Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2014-10-23T18:30:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_ProduçãoCaracterizaçãoXilanases.pdf: 1976333 bytes, checksum: abcb203afd3524486be3c53d6ad2e3d3 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-11-18T15:35:50Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_ProduçãoCaracterizaçãoXilanases.pdf: 1976333 bytes, checksum: abcb203afd3524486be3c53d6ad2e3d3 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-18T15:35:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_ProduçãoCaracterizaçãoXilanases.pdf: 1976333 bytes, checksum: abcb203afd3524486be3c53d6ad2e3d3 (MD5) Previous issue date: 2014 / A endo-1,4-β-xilanase (E.C. 3.2.1.8) é a principal constituinte do sistema enzimático xilanolítico devido à sua atuação na hidrólise da xilana, o segundo polissacarídeo mais abundante na parede celular de plantas. Neste trabalho, duas xilanases recombinantes, uma com as mutações V135A e A226T (XM) e outra sem mutações (XNM), derivadas do gene xynA de Orpinomyces, foram expressas em E. coli, purificadas e caracterizadas bioquímica e cineticamente com o substrato arabinoxilana de trigo, visando aplicações na tecnologia de alimentos. A produção da enzima em E. coli/pET24b foi feita em meios LB e SOB/kan, usando IPTG como indutor. As enzimas foram purificadas em cromatografia de troca iônica (Q-Sepharose) e apenas uma banda de 25 kDa, correspondente as xilanases, foi visualizada em SDS-PAGE. As atividades específicas, após purificação, foram de 12844 U mg-1 para a XNM, e de 10794 U mg -1 para a XM. As condições ótimas para XNM foram de 60 oC e pH entre 4,5 e 7,0, meia vida de 220 min a 50 oC e de 31 min a 60 oC, ambos em pH 6,5. Os valores de Km, Kcat e Ea foram de 0,0021 mg mL-1, 2,31x106 s-1 e 32,9 kJ mol-1, respectivamente. Já XM manteve a temperatura ótima de 60 oC e exibiu maior estabilidade na faixa de pH de 3 a 8, e meia vida de 440 e 71 min a 50 oC e 60 oC, respectivamente. Os valores de Km, Kcat e Ea foram 0,0014 mg mL-1, 3,29x106 s-1 e 43,9 kJ mol-1, respectivamente. Os ensaios de hidrólise da farinha de trigo integral (10 % p/v) foram conduzidos a 27 oC, 100 rpm, 6h, utilizando 50 U de XNM e 20U de XM/g farinha e a quantificação de xilose liberada foi feita em HPLC. Enquanto que nos ensaios conduzidos a 27 oC não houve liberação de xilose a partir da farinha de trigo, nos ensaios a 50 oC foram detectados 2,38 e 1,55 mg xilose/g farinha com o uso de XNM e XM, respectivamente. Nos ensaios de clarificação do suco de maçã, feita com 50 U/mL de XNM e XM, a 60 oC, 100 rpm, 60 min, foi observada liberação extremamente reduzida de xilose. Assim, para maior eficiência desse processo sugere-se a utilização conjunta de xilanase e pectinases. ________________________________________________________________________ / ABSTRACT: The endo-1,4-β-xylanase ( EC 3.2.1.8 ) is the main constituent of the xylanolytic enzyme system due to its role in the hydrolysis of xylan, the second most abundant polysaccharide in plant cell wall. In this work, two recombinant xilanases derived from the xynA Orpinomyces gene, one with the mutations V135A and A226T (XM) and another without mutations (XNM), were expressed in E. coli. The enzymes were purified and biochemically and kinetically characterized, with wheat arabinoxylan as substrat, targeting applications in food technology. The enzyme production in E. coli/pET24b was made in LB media and SOB/kan, using IPTG as inducer. The enzymes were purified on ion-exchange chromatography (Q - Sepharose) and only one band of 25 kDa was visualized on SDS-PAGE, corresponding to xylanase. Specific activities after purification were 12844 U mg-1 for XNM and 10794 U mg-1 for XM. The optimum conditions for XNM were 60 °C and pH between 4.5 and 7.0, half life of 220 min at 50 °C and 31 min at 60 °C, both at pH 6.5. The values of Km, kcat and Ea were 0.0021 mg mL-1, 2.3 x 106 s-1 and 32.9 kJ mol-1, respectively. XM maintained the optimum temperature of 60 °C and exhibited greater stability in the pH range 3-8, and half-life of 440 and 71 min at 50 oC and 60 oC, respectively. The values of Km, Kcat, and Ea were 0.0014 mg mL-1, 3.29 x 106 s-1 and 43.9 kJ mol-1, respectively. The hydrolysis assays of wheat flour (10% w / v) were conducted at 27 oC, 100 rpm, 6 hours, using 50 U / g flour of XNM and 20U / g flour of XM. The quantification of xylose released was made in HPLC. While in the tests conducted at 27 °C there was no release of xylose from wheat flour, in the tests at 50 °C it was detected 2.38 and 1.55 mg xylose / g flour using XNM and XM, respectively. In the experiments for clarification of apple juice, made with 50 U / ml of XNM and XM, at 60 oC, 100 rpm, 60 min, very low release of xylose was observed. Thus, for efficiency of this process, it is suggested the combined use of xylanase and pectinase.

Made available in DSpace on 2014-12-02T11:16:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-25Bitstream added on 2014-12-02T11:21:12Z : No. of bitstreams: 1 000792523_20160625.pdf: 76513 bytes, checksum: e43906ca0fef2820c17431ade4d5763b (MD5) Bitstreams deleted on 2016-06-27T11:55:24Z: 000792523_20160625.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-27T11:56:08Z : No. of bitstreams: 1 000792523.pdf: 1317947 bytes, checksum: 1b9e1e492b5929669f9db6097a8e3b62 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho teve como objetivo avaliar e interpretar a expectativa do consumidor de bebida funcional não alcoólica no Brasil e em Portugal usando a técnica do Discurso do Sujeito Coletivo (DSC). Foram reunidas informações sobre as técnicas qualitativas mais utilizadas para avaliar e compreender a atitude e o comportamento do consumidor de alimentos e bebidas, incluindo a técnica qualiquantitativa denominada Discurso do Sujeito Coletivo. Foi também realizado um estudo cross-cultural para avaliar o hábito de consumo de bebidas não alcoólicas de praticantes de atividade física no Brasil e em Portugal. Indivíduos frequentadores de academias de ginástica voluntariamente responderam a questionário estruturado contendo questões sobre dados sócio-demográficos e hábito de consumo de bebidas não alcoólicas. Esta etapa do trabalho foi realizada com o objetivo de identificar consumidores de bebidas não alcoólicas e recrutar indivíduos para posterior entrevista usando a técnica do DSC. Para avaliar a percepção dos consumidores de bebidas não alcoólicas sobre alimentos funcionais inicialmente foram estabelecidos critérios para aplicar o DSC e realizadas entrevistas individuais semiestruturadas. Para avaliar a expectativa do consumidor de bebida funcional não alcoólica os participantes foram estimulados a expor suas expectativas em relação ao tipo de bebida, à aparência, cor, sabor, textura, benefícios à saúde e informação do rótulo, imaginando que fossem desenvolver um produto e lançá-lo no mercado. O DSC foi avaliado segundo as idéias-centrais (ICs), as expressões-chave (ECHs) e o discurso. Dentre as técnicas qualitativas usadas para avaliar o comportamento do consumidor, a técnica do DSC se destaca por utilizar uma abordagem qualiquantitativa, permitindo avaliar a necessidade, percepção, preferência, atitude e decisão dos consumidores. O perfil dos praticantes de atividade física em academias de ... / This study evaluates and interprets consumer expectation of non-alcoholic functional beverage in Brazil and Portugal using the Discourse of the Collective Subject (DCS) technique. Information about the qualitative techniques most commonly used was pooled to evaluate and understand the attitude and behavior of the consumer of food and beverages, including the qualiquantitative technique the Discourse of the Collective Subject. A cross-cultural study was also performed to evaluate the consumption of non-alcoholic beverages of physical activity practitioners in Brazil and Portugal. Practitioners of physical activity from fitness centers voluntarily responded to a structured questionnaire which addressed socio-demographic data and habit of consumption of non-alcoholic beverages. This stage of the work was performed in order to identify consumers of non-alcoholic beverages and recruit individuals for subsequent interview using the DCS technique. Initially, after establishing the criteria to apply the DCS, semi-structured interviews were performed to evaluate the perception of non-alcoholic beverages consumers of functional food. To evaluate consumer expectation of non-alcoholic functional beverages, the participants were encouraged to express their expectations regarding beverage characteristics such as kind, color, flavor, texture, appearance, health benefits, and labeling information, imagining that they would develop and launch a product on the market. The DCS was evaluated according to the central ideas (CIs), key expressions (KEs) and discourse. Among the qualitative techniques used to assess consumer behavior, the DCS technique stands out by using qualitative and quantitative approach in order to evaluate the need, perception, preference, attitude and decision of consumers. The profile of physical activity practitioners in fitness centers in Brazil and Portugal was distinct. The majority of participants were 20 to 40 years old, ...

Orientador : Magali Monteiro da Silva / Coorientador: Camila Pinelli / Banca: Natália Soares Janzantti / Banca: Renata de Marchi / Banca: Fernando Lefevre / Banca: Jorge Herman Behrens / Resumo: Este trabalho teve como objetivo avaliar e interpretar a expectativa do consumidor de bebida funcional não alcoólica no Brasil e em Portugal usando a técnica do Discurso do Sujeito Coletivo (DSC). Foram reunidas informações sobre as técnicas qualitativas mais utilizadas para avaliar e compreender a atitude e o comportamento do consumidor de alimentos e bebidas, incluindo a técnica qualiquantitativa denominada Discurso do Sujeito Coletivo. Foi também realizado um estudo cross-cultural para avaliar o hábito de consumo de bebidas não alcoólicas de praticantes de atividade física no Brasil e em Portugal. Indivíduos frequentadores de academias de ginástica voluntariamente responderam a questionário estruturado contendo questões sobre dados sócio-demográficos e hábito de consumo de bebidas não alcoólicas. Esta etapa do trabalho foi realizada com o objetivo de identificar consumidores de bebidas não alcoólicas e recrutar indivíduos para posterior entrevista usando a técnica do DSC. Para avaliar a percepção dos consumidores de bebidas não alcoólicas sobre alimentos funcionais inicialmente foram estabelecidos critérios para aplicar o DSC e realizadas entrevistas individuais semiestruturadas. Para avaliar a expectativa do consumidor de bebida funcional não alcoólica os participantes foram estimulados a expor suas expectativas em relação ao tipo de bebida, à aparência, cor, sabor, textura, benefícios à saúde e informação do rótulo, imaginando que fossem desenvolver um produto e lançá-lo no mercado. O DSC foi avaliado segundo as idéias-centrais (ICs), as expressões-chave (ECHs) e o discurso. Dentre as técnicas qualitativas usadas para avaliar o comportamento do consumidor, a técnica do DSC se destaca por utilizar uma abordagem qualiquantitativa, permitindo avaliar a necessidade, percepção, preferência, atitude e decisão dos consumidores. O perfil dos praticantes de atividade física em academias de ... / Abstract: This study evaluates and interprets consumer expectation of non-alcoholic functional beverage in Brazil and Portugal using the Discourse of the Collective Subject (DCS) technique. Information about the qualitative techniques most commonly used was pooled to evaluate and understand the attitude and behavior of the consumer of food and beverages, including the qualiquantitative technique the Discourse of the Collective Subject. A cross-cultural study was also performed to evaluate the consumption of non-alcoholic beverages of physical activity practitioners in Brazil and Portugal. Practitioners of physical activity from fitness centers voluntarily responded to a structured questionnaire which addressed socio-demographic data and habit of consumption of non-alcoholic beverages. This stage of the work was performed in order to identify consumers of non-alcoholic beverages and recruit individuals for subsequent interview using the DCS technique. Initially, after establishing the criteria to apply the DCS, semi-structured interviews were performed to evaluate the perception of non-alcoholic beverages consumers of functional food. To evaluate consumer expectation of non-alcoholic functional beverages, the participants were encouraged to express their expectations regarding beverage characteristics such as kind, color, flavor, texture, appearance, health benefits, and labeling information, imagining that they would develop and launch a product on the market. The DCS was evaluated according to the central ideas (CIs), key expressions (KEs) and discourse. Among the qualitative techniques used to assess consumer behavior, the DCS technique stands out by using qualitative and quantitative approach in order to evaluate the need, perception, preference, attitude and decision of consumers. The profile of physical activity practitioners in fitness centers in Brazil and Portugal was distinct. The majority of participants were 20 to 40 years old, ... / Doutor

Made available in DSpace on 2010-04-20T20:12:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1995-05-30T00:00:00Z / Trata do esgotamento do modelo de desenvolvimento agroindustrial - inaugurado em meados dos anos 60 - e da perda do poder explicativo do conceito de complexo agroindustrial. Aborda o processo recente de reorganização em dois segmentos agroindustriais - cadeia soja/óleo/carnes e agroindústria citricola - e identifica uma nova dinâmica das articulações entre os agentes econômicos. A partir das evidências de recorrências nas estratégias dos agentes e da revisão das teorias recentes sobre organização industrial, propõe um novo referencial teórico, consubstanciado na noção de organização 'em rede'.