Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-16Bitstream added on 2014-06-13T20:20:20Z : No. of bitstreams: 1 vilela_jr_me_botfm.pdf: 328339 bytes, checksum: 3e8e5de0c2b9a25e5e58101a7e887aff (MD5) / Fundação de Ensino e Pesquisa em Ciências da Saúde (FEPECS) / A histerossonografia (HSN) foi descrita pela primeira vez há três décadas. A infusão de solução salina na cavidade uterina favorece sua exploração e proporciona excelente visualização da anatomia e do interior da cavidade do útero melhor do que com ultrassonografia transvaginal convencional (USG). Para verificar o papel atual da HSN na avaliação da cavidade uterina de mulheres com sangramento uterino anormal (SUA) e assintomática, foi realizado revisão bibliográfica de estudos que compararam a HSN com a USG ou histeroscopia diagnóstica ambulatorial (HTDx). Para isso, pesquisou-se estudos relevantes em bases de dados eletrônicas Medline/PubMed, SciELO/LILACS. A HSN é procedimento ambulatorial, “não invasivo”, de melhor custo-benefício, com melhor sensibilidade e especificidade na identificação de anomalias uterinas, causando desconforto mínimo e com baixo índice de complicações. Foi objeto de revisões, não existindo mais dúvidas quanto a sua acurácia. Pode-se concluir que a HSN é ferramenta útil na propedêutica de avaliação da cavidade uterina de mulheres sintomáticas com SUA, infertilidade e perdas gestacionais repetidas, falhas de implantação embrionária em programas com técnicas de reprodução assistida (TRA) / fertilização in vitro (FIV) e naquelas com qualquer alteração uterina intra ou extracavitária na USG. Portanto, está indicada como método de avaliação inicial da cavidade uterina antes de indicar HTDx / Sonohysterography (HSN) was firstly described three decades ago. The saline solution infusion into the uterine cavity favors its use and provides excellent visualization of the anatomy and the inner cavity of the uterus better than the conventional transvaginal sonography (USG). To check the current role of HSN in the uterine cavity assessment in women with abnormal uterine bleeding (AUB) and asymptomatic, a literature review comparing HSN with USG and/or ambulatory diagnostic hysteroscopy (HTDx) was carried out. To this end, relevant studies were researched in electronic databases Medline/PubMed, SciELO/LILACS. The HSN is an ambulatory procedure, non-invasive, better cost-benefit, better sensitivity and specificity to identify uterine abnormalities, causing minimal discomfort and low complications rate. It was subject to revision which there is no more doubt about its accuracy. It can be concluded that the HSN is a useful tool in the propedeutics to assess uterine cavity of symptomatic patients with SUA, infertility, recurrent miscarriages, and embryonic implantation failures in assisted reproduction treatment (ART) / in vitro fertilization (FIV) and in any other intra and extra uterine cavity alteration. Hence, USG is indicated as an initial method of assessment of the uterine cavity previously to HTDx

Orientador: Ilza Maria Urbano Monteiro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-17T15:37:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Belisiario_MiriamSieslerNobrega_D.pdf: 2303444 bytes, checksum: 6d5515eb40ca077499a875dbe2bb5487 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo:Introdução: Menorragia, ou sangramento uterino anormal é definido como uma perda menstrual maior que 80ml por ciclo, quando não se encontra nenhuma causa específica para este sangramento aumentado, tem se denominado hemorragia uterina disfuncional (HUD). O valor de corte de 80ml foi avaliado como sendo um valor para risco de desenvolvimento de repercussões hemodinâmicas, o que vem sendo questionado atualmente. Entretanto o desenvolvimento de anemia ou outras alterações hemodinâmicas não são as únicas razões para alterar a qualidade de vida nas mulheres modernas. O método da hematina alcalina é o mais confiável para mensurar a perda sanguínea menstrual, porém complexo para ser utilizado na prática clínica diária. A tabela ilustrativa denominada "Pictorial Blood Assessment Chart" (PBAC) mostrou uma boa correlação com o teste da hematina alcalina, é um método simples, barato, com uma acurácia razoável e fácil de ser utilizado pelas pacientes. Nos Estados Unidos da América somente o uso do ácido tranexâmico de liberação lenta (Lysteda¿ (Ferring Pharmaceuticals, Parsippany, New Jersey, USA) e o sistema intrauterino liberador de levonorgestrel (SIU-LNG) são aprovados pelo US FDA para o tratamento da HUD. Na Europa, América Latina e Ásia, entretanto, outros tratamento clínicos são utilizados, como anti-inflamatórios não esteróides, contraceptivos orais e ácido tranexâmico. Objetivo: Avaliar a eficácia do ácido tranexâmico em doses baixas e do SIU-LNG no tratamento da HUD e revisar o protocolo de atendimento às mulheres com sangramento uterino aumentado e aplicar no ambulatório de menorragia do Centro de Atenção Integrada à Saúde da Mulher (CAISM), da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Método: Foi realizado um estudo prospectivo randomizado (ensaio clínico), em mulheres com diagnóstico de HUD, ou seja, com "Pictorial Blood Assessment Chart" (PBAC) acima de 100. Estas pacientes foram tratadas, aleatoriamente, com ácido tranexâmico (1,5g/dia, por cinco dias) ou com SIU-LNG por um período de seis meses. Todas as pacientes aceitaram participar do estudo e assinaram o termo de consentimento livre e esclarecido. As variáveis analisadas foram variação do escore do PBAC e efeitos colaterais em 1, 3 e 6 meses e hemoglobin (Hb), hematócrito (Htc) e grau de satisfação ao final do estudo. Para o diagnóstico de HUD todas as mulheres foram submetidas a ecografia transvaginal e histeroscopia diagnóstica com biópsia de endométrio. Um total de 38 mulheres foram randomizadas, sendo que quatro delas não retornaram após a randomização e 17 pacientes em cada grupo terminaram o estudo. Durante a realização do estudo foi realizada uma revisão na literatura sobre a abordagem do sangramento menstrual aumentado e tratamento de HUD, com o propósito de aplicação no ambulatório de menorragia implantado durante a realização do mesmo, visto que muitos médicos ainda não prescrevem os melhores tratamentos para estas pacientes. Resultados: Ao final do estudo, a redução da média do escore de sangramento e o aumento nos níveis de Hb e Htc foram significativamente maiores no grupo tratado com o SIU-LNG comparado com ácido tranexâmico. A proporção de mulheres satisfeitas com o tratamento também foi maior nas usuárias do SIU-LNG, mas não houve diferença significativa, e o grau de satisfação nas pacientes em uso de ácido tranexâmico foi considerável (70,6%) apesar de redução do PBAC em 65% no sexto mês de tratamento. Não foi observado nenhum efeito colateral severo nos dois grupos, o grupo tratado com o SIU-LNG apresentou uma maior freqüência de dor pélvica no primeiro e terceiro mês de tratamento, com diferença significativa. A partir deste estudo foi elaborada uma revisão do protocolo de atendimento às mulheres com sangramento uterino aumentado e do tratamento de HUD. Conclusão: Em conclusão nosso estudo mostrou que o ácido tranexâmico pode ser uma opção segura, que reduz em torno de 65% a perda sanguínea e com alto grau de satisfação, podendo ser uma opção para o tratamento de HUD em pacientes com contra-indicações ao uso de terapia hormonal, como por exemplo, pacientes com câncer de mama. A partir deste estudo foi criado um ambulatório específico para atendimento das mulheres com sangramento menstrual aumentado, denominado de Ambulatório de Menorragia e foi instituído o uso do PBAC como instrumento para auxiliar no diagnóstico e no controle do tratamento destas mulheres / Abstract: Introduction: Menorrhagia or heavy menstrual bleeding was classically defined as menstrual blood loss of at least 80mL per cycle, when there is no specific cause for this increased bleeding, has been called dysfunctional uterine bleeding (DUB). The cutoff of 80ml was evaluated as a value for risk of hemodynamics, which is being questioned today. Nevertheless, it should be considered that the development of anemia or other hemodynamic alterations are not the only reasons for impaired quality of life in modern women. The most reliable method to assess menstrual blood loss is the alkaline hematin method, but it is too complex to perform in daily clinical practice. A diagram using an illustrated table named "Pictorial Blood Assessment Chart" (PBAC) showed a good correlation with the alkaline hematin test. It is a simple, inexpensive method with reasonable accuracy that patients find easy to use. In the United States of America only the use of slow-releasing tranexamic acid (Lysteda¿ (Ferring Pharmaceuticals, Parsippany, New Jersey, USA) and levonorgestrel-releasing intrauterine system (LNG-IUS) are approved by the FDA for the management of dysfunctional uterine bleeding (DUB). In Europe, Latin America and Asia, however, other clinical treatments have been used, such as nonesteroidal antiinflammatory agents, oral contraceptives and tranexamic acid. Objective: To evaluate the efficacy of tranexamic acid in low doses and the levonorgestrel releasing- intrauterine system (LNG-IUS) in the treatment of dysfunctional uterine bleeding (DUB) and review the protocol in treating women with uterine bleeding abnormal and applied in the Menorrhagia Outpatient Clinic in the Women's Integral Healthcare Center (CAISM), of the State University of Campinas-UNICAMP Medical School. Study Design: In this prospective randomized study, women diagnosed with DUB ("Pictorial Blood Assessment Chart" (PBAC) ? 100) were randomly treated with tranexamic acid (1.5g/day, for 5 days) or LNG-IUS for six months. Written informed consent was obtained from all participants before entry into the study. Ranges in the PBAC score and side effects were evaluated at 1 month, 3 and 6 months. In addition, levels of hemoglobin, hematocrit and satisfaction of the patient were assessed at the end of the study. DUB for the diagnosis of all women underwent transvaginal sonography and hysteroscopy with endometrial biopsy. A total of 38 women were randomized, and four of them did not return after randomization and 17 patients in each group completed the study. During the study was performed a literature review on the approach of increased menstrual bleeding and treatment of DUB, for the purpose of application in the Menorrhagia Outpatient Clinic deployed during the course of it, since many doctors do not prescribe the best treatments for these patients. Results: Three hundred and fifty-three (353) patients were examined and 34 were randomly assigned (17 to each group). A reduction in the mean bleeding score and increase in hemoglobin and hematocrit levels were significantly higher in the group treated with LNG-IUS compared with the group treated with tranexamic acid. There was no statistically significant difference in relation to satisfaction and 70.6% of patients in the tranexamic acid group were satisfied despite a 65% reduction in PBAC in the sixth month of treatment. Severe side effects were not observed in either group. From this study it was an elaborate review of the protocol in treating women with uterine bleeding and increased treatment of DUB. Conclusion: In conclusion our study showed that tranexamic acid may be a safe option, which reduces by about 65% blood loss and a high degree of satisfaction for the treatment of DUB, and may be an option for the treatment of DUB in patients with contraindications to hormonal therapy, such as patients with breast cancer. From this study it was created a specific clinic for the care of women with abnormal menstrual bleeding, and was set up using the PBAC as a tool to aid in the diagnosis and control of treatment of women / Doutorado / Fisiopatologia Ginecológica / Doutor em Ciências da Saúde

O mecônio é uma matéria fecal que começa a acumular no intestino do feto por volta do terceiro mês de gestação e normalmente é eliminado nos primeiros dias de vida do recém nascido. No mecônio ocorre o acúmulo de substâncias com as quais a mãe entrou em contato durante o período de gestação e, portanto, sendo possível avaliar a exposição fetal. Nos casos de mães fumantes, compostos presentes no tabaco tais como nicotina e substâncias que são formadas após a metabolização da nicotina como por exemplo a cotinina, podem ser também detectadas nas amostras de mecônio, já que ocorre o acúmulo de nicotina e seus metabólitos no mesmo. O uso do cigarro durante o período gestacional acarreta em uma série de problemas ao feto como baixo peso ao nascer, parto pré-maturo, doenças no trato respiratório, dentre outros. Nos dias atuais é possível fazer a pesquisa de drogas lícitas e ilícitas em várias amostras biológicas tais como, sangue, urina, cabelo, fluido oral, mecônio, entre outras. O mecônio é uma boa opção, por vários motivos: amostragem fácil e não invasiva (a coleta pode ser feita na fralda), indica o histórico do uso de substâncias pela mãe durante a gestação por ser cumulativo, etc. O objetivo foi desenvolver e validar um método analítico empregando cromatografia em fase gasosa acoplada a espectrometria de massas para a determinação de nicotina e, seu metabólito, cotinina em amostras de mecônio coletadas de recém nascidos. Para o desenvolvimento do método foi utilizado 0,5g de mecônio e os analitos foram extraídos com metanol e em seguida a amostra foi submetida a purificação através da extração em fase sólida utilizando cartuchos Bond Elut Certify I. O método foi validado de acordo com os parâmetros estabelecidos pela ANVISA e demonstrou linearidade de 160 1600 ng/g para nicotina e de 160 1000 ng/g para cotinina. Os limites de detecção estabelecidos foram de 10 ng/g para nicotina e 60 ng/g para cotinina, enquanto os limites de quantificação foram de 60 ng/g para nicotina e 100 ng/g para cotinina. A exatidão apresentou valores de 91,73% a 103,73%, a precisão intra-ensaio variou entre 3,21% a 10,86%, e a precisão inter-ensaio obteve valores entre 4,91% a 9,88%. O método validado foi aplicado em amostras de mecônio coletadas no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (HCFMRP-USP). / Meconium is a fecal matter passed by the newborn after birth. It begins to form around the 3th month of gestation and accumulates in the fetus until birth. Substances which the mothers had contact during the gestation period may accumulate in meconium and, therefore, its possible to assess fetal exposure. Substances from the tobacco smoke, like nicotine and its metabolite cotinine, also accumulates in the meconium and can be detected .Maternal smoking during pregnancy is hazardous to the fetus and it is associated with low birth weight, prematurity, respiratory tract infections and others. Nowadays it is possible to assess licit and illicit drugs in several biological samples like blood, urine, hair, oral fluid, meconium and others. Meconium is the best choice because its easy to collect and its noninvasive, indicates a history of substances use by the mother in the latter half of pregnancy, etc. The purpose of this study was to develop and validate a methodology using gas chromatography-mass spectrometry to assess nicotine and cotinine in meconium samples collected from newborns. To the development of the methodology 0,5g of meconium was used per assay and the analytes were extracted from the matrix using methanol. Then, a solid phase extraction was applied using Bond Elut Certify I cartridges. The methodology was validated in the range of 160 1600 ng/g for nicotine and 160 - 1000 ng/g for cotinine. The limit of detection established was 10 ng/g for nicotine and 60 ng/g for cotinine, while the limit of quantification was 60 ng/g for nicotine and 100 ng/g for cotinine. The accuracy showed values between 91,73% and 103,73%, the intra-assay precision between 3,21% and 10,86% and the inter-assay precision between 4,91% and 9,88%. The validated methodology was applied to analysis of meconium samples collected from newborns in the Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (HCFMRP-USP).

Pocket proteins (pRb, p107 and p130) are well studied in the role of regulating cell proliferation by controlling progression through the G1/S phase of the cell cycle. Increasing genetic and anatomical evidence suggests that these proteins also control early differentiation and even later stages of cell maturation including neural migration. However, the multifaceted functions of pocket proteins in the regulation of cell proliferation and cell death has complicated our interpretation of their role during development. As a result, the mechanisms through which pocket proteins regulate neuronal migration and neural maturation remain unknown. Using a pRb and p107 double knock out model, we show that a population of upper layer cortical neurons fails to pass through the intermediate zone into the cortical plate. Importantly, these neurons are born at the appropriate time and have exited the cell cycle. In addition, the role of pocket proteins in radial migration is independent cell death, since this migration defect cannot be rescued by eliminating ectopic cell death through Bax deletion. We also show a novel role of pRb and p107 in development of the dorsal midline and guidance of callosal axons. In the absence of pRb and p107, the structures of the commissural plate are highly disorganized and the callosal axons fail to cross the midline. We identify primary defects in axon extension and expression of multiple guidance cues, which can be observed prior to the disorganization of the midline axon guidance structures. Through the use of in vitro cortical explants and in utero electroporation, we identify defects in the rate of axon extension and directional guidance independent from the midline. In addition, protein levels of Netrin and Neuropilin-1 are decreased in the absence of pRb and p107, which could mediate the function of pocket proteins in guiding callosal axons. Indeed, we identify a previously undescribed population of Netrin expressing cells in the cingulate cortex of control embryos which is lost in the pRb/p107 deficient littermates. We propose that these cells play a significant role in callosal axon guidance during normal development. The results presented in this dissertation define multiple novel roles of pRb and p107 in the regulation of radial migration and axon guidance, independent from the role of these pocket proteins in cell death and proliferation.

Doctor Scientiae / In utero exposure to teratogens, increasing urbanization, rapid nutritional transition from poverty to affluence, adoption of a Western-style diet and physical inactivity have contributed to the growing obesity epidemic in the low-income countries. To investigate the associations between in utero exposure to alcohol and nicotine on the growth and development of children aged five years from a low-income setting. These effects will be observed in children aged five years as a reduced pancreas and kidney size, higher aorta and carotid intima thickness as well as higher visceral abdominal adiposity measurements.

Determina los grados de radiodermitis a nivel inguinal en pacientes con tratamiento de radioterapia externa para cáncer de cérvix estadio clínico III atendidos en el Instituto Nacional de Enfermedades Neoplásicas entre los meses de agosto 2016 a julio 2017. Realiza un estudio con enfoque cuantitativo, de tipo observacional, diseño descriptivo, retrospectivo y de corte transversal, cuya muestra estuvo conformada por 70 historias clínicas de las pacientes con cáncer de cérvix en estadio IIIA-IIIB que recibieron tratamiento de radioterapia externa, elegidas por muestreo no probabilístico por conveniencia. En el análisis estadístico, se calcularon frecuencias absolutas y relativas, así como rangos promedio y desviación estándar. Encuentra que la frecuencia de desarrollo de radiodermitis a nivel inguinal fue de un 80%. La radiodermitis grado 2, se presentó en 37.8% de las pacientes que fueron prescritas con una dosis/ fracción de 4000 cGy en 10 sesiones, comparado con el 51.5% de pacientes que fueron prescrita con dosis /fracción de 5000 cGy en 25 sesiones. Asimismo, la radiodermitis a nivel inguinal apareció en promedio en la 12.1±5.7 sesión de radioterapia externa en el tratamiento de cáncer de cérvix en estadio clínico III. La dosis acumulada promedio fue de 3171.4± 829.8 cGy, de las cuales, las pacientes que fueron prescritas con dosis fracción de 4000/10 tenían una dosis acumulada promedio de 2971.4 ± 803.2 cGy y las prescritas con una dosis fracción de 5000/25 tenían una dosis acumulada promedio de 3371.4± 821.4. También se encontró que las pacientes que tuvieron un rango de edad de 20 a 39 años presentaron radiodermitis de grado 0 (40%) y 1 (40%), las que tuvieron de 40 a 59 tuvieron radiodermitis de grado 1 (33.3%) y 2 (40.7%), las que tuvieron rangos de edad de 60 a 79 tuvieron radiodermitis de grado 1 (34.5%) y 2(37.9%) y los de 80 años a más, en su mayoría, radiodermitis de grado 2 (88,9%). Concluye que los grados de radiodermitis más frecuentes a nivel inguinal en pacientes con tratamiento de radioterapia externa para cáncer de cérvix estadio clínico III atendidos en el Instituto Nacional de Enfermedades Neoplásicas entre los meses de agosto 2016 a julio 2017 son los de grado uno (31.4%) y dos (44.3%). / Tesis

Magister Scientiae (Medical Bioscience) - MSc(MBS) / Cardiovascular diseases (CVD) are among the top 10 causes of death in all ages in South Africa. The prevalence of maternal smoking and alcohol consumption during pregnancy is alarmingly high in South Africa. In utero exposure to nicotine and alcohol may cause CVD later in life. There is a global need for early detection of CVD especially those vulnerable during early childhood, to prevent the development of CVD risk factors in adulthood. The aim of this study was to compare CVD risk in five-year-old children from a low socio-economic population with in utero dual exposure to nicotine and alcohol and in utero nicotine exposure by measuring carotid intima-media thickness (cIMT), anthropometric measurements and clinical measurements including blood pressure. A case-control study was conducted on 468 children at five years old through interviews to collect data on demographic characteristics and health statistics. The cIMT was measured using B-mode ultrasonography. Anthropometric measurements were taken such as skinfold thickness, waist circumference, height and weight to calculate Body Mass Index (BMI). Blood pressure measurements such as systolic blood pressure (SBP), diastolic blood pressure (DBP), mean arterial pressure (MAP) and heart rate (HR) were taken. The data was analysed using SPSS version 26. Descriptive and inferential statistics (Spearman’s correlations, non-parametric partial correlations), Kruskal-Wallis H, Chi-square tests and logistic regression were used for statistical analysis. Results showed a significantly higher right cIMT (RcIMT) (0.36 ± 0.05 mm; P < 0.01) in children with in utero exposure to nicotine and alcohol during pregnancy and a higher RcIMT in males (0.37 ± 0.06 mm; P < 0.01) with in utero dual exposure to nicotine and alcohol when compared to females. A significant association was found between in utero dual exposure to nicotine and alcohol and a high RcIMT, specifically in females at five years old after the adjustment for confounders (B= -1.618, P = 0.002). Consequently, females in the dual exposed group were 7.6 times more likely to exhibit higher RcIMT with a relative risk of 2.6 times greater to children with no exposure. Females also had significantly higher SBP (U= 3829.50, p <0.01), DBP (U= 3527.50, p <0.05), MAP (U= 3561.00, p <0.05) and HR (U= 3887.50, p <0.01) in the dual exposed group. Cardiovascular risk factors were modestly prevalent at five years old in children with in utero teratogen exposures. However, increased adiposity indices were not observed in this population at five years old and were not associated with teratogen exposures. This may indicate that dual exposure to nicotine and alcohol has a significant effect on the intima-media thickness of the carotid arteries in children, but not necessarily on central and peripheral adiposity at five years old. Therefore, CVD risk factors need to be identified early in children in low socioeconomic regions with in utero exposure to nicotine and alcohol to prevent CVD later in life.

Objetivo: Demostrar el efecto inhibidor del extracto etanólico de Cyperus rotundus (Piri-Piri) sobre la contractibilidad de la fibra uterina in vitro en ratas albinas. Método: Estudio de tipo experimental, diseño pre clínico. La muestra de estudio estuvo constituida por 15 ratas cepa Holtzman albinas con peso entre 250-300gr. Previo al experimento se estrogenizó a cada rata con cipionato de estradiol 0,1mg/kg IM. Luego, se extrajo en total 30 cuernos de útero de rata, los cuales se colocaron en el equipo de órgano aislado (Modelo LE 1-046) para el registro de los componentes de la contracción: intensidad, frecuencia y duración, obtenidas a través de la estimulación con oxitocina 0.01UI; posterior a ello, se administró secuencialmente las diferentes dosis del extracto etanólico de Cyperus rotundus (Piri-Piri): 0,5mg/ml, 1mg/ml, 10mg/ml, 50mg/ml, 100mg/ml y 200mg/ml, siendo el tiempo de estabilización entre cada dosis de 60 minutos con lavados de solución tyrode cada 10 minutos. Los datos obtenidos se analizaron en el programa Statistics SPSS versión 22.0, se utilizaron las pruebas de Wilconxon para comparación de medianas de cada componente de la contracción, la prueba Kruskal-Wallis para comparación de medianas de los porcentajes de reducción y la prueba Post Hoc de Dunn para comparaciones múltiples entre las diferentes concentraciones. Resultados: Para el primer componente de la contracción, se observó una disminución de la intensidad mediana a partir de la dosis 1mg/ml de Cyperus rotundus (Piri-Piri) con un porcentaje de reducción de 1.6%, evidenciándose un mayor efecto a medida que las dosis aumentan logrando una disminución completa de la intensidad para las concentraciones 100mg/ml y 200mg/ml de Cyperus rotundus con un porcentaje de reducción de 85.3% y 98.2%, respectivamente; de igual forma se observó para el componente duración, observándose un efecto tocolítico a partir de la dosis 1mg/ml con porcentaje de reducción de 3.7%, siendo mayor a dosis más altas, así para la dosis 100mg/ml y 200mg/ml la disminución de la duración fue completa con porcentajes de reducción de 86,6% y 98,7%, respectivamente Al analizar el componente frecuencia, se observó disminución de la frecuencia mediana desde la primera dosis (0,5mg/ml) con reducción de 12.1%, además se obtuvo una inhibición completa de la frecuencia a dosis de 100mg/ml y 200mg/ml con porcentajes de reducción de 92,2% y 98,7%., respectivamente. Tanto para el componente intensidad como duración, se evidenció diferencia significativa (p<0.05) a partir de la dosis 10mg/ml del Cyperus rotundus (Piri-Piri), mientras que para la frecuencia la diferencia significativa (p<0.05) fue a partir de la dosis 0.5mg/ml. Al comparar los porcentajes de reducción de intensidad, duración y frecuencia, se constató que existe diferencia significativa entre las diferentes concentraciones para los porcentajes de reducción de cada componente (p<0.05). Asimismo, al realizar comparaciones entre cada grupo de concentraciones de Cyperus rotundus (Piri-Piri) según los tres componentes, se encontró que la dosis necesaria para obtener una reducción significativa fue 10mg/ml para intensidad, 50mg/ml para duración y frecuencia. Conclusión: El extracto etanólico del Cyperus rotundus (Piri-Piri) presenta efecto inhibidor de manera dosis dependiente sobre la contractibilidad de la fibra uterina in vitro en ratas. / Tesis

Des mutations hétérozygotes faux-sens dans le gène de la tubuline gamma TUBG1, ont été identifiées dans le contexte des malformations du développement cortical, associées à une déficience intellectuelle et à l'épilepsie. Ici, nous avons étudié par la technique d’électroporation in-utero et par des études in vivo, l’effet de quatre de ces variantes sur le développement cortical. Nous montrons que les mutations dans TUBG1 affectent le positionnement neuronal dans la plaque corticale, en perturbant la locomotion des neurones nouvellement nés, mais sans affecter la neurogenèse. Nous proposons que la γ-tubuline mutante affecte le fonctionnement global de ses complexes, et en particulier leur rôle dans la régulation de la dynamique des microtubules. De plus, nous avons développé un modèle de souris knock-in Tubg1Y92C/+ et évalué les conséquences de la mutation sur le développement cortical, les caractéristiques neuroanatomiques et le comportement. Les souris mutantes présentent une microcéphalie globale, des anomalies du néocortex et de l'hippocampe, des altérations du comportement et une susceptibilité épileptique. Ainsi, nous montrons que les souris Tubg1Y92C/+ miment au moins partiellement le phénotype humain et représentent donc un modèle pertinent pour d'autres investigations de la physiopathologie des malformations du développement cortical. / Missense heterozygous variants in the gamma tubulin gene TUBG1 have been linked to malformations of cortical development, associated with intellectual disability and epilepsy. Here, we investigated through in-utero electroporation and in-vivo studies, how four of these variants affect cortical development. We show that TUBG1 mutants affect neuronal positioning within the cortical wall, by a disrupting the locomotion of newly born neurons but without affecting neurogenesis. We propose that mutant γ-tubulin affects overall functioning of γ-tubulin complexes, and in particular their role in the regulation of microtubule dynamics. Additionally, we developed a knock-in Tubg1Y92C/+ model and assessed consequences of the mutation on cortical development, neuroanatomical features and behaviour. Mutant mice present with global microcephaly, neocortical and hippocampal abnormalities, behavioural alterations and epileptic susceptibility. Thus, we show that Tubg1Y92C/+ mice partially mimic the human phenotype and therefore represent a relevant model for further investigations of the physiopathology of malformations of cortical development.

L’osteopetrosi autosomale recessiva (ARO) è un gruppo di malattie dovute a un difettoso funzionamento degli osteoclasti che preclude un rimodellamento osseo corretto. Nel 50% dei casi umani il difetto è dovuto ad una delezione nel gene Tcirg1. Il modello murino mutante oc/oc porta lo stesso difetto genetico e fenotipico umano. Nel lavoro di tesi si è dimostrato che gli epatociti fetali di 12.5 giorni di gestazione trapiantati in utero in feti mutati di 13.5 giorni di gestazione sono in grado di curare il fenotipo malato. Si è inoltre derivata una sottolinea di cellule staminali embrionali murine transgeniche per il costrutto plasmidico GOF18eGFP. Si vuole utilizzare la GFP sotto il controllo del promotore del gene Oct-4 come marcatore del livello di staminalità cellulare per microiniettare le ESC in blastocisti murine mutate oc/oc. / Autosomal recessive osteopetrosis (ARO) is a group of genetic disorders due to defects that preclude normal function of osteoclasts. In half the cases, human ARO is due to mutations in the Tcirg1 gene. The oc/oc mutant mouse closely recapitulates human Tcirg1-dependent ARO. In ths work we demonstrate that in utero injection of allogenic fetal liver cells on 12.5 days into oc/oc fetuses at 13.5 day post coitum completely rescue the osteopetrotic phenotype. Moreover, an embryonic stem cells line transgenic for GOF18eGFP was produced. The goal is to use the GFP under the transcriptional control of the Oct-4 promoter as a marker of pluripotency of the ESC that are to microinject into oc/oc blastocysts.