Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Un substitut fiable est nécessaire après résection circonférentielle étendue de la trachée. La transplantation trachéale (TT) s’est heurtée à l’impossibilité d’une revascularisation directe et au rejet. Ayant démontré chez l’animal la faisabilité du remplacement trachéal (RT) par allogreffe aortique (AA) sans immunosuppression, nous avons conduit une étude clinique à partir de 2005. Six patients atteints de cancer étaient inclus (27% des cas de la littérature) ; actuellement 3 sont en vie et en rémission (suivi moyen 81 mois). Cependant, contrairement à l’animal, nous n’avons pas observé chez l’homme de régénération trachéale des greffons, probable conséquence de leur ischémie initiale. Pour résoudre ce problème, nous avons conduit 5 séries d’investigations sur modèle lagomorphe : Etude de l’efficacité de l’enveloppement fascial (EF) sur la néo angiogenèse de l’AA. EF appliqué à un greffon composite (AA entourée d’anneaux cartilagineux allogéniques). RT avec ce greffon.Quarante neuf lapins étaient donneurs et 74 étaient receveurs de sexe opposé. Il n’y avait pas d’immunosuppression. Lors des EF, les greffons étaient enveloppés dans un lambeau de fascia latéro-thoracique, puis implantés sous la peau. Lors des RT et TT en 2 temps, la résection de la trachée du receveur était suivie d’une rotation au cou du greffon enveloppé, qui était suturé à la trachée native. Lors des RT en 1 temps, le greffon était directement interposé après résection de la trachée du receveur. Les lapins ont été suivis jusqu’au décès ou sacrifiés. Les études microscopiques, la détection des chromosomes X et Y (FISH) et des cellules en apoptose (APOSTAIN) ont permis d’étudier la revascularisation, la viabilité et le rejet des greffons.L’EF de l’AA (n=19) a permis de construire un nouvel organe tubulé et revascularisé. La FISH a démontré la migration de cellules de l’hôte au sein de l’AA, et la persistance de cellules du donneur, témoignant d’une ischémie minimale après EF. Mais ce greffon n’avait pas la rigidité requise pour un RT.• L’EF du greffon composite (n=9) a permis de construire un substitut trachéal rigide, à la structure cartilagineuse préservée. • Après RT avec greffon composite (n=10) les lapins sont décédés d’obstruction de la voie aérienne. Sept greffons sur 10 avaient une rigidité satisfaisante par calcification des cartilages, mais tous présentaient des lésions ischémiques (résultats insuffisants pour une application clinique).• Après EF, les segments d’ATDC (n=13) étaient viables. L’infiltration inflammatoire était minime, sans lymphocyte. L’apoptose observée évoquait une réaction de rejet à minima.• Après TT par longs segments d’ATDC (n=7), 6 lapins sont décédés de sténose par prolifération endoluminale fibroblastique de J3 à J48. Après TT par segments courts (n=7), 3 lapins sont décédés et 4, sacrifiés de J33 à J220, présentaient une perméabilité et une morphologie normale du greffon. Tous les greffons, présentaient des signes de néo angiogenèse. L’infiltration inflammatoire était variable, sans lymphocyte. Les cartilages se calcifiaient, de 90% à 100% après 30 jours. Enfin, la régénération épithéliale était observée dès J20. [...] / After extended circumferential resection of the trachea, a reliable substitute is needed. Tracheal transplantation (TT) failed because of impossibility for direct revascularization, and rejection. On the other hand, our animal studies have demonstrated the feasibility of tracheal replacement (TR) with aortic allografts (AA). Since 2005, we performed this procedure in 6 cancer patients (accounting for 27% of cases in the available literature), and 3 are alive with no evidence of disease (mean follow-up: 81 months). The graft of patients did not display, however, cartilage regeneration as shown in animal models, possibly due to critical ischemia prior to neoangiogenesis. To solve this issue, investigations were conducted in rabbit models: • Study of the efficacy of the lateral thoracic fascial flap wrap (FW) for neoangiogenesis of AA. FW applied to a composite graft (AA with external cartilage-ring support). Staged TR using the composite graft.FW applied to segments of tracheal allograft, epithelium-denuded and cryopreserved to reduce immunologic reaction. Staged, and then direct TT using these tracheal segments.Forty-nine rabbits were used as donors and 74 sex-mismatched as recipients. No immunosuppressive therapy was given. During FW, grafts were wrapped using a lateral thoracic fascial flap, and then implanted under the skin of the chest wall. During staged TR or TT, tracheal resection was followed by rotation of the flap-wrapped graft to the neck, and anastomosis to the native trachea. During direct TT, the allograft segment was interposed between the stumps of the resected trachea.Rabbits were followed-up to death or sacrifice. Microscopic examination, FISH analysis for detection of both X and Y chromosomes, and detecting apoptotic cells (APOSTAIN), were used to study the morphology, revascularization, viability, and determine rejection. The FW applied to AA (n=19) ensured the construction of a novel well-vascularized tube-shaped organ. FISH analysis showed migration of recipient cells into the AA, and persistence of normal cells from the donor suggestive of minimal ischemia. This construct, however, did not show stiffness sufficient to ensure TR. • The 9 animals in which FW was applied to composite graft showed a rigid tracheal substitute with preserved histological structure of cartilages.• The 10 rabbits undergoing TR with this composite graft died of central airway obstruction. Despite severe ischemic lesions, satisfactory graft stiffness was shown in 7 out of 10 animals, due to cartilage calcifications. The results did not allow, however, the use of the construct in the clinical setting.• The 13 animals in which FW was applied to epithelium-denuded-cryopreserved tracheal segments maintained viability. The inflammatory reaction was minimal, with no lymphocytes. Apoptosis events were suggestive of minimal immunological response.• The results of TT using long segments of epithelium-denuded-cryopreserved allografts were disappointing, since 6 rabbits sustained a graft stenosis because of intraluminal fibroblastic proliferation. Of 7 rabbits undergoing TT with short segments, 4 were euthanized between 33 and 220 days. They showed patency and satisfactory strain abilities of their graft due to cartilage calcification deposits; and microscopically, neoangiogenesis, non-specific inflammatory infiltrate with no lymphocytes and satisfactory epithelial cell ingrowths from day 20 [...]

La Cilicie Trachée demeure, malgré la multiplication des études récentes, une région méconnue. Les inscriptions funéraires nous permettent d’étudier les données relatives aux tombes, aux défunts, à leur croyance, à leur rapport à la mort, à la famille ou encore à la société. La documentation traitée comprend l’ensemble des épitaphes grecques et latines connues, soit plus de 1200, du IVe av. J.-C. au VIe ap. J.-C.. Si les épitaphes de l’époque hellénistique sont rares, nombreuses sont celles postérieures au IIe ap. J.-C. et plus encore au IVe ap. J.-C.. C’est d’ailleurs à cette période que leur contenu se modifie de façon significative : les inscriptions sont moins longues et les renseignements fournis sont bien souvent en relation avec le propriétaire de la tombe, son métier et ses croyances. Auparavant, les épitaphes mentionnent plus volontiers les rapports familiaux, les constructeurs, les dispositions juridiques et religieuses permettant de règlementer l’accès à la tombe… Cette étude s’intéresse donc à l’ensemble des informations contenues dans les épitaphes (à l’exception notable de l’aspect linguistique) en tenant compte des persistances, des évolutions et des changements d’un point de vue temporel, mais aussi géographique, local et régional. Les influences extérieures, grecques, latines ou encore chrétiennes dans les épitaphes ainsi que la conservation d’un substrat culturel local sont également prises en compte. / Despite the growing number of recent studies, the Rough Cilicia remains an unknown area. Data related to graves, deceased and their beliefs, relation to death, family or society can be studied thanks to funerary inscriptions. The documentation that has been dealt with includes all the Greek and Latin epitaphs that are known until now, that means more than 1200 epitaphs, from the 4th century B. C. to the 6th century A. C.. Epitaphs from the Hellenistic era are rare, whereas there are plenty of epitaphs dated from after the 2nd century A. C. and even more from after the 4th century A. C.. Besides, their content has strongly changed during this era: inscriptions have become shorter and the given information has often been linked to the owner of the grave, its profession and its beliefs. Previously, the epitaphs were preferably talking about family relationships, the builder of the grave or the legal and religious measures controlling the access of the grave. This study thus deals with all the information that have been found in epitaphs (to the exception of the linguistic aspect) and takes into account the lasting, evolving or changing phenomena from a temporal, geographic, local and regional point of view. The external influences on epitaphs (Greek, Latin or Christian) as well as the preservation of local cultural background are also taken into consideration.

Actinobacillus pleuropneumoniae et Streptococcus suis sont des bactéries pathogènes entraînant des maladies porcines mortelles et des pertes économiques importantes dans l’industrie porcine mondiale. Ces bactéries sont notamment reconnues pour leur implication dans certaines maladies pulmonaires porcines, dont la pneumonie, et leurs mécanismes de pathogénicité ne sont pas parfaitement élucidés. De ce fait, nous nous sommes intéressés à l’activité de ces deux bactéries sur la barrière épithéliale de la trachée du porc, soit un modèle représentatif de la première ligne de défense des voies respiratoires supérieures du porc. Plus précisément, nous avons étudié la capacité d’A. pleuropneumoniae et de S. suis à induire une perte d’intégrité de la barrière épithéliale, à la traverser, et à induire une réponse inflammatoire. En considérant les cytokines pro-inflammatoires sécrétées par les cellules épithéliales en présence de ces bactéries pathogènes, les effets du TNF-α sur la barrière épithéliale ont également été analysés. Nous avons démontré qu’A. pleuropneumoniae, S. suis et le TNF-α sont aptes à induire des dommages importants à la barrière épithéliale et à permettre la translocation de ces bactéries pathogènes à travers cette barrière. Ces résultats suggèrent que la barrière épithéliale puisse représenter une cible thérapeutique contre les infections engendrées par les bactéries pathogènes environnantes afin de limiter leur capacité d’invasion. Pour ce faire, il serait nécessaire d’investiguer davantage les facteurs de virulence de ces bactéries contribuant à la perte d’intégrité de la barrière épithéliale des voies respiratoires supérieures du porc afin d’élaborer de potentiels thérapies ciblées inhibant leur pathogénicité

La trachée est une structure très complexe des voies respiratoires, qui est composée d'anneaux cartilagineux, fait de cartilage hyalin, et de bandes musculaires, formées de cellules musculaires lisses, dont l'architecture confère à la fois rigidité et souplesse au canal trachéen. Contrairement à d'autres cartilages, tels que ceux trouvés dans la plaque de croissance en développement et dans les articulations adultes, ou aux cellules musculaires lisses des vaisseaux, très peu d'informations sont disponibles sur le développement du cartilage et du tissu musculaire trachéal et sur leur capacité à se minéraliser, bien que la calcification de la trachée soit un événement commun dans la population âgée et plus rare dans certaines pathologies. Dans ce contexte, ce travail de thèse a cherché dans le modèle souris à mieux caractériser le cartilage et le tissu musculaire lisse de la trachée et également comprendre les mécanismes moléculaires jusqu'alors inexplorés, régulant la minéralisation de la trachée. Grâce à une nouvelle technique de culture de cellules provenant de la trachée, nous avons démontré que les chondrocytes et les cellules musculaires lisses trachéaux sont tous deux capables de minéraliser lorsqu'ils sont traités avec un haut niveau de Pi, mais via des mécanismes moléculaires différents. En parallèle, une étude in vivo nous a permis de démontrer que la minéralisation de la trachée se produit uniquement dans les anneaux cartilagineux dès 30 jours après la naissance. Des analyses histologiques et moléculaires ont permis d'affiner ces résultats et de proposer un modèle de minéralisation de la trachée via une progression rostro-caudale dépendante de BMP2 / The trachea is a very complex structure of the respiratory tract, composed of C-shaped cartilaginous rings, made of hyaline cartilage, and muscular bands, made of smooth muscle cells, conferring rigidity and compliance to the windpipe, respectively. In contrast to other intensely studied cartilages such as the ones found in the developing growth plate and in the adult joints or smooth muscle cells from the vasculature, very little information is available on the development of the tracheal cartilage and smooth muscle tissues and on their innate propensity to mineralize, although calcification of the trachea is a common finding in the elderly population and also a rare manifestation of pathologic conditions. In this context, this PhD work sought to better characterized the poorly studied tracheal cartilage and smooth muscle tissue and understand the molecular mechanisms regulating tracheal mineralization that has been unexplored so far. We tackle these questions in the mouse model. Setting up a novel in-vitro culture of tracheal cells, we demonstrated that tracheal chondrocytes and smooth muscles cells are prone to mineralize when treated with high level of Pi, through different molecular mechanisms. In parallel, we found that in vivo mineralization of the trachea only happens in the cartilaginous rings, as early as 30 days after birth. Histological and molecular evidence suggest that tracheal mineralization occurs through a BMP-dependent rostro-caudal progression

La reconstruction trachéale autologue a pu être standardisée et optimisée grâce au développement d’untravail de recherche expérimentale. Ce travail a permis d’améliorer la technique chirurgicale et les résultatscliniques. C’est une solution thérapeutique qui permet de remplacer de façon reproductible plus de 50 % delongueur de trachée. Toutes les autres techniques de remplacement trachéal développées par denombreuses équipes, ainsi que leurs résultats expérimentaux et cliniques, ont été étudiés et classés enfonction du substitut utilisé.Après de nombreuses publications du Laboratoire de Recherche du Centre Chirurgical Marie Lannelonguesur ce sujet, nous nous sommes orientés vers l’utilisation des tissus autologues (lambeau libre et cartilagescostaux) en collaboration avec les chirurgiens plasticiens. Cela a permis grâce aux avancées techniques etnotamment de microchirurgie de réaliser un nouveau conduit trachéal. Ce substitut ne contient aucunmatériel prothétique et il peut donc résister aux infections. Malgré l’absence de renfort prothétique, il résisteaux pressions et surtout à la dépression respiratoire.Le développement de cette technique chirurgicale a été obtenu grace à ces travaux de recherche qui ontpermis d’optimiser la procédure, de l'améliorer et de la répéter.Le premier travail expérimental a été la création d'un modèle animal de remplacement trachéal autologuepar un lambeau pédiculé armé. Nous avons ainsi confirmé la résistance mécanique et la viabilité descartilages, ainsi que la durabilité de ce type de reconstruction.Les travaux suivants ont été réalisés en collaboration avec des équipes spécialisées en Ingénierie tissulaire.Le premier travail expérimental d’Ingénierie tissulaire a consisté en la réalisation d’anneaux de cartilage àpartir de cellules souches. L'objectif était d'obtenir des anneaux cartilagineux préformés, que l'on pourraitinsérer dans l'épaisseur du lambeau.Le deuxième travail a été de développer une technique permettant de transformer le revêtement cutané dulambeau en une muqueuse respiratoire. Quatre techniques d'ingénierie tissulaire ont été utilisées et testées :la greffe de péritoine, la greffe de muqueuse buccale expansée, l’ensemencement de cellules de lamuqueuse trachéale et la greffe de cellules épithéliales respiratoire de culture.Malgré les avancées technologiques, la culture de cellules cartilagineuses en trois dimensions sur desmoules en Silicone ne s’est pas avérée satisfaisante.Les différents procédés de remplacement du revêtement cutané ont confirmé la nécessité de réaliser desétapes supplémentaires au préalable de l'intervention chirurgicale. Parmi les techniques de remplacementde l'épithélium, la greffe de muqueuse buccale expansée et la greffe d’épithélium respiratoire de culture ontété les plus fiables.La reconstruction autologue est à ce jour la meilleure alternative pour le remplacement trachéal étendu enutilisant des tissus autologues. La poursuite d’une approche expérimentale est fondamentale pourl’amélioration de nos résultats. Ainsi, ces travaux vont être poursuivis par un travail expérimental sur leremplacement des anneaux de cartilages par des anneaux de Titane poreux sur un modèle animal. / Autologous tracheal reconstruction has been standardized and optimized in parallel with the development of experimental research and clinical practice. This is a therapeutic solution that replaces reproducibly more than 50% of tracheallength. All the other tracheal replacement techniques, developed by many teams and their experimental and clinical results, were studied and classified according to the substitute used.After an experimental study at the Laboratory of Surgical Research in the Marie Lannelongue, center, we started to work towards the use of autologous tissue (free flaps and costal cartilages). Thoses tissues were shaped using technical advances including microsurgery to create a new tracheal conduit.This tracheal substitute does not contain any prosthetic material. It may therefore resist to infection and it resists to respiratory pressures and especially respiratory depression.The development of this technique was conducted in parallel with research studies, that improved and optimized the surgical process and the results.The first experimental work was the creation of an animal model tracheal replacement using an armed autologous pedicle flap. We confirmed the strength and viability of the cartilage strip inserted between the dermal layers and the sustainability of this type of reconstruction.The following work was carried out in collaboration with two other teams specialized in Tissue Engineering.The first experimental work of tissue engineering tried to produce cartilage rings from stem cells. The objective was to obtain complete cartilaginous rings that could be inserted into the thickness of the flap.The next objective was to develop a technique to transform the superficial layer of the skin in a respiratory epithelium. Four tissue engineering techniques were used and tested: peritoneum of the graft, oral mucosa transplant, seeding cells from the tracheal mucosa and graft culture respiratory epithelial cells.Despite advances in technology, the culture of cartilage cells in three dimensions on Silicone mold were not viable and could not be used in clinical practice.The various alternative processes of skin covering highlighted the need for additional steps in advance of surgery.Among the techniques used to replace the epithelium with an expanded graft buccal mucosa, transplantation of culture respiratory epithelium is the most reliable.Autologous reconstruction is so far the best alternative for extended tracheal replacement using only autologous tissue. The pursuit of an experimental approach is fundamental to improve our results.Thus, this work will be pursued by an experimental work on the replacement of cartilage rings using porous titanium ring on an animal model.

Un substitut fiable est nécessaire après résection circonférentielle étendue de la trachée. La transplantation trachéale (TT) s'est heurtée à l'impossibilité d'une revascularisation directe et au rejet. Ayant démontré chez l'animal la faisabilité du remplacement trachéal (RT) par allogreffe aortique (AA) sans immunosuppression, nous avons conduit une étude clinique à partir de 2005. Six patients atteints de cancer étaient inclus (27% des cas de la littérature) ; actuellement 3 sont en vie et en rémission (suivi moyen 81 mois). Cependant, contrairement à l'animal, nous n'avons pas observé chez l'homme de régénération trachéale des greffons, probable conséquence de leur ischémie initiale. Pour résoudre ce problème, nous avons conduit 5 séries d'investigations sur modèle lagomorphe : Etude de l'efficacité de l'enveloppement fascial (EF) sur la néo angiogenèse de l'AA. EF appliqué à un greffon composite (AA entourée d'anneaux cartilagineux allogéniques). RT avec ce greffon.Quarante neuf lapins étaient donneurs et 74 étaient receveurs de sexe opposé. Il n'y avait pas d'immunosuppression. Lors des EF, les greffons étaient enveloppés dans un lambeau de fascia latéro-thoracique, puis implantés sous la peau. Lors des RT et TT en 2 temps, la résection de la trachée du receveur était suivie d'une rotation au cou du greffon enveloppé, qui était suturé à la trachée native. Lors des RT en 1 temps, le greffon était directement interposé après résection de la trachée du receveur. Les lapins ont été suivis jusqu'au décès ou sacrifiés. Les études microscopiques, la détection des chromosomes X et Y (FISH) et des cellules en apoptose (APOSTAIN) ont permis d'étudier la revascularisation, la viabilité et le rejet des greffons.L'EF de l'AA (n=19) a permis de construire un nouvel organe tubulé et revascularisé. La FISH a démontré la migration de cellules de l'hôte au sein de l'AA, et la persistance de cellules du donneur, témoignant d'une ischémie minimale après EF. Mais ce greffon n'avait pas la rigidité requise pour un RT.* L'EF du greffon composite (n=9) a permis de construire un substitut trachéal rigide, à la structure cartilagineuse préservée. * Après RT avec greffon composite (n=10) les lapins sont décédés d'obstruction de la voie aérienne. Sept greffons sur 10 avaient une rigidité satisfaisante par calcification des cartilages, mais tous présentaient des lésions ischémiques (résultats insuffisants pour une application clinique).* Après EF, les segments d'ATDC (n=13) étaient viables. L'infiltration inflammatoire était minime, sans lymphocyte. L'apoptose observée évoquait une réaction de rejet à minima.* Après TT par longs segments d'ATDC (n=7), 6 lapins sont décédés de sténose par prolifération endoluminale fibroblastique de J3 à J48. Après TT par segments courts (n=7), 3 lapins sont décédés et 4, sacrifiés de J33 à J220, présentaient une perméabilité et une morphologie normale du greffon. Tous les greffons, présentaient des signes de néo angiogenèse. L'infiltration inflammatoire était variable, sans lymphocyte. Les cartilages se calcifiaient, de 90% à 100% après 30 jours. Enfin, la régénération épithéliale était observée dès J20. [...]

Contexte – La stimulation de la muqueuse trachéale peut provoquer une réponse défensive à type de toux. La finalité de cette réponse est la protection des voies aériennes via la clairance du mucus et des particules déposées au sein de l’arbre trachéo-bronchique. La stimulation de la muqueuse nasale est à l’origine de réponses défensives n’incluant toutefois pas la toux. La modulation de la toux suggère de possibles interactions centrales des afférences provenant de localisations anatomiques distinctes. Objectif – Déterminer si une stimulation trachéale mécanique discriminante est capable de provoquer une toux lors d’une apnée provoquée par l’instillation nasale d’eau distillée. Méthodes – Douze lapins anesthésiés et trachéotomisés ont été étudiés. Les stimulations trachéales mécaniques ont été réalisées dans 3 conditions : contrôle, après instillation nasale de sérum physiologique, et lors d’apnée suite à l’instillation d’eau distillée. Résultats – Les paramètres ventilatoires de références ne sont pas différents dans les 3 conditions. Un total de 171 stimulations trachéales a été réalisé. Lors de l’apnée, 81% des réponses sont des réflexes expiratoires et le pic de débit expiré est inférieur (p < 0.0001) à celui observé dans les conditions contrôle et sérum physiologique. L’incidence des réponses comprenant un réflexe de toux est plus faible (p < 0,0001) en cas d’instillation d’eau distillée que dans les 2 autres conditions.Conclusion – La stimulation nasale par l’eau distillée désensibilise les réflexes de défense respiratoire faisant suite à une stimulation trachéale mécanique / Context - Cough may be triggered by irritation of afferents located in the airway mucosa. Primary role is to expel inhaled foreign matter from the lungs or clear the airways of endogenous mucus. Stimulation of the nasal mucosa provokes defensive responses but not cough. The ‘cough center’ can be tuned by various afferent inputs, suggesting possible interactions at a central level of neural pathways originating from distant anatomical sites. Objective - The present study was designed to determine whether brief mechanical stimulation of the trachea could trigger cough during apnoea elicited by nasal instillation of water. Method - Twelve anesthetized, tracheotomized rabbits were studied. Mechanical stimulation of the trachea was performed under 3 conditions: baseline control, after instillation of saline into the nose and during apnoea following instillation of water. Results - Baseline breathing pattern did not differ between the 3 conditions. In a series of 171 stimulations, expiration reflex occurred in 81% of stimulations during apnoea with a significantly (p < 0.0001) lower peak expiratory flow than at baseline or during saline instillation. The incidence of responses comprising a cough reflex was also lower during water instillation than at either baseline or with saline (p < 0.0001). Conclusion - These results indicate that stimulation of nasal afferents with distilled water likely down-regulates cough

La bronchiolite oblitérante (BO) est la principale cause de décès à long terme après transplantation pulmonaire. La BO se manifeste par une diminution des capacités respiratoires liée à l’obstruction des petites voies aériennes par un tissu inflammatoire et fibroprolifératif. Dans cette thèse nous avons étudié l’hypothèse de l’implication de la kinase nucléaire MSK1 dans la BO. Nous avons utilisé la transplantation hétérotopique de trachée comme modèle murin de BO. La pertinence du choix de ce modèle a été confirmée par l’étude de la re-vascularisation fonctionnelle de la greffe après transplantation. Dans ce modèle nous avons montré une augmentation de l’expression et de l’activité de MSK1 pendant le développement de la BO. Le traitement des souris transplantées avec des inhibiteurs pharmacologiques de MSK1 a permis d’inhiber l’inflammation et la fibroprolifération, montrant le rôle de MSK1 dans la BO. Nous avons également mis en place un essai de criblage utilisant la technologie HTRF pour rechercher de nouveaux inhibiteurs de MSK1. Les résultats décrits dans cette thèse, montrent que la kinase MSK1 est une potentielle cible thérapeutique pour combattre la BO. / Obliterative bronchiolitis (OB) is the chronic rejection after lung transplantation and is the main cause for late death post-transplantation. OB is characterized by decrease of the pulmonary function caused by obstruction of the small airways by inflammatory and fibroproliferative tissue. We studied the hypothesis of the implication of the nuclear kinase MSK1 in the OB. The relevance of the model was demonstrated by showing the rapid functional re-vascularization of the graft. In this model the allograft, shows an increased MSK1 expression and activity. We therefore treated mice with pharmacological inhibitors of the MSK1 activity and we demonstrated an inhibition of the inflammation and the fibroproliferation during OB. We next set up an enzymatic assay using the heterogeneous time-resolved fluorescence, to proceed for a screening for new MSK1 inhibitors. In summary, this study proposed MSK1 as potential therapeutic target to combat OB.

La bronchiolite oblitérante (BO) est la principale cause de décès à long terme après transplantation pulmonaire. La BO se manifeste par une diminution des capacités respiratoires liée à l'obstruction des petites voies aériennes par un tissu inflammatoire et fibroprolifératif. Dans cette thèse nous avons étudié l'hypothèse de l'implication de la kinase nucléaire MSK1 dans la BO. Nous avons utilisé la transplantation hétérotopique de trachée comme modèle murin de BO. La pertinence du choix de ce modèle a été confirmée par l'étude de la re-vascularisation fonctionnelle de la greffe après transplantation. Dans ce modèle nous avons montré une augmentation de l'expression et de l'activité de MSK1 pendant le développement de la BO. Le traitement des souris transplantées avec des inhibiteurs pharmacologiques de MSK1 a permis d'inhiber l'inflammation et la fibroprolifération, montrant le rôle de MSK1 dans la BO. Nous avons également mis en place un essai de criblage utilisant la technologie HTRF pour rechercher de nouveaux inhibiteurs de MSK1. Les résultats décrits dans cette thèse, montrent que la kinase MSK1 est une potentielle cible thérapeutique pour combattre la BO.