Orientador: Marcelo Antonio Amaro Pinheiro / Banca: Marcus Emanuel Barroncas Fernandes / Banca: Roberto Munehisa Shimizu / Banca: Camilo Dias Seabra Pereira / Banca: Milton Cezar Ribeiro / Resumo: O presente estudo avaliou o grau de contaminação da água, sedimento, vegetação arbórea (Rhizophora mangle) e do caranguejo-uçá (Ucides cordatus) por metais, em seis manguezais paulistas, bem como o impacto geno e citotóxico sobre as populações deste crustáceo, com base na frequência de hemócitos (hialinócitos) micronucleados e tempo de retenção do vermelho neutro pelos lisossomos. Os manguezais são áreas de preservação permanente (APPs) e berçários de diversas espécies animais, incluindo o caranguejo-uçá, que é amplamente comercializado e consumido pelo homem em regiões litorâneas. Seis áreas de manguezal do Estado de São Paulo (Cananéia, Iguape, Juréia, Cubatão, São Vicente e Bertioga) foram avaliadas, sendo cada uma representada por três subáreas de amostragem. Amostras de sedimento, folhas da vegetação arbórea (R. mangle), estruturas corpóreas do caranguejo-uçá (U. cordatus) e água da galeria deste crustáceo foram coletadas para a quantificação de seis metais totais (Cd, Cu, Pb, Cr, Mn e Hg), por espectrometria de absorção atômica. As dosagens de metais obtidas foram submetidas à ANOVA, com as médias comparadas por Tukey (5%). Os resultados obtidos quanto ao comportamento dos seis metais totais se coadunam com a literatura especializada, já que o Cd, Pb, Cr e Hg se acumularam mais no sedimento do que nos demais compartimentos abiótico-bióticos analisados, enquanto o Cu e Mn apresentaram maiores concentrações nas estruturas corpóreas de U. cordatus e nas folhas de R. mangle, respectivamente. Considerando a disponibilidade de metais associados à água, sedimento e folhas de R. mangle, os resultados evidenciam que cada área de manguezal (localidade) possui um ou mais metais em maiores proporções relativas, a saber: Cubatão e Bertioga: Pb e Cd; São Vicente: Hg; Juréia: Cr; Iguape: Cu, Mn e Hg; e Cananéia: Mn (em menor escala). Em relação ao acúmulo de metais nas amostras de... / Abstract: This study evaluated the metals contamination level of water, sediment, woody vegetation (Rhizophora mangle) and the "uçá"-crab (Ucides cordatus) in six mangrove areas located in São Paulo State, as well as the geno cytotoxic impact on the populations of this crustacean, based on micronucleated hemocytes (hyalinocytes) frequency and the retention time of neutral red in their lysosomes. Mangroves are permanent preservation areas (PPAs) and nurseries to several animal species, including the "uçá"-crab, which is widely traded and consumed by humans at coastlands. Six mangrove areas located in São Paulo State (Cananéia, Iguape Juréia, Cubatão, São Vicente and Bertioga) were evaluated, each of them were represented by three replicas. Samples from sediment, leaves of woody vegetation (R. mangle), body structures from "uçá"-crab (U. cordatus) and water from burrows of this crustacean were collected to dosage of six total metals (Cd, Cu, Pb, Cr, Mn and Hg) by atomic absorption spectrophotometer. The metals concentrations were compared by ANOVA and their means by Tukey (at 5%). The results regarding the tendencies of accumulation of six metals are in accordance with the literature, since the Cd, Pb, Cr and Hg have accumulated more in sediment than in others biotic-abiotic compartments analyzed, whereas Cu and Mn have showed higher concentrations in U. cordatus body structures and R. mangle leaves, respectively. At São Paulo mangroves, taking into account the availability of metals associated with their presence in water, sediment and leaves of R. mangle, the results suggest that each area (locality) has one or more metals in larger relative proportions, namely: Cubatão and Bertioga: Pb and Cd; São Vicente: Hg; Juréia: Cr; Iguape: Cu, Mn and Hg; and Cananéia: Mn (smaller scale). About the "uçá"-crab metals accumulation by mangrove area, it were found an association of Cu and Mn in animals from São Vicente and... / Doutor

Atualmente, diversas formulações de herbicidas a base de glifosato estão disponíveis no mercado. No entanto, diferentes surfactantes são também adicionados às formulações a fim de aumentar a eficácia do produto, o que pode contribuir significativamente para o aumento da toxicidade do herbicida aos organismos não alvos. Este estudo avaliou a genotoxicidade e o estresse oxidativo em planárias aquáticas (Dugesia schubarti) expostas às formulações de glifosato Roundup Original, Roundup Transorb e Roundup Ready. As planárias foram expostas à soluções de 0.5 mg/L de equivalente ácido de glifosato das três formulações durante 4, 8 e 16h. A genotoxicidade foi avaliada através do ensaio cometa e o estresse oxidativo foi medido através da atividade das enzimas superóxido dismutase (Sod) e catalase (Cat) e pelas substâncias reativas com o ácido tiobarbitúrico (TBARS). Todas as formulações foram capazes de induzir danos ao DNA e estresse oxidativo. A atividade de Sod aumentou entre 4 e 16h, enquanto os níveis de TBARS diminuíram entre 4 e 16h de tratamento. A atividade de Cat permaneceu diminuída em todos os tempos de exposição para as três formulações testadas. Esses resultados demonstram que formulações de herbicida contendo glifosato são capazes de causar dano ao DNA e alterar o balanço oxidativo em planárias indicando que a toxicidade deste herbicida não está restrita às plantas. / Currently, several glyphosate-based herbicide formulations are available in the market. However, different surfactants are also added to the formulation in order to increase the effectiveness of the product, what it can contribute significantly to the toxic effect exerted by the herbicide to the non target organisms. This study evaluated the genotoxicity and the oxidative stress in freshwater planarians exposed to the glyphosate formulations Roundup Original, Roundup Transorb and Roundup Ready. The planarians were submitted to 0.5 mg/L of glyphosate formulations during 4, 8, and 16h. The genotoxicity was evaluated through comet assay, and the oxidative stress was measured through the superoxide dismutase (Sod) and catalase (Cat) activity and by thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). All three formulations were able to induce genotoxicity and to disturb the antioxidants activity in different ways. While Sod increased between 4 and 16h, TBARS decreased between 4 and 16h, and Cat stayed depressed during all time-points tested. These results demonstrate that herbicide formulations which contend glyphosate can induce damage to the DNA and to modify the oxidative balance in planarians, indicating that the toxicity of this herbicide is not restricted to the plants.

Orientador: Jose Eduardo Tanus dos Santos / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-14T10:45:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dias_VaniaBraghinideRezende.pdf: 2420134 bytes, checksum: db28114d3602e3e14b5763e165a73cfc (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Mulheres grávidas constituem um grupo de indivíduos particularmente mais susceptíveis aos efeitos tóxicos associados ao chumbo (Pb)[1]. O chumbo é um metal pesado que se acumula nos tecidos mineralizados. Possui um comportamento similar ao cálcio, o que explica sua toxicidade. Durante a gravidez, o remodelamento ósseo promove a migração do chumbo para o plasma e como resultado, o metal é transferido para o feto, mesmo se a mãe foi exposta há vários anos [2]. Durante a exposição materna, cerca de 99% do chumbo absorvido, aqui referenciado como Pb-Sangue Total, permanece associado a enzima acido d-aminolevulinico desidratase (ALAD) no eritrócito. O restante (cerca de 1%), aqui referenciado como Pb-Plasma (e/ou Soro), permanece livre e eventualmente se deposita nos tecidos mineralizados (ossos e dentes)[2]. O Pb-Sangue Total e Pb-Plasma (ou Soro) são naturalmente correlacionados, mas essa correlação ainda não está bem compreendida, sendo essencial a medida dos dois parâmetros para esclarecer esses processos. Além disso, os fatores genéticos são de crucial importância, com alguns genes como o da ALAD e o do receptor da vitamina D (VDR) tendo sido associados a diferentes concentrações sanguíneas e plasmáticas de chumbo em indivíduos expostos[3]. A dinâmica do chumbo durante a gravidez também tem um papel importante nesse processo e deve ser considerada. Até o momento, nenhum trabalho havia estudado os fatores genéticos acima citados, numa população especialmente exposta e susceptível aos efeitos deletérios do chumbo. Mesmo quando a exposição materna cessa, o chumbo permanece alojado nos ossos por vários anos e será mobilizado através do remodelamento ósseo, contaminando o feto. Haveria um grupo de gestantes, segundo genótipos, predisposto a maiores ou menores aumentos do metal no plasma e fração plasmática? Teriam maior re-exposição ao chumbo durante períodos de acentuado remodelamento ósseo? Para responder a essas questões, esse estudo concentrou nas medidas do metal no Sangue e Plasma e/ou Soro (sendo o Soro equivalente ao plasma) e na avaliação da susceptibilidade genética das grávidas através do estudo dos polimorfismos dos genes ALAD e VDR, além da análise de polimorfismos agrupados em haplótipos. Nós não encontramos diferenças significativas para o grupo de genótipos da ALAD, nem mesmo para os genótipos do VDR. Porém, as principais descobertas foram que o grupo de haplótipos H8 do VDR (f, a, b) estão associados às mais baixas concentrações de Pb no Soro e na razão Pb-Soro/Pb-Sangue Total. Esses resultados sugerem que esse grupo de gestantes, mesmo expostas às mesmas concentrações de Pb, acumula e/ou reabsorvem menos Pb que os grupos com outros haplótipos. Além disso, é importante ressaltar que analisando apenas a concentração de Pb no sangue total, não seria possível chegar a essa conclusão. / Abstract: Pregnant women constitute a group of subjects particularly susceptible to toxic effects due to exposure to lead (Pb). Lead is a heavy metal which accumulates in bone tissues and has a behavior that is similar to calcium, thus explaining its toxicity. In particular, the increase in bone resorption processes that take place during pregnancy cause lead migration into the maternal plasma. As a result, lead transference to the fetus may take place even years after the mother's last exposure. During maternal exposure, most (99%) of the absorbed lead (here referred to as Pb-Blood) remains associated to d - aminolevulinic acid dehydratase within erytrocytes. The remaining (2% to 10%, here referred to as Pb-Plasma) lead remains free and is eventually deposited - and accumulated - in the bone tissues (teeth and bones). The Pb-Blood and Pb-Plasma are naturally correlated, but the correlation is not well understood, making it essential to measure both quantities in studies aimed at clarifying these processes. Also of crucial importance are genetic factors, with some genes such as ALAD and VDR been associated with Pb-Blood and Pb-Plasma concentrations. The dynamics of lead migration during pregnancy also plays a major role in the process and therefore must also be considered. Even after the mother's exposure has ceased, lead remains accumulated in the teeth and bones for many years and is mobilized by processes of bone resorption such as those taking place during pregnancy. Is there a group of pregnant women, according to genotypes, that is more prone to higher or lower Pb concentations in plasma? Is that group more exposed to Pb due to greater Pb absorption or reabsorption through bone remodeling? To address these questions, this study focused on the measurement of Pb-Blood and Pb-Serum (the same of plasma) and on genetic susceptibility of pregnant women. We found no significant differences among different ALAD or VDR genotype groups. However, the main findings reported here are that haplotype H8 of VDR (f, a, b) is associated with lower Pb-Serum concentration and lower Pb-Serum/Pb-Blood ratios. Therefore, pregnant women with this haplotype have lower Pb-serum, even when exposed to the same Pb-Blood concentrations. Interestingly, we would not have make this conclusion by assessing only Pb-Blood concentrations. / Universidade Estadual de Campi / Farmacologia / Doutor em Farmacologia

A Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS) é doença causada pelo vírus da imunodeficiência humana. Apesar dos benefícios proporcionados pela terapia de supressão viral, algumas doenças como lipodistrofia, doenças cardiovasculares e infertilidade aumentaram a sua prevalência. No paciente com AIDS, considera-se a carga viral e o uso de terapia antirretroviral como possíveis agentes de genotoxicidade. Apesar do espermograma não poder detectar a causa precisa da infertilidade, o mesmo ainda é o exame mais realizado para averiguar a qualidade seminal. Por outro lado, a integridade do DNA do espermatozóide tem sido proposta como um parâmetro adicional de qualidade do sêmen. O ensaio cometa alcalino detecta a genotoxicidade de células germinativas humanas e pode ser usado para demonstrar a capacidade de uma substância interagir com o material genético das células gonadais. O presente estudo incluiu 50 pacientes com AIDS, atendidos no Ambulatório de Infectologia do Município de Caxias do Sul e no Ambulatório da Universidade de Caxias do Sul, sendo analisados dois grupos: usuário de terapia antirretroviral e naive. Realizou-se espermograma e o ensaio cometa alcalino, comparando com o número de linfócitos T CD4+, a carga viral, a idade, etc. Os dados demonstraram que o uso de antirretrovirais reduziu a genotoxicidade espermática, mas não se encontrou correlação com o espermograma. O presente trabalho demonstra que o ensaio cometa alcalino é um método eficiente para mensurar a genotoxicidade espermática dos pacientes portadores do vírus da imunodeficiência adquirida. / The Acquired Immune Deficiency Syndrome (AIDS) is a disease caused by the human immunodeficiency virus. Despite all the benefits provided by the viral suppression therapy, some diseases such as lipodystrophy, heart diseases and infertility increased their prevalence. In patients with AIDS, viral load and anti-retroviral therapy are possible agents for genotoxicity. The World Health Organization guidelines are reference for semen analysis and sperm DNA integrity has been proposed as an additionalparameter for semen quality and a potential predictor of fertility. The alkaline comet assay has the potential to detect genotoxic human germ cells and can be used to demonstrate the ability of a substance or metabolite to interact directly with the genetic material of gonadal cells. The study has included 50 patients with AIDS treated at the Outpatient Center for Infectious Diseases and at the University of Caxias do Sul Clinical Center, evaluated as two groups: one treated with anti-retroviral therapy and the other was a naive group. Semen and sperm genotoxicity were analysed by alkaline comet assay, comparing CD4 cell count, viral load, age and other factors of potential genotoxicity between the two groups. Data showed that the use of any anti-retroviral class has reduced sperm genotoxicity. This study shows that the alkaline comet assay is a eficcientmethod to measure sperm genotoxicity in patients infected with the human immunodeficiency virus.

Orientador: Daisy Maria Fávero Salvadori / Resumo: As consequências da poluição ambiental não se limitam a danos ao ambiente, mas também atingem diretamente a saúde humana. Recentemente, a Organização Mundial de Saúde divulgou que um terço da população mundial não tem acesso a água potável e, mesmo quando existe, há o perigo desta conter poluentes nocivos à saúde, e que não foram totalmente eliminados após as etapas de tratamento. Nesse contexto, os possíveis efeitos toxicológicos dos resíduos dos compostos corantes descartados pela indústria têxtil em rios que abastecem cidades vêm sendo investigados, na tentativa de eliminar, ou mesmo reduzir, os riscos para as populações expostas. Assim, este estudo foi delineado com o objetivo de avaliar o potencial carcinogênico de amostras de água sob a influência de atividades têxteis (água do Ribeirão Quilombo - RQ - e do efluente tratado da Estação de Tratamento de Esgoto - ETE - de Americana, SP) em cólon de ratos e o potencial toxicogenômico dos corantes sintéticos Disperse Red 1 (DR1) e Disperse Blue 291 (DB291) em células de medula óssea, sangue periférico, fígado e rins de camundongos. Foi também investigado o potencial tóxico-reprodutivo do DR1 em células germinativas de camundongos. Os resultados mostraram que a exposição crônica às amostras de água do RQ e do efluente tratado da ETE não induziram lesões pré-neoplásicas no cólon de ratos, mas foram detectados sinais de hepatotoxicidade. Em relação aos corantes DR1 e DB291 foi observado aumento na frequência de micronúcleos em ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: / Doutor

Título original: Avaliação do potencial antigenotóxico e antimutagênico de Lycium barbarum (goji berry), nutracêutico usado como citoprotetor e antioxidante / Orientador: Maria Aparecida Marin-Morales / Coorientadora: Maria Tereza Pamplona da Silva / Banca: Daniela Morais Leme / Banca: Edson Luis Maistro / Resumo: O L. barbarum, popularmente conhecido goji berry, tem despertado o interesse da comunidade científica ocidental, devido a sua riqueza nutritiva e a ação antioxidante que promovem efeitos benéficos para a saúde humana. Entretanto, há poucos relatos na literatura sobre sua possível ação tóxica ou comprovação do seu potencial protetor. Sendo assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos citotóxicos (pelo MMT), genotóxicos e antigenotóxicos (pelo ensaio do cometa), mutagênicos, e antimutagênicos (pelo teste do micronúcleo com bloqueio de citocinese - MN), de estresse oxidativo (pela quantificação dos níveis de GSH e TBARS e pela atividade das enzimas SOD e GST), de potencial antioxidante, do teor de polifenóis totais e da fitoquímica qualitativa de 3 diferentes concentrações recomendadas para o uso diário do extrato de L. barbarum (0,2; 0,4 e 0,6 g/L), por meio de ensaios realizados com sistemas-teste in vitro e in vivo. Neste estudo foram utilizados o organismo teste Allium cepa e culturas de duas linhagens celulares: células de hepatocarcinoma humano (HepG2) e adenocarcinoma de mama humano (MCF-7). Para A. cepa, foram aplicados os testes de aberrações cromossômicas e de micronúcleos em células meristemáticas e dos micronúcleos em células F1. As análises de antigenotoxicidade e antimutagenicidade realizada com esse organismo seguiram protocolos convencionais de pré-tratamento, pós-tratamento e tratamento simultâneo simples. Os resultados destes testes mostrara... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The L. barbarum, popularly known as goji berry, has aroused the interest of the Western scientific community because of its nutritional richness and antioxidant action that promote beneficial effects on human health. However, there are few reports in the literature about its possible toxic action or proof of its protective potential. The present work aimed to evaluate the cytotoxic (by MMT test), genotoxic and antigenotoxic (by comet assay), mutagenic and antimutagenic effects (by micronucleus test with cytokinesis-block - MN), oxidative stress (quantification of GSH and TBARS levels and the activity of SOD and GST enzymes), antioxidant potential, total polyphenol content and qualitative phytochemical of 3 different concentrations recommended for daily use of L. barbarum extract (0.2; 0.4 and 0.6 g / L) by assays performed with in vitro and in vivo test systems. In this study, the test organism Allium cepa and cultures of two cell lines were used: human hepatocarcinoma cells (HepG2) and human breast adenocarcinoma (MCF-7). For A. cepa, the chromosomal aberrations and micronucleus tests wereapplied in meristematic cells and the micronuclei in F1 cells. The antigenotoxicity and antimutagenicity analyzes performed with this organism followed conventional protocols for pretreatment, post-treatment and simple simultaneous treatment. The results of these tests showed that L. barbarum did not present genotoxic or mutagenic potential for A.cepa, but presented positive responses to an... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Classius de Oliveira / Resumo: Peixes e anfíbios estão vulneráveis a diversos poluentes. O benzo[a]pireno (BaP) é um contaminante com propriedades tóxicas. Metabolizado pela enzima P450 (CYP1A1), de fase I EROD (Etoxiresorufina-O-deetilase), produz subprodutos tóxicos. Conhecida como um inibidor da CYP1A1, α-naftoflavona (aNF) impede o metabolismo do BaP e a geração de metabólitos tóxicos. A aNF é um composto exógeno e não se tem conhecimento do efeito dela em órgãos e tecidos. O fígado é a maior fonte de enzimas catalizadoras de reações de biotransformação. A suscetibilidade do órgão a danos por agentes químicos é uma conseqüência de seu papel no metabolismo. Porém, animais desenvolveram mecanismos para detectar e responder a esses produtos químicos. Melanomacrófagos (MMs) hepáticos são células que contém melanina e que estão envolvidos nesse processo, devido a sua função de detoxificação. Dessa forma, nossos objetivos foram avaliar os efeitos do BaP e/ou aNF nos MMs e efeitos genotóxicos dos compostos. Os animais foram expostos a 2mg/kg de BaP e/ou 20mg/kg de aNF por 48 horas e 7 dias. Após os experimentos o fígado passou por procedimentos histológicos para quantificação da área de melanina dos MMs e fagocitose na microscopia de luz; microscopia de fluorescência para análise do citoesqueleto dos MMs; espectrofotometria para quantificar a atividade EROD e síntese de melanina dos MMs; e análise genotóxica dos eritrócitos. Em peixes, após 7d houve diminuição da área de melanina, devido a uma inibição do BaP... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Fish and amphibians are vulnerable to various pollutants. Benzo[a]pyrene (BaP) is a contaminant with toxic properties. Metabolized by the enzyme P450 (CYP1A1) produces toxic byproducts. Known as a CYP1A1 inhibitor, α-naphtoflavone (aNF) prevents BaP metabolism and the generation of toxic metabolites. aNF is an exogenous compound and is not known for its effect on organs and tissues. The liver is the major source of catalyzing enzymes for biotransformation reactions. The susceptibility of the organ to damage by chemical agents is a consequence of its role in metabolism. However, animals have developed mechanisms to detect and respond to these chemicals. Melanomacrophages (MMs) are involved in this process due to their detoxification function. Thus, our objectives were to evaluate the effects of BaP and/or aNF on MMs and genotoxic effects of compounds. The animals were exposed to 2mg/kg BaP and/or 20mg/kg aNF for 48 hours and 7 days. After the experiments, the procedures for light microscopy, fluorescence, spectrophotometry and genotoxic analysis were followed. In fish, after 7d there was a decrease in melanin area, due to a inhibition of BaP in the melanogenic pathway; melanosome aggregation by interference in actin filaments; and increased frequency of micronucleus by the genotoxic potential of the compound. In anurans, at 48h, there was an increase in melanin production in BaP treatments, due to the antioxidant role of melanin; decreased phagocytosis by interfering with this... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Luciane Dias de Oliveira / Banca: Jônatas Rafael de Oliveira / Banca: Luana Marotta Reis de Vasconcellos / Resumo: Stryphnodendron barbatiman (Vell.) Mart (barbatimão) tem sido utilizado popularmente como anti-inflamatório e antimicrobiano. Este estudo se propôs a realizar a análise fitoquímica do extrato de S. barbatiman (Vell.) Mart. (barbatimão) e verificar in vitro algumas de suas atividades biológicas, como: antimicrobiana, sobre culturas planctônicas e biofilmes de Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas endodontalis, Porphyromonas gingivalis, e Parvimonas micra; citotoxicidade e genotoxicidade em macrófagos murinos (RAW 264.7), fibroblastos murinos (L929) e queratinócitos humanos (HACAT); e ação anti-inflamatória sobre RAW 264.7 estimuladas por lipopolissacarídeo (LPS) de Escherichia coli. A atividade antimicrobiana sobre culturas planctônicas foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo. Após, as concentrações efetivas foram avaliadas sobre biofilmes monomicrobianos. A análise de citotoxicidade foi verificada pelo teste de redução do brometo de 3(4,5-dimetiltiazol-2-yl)2,5-difeniltetrazólio (MTT) e a de genotoxicidade pelo teste de micronúcleos. A atividade anti-inflamatória foi analisada quantificando os níveis de citocinas pró-inflamatórias (TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-17) e anti-inflamatória (IL-10), por enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Os dados foram analisados por ANOVA e Teste de Tukey, ou Kruskal-Wallis e teste de Dunns, com nível de significância de 5% (P≤0,05). O extrato foi eficaz sobre os biofilmes, redução entre 54 e 100%. O extrato não foi citotóxico para R... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Anti-inflammatory and antimicrobial are popular uses of Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (barbatimão). This study proposed to perform the phytochemical analysis of S. barbatiman (Vell.) Mart. (barbatimão) extract and to verify in vitro some of its biological activities as antimicrobial on planktonic cultures and biofilms of Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas endodontalis, Porphyromonas gingivalis, and Parvimonas micra; cytotoxicity and genotoxicity on human keratinocytes (HACAT), murine macrophages (RAW 264.7) and fibroblasts (L929), and anti-inflammatory action on RAW 264.7. The antimicrobial activity on planktonic cultures was evaluated by broth microdilution. Afterwards, the effective concentrations were evaluated on mono microbial biofilms. The cytotoxicity analysis was verified by the MTT test and the genotoxicity by the micronucleus test. Anti-inflammatory activity was evaluated in RAW 264.7 stimulated by lipopolysaccharide (LPS) of Escherichia coli and treated with the extract, quantifying the levels of pro-inflammatory cytokines (TNF-α, IL-1β, IL-6 and IL-17) and anti-inflammatory (IL-10), by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The data that presented normal distribution were analyzed by ANOVA and Tukey's test, and those that were not, were analyzed by Kruskal-Wallis and Dunns test, with a significance level of 5% (p≤0.05). Barbatimão extract was effective on biofilms, reduction between 54 and 100%. The extract was not cytotoxic to RAW 264.7 and ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Edson Luis Maistro / Resumo: Das sementes de Pentaclethra macroloba (Willd.) Kuntze, popularmente conhecida como Pracaxi, é possível a extração de um óleo que vem sendo utilizado no Brasil e em outros países para fins terapêuticos e cosméticos. Este vegetal é endêmico da região amazônica e frequentemente utilizado pela população ribeirinha como agente cicatrizante tópico, aplicado principalmente em parturientes e em picadas de serpentes, devido à sua ação antiofídica. Apesar do uso popular desse óleo, na literatura encontram-se poucos estudos avaliando seu potencial citotóxico e genotóxico. Frente a esta lacuna científica, o objetivo deste estudo foi investigar os efeitos deste óleo em células humanas HepG2/C3A in vitro, sob os aspectos de citotoxicidade, genotoxicidade, influência sobre o ciclo celular, apoptose e expressão de genes do metabolismo de xenobióticos e outras vias de sinalização celulares. Os testes do cometa e do micronúcleo foram utilizados na avaliação da genotoxicidade e mutagênese, citometria de fluxo na avaliação dos efeitos sobre o ciclo celular e apoptose, bem como a avaliação da expressão de alguns genes envolvidos nesses processos. Os resultados obtidos revelaram que o óleo não reduz a viabilidade celular nas concentrações de 31, 125 e 500 µg/mL. Nos ensaios do cometa e do micronúcleo, o óleo não apresentou efeitos genotóxico nas concentrações testadas. Além disso, a citometria de fluxo revelou que o óleo não induz apoptose nas células. A análise da expressão gênica revelou que, d... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: From the Pentaclethra macroloba (Willd.) Kuntze seeds, popularly known as Pracaxi, it is possible to extract an oil that is being used in Brazil and in other countries for therapeutic and cosmetic purposes. This plant is endemic to the Amazon region and is frequently used by the riverine population as a topical healing agent, applied mainly to parturients and snake bites due to its antiofidic action. Despite the popular use of this oil, there are few studies in the literature evaluating its cytotoxic and genotoxic potential. The objective of this study was to investigate the effects of this oil on human HepG2 / C3A cells in vitro, under the aspects of cytotoxicity, genotoxicity, influence on the cell cycle, apoptosis and expression of xenobiotic and other metabolism genes cellular signaling pathways. The comet and micronucleus tests were used in the evaluation of genotoxicity and mutagenesis, flow cytometry in the evaluation of effects on the cell cycle and apoptosis, as well as the evaluation of the expression of some genes involved in these processes. The results showed that the oil did not reduce cell viability at concentrations of 31, 125 and 500 μg / mL. In the comet and micronucleus tests, the oil had no genotoxic effects at the concentrations tested. In addition, flow cytometry revealed that the oil does not induce apoptosis in cells. Analysis of gene expression revealed that of all genes tested, those that underwent stimulation were responsible for the metabolism of x... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Aparecida Marin Morales / Coorientador: Paula Suares Rocha / Banca: Thaís Cristina Casimiro Fernandes / Banca: Grasiela Dias de Campos Severi Aguiar / Resumo: Os ecossistemas aquáticos são os ambientes mais comprometidos pela poluição derivada de emissões de substâncias tóxicas presentes em efluentes industriais e domésticos e em resíduos agrícolas. Essa contaminação pode atingir tanto a água quanto os sedimentos dos ambientes aquáticos e induzir diversos efeitos adversos aos organismos vivos expostos. A bacia do rio Corumbataí, localizada no interior do estado de São Paulo (Brasil), apresenta grande importância econômica e ambiental para estado. As águas deste rio sofrem diversos impactos ambientais caracterizados pelo descarte de efluentes urbanos e industriais das cidades localizadas próximas à sua margem, bem como da ação de atividades agrícolas, principalmente da cultura de cana-de-açúcar. Sendo assim, este rio recebe uma quantidade considerável de substâncias potencialmente tóxicas, que vêm comprometendo a qualidade de suas águas e de seus sedimentos. O presente estudo teve como objetivo avaliar a citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade de amostras de águas e de sedimentos do rio Corumbataí - SP, em pontos situados entre as cidades de Rio Claro e Piracicaba. Foram realizadas duas coletas, uma na estação chuvosa e quente e outra na estação seca e fria, em quatro pontos distintos do rio: P1) à montante da cidade de Rio Claro; P2) à jusante da cidade de Rio Claro; P3) à jusante de Santa Gertrudes e da confluência do rio Corumbataí com o Ribeirão Claro; P4) à montante da cidade de Piracicaba. As avaliações foram realizadas por meio de bioensaios desenvolvidos com os organismos testes Allium cepa e com cultura de hepatócitos de truta arco-íris da linhagem RTL-W1. Para os bioensaios realizados com A. cepa, foram realizados testes de índice mitótico (IM), de aberrações cromossômicas (AC) e de indução de micronúcleos (MN), em células meristemáticas e testes de indução de MN em células F1. Para os bioensaios realizados com cultura de... / Abstract: Aquatic ecosystems are the most affected by pollution from toxic waste emissions of industrial, domestic and agricultural effluents. This contamination may occur in both water and sediments of aquatic environments and induce many adverse effects to the living organisms. The Corumbataí river basin, located within the state of São Paulo (Brazil), has great economic and environmental importance to the state. The waters of this river suffer from various environmental impacts characterized by the disposal of municipal and industrial effluents from cities located close to its border. Thus, this river receives a considerable amount of potentially toxic substances. Due to its importance for public water supply in the region this study aimed to evaluated the cytotoxic, genotoxic and mutagenic effects of water and sediments samples from this water resource, by means of bioassays. For this study, two sampling campaigns were performed, one in the warm and rainy season and the other in the cold and dry season. Samples were collected in Corumbataí River, in four different sites: P1) upstream the municipality of Rio Claro, P2) downstream the municipality of Rio Claro; P3) downstream the confluence of Corumbataí River and Ribeirão Claro; P4) upstream the municipality of Piracicaba. The evaluations were performed through bioassay with the Allium cepa test organisms and culture of hepatocytes from rainbow trout RTL - W1. According to obtained results in this work, it was possible to observed that water and sediments Corumbataí have genotoxic and mutagenic characteristics. The most significant results were recorded for the points P2 and P3, located near the cities of Rio Claro and Santa Gertrudes. Our results also indicated that samples collected at P3 were more affected, probably due to influence of discharges of industrial and domestic effluents from the city of St. Gertrudes , which is considered the largest ceramic hub of America / Mestre