Orientador: Adriana Vitorino Rossi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-23T10:19:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castro_PatriciadePadua_D.pdf: 5260822 bytes, checksum: f6893f2bb59ad505050a8c1a755fee4a (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Pb(II) e um contaminante acumulativo em solos; reações de spot test servem para análises exploratórias para avaliar contaminações. A reação de spot test entre Pb(II) e rodizonato (ROD) forma um complexo vermelho (PbROD), que pode ser quantificado em dispositivo microfluídico em papel (mPAD) em associação com análise digital de imagens, estudada neste trabalho para aplicação em solos. Misturas reacionais de ROD 9,96 mmol L, em tampão tartarato, e soluções aquosas de Pb(NO3)2 na faixa de concentração de 0,20 a 5,00 mmol L foram utilizadas para a formação de PbROD em mPAD e empregadas no desenvolvimento do método que envolveu a utilização de um scanner comercial para obtenção das imagens e, um programa para extração de dados de cores em sistema RGB (Red, Green e Blue) para quantificação por meio de curvas de calibração. O método desenvolvido foi aplicado para análise de Pb(II) em 28 amostras de solos dopadas com (PbNO3)2 a uma concentração 300 mg kg de solo, utilizando solução de HNO3 0,43 mmol L como extrator, que extraiu em média 75% do Pb(II) adicionado. A limitação imposta pelas barreiras hidrofóbicas no mPAD foi crucial para viabilizar a quantificação de Pb(II). Os dados extraídos da componente G da imagem do produto da reação obtido no mPAD apresentaram os melhores resultados. A precisão intermediária do método de spot test para Pb(II) formando PbROD foi 4 %, com limites de detecção e quantificação iguais a 0,07 e 0,24 mmol L, respectivamente. Das 28 amostras estudadas, sete não desenvolveram cor na reação devido às características físicas e químicas dos solos e a presença de possíveis interferentes (principalmente Ba, Sr, Matéria Orgânica, P e Argila). A grande heterogeneidade dos solos e os complexos mecanismos de adsorção e dessorção dos íons que afetam sua disponibilidade para a reação de análise representam aspectos limitantes para a aplicação do método desenvolvido, porém os resultados apontaram adequação para análise semiquantitativa exploratória de Pb(II) em áreas de solos contaminados / Abstract: Lead (Pb) is a cumulative soil contaminant, which can be assessed by spot test reactions in exploratory analyzes regarding soil contamination. The spot test reaction between Pb(II) and rhodizonate (ROD) forms a red complex (PbROD), which can be quantified on paper microfluidic device (mPAD) in combination with digital image analysis. The objective with this work was to develop a method based on the aforementioned system, for the determination of Pb(II) in soils. Reaction mixtures containing 9.96 mmol L of ROD (prepared in tartrate buffer) and aqueous solutions of Pb(NO3)2 in a concentration range from 0.20 to 5.00 mmol L were used to form PbROD in mPAD and employed for the method development. A commercial scanner was used to obtain images and a program was employed to extract data from the RGB (Red, Green and Blue) colors system for Pb(II) quantification, by using calibration curves. The method was applied for the analysis of Pb(II) in 28 soil samples spiked with Pb(NO3)2 at a concentration of 300 mg kg of soil and a 0.43 mmol L HNO3 solution was used as the extractant, which was able to extract, in average, 75% of Pb(II) added. The limitation imposed by hydrophobic barriers in the mPAD was crucial to enable the quantification of Pb(II). The data extracted from the G component of the image of the reaction product obtained in the mPAD showed the best results. Intermediate precision of the spot test method for Pb(II) forming PbROD was 4%, with limits of detection and quantification equal to 0.07 and 0.24 mmol L, respectively. From the 28 samples studied, seven did not develop color in the reaction, due to their physical and chemical characteristics and the presence of possible interferences (mainly Ba, Sr, Organic matter, P and clay content). The great heterogeneity of soils and the complex mechanisms of sorption and desorption of ions, that affect their availability for reaction analysis, represent limiting aspects for the quantitatively application of the method for soils. But the results show suitability for semiquantitative exploratory analyzes of Pb (II) in areas with soils contaminated with this element / Doutorado / Quimica Analitica / Doutora em Ciências

Antimicrobial substances, or bacteriocins are substances produced by probiotic lactic acid bacteria. They have a positive effect on the gastrointestinal tract of humans and are especially suitable for the food, but also the pharmaceutical industry. The aim of the thesis was the molecular identification of lactic acid bacteria of the Lactobacillus genus, species and their subsequent inclusion PCR method. Using the PCR method were tested also genes responsible for the production of bacteriocins. To confirm the production of bacteriocins has been selected the microbiological method, agarose droplet spot-test. In the present study also included the bioinformatics part to assess the specificity and non-specificity of the primers using in Primer-BLAST program.

Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2014-09-04T13:58:50Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇAO_JORGE LUIS OLIVEIRA SANTOS_PPGQ_UFBA.pdf: 1962243 bytes, checksum: a2a63de666dcab5749b766ddf2c50554 (MD5) / Approved for entry into archive by Fatima Cleômenis Botelho Maria (botelho@ufba.br) on 2014-09-04T14:30:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇAO_JORGE LUIS OLIVEIRA SANTOS_PPGQ_UFBA.pdf: 1962243 bytes, checksum: a2a63de666dcab5749b766ddf2c50554 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-04T14:30:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇAO_JORGE LUIS OLIVEIRA SANTOS_PPGQ_UFBA.pdf: 1962243 bytes, checksum: a2a63de666dcab5749b766ddf2c50554 (MD5) / FAPESB, CNPQ / Este trabalho foi realizado no âmbito do projeto PRONEX/Água-FAPESB. É proposta uma nova estratégia para determinação de nitrito e nitrato em sistema em fluxo por multicomutação e detecção por imagens digitais. Também foi proposta uma estratégia simples para determinação de nitrito por imagem digital combinado com spot test à base de papel de filtro. Os métodos foram baseados na reação do nitrito com a sulfanilamida, formando um cátion de diazônio que posteriormente é acoplado ao dicloreto de N-(1-naftil) etilenodiamina formando um diazo composto de coloração rósea com absorção máxima em 543 nm. No sistema em fluxo os sinais analíticos foram obtidos a partir das intensidades de coloração do diazo composto nas imagens digitais obtidas por um webcam e os valores foram medidos através do software image J. Na determinação do nitrato, este foi reduzido em fluxo a nitrito por uma coluna de cádmio cobreado. As condições do sistema em fluxo foram otimizadas e a concentração de nitrato e nitrito foram determinados respectivamente na faixa de 1,0 - 10,0 mg L-1 com precisão de 1,3% e 0,2 - 2,0 mg L-1 com precisão de 0,6%. Os limites de detecção e quantificação para nitrito foram 0,014 mg L-1 e 0,045 mg L-1 e para o nitrato 0,042 mg L-1 e 0,252 mg L-1, respectivamente. O procedimento em fluxo foi aplicado com sucesso em amostras de águas subterrâneas na frequência analítica de 103 amostras/h para nitrito e 80 amostras/h para nitrato. No caso do spot test o diazo composto foi formado na superfície do papel de filtro pela adição de 5μL da solução amostra e em seguida 5μL de regente cromogênico e a intensidade da cor foi medida a partir das imagens digitais do spot test. As imagens digitais do spot test foram obtidas através do uso de scanner e o sinal analítico foi obtido pelo tratamento das imagens com o software image J. O spot test foi otimizado e a concentração de nitrito foi determinada nas faixas de 0,2 - 1,0 mg L-1 (r=0,9924) e 1,0 - 10,0 mg L-1 (r=0,9989) com limites de detecção de 0,04 mg L-1 e 0,07 mg L-1, respectivamente. O spot test proposto foi aplicado na determinação de nitrito em amostras de salsichas e água subterrânea e os resultados encontrados foram nas faixas de 21,71- 23,88 mg kg-1 e 0,04 - 0,12 mg-N L-1, respectivamente.

Submitted by Verônica Esteves (vevenesteves@gmail.com) on 2017-09-27T17:47:16Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) ACURÁCIA DA CREATININA DOSADA EM GOTA DE SANGUE SECA EM PAPEL DE FILTRO PARA RASTREAMENTO DA DOENÇA RENAL CRÔNICA.pdf: 840099 bytes, checksum: e1a6a3188e8d5575446207666d1aac97 (MD5) / Approved for entry into archive by Verônica Esteves (vevenesteves@gmail.com) on 2017-09-27T17:51:13Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) ACURÁCIA DA CREATININA DOSADA EM GOTA DE SANGUE SECA EM PAPEL DE FILTRO PARA RASTREAMENTO DA DOENÇA RENAL CRÔNICA.pdf: 840099 bytes, checksum: e1a6a3188e8d5575446207666d1aac97 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-27T17:51:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) ACURÁCIA DA CREATININA DOSADA EM GOTA DE SANGUE SECA EM PAPEL DE FILTRO PARA RASTREAMENTO DA DOENÇA RENAL CRÔNICA.pdf: 840099 bytes, checksum: e1a6a3188e8d5575446207666d1aac97 (MD5) Previous issue date: 2015 / Consultório / A identificação precoce da doença renal crônica (DRC) em populações de risco é preconizada devido à elevada morbidade e mortalidade dessa patologia. O rastreamento é normalmente feito utilizando testes de baixo custo e pouco invasivos, como a detecção de albumina na urina ou a dosagem da creatinina sérica. Apresentamos nesse estudo uma forma alternativa inovadora e de simples execução para dosar a creatinina. Cento e seis pessoas com alto risco de desenvolverem DRC foram envolvidas. A idade dos participantes foi de 57 ± 12 anos, 78 (73,5%) eram do sexo feminino, 43 eram brancos (40,5%), 36 eram pardos (34%) e 27 negros (25,5%). Setenta e seis por cento alegaram serem hipertensos, 30% já sabiam ter diabetes, 37% disseram ter história familiar para DRC e 22% eram tabagistas. O índice de massa corpórea (IMC) foi de 29,5 ± 6,9 kg/m2, a pressão arterial sistólica foi de 125 mmHg (intervalo interquartil [IQR] 120-140 mmHg) e a pressão arterial diastólica de 80 mmHg (IQR 70-80 mmHg). A validade do teste feito com papel filtro foi calculada considerando como a variável de interesse uma taxa de filtração glomerular estimada menor que 60/ml/min/1,73m2, calculado pelas equações MDRD e CKD-EPI. Desta maneira, a sensibilidade do PF foi de 96% na equação MDRD e de 94% na CKD-EPI. O valor preditivo positivo foi de 96% para ambas equações. A acurácia mostrou um desempenho de 92% na MDRD e de 90% na CKD-EPI. O método de Bland e Altman mostrou que os valores de creatinina entre os dois testes estão numa faixa relativamente estreita (+0.68 mg/dL a -0.55 mg/dL) para um desvio padrão de ±1.96. Concluímos que a dosagem da creatinina em papel filtro é um teste pouco invasivo e apresentou um bom desempenho para rastrear a DRC. / Chronic kidney disease (CKD) screening is advisable in populations with risk factors for chronic kidney disease due to its high morbidity and mortality. It´s usually performed by sampling blood for creatinine and urine for albuminuria. Here we present an innovative and simpler method, by measuring creatinine in a dry blood spot on filter paper. One-hundred and six individuals at high risk for CKD were enrolled. Mean age was 57±12 years, 74% were female, 40% white, and 60% non-white. Seventy-six percent were hypertensive, 30% diabetic, 37% had family history of CKD, and 22% of smoking. The BMI was 29.5 ± 6.9 kg/m2, median systolic blood pressure was 125 mmHg (IQR 120-140 mmHg) and median diastolic blood pressure was 80 mmHg (IQR 70-80 mmHg). Adopting CKD with the found of a e_GFR60/ml/min/1,73m2 for MDRD and CKD-EPI equation, the sensitivity was 96% for MDRD and 94% in CKD-EPI. The positive predictive value was 96% for both equations. The accuracy was 92% in MDRD and 90% for CKD-EPI. . A Bland and Altman analysis showed a relatively narrow range of creatinine values differences (+0.68 mg/dL to -0.55 mg/dL) inside the ±1.96 SD, without systematic differences. Accordingly, the minimally invasive dry blood spot creatinine measurement disclosed good performance, and may be useful as a screening tool for CKD.

The green tea is considered a functional food with antioxidant activity, and this delays the process of old age and helps in the prevention of chronicle and degenerative diseases, such as cancer and heart affections. Of catechins, present in green tea, may is extremely important in the inactivation of free radicals, which provoke damages to the DNA molecules and to the cell membranes prevent the cytotoxicity induced by the oxidative stress in different tissues, by actuating in the process of chemoprevention. In this study two crosses, ST and HB aimed at evaluating the protective effects of green tea in three different concentrations (25, 50 e 75mg/mL), combined with the antitumor agent, doxorrubicin (DXR), of the genotoxic action; by the of wing spot test (SMART) of Drosophila melanogaster. The results obtained demonstrated that in MH descendants there was not a statistically significant increase in the frequencies of spots, in the individuals treated with green tea, in standard cross (ST) as well as in the high bioactivation cross (HB - characterized by a high constitutive level of cytochrome P450) . However we could observe a statistically significant decrease in the sum of mutant spots, in MH descendants of both crossings (ST and HB), in all concentrations of green tea associated to DXR. These results suggest that green tea does not present genotoxic effect, but presents protective affect against the mutagenic and recombinagenic action of DXR in the somatic cells of D. melanogaster, in the experimental concentrations used in this study. / O chá verde (CV) é considerado um alimento funcional com atividade antioxidante, que retarda o processo de envelhecimento e auxilia na prevenção de doenças crônicas e degenerativas, como o câncer e doenças cardiovasculares. As catequinas, presentes neste chá, podem inativar os radicais livres que causam danos na molécula de DNA e dessa maneira, prevenir a citotoxicidade induzida pelo estresse oxidativo, em diferentes tecidos, atuando no processo de quimioprevenção. Neste estudo dois diferentes cruzamentos, ST e HB foram utilizados para avaliar o efeito do CV em três diferentes concentrações (25, 50 e 75mg/mL) combinados com um agente tumoral, doxorrubicina (DXR), de comprovada ação genotóxica; através do teste para detecção de manchas (SMART) na asa de Drosophila melanogaster. Os resultados obtidos demonstram que para os descendentes MH não houve aumento, estatisticamente significativo, nas freqüências de manchas, nos indivíduos tratados apenas com CV, tanto no cruzamento padrão (ST) quanto no cruzamento de alta bioativação (HB - caracterizado pelo alto nível constitutivo de citocromo 450). Contudo, foi observada uma redução, estatisticamente significativa, no total de manchas mutantes, nos descendentes MH, de ambos os cruzamentos (ST e HB), em todas as concentrações do CV quando associadas com a DXR. Estes resultados sugerem que o CV não possui efeito genotóxico, e, apresenta efeito protetor contra a ação mutagênica e recombinogênica induzida pela DXR em células somáticas de D. melanogaster, nas concentrações experimentais utilizadas neste estudo. / Mestre em Genética e Bioquímica