Orientador: Célia Regina Nogueira / Coorientador: Paula de Oliveira Montandon Hokama / Banca: Vânia dos Santos Nunes / Banca: Glaucia Maria F. da Silva Mazeto / Banca: Patrícia Pinto Saraiva / Banca: Maria Tereza Nunes / Resumo: A incidência de câncer de mama (CM) tem aumentado de maneira alarmante nos últimos anos. Diversas pesquisas conduziram à descoberta de amphiregulin (AREG) como um oncogene, tendo sua expressão relacionada com diversos tipos de cânceres. Nosso grupo evidenciou a ação do T3 sobre diferentes genes em células de câncer de mama, por meio de microarray, porém nesse estudo não foi avaliado o mecanismo de ação pelo qual o T3 regula a expressão desses genes e o envolvimento de ER. A relação entre a expressão de AREG e a presença de HT permanece desconhecida, portanto, o objetivo do presente estudo foi verificar a ação nuclear e extra-nuclear do T3 na expressão gênica do oncogene AREG em linhagens celulares de adenocarcinoma de mama, MCF-7 e MDA-MB-231. As linhagens celulares foram submetidas ao tratamento com 10-8M de T3 nos tempos de 10', 30', 1h e 4h, na presença ou ausência de Fulvestrant (ICI 182,780), inibidor de ER, Actinomicina D (ACTD) - inibidor da expressão gênica, Ciclohexamida (CHX), inibidor da síntese protéica, e LY294002 - inibidor da via PI3K. O mRNA de AREG foi analisado pela técnica de RT-PCR. Para a análise dos dados foi utilizado ANOVA complementado com teste de Tukey e adotado significância mínima de 5%. O T3 elevou os níveis de expressão gênica de AREG, em relação ao grupo controle, nas duas linhagens celulares, independente dos tempos de incubação. Nosso trabalho confirma que a expressão gênica de AREG está aumentada na presença T3, em ambas as linhagens e em todos os tempos estudados. Os dados desse estudo indicam que T3 pode agir por meio de ER, diminuindo a expressão de AREG após 30' de tratamento nas células MCF-7 e não alterando a expressão desse gene nas células MDA-MB-231, as quais não possuem ER. Além disso, podemos sugerir que a ação de T3 sobre a expressão gênica de AREG ocorre de forma indireta. O T3 mantém a expressão de AREG mesmo após... / Abstract: The incidence of breast cancer (BC) has increased alarmingly in recent years. Several studies have been lead to the discovery of amphiregulin (AREG) as an oncogene, with its expression related to various cancer types. Our group showed the action of T3 on different genes in BC cells using microarray, but the mechanism which T3 regulates the expression of these genes and the involvement of ER have not been evaluated yet. The relationship between the expression of AREG and the presence of TH remains unknown, therefore, the aim of this study was to verify the nuclear and extra-nuclear action of T3 on AREG gene expression in breast adenocarcinoma cell lines, MCF-7 and MDA-MB-231. The cell lines were subjected to treatment with 10-8M T3 at the times 10', 30', 1h and 4h in the presence or the absence of Fulvestrant (ICI 182,780) - ER inhibitor, Actinomycin D (ACTD) - inhibitor of gene expression, cycloheximide (CHX) - inhibitor of protein synthesis, and LY294002 - inhibitor of PI3K pathway. The AREG mRNA levels were analyzed by RT-PCR. For data analysis we used ANOVA followed by the post hoc Tukey's test with a significance level of 5%. T3 increased AREG gene expression levels, compared to the control group in both cell lines, regardless of the incubation times. Our study confirms that AREG gene expression is increased in the presence of T3 in both cell lines and at all the times studied. The data from this study indicate that T3 might act through ER, decreasing AREG expression after 30' treatment in MCF-7 cells and did not alter the expression of this gene in MDA-MB-231 cells, which lack ER. Furthermore, we suggest that T3actionon AREG gene expression occurs indirectly. The T3 maintains AREG expression even after the inhibition of transcription. And, the PI3K pathway activation by T3 is required for the modulation of AREG in both cell lines studied / Doutor

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-10-13T19:41:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTACAO GIOVANNA GUSMÃO.pdf: 640329 bytes, checksum: eb48b6d00fc9a30b18bc1c3414978fc5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-13T19:41:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTACAO GIOVANNA GUSMÃO.pdf: 640329 bytes, checksum: eb48b6d00fc9a30b18bc1c3414978fc5 (MD5) Previous issue date: 1998-11-13 / Os hormônios tireoidianos são essenciais para um crescimento e desenvolvimento normal pós natal. Várias investigações têm tentado estabilizar o papel específico dos hormônios tireoidianos nas funções e desenvolvimento do trato reprodutor masculino. Os hormônios tireoidianos possivelmente exercem uma ação recíproca entre o esteróide testicular e as células de Sertoli durante o período prematuro. O presente estudo tentou avaliar o efeito da tiroxina sobre os níveis de testosterona no soro e no fluido intersticial testicular (FIT) em ratos machos. O hipertireoidismo foi induzido com a tiroxina (20 g\kg) em ratos Wistar machos com 22 dias de idade, pesando 80g por um período de 5,10, 15 e 20 dias de tratamento. Os grupos controles receberam solução salina 0,1 ml/100g do peso corporal, como veículo. Após cada período de tratamento, os animais foram pesados e sacrificados, para obtenção do sangue, e os testículos foram pesados, para coleta do fluido intersticial testicular (FIT). Os nossos resultados mostram que a tiroxina em ratos sexualmente prematuros, promove um aumento de testosterona, tempdependente. Observa-se também, que a nível testicular, no FIT, os níveis de testosterona encontram-se elevados. A tiroxina promoveu um aumento do peso corporal e testicular, modificando a função metabólica. Estudos evidenciaram que os receptores de LH e hCG é regulado em homogeneizado celular de testículo em ratos tratados com tiroxina por 20 dias. A capacidade de ligação específica foi obtida pela motodologia envolvendo a saturação de receptores do LH e hCG, aumentando a concentração de LH marcado e hCG não marcado. Outros resultados mostram que a tiroxina é capaz de alterar os níveis de receptores de LH de alta afinidade presentes em homogeneizado testicular, promovendo uma redução da capacidade de ligação específica (Bmax), obtido através da Análise de Scatchard. Conclui-se que a tiroxina pode acelerar a formação de testosterona no lumen intersticial no processo de maturação sexual, modificando possivelmente o mecanismo intracelular das células testiculares, e que a capacidade de ligação do LH e hCG é alterada após o tratamento com tiroxina. / Thyroid hormones are essential for normal pos-natal growth and development. Several investigators have attempted to establish a specific role of thyroid hormones in reproductive tract growth and function. The thyroid hormones possibly exert a reciprocal action between the testicular steroid and the Sertoli cells during the early period. The present study tried to evaluate the effect of the thyroxine over the serum levels of the testosterone and in the interstitial fluid of the testis in male rats. The hyperthyroidism was induced with the thyroxine (20 g\kg), In Wistar male rats 22 days of age, weighing 80kg for a period of 5, 10, 15 and 20 days. The control group received 0,9% saline solution as vehicle. After each treatment period, the animals were weighty and killed to obtainment of blood, and the testis was weighty to collect of testicular interstitial fluid (TIF). These results show that the thyroxin in premature rats, promote an increase of testosterone, dependent time. It is observed either an increase on testosterone level in the TIF. The thyroxin promoted an increase the corporeal and testicular weighty, capable in modify a metabolic function. In the previos study the regulation of LH and hCG receptors by homogenized testicular cells of the 20 days treatment. The specific binding capacity was also obtained by LH and hCG receptors with increasing concentration LH labelled and hCG no labelled. The Scatchard analysis of the saturad curve has show that a affinity constant (ka) is around 108 M-1. This result demonstred that the control present more binding specific that thyroxine wich is a maximum induction of hCG receptor. These results indicate that the thyroxine is able to accelerate the formation the interstitial lumen in the process of sexual maturation, altering possibly the intra-cell mechanism of testicular cells, and the LH and hCG binding capacity is changed after the thyroxine treatment.

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:26:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:06:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Uma linhagem celular de CHO, previamente modificada geneticamente pela introdução de cDNA da 2,6 sialiltransferase de rato, gerou, pela primeira vez, um hTSH recombinante com sialilação humanizada (hlsr-hTSH), mais similar ao hormônio nativo, com 61% de ligação de ácido siálico na conformação 2,3 e 39%, na conformação 2,6. O clone mais produtivo, quando submetido à amplificação gênica com 8 M de metotrexato, apresentou um nível de secreção de aproximadamente 2 g de hTSH/106 células/dia, nível este útil para a purificação e caracterização do produto. A massa molecular relativa do heterodímero e das subunidades e do hlsr-hTSH purificado, determinada por espectrometria de massa MALDI-TOF, e a hidrofobicidade relativa, determinada por RP-HPLC, não apresentaram diferenças significativas com relação às preparações de hTSH recombinante derivadas de células CHO sem a modificação devida ao gene da 2,6 sialiltransferase. Entretanto, algumas diferenças foram observadas na composição dos N-glicanos, com mais estruturas tri- e tetra-sialiladas no hlsr-hTSH. O hlsr-hTSH mostrou-se eqüipotente (p>0,05) à preparação comercial de r-hTSH (Thyrogen) e 1,5 vezes mais potente do que a preparação nativa de hTSH (p<0,001), quando analisado por um bioensaio in vivo baseado na capacidade do TSH de estimular a liberação de T4. / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:47:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:08:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 08317.pdf: 3150149 bytes, checksum: 4cea7ea7cd5d6a1b9497c4d9450e06c4 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

O hormônio tireoideano (T3) desempenha papel importante no desenvolvimento, no crescimento e no metabolismo celular. Um dos seus principais efeitos é a ativação do metabolismo basal, contribuindo de forma importante com a regulação do peso corporal, enquanto diminui os níveis plasmáticos de triglicérides e colesterol. A ativação seletiva do receptor <font face=\"Symbol\">&#946 para o hormônio tireoideano (TR) por meio de agonistas seletivos reduziu níveis séricos de colesterol além de aumentar o metabolismo sem causar efeitos indesejáveis sobre o coração, osso ou músculo esquelético. Estes dados sugerem que estes agonistas poderiam ser úteis no tratamento das manifestações da síndrome metabólica tais como obesidade, hipercolesterolemia e resistência à insulina. Dessa forma, estudamos os efeitos da ativação do TR usando um agonista também da série GC, o GC-24, em ratos machos Wistar tratados com dieta rica em gordura e submetidos a injeções diárias de T3 correspondente a 10x a dose fisiológica (30g/g P.C./dia) ou GC-24 em dose equimolar (17g/g P.C./dia). Nosso estudo mostrou que o GC-24 preveniu algumas alterações metabólicas típicas da síndrome metabólica, tais como o aumento da massa gorda, intolerância à glicose e hipertrigliceridemia e corrigiu parcialmente outras como a hipercolesterolemia, o aumento do conteúdo de colesterol hepático e IL-6. Estes achados sugerem um papel importante do TR na mediação dos efeitos do T3 e devem ter repercussão importante na utilização potencial de agonistas seletivos ao TR<font face=\"Symbol\">&#946 como agentes hipocolesterolemiantes / Thyroid hormone (T3) plays an important role in the development, growth and cell metabolism. One of its main effects is to activate the basal metabolic rate significantly contributing to the regulation of body weight, while decreasing serum triglycerides and cholesterol levels. Thyroid hormone receptor selective activation through selective agonists reduced serum cholesterol levels besides increasing metabolic rate without causing undesirable side effects on the heart, bone or skeletal muscle. These data suggest that these agonists could be useful in the treatment of metabolic syndrome manifestations such as obesity, hypercholesterolemia and insulin resistance. Thus, we studied the effects of TR activation also using an agonist from the GC series, the GC-24 in male Wistar rats treated with high fat diet and submitted to daily T3 injections, corresponding to 10x physiological dose (30g/g B.W. /day) or equimolar doses of GC-24 (17g/g P.C. /day). Our study has shown that GC-24 prevented some of the metabolic abnormalities typical of metabolic syndrome such as increase in fat mass, glucose intolerance and hypertriglyceridemia and partially corrected other ones like hypercholesterolemia, the increase in hepatic cholesterol and IL-6 levels. These findings suggest that TR has an important role in the mediating of T3 effects and should have important repercussions in the potential use of selective agonists to TR as cholesterol lowering agents.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Com o objetivo de verificar a influÃncia dos hormÃnios tireoideanos no desenvolvimento de hiperreatividade traqueal, ratos machos (200 - 250 g) eutireÃideos, hipotireÃideos (propiltiouracil [PTU] - v.o. 0,05% p/v, durante 4 semanas) ou hipertireÃideos (L- tiroxina [T4] - 0,5 mg/kg s.c., por 7 ou 9 dias) foram sensibilizados à ovalbumina (OVA) e, 14 dias depois, desafiados atravÃs da inalaÃÃo de OVA (1 mg/ml, seguida de 5 mg/ml, 15 min cada). O sacrifÃcio dos animais para a realizaÃÃo dos experimentos ocorreu 24 h apÃs o desafio antigÃnico por anestesia com hidrato de cloral (400 mg/Kg). A traquÃia isolada foi montada em cubas contendo 10 ml de Krebs-Henseleit modificado (37 oC, 5% de CO2 em O2). Foram obtidas curvas concentraÃÃo-efeito (CCE) para cloreto de potÃssio (KCl), carbacol (CCh) ou serotonina (5-HT). TambÃm foram realizadas CCE ao Ca2+ em preparaÃÃes estimuladas por KCl, CCh ou 5-HT e mantidas em soluÃÃo sem Ca2+. A reapresentaÃÃo do antÃgeno promoveu significativo aumento (p < 0,05, two-way ANOVA) da resposta mÃxima (RM) das CCE ao KCl de 0,96  0,10 gF para 1,53  0,11 gF (n = 7), ao CCh de 1,98  0,06 gF para 2,92  0,07 gF (n = 7) e à 5-HT de 1,64  0,14 gF para 2,41  0,15 (n = 6) nos tecidos obtidos de animais sensibilizados ou desafiados, respectivamente. As traquÃias tambÃm apresentaram aumento (p < 0,05, two-way ANOVA) da RM ao Ca2+ quando estimuladas com KCl de 0,54  0,06 gF para 0,86  0,07 gF (n = 6), com CCh de 1,20  0,14 gF para 1,77  0,14 gF (n = 6) ou com 5-HT de 0,59  0,10 gF para 1,15  0,05 gF (n = 6) nos tecidos obtidos de animais sensibilizados ou desafiados, respectivamente. O hipotireoidismo nÃo alterou significativamente a RM induzida por KCl e CCh, enquanto que aquela induzida pela 5-HT foi reduzida de 1,64  0,14 gF nos animais eutireÃideos para 0,34  0,07 gF nos animais hipotireÃideos (p < 0,001, two-way ANOVA). ApÃs desafio, a 5-HT produziu 0,56  0,11 gF (n = 7) no tecido hipotireÃideo (p < 0,001, two-way ANOVA). O hipotireoidismo aboliu o desenvolvimento de hiperreatividade para KCl e CCh. Ocorreu um aumento na CE50 nas CCE obtidas ao CCh de 0,49 x 10-6M para 4,65 x 10-6M (P < 0,05, two-way ANOVA ). O desafio reduziu a CE50 novamente para 1,53 x 10-6M (n = 6, p<0,05, two-way ANOVA). As traquÃias de animais hipotireÃideos desafiados apresentaram diminuiÃÃo da RM ao Ca2+ quando estimuladas com KCl, CCh e 5-HT. Ocorreu aumento na CE50 nas CCE ao Ca2+ em traquÃias desafiadas e estimuladas com CCh de 5,77 x 10-4 M para 22,50 x 10-4 M (n = 6, p<0,01 two-way ANOVA). O hipertireoidismo promoveu um significativo aumento na RM das CCE apenas ao KCl (0,96  0,10 gF no controle versus 1,58  0,15 no tecido hipertireÃideo). NÃo houve desenvolvimento de hiperreatividade apÃs o desafio antigÃnico (RM = 1,87  0,14 gF). Ocorreu diminuiÃÃo da CE50 ao CCh de 0,67 x 10-4 M no controle para 0,14 x 10-4 M apÃs tratamento com T4. Os resultados mostram que hà envolvimento dos hormÃnios tireoideanos no desenvolvimento de hiperreatividade em traquÃia de rato, induzida apÃs reapresentaÃÃo do antÃgeno a animais previamente sensibilizados. / In other to verify the influence of thyroid hormones on the tracheal hyperreactivity development, euthyroid, hypothyroid (propiltiouracil [PTU] - p.o. 0.05% w/v, 4 weeks) or hyperthyroid (L-tiroxine [T4] â 0.5 mg/kg s.c.,7 or 9 days) male rats (200 - 250 g) were sensitized to ovalbumine (OVA) and, 14 days later, challenged with OVA inhalation, (1 mg/ml, followed by 5 mg/ml, 15 min each). Animals sacrifice was carried out 24 later by means of anaesthesia with chloral hydrate (400 mg/Kg). Isolated trachea was mounted in 10 ml bath chamber filled with modified Krebs-Henseleit (37 oC, 5% de CO2 em O2). Concentration-effect curves (CEC) were carried out for potassium chloride (KCl), carbachol (CCh) or serotonin (5-HT). CEC to Ca2+ added in tissues maintained in Ca2+-free medium stimulated with KCl, CCh or 5-HT also were carried out. Antigenic challenge produced significant increase (p < 0.05, two-way ANOVA) of the maximal response (Emax) of the CCE for KCl from 0.96  0.10 gF to 1.53  0.11 gF (n = 7), for CCh from 1.98  0.06 gF to 2.92  0.07 gF (n = 7) and for 5-HT from 1.64  0.14 gF to 2.41  0.15 (n = 6) in tissues obtained from sensitized or challenged animals, respectively. Tracheae also showed increase on the Emax to Ca2+ (p < 0.05, two-way ANOVA) when stimulated with KCl from 0.54  0.06 gF to 0.86  0.07 gF (n = 6), with CCh from 1.20  0.14 gF to 1.77  0.14 gF (n = 6) or with 5-HT from 0.59  0.10 gF to 1.15  0.05 gF (n = 6) on sensitized or challenged tissues, respectively. The hypothyroidism did not modify significantly the KCl- or CCh-induced Emax, while the 5-HT-induced contractile effect was reduced from 1.64  0.14 gF in euthyroid tissues to 0.34  0.07 gF in hypothyroid tissues (p < 0.001, two-way ANOVA). After challenge, 5-HT produced in hypothyroid tissues a contraction corresponding to 0.56  0.11 gF (n = 7, p < 0.001, two-way ANOVA). Hypothyroidism prevented hyperreactivity development for KCl and CCh. It was observed an increased EC50 value in CCE for CCh from 0.49 x 10-6M to 4.65 x 10-6 M (p < 0,05, two-way ANOVA). After challenge, CE50 value was reduced to 1.53 x 10-6 M (n = 6, p < 0,05, two-way ANOVA). Tracheae from challenged hypothyroid animals showed decreased Emax to Ca2+ when they were stimulated with KCl, CCh and 5-HT. It was observed an increased EC50 value in CCE to Ca2+ in challenged tissues stimulated with CCh from 5.77 x 10-4 M to 22.50 x 10-4 M (n = 6, p < 0.01, two-way ANOVA). Hyperthyroidism significantly increased Emax of the KCl-induced CCE (0.96  0,10 gF in control versus 1.58  0.15 on hyperthyroid tissue). Hyperreactivity was not showed after antigenic challenge (Emax = 1.87  0.14 gF). It was observed a reduction of the EC50 value to CCh from 0.67 x 10-4 M in control to 0.14 x 10-4 M after T4 treatment. Our results show that there is a putative thyroid hormones involvement in hyperreactivity development on rat trachea, after an antigenic challenge.

nÃo hà / Esta tese avaliou os efeitos do estresse tÃrmico nas respostas fisiolÃgicas, hematolÃgicas e hormonais de bÃfalas, criadas ao sol e à sombra, na Unidade de Pesquisa Animal âSenador Ãlvaro Adolphoâ (01Â.26â.03â S e 48Â.26â.03â W), Embrapa AmazÃnia Oriental, em BelÃm, ParÃ, em condiÃÃes tropicais quentes e Ãmidas. Foram utilizadas 20 bÃfalas da raÃa Murrah, distribuÃdas de modo inteiramente casualizado, em dois grupos (grupo Sem Sombra - SS e grupo Com Sombra - CS). Todos os animais permaneceram em pastejo rotacionado, sendo os do grupo CS (n=10) mantidos em piquetes de sistema silvipastoril, sombreados pela leguminosa Acacia mangium e os do grupo SS (n=10), mantidos em piquetes sem acesso à sombra. A alimentaÃÃo foi a pasto, com a gramÃnea quicuio-da-amazÃnia (Brachiaria humidicola), com acesso à Ãgua para beber e sal mineral ad libitum. As variÃveis climÃticas, temperatura do ar (TA), umidade relativa do ar (UR) e temperatura de globo negro, foram obtidas no microclima de cada tratamento. As variÃveis fisiolÃgicas estudadas foram: temperatura retal (TR), frequÃncia respiratÃria (FR), frequÃncia cardÃaca (FC) e temperatura da superfÃcie corporal (TSC), as quais foram aferidas nos turnos da manhà (7h00) e da tarde (13h00). As colheitas de sangue para realizaÃÃo do eritrograma, do nÃmero total de leucÃcitos e para determinaÃÃo quantitativa de cortisol, triiodotironina (T3) e tiroxina (T4) foram realizadas no horÃrio de pico de temperatura ambiente local (13h00). Foram considerados os perÃodos: mais chuvoso (janeiro a abril), de transiÃÃo (maio a julho) e menos chuvoso (agosto a dezembro). AtravÃs da anÃlise de variÃncia foram constatadas diferenÃas significativas (P<0,05) da TA, Ãndice de temperatura e umidade (ITU) e Ãndice de temperatura de globo e umidade (ITGU), entre os turnos e grupos, sendo mais elevados no perÃodo da tarde e no grupo SS. Os maiores valores de UR ocorreram no perÃodo mais chuvoso do ano, com diferenÃas estatÃsticas (P<0,05) entre os turnos, com valores superiores pela manhÃ. Resultados da anÃlise de variÃncia das variÃveis fisiolÃgicas TR, TSC, FR e FC revelaram diferenÃas significativas entre os turnos e grupos, com valores superiores no turno da tarde e grupo SS (P<0,05). No que se refere aos dados hematolÃgicos, o nÃmero de leucÃcitos sofreu influÃncia dos perÃodos do ano e tratamentos (P<0,05). No perÃodo mais chuvoso, o grupo CS apresentou valores superiores, enquanto nos perÃodos de transiÃÃo e menos chuvoso, os maiores valores foram do grupo SS. Os valores de hemÃcias sofreram influÃncia apenas dos tratamentos (P<0,05), com valores mais elevados no grupo SS, durante o perÃodo menos chuvoso do ano. O teor de hemoglobina sofreu influÃncia somente nos perÃodos de transiÃÃo e menos chuvoso, com nÃveis mais elevados (P<0,05). Em relaÃÃo aos resultados hormonais, o cortisol sofreu influÃncia dos tratamentos e perÃodos (P<0,05), com valores mais altos no grupo SS e perÃodos mais e menos chuvosos (P<0,05), enquanto que no perÃodo de transiÃÃo foram observados os menores valores. As mÃdias mais elevadas de T3 e T4 foram registradas no perÃodo mais chuvoso (P<0,05). A TR, TSC e FR apresentaram correlaÃÃes significativas (P<0,01) e positivas com a TA, ITU e ITGU, e negativas com a UR, as quais foram mais elevadas no perÃodo menos chuvoso. A FC, nos dois perÃodos do ano, apresentou correlaÃÃes baixas, porÃm altamente significativas (P<0,01) e positivas, com a TA, ITU e ITGU, e significativa e negativa (P<0,05), com a UR, somente no perÃodo mais chuvoso do ano. Os leucÃcitos, hemÃcias e o volume globular nÃo se correlacionaram com a TA, UR e ITGU. Somente a hemoglobina teve correlaÃÃo significativa e negativa (P<0,05), com a UR. O cortisol nÃo se correlacionou com a TA, UR e ITGU. O T3 e T4 se correlacionaram, negativamente, com a TA e ITGU, e positivamente, com a UR. Conclui-se que independente do perÃodo do ano, as bÃfalas Murrah estÃo sujeitas a ambiente hostil, com o perÃodo menos chuvoso considerado como o mais propÃcio a provocar estresse tÃrmico. O perÃodo de transiÃÃo à o que menos causou impacto sobre as variÃveis hormonais, e pode ser considerado de melhor conforto tÃrmico. A arborizaÃÃo da pastagem à eficiente para melhorar o conforto e, consequentemente, o desempenho produtivo dos animais, principalmente no turno da tarde. / This thesis aimed at evaluate the effects of heat stress on physiological, hematologic and hormonal responses of female buffaloes raised under full sun and shade at Embrapa Eastern Amazon, Belem, Para State, Brazil (01Â.26â.03â S e 48Â.26â.03â W). Twenty female Murrah buffaloes were used. They were randomly assigned into two groups (Non Shade Group â NS, and Shade Group â SG). All animals were kept under rotational grazing: the ones in the NS group (n=10) were maintained in paddocks under a silvopastoral system, shaded by the tree legume Acacia mangium, whereas the ones in the SG (n=10) were kept in paddocks with no shade access. All animals were grass fed with Brachiaria humidicola, and had free access to drinking water and mineral salt. The climate variables: air temperature (AT), relative humidity (RH) and black globe temperature (BGT) were measured on each treatment. The physiological variables studied were: rectal temperature (RT), respiratory rate (RR), heart rate (HR) and body surface temperature (BST). They were measured in the morning (7h00) and in the afternoon (13h00). Blood sampling, aiming erythrogram, leukocyte count, and the quantitative determination of cortisol, triiodothyronine (T3) and thyroxine (T4), was carried out at the time of the highest temperature in the region (13h00). Three distinct climatic periods of the year were considered: rainy (January to April), transition (May to July) and less rainy (August to December). Analysis of variance showed that there were significant differences (P<0.05) in the AT, temperature humidity index (THI), and black globe humidity index (BGHI) between the distinct periods of the day and between groups. The highest rates were observed in the afternoon in the NS group. The highest RH values were observed during the rainy period. There were statistical differences (P<0.05) in RH between the periods of the day, and the highest values were measured in the morning. Results of analysis of variance for the physiological parameters RT, BST, RR and HR revealed that there were significant differences between the periods of the day and groups, and the values observed in group SS, during the afternoon, were higher (P<0.05) than the ones during the morning. Regarding the hematologic data, the leukocytes count was influenced by the periods of the year and treatments (P<0.05). During the rainy periods, the SG group presented the highest values. In the less rainy and transition periods, the highest values were observed in the NS group. The erythrocytes count was influenced (P<0.05) by the treatments, and the NS group showed the highest values in the less rainy period. Hemoglobin contents were not influenced by the treatments, however they were influenced by the periods of the year, and the highest levels (P <0.05) were observed during the transition and less rainy periods. Regarding the hormones, cortisol was influenced by the treatments (P<0.05), and the NS group showed the highest values. The highest mean rates of cortisol were reported during the rainy and less rainy periods of the year (P<0.05), and the transition period presented the lowest cortisol values. The highest average levels of T3 and T4 were recorded during the rainy period (P<0.05). RT, BST and RR presented a significant and positive (P<0.01) correlation with AT, THI and BGHI, and a negative correlation with RH. These correlations were higher during the less rainy period. HR showed low, but relevant and positive (P<0.01) correlations with AT, THI and BGHI during the two other periods, and significant and negative (P<0.05) correlation with RH only in the rainy period. Leukocytes, erythrocytes and the globular volume did not correlate with AT, RH and BGHI. Only hemoglobin presented a significant and negative (P<0.05) correlation with RH. Cortisol did not correlate with AT, RH and BGHI. T3 and T4 correlated negatively with AT and BGHI, and positively with RH. We concluded that regardless of the season, Murrah buffaloes are subject to a hostile environment, and that the less rainy period is the most conducive to cause heat stress. The transition period caused less impact on the hormonal variables. It can be considered as the period with the best thermal comfort. Forestation of pasture areas is sufficient to increase comfort and consequently improve the productive performance of the animals, especially during the afternoon.

Diversos fatores respondem por variações na viabilidade do sêmen eqüino e na sua qualidade espermática; em humanos, reportam-se correlações entre fatores endócrinos e parâmetros seminais, mas em eqüinos poucos estudos contribuem para esta correlação. Para se investigar eventuais correlações entre hormônios sexuais e tireoideanos com as características seminais físicas e morfológicas, além de longevidade seminal, foram mensuradas as concentrações plasmáticas de estradiol, testosterona, T3 e T4 de garanhões e analisadas tais características espermáticas no momento da colheita seminal e após 24h, 48h e 72h de armazenamento a 5oC. 05 garanhões férteis em idade reprodutiva foram submetidos à colheita de sêmen (2 vezes/semana) e sangue (1 vez/semana, a cada 6 horas) durante 6 semanas. Estradiol, testosterona, T3 e T4 foram analisados por RIE. Após a colheita, o sêmen foi analisado e resfriado a 5oC, com análises subseqüentes após 24h, 48h e 72h de armazenamento. O sêmen foi avaliado quanto às características seminais físicas e morfológicas, além de integridade de membrana. Significativas (p<0.05) diferenças foram observadas entre os animais quanto às concentrações hormonais; o estradiol mostrou as maiores variações entre indivíduos, embora todos os resultados tenham se mostrado compatíveis aos valores de referência da literatura. Logo após a colheita, não se observou diferenças significativas (p<0.05) para vigor e motilidade total/progressiva, em exceção ao garanhão 4, que apresentou significativa menor motilidade progressiva inicial. Após 24h, 48h e 72h de resfriamento, diferenças significativas (p<0.05) foram observadas entre os garanhões; os menores índices de vigor/motilidade progressiva foram observados nos garanhões 1 e 4. Diferenças significativas (p<0.05) também foram observadas entre os animais para as características espermáticas morfológicas e integridade de membrana. Análises de covariância e correlações não demonstraram correspondência entre concentrações hormonais, longevidade espermática e características seminais físicas/morfológicas, tendo \"tempo de resfriamento\" e \"indivíduos\" como fatores. Correlação positiva foi observada entre motilidade progressiva/vigor e espermatozóides vivos com acrossomo intacto (r=0.70 e r=0.71 respectivamente); em analogia, correlação negativa foi encontrada entre motilidade progressiva/vigor e espermatozóides com acrossomo intacto (r=-0.70 e r=-0.72 respectivamente), indicando que, vivos ou mortos, apresentar acrossomo intacto é fator crítico para a viabilidade espermática mesmo após diferentes tempos de armazenamento em resfriamento. Os resultados mostram que a longevidade do sêmen eqüino provavelmente não é diretamente afetada por razões hormonais primárias; o mesmo pode ser considerado para morfologia espermática. Por outro lado, a longevidade do sêmen eqüino parece ser diretamente influenciada pela integridade de membrana espermática e eventualmente fatores bioquímicos, metabólicos e enzimáticos. / Several factors respond for variations of equine semen viability and sperm quality; in humans, scientific reports try to correlate endocrine issues and sperm parameters. In horses, few studies contribute to this correlation. In order to investigate eventual correlations between sexual and thyroid hormones with physical and morphologic characteristics and also longevity of equine semen,were measured plasma concentrations of estradiol, testosterone, T3 and T4 of stallions and analyzed physical and morphologic characteristics and membrane integrity of spermatozoa at the moment of collection and after 24, 48 and 72 hours of storage at 5oC. Five fertile stallions in reproductive age had semen (twice a week) and blood (once a week, every 6 hours) collected during 6 weeks. Estradiol, testosterone, T3 and T4 were analyzed by RIA. After collection, semen was analyzed and cooled at 5oC, with further analyses after 24, 48 and 72 hours of storage. Semen analysis consisted in physical, morphologic and embrane integrity characteristics. Significant (p<0.05) differences were observed among stallions when compared for plasma hormonal concentrations; estradiol showed the greater variations between individuals, despite all results were compatible to reference values in literature. Just after collection, no significant differences (p<0.05) were observed for vigor and total/progressive motility, in exception to stallion 4, that presented a significant lower initial progressive motility. After 24, 48 and 72 hours of storage, significant differences (p<0.05) were observed among stallions; lowest values of vigor/progressive motility were observed for stallions 1 and 4. Significant differences (p<0.05) were also observed among stallions for morphologic characteristics of sperm and membrane integrity. Analyses of covariance and correlations showed no correspondence among hormonal plasma concentrations, sperm longevity and physical/morphologic characteristics, having time of storage and individuals as factors. Meanwhile, a positive correlation was observed among progressive motility/vigor and live sperm with intact acrosome (r=0.70 and r=0.71 respectively); in analogy, a negative correlation was found among progressive motility/vigor and dead sperm with intact acrosome (r=-0.70 and r=-0.72 respectively), indicating that neither being live or dead, but having acrosome membrane intact is a critical factor for spermatozoa\'s viability even after different times of storage at cooling temperatures. Results show that longevity of equine semen is probably not directly affected by primary hormonal reasons; the same can be considered for sperm morphology. Otherwise, longevity of equine semen seems to be directly influenced by sperm membrane integrity and eventually by biochemical, metabolic and enzymatic factors.

Este trabalho teve por objetivo avaliar, em seres humanos, se a exposição ao mercúrio acarreta alterações no estado nutricional relativo ao selênio que possam interferir na ativação do hormônio tireoidiano T3. Estas alterações poderiam ocorrer pela redução da disponibilidade do selênio, uma vez que este mineral é considerado um fator protetor contra a intoxicação pelo mercúrio, realizando ligações com o metal e desta forma, inibindo sua absorção; e portanto, a conversão do hormônio tiroidiano T4 em T3 poderia ser prejudicada, tendo em vista que é dependente de selenoproteínas. Alguns estudos têm avaliado a relação entre mercúrio e selênio na população brasileira, no entanto, não têm observado qual o efeito desta interação nos hormônios tiroidianos. A importância deste estudo está em detectar se existem estas alterações, e se elas forem observadas, sugerir formas de melhorar o estado nutricional relativo ao selênio, para minimizar a contaminação por mercúrio e os problemas acarretados pela redução dos níveis circulantes do hormônio tiroidiano ativo. Nesta pesquisa foram formados três grupos, um em Cubatão, um em Novo Airão na região amazônica e, como grupo controle, um em São Paulo. Foi observado que os grupos de Cubatão e São Paulo não se encontram em risco de intoxicação por mercúrio. Já o grupo formado em Novo Airão apresentou teores altos do metal. A ingestão de selênio em todos os grupos apresentou índices de inadequação de consumo acima dos 30%, no entanto, todos se apresentaram adequados em relação aos parâmetros bioquímicos do mineral, e também em relação às concentrações dos hormônios tireoidianos. Nesta pesquisa foi observado que na região amazônica, apesar dos valores elevados de mercúrio, este não provocou efeito no estado nutricional relativo ao selênio e no metabolismo normal dos hormônios tireoidianos. Mais estudos são necessários para que a dinâmica entre selênio e mercúrio seja completamente elucidada, principalmente em regiões onde possa ocorrer exposição aguda ao metal, onde se acredita que as consequências dessa exposição seriam deletérias sobre o status do mineral e suas funções. / The aim of this work was to assess, in human beings, if mercury exposure may lead to changes in selenium status that may interfere with the conversion of active thyroid hormone T3. Changes in selenium status could occur for a reduction in its bioavailability, once the mineral is considered as a protection factor against mercury intoxication, by bounding to the metal and inhibiting its absorption, and so disturbing the conversion of T4 to T3, witch is dependent on selenoproteins. Some researches have assessed the relationship between mercury and selenium in Brazilian population, but these studies did not observed the effects of this interaction in the thyroid hormones concentrations. This research is important because it might detect if there is such interaction, and if it is observed, may suggest viable ways to ameliorate selenium status, reduce mercury contamination risk and the problems that might occur due to reduction on active thyroid hormones concentration. For this research three groups were formed, one in the city of Cubatão, one in Novo Airão in the amazon region, and, as a control group, one in São Paulo city. Is has been observed that the groups of Cubatão and São Paulo are not in risk for mercury intoxication. However, in Novo Airão, the levels of Mercury found were high. Analysis of selenium intake in all groups show that in all of than inadequate rate intake was over 30%, however, in every group biomarkers for selenium were adequate, as well as the thyroid hormone levels. Hence, this study observed that in Amazon region, in spite of high mercury levels, there is no effect in selenium status and in the thyroid hormone. Further investigations are needed to fully elucidate mercury and selenium interaction, especially in regions were an acute exposure to the metal might happen, when the consequences of this mey be deleterious to selenium status and its functions.

Abstract Endocrine disorders are common in adults with epilepsy on antiepileptic drugs (AEDs). This study aimed to evaluate endocrine function, lipid metabolism and growth in patients with childhood- or adolescence-onset epilepsy. Altogether 148 patients with epilepsy on carbamazepine (CBZ), oxcarbazepine (OXC), valproate (VPA) or lamotrigine monotherapy during pubertal maturation and 124 healthy controls participated in this population-based cohort study. Boys and young men (n = 140) underwent cross-sectional evaluation once, and girls and young women (n = 132) twice at an approximate interval of 6 years. Gonadal structure and serum reproductive and thyroid hormone and lipid concentrations were evaluated and growth data were gathered. Elevated serum testosterone and androstenedione levels and polycystic ovary syndrome (PCOS) were common in female subjects whose medication, especially VPA, continued into young adulthood. Serum reproductive hormone concentrations and ovarian structure were similar in patients off medication and controls in young adulthood. CBZ was associated with elevated serum sex hormone binding globulin and decreased dehydroepiandrosterone sulfate levels and VPA with elevated serum androstenedione concentrations in male patients. Testicular structure was similar in patients and controls. CBZ, OXC and VPA were associated with changes in serum thyroid hormone, thyrotropin and lipid levels during pubertal maturation in female patients, but these levels returned to normal after withdrawal of medication. Linear growth and final height were normal in female patients, but overweight was common if they had been obese and on VPA medication during pubertal maturation. Elevated serum androgen levels, PCOS and overweight are common if epilepsy and AED use, especially VPA, continue into young adulthood. These untoward changes or alterations in serum thyroid hormone or lipid concentrations are not present in young women with medication withdrawn. CBZ and VPA are associated with changes in serum sex hormone levels in boys and young men with epilepsy. Epilepsy and AED use during pubertal maturation does not seem to affect growth.