Titre de l'écran-titre (visionné le 10 janvier 2024) / La rétention urinaire post-opératoire est une complication pouvant causer de sérieux inconvénients pour les patients, tels que la distension douloureuse de la vessie, ainsi que des conséquences infectieuses ou urologiques reliées à l'utilisation d'un cathéter. En plus, sa survenue peut nécessiter une admission imprévue et des soins post-hospitalisation additionnels. La microchirurgie transanale endoscopique (TEM) est une procédure plus fréquemment effectuée dans les dix dernières années et la rétention urinaire fait partie des complications les plus fréquentes. En fait, un homme sur quatre présente une rétention urinaire post-opératoire après une résection par TEM. En préparation à une étude à grande échelle dans cinq sites canadiens, nous avons effectué une étude de faisabilité dans deux des centres. Les objectifs étaient le taux de recrutement, l'adhérence au protocole et l'évaluation de l'issue primaire prévue. Nous avons randomisé avec succès 64 patients sur une durée de 13 mois et 62 patients ont été inclus pour l'analyse. L'âge médian des patients était de 66 ans (IQR, 61-73). Les raisons pour le non-recrutement incluaient le refus du patient, le trop court délais entre planification chirurgicale et la date d'opération et la présence de critères d'exclusion . L'objectif pour le taux de recrutement au site coordonnateur a été atteint, mais il n'a pas été atteint à l'autre centre canadien participant. L'adhérence au protocole et à la médication était élevée. Les résultats de cette étude de faisabilité ont montré que le recrutement hors du centre coordonnateur était difficile et la faisabilité d'un essai clinique multicentrique plus large était limitée. / Post-operative urinary retention (POUR) is a complication that can cause significant inconveniences for patients, as painful distension of the bladder, use of a catheter, urological or infectious consequences, unexpected hospital admission and additional outpatient care. Transanal endoscopic microsurgery (TEM) is a procedure that became more frequently performed in that last ten years and POUR is one of the most common complications that occurs. In fact, as many as one in four men experience post-operative urinary retention after TEM resection. In preparation of a large-scale, randomized clinical trial in five Canadian sites, we sought to determine the feasibility with a Vanguard phase in two of the sites. The objectives for the feasibility trial were to evaluate the recruitment rate, the outcome assessment and the protocol adherence. We successfully randomized 64 patients over a 13-month period, and 62 were included for the analysis. The median age of the patients was 66 (IQR, 61-73). The reasons for non-enrolment were the refusal of the patient, the delay before the surgery was too short, the patient did not meet eligibility criteria. The median recruitment rate over the study period target was met locally but not at our other participating site. The protocol and medication adherence were high. The results of this Vanguard phase revealed that recruitment outside the coordinating center was difficult and the feasibility of a larger multicenter randomized clinical trial was limited.

The effects of dietary broccoli on the body's ability to detoxify were studied in 18 male subjects between the ages of 22-40 years. The biological parameters used for measuring detoxification were the four major urinary conjugates, namely, mercapturates, sulfoconjugates, glucuronides, and amino acid conjugates. Dietary broccoli increased the urinary excretion of mercapturates and sulfoconjugates, but did not influence the excretion of glucuronides and amino acid conjugates. A significant linear trend was observed over the six-day broccoli diet treatment for both urinary mercapturate (P<0.005) and sulfoconjugate (P<0.0001) excretion. The linear trend for the mercapturate excretion was in a dose-dependent manner, resulting in a 1.3 and 2.1 fold increase by the third and sixth days, respectively, of the broccoli diet, compared to the control. For sulfoconjugates, an unexpected decrease was observed on the first day of the broccoli diet. However, within the six-day broccoli dietary treatment, a continuous increase in conjugate excretion was observed, resulting in a 2.5 fold increase by the sixth day compared to the first day. The excretion of sulfoconjugates was not necessarily dose-dependent, and increased excretion at the highest level of broccoli (500 g) could be due to a time effect. Overall, sulfoconjugate excretion was the highest (3.98-8.91 mmole/24 h) followed by the amino acid conjugates (3.06-5.99 mmole/24 h) and glucuronides (2.85-3.54 mmole/24 h). Mercapturate excretion was the lowest (0.16-0.34 mmole/24 h). In spite of its low excretion level, the level of urinary mercapturates appeared to be the most responsive urinary conjugate to the different levels of broccoli diet. / Ph. D.

In order to establish a profile of detoxification via glutathione conjugation, the level of urinary mercapturic acid excreted by a free-living male population and the effect of external environmental and genetic factors, such as consumption of vegetables, fruits, and meat, charbroiled food intake, tobacco, alcohol, caffeinated coffee, and marijuana use, exposure to chemicals and familial cancer incidence, were investigated. A subgroup of 30 subjects was randomly selected from 117 subjects who complied with the collection protocol. Three consecutive 24 hr urine samples of this subgroup were analyzed. The modified method of Seutter-Berlage et al (Chemical Porphyria in Man. Elsevier/North-Holland Biomedical Press, N.Y. 1979:233-236) was used for the quantitation of urinary mercapturic acid. The mean excretion of mercapturic acid was 0.27 mmole mercapturate (-SH)/24 hr and 18.1 umole -SH/mmole creatinine. An analysis of variance showed a large degree of inter- and intraindividual variability. The interindividual coefficients of variation in mmole -SH/24 hr and umole -SH/mmole creatinine were 37.7% and 31.2%, respectively. The intraindividual coefficients of variation in mmole -SH/24 hr and umole - SH/mmole creatinine were 32.4% and 30.1%, respectively. A higher (p≤0.05) excretion of mercapturic acid was observed among subjects with a high frequency of exposure to chemicals. The lack of significance of the other dietary, non-dietary, and genetic factors on the observed mercapturic acid excretion may be due to the large inter- and intravariability, the use of food consumption frequency in food intake analysis, and unequal sample sizes of subgroups. / Master of Science

No / An isocratic oil-in-water microemulsion High Performance Liquid Chromatography (MELC) was developed and validated for the determination of terbutaline in urine samples. A solid phase extraction (SPE) method which used Oasis HLB cartridges was optimised to isolate terbutaline from a urine matrix followed by HPLC with fluorescence detection. The urinary assay was performed in accordance with FDA and ICH regulations for the validation of bioanalytical samples. The method uses the isocratic oil-in-water micro emulsion to separate the terbutaline from the endogenous urine components. The chromatographic separation was carried out on C18-Spherisorb (250mm×4.6mm) analytical column maintained at 30 °C. The mobile phase was 94.4% aqueous orthophosphate buffer (adjusted to pH 3 with orthophosphoric acid), 0.5% ethyl acetate, 1.5% Brij35, 2.5% 1-butanol and 1.1% Octanesulfonic acid (OSA), all w/w. The terbutaline peak was detected by fluorescence detection, using excitation and emission wavelengths of 267 and 313 nm, respectively. The linearity of response was demonstrated at six different concentrations of terbutaline which were extracted from spiked urine, ranging from 60 to 1000ng/ml. The terbutaline was extracted from urine by a solid phase extraction clean-up procedure on Oasis HLB cartridges, and the relative recovery was >87.64% (n = 5). The limit of detection (LOD) and limit of quantitation (LOQ) in urine were 20.21 and 61.24ng/ml, respectively. The intra-day and inter-day precisions (in term of % coefficient of variation) were <3.56% and <2.87%, respectively. In the method development the influence of the composition of the microemulsion system was also studied and the method was found to be robust with respect to changes of the microemulsion components.

L’étiologie des troubles du spectre autistique (TSA) est multifactorielle mettant en jeu une forte composante génétique ainsi que des facteurs environnementaux. A ce jour, il n’existe aucun biomarqueur facilitant un diagnostic précoce des TSA, ce qui permettrait une meilleure prise en charge des patients. De plus, les mécanismes physiopathologiques sont encore mal connus. La majorité des études sur les TSA ont été réalisées sur des populations occidentales. Ainsi, nous avons voulu étudier un groupe de patients libanais atteints de TSA. Nos objectifs s’articulent autour de trois volets : 1) L’identification de facteurs de risques environnementaux dans le but de mieux comprendre la pathologie. Les résultats de cette étude ont montré que plusieurs facteurs tels que la consanguinité, le stress au cours de la grossesse et la prématurité semblent être des facteurs de risques. 2) L’identification des variations structurales dans le génome des enfants atteints de TSA afin d'évaluer la contribution de CNV par l'approche de CGH array à haute résolution. Cette étude nous a permis d’identifier de nouveaux gènes dans les TSA ainsi de confirmer la présence des régions et des gènes déjà cités dans des études précédentes sur les TSA. 3) L’identification des métabolites urinaires et des voies métaboliques associés afin de proposer des biomarqueurs aidant à un diagnostic précoce et à une meilleure compréhension de la physiopathologie de la maladie. De nouveaux métabolites ont été identifiés, comme nous avons confirmé des variations anomalies déjà citées dans la littérature concernant certains métabolites qui pourraient représenter des marqueurs robustes de la maladie. / The etiology of autism spectrum disorders (ASD) is multifactorial involving a strong genetic component as well as environmental factors. To date, there is no biomarker facilitating early diagnosis of ASD to improve patient management and outcomes. In addition, the physiopathological mechanisms are still poorly understood. Most studies on ASD have been conducted in Western populations. Thus, we wanted to study a group of Lebanese patients with ASD. Our objectives focus around three aspects: 1) The identification of environmental risk factors in order to better understand the pathology. The results of this study showed that several factors such as consanguinity, stress during pregnancy and prematurity appear to be risk factors. 2) The identification of structural variations in the genome of children with ASD in order to evaluate the contribution of CNV by high resolution CGH array approach. This study allowed us to identify new genes in ASD as well as to confirm the presence of regions and genes already cited in previous ASD studies. 3) The identification of metabolites and associated metabolic pathways to provide biomarkers for early diagnosis and to better understanding of the pathophysiology of the disease. New metabolites have been identified and we have confirmed variations already mentioned in the literature concerning certain metabolites that could represent robust markers of the disease.

Le MTX est un agent anticancéreux utilisé à hautes doses pour le traitement des hémopathies malignes et de certaines tumeurs solides. Il présente une importante variabilité pharmacocinétique (PK) traduite par des surexpositions à l'origine de toxicités très sévères, surtout lors d'une administration à haute dose. Les retards d'élimination du MTX surviennent encore de manière inattendue et il n'existe à ce jour aucun biomarqueur qui permette un diagnostic précoce du risque de surexposition. Nos travaux ont focalisé sur les déterminants de l'élimination rénale du MTX, et en particulier le rôle du transporteur MRP2/ABCC2 dans ce processus. Ce travail s'inscrit donc (1) dans la recherche de biomarqueurs métabolomiques urinaires prédictifs de la PK du MTX et (2) dans l'identification de substrats endogènes de MRP2 parmi un panel de 217 acides organiques urinaires analysés par chromatographie gazeuse couplée à la spectrométrie de masse. Nos analyses ont abouti à un profil de 28 anions organiques endogènes, prédictifs de la CL MTX. L'outil était en revanche mal adapté à la prédiction des retards d'élimination. Pour la 2eme partie, nos résultats tendent à montrer que 8 métabolites urinaires sont des bio-marqueurs potentiels de l'activité de MRP2. Leur utilisation en clinique nécessite encore des études confirmatoires. / MTX is an anticancer agent used at high doses for the treatment of malignant haemopathies and some solid tumors. It presents an important pharmacokinetic variability (PK), manifested by overexposures causing very severe toxicities, especially when administered at high doses. Delayed elimination of MTX still occurs unexpectedly and there is currently no biomarker that allows early diagnosis of the risk of overexposure. Our work focused on the determinants of renal elimination of MTX, and particularly on the role of MRP2 / ABCC2 in this process. This work is therefore devoted to (1) the search for metabolomic biomarkers predictive of MTX PK and (2) the identification of endogenous substrates of MRP2, from a panel of 217 urinary organic acids analyzed by gas chromatography-mass spectrometry. Our analyses resulted in a profile of 28 endogenous organic anions, predictive of CL MTX. The tool was, on the other hand, poorly adapted to the prediction of delayed elimination. For the second part, our results tend to show that 8 urinary metabolites are potential biomarkers of MRP2 activity. Their clinical use still requires confirmatory studies.

Xiao, Yajie. / Thesis (Ph.D.)--Chinese University of Hong Kong, 2013. / Includes bibliographical references (leaves 156-190). / Electronic reproduction. Hong Kong : Chinese University of Hong Kong, [2012] System requirements: Adobe Acrobat Reader. Available via World Wide Web. / Abstract also in Chinese.

La dengue est une maladie virale des régions tropicales et subtropicales, transmise par les moustiques du genre Aedes. Le virus de la dengue (DENV) appartient à la famille des Flaviviridae, genre Flavivirus. Si la plupart des infections sont asymptomatiques ou se traduisent par un syndrome fébrile sans gravité, le virus peut aussi causer une maladie plus sévère caractérisée par une fuite plasmatique, avec ou sans hémorragie. Sans prise en charge adéquate, les formes les plus sévères peuvent évoluer vers un syndrome de choc, potentiellement mortel. Il n’existe pas de traitement spécifique de la dengue mais une réhydratation adaptée et débutée précocement permet de réduire la survenue de formes sévères de la maladie. Malheureusement, les symptômes initiaux de la dengue avant la survenue des éventuelles complications ne sont pas spécifiques et seul un diagnostic biologique basé sur la détection du génome viral, de l’antigène NS1 ou des anticorps anti-DENV dans le sang des patients permet de confirmer la nature exacte de l’infection. La dengue constitue à l’heure actuelle un problème majeur de santé publique du fait de son expansion mondiale et de l’augmentation annuelle du nombre de cas sévères. Pour assurer la surveillance épidémiologique et le contrôle de la maladie, il est indispensable de développer des outils diagnostiques performants et faciles à mettre en œuvre, à la fois utilisables par les médecins de toutes les structures médicales, des simples centres de soins de santé primaire aux centres de référence, et utilisables lors d’enquêtes épidémiologiques pour l’investigation de nouvelles épidémies. Le travail de cette thèse a porté sur plusieurs aspects de cette problématique. Dans une première partie, un test commercial de diagnostic rapide (TDR) permettant la détection simultanée de la NS1 et des IgG et IgM anti-DENV, a été évalué, en laboratoire spécialisé et sur le terrain, afin de comparer, à partir des mêmes échantillons, les performances du test dans deux situations différentes. La sensibilité s’est révélée plus faible lors de l’utilisation sur le terrain que lors de l’utilisation en laboratoire de référence. La majorité des discordances a été observées pour la détection des IgG et des IgM. L’impact de la mise à disposition du test sur la prise en charge des patients a également été évalué et il s’est avéré qu’au cours de cette étude les pédiatres cambodgiens ont ignorés les résultats du test rapide et ont préféré suivre leur instinct clinique.Un second volet a porté sur la faisabilité d’utiliser les urines et la salive en remplacement du sang veineux pour les tests employés en routine pour le diagnostic de la dengue. Les urines et la salive sont des fluides biologiques plus faciles à prélever que le sang veineux ce qui présente un avantage majeur pour les enquêtes épidémiologiques mais peut également secourir les médecins lorsqu’un prélèvement de sang veineux est difficile à obtenir, par exemple chez les enfants. Bien que les performances des différentes méthodes de diagnostic ne soient pas aussi bonnes avec de l’urine et la salive qu’avec du plasma, les résultats obtenus par PCR en temps réel et avec les ELISAs de détection des anticorps anti-DENV démontrent l’intérêt potentiel de ces deux fluides biologiques pour détecter les infections par le DENV lorsqu’il est difficile d’obtenir du sang veineux. Plusieurs TDR commerciaux développés pour permettre la détection de la NS1 et des anticorps anti-DENV (IgM, IgG et IgA) dans les urines et la salive ont été évalués mais les performances obtenues se sont révélées peu satisfaisantes.Une dernière partie du travail a été consacrée à l’étude de la protéinurie comme marqueur pronostic potentiel de sévérité de la dengue. Ce marqueur biologique ne s’est pas révélé être utile pour diagnostiquer précocement les formes sévères de la maladie. / Dengue is a viral disease transmitted by Aedes species mosquitoes, in tropical and subtropical regions. Dengue virus (DENV) belongs to the family Flaviviridae, genus Flavivirus. Although most DENV infections are asymptomatic or result in a self-limited febrile illness, severe diseases characterized by plasma leakage, with or without hemorrhage, can also occur. Patients with a severe dengue can rapidly progress into a life-threatening shock syndrome if no efficient clinical management is provided. There is no specific treatment available for dengue but an accurate and early fluid therapy substantially reduces the occurrence of severe forms of the disease. Dengue symptoms are typically non-specific until or unless complications develop. Only a biologic diagnosis based on DENV genome, NS1 antigen or anti-DENV antibodies detection enables to confirm dengue cases. Dengue is now a major public health problem due to both its geographical spread and the increase in the number of severe cases. New diagnostic tools are necessary to ensure epidemiological surveillance and control of the disease. These tools need to be effective and easy to use in every medical settings, from the smallest primary health centers to the biggest reference centers, and also usable for epidemiologic studies, e.g. for epidemic investigations. The work presented in this thesis was dedicated to this problematic.In a first part of the work, a rapid diagnostic test (RDT), designed to detect NS1 antigen, anti-DENV IgG and IgM, was evaluated, both in a specialized laboratory and in the field, in order to compare the test performances in two different settings, with the same samples. Interestingly, sensitivity was lower when the test was used in the field compared to the sensitivity of the test when performed in the specialized laboratory. Discordances were mainly observed for IgM and IgG detection. Impact of the use of the RDT on clinical management was also assessed during the field study and it revealed that Cambodian pediatricians ignored the results of the RDT and followed their clinical instinct.A second part of the work was dedicated to the assessment of the usefulness of urine and saliva for dengue diagnostic. Dengue diagnostic normally requires a venous blood sample that can be difficult to obtain in certain conditions such as in children or during epidemiological studies. Urine and saliva are easier to collect as the procedure is non-invasive. We showed that, although the performances of the different diagnostic methods were not as good in saliva and urine as in plasma specimens, the results obtained by qRT-PCR and by anti-DENV antibody ELISA could well justify the use of these two body fluids to detect dengue infection in situations when the collection of blood samples is difficult. Performances of commercial RDTs developed for NS1 and anti-DENV antibodies (IgM, IgG and IgA) detection in urine and saliva specimens were not satisfactory.In the last part of the thesis, the potential use of proteinuria as a prognostic marker of severity was assessed but it didn’t prove to be a useful marker for risk prediction.

Chronic kidney disease (CKD) is a major cause of illness in dogs, and it is commonly caused by glomerular diseases that result in proteinuria and a progressive decline in renal function. Despite the importance of glomerular lesions, tubulointerstitial fibrosis identified by histologic evaluation of renal biopsies correlates best with renal function. However, performing a renal biopsy is invasive. Most current non-invasive tests for renal function lack adequate sensitivity and specificity for renal disease. Proteinuria can be both a sensitive and specific marker for renal damage. However, its evaluation in veterinary medicine beyond determination of the magnitude of proteinuria (e.g., urine protein:creatinine ratio (UPC)) is limited. Therefore, in this report, further evaluation of the UPC was performed to aid in the monitoring of renal disease progression and response to treatment. In addition, qualitative evaluation of proteinuria was performed in dogs with progressive CKD in order to identify better non-invasive markers for tubulointerstitial injury. The day-to-day variability of the UPC was determined utilizing data obtained from female dogs that are carriers for X-linked hereditary nephropathy (XLHN). Despite an unchanging magnitude of proteinuria in these dogs, substantial variation in their UPC was observed. Using these results, guidelines were suggested to help assess whether disease progression or treatment leads to a significant change in UPC. Qualitative characterization of proteinuria in dogs with CKD was performed using urine from male dogs affected with XLHN, and results were correlated with clinical and histologic findings concerning renal function and damage. The two discovery proteomic techniques utilized (chromatographic chip array and two-dimensional gel electrophoresis) revealed several proteins that have not previously been implicated as markers for canine CKD, providing a basis for future studies. Specific assays for urinary biomarkers of renal injury were used to serially evaluate renal function in these dogs. All proteins evaluated proved to be sensitive markers for renal damage. However, only retinol binding protein provided clear evidence for renal disease progression. These results will provide the foundation for future studies aimed at monitoring urinary biomarkers in dogs with CKD, which will ultimately help veterinarians better diagnose and monitor proteinuric renal disease.

Le développement de systèmes d’assainissement spécifiques et décentralisés peut apporter des réponses à une double problématique : l’amélioration des conditions sanitaires dans les zones les plus pauvres du monde et le développement de sources renouvelables de nutriments essentiels pour l’agriculture. L’objectif de cette thèse est de développer des connaissances scientifiques sur une filière de traitement et valorisation de l’urine couplant une cristallisation à une séparation membranaire. Il a été démontré que la précipitation de phosphore sous forme de struvite permet de récupérer la quasi-totalité du phosphore et une partie de l’azote en 20 secondes environ suite à l’ajout de magnésium avec un ratio Mg :P=1,3 :1. L’influence des conditions d’agitation, de l’apport en magnésium, des conditions de stockage de l’urine et de la présence de matières organiques et de cristaux initiaux a été étudié en réacteur batch et continu.L’ultrafiltration de différents types d’urine (fraichement excrétée, stockée, stockée puis cristallisée) a été réalisée avec des membranes en PES, PAN et PVDF. Les mécanismes responsables de cette chute de flux ainsi que l’influence spécifique des fractions particulaires colloïdales et particulaires ont été étudiés. En se basant sur ces résultats différents procédés ont été proposés et discutés / The development of decentralized and specific sanitation system is an issue that concerns both the improvement of sanitary conditions in the poorest area of the world and the development of renewable sources of nutrients for agriculture. This study aims to provide some elements about a treatment line including crystallization and membrane separation for the treatment and valorization of urine. Crystallization allows to recover phosphorus and part of nitrogen contained in urine. Membrane separation is used in order to remove bacteria and viruses from urine. To check the potentialities of these processes some tests were performed at labscale with synthetic and real human urines.It was shown that the struvite crystallization by magnesium addition with a ratio Mg:P=1,3:1 allows recovering most of the phosphorus from urine with a very rapid kinetics (about 20s). Influence of mixing conditions, urine storage, organic matter and initial crystals in urine was studied in batch and continuous reactor. Ultrafiltrations of different pretreated urines (no pretreatment, stored urine, stored and crystallized urine) were performed with PES, PAN and PVDF membranes. Mechanisms responsible for an important flux decline during urine flitration were studied. Specific influence of particular, colloidal and soluble fraction on the flux decline was also evidenced. On these basis different possible treatment lines of urines are proposed and discussed