A engenharia tecidual visa repor, reparar ou ajudar a regenerar tecidos e órgãos danificados por meio da combinação de biomateriais, biomoléculas e células. Scaffolds de nanofibras biodegradáveis mimetizam a matriz extracelular natural fornecendo uma estrutura ideal para o crescimento celular. Blendas de policaprolactona (PCL) e gelatina são biodegradáveis e proporcionam uma combinação de boas propriedades mecânicas, do PCL, com a hidrofilicidade e caráter que promove a adesão celular, da gelatina. Neste contexto, o objetivo deste trabalho é avaliar a importância das diferentes espessuras de scaffolds eletrofiados em relação às suas propriedades principais. Quatro conjuntos de scaffolds de PCL/gelatina com diferentes espessuras foram produzidos sob as mesmas condições apenas aumentando o tempo de duração do processo de eletrofiação. Os resultados indicam que as espessuras aumentaram proporcionalmente ao tempo de eletrofiação, variando de 100 nm a 300 nm nos períodos de 1 a 3 horas, enquanto a densidade aparente e a porosidade mantiveram-se constantes. As micrografias das membranas revelaram fibras lisas com diâmetros maiores para os scaffolds de menor espessura, e fibras irregulares com diâmetros menores e regiões fundidas ou ligadas para os scaffolds de maior espessura. Além disso, o aumento da espessura melhorou a resistência mecânica e a molhabilidade dos scaffolds. A esterilização por peróxido de hidrogênio não modificou quimicamente a composição das membranas de PCL/gelatina, embora algumas amostras tenham se deformado. As membranas também apresentaram bons resultados de citotoxicidade, melhorando a viabilidade celular, apesar desses valores diminuírem minimamente para os scaffolds de maior espessura, provavelmente devido à maior quantidade de PCL. O teste de adesão não foi conclusivo e deverá ser repetido. / Tissue engineering aims to replace, repair, or helping regenerate damaged tissues and organs through the combination of biomaterials, biomolecules and cells. Biodegradable nanofibrous scaffolds mimic the natural extracellular matrix providing an ideal structure to cellular growth. Blends of polycaprolactone (PCL) and gelatin are biodegradable and provide a combination of good mechanical properties, from PCL, with the hydrophilicity and cell adhesion promoter character, from gelatin. The aim of this work was to evaluate the importance of the thickness of electrospun scaffolds on their key properties. Four sets of PCL/gelatin scaffolds with different thicknesses were produced under the same conditions by simply increasing the time length of electrospinning process. Results indicate that the thickness increases proportionally to the electrospinning time, varying from 100 nm to 300 nm in periods of 1 to 3 hours, while the apparent density and porosity remained constant. Micrographs from the nonwoven mats revealed smooth fibers with larger diameters in the thinner scaffold, and irregular fibers with smaller diameters and molten or bonded regions as the thickness increased. Furthermore, the increase of thickness improved mechanical resistance and wettability of the scaffolds. Plasma sterilization did not modify chemical composition of PCL/gelatin membranes, although some samples have been deformed. Membranes also presented good results for cytotoxicity, improving cell viability, despite these values decreased minimally to the thicker scaffolds, probably due to the higher amount of PCL. Adhesion test was not conclusive and might be repeat.

O estudo de biomateriais aplicados à cicatrização levou à modalidade do tratamento chamada de regeneração tecidual guiada (RTG). A RTG reconstitui novos tecidos usando membranas como barreira de proteção da área defeituosa, impedindo a invasão de outros tecidos, especialmente dos tecidos conjuntivos fibrosos. Em outras palavras, a RTG é uma forma de isolar o tecido ósseo do tecido mole, resultando dessa forma em uma ótima condição para a formação óssea. Atualmente, mais de 20 tipos diferentes de polímeros são usados em aplicações biomédicas, e entre eles está o colágeno, polímero ao qual, pela sua hidrólise parcial pode-se obter a gelatina. A gelatina é um polipeptídeo biodegradável, biocompatível, que apresenta anti-genicidade, plasticidade e elasticidade. A prata tem seu efeito antimicrobiano bem conhecido, com utilidade em diferentes campos da medicina, odontologia e biomateriais. Nesse contexto, este trabalho desenvolve e estuda o comportamento das membranas de gelatina e membranas de gelatina com prata para aplicações em RTG. As Membranas de gelatina foram obtidas com concentração de 4% em massa e as membranas de gelatina com prata foram obtidas nas concentrações de 0,01%, 0,05% e 0,1% da solução. Na etapa de reticulação, as membranas secas foram imersas em solução tampão de fosfato de sódio com concentrações de glutaraldeído (GTA) a 0,5%, 1% e 2%, 24 horas. O ensaio de intumescimento foi realizado em membranas reticuladas e não reticuladas, pesadas e imersas em solução tampão de fosfato pH 7,4 por períodos de 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 1 hora, 3 horas, 22 horas e 24 horas e durante 8 semanas. Obteve-se membranas de gelatina com prata mediante a metodologia de adição da solução de Ag compravada pelas técnicas de DRX, FTIR, MEV e pelo teste de halo de inibição. As membranas reticuladas apresentaram menor valor de porcentagem de intumescimento quanto maior foi a concentração do agente reticulante, com exceção das amostras com concentração de 0,1M de prata. Além da atuação do GTA a prata também interfere no processo de intumescimento, aspecto e comportamento das membranas de gelatina. O efeito bactericida foi avaliado utilizando ensaio de cultura de bactérias - Teste de halo de inibição, onde as membranas de gelatina com Ag apresentaram efeito bacteriostático contra bactéria Gram positiva e Gram negativa. / The study of biomaterials applied to healing led to the treatment modality called guided tissue regeneration (GTR). The RTG reconstruct new tissue using the membranes as a barrier to protect the defective area, preventing the invasion of other tissues, especially connective tissue fibers. In other words, the RTG is a way of isolating the bone tissue of the soft tissue, thereby resulting in an excellent condition for bone formation. Currently, more than 20 different types of polymers are used in biomedical applications, and among them is the collagen polymer to which, by its partial hydrolysis can get the gelatin. Gelatin is a polypeptide biodegradable, which has antigenicity, plasticity and elasticity. Silver has antimicrobial effect well known, are useful in different fields of medicine, dentistry and biomaterials. In this context, this paper develops and studies the behavior of membranes of gelatin and gelatin silver membranes for applications in RTG. Membranes were obtained with gelatin concentration of 4% by weight and gelatin silver membranes were obtained at concentrations of 0.01%, 0.05% and 0.1% of the solution. In the crosslinking step, the dried membranes were immersed in sodium phosphate buffer to concentrations of glutaraldehyde (GTA) at 0.5%, 1% and 2% 24 hours. The swelling test was performed on crosslinked and uncrosslinked membranes, weighed and immersed in phosphate buffer pH 7.4 for a period of 5 minutes, 15 minutes, 30 minutes, 1 hour, 3 hours 22 hours and 24 hours, and for 8 weeks. Obtained gelatin membranes with silver by the method of adding the solution of Ag proven by XRD techniques, FTIR, SEM and the zone of inhibition test. The crosslinked membranes had lower percentage of swelling the higher the concentration of crosslinking agent, except for the samples with a concentration of 0.1 M silver. In addition to operating the GTA silver also interferes with the process of swelling, appearance and behavior of gelatin membranes. The bactericidal effect was evaluated by bacterial culture test - Test of inhibition zone, where the gelatin membrane with Ag Ag exhibited bacteriostatic effect exhibited against Gram positive and Gram negative.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-06-24T22:19:49Z No. of bitstreams: 1 471017 - Texto Completo.pdf: 5708318 bytes, checksum: 28730b4a87bc0d3ea819556c7b2b4dc6 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-24T22:19:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 471017 - Texto Completo.pdf: 5708318 bytes, checksum: 28730b4a87bc0d3ea819556c7b2b4dc6 (MD5) Previous issue date: 2015-03-12 / Lesions in bone tissue reach 15 million cases per year worldwide. Thus, a significant amount of bone tissue transplants have been performed in recent years. A promising alternative to bone graft is in the field of tissue engineering, which is based on the use of polymeric structures acting as support for hard tissue regeneration. The objective of this project was look for the association of the PLGA copolymer, to the bioceramic hydroxyapatite, to form a polymeric bioactive macroporous structure. The preparation was made through the PLGA dissolution in chloroform, followed by addition of sodium chloride and hydroxyapatite (porogenic agent). Molding of the samples was performed by compression in hydraulic press. After, was performed the leaching of the scaffolds, followed by treatment with NaOH. Finally the composites obtained were characterized by FEG - SEM, in order to analyze qualitatively the morphology, porosity and interconnectivity of the pores; the hydrophilicity of the surface was evaluated by wettability tests it was proved chemical treatment efficiency; in vitro hydrolytic degradation assays performed as a function of time demonstrate that the percentage of degradation of various types of scaffolds did not showed significant changes between 14 and 42 days. Hydrolytic degradation assays found yet that the fluid retention was higher in scaffolds chemically treated; compression tests evaluated the mechanical behavior of different types of scaffolds made. It was concluded then that the methodology used originated macroporous composites that may be applied in bone tissue engineering. / Les?es em tecido ?sseo chegam a somar 15 milh?es de casos por ano mundialmente. Diante disso, uma quantidade significativa de transplantes de tecidos ?sseos tem sido realizada nos ?ltimos anos. Uma alternativa promissora para enxertos ?sseos est? na ?rea da engenharia de tecidos, que se baseia na utiliza??o de estruturas polim?ricas atuando como scaffolds para regenera??o do tecido duro. O objetivo deste trabalho foi buscar a associa??o entre o copol?mero PLGA e a biocer?mica hidroxiapatita com a finalidade de formar uma estrutura polim?rica bioativa macroporosa. A confec??o foi dada atrav?s da dissolu??o de PLGA em clorof?rmio, seguida da adi??o de hidroxiapatita e cloreto de s?dio (agente porog?nico). A moldagem das amostras foi realizada por compress?o em prensa hidr?ulica. Ap?s, foi feita a lixivia??o das amostras, seguida do tratamento com NaOH. Finalmente os comp?sitos obtidos foram caracterizados atrav?s de MEV-FEG, visando analisar qualitativamente a morfologia, a porosidade e a interconectividade dos poros; a hidrofilicidade das superf?cies foi analisada por testes de molhabilidade em que foi comprovada a efici?ncia do tratamento qu?mico; ensaios de degrada??o hidrol?tica realizados em fun??o do tempo revelaram que o percentual de degrada??o dos diferentes tipos de scaffolds n?o apresentou mudan?a significativa entre os tempos de 14 e 42 dias. O ensaio de degrada??o hidrol?tica constatou ainda que a reten??o de l?quido fora maior em scaffolds tratados quimicamente; os ensaios de compress?o avaliaram o comportamento mec?nico dos diferentes tipos de scaffolds confeccionados. Concluiu-se, ent?o, que a metodologia utilizada originou comp?sitos macroporosos que podem vir a ser aplicados na engenharia de tecido ?sseo.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 458211.pdf: 2390147 bytes, checksum: 88c6a01bcd87265c68297af0c6ea8e78 (MD5) Previous issue date: 2014-03-27 / Bioresorbable polymers have been used as scaffolds in tissue engineering, thus representing an important alternative for reconstruction of lesions and tissue losses. This study aimed to evaluate the in vivo performance of three-dimensional scaffolds made of polycaprolactone (PCL), by means of through a PCL implant on the subcutaneous tissues of rats back and calvaria, as well as the reaction of their kidneys, lungs and liver. The histological analysis of the bone repair process in calvaria showed the presence of newly formed bone growing towards the center of the defects. The formation of a thin fibrous capsule was observed in the tissues adjacent to the scaffold implanted on the back of all animals, with collagenous fibers involving the implant. As for events occurring in animals' kidneys, lungs and liver, there were no harmful tissue alterations in these organs nor the presence of inflammatory process, hyperplasia, metaplasia, dysplasia or hemorrhage. A quantitative analysis of the bone repair process was performed using histomorphometry and cone beam computed tomography (CBCT). Results showed that the newly formed bone grew towards the center of the defects. Statistical analysis revealed that the total area of new bone formation was greater in experimental defects at 21, 60 and 120 days, showing a statistically significant difference. In tomographic analysis found that new bone formation is more likely to occur in experimental defects, but with no statistically significant difference. Considering tomographic analysis as a new method for the assessment of new bone formation, the data obtained from this assessment could not be correlated with those obtained from histomorphometric analysis. Therefore, it can be concluded that PCL scaffolds produced on an additive manufacturing machine are biocompatible, non-cytotoxic and bioresorbable products that promote osteoconduction. PCL showed great potential for clinical use in the treatment of bone defects by increasing bone ?rea and seems to be an appropriate biomaterial to be used in other studies aiming to elucidate issues related to this topic. Additionally, CBCT does not seem to be a useful tool in the evaluation of new bone formation of rat calvaria, which means that histomorphometric analysis is still the most appropriate method. / Pol?meros biorreabsorv?veis v?m sendo utilizados como scaffolds na engenharia tecidual, destacando-se como alternativa para reconstru??o de les?es e perdas teciduais. Neste estudo, avaliou-se o desempenho in vivo de scaffolds tridimensionais de pol?mero policaprolactona (PCL), atrav?s do implante do PCL nos tecidos subcut?neos do dorso e na calv?ria, bem como da rea??o dos ?rg?os rins, pulm?es e f?gado de ratos. A an?lise histol?gica qualitativa do processo de reparo ?sseo nas calv?rias mostrou neoforma??o ?ssea e que o osso neoformado cresceu em dire??o ao centro de defeitos. Nos tecidos adjacentes ao scaffold implantado no dorso, percebeu-se que em todos os animais houve forma??o de c?psula fibrosa fina, com fibras col?genas organizadas envolvendo o implante. Com rela??o aos eventos ocorridos nos rins, f?gado e pulm?es dos animais, n?o houve altera??es teciduais danosas aos ?rg?os, tampouco a presen?a de processo inflamat?rio, hiperplasia, metaplasia, displasia ou hemorragia. A an?lise quantitativa do processo de reparo ?sseo foi realizada atrav?s de histomorfometria e tomografia computadorizada de feixe c?nico (TCFC). Ap?s an?lise estat?stica, a ?rea total de neoforma??o ?ssea em mm2 foi maior nos defeitos experimentais aos 21, 60 e 120 dias, com diferen?a estatisticamente significativa. Na an?lise tomogr?fica, percebeu-se uma tend?ncia de maior neoforma??o ?ssea nos defeitos experimentais, mas sem diferen?a estatisticamente significativa. Considerando-se a an?lise tomogr?fica como uma nova metodologia para avalia??o de neoforma??o ?ssea, os dados obtidos atrav?s dessa avalia??o n?o puderam ser correlacionados com aqueles obtidos na an?lise histomorfom?trica. Portanto, conclui-se que os scaffolds de PCL produzidos na plataforma experimental de manufatura aditiva s?o biocompat?veis, n?o citot?xicos, biorreabsorv?veis e promovem osteocondu??o. O PCL apresentou grande potencial de aplica??o cl?nica nos defeitos onde se espera aumentar a ?rea ?ssea e parece adequado como um biomaterial de escolha para outros estudos que elucidem as quest?es pertinentes. A TCFC n?o parece ser uma ferramenta ?til na avalia??o da neoforma??o ?ssea em calv?ria de ratos, de modo que a an?lise histomorfom?trica permanece como m?todo mais adequado.

Orientador: Marinônio Lopes Cornélio / Coorientadora: Agnes Cristina Fett Conte / Banca: Elias Naim Kassis / Banca: Maria Tercília Vilela de Azeredo Oliveira / Banca: Patrícia Simone Leite Vilamaior / Banca: Andreia Borges Scriboni / Resumo: Introdução: A terapia de tecidos e órgãos artificiais tem resultado no aumento da expectativa de vida de milhares de pessoas, sendo que uma a cada cinco com mais de 65 anos já foi beneficiada com tecidos e órgãos gerados in vitro. Assim, torna-se imperativo o desenvolvimento de novas estratégias de desenvolvimento e optimização de biomatrizes e de células tronco, para atender a demanda, que sejam capazes de promover regeneração de tecidos e órgãos, amortização dos custos e uso seguro em nível celular. Neste contexto, as células tronco mesenquimais adiposas (CTMA) tem despertado grande interesse científico. Objetivo: Foi analisado a biocompatibilidade em nível celular e cromossômica/cromatídica da biomatriz de quitosana-colágeno-genipina com CTMA humanas. Métodos: Foram testadas diferentes concentrações de genipina para estabelecimento da matriz, por análise de intumecimento, degradação e grau de reticulação, por espectrofotometria. As CTMA foram obtidas por processamento enzimático do lipoaspirado humano e cultivadas em Petakas (controle) e na biomatriz selecionada após caracterização físico-química, com e sem criopreservação. As CTMA foram caracterizadas quanto a adesão e proliferação por microscopia óptica convencional, contraste de fase e eletrônica de varredura, imunofenotipagem, viabilidade celular com teste de azul de Trypan, estabilidade cromossômica, por técnicas citogenéticas convencionais, potencial neoplásico por teste de Papanicolau e quanto a capacidade de... / Abstract: Introduction: Therapy of artificial tissues and organs has resulted in an increase in the life expectancy of thousands of people, and one in five over 65 years has already benefited from tissues and organs generated in vitro. Thus, it is imperative to develop new strategies for the development and optimization of biomatrices and stem cells to meet demand, which is capable of promoting tissue and organ regeneration, cost amortization and safe use at the cellular level. In this context, adipose mesenchymal stem cells (AMSC) have aroused great scientific interest. Objective: The biocompatibility at the cellular and chromosomal/chromatidic level of chitosan-collagen-genipin biomatrix with human AMSC was analyzed. Methods: Different concentrations of genipin for matrix establishment were tested by the analysis of the number of cells, the degradation, and degree of crosslinking by spectrophotometry. AMSC were obtained by enzymatic processing of human lipoaspirate and cultured in Petakas (control) and in the selected biomatrix after physicochemical characterization, with and without cryopreservation. The AMSC were characterized for adhesion and proliferation by conventional optical microscopy, phase contrast and scanning electron microscopy, immunophenotyping, cell viability with Trypan blue test, chromosomal stability, by conventional cytogenetic techniques, neoplastic potential by Papanicolaou test and for the capacity of cell differentiation in three types of tissues, with a ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

A medicina regenerativa é um campo fascinante e tem chamado a atenção, nos últimos anos, pelo crescente esforço multidisciplinar em busca de metodologias adequadas para a reposição de tecidos danificados no corpo humano. Entre as técnicas utilizadas para desenvolver matrizes para o uso em engenharia tecidual está o electrospinning. Essa técnica que permite a produção de nanofibras através do uso de forças electrostáticas e tem sido empregado para a produção de matrizes fibrosas. As células-tronco mesenquimais (CTM) são células-tronco adultas com alta plasticidade e por isto alvo de muitos estudos terapêuticos. O presente trabalho foi dividido em dois capítulos sendo que cada um tratou de um objetivo, como segue: (1) cultivar e diferenciar células-tronco mesenquimais em matrizes de nanofibras de poli(ácido lático-co-glicólico) (PLGA) produzidas através da técnica de electrospinning e investigar o envolvimento de receptores integrina- 1 no processo de adesão em matrizes de PLGA; (2) avaliar a viabilidade celular de células-tronco mesenquimais ou células mononucleares (CMNs) misturadas a uma solução de poli(álcool vinílico) (PVA) e submetidas a produção de fibras por electrospinning. No capítulo I, as CTM foram isoladas de camundongos da linhagem C57BL/6, cultivadas e submetidas a diferenciação condrogênica em matrizes de nanofibras de PLGA produzidas por electrospinning. Análises realizadas 24 horas após a semeadura demonstraram que as CTM eram responsívas e apresentavam morfologia semelhante a de fibroblastos com a presença de fibras de estresse de actina. O bloqueio dos receptores integrina- 1 reduziu (em cerca de 20%) a adesão celular e as observações demonstraram a perda das fibras de estresse de actina. Estes resultados demonstraram a habilidade das nanofibras de PLGA em ativar respostas celulares mediadas por adesão via integrina. No capítulo II foi avaliada a viabilidade de CTM e CMNs após terem sido processadas pelo electrospinning. As CTM foram extraídas da parede de cordão umbilical e as CMNs do sangue de cordão umbilical. Ambas as células foram misturadas a uma solução de PVA 10% e esta suspensão foi utilizada para produzir fibras pelo processo de electrospinning durante 30 minutos utilizando-se uma voltagem de 21 kV. Após o procedimento a viabilidade celular foi mensurada através de contagem celular com exclusão de células mortas por coloração com Trypan Blue. As CTM tiveram a viabilidade reduzida para 19.6%, e as CMNs para 8.38%. Os dados coletados sugerem a necessidade de mais estudos na busca de estratégias de proteção celular durante o electrospinning, uma vez que a elevada perda da viabilidade celular pode estar relacionada à alta viscosidade da solução polimérica, levando a redução do acesso ao meio nutritivo, associada aos efeitos do estresse mecânico e elétrico inerentes do procedimento. Os resultados gerais destes capítulos (1) demonstraram a habilidade das matrizes de nanofibras de PLGA em ativar respostas celulares via receptores integrinas- 1; (2) sugerem que a incorporação de células em matrizes fibrosas durante a produção de fibras através da técnica de electrospinning é um procedimento viável e pode ser utilizado como estratégia para a melhor distribuição celular na matriz formada. Juntamente, estes dados contribuem para o entendimento do comportamento das CTM em matrizes biodegradáveis e biocompatíveis produzidas por electrospinning, as quais podem ser utilizadas como material carreador em tratamentos clínicos envolvendo transplante celular. / Regenerative medicine is an amazing field that has called attention, in the last years, due to the multidisciplinary efforts to find suitable methodologies to regenerate damage tissues. Electrospinning is an important technique used to produce nanofibers and is employed to develop fibrous scaffolds. Mesenchymal stem cells (MSC) are adult stem cells with high plasticity and, for this reason, are widely studied in therapeutic approaches. The present study is composed by two chapters, with different aims, as follow: (1) culture MSC on poly(D, Llactide- co-glycolide) (PLGA) nanofiber scaffolds and induce them to condrogenic differentiation and, analyze the influence of the integrin- 1 receptor in the adhesion of MSC on PLGA scaffolds; (2) analyze the viability of MSC and mononuclear cells (MNCs) mixed to a PVA solution after electrospinning. In the Chapter I, MSCs were isolated from C57BL/6 mice, cultured on PLGA scaffold produced by electrospinning technique and differentiated into chondrogenic lineage. After seeding, MSCs were responsive and become flattened with fibroblast-like morphology demonstrated by the presence of actin stress fibers. Integrin- 1 receptor blockage reduced (about 20%) cell adhesion with loss of actin stress fibers, demonstrating the ability of PLGA nanofiber to trigger integrin receptor-mediated cell adhesion. In the Chapter II, the viability of MSC and MNC after electrospinning were analyzed. MSC were extracted from the wall of the umbilical cord, and MNC from the umbilical cord blood. Cells were resuspended in a solution of poly(vinil alcohol) (PVA) 10% and subjected to electrospinning during 30 minutes under a voltage of 21kV. Cell viability was assessed before and after the procedure by exclusion of dead cells by Trypan Blue staining. After electrospinning the MSC viability reduced to 19.6%, and the MNCs viability to 8.38%. These data suggest the need for more investigations looking for strategies to protect cell from the damages caused by electrospinning, as the loss of viability can be related to the high viscosity of the polymeric solution which reduced the access to nutrients associated to the electric and mechanical stress during electrospinning. The results of both chapters (1) demonstrated the ability of PLGA nanofiber to trigger integrin receptor-mediated cell adhesion; (2) suggested that the cellular incorporation into fibrous scaffolds produced by electrospinning is a viable process and can be used to improve the cellular distribution into scaffolds. The present data contribute to the understanding of MSCs´ behavior on these biodegradable and biocompatible scaffolds that can be used as carriers in treatments involving cell transplantation.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-07-26T14:16:17Z No. of bitstreams: 1 DIS_MAURICIO_DA_SILVA_HOFFMANN_COMPLETO.pdf: 3702613 bytes, checksum: 3b0ef365d0e0899c33cdef47ae74d886 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-26T14:16:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_MAURICIO_DA_SILVA_HOFFMANN_COMPLETO.pdf: 3702613 bytes, checksum: 3b0ef365d0e0899c33cdef47ae74d886 (MD5) Previous issue date: 2016-03-04 / Polyurethanes (PU) are widely used as biomaterials because it has good compatibility, and desirable mechanical properties and branched polyurethanes have shown besides these characteristics, an appreciable stability to hydrolytic and enzymatic degradation. Within this context, this study aimed to synthesize branched polyurethanes from the addition of pentaerythritol and evaluate its potential use as scaffolds in tissue engineering. Polycaprolactone diol (PCL) as polyol and pentaerythritol (PETT) in different amounts (5, 10 and 15% w/w relative to the polyol) as well as the hexamethylene diisocyanate (HDI) were used in the synthesis of the branched PU. These branched PU (PU-PETT) were evaluated for structural, morphological, mechanical, thermal and solubility in various organic solvents and compared to the linear PU (without PETT). Among the branched PU, PU-PETT 5% showed better morphological and tensile strength characteristics, so it was used to prepare membranes leached with the linear PU. The leached membranes were evaluated for their structural, morphological, mechanical, thermal properties, wettability, hydrolytic degradation, calcification and swelling degree. The leached membrane PU-PETT 5% showed high porosity and interconnectivity, greater thermal stability compared to linear PU leached membrane, despite the lower degree of crystallinity and molar weight. Also, the PU-PETT 5% membrane exhibited the ability of calcium phosphate biomineralization, good wettability, higher stability hydrolytic degradation and greater swelling as compared to linear PU membrane. Thus, it can be concluded that the membrane PU-PETT 5% exhibited characteristics suitable for use as biomaterials in tissue engineering. / Poliuretanos (PU) t?m sido amplamente utilizados como biomaterial por possuir boa compatibilidade e desej?veis propriedades mec?nicas e os poliuretanos ramificados tem apresentado al?m destas caracter?sticas, apreci?vel estabilidade a degrada??o hidrol?tica e enzim?tica. Dentro deste contexto, este trabalho teve como objetivo sintetizar poliuretanos ramificados est?veis a partir da adi??o de pentaeritritol e avaliar seu potencial uso como suportes em engenharia tecidual. Para a s?ntese do PU ramificado foi utilizado o poliol policaprolactona diol (PCL) e pentaeritritol (PETT) em diferentes quantidades (5, 10 e 15% m/m em rela??o ao poliol), bem como, o hexametilenodiisocianato (HDI). Estes PU ramificados (PU-PETT) foram avaliados quanto ?s propriedades estruturais, morfol?gicas, mec?nicas, t?rmicas e de solubilidade em diversos solventes org?nicos e comparados ao PU linear (sem PETT). Entre os PU ramificados, o PU-PETT 5% apresentou melhores caracter?sticas morfol?gicas e de resist?ncia a tra??o, por isso ele foi utilizado para preparar membranas lixiviadas juntamente com o PU linear. As membranas lixiviadas foram avaliadas quanto as suas propriedades estruturais, morfol?gicas, mec?nicas, t?rmicas, molhabilidade, degrada??o hidrol?tica calcifica??o e grau de inchamento. A membrana lixiviada de PU-PETT 5% apresentou alta porosidade e interconectividade, maior estabilidade t?rmica comparada a membrana lixiviada de PU linear, apesar do menor grau de cristalinidade e massa molar. Al?m disso, a membrana de PU-PETT 5% apresentou habilidade para a biomineraliza??o de fosfato de c?lcio, boa molhabilidade, maior estabilidade a degrada??o hidrol?tica e maior grau de inchamento quando comparado a membrana de PU linear. Com isso, pode-se concluir que a membrana de PU-PETT 5% apresentou caracter?sticas adequadas para uso como biomaterial em engenharia de tecidos.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-16Bitstream added on 2014-06-13T19:01:23Z : No. of bitstreams: 1 caruso_m_dr_arafcf_parcial.pdf: 72130 bytes, checksum: 0f5d046d009c41010ce608d7390634e2 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-25T13:01:08Z: caruso_m_dr_arafcf_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-25T13:03:26Z : No. of bitstreams: 1 000682142_20151231.pdf: 71945 bytes, checksum: bd241f7f32244e4999c4ce1cf227b884 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-01-04T10:26:47Z: 000682142_20151231.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-04T10:28:37Z : No. of bitstreams: 1 000682142.pdf: 1232603 bytes, checksum: c1d0330a8cc50cbfbeefd9d4de058538 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O propósito desse trabalho, dividido em dois experimentos, foi estudar os efeitos da Lactoferrina (Lf) em três situações de injúria tecidual. Todas as análises estatísticas consideraram nível de significância (alfa) p < 0,05. O Experimento I abordou a cicatrização de feridas cutâneas abertas, induzidas cirurgicamente. Utilizaram-se seis coelhos da espécie Oryctolagus cuniculus, machos, com seis semanas de idade. Realizaram-se na região dorsal, duas incisões na pele, com 10 mm de diâmetro. A cada 24 horas, uma ferida (FL) recebeu 1mL de Lf a 100µg/mL em solução salina e a outra (FC) somente solução salina. Fotografou-se diariamente para análise morfométrica. No décimo dia removeram-se retalhos do tecido de cicatrização para estudo histológico, histoquímico e imunohistoquímico dos elementos cicatriciais. Os resultados mostraram para FL maior: proliferação vascular (p < 0,01), fibroblástica (p < 0,01) e de mononucleares (p < 0,001); intensidade de colagenização (p < 0,01), reepitelização (p < 0,01), deposição de colágeno tipo I (p < 0,01); e melhor índice de Maturação (IMac) (p < 0,01). O número e área dos miofibroblastos foram maiores para FL com p < 0,001. A redução da área... / The purpose of this work, divided into two experiments, was to study the effects of Lactoferrin (LF) in three situations of tissue injury. All statistical analysis found significance level (alpha) p <0.05. Experiment I addressed the healing of open wounds, surgically induced. We used six species of rabbits Oryctolagus cuniculus, males, six weeks old. Performed in the dorsal region, two skin incisions, with 10mm diameter. Every 24 hours, a wound (FL) received 1 mL of the Lf 100µg/mL saline and the other (FC) only saline. Photographed daily to morphometric analysis. On the tenth day, flaps of the scar tissue were removed, for the histological, histochemical and immunohistochemical evidence of scarring. The results showed greater for FL: vascular proliferation (p < 0.01), fibroblastic (p < 0.01) and mononuclear (p < 0.001), intensity of collagen (p < 0.01), re-epithelialization (p < 0,01), deposition of collagen type I (p < 0.01), and better rate of maturation (iMac) (p < 0.01). The number and area of myofibroblasts were... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Tetuo Okamoto / Resumo: Este estudo avaluoi-se o proceso de reparo de feridas de extração dental após irrigação com solução a 5% de ácido epsilon-amino-capróico (EACA) e implante de adesivo fibrínico (Tissucol). Foram utilizados 60 ratos (Wistar), machos, com peso entre 250 gramas e 300 gramas e divididos em 03 grupos com 20 animais cada, onde foram realizados os seguintes procedimentos: No grupo 1 foi administrado 0,1 ml/100mg de peso corporal de solução salina a 0,9%, iniciando-se 06 dias antes da exodontia, administração diária de 0,03ml de varfarina sódica sendo mantida durante todo o experimento. Após a exodontia do incisivo superior direito, seus alvêolos foram preenchido com adesivo fibrinico, No grupo III, os animais desse grupo receberam os mesmos procedimentos dos animais do grupo IIe, após a exodontia, tiveram seus alvêolos irrigados com 5ml de solução a 5% de ácido epsilon-amino-capróico e também preenchidos com adesivos fibrinico (Tissucol)...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Este trabalho tem por objetivo comparar a eficácia da cola biológica de fibrina e da drenagem de aspiração pós-operatória na prevenção de complicações cirúrgicas como hematoma e seroma após a realização de ritidoplastia pela equipe da Clínica Rezende no Hospital Moinhos de Vento, na cidade de Porto Alegre/RS. Realizou-se estudo prospectivo, controlado, randomizado e duplo cego. Foram analisadas 72 pacientes, divididas em dois grupos de 36, sendo que no grupo dreno utilizou-se drenagem de aspiração e no grupo cola utilizou-se cola de fibrina. Quarenta e oito horas após a realização dos procedimentos, todas as pacientes foram submetidas a aferição ecográfica da lâmina de exsudato presente sob os retalhos cutâneos da face. O volume total médio foi de 3,21 mL no grupo dreno e 1,02 mL no grupo cola, com magnitude de efeito de 68,1% e intervalo de confiança de 55,3 a 77,2 e p <0,001. Com esses resultados, comprovou-se que a cola apresenta eficácia significativa, demonstrando que sua utilização é 68,1 % mais efetiva que a drenagem de aspiração na prevenção de hematomas ou seromas em ritidoplastia. / This study aimed to compare the efficacy of fibrin glue and suction drainage in preventing postoperative complications such as hematoma and seroma following rhytidoplasties conducted by the staff of Clínica Rezende at Hospital Moinhos de Vento in Porto Alegre, Brazil. A prospective, controlled, randomized, double-blind trial was conducted. The 72 patients assessed in the study were divided into two groups of 36 each, one treated with suction drainage and other with fibrin glue. Forty-eight hours after the procedures, all patients underwent ultrasound evaluation of the volume of exudate under facial skin flaps. The average volume of exudate was 3.21 mL in the drainage group and 1.02 mL in the fibrin glue group, with a size effect of 68.1%, 95% confidence interval of 55.3 to 77.2, and p <0.001. The results of this investigation significant favor the use of fibrin glue, showing that was 68.1 % more effective than suction drainage in preventing hematoma or seroma following rhytidoplasty.