O objetivo do presente estudo foi comparar a expressão de IL-1β, IL-4, IL-8, interferon-γ, atividade de elastase e a composição do perfil microbiano subgengival antes e depois do tratamento periodontal não cirúrgico em pacientes com doença peridontal crônica generalizada (PC) e agressiva generalizada (PA). Vinte pacientes com PC e quatorze com PA foram avaliados. Dados clínicos, fluido gengival e biofilme subgengival foram analisados na visita inicial (VI) e 3 meses (3M) após o tratamento periodontal não cirúrgico. Amostras de fluido gengival (FG) foram coletadas com tiras de papel e os níveis de: IL-1β, IL-4, IL-8 e INF-γ foram medidos, utilizando um tipo de imunoensaio multiplexado (Luminex). Atividade da elastase foi avaliada por um ensaio enzimático. Amostras de placa subgengival foram analisadas através do checkerboard DNA-DNA hybridization. Na avaliação de 3 meses após terapia periodontal foi encontrado melhora significativa para todos os parâmetros clínicos em ambos os grupos. Foram encontradas reduções significativas na atividade de elastase nos sítios rasos e profundos dos pacientes do grupo PA e nos sítios profundos do grupo PC, também foi achado um aumento significativo de INF-γ nos sítios rasos do grupo PA. Os dados microbiológicos, mostraram reduções significativas para os níveis dos membros do complexo vermelho (P. gingivalis, T. forsythia, T.denticola), e para as espécies E.nodatum e P.micra no grupo PC. No grupo PA, ocorreram reduções significativas no níveis de P. gingivalis, T. forsythia, Fusobacterium nucleatum ss polymorphum e Fusobacterium periodonticum. Quando as respostas clínica e imunológica 3M após terapia foram comparadas entre os grupos, apenas diferenças sutis foram observadas. Nenhuma diferença microbiológica foi encontrada entre os grupos após a terapia. Em conclusão, os achados suportam nossa hipótese de que as periodontites cronica e agressiva respondem de forma semelhante ao tratamento periodontal nao cirúrgico. / Our aim was to compare the expression of IL1β, IL-4, IL-8, INF-γ, elastase activity and the composition of the subgingival microbiota profile before and after non-surgical periodontal treatment in patients with untreated generalized chronic (GCP) and aggressive periodontitis (GAgP). Twenty patients with GCP and 14 with GAgP were evaluated. Clinical data, GCF and plaque were analyzed at baseline and 3 months after non-surgical periodontal treatment. IL-1β, IL-4, IL-8 and INFγ were analyzed in a luminex assay. Elastase activity was assessed by an enzymatic assay. Subgingival plaque samples were analyzed using checkerboard DNA-DNA hybridization. Three months after periodontal therapy significant improvement for all clinical parameters in both groups were found. We have found significant reductions in the elastase activity in shallow and deep sites from GAgP and in deep sites from GCP group. A significant increase in INF-γ in the shallow sites from GAgP group were also found. Microbiological data showed significant reductions in the levels of members of the red complex (P. gingivalis, T. forsythia, T. denticola), and for the species E.nodatum and P.micra on GCP group. In the GAgP group, there were significant reductions in levels of P. gingivalis, T. forsythia, Fusobacterium nucleatum and Fusobacterium polymorphum ss periodonticum. When the clinical and immunological responses after therapy were compared between groups, only slight differences were found. No microbiological difference was found between groups after therapy. In conclusion, the findings support our hypothesis that the chronic and aggressive periodontitis respond equally well to non-surgical periodontal treatment.

Aggregatibacter actinomycetemcomitans e Fusobacterium nucleatum são microrganismos gram-negativos presentes nos processos inflamatórios e nas diferentes formas da doença periodontal. Ambos formam parte da microbiota residente da cavidade bucal humana podendo levar ao desenvolvimento de infecções endógenas ou exógenas. Neste estudo, as avaliações qualitativa, quantitativa e genotípica de A. actinomycetemcomitans e F. nucleatum isolados de pacientes com gengivite, periodontite crônica e indivíduos sadios foram realizadas. Biofilmes subgengivais de 70 pacientes com gengivite, 75 com periodontite crônica e 95 indivíduos saudáveis foram avaliados. A. actinomycetemcomitans foi isolado em 2 (2,8%) pacientes com gengivite, 4 (5,3%) com periodontite e 5 (5,3%) sadios; e F. nucleatum em 13 (18,6%) pacientes com gengivite, 20 (26,6%) com periodontite crônica e 19 (20%) sadios. Ambos os microrganismos foram isolados em 5 (7,1%) pacientes com gengivite, 9 (12%) com periodontite crônica e 3 (3,15%) sadios. Por PCR, os DNA de A. actinomycetemcomitans foram detectados em 23 (32,8%) pacientes com gengivite, 20 (26,6%) com periodontite crônica e 38 (40%) indivíduos saudáveis; e de F. nucleatum em 17 (24,3%) pacientes com gengivite, 11 (14,6%) com periodontite e 19 (20%) sadios. Em associação esses microrganismos foram detectados em 23 (32,8%) pacientes com gengivite, 40 (53,3%) com periodontite crônica e 17 (17,8%) sadios. A. actinomycetemcomitans isolados de pacientes com gengivite pertenceram aos biotipos I, II, IV, V e X, e aos sorotipos a, c, e e. Em pacientes com periodontite foram encontrados os biotipos II, VI e X, e os sorotipos a, b, e c, sendo o sorotipo c o mais predominante (80%); e em indivíduos sadios os biotipos II e X, e os sorotipos b e c. Os valores quantitativos de A. actinomycetemcomitans para os três grupos analisados variaram em número de cópias de 0 a 1,14 x 108, e de F. nucleatum de 0 a 3,98 x 106. Os resultados obtidos por AP-PCR mostram a heterogeneidade dos isolados de A. actinomycetemcomitans e de F. nucleatum nos diferentes grupos clínicos de pacientes avaliados. Esses resultados comparativos poderão ser levados em consideração pelos clínicos para melhor direcionar o tratamento da doença periodontal, colaborando de forma efetiva para o seu monitoramento. / Aggregatibacter actinomycetemcomitans and Fusobacterium nucleatum are gram-negative microorganisms observed in inflammatory processes and different forms of periodontal disease. Both are part of the human oral resident microbiota which may cause endogenous or exogenous infections. In this study, a qualitative, quantitative and genotypic analysis of A. actinomycetemcomitans and F. nucleatum isolated from patients with gingivitis, chronic periodontitis and healthy subjects were determined. Subgingival biofilms of 70 patients with gingivitis, 75 with chronic periodontitis and 95 healthy subjects were evaluated. A. actinomycetemcomitans was isolated in 2 (2,8%) patients with gingivitis, 4 (5,3%) with periodontitis and 5 (5,3%) healthy individuals; and F. nucleatum in 13 (18,6%) patients with gingivitis, 20 (26,6%) with chronic periodontitis and 19 (20%) healthy. Both microorganisms were identified in 5 (7,1%) patients with gingivitis, 9 (12%) with chronic periodontitis and 3 (3,15%) healthy. By PCR, DNA of A. actinomycetemcomitans were detected in 23 (32,8%) patients with gingivitis, 20 (26,6%) with chronic periodontitis and 38 (40%) healthy individuals; and F. nucleatum 17 (24,3%) patients with gingivitis, 11 (14,6%) with periodontitis and 19 (20%) healthy. In association, microorganisms were detected in 23 (32,8%) patients with gingivitis, 40 (53,3%) with chronic periodontitis and 17 (17,8%) healthy. A. actinomycetemcomitans isolated from patients with gingivitis belonged to biotype I, II, IV, V, X, and serotypes a, c and e. In patients with periodontitis biotypes II, VI and X and serotypes a, b, and c were found and serotype c was the most predominant (80%); and healthy individuals biotypes II and X, and serotypes b and c. Quantitative values for A. actinomycetemcomitans in the three patients groups were ranged from 0 to 1.14 x 108 and F. nucleatum 0 to 3.98 x 106. The results of this study by AP-PCR showed the heterogeneity of A. actinomycetemcomitans and F. nucleatum in the different clinical status. These comparative results can be considered by dentists for the treatment of periodontal disease and its effective monitoring.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:31:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BrunaRafaelaMS.pdf: 1773532 bytes, checksum: 553ecb49ceff7440e7c16d387e2a1ca2 (MD5) Previous issue date: 2007-02-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The aim of this study was determine the prevalence and antimicrobial susceptibility of Staphylococcus spp. from patients with periodontal disease and periodontally healthy, correlate them with factors to host, local environment and traits of the diseases. To this, thirty adults from 19 to 55 years old were selected. They had not periodontal treatment and no antibiotic or antimicrobial was administered during three previous months. From these individuals, sites periodontally healthy, with chronic gingivitis and/or periodontitis were analyzed. Eighteen subgingival dental biofilm samples were collected through sterile paper points being six from each tooth randomly selected, representing conditions mentioned. They were transported to Oral Microbiology laboratory, plated onto Mannitol Salt Agar (MSA) and incubated at 370C in air for 48 h. Staphylococcus spp. were identified by colonial morphology, Gram stain, catalase reaction, susceptibility to bacitracin and coagulase activity. After identification, strains were submitted to the antibiotic susceptibility test with 12 antimicrobials, based on Kirby-Bauer technique. To establish the relation between coagulase-negative Staphylococcus (CSN) presence and their infection levels and host factors, local environment and traits of diseases were used Chi-square, Mann-Whitney and Kruskal-Wallis tests to a confidence level of 95%. 86,7% subjects harbored CSN in 11,7% periodontal sites. These prevalence were 12,1% in healthy sites, 11,7% in chronic gingivitis, 13,5% in slight chronic periodontitis, 6,75% in moderate chronic periodontitis and in sites with advance chronic periodontitis was not isolated CSN, without difference among them (p = 0,672). There was no significant difference to presence and infection levels of CSN as related to host factors, local environm ent and traits of the diseases. Amongst the 74 samples of CSN isolated, the biggest resistance was observed to penicillin (55,4%), erythromycin (32,4%), tetracycline (12,16%) and clindamycin (9,4%). 5,3% of the isolates were resistant to oxacilin and methicillin. No resistance was observed to ciprofloxacin, rifampicin and vancomycin. It was concluded that staphylococci are found in low numbers in healthy or sick periodontal sites in a similar ratio. However, a trend was observed to a reduction in staphylococci occurrence toward more advanced stages of the disease. This low prevalence was not related to any variables analyzed. Susceptibility profile to antibiotics demonstrates a raised resistance to penicillin and a low one to methicillin. To erythromycin, tetracycline and clindamycin was observed a significant resistance / O objetivo deste estudo foi determinar a preval?ncia e a susceptibilidade antimicrobiana de Staphylococcus spp. em quadros de sa?de e doen?a periodontal, relacionando-as com fatores do hospedeiro, do meio ambiente local e pr?prios das doen?as. Para tanto, foram selecionados 30 indiv?duos adultos, entre 19 e 55 anos, que apresentassem s?tios periodontais saud?veis, com gengivite cr?nica e/ou periodontite cr?nica, sem tratamento periodontal, e que n?o tivessem usado antibi?tico ou antimicrobiano nos ?ltimos tr?s meses. De cada paciente foram coletadas 18 amostras de biofilme subgengival, sendo 6 por elemento dent?rio sorteado com as condi??es supracitadas. Com o aux?lio de pontas de papel absorventes est?reis, tais amostras foram coletadas do sulco gengival ou bolsa periodontal, semeadas em Agar Manitol Salgado e incubadas a 370C por 48 horas. A identifica??o de Staphylococcus spp. se deu atrav?s da colora??o de Gram, prova da catalase, susceptibilidade ? bacitracina e prova da coagulase livre Ap?s a identifica??o, as amostras foram submetidas ao teste de susceptibilidade a doze antimicrobianos, atrav?s da t?cnica de Kirby-Bauer. Para o estabelecimento da rela??o entre a presen?a de estafilococos coagulase-negativos, os n?veis de infec??o dos mesmos e os fatores do hospedeiro, do meio ambiente local e pr?prios das doen?as, foram usados os testes do Quiquadrado, Mann-Whitney e Kruskal-Wallis para um n?vel de confian?a de 95%. Quanto ? preval?ncia de estafilococos coagulase-negativos, 86,7% dos indiv?duos albergavam este microrganismo em 11,7% dos s?tios periodontais, sendo distribu?dos em 12,1% entre os saud?veis, 11,7% com gengivite cr?nica, 13,5% com periodontite cr?nica leve, 6,75% com periodontite cr?nica moderada e nenhum s?tio com periodontite cr?nica severa (p=0,672). N?o houve associa??o significativa na freq??ncia de isolamento ou nos n?veis de infec??o de ECN com fatores do hospedeiro, do meio ambiente local e pr?prios das doen?as. Dentre as 74 cepas isoladas de ECN, a maior resist?ncia observada neste estudo foi ? penicilina (55,4%), eritromicina (32,4%), tetraciclina (12,16%) e clindamicina (9,4%). Cinco v?rgula tr?s por cento das cepas foram resistentes ? oxacilina e ? meticilina. Nenhuma cepa apresentou resist?ncia aos antibi?ticos ciprofloxacina, rifampicina e vancomicina. Conclui-se, portanto, que os estafilococos est?o presentes em baixos n?meros em s?tios periodontais saud?veis e doentes numa propor??o equivalente. Por?m, uma tend?ncia foi observada em rela??o ao decr?scimo de sua ocorr?ncia em quadros mais avan?ados da doen?a periodontal. Essa baixa preval?ncia de SCN n?o esteve associada a nenhum a das vari?veis testadas nesse estudo. O perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos demonstrou um a elevada resist?ncia ? penicilina, por?m uma baixa resist?ncia ? meticilina. Para a eritromicina, tetraciclina e clindamicina foi encontrada uma resist?ncia significativa

O objetivo do presente estudo foi comparar a expressão de IL-1β, IL-4, IL-8, interferon-γ, atividade de elastase e a composição do perfil microbiano subgengival antes e depois do tratamento periodontal não cirúrgico em pacientes com doença peridontal crônica generalizada (PC) e agressiva generalizada (PA). Vinte pacientes com PC e quatorze com PA foram avaliados. Dados clínicos, fluido gengival e biofilme subgengival foram analisados na visita inicial (VI) e 3 meses (3M) após o tratamento periodontal não cirúrgico. Amostras de fluido gengival (FG) foram coletadas com tiras de papel e os níveis de: IL-1β, IL-4, IL-8 e INF-γ foram medidos, utilizando um tipo de imunoensaio multiplexado (Luminex). Atividade da elastase foi avaliada por um ensaio enzimático. Amostras de placa subgengival foram analisadas através do checkerboard DNA-DNA hybridization. Na avaliação de 3 meses após terapia periodontal foi encontrado melhora significativa para todos os parâmetros clínicos em ambos os grupos. Foram encontradas reduções significativas na atividade de elastase nos sítios rasos e profundos dos pacientes do grupo PA e nos sítios profundos do grupo PC, também foi achado um aumento significativo de INF-γ nos sítios rasos do grupo PA. Os dados microbiológicos, mostraram reduções significativas para os níveis dos membros do complexo vermelho (P. gingivalis, T. forsythia, T.denticola), e para as espécies E.nodatum e P.micra no grupo PC. No grupo PA, ocorreram reduções significativas no níveis de P. gingivalis, T. forsythia, Fusobacterium nucleatum ss polymorphum e Fusobacterium periodonticum. Quando as respostas clínica e imunológica 3M após terapia foram comparadas entre os grupos, apenas diferenças sutis foram observadas. Nenhuma diferença microbiológica foi encontrada entre os grupos após a terapia. Em conclusão, os achados suportam nossa hipótese de que as periodontites cronica e agressiva respondem de forma semelhante ao tratamento periodontal nao cirúrgico. / Our aim was to compare the expression of IL1β, IL-4, IL-8, INF-γ, elastase activity and the composition of the subgingival microbiota profile before and after non-surgical periodontal treatment in patients with untreated generalized chronic (GCP) and aggressive periodontitis (GAgP). Twenty patients with GCP and 14 with GAgP were evaluated. Clinical data, GCF and plaque were analyzed at baseline and 3 months after non-surgical periodontal treatment. IL-1β, IL-4, IL-8 and INFγ were analyzed in a luminex assay. Elastase activity was assessed by an enzymatic assay. Subgingival plaque samples were analyzed using checkerboard DNA-DNA hybridization. Three months after periodontal therapy significant improvement for all clinical parameters in both groups were found. We have found significant reductions in the elastase activity in shallow and deep sites from GAgP and in deep sites from GCP group. A significant increase in INF-γ in the shallow sites from GAgP group were also found. Microbiological data showed significant reductions in the levels of members of the red complex (P. gingivalis, T. forsythia, T. denticola), and for the species E.nodatum and P.micra on GCP group. In the GAgP group, there were significant reductions in levels of P. gingivalis, T. forsythia, Fusobacterium nucleatum and Fusobacterium polymorphum ss periodonticum. When the clinical and immunological responses after therapy were compared between groups, only slight differences were found. No microbiological difference was found between groups after therapy. In conclusion, the findings support our hypothesis that the chronic and aggressive periodontitis respond equally well to non-surgical periodontal treatment.

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OBJETIVOS: investigar a prevalência e a presença de distintos perfis microbianos no biofilme subgengival e avaliar o seu papel no diagnóstico e risco das doenças periodontais destrutivas em uma população isolada brasileira sem acesso à tratamento periodontal e tradição ao uso de métodos de higiene bucal. MATERIAL E MÉTODOS: A população-alvo consistiu de todos os indivíduos com 12 ou mais anos de idade (N= 264) residentes na microárea Cajaíba, identificados por meio de um censo. Estes indivíduos foram entrevistados por meio de um questionário estruturado e submetidos a um exame periodontal completo que consistiu na avaliação de 6 sítios por dente em toda a boca e na coleta de amostras do biofilme subgengival em 4 sítios por indivíduo. A detecção dos micro-organismos A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythia e C. rectus, bem como a distribuição dos sorotipos e presença do clone JP2 do A. actinomycetemcomitans foram avaliadas por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). RESULTADOS: A. actinomycetemcomitans foi detectado em 25% dos indivíduos, enquanto que P. gingivalis T. forsythia, P.intermedia e C. rectus foram detectados em 64%, 59%, 38% e 90% dos indivíduos, respectivamente. Entre as amostras positivas para o A. actinomycetemcomitans (n=42), 18 (42%) representaram o sorotipo a, 2 (5%) o sorotipo b, 19 (46%) o sorotipo c, 1 (2%) o sorotipo e, e 4 (10%) foram não-sorotipáveis. O clone JP2 do A. actinomycetemcomitans não foi detectado em nenhum indivíduo desta população. Dois perfis microbianos subgengivais foram identificados: (perfil 1) nenhum dos microrganismos estudados, com exceção do C. rectus (n = 31), e (perfil 2) co-ocorrência de P. gingivalis e T. forsythia (n = 77). O perfil 1 demonstrou valores de sensibilidade extremamente baixos, enquanto que o perfil 2 apresentou valores de sensibilidade variados na identificação dos desfechos subrrogados periodontais avaliados, e valores de baixos a moderados para a especificidade. Os seguintes perfis subgengivais estiveram associados com a prevalência de perda clínica de inserção (NCI) e profundidade de sondagem (PS) nos modelos finais de regressão logística múltipla, ajustados para variáveis demográficas, biológicas e comportamentais: T. forsythia (PS e NCI 5 mm, e 7 mm), P. gingivalis (NCI 7 mm) e o perfil 2 (PS 5 mm e NCI 7 mm). CONCLUSÕES: Os micro-organismos periodontais estudados foram prevalentes nessa população isolada. Esta população apresentou predominância dos sorotipos a e c do A. actinomycetemcomitans. Dois perfis microbianos subgengivais puderam ser identificados nesta população isolada. Porém, eles não foram superiores ao diagnóstico de parâmetros clínicos periodontais específicos, quando adicionados à informação clínica tradicional. Perfis microbianos subgengivais apresentando T. forsythia como indicador de risco foram significativamente associados com o aumento da PS e do NCI nessa população isolada. / AIMS: To investigate the prevalence and describe the subgingival microbial profiles of selected periodontal pathogens in the subgingival biofilm; and assess their role as possible diagnostic markers or risk indicators for destructive periodontal diseases in a periodontally untreated and isolated population from Brazil. MATERIAL AND METHODS: The target population consisted of all subjects aged 12 years (n=264) in an isolated Brazilian population. A full-mouth clinical examination was conducted, and pooled subgingival plaque samples were obtained from four sites per subject. PCR analyses were performed to identify the following microorganisms: A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, T. forsythia, P. intermedia and C. rectus, as well as the A. actinomycetemcomitans serotype distribution and JP2 clone detection. RESULTS: A. actinomycetemcomitans was detected in 25% of the subjects, whereas P. gingivalis, T. forsythia, P.intermedia and C. rectus were detected in 64%, 59%, 38% and 90% of the subjects, respectively. From the A. actinomycetemcomitans positive isolates (n=42), 18 (42%) were serotype a, 2 (5%) b, 19 (46%) c, 1 (2%) e, and 4 (10%) were non-serotypeable. None of the strains belonged to the JP2 clone. Two specific subgingival microbial profiles were identified: (1) In one, only C. rectus could or not be present (n = 31), while in the other, (2) Co-occurrence of T. forsythia and P. gingivalis was observed (n = 77). Profile 1 showed very low sensitivity values, and profile 2 showed varying sensitivity values for the identification of the various periodontal states, and considerably low to moderate specificity values. The following subgingival profiles were significantly associated with the prevalence of periodontal attachment loss (CAL) and probing depth (PD) in the final multiple logistic regression models adjusted for demographic, biological and behavioral variables: T. forsythia (PD and CAL 5 mm and 7 mm), P. gingivalis (CAL 7 mm) and the profile 2 (PD 5 mm and CAL 7 mm). CONCLUSIONS: The five studied periodontal microorganisms were prevalent in this isolated population. The A. actinomycetemcomitans positive subjects consisted predominantly of a and c serotypes. Two specific microbial profiles could be identified in this isolated population. They did not result in significant superior diagnostic accuracy when compared totraditional clinical markers. Subgingival microbial profiles presenting T. forsythia as risk indicator were significantly associated with increased PD and CAL in this isolated population.

O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito clínico da instrumentação ultra-sônica subgengival irrigada com óleos essenciais na redução de bolsas periodontais em sítios 5mm após a reavaliação. Para tanto foi conduzido um ensaio clínico aleatório, duplo-cego, paralelo e controlado com placebo. Foram convidados para participar deste estudo 64 indivíduos com periodontite crônica. Os pacientes foram aleatoriamente alocados para grupo teste (irrigação com óleos essenciais contendo Timol 0,064%, Eucaliptol 0,092% Salicilato de Metila 0,06%, Mentol 0,042% e Álcool 21,6%) ou controle (irrigação com placebo, solução alcoolica 21%). Foram avaliados os parâmetros clínicos profundidade clínica de sondagem (PCS), nível clínico de inserção (NCI), retração da margem gengival (R), sangramento à sondagem (SS) e índice de placa (IP) no início e 4, 12 e 24 semanas após. O indivíduo foi considerado a unidade estatística. As diferenças entre os grupos e as alterações ao longo do tempo foram analisadas de acordo com um modelo linear generalizado (análise de variância de medidas repetidas). Houve redução significativa de PCS (1,59mm teste e 1,16mm controle) e SS (44,4% teste e 52,62% controle) e ganho em NCI (1,15mm teste e 0,91mm controle) nos dois grupos (p<0,001). No entanto, não houve diferenças entre os grupos ao final do estudo. Quando foram analisadas apenas as bolsas com PCS inicial >7mm observou-se redução significativa na PCS no grupo teste (1,60mm, p = 0,004) e controle (1,10mm, p = 0,0008) e ganho de NCI significativo no grupo teste apenas (teste: 1,59mm, p<0,001; controle: 0,71mm, p=0,051), sendo que houve diferença significativa entre os grupos após 24 semanas (p=0,02). Concluiu-se que a instrumentação ultra-sônica subgengival em bolsas residuais promoveu redução significativa em PCS, SS e ganho significativo de NCI. Além disso, o uso de óleos essenciais como agente irrigante promoveu benefícios adicionais em ganho de NCI em bolsas > 7mm, quando comparado com o grupo controle. / The aim of this study was to evaluate the clinical effect of ultrasonic instrumentation irrigated with essential oils in the reduction of sites with a probing depth of 5 mm or more. For this purpose, a randomized, double-blind, parallel-arm and placebocontrolled clinical trial was conducted. Sixty-four individuals with chronic periodontitis were invited to participate in this study. The patients were randomly allocated to the test group (irrigation with essential oils containing 0.064% Thymol, 0.092% Eucalyptol, 0.06% Methyl Salicylate, 0.042% Menthol and 21.6% Alcohol) or control (irrigation with placebo, 21% alcoholic solution). Probing pocket depth (PD), clinical attachment level (CAL), gingival recession (R), bleeding on probing (BOP) and plaque index (PI) were assessed. The individual was considered the statistical unit. The differences between the groups and the alterations over the course of time were analyzed according to a generalized linear model (repeated measures analysis of variance). There was a significant reduction in PD (1.59mm test and 1.16mm control) and BOP (44.4% test and 52.62% control) and CAL gain (1.15mm test and 0.91mm control) in both groups (p<0.001). However, there was no difference between groups at the end of the trial. When sites with PD >7mm at baseline were analyzed, a significant reduction in PD was observed in test (1.60mm, p = 0.004) and control groups (1.10mm, p = 0.0008), as well as a significant gain in CAL in test group only (test: 1.59mm, p<0.001; control: 0.71mm, p=0.051). There was a significant difference between the groups after 24 weeks (p=0.02). It was concluded that subgingival ultrasonic instrumentation in residual pockets promoted reduction in PPD, BOP and gain in CAL. Besides, adjunctive irrigation with essential oils promoted additional benefits in gain of CAL in sites with initial pockets > 7mm, when compared to test group.

Porphyromonas gingivalis é um dos principais mircrorganismos associados à periodontite. O objetivo do presente estudo foi testar a hipótese de que a colonização por diferentes genótipos fimA de P.gingivalis resultaria em diferenças na resposta ao tratamento periodontal. Foram analisados 20 pacientes com periodontite crônica, fumantes, portadores de P.gingivalis, divididos em 2 grupos: 1 grupo recebeu tratamento periodontal mecânico (RAR) e o outro recebeu, além da RAR, antibioticoterapia (amoxicilina e metronidazol). O efeito do tratamento foi avaliado com relação a parâmetros clínicos, prevalência e níveis subgengivais de P. gingivalis e dos genótipos fimA II e fimA IV em estudo quantitativo por PCR em tempo real, antes e 180 dias após o tratamento. Os dados sugerem que RAR associado a antibiotioticoterapia sistêmica é mais eficiente na redução dos níveis de P.gingivalis do que apenas RAR. Não foram detectadas diferenças na resposta ao tratamento periodontal quanto à presença dos genótipos fimA II ou fimA IV em relação aos demais genótipos de P.gingivalis. / Porphyromonas gingivalis is one of the main mircrorganisms associate to periodontitis. The present study proposed to test the hypothesis that the colonization by different P.gingivalis genotypes fimA would lead to different results on periodontal treatment. Twenty chronic periodontitis patients, smokers, bearers of P. gingivalis was analyzed and divided in 2 groups: one group received mechanic periodontal treatment (SRP) and the other group received, besides SRP, antibiotic therapy (amoxicillin and metronidazole). The effect of treatment was appraised under clinical parameters, prevalence and subgingival levels of P. gingivalis and genotypes fimA II and fimA IV in quantitative study by Real time PCR, before and after 180 days of the treatment. Data suggest that SRP associated with systemic antibiotic administration is more efficient in reducing P. gingivalis levels than SRP only. No difference on periodontal treatment results was detected about the presence of fimA II or fimA IV genotypes related to other P.gingivalis genotypes.

Archaea ainda não foi reconhecido como patógeno de doença humana. O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência, diversidade, níveis e proporções de Archaea no biofilme subgengival de indivíduos com periodontite agressiva (PA) e saúde periodontal (SP). Sessenta indivíduos foram selecionados para este estudo (n=30/grupo). A análise de diversidade foi realizada em 10 indivíduos/grupo. Quatro sítios/indivíduo do grupo PA e 2 sítios/indivíduo do grupo SP foram analisados por qPCR. A freqüência de Archaea foi de 60% dos indivíduos/ 15,2% dos sítios em PA e de 63,3% dos indivíduos/ 15,6% dos sítios em SP (p>0,05). Um a três filotipos foi identificado por amostra. O número de cópias e a proporção de Archaea e Bacteria foram menores no grupo SP do que no grupo PA (p<0,05). Archaea são encontrados no biofilme subgengival de indivíduos com PA e SP. Methanobrevibacter oralis é o filotipo mais prevalente, podendo ser considerado residente da cavidade bucal. A alteração ecológica na microbiota de indivíduos com PA inclui o aumento dos níveis e proporções de Archaea. / Membrers of Archaea domain may be detected in the microbiota of mucous surfaces of human and animals, but their association with diesase have not been yet stablished Some studies have suggested that Archaea domain may be indirectly associated with pathogenesis of periodontitis, since they are found restrict to subgingival sites with severe periodontal destruction. The aim of this study was to determine the prevalence, diversity, levels and proportions of microorganisms of Archaea domain in subgingival biofilm of aggressive periodontitis and periodontally healthy subjects. Thirty generalized aggressive periodontitis (GAgP) and 30 periodontally healthy (PH) subjects were selected. Archaea detection was performed by PCR using domain-specific primers in 9 subgingival samples taken from each subject. Archaea diversity was determined by evaluating a single positive sample per subject, randomly selected from 10 GAgP and 10 PH subjects. Archaeal 16S rRNA gene library were constructed to each sample and the identity of phylotypes were determined for the comparison of unrecognized sequences with gene database. The levels and proportions of Archaea in relation to total microbial load were analysed by quantitative PCR (qPCR) in 4 sites per GAgP subject and 2 sites per PH subject. A total of 540 subgingival samples were analysed to Archaea presence. This domain were detected in 18 GAgP (60%) and in 19 PH (63.3%) subjects. Forty-one (15.2%) and 42 (15.6%) samples were positive for this domain in GAgP and PH subjects, respectively. There was not difference in prevalence of this domain between subjects from GAgP and PH groups, as well as there was not difference in prevalence between sites with different probing depthsin GAgP group. Thenumber of 16S rRNA clones available to identification per sample varies from 33 to 47 in GAgP group, and from 15 to 23 in PH group, with a mean of 42.8+3.9 e 20.2 +2.2, respectively. The analysis of 629 sequencies permits an identification of 1 to 3 phylotypes of Archaea domain per sample. Methanobrevibacter oralis was detected in all archaeal positive samples, being the single detected specie of this domain in 5 subjects from GAgP group, and in 3 subjects from PH group. Methanobacterium curvum/congolense was detected in 3/10 GAgP and 6/10 PH samples, whereas Methanosarcina mazeii was detected in 4/10 samples from both groups. Archaea analysis by qPCR was carried out in 103 sites and 28 GAgP subjects and in 60 sites and 30 PH individuals. Archaea has been detected in 27/28 subjects and in 68% of studied sites in GAgP group and in 26/30 subjects and 58,3% of total analysed sites in PH group. Archaeal and bacterial 16S rRNA mean levels were smaller in PH group than in GAgP group (Mann Whitney, p<0.05). There was no statistic significance of difference in the levels of Archaea in regard to probing depth categories in GAgP group (p>0.05). Moreover, the proportion of Archaea in relation to total microbial load (Archaea + Bacteria) was 0.02% and 0.08% in PH and GAgP group (p<0.05), respectively. These data suggest that Archaea is commonly found in the subgingival biofilm of humans, and that M. oralis may be considered a member of the resident microbiota of subgingival sites. The ecological shift in the microbiota of aggressive periodontitis subjects includes the increase of levels and proportions of Archaea domain.

OBJETIVOS: investigar a prevalência e a presença de distintos perfis microbianos no biofilme subgengival e avaliar o seu papel no diagnóstico e risco das doenças periodontais destrutivas em uma população isolada brasileira sem acesso à tratamento periodontal e tradição ao uso de métodos de higiene bucal. MATERIAL E MÉTODOS: A população-alvo consistiu de todos os indivíduos com 12 ou mais anos de idade (N= 264) residentes na microárea Cajaíba, identificados por meio de um censo. Estes indivíduos foram entrevistados por meio de um questionário estruturado e submetidos a um exame periodontal completo que consistiu na avaliação de 6 sítios por dente em toda a boca e na coleta de amostras do biofilme subgengival em 4 sítios por indivíduo. A detecção dos micro-organismos A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythia e C. rectus, bem como a distribuição dos sorotipos e presença do clone JP2 do A. actinomycetemcomitans foram avaliadas por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). RESULTADOS: A. actinomycetemcomitans foi detectado em 25% dos indivíduos, enquanto que P. gingivalis T. forsythia, P.intermedia e C. rectus foram detectados em 64%, 59%, 38% e 90% dos indivíduos, respectivamente. Entre as amostras positivas para o A. actinomycetemcomitans (n=42), 18 (42%) representaram o sorotipo a, 2 (5%) o sorotipo b, 19 (46%) o sorotipo c, 1 (2%) o sorotipo e, e 4 (10%) foram não-sorotipáveis. O clone JP2 do A. actinomycetemcomitans não foi detectado em nenhum indivíduo desta população. Dois perfis microbianos subgengivais foram identificados: (perfil 1) nenhum dos microrganismos estudados, com exceção do C. rectus (n = 31), e (perfil 2) co-ocorrência de P. gingivalis e T. forsythia (n = 77). O perfil 1 demonstrou valores de sensibilidade extremamente baixos, enquanto que o perfil 2 apresentou valores de sensibilidade variados na identificação dos desfechos subrrogados periodontais avaliados, e valores de baixos a moderados para a especificidade. Os seguintes perfis subgengivais estiveram associados com a prevalência de perda clínica de inserção (NCI) e profundidade de sondagem (PS) nos modelos finais de regressão logística múltipla, ajustados para variáveis demográficas, biológicas e comportamentais: T. forsythia (PS e NCI 5 mm, e 7 mm), P. gingivalis (NCI 7 mm) e o perfil 2 (PS 5 mm e NCI 7 mm). CONCLUSÕES: Os micro-organismos periodontais estudados foram prevalentes nessa população isolada. Esta população apresentou predominância dos sorotipos a e c do A. actinomycetemcomitans. Dois perfis microbianos subgengivais puderam ser identificados nesta população isolada. Porém, eles não foram superiores ao diagnóstico de parâmetros clínicos periodontais específicos, quando adicionados à informação clínica tradicional. Perfis microbianos subgengivais apresentando T. forsythia como indicador de risco foram significativamente associados com o aumento da PS e do NCI nessa população isolada. / AIMS: To investigate the prevalence and describe the subgingival microbial profiles of selected periodontal pathogens in the subgingival biofilm; and assess their role as possible diagnostic markers or risk indicators for destructive periodontal diseases in a periodontally untreated and isolated population from Brazil. MATERIAL AND METHODS: The target population consisted of all subjects aged 12 years (n=264) in an isolated Brazilian population. A full-mouth clinical examination was conducted, and pooled subgingival plaque samples were obtained from four sites per subject. PCR analyses were performed to identify the following microorganisms: A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, T. forsythia, P. intermedia and C. rectus, as well as the A. actinomycetemcomitans serotype distribution and JP2 clone detection. RESULTS: A. actinomycetemcomitans was detected in 25% of the subjects, whereas P. gingivalis, T. forsythia, P.intermedia and C. rectus were detected in 64%, 59%, 38% and 90% of the subjects, respectively. From the A. actinomycetemcomitans positive isolates (n=42), 18 (42%) were serotype a, 2 (5%) b, 19 (46%) c, 1 (2%) e, and 4 (10%) were non-serotypeable. None of the strains belonged to the JP2 clone. Two specific subgingival microbial profiles were identified: (1) In one, only C. rectus could or not be present (n = 31), while in the other, (2) Co-occurrence of T. forsythia and P. gingivalis was observed (n = 77). Profile 1 showed very low sensitivity values, and profile 2 showed varying sensitivity values for the identification of the various periodontal states, and considerably low to moderate specificity values. The following subgingival profiles were significantly associated with the prevalence of periodontal attachment loss (CAL) and probing depth (PD) in the final multiple logistic regression models adjusted for demographic, biological and behavioral variables: T. forsythia (PD and CAL 5 mm and 7 mm), P. gingivalis (CAL 7 mm) and the profile 2 (PD 5 mm and CAL 7 mm). CONCLUSIONS: The five studied periodontal microorganisms were prevalent in this isolated population. The A. actinomycetemcomitans positive subjects consisted predominantly of a and c serotypes. Two specific microbial profiles could be identified in this isolated population. They did not result in significant superior diagnostic accuracy when compared totraditional clinical markers. Subgingival microbial profiles presenting T. forsythia as risk indicator were significantly associated with increased PD and CAL in this isolated population.