Objetivo: Avaliar as condições de saúde bucal e os níveis de Streptococcus mutans na saliva de crianças com síndrome de Down (SD), na cidade de Porto Alegre, RS. Materiais e Métodos: Realizou-se um estudo observacional e transversal. A amostra foi composta por um total de 131 crianças de 6 a 12 anos de idade, sendo 60 com SD e 71 sem a síndrome, niveladas por idade e gênero. A detecção de cárie em dentes decíduos e permanentes foi realizada de acordo com os critérios da OMS. Foram registrados os índices de placa (IP) e de sangramento gengival (ISG). Informações sobre consumo de sacarose, renda familiar e hábitos de higiene oral foram obtidas por meio de entrevistas com as famílias. Amostras de saliva estimulada foram coletadas para determinar os níveis de Streptococcus mutans. As análises estatísticas foram realizadas utilizando-se os testes Qui-quadrado, Mann-Whitney e t de Student. O nível de significância adotado foi de 5%. Resultados: A experiência de cárie na dentição decídua e permanente foi similar em ambos os grupos (P > 0,05). Crianças com SD tiveram significativamente menos IP e ISG comparadas às crianças sem SD (P < 0,05). A frequência de consumo de sacarose e a renda familiar não mostraram diferença entre os grupos (P > 0,05). Entretanto, em relação à escovação dentária, as crianças com SD apresentaram maior frequência comparadas às crianças sem SD (P < 0,05). A escovação supervisionada pelos pais ou responsáveis foi significativamente maior no grupo com SD (P < 0,01) e esta foi diretamente associada com menores valores de IP e ISG (P < 0,05). Crianças com e sem SD não diferiram quanto aos níveis de Streptococcus mutans na saliva (P > 0,05). No entanto, verificou-se uma associação entre contagens elevadas (≥ 106 UFC/mL) de Streptococcus mutans na saliva e crianças com cárie do grupo com SD (P < 0,05). Conclusões: Crianças com SD entre 6 e 12 anos de idade apresentam experiência de cárie semelhante a crianças sem a síndrome da mesma faixa etária. IP e ISG foram menores em comparação com as crianças sem a síndrome, devido à maior supervisão dos pais ou responsáveis durante a escovação dos dentes. Crianças com SD que tinham cárie foram associadas com altas contagens de Streptococcus mutans na saliva. / Aim: Assess oral health status and levels of mutans streptococci in saliva of Down syndrome (DS) children in the city of Porto Alegre, Brazil. Materials and methods: A cross-sectional and observational study was performed. The sample consisted of a total of 131 children aged 6 to 12 years old, comprising 60 with DS and 71 age and gender-matched non-DS / public school children. Caries detection in primary and permanent teeth was carried out according to WHO caries criteria. Plaque and gingival bleeding indices (PI and GBI) were recorded. Information about sugar intake, household income and oral hygiene habits were obtained by families’ interviews. Stimulated whole saliva samples were collected to determine mutans streptococci levels. Statistical analyses were performed using Chi-square, Mann-Whitney and Student’s t test. The significance level was 5%. Results: Dental caries in deciduous and permanent dentition was similar in DS and non-DS children (P > 0.05). DS children had lower PI and GBI compared to non-DS children (P < 0.05). The frequency of sucrose intake and household income showed no difference between the groups (P > 0.05). However, concerning toothbrushing habits, DS children showed a higher toothbrushing frequency compared to non-DS children (P < 0.05). Supervised toothbrushing by parents or guardians was significantly higher in DS children (P < 0.01) and this was associated with lower values of PI and GBI (P < 0.05). Children with and without DS did not differ in the levels of mutans streptococci in saliva (P > 0.05). However, there was an association between high counts (≥ 106 CFU/mL saliva) of mutans streptococci in saliva and caries experience in DS children (P < 0.05). Conclusions: DS children present similar caries experience with non-DS age matched children. PI and GBI were lower in DS children, due to they have more supervised toothbrushing by parents or guardians and higher toothbrushing frequency than non-DS children. Nevertheless when DS children had caries, they were associated with high counts of mutans streptococci in saliva.

Após a exposição da raiz do dente na cavidade bucal, causada por recessão gengival, há uma mudança na microflora existente na região. Micro-organismos se depositam nessa região e formam um biofilme, que se exposto a carboidratos fermentáveis pode levar a uma queda de pH do meio, selecionando micro-organismos ácido-tolerantes e causando uma dissolução dos tecidos minerais e ativação de mecanismos de degradação da matriz orgânica da dentina. A presença de Candida albicans em lesões radiculares vem sendo relatada na literatura de forma controversa, alguns estudos sugerem que a cariogenicidade do biofilme aumenta na presença desse fungo, embora outros sugerem que o fungo levaria a uma neutralização do pH do biofilme por meio de secreção de metabólitos e consumo de ácido lático liberado na matriz do biofilme como resultado da metabolização de carboidratos. Frente ao exposto, o objetivo desse estudo foi avaliar o potencial cariogênico de biofilmes contendo Candida albicans em relação à dentina radicular. Discos de dentina radicular foram obtidos de raízes de dentes bovinos e tiveram sua microdureza de superfície inicial determinada. Foi realizado então um experimento in vitro nos quais os blocos de dentina foram aleatorizados em 3 grupos para cultivo de biofilme como se segue: Grupo 1 – biofilme monoespécie de S. mutans (SM); Grupo 2 – biofilme monoespécie de C. albicans (CA); e Grupo 3 – biofilme dualespécies de S. mutans + C. albicans (MIX). Os biofilmes foram cultivados na superfície dos blocos de dentina durante 24, 48 e 72 horas. pH do meio de cultura dos biofilmes foi aferido a cada 24 horas. Biofilmes foram coletados da superfície de seis blocos de dentina após cada um dos tempos acima descritos e a contagem de células viáveis foi determinada. Além disso, após cada período de formação de biofilme, os mesmos blocos de dentina tiveram sua microdureza de superfície medida novamente para determinação da porcentagem de perda de dureza de superfície (%PDS) e duas amostras de cada grupo/tempo foram submetidas a coloração histológica PicroSirius Red para determinação da porcentagem de colágeno estruturado na matriz orgânica da dentina desmineralizada. Os experimentos foram realizados em triplicata e os dados foram analisados por ANOVA de duas vias seguido de teste de Bonferroni ao nível de significância de 5%. Em relação aos resultados, independentemente da composição microbiana do biofilme, houve maior %PDS em biofilmes formados durante 48 e 72h em comparação aos biofilmes formados por 24 horas. Em relação à composição microbiana do biofilme, observou-se que a %PDS no biofilme de SM foi estatisticamente maior que na presença do biofilme MIX, que por sua vez foi maior que aquela encontrada na presença de biofilme CA. Os resultados mostraram ainda que os valores de pH do meio de cultivo dos biofilmes MIX foram estatisticamente maiores do que os valores encontrados na presença de biofilme SM nos tempos de 48 e 72 horas (p<0,05). Em relação à análise orgânica da dentina, os resultados sugerem que há uma maior tendência para manutenção de colágeno estruturado em biofilmes contendo CA do que em relação aos biofilmes de SM e de MIX. Nossos resultados sugerem que embora a C. albicans apresente potencial cariogênico para dentina radicular, o biofilme contendo C. albicans associada ao S. mutans parece apresentar um menor potencial cariogênico quando comparado aos biofilmes cultivados na ausência deste fungo. / After root exposure on the oral cavity, caused by gingival recession, a shift in the site microflora occurs. Deposits of microorganisms turn in to a biofilm in the root surface, which if exposed frequently to fermentable carbohydrates may lead to a pH drop on the biofilm matrix, selecting acid tolerant microorganisms causing solubilization of the mineralized tissues and the activation of dentin organic matrix degrading system. Candida albicans presence in root caries has been debated on the literature, some studies suggest that the cariogenicity of the biofilm increases on the fungus presence, although some others have said that the fungus would lead to a biofilm pH neutralization by releasing some metabolites and lactic acid consumption, the acid released on the biofilm matrix as a product of the carbohydrates metabolization. Therefore, the aim of this present study was to evaluate the cariogenic potential of biofilms containing C. albicans in relation to root dentin. Dentin root slabs were obtained from root of bovine teeth and its surface microhardness was accessed. An in vitro trial was performed, by randomizing the slabs in 3 groups: Group 1 – mono-species S. mutans biofilm (SM), Group 2 – monospecies C. albicans biofilm (CA) and Group 3 - dual-species S. mutans and C. albicans biofilm (MIX). The biofilms were grown at the dentin slab surface in 24, 48 and 72. The pH of the culture medium was checked every 24 hours. Biofilms were collected from the surface of six dentin slabs after each time as described above and the CFU/mL counts were determined. Additionally, after each time of biofilm growth, the surface microhardness of the samples was measured again to calculate the surface hardness loss percentage (%SHL) and, also, two samples of each group/time were sent to histological stain by PicroSirius Red to determine the percentage of structured collagen on the organic demineralized dentin. Each trial was performed three times and the data was analysed by Two-Way ANOVA, followed by Bonferroni test, with a significance level of 5%. As related to the results, irrespective from the microbial composition of the biofilm, a higher %SHL was observed in biofilms growth in 48 and 72 hours when compared to the biofilms growth in 24 hours. Regarding the microbial composition of the biofilm, it was observed that the %SHL at the SM biofilm was statistically higher than in the presence of the MIX biofilm, which was also higher than the one found at the CA biofilm. The results also show that the pH values of the culture medium in MIX biofilms were statistically higher than those found in the presence of SM biofilms at 48 and 72 hours (p<0,05). Related to the organic analysis of the dentin, the results suggest that there is a higher tendency to structured collagen maintenance in CA biofilms when compared to the SM and MIX biofilms. Our results suggest that, although C. albicans has a cariogenic potential related to root dentin, the biofilm containing C.albicans associated to S. mutans seems to present a lower cariogenic potential when compared to biofilms growth without this fungus.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Over the past few years, the involvement between oral pathogens and vascular disease has been investigated, with growing attention to the pathogenesis and progression of atherosclerosis. Oral bacteria have been detected in atherosclerotic plaques at a variable frequency; however, the connection between oral health and vascular and oral bacterial profiles of these patients is not clearly established. The aim of this study was to evaluate the presence of oral bacteria DNA in the mouth and atherosclerotic plaques, in addition to assess the patientâs caries and periodontal disease history. Thirty samples of supragingival and subgingival plaque, saliva and atherosclerotic plaques of 13 patients with carotid stenosis or aortic aneurysm were evaluated, through Real Time Polymerase Chain Reaction, for the presence/absence of Streptococcus mutans, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis and Treponema denticola. For edentulous patients, the variables of supragingival and subgingival plaques were not considered. All patients were submitted to oral exams using the DMTF (decayed, missing and filled teeth) and PSR (Periodontal Screening and Recording) indexes for dental and periodontal evaluation, respectively, and histopathological analysis of the atherosclerotic plaques was performed. Most of the patients were edentulous (76.9%). Streptococcus mutans, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis and Treponema denticola were detected in 100.0%, 92.0%, 15.3% and 30.7% of the oral samples, respectively. Streptococcus mutans was the most prevalent targeted bacteria in atherosclerotic plaques (p<0,05), detected in 100% of the samples, followed by Prevotella intermedia (7.1%), and the vascular samples were negative for Porphyromonas gingivalis and Treponema denticola. There was a statistically significant difference (p<0,05) between the presence of Porphyromonas gingivalis and Treponema denticola in the oral cavity and vascular samples. In conclusion, Streptococcus mutans was found at a high frequency in oral and vascular samples, even in edentulous patients, and its presence in atherosclerotic plaques suggests the possible involvement of this bacteria with the disease progression. / Nos Ãltimos anos, a relaÃÃo entre patÃgenos orais e doenÃa vascular tem sido investigada, com crescente atenÃÃo para a etiopatogÃnese e progressÃo da aterosclerose. BactÃrias orais tÃm sido detectadas em placas aterosclerÃticas, com variÃvel frequÃncia, porÃm, a relaÃÃo entre saÃde bucal e perfis bacterianos vasculares e orais dos pacientes nÃo està claramente estabelecida. Foi objetivo deste estudo avaliar a presenÃa de DNA de bactÃrias orais na boca e placas aterosclerÃticas, alÃm de avaliar histÃrico de cÃrie e doenÃa periodontal dos pacientes. Trinta amostras de placa dental supragengival, subgengival, saliva, e placas aterosclerÃticas de 13 pacientes com estenose de carÃtida ou aneurisma de aorta foram avaliadas, atravÃs de ReaÃÃo em Cadeia da Polimerase em Tempo Real, para presenÃa/ausÃncia de Streptococcus mutans, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis e Treponema denticola. Para pacientes desdentados totais, nÃo foram consideradas as variÃveis de placa supragengival e subgengival. Todos os pacientes foram submetidos a exames de CPO-D (dentes permanentes cariados, perdidos e obturados) e PSR (registro periodontal simplificado) para avaliaÃÃo dentÃria e periodontal, respectivamente, bem como anÃlise histopatolÃgica das placas aterosclerÃticas. A maioria dos pacientes eram edÃntulos (76,9%). Streptococcus mutans, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis e Treponema denticola foram detectados em 100,0%, 92,0%, 15,3% e 30,7% das amostras orais, respectivamente. O micro-organismo mais prevalente em placas aterosclerÃticas foi o Streptococcus mutans (p<0,05), presente em 100,0% das amostras, seguido de Prevotella intermedia (7,1%), e as amostras vasculares foram negativas para Porphyromonas gingivalis e Treponema denticola. Observou-se diferenÃa estatisticamente significante (p<0,05) com relaÃÃo à presenÃa de Porphyromonas gingivalis e Treponema denticola em cavidade oral e amostra vascular. Em conclusÃo, Streptococcus mutans foi encontrado em alta frequÃncia em amostras orais e vasculares, mesmo de pacientes desdentados, e sua presenÃa em placas aterosclerÃticas sugere o possÃvel envolvimento desse patÃgeno na progressÃo da doenÃa.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / The elimination of bacteria inside the demineralized dentin layer might contribute for a more conservative approach in the restorative treatment of deep dentin caries lesions. This way, this in vitro study aimed to establish safe and effective parameters for using an LED (&#955; = 620-660 nm) associated to the photosensitizer toluidine blue O (TBO) in the disinfection of artificially produced dentin caries lesions. For this, slabs with 25 mm2 of flatted occlusal human dentin were immersed for 5 days in BHI broth inoculated with Streptococcus mutans for caries induction. After demineralization, the slabs were randomly allocated to 10 experimental groups (n=15), as follows Control5; Control10; Control15; TBO; LED5; LED10; LED15; PDT5; PDT10 and PDT15, which were treated with TBO (0.1 mg.ml-1 for 5 min) or 0.9% NaCl solution for 5, 10 or 15 min, and submitted or not to LED irradiation for 5, 10 or 15 min (47, 94, and 187 J/cm2). Dentin samples from caries lesions were collected before and after treatments and bacteria were then cultured for Streptococcus mutans counts. In addition, using a type K thermometer, the temperature inside the pulp and in periodontal area was monitored for the groups PDT5, PDT10 and PDT1510 in 10 teeth with deep occlusal cavities. Paired t test/Wilcoxon matched pairs test (&#61537;=5%) were used to determine differences between microbial population before and after treatments, and ANOVA followed by Tukey test for comparing data of temperature and log reductions. Statistically significant differences in Streptococcus mutans viability were found for the groups: Control15; LED15; PDT5; PDT10 and PDT15. The temperature from intrapulpal and periodontal area were lower than 2oC, being higher inside the pulpal chamber for group PDT15 when compared to group PDT5. Thus, it the experimental conditions used in the study, photodynamic therapy may be a safe and effective treatment to be used for disinfecting carious dentin, however the influence of time of irradiation/exposition it the Streptococcus mutans viability should be better investigated. / A eliminaÃÃo de bactÃrias presentes na camada de dentina desmineralizada poderia contribuir para uma abordagem mais conservadora no tratamento restaurador de lesÃes de cÃrie dentinÃria profundas. Desta forma, este estudo in vitro objetivou estabelecer parÃmetros eficazes e seguros para a utilizaÃÃo de um LED (&#955; = 620-660 nm) associado ao fotossensibilizador azul de orto-toluidina (TBO) na desinfecÃÃo de lesÃes de cÃrie dentinÃria produzidas artificialmente. Para tal, blocos com 25 mm2 de dentina oclusal planificada foram imersos por 5 dias em BHI caldo inoculado com Streptococcus mutans para induÃÃo de cÃrie. Depois da desmineralizaÃÃo, os blocos foram aleatoriamente distribuÃdos em 10 grupos experimentais (n=15), a saber: Controle5; Controle10; Controle15; TBO; LED5; LED10; LED15; TFD5; TFD10 e TFD15, que foram tratados ou nÃo com TBO (0,1 mg.ml-1 por 5 minutos) ou soluÃÃo de NaCl a 0,9% por 5, 10 ou 15 minutos, e submetidos ou nÃo a irradiaÃÃo com LED por 5, 10 ou 15 minutos (47, 94, e 187 J/cm2). Amostras de dentina cariada foram coletadas antes e apÃs os tratamentos e as bactÃrias foram semeadas para contagem de Streptococcus mutans. Adicionalmente, com um termÃmetro tipo K, a temperatura intra-pulpar e da Ãrea periodontal nos grupos TFD5; TFD10 e TFD15 foi monitorada em 10 dentes com cavidades oclusais confeccionadas em dentina profunda. Teste t pareado e ANOVA seguida pelo teste Tukey (&#61537;=5%) foram usados para verificaÃÃo da reduÃÃo microbiana promovida pelos tratamentos, bem como para verificaÃÃo da alteraÃÃo na temperatura durante a irradiaÃÃo. DiferenÃas significativas estatisticamente na viabilidade do Streptococcus mutans entre contagens foram observadas nos grupos: Controle15; LED15; TFD5; TFD 10 e TFD15. A temperatura intra-pulpar e no periodonto foi inferior a 2oC, sendo a no interior da cÃmara pulpar maior para o grupo TFD15 quando comparado ao grupo TFD5. Dessa forma, nas condiÃÃes experimentais atuais, a terapia fotodinÃmica pode ser um tratamento eficaz e seguro a ser usado na desinfecÃÃo de dentina cariada, contudo a influÃncia do tempo de irradiaÃÃo ou exposiÃÃo à soluÃÃo salina na viabilidade do Streptococcus mutans deve ser melhor investigada.

Desequilíbrios no desenvolvimento da microbiota bucal podem gerar algumas patologias e, entre elas, está a cárie dental, uma doença crônica - contagiosa, de etiologia multifatorial, mas extremamente relacionada à bactéria Streptococcus mutans, que através de seu metabolismo fermentativo destrói estruturas mineralizadas do dente. Além disso, o aumento da resistência à antibioticoterapia, devido à existência do biofilme (também formado pelo S. mutans) e aos tratamentos bactericidas mal sucedidos, faz do desenvolvimento de técnicas antimicrobianas alternativas um importante foco nesta área de pesquisa. Assim, na busca de novas metodologias contra microrganismos, estudos usando a Terapia fotodinâmica (TFD) têm sido empregados para se obter a inativação de bactérias como o S. mutans. A TFD é uma modalidade terapêutica em que há a integração de uma luz visível, um corante e oxigênio que quando interagem, levam à produção de diferentes espécies reativas de oxigênio (ERO?s) que irão desencadear uma seqüência de eventos biológicos, resultando numa possível morte ou inativação celular, inclusive de microrganismos como o S. mutans. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação da TFD sobre a bactéria S. mutans em meio planctônico ou formando biofilme. Assim, a metodologia padronizada possibilitou o cultivo da bactéria em meio líquido (planctônico) ou na forma de biofilme, tornando-se possível a realização de testes com a aplicação da terapia fotodinâmica. Uma análise das curvas de crescimento possibilitou avaliar o metabolismo anaeróbico de S. mutans que consome açúcares fermentáveis (glicose, frutose, sacarose e maltose), mostrando-se hábil na produção de ácidos. Conforme proposto, um fotopolimerizador de resina odontológica foi empregado como fonte de luz na TFD. Esta luz é emitida em comprimentos de onda variáveis (possível graças à troca do filtro de luz do equipamento) que fotoativam os diferentes corantes empregados tais como: Rose bengal, a Protoporfirina IX (PPIX) e a Zinco ftalocianina. Estes agentes fotossensíveis, depois de irradiados, produzem espécies reativas de oxigênio, principalmente o oxigênio singlete, que leva à inativação bacteriana observada nos experimentos realizados. Em contrapartida, as concentrações de luz e corantes empregados na inativação bacteriana apresentaram valores de baixa toxicidade para culturas de fibroblastos. Além disso, a grande diferença entre as concentrações de corante que causa a morte da bactéria na presença e na ausência de luz, indica que os compostos produzidos pela fotoativação são os responsáveis pela morte bacteriana em meio planctônico. Quanto ao biofilme formado por S. mutans, é possível promover uma diminuição da sua formação tanto com a TFD quanto com o emprego de flúor. Células irradiadas imediatamente após a adição do corante foram semelhantemente inativadas após TFD, podendo ser desconsiderada uma incubação prévia para que agente fotossensível fosse homogeneamente distribuído. Aparentemente a TFD não acarretou em mudanças na atividade ATPase total extraída da membrana da bactéria. Os experimentos para a determinação da localização dos corantes na célula ou para a avaliação de sua capacidade acidogênica não foram conclusivos em relação à possibilidade das espécies reativas estarem causando danos à parede, membrana plasmática ou ainda em alguma biomolécula citoplasmática da bactéria. Em adição, os estudos da peroxidação lipídica, de análise do DNA e de proteínas de stress após a TFD não trouxeram nenhuma informação adicional conclusiva sobre o alvo específico das ERO?s que causam a inativação bacteriana. Esta metodologia, apesar de ainda não poder ser aplicada na clínica, poderá complementar as técnicas antimicrobianas convencionais, por ser uma metodologia simples, de fácil emprego e baixo custo, podendo inclusive ser associada à possibilidade do uso de diferentes agentes fotossensíveis e adequada às necessidades da prática odontológica. / Unbalance in the development of the mouth macrobiota can originate some pathologies, dental cavity being among them - a chronic disease - contagious, of multifactorial etiology, but extremely related to the Streptococcus mutans bacteria, which, through its fermentative metabolism, destroys tooth mineralized structures. Besides that, the increase in resistance to antibiotic therapy, due to the existence of biofilm (also formed by S. Mutans) and to non successful bactericide treatments, makes alternative antimicrobial techniques development an important focus in this research area. So, in search of new methodologies against microorganisms studies using the Photodynamic Therapy (TFD) have been employed to achieve inactivation of bacteria such as S. mutans. TFD is a therapeutical modality in which there is an integration of a visible light, a dye and oxygen and, when they interact, there is the production of different reactive oxygen species (ERO?s) which will lead to a sequence of biological events, resulting in a possible cellular death or inactivation, including microorganisms such as S. mutans. The aim of this work was to evaluate the action of TFD on S. mutans bacteria in planktonic medium of forming biofilm. So, the standardized methodology allowed the cultivation of bacteria in liquid media (planktonic) or in the biofilm form, making it possible to do tests with the application of the photodynamic therapy. The analysis of the growth curves allowed the evaluation of the anaerobic metabolism of S. mutans, which consumes fermentable sugars (glucose, fructose, sucrose and maltose), and is apt in acid production. According to what is was proposed, a odontological resin photopolymerizer was used as light source in TFD. This light is sent in variable wave lengths (made possible thanks to the change of the light filter in the equipment) which photoactivate the different dyes used, such as Rose Bengal, Protoporfirine IX (PPIX) and the Zinc Phtalocyanine. These photosensitive agents, after being irradiated, produce reactive oxygen species, specially the singlet oxygen, which leads to the bacterial inactivation observed in the experiments done. Nonetheless, the light concentrations and dyes used in the bacterial inactivation have shown low toxicity values for fibroblasts cultures. Besides that, the high difference between the dye concentrations which causes the death of bacteria in the presence and absence of light indicates that the compounds produced by the photoactivation are the responsible for the bacterial death in planktonic media. As for the biofilm formed by S. mutans, it is possible to have a decrease in its formation with TFD as much as with the use of fluoride. Cells irradiated immediately after the dye addition were similarly inactivated after TFD, so a previous incubation for the homogeneous distribution of the photosensitive agent can be discarded. Apparently, the TFD did not cause changes in the total APTase activity extracted from bacteria membrane. The experiments for the determination of dye location in the cell or for the evaluation of its acidogenic capacity were not conclusive in relation to the possibility of reactive species to be causing damage to the wall, plasmatic membrane or still in some cytoplasmatic biomolecule of the bacteria. In addition, the studies of lipidic peroxidation, DNA analysis and stress proteins after TFD did not bring any conclusive additional information about the specific target of ERO?s that cause bacterial inactivation. This methodology, although can?t be applied in clinic yet, can complement the conventional antimicrobial techniques, being a simple methodology, of easy used and low cost, which can also possibly be associated to the use of different photosensitive agents and adjusted to the needs of odontological practice.

Submitted by Rosangela Silva (rosangela.silva3@unioeste.br) on 2018-05-28T19:35:21Z No. of bitstreams: 2 Bruna Caroline de Oliveira Lima.pdf: 4552147 bytes, checksum: ed63b8fd6c3f7a7605c22fc5b4d9e51d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-28T19:35:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Bruna Caroline de Oliveira Lima.pdf: 4552147 bytes, checksum: ed63b8fd6c3f7a7605c22fc5b4d9e51d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Chlorhexidine in recent years has been used in dentistry for the improvement of the hybrid layer and consequently greater durability of direct aesthetic restorations. Thus, the objective of this work can be applied in vitro or the effect of chlorhexidine (CHX) on the adhesive interfaces, through the microshear bond strength test and the antibacterial activity of CHX incorporated to different adhesive systems, after 24 hours and 30 days of immersion in solution distilled water. We selected 150 crowns of bovine incisors divided into three groups: G1: Single Bond Plus adhesive system; G2: Clearfil SE Bond adhesive system; G3: adhesive system AdheSE Primer and Bond. All groups were subdivided according to the incorporation of CHX (n = 5): no CHX, with CHX prior to incorporated with 0.5%, 1.0% and 2.0% CHX. The micro-shear test was performed with half the CP after 24 hours and with another medium for 30 days. Later, the fracture modes were also found. Antibacterial diffusion tests on agar with Streptococcus mutans were performed with the same groups and subgroups. The Bond Strength variable was evaluated between the groups and solutions by means of the Factor Variance Analysis for repeated measurements. However, the variable size of the bacterial halo was submitted to Kruskall - Wallis non - parametric test, both with a significance level of 95%. The qualitative variability of fractures was evaluated through descriptive statistical analysis. The concentrations of CHX with 0.5 and 1% contributed to the increase of bond strength values and the Clearfil SE Bond system had the highest mean values in the microshear bond strength test. The AdheSE Bond adhesive system presents the best results without antibacterial testing with S.mutans. / A clorexidina nos últimos anos tem sido utilizada na Odontologia para melhoria da camada híbrida e consequentemente maior durabilidade das restaurações estéticas diretas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro o efeito da clorexidina (CHX) nas interfaces adesivas, por meio do teste de microcisalhamento e da atividade antibacteriana da CHX incorporada a diferentes sistemas adesivos, após 24 horas e 30 dias de imersão em solução de água destilada. Foram selecionadas 150 coroas de incisivos bovinos divididas em três grupos: G1: sistema adesivo Single Bond Plus; G2: sistema adesivo Clearfil SE Bond; G3: sistema adesivo AdheSE Primer e Bond. Todos os grupos foram subdivididos de acordo com a concentração de CHX (n=5): sem CHX, com CHX previamente ao adesivo e incorporado com CHX a 0,5%, 1,0% e 2,0%. O teste de microcisalhamento foi realizado com metade dos corpos de prova (CP) após 24 horas e com a outra metade após 30 dias. Posteriormente também foram avaliados os modos de fratura. Testes antibacterianos de difusão em ágar com Streptococcus mutans foram realizados aos grupos com CHX. A variável Resistência de União foi avaliada por meio da Análise da Variância fatorial para medidas repetidas. Já a variável tamanho do halo bacteriano foi submetida ao teste não paramétrico de Kruskall – Wallis, ambos com nível de significância de 5%. A variável qualitativa de padrão de fraturas foi avaliada por meio de análise estatística descritiva. Assim pode-se concluir que as concentrações de CHX com 0,5 e 1%, valor de p > 0,05, contribuíram para o aumento dos valores de resistência de união e o sistema adesivo Clearfil SE Bond teve as maiores médias no teste de microcisalhamento. O sistema adesivo AdheSE Bond apresentou os melhores resultados no teste antibacteriano com S.mutans.

O uso de enxaguatórios bucais contendo substâncias ativas antimicrobianas tem sido proposto como um importante meio de redução da formação de biofilme dental supragengival quando usados concomitantemente com higienização mecânica da cavidade bucal. A microemulsão é um moderno sistema de liberação de fármacos, que pode solubilizar tanto compostos lipo quanto hidrossolúveis. Foi demonstrado que extratos de Baccharis dracunculifolia (Bd), popularmente conhecido como alecrim-do-campo apresentaram atividade anticariogênica, sugerindo sua utilização em produtos para higiene bucal. No entanto, o extrato de Baccharis dracunculifolia é pouco solúvel em água. No presente trabalho, nós desenvolvemos e caracterizamos microemulsões com extrato e óleo essencial das folhas de Bd para incorporar em formulação de enxaguatório bucal sem álcool, com finalidades preventiva e terapêutica, contendo extrato hidroetanólico e óleo essencial das folhas de Baccharis dracunculifolia e avaliar o seu efeito sobre fatores de virulência de Streptococcus mutans (S. mutans) in vitro. Foram obtidos 4 diagramas de fase pseudo-ternário: 1. Labrasol® (L-polietilenoglicol-8-caprilato/caprato)/Plurol® (P-isoestearato de poligliceril) (3:1)/Oleato Etila - (LP); 2. PEG 40 (óleo de rícino hidrogenado e etoxilado)/Sorbitol (2:1)/ Oleato de etila - (PSO); 3. PEG 40/Sorbitol (2:1)/Miristato de isoropila - (PSM) e 4. PEG 40/Sorbitol/Glicerol (1:1:1)/Oleato de etila e óleo essencial de B. dracunculifolia - (PSG). Os sistemas foram caracterizados (microscopia óptica, estabilidade preliminar, reologia, pH, tamanho de gotículas, viscosidade, condutividade elétrica, densidade relativa e índice de refração). Foram desenvolvidas 4 formulações enxaguatórias com a microemulsão escolhida e submetidas à análise sensorial por teste de preferência. O efeito do enxaguatório bucal contendo o extrato hidroetanólico e óleo essencial de B. dracunculifolia foi avaliado in vitro, sobre fatores cariogênicos de S. mutans: inibição do potencial acidogênico, concentração inibitória mínima (CIM) e influência no perfil de crescimento. Além disso, foram avaliados citotoxicidade por MTT e capacidade de manchamento de dentes de estoque pelo padrão CIELAB do enxaguatório bucal. O sistema microemulsionado escolhido apresentou as seguintes propriedades físico-químicas: viscosidade de 12,40 cP, tamanho de gotícula 19,53 nm, condutividade 204,63 µS/cm, pH final 4,95, densidade relativa 1,0394g/mL, índice de refração igual a 1,3595. A formulação escolhida para desenvolver o enxaguatório bucal, apresenta pH final igual a 5,89, densidade igual a 1,0425 g/mL, índice de refração de 1,3614 e viscosidade igual a 12,0 cP. O enxaguatório bucal apresentou atividade inibitória sobre a produção bacteriana de ácidos, com valor de CI50 igual a 128 µg de extrato bruto/mL da formulação, apresentando CIM (Concentração Inibitória Mínima) igual a 400 g de extrato bruto/mL da formulação, para uma concentração final de inóculo igual a 5 x 103 ufc/mL. Na avaliação de mudança de coloração dos dentes, o enxaguatório bucal de referência Periogard® (contendo digluconato de clorexidina 0,12%) e o enxaguatório de B. dracunculifolia apresentaram valores de E iguais a 2,62 e 0,55 unidades CIELAB, respectivamente, evidenciando que o primeiro mancha os dentes e o segundo não, mas que os dois são clinicamente aceitáveis. Além disso, enxaguatorio bucal contendo extrato e óleo essencial de B. dracunculifolia apresenta baixa interferência na proliferação celular, por teste de MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolium). Os resultados sugerem que a formulação final escolhida possui propriedades antimicrobianas superiores ao extrato hidroetanólico bruto, com baixo efeito citotóxico, credenciando-o para avaliação clínica. / The use of antimicrobial mouthrinses to help the plaques supragengival control and gingivitis has been shown to significantly contribute to patients daily oral hygiene. Formulations based on microemulsions have several interesting characteristics such as the ability to protect labile drugs, their release control, and to increase their solubility and bioavailability. It has been demonstrated that extracts from Baccharis dracunculifolia (Bd), a Brazilian shrub species, popularly known as alecrim-do-campo, show anticariogenic properties, which suggests its appliance into oral care products. However, Baccharis dracunculifolia extracts are poorly water soluble. In this work, we have developed and characterized microemulsions in which Baccharis dracunculifolia extract and essential oil may be incorporated to produce a clear solution in an alcohol-free mouthrinse. Four Bd extract - containing microemulsion systems (1) ethyl oleate/Labrasol®/Plurol® (LP), (2) isopropyl miristate/PEG 40/Sorbytol (PSM), (3) ethyl oleate/PEG 40/Sorbytol (PSO) and (4) ethyl oleate/Baccharis dracunculifolia extract/essencial oil/PEG 40/Sorbytol/Glycerol (PSG), were prepared in aqueous mixtures at room temperature, using the conventional titration technique. The pseudo-ternary phase diagrams were prepared at room temperature. The systems were characterized by optical microscopy, preliminary stability, rheology, pH, droplet size, electrical conductivity, relative density, viscosity and refractive index. The inhibitory effect on bacterial acid production was evaluated through the potentiometric measurement of pH from bacterial suspensions treated with serial concentrations of Bd mouthrinse (16 - 400 µg/mL). For the antibacterial activity assay, the inhibitory effect on bacterial growth and the minimum inhibitory concentrations (MIC) were determined. Bd mouthrinses four formulations sensory analysis was evaluated at preference test. The citotoxicity was evaluated by MTT method and staining potential was measured by CIELAB standart. Two regions were identified in the first diagram (bifasic system and microemulsion) while three regions were identified on the others (bifasic system, emulsion and microemulsion). All systems displayed an oil-in-water microemulsion region. The system chosen for the mouthrinse presented viscosity (12.40 cP), droplet size (19.53nm), conductivity (204.63 S/cm), pH (4.95), relative density (1.0394g/mL) and refractive index (1.3595). The chosen mouthrinse presented viscosity (12.00 cP), droplet size (19.53nm), final pH (5.89), relative density (1.0425g/mL) and refractive index (1.3614). The mouthrinse displayed inhibitory effects upon S. mutans virulence factors. The IC50 value for the inhibitory effect on the bacterial acid production was 128 µg/mL. The MIC value was 400µg/mL. Bd mouthrinse tested by the agar diffusion method, was not displayed growth inhibition. The acrylic resin teeth stainability test displayed E values of 2.62 CIELAB units for the reference mouthrinse (Periogard®) and 0,55 for Bd mouthrinse. According to results, the reference mouthrinse (Periogard®) causes resin acrylic teeth color variation while Bd mouthrinse did not cause teeth staining or cytotoxicity by MTT method. The Results indicate that these systems could be an interesting Bd vehicle for a mouthrinse and suggest that the final rising formulation has antimicrobial properties superior to the rough hydroetanolic extract, with low cytotoxic effect, turning it credible to clinical evaluation.

Orientador: Altair A. Del Bel Cury / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-25T04:05:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rocha_EduardoPassos_M.pdf: 8338827 bytes, checksum: a8aba43a0026699db752f3c1473b688b (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Parte da literatura relaciona o uso da prótese parcial removível (PPR) com níveis diferenciados de estreptococos do grupo mutans (EGM). No entanto, os relatos são inconclusivos e os trabalhos que associam medidas preventivas de controle químico são poucos e inexistentes a longo prazo. Dessa forma, o objetivo do trabalho foi avaliar a influência da PPR no índice de EGM na saliva, e o seu controle químico com o uso do gel de digluconato de clorexidina a 1 % (CHX). Para tanto, amostras de saliva foram coletadas imediatamente antes da instalação da PPR (tempo zero=T0), 8 dias após (T8), 48 dias após (T 48), 92 dias após (T92), 140 dias após (T140) e 189 dias após a instalação da PPR (T189). Estas foram homogeneizadas em agitador de tubos (Vortex) por 1 min. Diluições seriadas de '10 POT. ¿1' a '10 POT. ¿6' foram realizadas em solução estéril de tampão fosfato, 0,05 M, pH 7,0. Em duplicata, alíquotas de 25 'muL' foram semeadas em placas de petri contendo ágar MSB. A seguir, as placas foram incubadas em estufa de C02 (5%), a 37°C, por 72 horas. Os resultados apresentaram diferença estatística (Test t, p<0,05) entre os valores de T0 e T48, respectivamente: (média/desvio-padrão em UFC de EGM/mL de saliva) 2,26 x '10 POT. 6'/4,43 x '10 POT. 6' e 4,79 x '10 POT. 7'/1,48 x '10 POT. 8'. Decorrido esses períodos, a CHX foi aplicada em 29 voluntários, não sendo eficaz na redução dos níveis de EGM (Test t, p>0,05). Novas amostras de CHX foram formuladas e avaliadas quanto à efetividade. A nova formulação foi aplicada em 15 voluntários. Amostras de saliva foram coletadas nos períodos: antes da aplicação da clorexidina (tempo zero=T0), 24 horas após (T24h) e 82 dias após (T82). Os resultados apresentaram diferença estatística (Sign Rank, p<0,05) entre os valores de T0 e T24h, respectivamente: (média/desvio-padrão em UFC de EGM/mL de saliva) 6,64 x '10 POT. 6'/8,47 x '10 POT. 6' e 3,20 x '10 POT.5'/4,27 x '10 POT. 5'. O índice de EGM na saliva retomou aos valores iniciais num período de 82 dias (T82). Concluiu-se Que o uso da PPR promoveu aumento significativo do índice de EGM após 48 dias de instalação da prótese e Que o gel de clorexidina a 1 % foi eficaz na redução do índice de EGM num intervalo de tempo entre 24h e 82 dias após a segunda aplicação / Abstract: Many studies have reported an evaluating of the salivary levels of MS in patients submitted to oral rehabilitation with RPD. Thus, after subscription of consent term and approval of ethic committee, saliva samples (2.0 mL) were obtained from 32 patients in 6 periods: (T0): immediately before installation of RPD; (T8): 8 days after T0; (T48): 48 days after T0; (T92): 92 days after T0; (T140): 140 days after T0 and (T189): 189 days after T0. The samples were vortexed and serially diluted from '10 POT. ¿1' to '10 POT. ¿6' in 0.05 M phosphate buffer in the number of MS in saliva between the periods T0 and T48 (mean/SD, CFU/mL saliva): T0: 1.90/4.02 x '10 POT. 6' and T48: 0.38/1.33 x '10 POT. 8'. After this, intensive treatment with CHX was (pH 7.4). From each dilution, 0.025 mL was plated on MSB. The plates were incubated in 5% COz at 37°C for 72 hours. There was a statistically significant increase (Test t, p<0.05) accomplished in 29 patients. Saliva samples (2.0 mL) were obtained after treatment in 4 periods: (T24h): 24 hours after T24h; (T14): 14 days after T24h; (T28): 28 days after T24h and (T63): 63 days after T24h. After treatment with CHX, the number of MS in saliva did not decrease (Test t, p>0.05). A new CHX formulation was applied in 15 patients. Saliva samples (2.0 mL) were obtained in periods: (T0): before CHX; (T24h): 24 hours after T0 and (T82): 82 days after T0. The new CHX reduced the MS in periods T0 and T24h: (mean/SD, CFU/mL saliva): T0: 6.64/8.47 x '10 POT. 6' and T24h: 3.2/4.27 x '10 POT. 5' (Sign Rank, p<0.05). In conclusion, there was a significant increase in the number of MS in saliva after installation of RPD and that the intensive treatment with a properly formulated 1 % chlorhexidine gel was effective in the reduction of MS between 24h and 82 days after new appliance of CHX / Mestrado / Protese Dental / Mestre em Clínica Odontológica

Magister Scientiae (Medical Bioscience) - MSc(MBS) / Good oral health has a major influence on the general quality of life and well-being. Several chronic and systemic diseases have been attributed to poor oral health. With the increasing incidence of oral diseases, the global need for alterative prevention and treatment methods and safe, effective, and economical products has expanded. There are many studies showed that Streptococcus mutans has been implicated as major etiological agent of dental caries. South African has very rich natural flora especially Cape region. Several South African medicinal plants have been used since immemorial time for treatment of different human pathologies including dental problems. The antibacterial activities of plants extracts have been recognized and documented scientifically during the last few decades. In this project we aimed at the screening of 31 South African plants randomly collected from Cape region for their antibacterial activity against Streptococcus mutans initially at two concentrations (500 and 100 µg/ml).MIC’s and MBC’s were determined for the active plant extracts, as well as the qualitative studies of the effect of the active extracts on the biofilm formation. The best or the most active safe plant (Psoralea fruticans) was submitted to chromatographic separation to isolate the bioactive compounds which could be responsible for such activity. Identification of the pure active compounds was carried out using different spectroscopic techniques. Finally the biological evaluation of the isolated pure compounds was measured against S. mutans and also the cytotoxicity studies in-vitro against normal cells lines was carried out.

Orientador: Elisa Maria Aparecida Giro / Resumo: O peróxido de hidrogênio (H2O2) é considerado uma das principais fontes endógenas de estresse oxidativo para bactérias orais. Contudo, o seu papel no processo de desenvolvimento da cárie dentária ainda não está completamente elucidado. O objetivo deste estudo in vitro foi gerar uma cepa de Streptococcus mutans tolerante ao H2O2, e avaliar a habilidade do H2O2 em afetar a formação e a virulência de biofilmes de S. mutans. Para gerar a cepa tolerante ao H2O2, a cepa de S. mutans UA159, foi reativada em placas de agar BHI e incubadas (48 horas, a 37°C e 5% de CO2). Duas a cinco colônias foram transferidas para tubos falcon contendo 2 mL de caldo BHI suplementado com 1% de glicose e incubadas por 18 horas, sob as mesmas condições. As culturas foram diluídas 1:20 em meio de cultura fresco, incubadas até atingirem a fase exponencial de crescimento, centrifugadas, lavadas, ressuspensas em glicina, e submetidas a tratamento com 80 mM de H2O2. Esses procedimentos foram repetidos por oito vezes, e as colônias sobreviventes foram consideradas tolerantes. Em seguida, para o crescimento do biofilme, foi usado um modelo de aderência ativa. Lamínulas de vidro estéreis, jateadas com óxido de alumínio, foram imersas em saliva filtrada para a formação da película adquirida. Posteriormente, foram imersas verticalmente em 2,8 mL de caldo BHI com 1% de sacarose (n=12 por grupo) inoculado com 106 UFC/mL da cepa controle (grupo GC) ou da cepa tolerante ao H2O2. Para a cepa tolerante ao H2O2, em um ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Hydrogen peroxide (H2O2) is one of the main endogenous sources of oxidative stress for oral bacteria. However, its role in the dental caries development has not been fully elucidated. The objective of this in vitro study was to generate a strain of S. mutans tolerant to H2O2, and to evaluate the ability of H2O2 to affect the biofilm formation and virulence of S. mutans. To generate the H2O2 tolerant strain, S. mutans UA159 was reactivated on BHI agar plates, and incubated (48 hours at 37 oC and 5% CO2). Two to five colonies of the microorganism were transferred to falcon tubes containing 2 mL of BHI broth supplemented with 0.8% glucose and incubated under the same conditions for 18 hours. The culture was diluted 1:20 in fresh culture medium, incubated again until reaching the mind-log growth phase, centrifuged, washed, suspended in glycine, and treated with 80 mM H2O2. These procedures were repeated for eight times, and then the surviving colonies were considered tolerant. Next, the biofilm were grown on glass slides using an active adherence model. First, sterile glass slides, sandblasted with aluminum oxide, were immersed in filtered saliva to form the acquired pellicle. After that, the slides were immersed vertically in 2.8 mL of BHI broth with 1% sucrose (n = 12 per group) and inoculated with 106 CFU/mL of the control strain (GC Group) or H2O2 tolerant strain. For the H2O2 tolerant strain, in a group (GTcPH group) 80 mM H2O2 were added in the culture medium and in the oth... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre