CAVALCANTI, Pacífica Pinheiro. Estudo de biodisponibilidade comparativa entre duas formulações contendo levotiroxina sódica em voluntários sádios. 2005. 189 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2005. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-08T13:29:02Z No. of bitstreams: 1 2005_dis_ppcavalcanti.pdf: 2317325 bytes, checksum: 7ff7915a45e7780f9bef2ca02d290784 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-05-08T16:53:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2005_dis_ppcavalcanti.pdf: 2317325 bytes, checksum: 7ff7915a45e7780f9bef2ca02d290784 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-08T16:53:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005_dis_ppcavalcanti.pdf: 2317325 bytes, checksum: 7ff7915a45e7780f9bef2ca02d290784 (MD5) Previous issue date: 2005 / O tratamento de escolha para o hipotireoidismo é a levotiroxina sódica. Estudos de biodisponibilidade com medicamentos com características hormonais têm grande importância na garantia do controle da qualidade dos fármacos disponíveis à população. Logo, o objetivo deste estudo foi: Determinar a biodisponibilidade de duas formulações de 150 μg de levotiroxina sódica em indivíduos sadios; após única administração de 600 μg, por via oral e compará-las .A pesquisa consistiu de um estudo aberto, randomizado, cruzado, com dois tratamentos, dois períodos (duas seqüências), nos quais os 24 voluntários, saudáveis e de ambos os sexos, receberam, em cada período distinto, a formulação teste do Aché Laboratórios Farmacêuticos S.A. ou a formulação referência da Sanofi-Synthelabo Ltda. (Puran ®T4). Foi utilizado o imunoensaio de eletroquimioluminescência para dosar as concentrações dos hormônios T3 (liotironina) e T4 (levotiroxina) nas amostras de soro dos voluntários e posterior determinação dos parãmetros farmacocinéticos. Os resultados da análise de variância (ANOVA) da Levotiroxina demonstraram um significante efeito de período com diminuição dos níveis séricos do T4, no segundo internamento, independente da aleatorização (p<0,05). As razões das médias geométricas do Cmax e ASC0-48h das formulações teste e referência foram 92,97% e 97,87%, respectivamente. Os intervalos de confiança de 90% foram de 88,70– 97,44% e 93,10 - 102,88%, respectivamente. As formulações de comprimidos de 150microg de levotiroxina sódica estudadas apresentaram biodisponibilidades semelhantes, quando administradas em dose única de 600microg, por via oral a voluntários sadios; sendo então consideradas bioequivalentes.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006 / APRESENTAÇÃO - Nesta tese de mestrado, apresentamos, de acordo com recomendações do Conselho Especial do Programa de Pós-Graduação de Endocrinologia da Universidade Federal de São Paulo – Escola Paulista de Medicina, um trabalho completo em inglês entitulado: "Thyroglobulin is still detectable in the serum of normal individuals after a trial of TSH-suppressive doses of L-T4 during 3 months", traduzido para o português como "A tiroglobulina é ainda detectável no soro de indivíduos normais após 3 meses de uso de L-tiroxina em dose supressiva de TSH", de autoria de Ricardo A. Guerra, Felipe Crispim, Cláudia C. D. Nakabashi, Cléber P. Camacho, Teresa S. Kasamatsu e Rui M. B. Maciel. A idéia deste trabalho surgiu a partir da necessidade de conhecimento do comportamento dos níveis séricos de tiroglobulina na ausência de um dos três principais fatores determinantes de sua concentração, os níveis séricos de TSH (Spencer e cols., 1996; Torréns e Burch, 2001; Baloch e cols., 2003). Além do interesse fisiológico, há também uma questão prática envolvida, que é o diagnóstico precoce da tirotoxicose factícia (Mariotti e cols., 1982; Bogazzi e cols., 1999). / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-05-09T19:53:50Z No. of bitstreams: 1 2015 - Phelipe Fontanezi Campos Garcia Fontes.pdf: 1744858 bytes, checksum: 8509d8579b9954973f7546999edfab62 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-09T19:53:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015 - Phelipe Fontanezi Campos Garcia Fontes.pdf: 1744858 bytes, checksum: 8509d8579b9954973f7546999edfab62 (MD5) Previous issue date: 2015-07-31 / Hypothyroidism is the most common disease caused by hormone deficiency, affecting more than 10 million people in the United States of America and about 6.6% of the adult population of S?o Paulo. Symptoms of depression and anxiety often occurs in hypothyroid pacients. Depression and anxiety disorders are the most common behavioral disorders. These behavioral disorders has high comorbidity and could aggravate the clinical progress when they occur in ill people. Thus, the depression is the major cause of disability and affects more than 350 million people. Anxiety disorders are highly prevalent, for example, 18.1% of the North American population suffers from this disorder. In this context, about 5-10% of hypothyroid patients shows symptoms depression and anxiety disorders even under treatment with levothyroxine (L-T4). Despite levels of TSH and T4 within the reference values L-T4 did not appear effective in reversing these symptoms and this can be linked to the fact that this pharmacological approach not restore euthyroidism in all tissues. Added to this, there are few studies that evaluate these behavioral disorders in hypothyroidism and effects of thyroxine. Therefore, this work studied the behavioral changes caused by hypothyroidism by total thyroidectomy protocol. Furthermore, this study aimed to verify in which the effects of replacement with thyroxine against these behavioral alterations. Therefore, the animals were divided into 3 groups: 1) Control group / false operated (SHAM); 2) thyroidectomized group (TX); 3) thyroidectomized Group receiving hormone replacement (TX + T4). These animals were subjected to a battery of behavioral tests to check behaviors similar to depression and anxiety. It was also observed body weight of the animals during the experiment to verify the onset of hypothyroidism, and adrenal weight. The TX group presented similar behavior to depression and anxiety increased when comparated with the SHAM group. The treatment with T4 reversed partially these behaviors. Given these results, we found that conventional therapy alone, failure to reverse all the behavioral symptoms caused by hypothyroidism. These data are in agreement with data presented in the literature and it shows in clinical the L-T4 ineffectiveness in reverse the symptoms reported for a portion of patients. / O hipotireoidismo ? a patologia relacionada a defici?ncia hormonal mais comum, afetando mais de 10 milh?es de pessoas nos Estados Unidos das Am?ricas e cerca de 6,6 % da popula??o adulta de S?o Paulo. Nesta doen?a ? comum aparecerem sintomas de depress?o e transtorno de ansiedade que s?o os dist?rbios comportamentais mais comuns. Essas doen?as comportamentais possuem alta comorbidade e podem agravar o quadro cl?nico quando ocorrem em indiv?duos doentes. Sendo assim, a depress?o aparece como a maior causa de incapacidade e acomete mais de 350 milh?es de pessoas. Os transtornos de ansiedade possuem alta preval?ncia, por exemplo, 18,1% da popula??o Norte Americana sofre deste transtorno. Neste contexto, cerca de 5-10% dos pacientes que sofrem de hipotireoidismo e s?o tratados com levotiroxina (L-T4) apresentam sintomas de depress?o ou transtornos de ansiedade. Mesmo apresentando n?veis de TSH e T4 dentro dos valores de refer?ncia a L-T4 parece n?o ser eficaz em reverter estes sintomas e isto pode estar associado ao fato desta abordagem farmacol?gica n?o reestabelecer o eutireoidismo e m todos os tecidos. Somado a isto, h? poucos estudos que avaliam estes transtornos comportamentais no hipotireoidismo e os respectivos efeitos da tiroxina. Portanto, o presente trabalho estudou as altera??es comportamentais ocasionadas pelo hipotireoidismo atrav?s do protocolo de tireoidectomia total. Al?m disso, este estudo objetivou-se em verificar quais os efeitos da reposi??o com tiroxina sobre essas altera??es. Para tanto, os animais foram divididos em 3 grupo: 1) Grupo controle/falso operado (SHAM); 2) Grupo tireoidectomizado (TX); 3) Grupo tireoidectomizado submetido a reposi??o hormonal (TX+T4). Estes animais foram submetidos a uma bateria de testes comportamentais para verificar comportamentos semelhantes ? depress?o e ansiedade. Tamb?m foi verificado o peso corporal dos animais durante o experimento, para verificar o aparecimento de hipotireoidismo, e o peso da adrenal. O grupo TX apresentou comportamentos an?logos a depress?o e ansiedade aumentados em rela??o ao SHAM. J? o tratamento com T4 reverteu tais comportamentos parcialmente. Diante destes resultados, observamos que a terapia convencional, monoterapia, falha em reverter todos os sintomas comportamentais ocasionados pelo hipotireoidismo. Estes dados est?o em concord?ncia com os apresentados na literatura que demonstram na cl?nica a inefic?cia da L-T4 em reverter os referidos sintomas para uma parcela de pacientes.

Os hormônios da tireóide, incluindo a triiodotironina (T3) e a tetraiodotironina (T4), são reconhecidos como hormônios metabólicos fundamentais do corpo. Os hormônios da tireóide são essenciais para a maturação e função do sistema nervoso central (SNC) de mamíferos e sua deficiência, durante um período crítico do desenvolvimento, profundamente afeta a função cognitiva. A sódio potássio adenosina 5'-trifosfatase (Na+,K+-ATPase) é uma enzima crucial responsável pelo transporte ativo de íons sódio e potássio no SNC necessário para manter o gradiente iônico para a excitabilidade neuronal. Estudos sugerem que a Na+,K+-ATPase possa ter um papel na formação da memória. Além disso, os hormônios da tireóide parecem estimular a atividade da Na+,K+-ATPase no coração de algumas espécies. Neste trabalho investigamos o efeito da administração crônica de L-tiroxina (LT4) e propiltiouracil (PTU), uma droga antitireóide, sobre alguns paradigmas de comportamento: esquiva inibitória, campo aberto, plus maze e Y-maze, e sobre a atividade da Na+,K+-ATPase no córtex parietal e no hipocampo de ratos.Utilizando tratamentos que demonstraram induzir alterações nos hormônios da tireóide similares àquelas presentes nos pacientes com hiper e hipotireoidismo, nós buscamos compreender o efeito de um estado alterado por essas doenças sobre o aprendizado e a memória e sobre a atividade da Na+,K+-ATPase. Nossos resultados demonstraram que um estado hiper e hipotireóide altera o comportamento animal e também podem indicar um efeito dos hormônios da tireóide sobre o aprendizado e a memória. Decidimos investigar também o efeito de um modelo animal agudo de hipertireoidismo previamente estabelecido. Utilizando um tratamento agudo para induzir esse modelo animal, nós intencionamos verificar o efeito de níveis alterados de hormônios da tireóide sobre o aprendizado e a memória e sobre a atividade da Na+,K+- ATPase no córtex parietal e no hipocampo de ratos.Nossos resultados demonstraram que um tratamento agudo com L-T4 não alterou a evocação da memória da tarefa da esquiva inibitória, mas teve um efeito significativo no plus maze e no campo aberto em ratos. Sugerimos que animais tratados com L-T4 apresentam uma melhora na habituação a um ambiente novo, assim como uma melhor avaliação de um ambiente perigoso, respectivamente. A atividade daNa+,K+-ATPase está aumentada no córtex parietal (30%), mas não está alterada no hipocampo no grupo tratado com L-T4. Essas duas estruturas cerebrais estão envolvidas nos processos de memória e já foi previamente demonstrado que existe uma dissociação dupla entre elas para informação de localização espacial, memória perceptual e episódica. Dessa forma, propomos a hipótese que esse aumento da Na+,K+-ATPase no córtex parietal pode estar correlacionado a nossos resultados nos testes comportamentais, que sugerem um papel dos hormônios da tireóide assim como da Na+,K+-ATPase nos processos cognitivos. / Thyroid hormones, including triiodothyronine (T3) and tetraiodothyronine (T4), are recognized as key metabolic hormones of the body. Thyroid hormones are essential for normal maturation and function of the mammalian central nervous system (CNS) and its deficiency, during a critical period of development, profoundly affects cognitive function. Sodium potassium adenosine 5'-triphosphatase (Na+,K+-ATPase) is a crucial enzyme responsible for the active transport of sodium and potassium ions in the CNS necessary to maintain the ionic gradient for neuronal excitability. Studies suggest that Na+,K+-ATPase might play a role on memory formation. Moreover, thyroid hormones were proposed to stimulate Na+,K+-ATPase activity in the heart of some species. In this work we investigated the effect of a chronic administration of Lthyroxine (LT4) or propylthiouracil (PTU), an antithyroid drug, on some behavioral paradigms: inhibitory avoidance task, open field task, plus maze and Y-maze, and on the activity of Na+,K+-ATPase in the rat parietal cortex and hippocampus.By using treatments which have shown to induce alterations in thyroid hormones levels similar to those found in hyperthyroid and hypothyroid patients, we aimed to understand the effect of an altered hyperthyroid and hypothyroid state on learning and memory and on the activity of Na+,K+-ATPase. Our results showed that a hyper and hypothyroid state can alter animal behavior and they also might indicate an effect of thyroid hormones on learning and memory. We also decided to investigate the effect of an previously established acute hyperthyroid animal model. By using an acute treatment to induce this hyperthyroid animal model, we aimed at investigating the effect of an altered thyroid hormones levels on learning and memory and on the activity of Na+,K+-ATPase in the parietal cortex and hippocampus. Our results have shown that the acute treatment with L-T4 did not alter the retrieval of the inhibitory avoidance task, but had a significant effect on the elevated plus maze and on open-field performance in rats. We suggest that animals subjected to L-T4 administration improved the habituation to a novel environment as well as a better evaluation of a dangerous environment, respectively. Na+,K+-ATPase activity is increased in parietal cortex (30%), but it is not altered in hippocampus in L-T4 treated group. These both brain structures are involved in memory processing and it was previously demonstrated that there is a double dissociation between them for spatial location information, perceptual and episodic memory. We propose the hypothesis that this increase of Na+,K+-ATPase activity in parietal cortex may be correlated to our results in behavior tests, which suggest a role of thyroid hormones as well as of the Na+,K+-ATPase in the cognitive process.

Os hormônios da tireóide, incluindo a triiodotironina (T3) e a tetraiodotironina (T4), são reconhecidos como hormônios metabólicos fundamentais do corpo. Os hormônios da tireóide são essenciais para a maturação e função do sistema nervoso central (SNC) de mamíferos e sua deficiência, durante um período crítico do desenvolvimento, profundamente afeta a função cognitiva. A sódio potássio adenosina 5'-trifosfatase (Na+,K+-ATPase) é uma enzima crucial responsável pelo transporte ativo de íons sódio e potássio no SNC necessário para manter o gradiente iônico para a excitabilidade neuronal. Estudos sugerem que a Na+,K+-ATPase possa ter um papel na formação da memória. Além disso, os hormônios da tireóide parecem estimular a atividade da Na+,K+-ATPase no coração de algumas espécies. Neste trabalho investigamos o efeito da administração crônica de L-tiroxina (LT4) e propiltiouracil (PTU), uma droga antitireóide, sobre alguns paradigmas de comportamento: esquiva inibitória, campo aberto, plus maze e Y-maze, e sobre a atividade da Na+,K+-ATPase no córtex parietal e no hipocampo de ratos.Utilizando tratamentos que demonstraram induzir alterações nos hormônios da tireóide similares àquelas presentes nos pacientes com hiper e hipotireoidismo, nós buscamos compreender o efeito de um estado alterado por essas doenças sobre o aprendizado e a memória e sobre a atividade da Na+,K+-ATPase. Nossos resultados demonstraram que um estado hiper e hipotireóide altera o comportamento animal e também podem indicar um efeito dos hormônios da tireóide sobre o aprendizado e a memória. Decidimos investigar também o efeito de um modelo animal agudo de hipertireoidismo previamente estabelecido. Utilizando um tratamento agudo para induzir esse modelo animal, nós intencionamos verificar o efeito de níveis alterados de hormônios da tireóide sobre o aprendizado e a memória e sobre a atividade da Na+,K+- ATPase no córtex parietal e no hipocampo de ratos.Nossos resultados demonstraram que um tratamento agudo com L-T4 não alterou a evocação da memória da tarefa da esquiva inibitória, mas teve um efeito significativo no plus maze e no campo aberto em ratos. Sugerimos que animais tratados com L-T4 apresentam uma melhora na habituação a um ambiente novo, assim como uma melhor avaliação de um ambiente perigoso, respectivamente. A atividade daNa+,K+-ATPase está aumentada no córtex parietal (30%), mas não está alterada no hipocampo no grupo tratado com L-T4. Essas duas estruturas cerebrais estão envolvidas nos processos de memória e já foi previamente demonstrado que existe uma dissociação dupla entre elas para informação de localização espacial, memória perceptual e episódica. Dessa forma, propomos a hipótese que esse aumento da Na+,K+-ATPase no córtex parietal pode estar correlacionado a nossos resultados nos testes comportamentais, que sugerem um papel dos hormônios da tireóide assim como da Na+,K+-ATPase nos processos cognitivos. / Thyroid hormones, including triiodothyronine (T3) and tetraiodothyronine (T4), are recognized as key metabolic hormones of the body. Thyroid hormones are essential for normal maturation and function of the mammalian central nervous system (CNS) and its deficiency, during a critical period of development, profoundly affects cognitive function. Sodium potassium adenosine 5'-triphosphatase (Na+,K+-ATPase) is a crucial enzyme responsible for the active transport of sodium and potassium ions in the CNS necessary to maintain the ionic gradient for neuronal excitability. Studies suggest that Na+,K+-ATPase might play a role on memory formation. Moreover, thyroid hormones were proposed to stimulate Na+,K+-ATPase activity in the heart of some species. In this work we investigated the effect of a chronic administration of Lthyroxine (LT4) or propylthiouracil (PTU), an antithyroid drug, on some behavioral paradigms: inhibitory avoidance task, open field task, plus maze and Y-maze, and on the activity of Na+,K+-ATPase in the rat parietal cortex and hippocampus.By using treatments which have shown to induce alterations in thyroid hormones levels similar to those found in hyperthyroid and hypothyroid patients, we aimed to understand the effect of an altered hyperthyroid and hypothyroid state on learning and memory and on the activity of Na+,K+-ATPase. Our results showed that a hyper and hypothyroid state can alter animal behavior and they also might indicate an effect of thyroid hormones on learning and memory. We also decided to investigate the effect of an previously established acute hyperthyroid animal model. By using an acute treatment to induce this hyperthyroid animal model, we aimed at investigating the effect of an altered thyroid hormones levels on learning and memory and on the activity of Na+,K+-ATPase in the parietal cortex and hippocampus. Our results have shown that the acute treatment with L-T4 did not alter the retrieval of the inhibitory avoidance task, but had a significant effect on the elevated plus maze and on open-field performance in rats. We suggest that animals subjected to L-T4 administration improved the habituation to a novel environment as well as a better evaluation of a dangerous environment, respectively. Na+,K+-ATPase activity is increased in parietal cortex (30%), but it is not altered in hippocampus in L-T4 treated group. These both brain structures are involved in memory processing and it was previously demonstrated that there is a double dissociation between them for spatial location information, perceptual and episodic memory. We propose the hypothesis that this increase of Na+,K+-ATPase activity in parietal cortex may be correlated to our results in behavior tests, which suggest a role of thyroid hormones as well as of the Na+,K+-ATPase in the cognitive process.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2016 / Submitted by Camila Duarte (camiladias@bce.unb.br) on 2017-01-11T13:19:41Z No. of bitstreams: 1 2016_AndressaAbyFarajLinharesMaciel.pdf: 5427872 bytes, checksum: 6b21384554a80617808b4a89dbfb217a (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-01-16T21:04:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_AndressaAbyFarajLinharesMaciel.pdf: 5427872 bytes, checksum: 6b21384554a80617808b4a89dbfb217a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-16T21:04:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_AndressaAbyFarajLinharesMaciel.pdf: 5427872 bytes, checksum: 6b21384554a80617808b4a89dbfb217a (MD5) / Introdução: A globulina carreadora de tiroxina (TBG) é a principal proteína transportadora dos hormônios tireoidianos em humanos. Anormalidades hereditárias que comprometem a estrutura e função da proteína resultam em deficiência completa (TBG-CD) e parcial de TBG (TBG-PD). O gene que codifica a TBG é o SERPINA7 e está localizado no braço longo do cromossomo X (Xq22.2). Objetivos: Os objetivos desse estudo foram realizar análise molecular do gene SERPINA7 em uma família brasileira com TBG-PD, investigar o padrão de inativação da região do cromossomo X que compreende o gene, bem como realizar modelagem estrutural da proteína mutante e análise estrutural comparativa à família de proteínas serpinas, a fim de inferir efeitos funcionais da mutação identificada. Métodos: O DNA genômico foi extraído do caso índice, do seu pai, da sua irmã gêmea dizigótica e seus dois irmãos. Reação de polimerização em cadeia (PCR) foi utilizada para amplificação do gene SERPINA7 e os produtos foram submetidos a sequenciamento pelo método Sanger. O padrão de inativação do cromossomo X foi avaliado no caso índice por meio da análise do padrão de metilação do gene que codifica o receptor androgênico (AR gene), que está localizado próximo do gene SERPINA7 (Xq11.2). Análises estruturais na família das serpinas foram feitas usando PFSTATS, que também foi usado para mapear posições equivalentes em todos homólogos humanos. A modelagem molecular foi realizada usando protocolo descrito por Feyfant e colaboradores. Resultados: Uma nova mutação missense no gene SERPINA7 (p.R35W) foi encontrada em heterozigose no caso índice e em hemizigose nos seus irmãos do sexo masculino. Eles apresentaram baixos níveis séricos de TBG compatíveis com TBG-PD. Esta mutação consistiu na substituição de um nucleotídeo (C>T) na posição 163 do éxon 1, que resultou na troca de uma arginina por um triptofano no códon 35 (p.R35W). O caso índice expressou uma razão de inativação do cromossomo X de 20:80. Na mutação, o carbono alfa do resíduo 35 encontrata-se a cerca de 17Å de distância do átomo mais próximo do T4, e este resíduo reside numa hélice, com a sua cadeia lateral de frente para o solvente. A Arg35 está também envolvida com interações eletrostáticas com os principais oxigênios das cadeias da Met264 e Asp261, e também do oxigênio do grupo carboxamida na Asn32 e ainda com duas moléculas de água. Os padrões de conservação e de correlação envolvendo este resíduo, pode ser visto que os resíduos mais frequentes nestas posições são as lisinas (26,7%), argininas (18,4%) e glutaminas (10,8%). Triptofanos, como na proteína mutante, são extremamente raros (0,1%) e não há significantes (p<10-10) correlações de emparelhamentos envolvendo resíduos nesta posição. Conclusão: O presente estudo relatou uma nova variante do gene SERPINA7 associada à TBG-PD em três irmãos: uma mulher e dois homens. O padrão de inativação do cromossomo X observado no caso índice aponta para um desvio do padrão de inativação, o que corrobora a variabilidade genótipo-fenótipo em mulheres com mutações heterozigóticas no gene SERPINA7, uma condição rara. A natureza hidrofóbica do triptofano poderia resultar em um fragmento apolar que estaria significativamente exposto ao solvente na proteína mutante podendo resultar em agregação da proteína e/ou enovelamento incorreto, e consequente defeito no transporte sérico de T4. Adicionalmente, esses achados sugerem que a TBG e seus homólogos dentro da família das serpinas poderiam ser igualmente afetados por mutações nesta posição rompendo a rede de interações com seus vizinhos na estrutura nativa, com provável impacto funcional. __________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Thyroxine-binding globulin (TBG) is the major human thyroid hormone transport protein. Inherited TBG abnormalities that implicated the protein’s structure and function result in complete (TBG-CD) and partial (TBG-PD) and TBG deficiency. The SERPINA7 gene encodes TBG and it is located on the long arm of the X chromosome (Xq22.2). Objectives: The purpose of this study was to perform the molecular analysis of the SERPINA7 gene in a Brazilian family with TBG-PD, investigate the X-chromosome inactivation pattern region comprising the gene as well as perform structural modeling of the mutant protein and comparative structural analysis of the serpin family of proteins, in order to infer functional effects of these mutations. Methods: Genomic DNA was extracted from the female proband, her father, her dizygotic twin sister and her two brothers. The samples were subjected to polymerase chain reaction (PCR) for SERPINA7 gene amplification and the products were sequenced by the Sanger method. The proband’s sample was evaluated by methylation analysis using the human androgen receptor (AR) gene, which is located next to the TBG gene (Xq11.2). Structural analysis of the serpin family was analyzed using PFSTATS and was also used to map equivalent positions in all human homologs. The molecular modeling was using the protocol described by Feyfant et al. Results: A novel missense mutation in the SERPINA7 gene (p.R35W) was found in heterozygosity in the proband and in hemizygosity in her brothers. They presented low serum TBG levels compatible with TBG-PD. This mutation consisted in a single nucleotide substitution (C>T) at position 163 of exon 1 which resulted in the replacement of an arginine by a tryptophan at codon 35. The proband expressed an Xchromosome inactivation ratio of 20:80. In this mutation, the alpha carbon of residue 35 is about 17Å away from the closest atom from T4 and this residue lies in a helix, with its side chain facing the solvent. Arg35 is also involved in electrostatic interactions with the main chain oxygens of Met264 and Asp261, and also the oxygen on the carboxamide group in Asn32, besides interacting with two waters molecules. The conservation and correlation patterns involving this residue, it can be seen that the most frequent residues in these positions are lysines (26.7%), arginines (18.4%) and glutamines (10.8%). Tryptophans are extremely rare (0.1%), and there is no significant (p<10-10) pairwise correlations involving residues in this position. Conclusion: This study reported a new variant of the SERPINA7 gene associated with TBG-PD in three siblings: one woman and two men. The X-chromosome inactivation pattern verified in the proband corroborated that deviations in the inactivation pattern account for genotype-phenotype variability in women with heterozygous mutations in the SERPINA7 gene, a rare condition. The hydrophobic nature of tryptophan would result in an apolar patch that would be significantly exposed to the solvent can result in protein aggregation and/or misfolding, and the consequent defect in the serum T4 transport. Additionally, these findings suggest that the TBG and its homologs in the serpin family could be similarly affected by mutations in this position which would disrupt the interaction network to its neighbors in the native structure, with probable functional impact.

Os hormônios da tireóide, incluindo a triiodotironina (T3) e a tetraiodotironina (T4), são reconhecidos como hormônios metabólicos fundamentais do corpo. Os hormônios da tireóide são essenciais para a maturação e função do sistema nervoso central (SNC) de mamíferos e sua deficiência, durante um período crítico do desenvolvimento, profundamente afeta a função cognitiva. A sódio potássio adenosina 5'-trifosfatase (Na+,K+-ATPase) é uma enzima crucial responsável pelo transporte ativo de íons sódio e potássio no SNC necessário para manter o gradiente iônico para a excitabilidade neuronal. Estudos sugerem que a Na+,K+-ATPase possa ter um papel na formação da memória. Além disso, os hormônios da tireóide parecem estimular a atividade da Na+,K+-ATPase no coração de algumas espécies. Neste trabalho investigamos o efeito da administração crônica de L-tiroxina (LT4) e propiltiouracil (PTU), uma droga antitireóide, sobre alguns paradigmas de comportamento: esquiva inibitória, campo aberto, plus maze e Y-maze, e sobre a atividade da Na+,K+-ATPase no córtex parietal e no hipocampo de ratos.Utilizando tratamentos que demonstraram induzir alterações nos hormônios da tireóide similares àquelas presentes nos pacientes com hiper e hipotireoidismo, nós buscamos compreender o efeito de um estado alterado por essas doenças sobre o aprendizado e a memória e sobre a atividade da Na+,K+-ATPase. Nossos resultados demonstraram que um estado hiper e hipotireóide altera o comportamento animal e também podem indicar um efeito dos hormônios da tireóide sobre o aprendizado e a memória. Decidimos investigar também o efeito de um modelo animal agudo de hipertireoidismo previamente estabelecido. Utilizando um tratamento agudo para induzir esse modelo animal, nós intencionamos verificar o efeito de níveis alterados de hormônios da tireóide sobre o aprendizado e a memória e sobre a atividade da Na+,K+- ATPase no córtex parietal e no hipocampo de ratos.Nossos resultados demonstraram que um tratamento agudo com L-T4 não alterou a evocação da memória da tarefa da esquiva inibitória, mas teve um efeito significativo no plus maze e no campo aberto em ratos. Sugerimos que animais tratados com L-T4 apresentam uma melhora na habituação a um ambiente novo, assim como uma melhor avaliação de um ambiente perigoso, respectivamente. A atividade daNa+,K+-ATPase está aumentada no córtex parietal (30%), mas não está alterada no hipocampo no grupo tratado com L-T4. Essas duas estruturas cerebrais estão envolvidas nos processos de memória e já foi previamente demonstrado que existe uma dissociação dupla entre elas para informação de localização espacial, memória perceptual e episódica. Dessa forma, propomos a hipótese que esse aumento da Na+,K+-ATPase no córtex parietal pode estar correlacionado a nossos resultados nos testes comportamentais, que sugerem um papel dos hormônios da tireóide assim como da Na+,K+-ATPase nos processos cognitivos. / Thyroid hormones, including triiodothyronine (T3) and tetraiodothyronine (T4), are recognized as key metabolic hormones of the body. Thyroid hormones are essential for normal maturation and function of the mammalian central nervous system (CNS) and its deficiency, during a critical period of development, profoundly affects cognitive function. Sodium potassium adenosine 5'-triphosphatase (Na+,K+-ATPase) is a crucial enzyme responsible for the active transport of sodium and potassium ions in the CNS necessary to maintain the ionic gradient for neuronal excitability. Studies suggest that Na+,K+-ATPase might play a role on memory formation. Moreover, thyroid hormones were proposed to stimulate Na+,K+-ATPase activity in the heart of some species. In this work we investigated the effect of a chronic administration of Lthyroxine (LT4) or propylthiouracil (PTU), an antithyroid drug, on some behavioral paradigms: inhibitory avoidance task, open field task, plus maze and Y-maze, and on the activity of Na+,K+-ATPase in the rat parietal cortex and hippocampus.By using treatments which have shown to induce alterations in thyroid hormones levels similar to those found in hyperthyroid and hypothyroid patients, we aimed to understand the effect of an altered hyperthyroid and hypothyroid state on learning and memory and on the activity of Na+,K+-ATPase. Our results showed that a hyper and hypothyroid state can alter animal behavior and they also might indicate an effect of thyroid hormones on learning and memory. We also decided to investigate the effect of an previously established acute hyperthyroid animal model. By using an acute treatment to induce this hyperthyroid animal model, we aimed at investigating the effect of an altered thyroid hormones levels on learning and memory and on the activity of Na+,K+-ATPase in the parietal cortex and hippocampus. Our results have shown that the acute treatment with L-T4 did not alter the retrieval of the inhibitory avoidance task, but had a significant effect on the elevated plus maze and on open-field performance in rats. We suggest that animals subjected to L-T4 administration improved the habituation to a novel environment as well as a better evaluation of a dangerous environment, respectively. Na+,K+-ATPase activity is increased in parietal cortex (30%), but it is not altered in hippocampus in L-T4 treated group. These both brain structures are involved in memory processing and it was previously demonstrated that there is a double dissociation between them for spatial location information, perceptual and episodic memory. We propose the hypothesis that this increase of Na+,K+-ATPase activity in parietal cortex may be correlated to our results in behavior tests, which suggest a role of thyroid hormones as well as of the Na+,K+-ATPase in the cognitive process.

O hipertiroidismo em felinos começou a ser diagnosticado a partir de 1979 e atualmente é uma endocrinopatia de grande ocorrência em muitos países. Devido a este fato, foi realizada a determinação dos hormônios tiroidianos (T3 e T4) dos felinos domésticos atendidos no HOVET/USP no período de 2002-2007. Foi utilizada a técnica de radioimunoensaio para a determinação de T4 total, T4 livre e T3 total. A amostragem compôs-se de 234 felinos, dois quais 26 (11,1%) foram diagnosticados com hipertiroidismo, pelo aumento de T4 total. Destes animais, apenas dois (7,7%) apresentavam suspeita para a doença na ocasião da consulta. Dentre as principais manifestações clínicas pôde-se observar: anorexia/disorexia, êmese, perda de peso, poliúria e polidipsia. Os valores de T4 livre e T3 total não foram significativos para o diagnóstico da doença neste estudo. A doença renal crônica foi observada em 46,2% dos felinos que apresentavam hipertiroidismo. Deve-se ter maior atenção ao exame físico do paciente felino idoso em relação à palpação da tiróide. / Recognised with a great occurence nowadays in many countries, hyperthyroidism in cats was first diagnosed in 1979. Due to this fact, thyroid hormones (T3 and T4) were measured in domestic felines assisted on the Veterinary Teaching Hospital of the University of São Paulo - Brazil, during 2002 through 2007. Total T4, free T4 and total T3 values were obtained by a radioimmune assay. Samples of 234 felines were analysed, and 26 (11,1%) were diagnosed with hiperthyroidism, having an increased total T4. Hypethyroidism was suspected in only two (7,7%) animals of this group. Anorexia/disorexia, vomiting, weight loss, polyuria and polydipsia were the main clinical signs observed. In this study, free T4 and total T3 values were not significant in diagnosing the disease. Chronic renal failure was observed in 46,2% of the felines with hyperthyroidism. In conclusion, a low suspicion of hyperthyroidism by the clinitians was noticed and thyroid palpation during the physical exam of the elder feline may be deficient and omissive.

Introdução: Sobreviventes ao infarto agudo do miocárdio enfrentam declínio progressivo na qualidade de vida, devido a alterações patológicas sistêmicas que levam à insuficiência cardíaca, intolerância ao exercício e limitação da realização de tarefas diárias. O treinamento físico é um método coadjuvante para melhorar a qualidade de vida destes pacientes, porém nem sempre pode ser utilizado com segurança, tornando necessário o desenvolvimento de outras alternativas que possam ser aplicadas nestes casos. O tratamento com T3 e/ouT4 foi recentemente demonstrado como uma alternativa viável para melhorar a função cardiovascular após o infarto. Contudo, ainda é necessário estabelecer uma dosagem e tempo de tratamento adequados, bem como verificar os seus efeitos em outros órgãos como o pulmão e a musculatura esquelética, além de validar este tratamento, o comparando com uma alternativa já utilizada. Objetivo: O presente estudo propôs comparar os efeitos benéficos da baixa dose dos hormônios tireoidianos e o treinamento físico sobre parâmetros de função cardíaca, vasculares, pulmonares e sobre a musculatura esquelética de ratos Wistar após o infarto do miocárdio induzido experimentalmente. Materiais e métodos: Para isso, utilizamos o modelo experimental de indução cirúrgica de infarto agudo do miocárdio em ratos Wistar machos. Os ratos foram divididos em 4 grupos (n=8/grupo): um grupo SHAM, submetido à simulação cirúrgica; e três grupos infarto, submetidos à cirurgia de indução de infarto. Dentre os grupos infarto, o primeiro, assim como o SHAM, não recebeu intervenção; o segundo foi submetido ao treinamento físico em esteira; e o terceiro recebeu hormônios T3 e T4 por gavagem. As duas intervenções foram iniciadas uma semana após o infarto, e ambas foram realizadas 5 vezes por semana (de segunda a sexta), durante 9 semanas. O treinamento físico foi realizado em esteira adaptada para ratos, e o protocolo consistiu em aumento gradual do tempo e intensidade de treinamento até atingir 60 minutos e 40% da velocidade do teste de esforço máximo (realizado na primeira e quarta semana após a cirurgia, e novamente ao final do protocolo). O tratamento com hormônios T3 e T4 foi administrado diariamente por gavagem (T3 a 1,2μg/100g/dia e T4 a 4,8μg/100g/dia). O peso corporal dos animais foi monitorado semanalmente. A avaliação ecocardiográfica, por outro lado, foi monitorada 48 horas e 10 semanas depois da cirurgia. Após a última ecocardiografia, foram analizados os seguintes parâmetros: 1. No ventrículo esquerdo: parâmetros de função e 12 contratilidade a partir da pressão intraventricular, morfometria, estresse oxidativo, expressão de proteínas de manejo do cálcio e marcadores de insuficiência cardíaca e análise histológica de fibrose; 2. No ventrículo direito: morfometria e estresse oxidativo; 3. Na artéria femoral: modulação autonômica central e vascular; 4. No pulmão: morfometria, estresse oxidativo, conteúdo de glicogênio e análise histológica para presença de macrófagos e infiltrado inflamatório; 5. No gastrocnêmio: morfometria, estresse oxidativo, conteúdo de glicogênio e análise histológica de hipertrofia. Resultados: Ambos treinamento físico e tratamento com hormônios T3 e T4 melhoraram a função sistólica do ventrículo esquerdo após o infarto. No entanto, o tratamento com hormônios da tireoide também reduziu a área de infarto e aumentou a fração de ejeção do ventrículo esquerdo, o que não ocorreu com o treinamento físico. Os hormônios T3 e T4 também induziram hipertrofia cardíaca mais intensa, aumento da relação força-frequência de estimulação e melhora das proteínas do manejo do cálcio no ventrículo esquerdo quando comparados ao treinamento físico. O treinamento físico foi mais eficaz na redução de fibrose do ventrículo esquerdo, embora o tratamento hormonal também tenha mostrado bom resultado. Nenhuma das intervenções causou aumento na frequência cardíaca ou alteração nos níveis plasmáticos de T3, T4 ou TSH, e ambas melhoraram marcadores de insuficiência cardíaca. Nenhuma das intervenções teve efeitos no ventrículo direito. Diferente do treinamento físico, o tratamento com hormônios T3 e T4 foi capaz de melhorar a modulação autonômica sobre a variabilidade da pressão arterial sistólica. Ambas as intervenções aumentaram a geração de peróxido pulmonar, concomitantemente à restauração no número de macrófagos e aumento do infiltrado inflamatório. Não houve alteração nos níveis de glicogênio, tanto no pulmão quanto no gastrocnêmio. Ambas as intervenções induziram hipertrofia no músculo gastrocnêmio, embora mais intensa com o tratamento hormonal. No entanto, os hormônios T3 e T4 promoveram aumento no nível de sulfidrilas no gastrocnêmio, o que não ocorreu com o treinamento físico. Conclusão: Ambas as intervenções promoveram benefícios similares à função cardíaca e pulmonar, e melhoraram a capacidade física dos animais infartados. O tratamento com hormônios T3 e T4 proporcionou benefícios adicionais de relaxamento vascular e hipertrofia mais intensa acompanhada de proteção antioxidante no músculo gastrocnêmio quando comparado ao treinamento físico. O tratamento combinado de baixa dose de T3 e T4 não causou efeitos adversos sobre preditores de insuficiência 13 cardíaca, como a alteração dos níveis de T3, T4 e TSH, e o aumento da frequência cardíaca. No entanto, o tratamento com T3 e T4 aumentou a lipoperoxidação e reduziu as defesas antioxidantes no ventrículo esquerdo, o que pode indicar que a dosagem, ou o tempo de tratamento utilizado neste estudo, ainda não é a escolha ideal. Embora sejam necessários mais estudos, o tratamento com baixa dose de hormônios tireoidianos pode vir a ser uma alternativa nos casos em que não há um método eficaz para melhorar a tolerância ao exercício, principalmente em casos de insuficiência cardíaca após o infarto.

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Desta forma buscaremos investigar possíveis alterações funcionais na retina de ratos wistar jovens após a tireoidectomia bilateral, utilizando respostas eletrofisiológicas não invasivas. Para tanto, dividimos os ratos em três grupos (controle, sham e tireoidectomizado) cada um contendo ≥ 8 animais. As cirurgias foram realizadas 30 dias pós-natal. Os eletrorretinogramas de campo total foram realizados 10, 15, 20, 25 e 30 dias após a cirurgia, utilizando protocolos para avaliar a resposta escotópica máxima, resposta fotópica (com e sem o uso de filtros de luz) e a resposta ao flicker (12, 15, 18 e 30 Hz). Os parâmetros analisados foram o tempo implícito e a amplitude das ondas a e b. Além disso, realizamos o monitoramento dos parâmetros clínicos dos animais, visando identificar características que indiquem um quadro de hipotireoidismo, bem como a dosagem dos hormônios tireoidianos. Os resultados obtidos demonstraram que em todos dos protocolos de estimulação utilizados no ERG houve diminuição nas amplitudes das ondas a e b nos animais tireoidectomizados em todos os dias avaliados após a cirurgia, quando comparados com animais do grupo controle e sham. Os resultados da avaliação do tempo implícito para ambas as ondas não demonstraram diferença estatística quando comparamos os diversos grupos ao controle. Também podemos constatar uma redução do ganho de peso e tamanho nos animais que sofreram tireoidectomia, associados à redução dos níveis de hormônio tireoidiano (T3). Concluímos dessa forma que os hormônios tireoidianos estão diretamente ligados a alterações funcionais na retina dos animais que sofreram tireoidectomia, bem com, na redução da aquisição de peso e aumento de tamanho. / The thyroid synthesizes thyroxine (T4) and 3,5,3 '-triiodothyronine (T3), both hormones have a crucial role in the development of the central nervous system, including the retina and visual system. The decrease in blood levels of T3 and T4 causes a syndrome called hypothyroidism, which may lead to visual impairment. The visual deficits generated by hypothyroidism are directly related to the development period of the individual. It has been demonstrated in murine models that congenital hypothyroidism decreases the retinal thickness, the number of cells and interferes with the differentiation of M cones. Here, we investigated the possible functional changes in juvenile rat’s retina after bilateral thyroidectomy using noninvasive electrophysiological responses. Therefore, we divided the rats into three groups (control, sham and thyreoidectomized) each containing n≥8 animals. The surgeries were performed 30 days post-natal and the full-field electroretinogram (ERG) were performed 10, 15, 20, 25 and 30 days after surgery, using standard protocols for assessing the scotopic response maximum, photopic response (with and without the use of light filters) and response to flicker (12, 15, 18 and 30 Hz). The parameters analyzed were implicit time and amplitude of a- and b-waves of ERG. We also perform monitoring of clinical parameters of animals in order to identify characteristics that indicate a hypothyroidism, as well as the dosage of thyroid hormones. The results showed that there was a decrease in the a- and b-waves amplitudes in thyroidectomy animals (10, 15, 20, 25 and 30 days after surgery), compared to control and sham animals at all the stimulation protocols used in ERG. The results of the evaluation of the implicit time for both waves showed none statistical difference when comparing to control and sham groups. Also we observed a reduction in size and weight of thyroidectomy animals, associated with reduced levels of thyroid hormone (T3). Thus we concluded that the thyroid hormones are directly related to functional changes in the retina of thyroidectomy animals, together with the reduction of weight and size.