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Efeitos da l-alanil-glutamina sobre as concentrações in vivo de metabólitos em ratos submetidos á isquemia-reperfusão do membro pélvico esquerdo / Effects of L-alanyl-glutamine upon in vivo metabolites concentrations in rats subjected to hind limb ischemia followed by reperfusionAlves, Marcos Antônio January 2005 (has links)
ALVES, Marcos Antonio. Efeitos da L-Alanil glutamina sobre as concentrações in vivo de metabólitos em ratos submetidos à isquemia-reperfusão do membro pélvico esquerdo. 2005. 149 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2005. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-10T16:17:10Z
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Previous issue date: 2005 / A study has been conducted to investigate the effects of L-alanyl-glutamine upon blood and tissue concentrations of metabolites (pyruvate, lactate, glucose, acetoacetato, 3-hydroxybutyrate, ketone bodies and ATP) in Wistar rats subjected to ischemia/reperfusion of hind limb. Ninety-six adult male rats were randomized in 4 groups and pre-treated with saline 2.0 mL (G-1,G-3) or L-alanyl-glutamine solution 0.75 mgKg-1(G-2, G-4) during 7 days. One-hour after the last gavage all rats were submitted to clamping of the left iliac artery or sham operation. The clamp was removed after 3 h; sham rats were operated once more. Muscle, liver, kidney and blood samples were collected at the end of ischemia and at 1-3-6 h during reperfusion. Metabolites were submitted to enzymatic analyses. Results were expressed as Mean ± S.E.M. Non-parametric tests (Mann-Whitney and Kruskal-Wallis/Dunn) were utilized for statistical analyses. P<0.05 was accepted as significant. Lactate, pyruvate and glucose concentrations did not increase during ischemia or reperfusion in rats pre-treated with saline (G-1 vs. G-2). On the other hand ketone bodies concentrations were decreased in T-0 and blood glucose was elevated during reperfusion. Liver lactate and muscle glucose were increased and lactate concentration was decreased in L-alanyl-glutamine pre-treated rats. Ketone bodies were elevated in the liver, muscle and blood and renal lactate was also elevated in the aforementioned rats. It is concluded that the model utilized in this study promotes significant metabolic alterations due to ischemia/reperfusion injury. L-Ala-Gln dipeptide induced increased hepatic lactate and muscle glucose concentrations and decreased of muscle lactate concentrations point out to increased turnover of glucose. L-Ala-Gln also induced increased ketogenesis, ketonemia and ketone bodies uptake during reperfusion along with increased lactacidemia and kidney lactate concentrations. Increased glycolytic activity in peripheral tissues via malate-aspartate shuttle activation lead to decreased insulin resistance with possible decrease in plasma insulin levels and increased ketogenesis. / Foram investigados os efeitos metabólicos da L-alanil-glutamina nas concentrações sanguíneas e teciduais dos metabólitos (piruvato, lactato, glicose, acetoacetato, 3-hidroxibutirato, corpos cetônicos e ATP) em ratos Wistar submetidos à isquemia/reperfusão do membro pélvico. Utilizaram-se 96 ratos adultos, machos, distribuídos aleatoriamente em 4 grupos numericamente iguais e pré-tratados com solução salina 2,0 mL (G-1 e G-3) ou L-alanil-glutamina 0,75 g Kg-1(G-2 e G-4), durante 7 dias. Uma hora após a última gavagem, todos os ratos foram submetidos ao pinçamento da artéria ilíaca esquerda ou operação simulada. Após 3 horas a pinça foi removida; nos grupos simulados realizou-se nova intervenção cirúrgica. Amostras (músculo, fígado, rim e sangue) foram coletadas ao final da isquemia máxima (T-0) e durante a reperfusão (1, 3 e 6h). Os metabólitos foram determinados por ensaio enzimático e expressos como Média ± E.P.M. Testes não paramétricos (Mann-Whitney e Kruskal-Wallis/Dunn) foram utilizados para a análise estatística. O nível de significância foi de p<0,05. Não foi evidenciada elevação nas concentrações de lactato, piruvato e glicose durante a lesão de isquemia ou reperfusão, comparando-se os grupos tratados com solução salina (G-1 vs. G-2). Por outro lado houve redução nas concentrações de corpos cetônicos em tecido muscular no tempo de isquemia máxima e hiperglicemia durante o período de reperfusão. Houve elevação nas concentrações hepáticas de lactato e glicose muscular e redução de lactato no mesmo tecido, nos ratos pré-tratados com o dipeptídeo. Observou-se ainda, nos mesmos animais, elevação das concentrações de corpos cetônicos no fígado, no sangue, no músculo e nas concentrações renais de lactato. Conclui-se, portanto, que o modelo de pinçamento da artéria ilíaca esquerda promove alterações metabólicas decorrentes da lesão de isquemia/reperfusão. O dipeptídeo L-ALA-GLN induz aumento nas concentrações hepáticas de lactato, promove elevação de glicose muscular e redução de lactato no mesmo tecido indicando aumento no “turn over” de glicose. O dipeptídeo causou aumento da cetogênese, cetonemia e captação de corpos cetônicos durante a reperfusão, assim como hiperlactacemia e aumento nas concentrações renais de lactato. Maior atividade glicolítica em tecidos periféricos, via ativação do ciclo malato-aspartato, levou a diminuição da resistência insulínica com possível queda de insulinemia, com aumento da cetogênese.
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Isquemia hepática experimental e a ação da l-alanil-glutamina / Experimental hepatic ischemia and precondictining action of l-alanil-glutamineAraújo Junior, Raimundo José Cunha January 2010 (has links)
ARAÚJO JÚNIOR, Raimundo José Cunha. Isquemia hepática experimental e a ação pré-condicionante da l-alanil-glutamina. 2010. 74 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-03-12T12:35:51Z
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Previous issue date: 2010 / The strategies to prevent the hepatic ischemia/reperfusion injury after hepatic resections or transplantation include intermittent control of blood influx to the liver or the use of a substance that could cause a protective effect or increase of the resistance of the hepatic tissue to ischemia. The present study had the objective to evaluate the effect of the use of the L-Alanil-Glutamina in Ratus novergicus submitted the normothermic hepatic ischemia on liver biochemists and imunohistochemistry, as well as evaluating apoptosis present in this experimental model. 30 male rats, with average weight of 300 grams, divided in three groups of 10 rats: Control group, Ischemia Reperfusion group and Glutamine group. Ischemia Reperfusion group received saline solution 0.9% intra-peritoneal (IP), 2 hours before being submitted to laparotomy, and total ischemia by clampping of portal triad for 30 minutes followed of reperfusion for 60 minutes; The Glutamine group received 0,75mg/Kg IP 2 hours before total ischemia for 30 minutes, followed by reperfusion for 60 minutes. Control group was submitted the peritoneal punction 2 hours before the laparotomy, and only manipulation of the biliary tree, without carrying through any clamping. The procedure was carried through under anesthesia (IP) with a solution of Ketamin chloridate , 80 mg/Kg + xilazin chloridate, 10 mg/Kg. To the end of the period of reperfusion the animals had been relaparotomized and blood collected for evaluation of the levels of ALT and DHL, and hepatic tissue samples for imunohistochemistry study with antibody for Caspase-3. The statistics significance was calculated by ANOVA and the post test of multiple comparison of Tukey, using the software GraphPad Prism, version 5.00. The average and error standard of the dosage of ALT, DHL, and of the index of cells marked with Caspase-3 was respectively for the Ischemia Reperfusion group: 270,6+40,8; 2079,0+262,4 and 66,3+13,5; for the Glutamine group: 127,9+31,17; 1019,0+187,9 and 36,6+12,0; for the Control group: 83,3+5,5; 206,6+16,2 and 21,9+111,4. The preconditioning with intraperitoneal L-alanil-glutamine significantly reduces the values of the biochemists markers, in Ratus novergicus submitted to the hepatic ischemia-reperfusion injury, suggesting hepatic protection. / As estratégias para prevenir a lesão de isquemia reperfusão durante as cirurgias hepáticas incluem a oclusão intermitente do fluxo de sangue ao fígado ou a utilização de substâncias que poderiam causar um efeito protetor ou aumento da resistência do tecido hepático à isquemia. O presente estudo teve o objetivo de avaliar o efeito do uso da L-Alanil-Glutamina (GLN) em Ratus novergicus submetidos à isquemia hepática normotérmica, através de provas bioquímicas e imunohistoquímicas. Utilizou-se 30 ratos machos, da variedade Wistar, com peso médio de 300 gramas, distribuídos em três grupos de 10 ratos cada: grupo Controle, Grupo Isquemia Reperfusão (IR) e grupo Glutamina + Isquemia Reperfusão (GLN+IR). O grupo IR recebeu solução salina 0,9% intra-peritoneal (IP), 2 horas antes de ser submetido laparotomia, e isquemia total por pinçamento da tríade portal por 30 minutos seguidos de reperfusão por 60 minutos; O grupo GLN + IR recebeu 0,75mg/Kg de glutamina IP 2 horas antes de isquemia total por 30 minutos, seguidos de reperfusão por 60 minutos. O grupo Controle foi submetido à punção peritoneal 2 horas antes da laparotomia, e de apenas manipulação da tríade portal, sem realizar pinçamento algum. O procedimento foi realizado sob anestesia (IP) com uma solução de cloridrato de ketamina, 80 mg/Kg + cloridrato xilazina, 10 mg/Kg. Ao final do período de reperfusão os animais foram relaparotomizados e colhido amostras de sangue para avaliação dos níveis de ALT e DHL, e amostras de tecido hepático para estudo imunohistoquímico com anticorpo para Caspase-3. A significância estatística foi calculada pelo teste ANOVA e pelo pós-teste de comparação de múltiplas médias de Tukey utilizando-se o software GraphPad Prism, versão 5.00. A média e erro padrão da dosagem de ALT, DHL, e do índice de células marcadas com Caspase-3 foi respectivamente para o grupo IR: 270,6+40,8; 2079,0+262,4 e 66,3+13,5; para o grupo GLN +IR: 127,9+31,17; 1019,0+187,9 e 36,6+12,0; para o grupo Controle: 83,3+5,5; 206,6+16,2 e 21,9+111,4. O pré-condicionamento com L-alanil-GLN IP reduziu significativamente os valores de ALT e DHL em Ratus novergicus, submetidos à lesão de IR hepática, sugerindo hepatoproteção.
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Efeito do uso da tadalafila, inibidor da fosfodiesterase tipo 5, na isquemia-reperfusão renal : estudo experimental em suínosMorales, Cláudio Miguel Pinto January 2010 (has links)
Objetivo: Avaliar os efeitos da tadalafila, um inibidor da fosfodiesterase tipo 5, nos valores teciduais renais de malondialdeído (produto da lipoperoxidação celular), nos níveis séricos de uréia e creatinina e na histologia renal em suínos submetidos à isquemia-reperfusão renal em rim único. Material e métodos: Doze suínos Large-White foram submetidos à uninefrectomia seguida por isquemia-reperfusão renal contralateral e separados aleatoriamente em dois grupos com ou sem tratamento com tadalafila 20 mg via oral. Foram analisados os resultados de lipoeroxidação, histologia e função renal. Resultados: Os valores teciduais de Malondialdeído (MDA) foram significativamente superiores no grupo não tratado com tadalafila (p<0,05), quando comparados ao grupo de animais tratados com o fármaco. Houve diferença estatística nos estudos histológicos, tendo ocorrido mais vacuolização e infiltrado polimorfonuclear intersticial no grupo não tratado com tadalafila. Não houve diferença significativa nas dosagens séricas de uréia e creatinina. Conclusão: Nosso estudo sugere, pela primeira vez na literatura, que a tadalafila tem um efeito protetor na isquemia e reperfusão renal em suínos, como evidenciado pelos resultados da lipoperoxidação e pelos estudos histológicos.
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Avaliação morfológica e imunohistoquímica tardia do fígado e do pulmão após lesão de isquemia e reperfusão hepática seletiva com modulação pelo precondicionamento isquêmico ou pela N-acetilcisteina / Late morphological and immunohistochemical evaluation of liver and lung after seletive ischemia and reperfusion injury modulated by ischemic preconditioning or N-acetylSouza, Maria Aparecida Galhardo de [UNIFESP] January 2007 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2007 / Este estudo teve como objetivo avaliar 0 papel do precondicionamento isquemico (IPC) e da N-acetilcisteina (NAC) no figado e no pulmao na fase tardia da lesao de isquemia e reperfusao hepatica. Foram usados 24 ratos Wistar EPM-1, distribuidos por randomizacao em quatro grupos: (IR) Isquemia hepatica por 40 minutos e reperfusao por 24 horas; (IPC) precondicionamento isquemico de 10 minutos de isquemia e 10 minutos de reperfusao antes da isquemia prolongada; (NAC) Animais receberam N-acetilcisteina 15 minutos antes da isquemia e 5 minutos antes da reperfusao e (SHAM) Animais foram operados e tiveram 0 pediculo hepatico manipulado sem serem submetidos a isquemia. Na reoperacao, apos 24 horas de reperfusao hepatica, foi colhido sangue para dosagem de aspartate aminotransferase (AST) e alanino aminotransferase (AL T) e retirados os lobos isquemicos do figado e 0 pulmao esquerdo para estudo histologico e imunohistoquimico com Caspase-3 e PCNA para avaliar a apoptose e a proliferacao celular, respectivamente. Foram usados 0 teste de Kruskal-Wallis e 0 teste de variancia com pos-teste de Tukey (p < 0,05). Os valores da AST foram similares entre os grupos (p=0,45); para a ALT houve aumento comparado ao grupo SHAM (p=0,036). Nos grupos IPC e NAC houve prevencao da necrose (p=0,027), apoptose (p=0,003) e esteatose microvesicular (p=0,0007); porem somente no grupo NAC houve reducao do infiltrado inflamatorio (p=0,004) no figado. Os grupos IPC e NAC reduziram a marcacao citoplasmatica de Caspase-3 (p=0,0001) e a marcacao nuclear do PCNA (p=0,0001) no figado. No pulmao, o IPC reduziu 0 espessamento da parede do alveolo (p=0,014), porem tanto 0 IPC quanto a NAC reduziram a Caspase-3 e 0 PCNA em relacao ao grupo IR. Em conclusao, o precondicionamento isquemico e a N-acetilcisteina reduzem a lesao de isquemia e reperfusao hepatica no figado e no pulmao na fase tardia / This study aimed to evaluate the effect of ischemic preconditioning (IPC) and Nacetylcysteine
(NAC) in hepatic and pulmonary damage in late phase after liver
ischemia-reperfusion injury. 24 male Wistar-EPM rats were randomized and
assigned into four groups: (IR) Hepatic ischemia-reperfusion; (IPC) IPC achieved
before hepatic ischemia; (NAC) Animals received NAC pre treatment; and (SHAM)
Sham operated group. After 24 hours of hepatic reperfusion, blood, ischemic liver
and pulmonary samples were collected. Aspartate aminotransferase (AST) and
alanine aminotransferase (ALT) activity were measured, histological and
immunohistochemical studies in liver and lung were also performed. Apoptosis was
evaluated by Caspase-3 while cell proliferation by proliferating cell nuclear antigen
(PCNA) in liver and pulmonary samples. Kruskal-Wallis and one-way ANOVA with
post-hoc Tukey's test for multiple comparisons were used (p ≤ 0.05). AST levels were
similar among experimental groups. ALT lower levels were observed in sham group
(p=0.04). IPC and NAC groups prevented from necrosis (p=0.027), apoptosis
(p=0.003) and microvesicular steatosis (p=0.0007), but just NAC group prevented
from neutrophil infiltration in liver tissue (p=0.004). SHAM, NAC and IPC groups
were lower than IR group in the caspase-3 activity (P=0,001) and quantitative
analysis showed that PCNA in IR group was higher than SHAM, NAC and IPC
groups (P=0,001). In lung tissue, just IPC treatment reduced alveolar septal edema
(p=0.014), but IPC and NAC groups didn’t prevent from neutrophil infiltration or
vascular congestion. The immunohistochemical study showed NAC and IPC groups
prevented apoptosis (P= 0,001) and cell proliferation (P=0,001). In conclusion, IPC
and NAC attenuated hepatic and pulmonary damage after hepatic ischemiareperfusion
injury in late phase. / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Efeito do pré-tratamento com l-alanil glutamina e precondicionamento isquêmico em modelo de isquemia : reperfusão de membros pélvicos em ratos / Effect of the pre-treatment with l-alanyl glutamine and ischemic preconditioning in an ischemia : reperfusion model of hind limbs in ratsLandim, Emanuel Rocha January 2008 (has links)
LANDIM, Emanuel Rocha. Efeito do pré-tratamento com l-alanil glutamina e precondicionamento isquêmico em modelo de isquemia : reperfusão de membros pélvicos em ratos. 2008. 70 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-19T12:59:47Z
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Previous issue date: 2008 / The present work determined the effects of pre-treatment with L-alanyl glutamine (Ala-Gln) and ischemic preconditioning (IPC), alone and in combination, against lesions caused by I/R by clamping the infrarenal aorta in rats. Sixty Wistar rats were distributed into five groups (n = 12) divided into two times (n = 6): Control, Group I/R, Group IPC + I/R, Group Ala-Gln + I/R, Group Ala-Gln + IPC + I/R. Times: T1 (infrarenal-aorta clamping ischemia-4h); T2 (ischemia-4h plus reperfusion-1h). Pulmonary myeloperoxidase (MPO) and plasma TBARS concentrations were measured. Data expressed as mean ± standard-deviation, analyzed by Student’s t-test and ANOVA/Tukey’s post-test. P-values < 0,05 were considered significant. Increased MPO concentrations in ischemic group and in I/R group occurred as compared to control. Reduction in MPO concentrations happened in ischemic groups pre-treated with either Ala-Gln or IPC. I/R induced no change in MPO concentrations in groups pre-treated with either Ala-Gln or IPC. Pre-treating with the two procedures showed increased MPO at both times studied. Reduction in TBARS concentrations occurred in Ala-Gln pre-treated group, whereas significant elevation was observed when Ala-Gln and IPC were associated in ischemic animals. Ischemia/reperfusion induced elevation of plasma TBARS. Pre-treatment with either Ala-Gln or IPC protects against distant pulmonary lesion due to ischemia. The same did not occur in I/R lesion. Combining the two procedures aggravated inflammation indicated by increased MPO concentrations. Elevated TBARS concentrations in ischemic animals pre-treated with the two procedures indicate increased lipid peroxidation, whereas pre-treatment with Ala-Gln induced decreased TBARS concentrations. / No presente trabalho, estudaram-se os efeitos da l-alanil glutamina (Ala-Gln), do precondicionamento isquêmico (PCI) e das duas técnicas concomitantemente sobre a lesão pulmonar provocada por isquemia e reperfusão (I/R) causada por pinçamento da aorta infra-renal em ratos. Foram utilizados 60 ratos machos Wistar, randomizados em cinco grupos (n = 12) divididos em dois tempos (n = 6): Grupo Simulado, Grupo I/R, Grupo PCI + I/R, Grupo Ala-Gln + I/R, Grupo Ala-Gln + PCI + I/R. Tempos: T1 (4h de isquemia) e T2 (4 horas de isquemia e 1h de reperfusão). Todos os grupos receberam solução salina previamente, menos os grupos pré-tratados com Ala-Gln que receberam o dipeptídeo e solução salina em igual volume. Foi utilizado o modelo de pinçamento da aorta infra-renal com 4 horas de isquemia e 1 hora de reperfusão. Determinaram-se as concentrações de mieloperoxidase (MPO) pulmonar, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e glutationa reduzida (GSH) no sangue e pulmão para avaliar os grupos em estudo. O teste de Kolmogorov-Smirnoff mostrou distribuição normal dos dados. Dados expressos como média acompanhada pelo seu desvio padrão (Média ± DPM) sendo realizado teste t de Student. Para análise comparativa simultânea de três grupos utilizou-se o teste Anova com pós-teste de Tukey. Em todos os casos foi adotado o nível de significância de p<0,05. Houve elevação das concentrações de MPO pulmonar tanto no grupo submetido à isquemia quanto no grupo que realizou a I/R. Ocorreu redução significante das concentrações de MPO pulmonar nos grupos submetidos à isquemia pré-tratados com Ala-Gln e com PCI. Na avaliação dos grupos que sofreram I/R não foi observada alteração nas concentrações de MPO nos grupos pré-tratados Ala-Gln ou PCI. O grupo pré-tratado com as duas técnicas apresentou aumento significante da MPO nos tempos estudados. A Ala-Gln como pré-tratamento isolado reduziu TBARS plasmático na isquemia e o aumentou no pulmão na I/R. Já no pulmão durante isquemia e no plasma na I/R houve redução da GSH. O PCI como pré-tratamento isolado elevou o TBARS pulmonar na I/R e reduziu a GSH pulmonar na I/R. A associação da Ala-Gln e PCI acresceu o TBARS plasmático na isquemia, também o elevando no pulmão e músculo na I/R. Já a GSH, com os dois pré-tratamentos, sofre redução plasmática na isquemia e pulmonar na I/R, com elevação plasmática na I/R. O presente estudo demonstra que tanto o pré-tratamento com Ala-Gln como o PCI protegem contra a lesão isquêmica à distância, em modelo murino de pinçamento da aorta infra-renal quando avaliado MPO pulmonar. O mesmo não ocorre na lesão por I/R. Não há benefício, e sim agravamento de lesão à distância pulmonar, na associação dos dois pré-tratamentos ao mensurar a MPO pulmonar.
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Dosagem, in vivo, de metabólitos sanguíneos e tissulares de ratos submetidos à isquemia renal e a reperfusão durante a oferta de L-alanil-glutamina / Effects of L-alanil glutamine pre-treatment on the concentratios of lactate, pyruvate, glucose and ketone bodies in the intestinal tissues an blood of rats subjected to normothermic intestinal ischemia, in vivoBezerra Filho, João Evangelista January 2004 (has links)
BEZERRA FILHO, João Evangelista. Dosagem, in vitro, de metabólitos sanguíneos e tissulares de ratos submetidos à isquemia renal e à reperfusão durante a oferta de L-alanil-glutamina. 2004. 117 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2004. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-27T15:27:16Z
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Previous issue date: 2004 / Renal tranplantation and other operations give rise to kidney ischemia/ reperfusion injuries that may interfere with the final outcome. The purpose of this study is to examine the effects of l-alanil-glutamine pre-treatment in rats subjected to renal ischemia/reperfusion. Twenty -four rats were distributed in 4 subgroups of 6 animals. Half an hour following administation of l-alanil-glutamine (0,75 g/Kg) animals were subjected to kidney ischemia during 30 minutes. Kidney arterial blood samples were collected at the end of the ischemia and 5,15 and 30 minutes later. Glucose pyruvate lactate and cetonic bodies in vivo concentrations were determined in all samples. A second group of 24 animals received i.v.saline solution pre-treatment half an hour prior to the experiment. Laboratory analysis revealed a significant increase in blood concentration of lactate in l-alanil –glutamine group and during reperfusion. The offer of l-alanil-glutamine cause no significant change on concentration of glucose and pyruvate. On the other hand it did induce to significant reduction of cetonemia in the animal group treated with l-alanil-glutamine as compared to that observed in animals from control group. It is concluded that l-alanil –glutamine pre – treatment may enhance glycolysis during ischemia-reperfusion. Activation of malate-aspartate shuttle in glucose oxidative pathway due to increase availabitity of glutamate can explain these changes. / Durante a realização de transplantes renais e outras operações sobre os rins ocorrem os fenômenos de isquemia/reperfusão cujos efeitos nocivos colocam em risco o sucesso dessas intervenções. Pesquisas têm sido feitas no sentido de controlar, ou ao menos diminuir, os efeitos indesejáveis da isquemia/reperfusão. O objetivo desse estudo é avaliar o possível efeito da l-alanil-glutamina sobre a isquemia/reperfusão renal mediante a determinação, in vivo, das concentrações de glicose, piruvato, lactato e corpos cetônicos no sangue e no tecido renal submetido a isquemia/reperfusão. Isquemia de 30 min. foi induzida em dois grupos de animais de experimentação (ratos Wistar). Em seguida, foram determinadas as alterações ocorridas no tempo pós-reperfusão (0 min., 5mi., 15 min., 30 min.) nas concentrações sangüíneas e renais de glicose, piruvato, lactato e corpos cetônicos. Um grupo de 24 animais (6 para cada tempo) foi previamente tratado com l-alanil-glutamina administrada por via venosa e na dose de 0,75g /kg de peso. Em grupo controle com igual número de animais administrou-se, também por via venosa, o mesmo volume de solução salina. Os resultados apontam para aumento significante na concentração sangüínea de lactato nos animais que receberam l-alanil-glutamina, logo após a isquemia (tempo 0 min.) e em todos os tempos após a reperfusão. Não foram constatadas alterações significantes nas concentrações de piruvato e de glicose. No entanto, foi observada redução significante na concentração de corpos cetônicos. Os resultados obtidos sugerem aumento da atividade glicolítica durante o período de reperfusão decorrente da oferta exógena de l-alanil-glutamina. Tal fato deve-se, provavelmente, à ativação do sistema carreador malato-aspartato, em razão da oferta de glutamato, através de seu precursor l-glutamina.
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Efeitos da acupuntura e da eletroacupuntura sobre o estresse oxidativo e a inflamação decorrentes da torção/distorção do testículo em ratos / Protective effects of acupuncture and electroacupuncture on oxidative stress and inflammation due to testis torsion/detorsion in ratsAcioli, Porfírio Cezar Passos January 2014 (has links)
ACIOLI, Porfírio Cezar Passos. Efeitos da acupuntura e da eletroacupuntura sobre o estresse oxidativo e a inflamação decorrentes da torção/distorção do testículo em ratos. 2014. 68 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-08-19T13:51:40Z
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Previous issue date: 2014 / The efects of acupuncture (Ac) and Electroacupuncture (EAc) were evaluated using an experimental rat model of ischemia/reperfusion (IR) of the testis. In Traditonal Chinese Medicine, these forms of therapies are used in the promotion of organic equilbrium, through stimulation of specifc neurotransmiters producing nerve pathways, resulting in a analgesic and anti-nflammatory autonomic regulatory. response. In the study, 30 male Wistar rats, 279.6g average weight (230-30 g) were randomly divided into five groups. Al rats received intraperitoneal anesthesia (Ketamine 10 90mgKgXilazina mgKg), at the begining of the experiment, before the detorsion and at the end of the experiment. G1 group was submited to torsion of the testicle (TT), two complete turns (720º) with immediate detorsion (sham). The other groups (G2IR, G3Ac, G4EAc2 and G5EAc10) were submited to TT during 3 hours, folowed by detorsion and reperfusion during 4 hours. Five minutes before the detorsion Ac (G3Ac) or EAc (G4EAc2, G5EAc10) was aplied, under anesthesia, for 5 minutes. Next the testis was detorsioned and reperfused for 4 hours. At the end blod samples the right testicle were colected. Evaluated parameters included determination of reduced Glutathione (GSH), Malonaldehyde (MDA), Myeloperoxidase (MPO) and histopathology of the testicle. EAc (2 and 10 Hz) promoted signifcant increase in concentrations of GSH in plasma and in the rat estis of G4-G5, compared to the control G1. Ac did not alter signifcantly the concentrations of GSH in the G3 group compared to the G1. There was signifcant increase of MDA in tisue in groups G4-G5 and plasma MDA in al groups, compared to the G1. EAc (2 Hz and 10 Hz) signifcantly decreased the activity of MPO in the testis of rats subjected to TT (G4-G5), compared to the control G1. No signifcant diferences were observed in the activity of MPO comparing groups G4-G5 to group G1. It is concluded that EAc stimulation (2 and 10 Hz) atenuates oxidative stres and inflammatory response in rats subjected to testicular torsion/detorsion. / Os efeitos da Acupuntura (Ac) e da Eletroacupuntura (EAc) foram avaliados utilzando um modelo experimental de isquemia/reperfusão (I/R) do testículo em rato. Na Medicina Tradicional Chinesa, esas formas de terapias são utilzadas na promoção do equilíbrio orgânico, mediante estímulo de vias nervosas produtoras de neurotransmisores específicos, resultando em uma resposta anti-nflamatória, analgésica e reguladora autonômica. No experimento, 30 ratos Wistar machos, peso médio 279,6 g (230-30g) foram distribuídos aleatoriamente em cinco grupos. Todos os ratos receberam anestesia intraperitonial (Cetamina 90mg/Kg+Xilazina 10 mg/Kg), no inicio do experimento, antes da destorção e ao término do experimento. O grupo G1 foi submetido à torção do testículo (TT), duas voltas completas (720º) com imediata destorção (sham). Os demais grupos (G2IR, G3Ac, G4EAc2 e G5EAc10) foram submetidos à TT durante 3 horas, seguido de destorção e reperfusão durante 4 horas. Cinco minutos antes da destorção procedeu-se à aplicação da Ac (G3Ac) ou EAc (G4EAc2, G5EAc10), sob anestesia por 5 minutos. Findo ese tempo realizou- se à destorção do testículo e permitu-se a reperfusão por 4 horas. Ao término foram coletadas amostras de sangue arterial e de tecido (testículo direito). Parâmetros avaliados incluíram determinação de Glutationa (GSH) reduzida, Malonaldeído (MDA), Mieloperoxidase (MPO) e histopatologia do testículo. A EAc (2 e 10Hz) promoveu aumento signifcante nas concentrações de GSH no plasma e no testículo dos ratos dos grupos G4-G5, comparados ao controle G1. A Ac não alterou signifcativamente as concentrações de GSH no grupo G3 comparado ao G1. Houve aumento signif cante do MDA tecidual nos grupos G4-G5 e do MDA plasmático em todos os grupos, comparados ao G1. A EAc (2Hz e 10Hz) diminuiu signifcativamente a atividade da MPO no testículo dos ratos submetidos à torção do testículo (grupos G4-G5), comparados ao controle G1. Não foram observadas diferenças signifcantes na atividade da MPO comparando-se os grupos G4-G5 ao grupo G1. Conclui-se que a aplicação de EAc de 2/10Hz promove proteção local e sistêmica sobre o estrese oxidativo e diminuição da resposta inflamatória em ratos sadios submetidos a torção/destorção do testículo.
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Perfil imuno-histoquímico da expressão de ativadores intracelulares com e sem pré-condicionamento com l-alanil-glutamina em modelo de isquemia e reperfusão em cérebros de gerbils / Immunohistochemical profile expression of intracellular activators with and without L - alanyl - glutamine preconditioning in experiments of brain ischemia/reperfusion on gerbilsOliveira, Leidelamar Rosário Alves de January 2012 (has links)
OLIVEIRA, Leidelamar Rosário Alves de. Perfil imuno-histoquímico da expressão de ativadores intracelulares com e sem pré-condicionamento com l-alanil-glutamina em modelo de isquemia e reperfusão em cérebros de gerbils. 2012. 100 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-07T13:38:17Z
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Previous issue date: 2012 / We investigated the protective effects of L-alanyl-Glutamine (L-ALN-GLN) through the immunohistochemical detection of proinflammatory mediators (IL-6, TNF, NF-kB e HO-1). This was achieved by means of a experimental and controlled study. Fifty-four male gerbils with a mean weight of 150g were used. They were divided randomly and equally into 3 groups: saline with ischemia and reperfusion (SIR), saline without ischemia and reperfusion (SSI) and with L-alanyl-glutamine and with ischemia and reperfusion (GIR). They were then redistributed into three subgroups according to time: T0 (maximum time of ischemia), T30 (30 minutes of reperfusion) and T60 (60 minutes of reperfusion), containing 6 animals each. They were pretreated with saline 2.0mL 0,9% intra-venously (iv) or L-ALN-GLN 0.75% G/KG (IV) 30 min before the start of the experiments. Cerebral ischemia was performed by bilateral occlusion of the common carotid arteries (CCAs) for a period of 15 minutes. After all surgical procedures and at the end of the three time periods the animals were sacrificed and brain tissue samples immediately obtained, which were fixed in 10% formalin solution for 24 hours in order being duly processed prior paraffin embedding. The samples (brain tissue) were collected at the end of each time periods. After this and through using a microtome, tissue sections were made at 4 microns and then placed on glass slides covered with L-polylysine, a proper way for performing immunohistochemistry. The streptavivin-biotin-peroxidase method was used. The quantitative analysis was made by means of counting immunocytochemically-stained cells, both neurons and glial cells, as observed at 400X magnification under an optical microscope Olympus model BX41. Ten fields were observed for each section, with a total of 4 sections per sub-group, always at start, looking for the internal pyramidal layer. Comparing the groups (SSI) and (SIR) a significant increase in NFkB-labeled cells in the subgroup SIR T30 (238,25±218,437 versus 1234,75±144,857); p=0,001 and SIR T60 (586,50±141,210 versus 1286,25±84,968); p=0,002 was observed. There was also a significant increase in the (SIR) subgroup, of the TNF immunostaining at T30 and T60 (263,75±42,906 versus 1015,50±102,796); p=0,01 in comparison to the SSI group. Regarding the cells expressing IL-6 positive labeling, comparing the groups (SIR) and (GIR), it was observed a significant decrease at T30 and T60 in the GIR group (536,25±119,837 versus 9,00±18,000); p=0,033. Comparing the groups (SIR) and (GIR), in relation to the NFkB immunolabeling, there was a significant decrease in group T30 in the GIR group (1234,75±144,857 versus 247,50±495); p=0,001 as well as at T60 (1286,25±84,968 versus 217,75±435,500); p=0,001. There was also a significant decrease, comparing the groups (SIR) and (GIR), of the TNF expression in (GIR) group at all time periods, chiefly at T60 (1015,50±102,796 versus 3,50±7,000); p=0,001. Regarding the immunostaining of the enzyme HO-1, there has been, comparing the groups (SSI) and (SIR), a significant decrease in the expression of this anti-oxidant protein in the SIR group. In the contrary, comparing the groups SIR and GIR, a substantial and significant expression of HO-1 was documented in the group treated previously by the L-alanil-glutamina, at times T30 and T60. In conclusion, the prior administration of L-alanil-glutamina in experiments of ischemia-reperfusion in Gerbils, disclosed a protective outcome, by promoting an in situ reduction in the expression of pro-inflammatory cytokines (TNF and IL-6) and nuclear transcription factor NFkB. At the same time, there has been an increase in the induction of the expression of the anti-oxidative enzyme HO-1, supporting a protective role of this preconditioning agent, chiefly against the inflammatory-oxidative stress. caused by the ischemia reperfusion brain injury model, in Gerbils / Foi investigado o efeito da administração prévia de L-alanil-glutamina (L-ALN-GLN) nas lesões de isquemia e reperfusão em cérebros de gerbils através da detecção imunohistoquímica da expressão de mediadores pró-inflamatórios e da defesa anti-oxidante (IL-6, TNF, NF-kB e HO-1). Trata-se de um estudo experimental, controlado, utilizando 54 gerbils machos, com peso médio de 150g, distribuídos aleatoriamente em 3 grupos: salina sem isquemia e reperfusão (SSI), salina com isquemia e reperfusão (SIR), L-alanil-glutamina com isquemia e reperfusão (GIR), redistribuídos em 3 subgrupos: T0 (tempo máximo de isquemia), T30 (30 min de reperfusão) e T60 (60 min de reperfusão), com 6 animais por subgrupo. Foram pré-tratados com solução salina 2,0 mL 0,9% via endovenosa (e.v.) ou L-ALN-GLN 0,75g/Kg (e.v.), 30 min antes do início dos experimentos. A isquemia cerebral foi induzida pela oclusão bilateral das artérias carótidas comuns (ACCs), por um período de 15 minutos. Após todos os procedimentos cirúrgicos e ao final dos três tempos 0, 30, 60 minutos, os animais foram sacrificados e tiveram os tecidos cerebrais removidos e fixados em formol a 10% por 24 horas, a fim de serem devidamente processados para inclusão em parafina. Após esse procedimento, foram feitos cortes de 4 µm em micrótomo e colocados em lâminas de L-polilisina, apropriadas para a realização da imunohistoquímica. Foi utilizado o método de estreptavidina-biotina-peroxidase. A avaliação quantitativa foi feita por meio da contagem das células nervosas imunomarcadas, tanto neurônios quanto células da neuroglia, observadas com aumento de 400X em microscópio óptico modelo Olympus BX41. Foram observados dez campos de cada corte, com um total de 4 cortes por subgrupo, procurando-se sempre iniciar pela camada piramidal interna. Nas comparações entre os grupos (SSI) e (SIR) houve um aumento significante nas células NFkB-posittivas no grupo SIR nos tempos T30 (238,3±218,4 versus 1234,8±144,9); p=0,000 e T60 (586,5±141,2 versus 1286,3±85,0); p=0,000. Verificou-se também um aumento significante do TN no grupo SIR nos tempos T30 (214,0±17,3 versus 333,0±395,6); p=0,999 e fortemente, em T60 (263,8±42,9 versus 1015,5±102,8); p=0,00 e observou-se um aumento significante da IL-6 no tempo T60 no grupo SIR em comparação ao grupo SSI, (206,8±248,3 versus 316,0±365,4); p=0,999. Entretanto, as células marcadas pela HO-1, no grupo SIR, comparativamente ao grupo SSI, diminuíram significativamente nos tempos T30 (25,8±3,9 versus 11,3±13,0) p=1,000 e T60 (18,5±7,6 versus 9,8±13,7) p=1,000. Para as células expressando marcação para as citocinas IL-6 em T0 (311,0±246,5 versus 14,8±29,5); p=0,817. T30 (536,3±119,8 versus 9,0,3±18,0); p=0,033. T60 (316,0±365,4 versus 28,5±57,0); p=0,591. E TNF em T0 (30,3±36,0 versus 3,5±7,0); p=1,000 e T30 (333,0±395,6 versus 3,5±7,0); p=0,503, T60 (1015,5±102,8 versus 3,5±7,0); p=0,000 comparando-se os grupos (SIR) e (GIR), observou-se uma diminuição significante, em todos os tempos, no grupo GIR, contrariamente à imunomarcação da HO-1, que aumentou significativamente no grupo (GIR) tratado pela L-alanil-glutamina em T0 (32,5±9,7 versus 0,0+0,0); p=1,000. T30 (11,3±13,0 versus 6,8±13,5); p=1,000 e T60 (9,8±13,7 versus 7,5±15,0); p=1,000. Nas comparações entre os grupos (SIR) e (GIR), em relação ao NFkB, houve uma diminuição significante no grupo GIR em T30 (1234,8±144,9 versus 247,5±495,0); p=0,000 e T60 (1286,3±85 versus 217,8±435,5); p=0,000. Em conclusão, a administração prévia de L-alanil-glutamina, no presente experimento de isquemia/reperfusão cerebral, em gerbils, revelou efeito protetor da mesma, ao promover redução in situ na expressão de citocinas e fator de transcrição de genes pró-inflamatórios: TNF, IL-6 e NFkB. Concomitantemente, houve indução aumentada da expressão da enzima antioxidante HO-1, corroborando a ação protetora deste nutracêutico na injúria de isquemia/reperfusão, mormente do estresse inflamatório-oxidativo, em gerbils
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Efeito do uso da tadalafila, inibidor da fosfodiesterase tipo 5, na isquemia-reperfusão renal : estudo experimental em suínosMorales, Cláudio Miguel Pinto January 2010 (has links)
Objetivo: Avaliar os efeitos da tadalafila, um inibidor da fosfodiesterase tipo 5, nos valores teciduais renais de malondialdeído (produto da lipoperoxidação celular), nos níveis séricos de uréia e creatinina e na histologia renal em suínos submetidos à isquemia-reperfusão renal em rim único. Material e métodos: Doze suínos Large-White foram submetidos à uninefrectomia seguida por isquemia-reperfusão renal contralateral e separados aleatoriamente em dois grupos com ou sem tratamento com tadalafila 20 mg via oral. Foram analisados os resultados de lipoeroxidação, histologia e função renal. Resultados: Os valores teciduais de Malondialdeído (MDA) foram significativamente superiores no grupo não tratado com tadalafila (p<0,05), quando comparados ao grupo de animais tratados com o fármaco. Houve diferença estatística nos estudos histológicos, tendo ocorrido mais vacuolização e infiltrado polimorfonuclear intersticial no grupo não tratado com tadalafila. Não houve diferença significativa nas dosagens séricas de uréia e creatinina. Conclusão: Nosso estudo sugere, pela primeira vez na literatura, que a tadalafila tem um efeito protetor na isquemia e reperfusão renal em suínos, como evidenciado pelos resultados da lipoperoxidação e pelos estudos histológicos.
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Efeito do uso da tadalafila, inibidor da fosfodiesterase tipo 5, na isquemia-reperfusão renal : estudo experimental em suínosMorales, Cláudio Miguel Pinto January 2010 (has links)
Objetivo: Avaliar os efeitos da tadalafila, um inibidor da fosfodiesterase tipo 5, nos valores teciduais renais de malondialdeído (produto da lipoperoxidação celular), nos níveis séricos de uréia e creatinina e na histologia renal em suínos submetidos à isquemia-reperfusão renal em rim único. Material e métodos: Doze suínos Large-White foram submetidos à uninefrectomia seguida por isquemia-reperfusão renal contralateral e separados aleatoriamente em dois grupos com ou sem tratamento com tadalafila 20 mg via oral. Foram analisados os resultados de lipoeroxidação, histologia e função renal. Resultados: Os valores teciduais de Malondialdeído (MDA) foram significativamente superiores no grupo não tratado com tadalafila (p<0,05), quando comparados ao grupo de animais tratados com o fármaco. Houve diferença estatística nos estudos histológicos, tendo ocorrido mais vacuolização e infiltrado polimorfonuclear intersticial no grupo não tratado com tadalafila. Não houve diferença significativa nas dosagens séricas de uréia e creatinina. Conclusão: Nosso estudo sugere, pela primeira vez na literatura, que a tadalafila tem um efeito protetor na isquemia e reperfusão renal em suínos, como evidenciado pelos resultados da lipoperoxidação e pelos estudos histológicos.
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