossupressão durante a metamorfose pode tornar os animas mais susceptíveis a algumas doenças, dentre elas, a causada pelo fungo Batrachochytrium dendrobatidis (Bd), que é considerado o principal patógeno de anfíbios da atualidade. Nesse contexto, a produção de anticorpos da classe IgY anti-Bd, extraídos de gemas de ovos de galinhas poedeiras infectadas com o referido fungo, pode agregar valor ao ovo, auxiliar no combate a quitridiomicose, diminuição da perda da produção e dispersão do patógeno por criadouros, diminuindo também o uso de antibióticos no tratamento e profilaxia da quitridiomicose, aumentando o nível de segurança da carne e valorizando o produto final. No presente estudo a imunização das aves com o antígeno desativado fez com que o sistema humoral das mesmas respondesse a indução contra Bd viabilizando a produção e purificação de imunoglobulinas da classe IgY específicas e de alta avidez contra o fungo. A transferência passiva das imunoglobulinas purificadas das gemas apresentou resultados promissores, onde os girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus) tratados não apresentaram danos deletérios quanto à sanidade animal dos mesmos, mantendo ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The development of amphibians is characterized by a series of events that enable these animals to occupy aquatic and terrestrial environments. In this sense, suppression of the immune system is necessary for these events to occur in an orderly manner, avoiding autoimmune responses. On the other hand, this immunosuppression during metamorphosis may make the animals more susceptible to some diseases, among them, the one caused by the fungus Batrachochytrium dendrobatidis (Bd), which is considered the main amphibian pathogen today. In this context, the production of anti-Bd IgY class antibodies, extracted from egg yolks of laying hens infected with this fungus, may add value to the egg, assist in the fight against chytridiomycosis, decrease production loss and pathogen dispersion by breeding facilities, reduce the use of antibiotics in the treatment and prophylaxis of chytridiomycosis, increasing the safety level of the meat and valuing the final product. In the present study, the immunization of hens with the deactivated antigen caused their humoral system to respond to induction against Bd, enabling the production and purification of specific and highly avid fungal IgY class immunoglobulins. Passive transfer of purified immunoglobulins from yolk showed promising results, where treated bullfrog tadpoles (Lithobates catesbeianus) showed no deleterious damage to animal health, keeping the morphology and counting of blood cells within normal range. These results enable the develop... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-07-08T21:45:26Z No. of bitstreams: 1 PhilippeDeCastroMesquita_DISSERT.pdf: 4902837 bytes, checksum: f6da7808fb637146d14c266f835d467b (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-07-13T21:11:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PhilippeDeCastroMesquita_DISSERT.pdf: 4902837 bytes, checksum: f6da7808fb637146d14c266f835d467b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T21:11:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PhilippeDeCastroMesquita_DISSERT.pdf: 4902837 bytes, checksum: f6da7808fb637146d14c266f835d467b (MD5) Previous issue date: 2015-07-24 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Acidentes notificados envolvendo o envenenamento por escorpi?es ainda s?o frequentes no Brasil, ocasionados principalmente pela esp?cie Tityus serrulatus, conhecido como escorpi?o amarelo. Embora os soros antiescorpi?nicos sejam produzidos rotineiramente por diversos laborat?rios oficiais, a efic?cia de sua utiliza??o depende da rapidez com que se inicia o tratamento e da efici?ncia na produ??o de anticorpos pelos animais imunizados. No presente trabalho, o desenvolvimento de nanopart?culas polim?ricas cati?nicas de poli(?cido l?tico) teve como objetivo a busca de um sistema de libera??o modificada para os pept?deos e prote?nas presentes na pe?onha do escorpi?o T. serrulatus, capaz de potencializar a produ??o de anticorpos em soro anti-veneno. As nanopart?culas cati?nicas foram obtidas por nanoprecipita??o, ap?s o estudo do efeito dos par?metros da t?cnica sobre as propriedades f?sico-qu?micas das part?culas, com a otimiza??o de um m?todo de baixa energia. A funcionaliza??o da superf?cie das nanopart?culas com a polietilenoimina hiper-ramificada foi comprovada pela an?lise de potencial zeta e possibilitou a adsor??o por intera??o eletrost?ticade diferentes tipos de prote?nas. A efici?ncia de incorpora??o de 40-80 % de albumina de sorobovino (BSA) e 100 % de pept?deos da pe?onha do escorpi?o avaliadas por espectrofotometria e eletroforese em gel de poliacrilamida, confirmou o sucesso na escolha dos par?metros do m?todo de obten??o das nanopart?culas, produzidas com tamanho entre 100 a 250 nm. A an?lise de microscopia de for?a at?mica e estudos in vitro de libera??o, mostraram que as nanopart?culas esf?ricas fornecem um perfil sustentado de libera??o das prote?nas pelo mecanismo de difus?o, que potencializou a produ??o de anticorpos antiveneno em animais imunizados com as nanopart?culas contendo a pe?onha do escorpi?o, comprovando o potencial para aplica??o in vivo das nanopart?culas. / Reported accidents involving the poisoning scorpions are still frequent in Brazil, mainly caused by Tityus serrulatus, known as yellow scorpion. Although antivenom sera are produced routinely by various government laboratories, the effectiveness of its use depends on how quickly treatment is initiated and efficiency in the production of antibodies by the immunized animals. In this study, the development of cationic polymeric nanoparticles of poly(lactic acid) aimed to create a modified delivery system for peptides and proteins of T. serrulatus venom, able to enhance the production of serum antibodies against the scorpion toxins. The cationic nanoparticles were obtained by a low energy nanoprecipitation, after study of the parameters? variations effects over the physicochemical properties of the particles. The surface functionalization of the nanoparticles with the hyperbranched polyethyleneimine was proved by zeta potential analysis and enabled the adsorption by electrostatic interaction of different types of proteins. The protein loading efficiency of 40-80 % to bovine serum albumin (BSA) and 100 % to scorpion venom peptides evaluated by spectrophotometry and polyacrylamide gel electrophoresis confirmed the success of the selected parameters established for obtainment of nanoparticles, produced with size between 100 to 250 nm. The atomic force microscopy analysis and in vitro release showed that the spherical nanoparticles provided a sustained release profile of proteins by diffusion mechanism, demonstrating the potential for application of the nanoparticles in vivo.

No Brasil acidentes por peixes peçonhentos como Thalassophryne nattereri, Cathorops spixii, Scorpaena plumieri e Potamotrygon gr orbygnyi vêm sendo relatados. O quadro clínico é caracterizado por efeitos locais e sistêmicos. Para esses acidentes não existe tratamento adequado e eficiente. A soroterapia é um eficiente tratamento para reverter os efeitos causados por venenos. Diante disso nosso objetivo é a obtenção de um soro poliespecifico através da junção de soros monoespecificos produzidos em camundongos e avaliar a sua capacidade de neutralização das atividades tóxicas induzidas pelos principais peixes peçonhentos brasileiros. As alterações induzidas na microcirculação foram abolidas na pré-incubação e no tratamento imediato, somente dano em fibra muscular induzido pelo C. spixii exigiu soro na proporção 1:2. Obtivemos o controle parcial da nocicepção e edema. O efeito sistêmico foi eficientemente neutralizado. Nossos dados nos permitem sugerir o uso de soro poliespecífico nos envenenamentos causados pelos peixes T. nattereri, S. plumieri, C. spixii e P. gr orbygnyi. / Envenoming induced by venomous fish represents a great cost brazilian communities. Victims develop local and systemic symptoms. The most frequent founded are Thalassophryne nattereri, Cathorops spixii, Scorpaena plumieri and Potamotrygon gr orbygnyi. The anti-inflammatory drugs used are not efficient. After the accident, the passive transfer of heterologous specific antibodies allows that immediate toxic effect can be neutralized in the victims. The aim of this work was to produce in mice polyspecific antivenom and evaluation the neutralization of the main toxic effects induced by the brazilian venomous fish. The effects induced in microcirculation were abolished by the polyspecific antiserum, except for the effects caused by C. spixii in muscular fibers where was necessary a proportion of 1:2. The polyspecific antiserum controlled the edematogenic and nociceptive activities and the airway inflammation.These data allow us to suggest the use of polyspecific antiserum in the treatment of the pathological effects provoked by the most frequent brazilian venomous fish.