Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 696310 bytes, checksum: 885479e14190b04344238aca73a62d1d (MD5) Previous issue date: 2007-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The Zabrotes subfasciatus Boheman (Coleoptera: Bruchidae) is a species probably originated from Central America. It became an agricultural pest since it was established and continually began to reproduce in stored seeds and later diffused throughout tropical and subtropical regions. In stores, those insects cause damages to the grains, by boring them and giving them an unpleasant flavor, therefore depreciating their commercial value. In seeds, the pest consumes the reserves of the cotyledons, therefore endangering germination. This study was conducted to estimate the genetic diversity in Z. subfasciatus populations, by using the molecular markers ISSR (Inter Simple Sequence Repeat). Twelve populations of Z. subfasciatus amostradas were sampled in eight Brazilian states as totaling 269 individuals, then they were evaluate. Five primers ISSR (UBC 807, UBC 808, UBC 809, UBC 811, UBC 891) were used, whereas a total of 51 polymorphic bands averaging 10 bands by each primer were amplified. The percent polymorphism within each population ranged from 74.51 to 92.16, with an average percentage of 83.82. The expected heterozygozite corrected by Nei in 1978 ranged from 0.2253 to 0.;3281 with some 0.2885 average, whereas the genetic diversity index by Shannon and Weaver (HE) ranged from 0.2908 to 0.4805, as averaging 0.4167. At species level, those two indexes showed the values 0.3636 and 0.5393 respectively. The FST values between the population pairs obtained by molecular variance analysis (AMOVA) ranged from 0.06804 to 0.6165. The genetic distance by Nei used in estimation of the genetic divergence among populations ranged from 0.0563 to 0.3250. The AMOVA allowed for the partition of the genetic variation into two levels: either inside and among populations. Higher genetic variation was observed inside population, with 66% of the total variation. Only 34% genetic variation were observed among populations. The Mantel` test showed low correlation between geographical distance and FST, genetic identity and FST, and between the Nei´genetic distance and FST. According to the results, the following conclusions were drawn: the genetic variability of the species is still considered as low in Brazil, probably due to the recent introduction of the pest; and those Zabrotes subfasciatus populations showed to be not geographically structured in Brazil. / Zabrotes subfasciatus Boheman (Coleoptera: Bruchidae), espécie originária provavelmente na América Central, se tornou uma praga agrícola quando se estabeleceu e passou a se reproduzir continuamente em sementes armazenadas, difundindo-se posteriormente pelas regiões tropicais e subtropicais. Em armazéns, esses insetos causam danos aos grãos, perfurando-os e conferindo-lhes sabor desagradável, depreciando o seu valor comercial. Nas sementes, a praga consome as reservas dos cotilédones, comprometendo a germinação. O objetivo deste trabalho foi estimar a diversidade genética de populações de Z. subfasciatus por meio de marcadores moleculares ISSR (Inter Simple Sequence Repeat). Foram avaliadas 12 populações de Z. subfasciatus, amostradas em oito estados brasileiros, totalizando 269 indivíduos. Cinco primers ISSR foram utilizados (UBC 807, UBC 808, UBC 809, UBC 811, UBC 891), sendo amplificadas um total de 51 bandas polimórficas com média de 10 bandas por primer. A porcentagem de polimorfismo dentro de cada população variou de 74,51 a 92,16, com porcentagem média de 83,82. A heterozigosidade esperada corrigida de Nei (HE), variou de 0,2253 a 0,3281, com média de 0,2885 e o índice de diversidade genética de de Shannon e Weaver (I) variou de 0,2908 a 0,4805, com média de 0,4167. Em nível de espécie, estes dois índices apresentaram valores de 0,3636 e 0,5393 respectivamente. Os valores de FST entre pares de populações obtidos pela análise de variância molecular (AMOVA) variaram de 0,06804 a 0,6165. A distância genética de Nei (1978), usada para estimar a divergência genética entre populações, variou de 0,0563 a 0,3250. A AMOVA permitiu uma partição da variação genética em dois níveis: dentro de populações e entre populações. Foi observada maior variação genética dentro da população, com 66% da variação total. Apenas 34% da variação genética foi observada entre populações. O teste de Mantel revelou baixa correlação entre distância geográfica e FST, identidade genética e FST e entre distância genética de Nei e FST. Pode-se concluir que a variabilidade genética da espécie ainda é considerada baixa no Brasil, provavelmente devido à introdução recente da praga. As populações de Zabrotes subfasciatus avaliadas não se apresentam geograficamente estruturadas no Brasil.

Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Zabrotes subfasciatus is the most common pest of the stored beans (Phaselous vulgaris). This study was carried out to characterize ATPase from Z. subfasciatus larvae and to investigate its phytotherapy modulation. Larvae extracted from Phaseolus vulgaris were firstly homogenised in extraction buffer, and then centrifuged 45000g for 30min at 4ºC. Supernatant was fractioned with ammonium sulfate, precipitaded fraction on 45-80% saturation was homogenized in reduction ionic strength buffer, centrifuged and the supernatant was applied in ion exchange chromatography on Q-Sepharose. The column was eluted with 200mM NaCl and after that with salt gradient containing 200 to 500mM NaCl. After chromatography, fractions that presented Ca2+/Mg2+-ATPase activity constituted Z. subfasciatus larvae ATPase fraction. The main polypeptide from this fraction showed relative molecular weight similar of the myosin VII. This fraction presented significant K+/EDTA-ATPase activity. Both pyrophosphate and ADP were not hydrolyzed. Tapsgargin, ouabain and azide did not inhibit Ca2+/Mg2+-ATPase activity. Aqueous extracts from leaves of C. ambrosioides, R. officinalis and E. citriodora inhibited Ca2+/Mg2+-ATPase activity, being the last one more effective. These results strongly indicate the presence of myosin in Z. subfasciatus larvae ATPase fraction, considering that it presented high K+/EDTA activity. / Zabrotes subfasciatus (Boheman) é a principal praga do feijão comum (Phaselous vulgaris). O objetivo do presente estudo foi a purificação, caracterização e modulação fitoterápica de uma ATPase a partir da fração solúvel de larvas de Z. subfasciatus. As larvas, recém extraídas do feijão, foram homogeneizadas em tampão de extração e centrifugadas a 45.000 g por 30 min a 4ºC. O sobrenadante foi fracionado com sulfato de amônio. A fração precipitada 45-80% de saturação foi homogeneizada em tampão de baixa força iônica e centrifugada, o sobrenadante resultante foi aplicado em coluna de Q-Sepharose. A coluna foi eluída com NaCl 200mM e, posteriormente, com um gradiente de NaCl 200 a 500mM. Após a cromatografia, as frações que expressaram maior atividade Ca2+/Mg2+-ATPase foram reunidas, constituindo a fração ATPase de larvas de Z. subfasciatus. O principal polipeptídio dessa fração apresentou massa molecular relativa um pouco acima da cadeia pesada de miosina II. A fração ATPase apresentou atividade K+/EDTA-ATPase significativa. O PPi e o ADP praticamente não foram hidrolisados,. Tapsigargina, ouabaína e azida não inibiram a atividade Ca2+/Mg2+-ATPase. Extrato aquoso de Eucalyptus citriodora, Chenopodium ambrosioides e Rosmarinus officinalis inibiram a atividade Ca2+/Mg2+-ATPase, sendo que o Eucalyptus citriodora inibiu por completo essa atividade. A caracterização desta fração excluiu a possibilidade da presença de várias ATPases e apresentou um forte indício da presença de miosina, devido a alta atividade K+/EDTA. / Mestre em Genética e Bioquímica

The Zabrotes subfasciatus (Boh 1833) (Coleoptera: Bruchidae) is known popularly as weevil of beans being one of the more important pests of stored grains. The pest control is performed basically using efficient chemical insecticides, however, they cause harm to men, fauna and flora, in the surroundings, being non-specific. In the search for alternative and less aggressive control, we study the action of infochemicals in the control of the Zabrotes subfasciatus. The study of reproductive aspects and of the intra- and interespecific communication had been carried out as well as the identification of the chemical constituents of the extracts of males and females of Zabrotes subfasciatus. The sequence of courtship and mating of the Z. subfasciatus had been first observed, which resulted in an etogram. After that the selective behavior of the female in relation to the partner and the differences of the sexual reasons that had influenced in the reduction of the number of mating were analyzed. For studies of the intra and interspecific communication, the study had been conducted through olfatometric and electroanthenographic tests. Using olfatometry, it was confirmed that the females are responsible for the release of the sexual pheromone, which exerted attractiveness only toward the males. The plant hostess did not influence in the production of the pheromone. Extracts prepared with dichloromethane had been more efficient in the attractiveness than hexanic extracts, but were less attractive than the alive females. In the electroantenography tests only the males had answered in a positive way to the treatments that consisted of alive females and extracts of females, females plus beans, using dichloromethane as solvent, in order to strengthen the idea of the female being the releaser of the sexual pheromone. The extracts of males and females had been analyzed through GC-MS, to know their chemical contents. Extracts of females had presented greater amount and variety of chemical compounds than the extracts of the males. In the extracts of females, a homologous series of hydrocarbons, alcohols, carboxylic acids, esters and ethers had been found. Morphology differences between the bristles of males and females of Z. subfasciatus were observed. The females present ramified and voluminous bristles, while the males possess filiform bristles / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Alagoas / O Zabrotes subfasciatus (Boh 1833) (Coleoptera: Bruchidae) é conhecido vulgarmente como caruncho do feijão sendo uma das principais pragas de grãos armazenados. O controle dessa praga é feito basicamente utilizando-se inseticidas químicos que são eficientes no controle mas é altamente tóxicos ao homem e ao meio ambiente. Na procura por alternativas de controle menos agressiva, estudamos a ação dos infoquímicos no controle do Zabrotes subfasciatus. O estudo comportamental para esclarecimento de aspectos reprodutivos e da comunicação intra e interespecificas foram realizados assim como a identificação dos constituintes químicos presentes nos extratos de machos e fêmeas dessa praga. Foram observada primeiramente a seqüência de corte e cópula do Z. subfasciatus o qual resultou em um etograma. Em seguida foi analisado o comportamento seletivo da fêmea em relação ao parceiro e as diferenças das proporções sexuais que influíram na diminuição do número de acasalamentos. Para estudos da comunicação intra e interespecífica, foram realizados testes olfatômetricos e eletroantenográficos. Utilizando olfatometria foi confirmado ser as fêmeas as responsáveis pela liberação do feromônio sexual, o qual exerceu atratividade apenas nos machos. A planta hospedeira não influenciou na produção do feromônio. Extratos obtidos em diclorometano foram mais eficientes na atratividade que extratos obtidos em hexano, mas não mais atrativo que as fêmeas vivas. Nos testes eletroantenográficos apenas os machos responderam de maneira positiva aos tratamentos; fêmeas vivas e extratos de fêmeas, fêmeas mais feijão utilizando como o solvente o diclorometano, reforçando a ideia da fêmea ser o sexo liberador do feromônio. Os extratos de machos e fêmeas foram analisados em (CG-EM). Extratos de fêmeas apresentaram maior quantidade e variedade de compostos químicos que os extratos dos machos. Em extratos de fêmeas foram encontrados uma serie homologa de hidrocarbonetos e compostos oxigenados como; álcoois, ácidos carboxílicos , ésteres e éteres. Constatou-se que há diferenças quanto à morfologia das cerdas de machos e fêmeas de Z. subfasciatus. As fêmeas apresentam cerdas mais ramificadas e volumosas enquanto os machos possuem cerdas filiformes

Sementes de feijão são freqüentemente infestadas por diferentes insetos-praga incluindo Zabrotes subfasciatus, Callosobruchus maculatus e Acanthocelides obtectus. Estratégias visando o controle do ataque desses insetos têm sido desenvolvidas através do estudo de substâncias tóxicas e/ou proteínas antinutricionais que atuem sobre o desenvolvimento destes insetos. Os inibidores protéicos de α-amilases presentes em leguminosas como o feijão comum, bem como em sementes de cereais como o trigo, têm a capacidade de inibir a α-amilase de Z. subfasciatus. O estudo do mecanismo de interação entre os inibidores e as enzimas digestivas de insetos pode propiciar o delineamento de inibidores potentes que atuariam especificamente contra essas pragas. O estudo da interação do inibidor de trigo 0.19 e com a α-amilase de Z. subfasciatus desenvolvido neste trabalho demonstra a atuação de vários componentes de força na superfície de interação entre a enzima e o inibidor, garantindo a estabilidade do complexo. A presença de pontes de hidrogênio, interações hidrofóbicas e ligações iônicas foram evidenciadas. Através da análise da seqüência primaria de outros inibidores de cereais, foi verificado que o inibidor de α-amilase de trigo denominado 0.53 e o inibidor de cevada possivelmente atuam da mesma maneira sobre a α- amilase do inseto. Estes resultados tornam esses inibidores protéicos potenciais candidatos à transformação de plantas de feijão visando o controle do desenvolvimento de Z. subfasciatus durante seu estágio larval. / Several insects included Callosobruchus maculatus, Acanthocelides obtectus and Zabrotes subfasciatus have frequently infest bean seeds. Strategies for the control of these predators have been developed through the study of toxic substances and antinutritional factors, which act on the development of these insects. Proteinaceus Inhibitors of α-amylases present in varieties of beans, as well as in wheat seeds have been demonstrated to be active to the α-amylase of Z. subfasciatus. The study of the mechanism of interaction between these inhibitors and the digestive enzymes can promote a powerful inhibitor that acts specifically against these insect-pest. Studies on the interaction of the inhibitor of wheat kernels 0.19 and Z. subfasciatus α-amylase demonstrated the performance of some intermolecular forces on the surface of the enzyme-inhibitor interaction giving the stability to the complex. The presence of hydrogen bond, hydrophobic interactions and saline bridges had been showed . The analysis of the primary sequences of inhibitors from other cereals allowed to verify that the wheat amylase inhibitor 0.53 and the barley inhibitor possibly act by the same way on the insect a-amylase. These results make these proteinaceus inhibitors potential candidates to be used on the plant transformation for the control of the development of Z. subfasciatus during of larval stage.

Sementes de feijão são freqüentemente infestadas por diferentes insetos-praga incluindo Zabrotes subfasciatus, Callosobruchus maculatus e Acanthocelides obtectus. Estratégias visando o controle do ataque desses insetos têm sido desenvolvidas através do estudo de substâncias tóxicas e/ou proteínas antinutricionais que atuem sobre o desenvolvimento destes insetos. Os inibidores protéicos de α-amilases presentes em leguminosas como o feijão comum, bem como em sementes de cereais como o trigo, têm a capacidade de inibir a α-amilase de Z. subfasciatus. O estudo do mecanismo de interação entre os inibidores e as enzimas digestivas de insetos pode propiciar o delineamento de inibidores potentes que atuariam especificamente contra essas pragas. O estudo da interação do inibidor de trigo 0.19 e com a α-amilase de Z. subfasciatus desenvolvido neste trabalho demonstra a atuação de vários componentes de força na superfície de interação entre a enzima e o inibidor, garantindo a estabilidade do complexo. A presença de pontes de hidrogênio, interações hidrofóbicas e ligações iônicas foram evidenciadas. Através da análise da seqüência primaria de outros inibidores de cereais, foi verificado que o inibidor de α-amilase de trigo denominado 0.53 e o inibidor de cevada possivelmente atuam da mesma maneira sobre a α- amilase do inseto. Estes resultados tornam esses inibidores protéicos potenciais candidatos à transformação de plantas de feijão visando o controle do desenvolvimento de Z. subfasciatus durante seu estágio larval. / Several insects included Callosobruchus maculatus, Acanthocelides obtectus and Zabrotes subfasciatus have frequently infest bean seeds. Strategies for the control of these predators have been developed through the study of toxic substances and antinutritional factors, which act on the development of these insects. Proteinaceus Inhibitors of α-amylases present in varieties of beans, as well as in wheat seeds have been demonstrated to be active to the α-amylase of Z. subfasciatus. The study of the mechanism of interaction between these inhibitors and the digestive enzymes can promote a powerful inhibitor that acts specifically against these insect-pest. Studies on the interaction of the inhibitor of wheat kernels 0.19 and Z. subfasciatus α-amylase demonstrated the performance of some intermolecular forces on the surface of the enzyme-inhibitor interaction giving the stability to the complex. The presence of hydrogen bond, hydrophobic interactions and saline bridges had been showed . The analysis of the primary sequences of inhibitors from other cereals allowed to verify that the wheat amylase inhibitor 0.53 and the barley inhibitor possibly act by the same way on the insect a-amylase. These results make these proteinaceus inhibitors potential candidates to be used on the plant transformation for the control of the development of Z. subfasciatus during of larval stage.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-29T16:49:22Z No. of bitstreams: 1 Sergio Monteze Alves.pdf: 300642 bytes, checksum: fce1237abc75b8072be0d5a98b316b58 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-29T16:49:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sergio Monteze Alves.pdf: 300642 bytes, checksum: fce1237abc75b8072be0d5a98b316b58 (MD5) Previous issue date: 2012-02-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The bean species, Phaseolus vulgaris (L.), stands out as the most important of the five cultivated in the world. Among the pests of stored beans in Brazil, Zabrotes subfasciatus (Boh.) is considered the major one, whose control is commonly carried out using synthetic protectors and fumigants. New approaches to control have been tested, using less toxic compounds, less expensive, accessible and appropriate to the principles of Integrated Pest Management (IPM). The aims of this study were: (i) toxicity test (contact and fumigation) and repellence of dos Eucaliptus staigeriana F. Muell, Eucaliptus citriodora Hook, Ocimum gratissimum (L.) and Foeniculum vulgare Mill essential oils; (ii) identify and quantify the constituting compounds. The analysis by GC/ME indicated the presence of Limonene (28.73%), Geranial (15.20%) and Neral (12.16%), as main constituents of E. staigeriana oil; and for E. citriodora oil, Citronellyl acetate (3.34%), 1,8-Cineole (2.87%) and β-Pineno (0.94%). Among the oils tested at fumigant action, the most effective in controlling Z. subfasciatus were: O. gratissimum (LC50 = 0.9 μL/L air) and E. citriodora (LC50 = 0.9 μL/L air). In contact tests the highlights were: E. staigeriana (LC50 = 2.73 μL/20g) and F. vulgare (LC50 = 2.74 μL/20g). E. citriodora resented repellent effect from the concentration of 7.6 μl/20g of beans seeds, followed by E. staigeriana 8.0 μl/20g. The oviposition reduction of Z. subfasciatus was 96.2%, 96.4% and 57.2%, respectively, for E. staigeriana, E. citriodora and F. vulgare oils. Similar results were found to adult emergence. / A espécie de feijão comum, Phaseolus vulgaris (L.), destaca-se como a mais importante, entre as cinco cultivadas no mundo. Dentre as pragas do feijão armazenado no Brasil, Zabrotes subfasciatus (Boh.) é considerada uma das mais significativas, sendo seu controle comumente realizado com inseticidas sintéticos protetores e fumigantes. No entanto, novas alternativas aos inseticidas sintéticos vêm sendo testadas, como os produtos naturais, que são menos tóxicos, de menor custo, biodegradáveis e adequados aos princípios do Manejo Integrado de Pragas (MIP). Os objetivos desse trabalho foram: (i) testar a toxicidade (contato e fumigação) e a repelência dos óleos essenciais de Eucaliptus staigeriana F. Muell, Eucaliptus citriodora Hook, Ocimum gratissimum (L.) e Foeniculum vulgare Mill em Z. subfasciatus; (ii) identificar e quantificar os compostos constituintes. A análise por CG/EM revelou a presença de Limoneno (28,73%), Geranial (15,20%) e Neral (12,16%), como constituintes majoritários do óleo de E. staigeriana; e para E. citriodora, Citronelil acetato (3,34%), 1,8-Cineole (2,87%) e β-Pineno (0,94%). Os óleos mais efetivos com efeito fumigante no controle de Z. subfasciatus foram O. gratissimum e E. citriodora com CL50s de 0,9 μL/L de ar. Nos testes de contato se destacaram E. staigeriana (CL50 = 2,73 μL/20g) e F. vulgare (CL50 = 2,74 μL/20g). E. citriodora apresentou efeito repelente para adultos de Z. subfasciatus, a partir de 7,6 μl/20g de feijão, seguido por E. staigeriana à 8,0 μl/20g. A redução da postura de Z. subfasciatus foi de 96,2, 96,4 e 57,2%, respectivamente, para os óleos de E. staigeriana, E. citriodora e F. vulgare. Resultados semelhantes, também, foram encontrados para a emergência de adultos.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / A planta Calotropis procera pertencente à famÃlia Asclepiadaceae à encontrada em vasta extensÃo do Nordeste Brasileiro. à uma planta laticÃfera e sua produÃÃo endÃgena de lÃtex à extraordinÃria. Embora haja na literatura cientÃfica diversas publicaÃÃes que relatam o potencial medicinal de diversas partes da planta, principalmente de seu lÃtex, nÃo hà ainda uma abordagem bioquÃmica e funcional de seu fluido laticÃfero. Esta pesquisa foi desenvolvida no sentido de proceder a um estudo bioquÃmico parcial de atividades endÃgenas da fraÃÃo protÃica majoritÃria do lÃtex e de avaliar seus efeitos inseticidas sobre diferentes modelos de pragas agrÃcolas. A fraÃÃo protÃica majoritÃria do lÃtex foi preparada a partir de um protocolo previamente desenvolvido no laboratÃrio em que sÃo envolvidas etapas de centrifugaÃÃo e diÃlise. A fraÃÃo protÃica isenta de borracha e de molÃculas de baixa massa molecular foi testada para atividades enzimÃticas endÃgenas proteolÃticas, quitinÃsicas e a-amilÃsica e atividades inibitÃrias para proteases e a-amilase. Ensaios enzimÃticos de digestÃo das proteÃnas do lÃtex por extratos digestivos de insetos foram tambÃm realizados. Bioensaios utilizando-se dietas artificiais contendo diferentes proporÃÃes das proteÃnas do lÃtex Ãntegras, digeridas por pronase ou aquecidas a 98 ÂC foram realizados com seis insetos pertencentes a quatro ordens. Nos bioensaios foram avaliados parÃmetros tais como desenvolvimento, sobrevivÃncia, tempo de emergÃncia dos indivÃduos alÃm de ser avaliado o efeito cumulativo de proteÃnas do lÃtex na dieta por sucessivas geraÃÃes. Na fraÃÃo protÃica do lÃtex foram encontradas atividades proteolÃticas do tipo cisteÃnica e serÃnica, alÃm de atividade quitinolÃtica. NÃo foi detectada atividade a-amilÃsica. SoluÃÃes de proteÃnas do lÃtex nÃo exibiram atividade inibitÃria do tipo a-amilÃsica e tripsÃnica ou quimiotripsÃnica. ApÃs tratamento tÃrmico, proteÃnas do lÃtex ainda solÃveis foram capazes de inibir a atividade da papaÃna. Posteriormente esta atividade inibitÃria foi capaz de inibir as atividades proteolÃticas de Callosobruchus maculatus e Dysdercus peruvianus. As proteÃnas do lÃtex foram inseticidas para C. maculatus, Zabrotes subfasciatus, Anticarsia gemmatalis e Ceratitis capitata enquanto que nÃo foram para Spodoptera frugiperda e D. peruvianus. NÃo houve efeito deletÃrio acumulativo em insetos submetidos a uma dieta contendo proteÃnas do lÃtex durante seis geraÃÃes. Quando digeridas por pronase e aquecidas por 30 min a 98 ÂC, a aÃÃo inseticida das proteÃnas do lÃtex ainda foi mantida sobre o C. maculatus. As proteÃnas do lÃtex foram completamente resistentes à proteÃlise por enzimas digestivas de Dysdercus peruvianus e Callosobruchus maculatus. Entretanto, a aÃÃo proteolÃtica endÃgena do lÃtex promoveu a proteÃlise do extrato enzimÃtico de C. maculatus embora isto nÃo tenha ocorrido no extrato intestinal de D. peruvianus. O lÃtex de C. procera apresenta forte atividade proteolÃtica e resistÃncia à proteÃlise por enzimas digestivas de insetos. Atividade quitinolÃtica foi tambÃm observada. O lÃtex possui atividade inseticida para diferentes pragas agrÃcolas e esta atividade parece estar associada à presenÃa de um inibidor de atividade proteolÃtica do tipo cisteÃnica, alÃm da presenÃa de quitinases e elevada atividade proteolÃtica endÃgena. Assim, a fraÃÃo protÃica do lÃtex pode ser considera como parte constituinte da defesa da planta contra insetos. / The plant Calotropis procera belonging to Asclepiadaceae is found around a vast extension of the Northeast from Brazil. It is a lactifers plant and its endogenous production of latex is admirable. Despite continuous reports appearing in the literature give mention to the medicinal properties of different parts of the plant, including the latex, there is not scientific approaches comprising biochemical of functional aspects of the latex from C. procera. The aims this work was determine the presence of endogenous enzymatic activities and inhibitory activity against different proteases and a-amylase, to evaluate insecticidal properties against different crop pests and to correlate enzymatic content and insecticidal action with possible role of the latex in protecting the plant to insect pathogens. The major soluble protein fraction from the latex was prepared following the protocol previously defined that includes centrifugations and dialysis steps. The protein fraction devoided of rubber and low molecular mass molecules was assayed to the presence of endogenous proteolytic activities as well as a-amylase activity. Even, the presence of inhibitor of such activities was investigated. Additionally the latex proteins were submitted to proteolysis by digestive content of different insects. Bioassays base on artificial diets with different contents of native, pronase digested or heated treated (98 ÂC) latex proteins were performed against six insects belonging to 4 different orders. Increment in bodyweight of larvae, time of development and percentage of survive were the parameters considered to analyze detrimental effects of latex proteins upon insects. The effect of latex proteins upon Callosbruchus maculatus insects by continuous exposure until F-6 generation was reached was performed. It was found strong endogenous proteolytic activity and latex proteins were resistent to proteolysis by insect digestive extracts. In addition chitinolytic activity was also detected. The latex exhibited insecticidal activity against different insect groups and this effect may be correlated to the presence of a cysteine protease inhibitor associated to its proteolytic properties and chitinolytic activity. It is suggested that the protein fraction of the latex from Calotropis procera plays a relevant role in defending the plant against pathogens.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-23T15:22:35Z No. of bitstreams: 1 Cleia Gomes Vieira e Silva.pdf: 397357 bytes, checksum: 224e5b48f721843c7d8a272b57e0013f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-23T15:22:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cleia Gomes Vieira e Silva.pdf: 397357 bytes, checksum: 224e5b48f721843c7d8a272b57e0013f (MD5) Previous issue date: 2007-07-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Plants constitute natural sources of insecticide substances and have been used by mankind since Antiquity. It is also known that medicinal plants present great quantities of secondary compounds such as alkaloids, terpens, flavonoids and steroids which promote high resistance to the onset of pests and diseases. The genus Croton, which is made up of species that occur naturally in the State of Pernambuco, where many of them are used in the popular medicine and characterize themselves by the production of essential oil, owns expressive relevance founded on their sources of fixed and volatile components with recognized biological activity in the treatment of various illnesses. The knowledge that medicinal plants present high resistance to the onset of diseases and pests has led us to investigate the potential insecticide of crude ethanolic extracts from different parts of plants of the genus Croton against Plutella xylostella L. and of the essential oil of the species C. grewioides against Zabrotes subfasciatus Boheman. All the investigated plants are native to the biome in Pernambuco with use in the popular medicine by the community where its occurrence is reported. The crude extracts were obtained through cold maceration, ethanol being used as solvent, from leaves and stalks of the species Croton jacobinensis Baill, C. micans Muell., C. rhamnifolius H.B.K and C. sellowii Baill. The essential oil, on the other hand, was obtainedthrough hydro-distillation from the leaves and stalk of C. grewioides. These extracts were diluted into previously determined concentrations by means of a pilot experiment and their activities were tested for the development and survival of Plutella xylostella L. To do so, with the aid of Potter’s Tower, eight-cm diameter cabbage disks, Brassica oleracea var. acephala L., were ground with different concentrations of the ethanolic extracts and offered to caterpillars confined into Petri’s dishes. Among the studied extracts, the ethanolic extract from leaves of C. rhamnifolium was the most toxic at the larval phase, followed by the ethanolic extract from the stalk of the same species, presenting CL50 of 14.95 and 42.40μg mL-1, respectively. The interference of the extract of C. rhamnifolius in the development of P. xylostella was also noticed. From the stalk and leaves of Croton grewioides Baill essential oils were extracted through hydro-distillation and then analyzed by GC/MS. This analysis revealed that both oils are made up of 22 compounds, in which the predominant chemical class was that of the phenylpropanoids, whose major representative was (E)-anetol (65.5% in the leaves and 47.8% in the stalk). The fumigant effect of both essential oils was assessed for the woodworm of beans, Z. subfasciatus, which presented itself as potential for the control of this pest. The essential oil of leaves presented itself about 3.4 times more effectivethan the essential oil from the stalk and the estimated values for the CL50 were 4.0 and 13.7 μg mL-1 of air, respectively. / As plantas constituem fontes naturais de substâncias inseticidas, e vêm sendo utilizadas pela humanidade desde a antiguidade. As plantas medicinais apresentam grandes quantidades de compostos secundários como alcalóides, terpenos, flavonóides e esteróides, que promovem alta resistência ao ataque de pragas e de doenças. O gênero Croton, que é constituído por espécies que ocorrem naturalmente no estado de Pernambuco, onde muitas delas são utilizadas na medicina popular. Estas plantas se caracterizam pela produção de óleo essencial e detém expressiva relevância alicerçada em suas fontes de componentes fixos e voláteis com reconhecida atividade biológica no tratamento de várias enfermidades. O conhecimento de que plantas medicinais apresentam alta resistência ao ataque de doenças e pragas motivou a investigação do potencial inseticida de extratos etanólicos brutos de diferentes partes de plantas do gênero Croton no controle de Plutella xylostella L. e do efeito fumigante de óleo s essenciais da espécie C. grewioides contra Zabrotes subfasciatus Boheman. Todas as plantas investigadas são nativas do bioma pernambucano com uso na medicina popular pela comunidade onde sua ocorrência é registrada. Os extratos brutos foram obtidos por maceração a frio, utilizando como solvente o etanol, a partir de folhas e caules das espécies Croton jacobinensis Baill, C. micans Muell., C.rhamnifolius H.B.K. e C. sellowii Baill. Já o óleo essencial foi obtido por hidrodestilação a partir de folhas e caule de C. grewioides. Os extratos obtidos foram diluídos em concentrações previamente determinadas mediante experimento piloto e tiveram suas atividades testadas sobre o desenvolvimento e sobrevivência de Plutella xylostella L. Para isto, com auxílio de torre de Potter, discos de oito cm de diâmetro de folhas de couve, Brassica oleracea var. acephala L., foram pulverizados com diferentes concentrações dos extratos etanólicos, e oferecidos às larvas confinadas em placas de Petri. Dentre os extratos estudados, o extrato etanólico de folhas de C. rhamnifolium foi o mais tóxico à fase larval, seguido do extrato etanólico de caule da mesma espécie, apresentando CL50 de 14,95 e 42,40μg mL-1, respectivamente. Observou-se ainda uma interferência do extrato de C. rhamnifolius no desenvolvimento de P. xylostella. O óleo essencial obtido a partir do caule e folhas de Croton grewioides Baill. foi analisado por CG/EM. Um total de 22 compostos foi identificado. A classe química predominante foi fenilpropanóide, cujo representante majoritário, o (E)-anetol apresentou percentual de 65,5% no óleo de folha, e 47,8% no óleo do caule. Bioensaio de fumigação foi realizado contra o caruncho do feijão Z. subfasciatus. O óleo essencial de folhas foi cerca de 3,4 vezes mais tóxico eficaz do que o óleo essencial do caule cujos valores estimados para a CL50 foram 4,0 e 13,7 μgL-1 de ar, respectivamente.

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Assim, buscou-se com este trabalho produzir e avaliar o potencial de extratos vegetais de Aspidosperma pyrifolium (pereiro), Anadenanthera colubrina (angico) e Licania rígida (oiticica) no controle do Zabrotes subjàsciatus, bem como avaliar a qualidade física e fisiológica das sementes de feijão Phaseolus tratadas com extratos, obtidos da folha c da casca dessas espécies, durante 180 dias acondicionadas em embalagens do tipo pet em ambiente não controlado de temperatura e umidade relativa do ar. O trabalho foi realizado cm quatro experimentos, onde no primeiro foram produzidos os extratos e realizados a bbatividade inseticida dos extratos vegetais hidroalcoolico e seco, cm que o extrato pereiro casca a partir da dose de 3 ml, foi 100% eficiente em matar o Zabrotes subfasciatus e, nas doses de 4 e 5 ml a mortalidade de 100% deu-se para todos os extratos. No segundo experimento se estudou a repelência/atralividade e mortalidade do Zabrotes subfasciatus pelos extratos pós das mesmas plantas, tendo-sc observado que o número de insetos adultos repelidos pelos extratos pós tbi maior com o extrato oiticica casca, seguido dos demais (pereiro casca, angico casca, pereiro folha e angico folha) que estatisticamente se igualaram e, o menor número de insetos repelidos deu-se com o extrato oiticica folha, ocorrendo o contrário com a atratividade. Os bioensaios para prospecção lltoquímica dos extratos vegetais obtidos das folhas e das cascas dessas espécies, correspondeu ao terceiro experimento, em que os extratos de pereiro revelaram os mais elevados índices de compostos secundários (alcalóides, esteróides, taninos, flavonóides e saponinas) seguidos de angico e oiticica e, no quarto experimento os extratos botânicos foram utilizados no controle deste inseto praga durante o armazenamento, onde constatou-se atividade inseticida no controle do Zabrotes subfasciatus, matando-os e/ou inibindo o seu desenvolvimento. No tratamento das sementes de feijão Phaseolus, a dose de 3 ml tbi a de melhor controle com melhor resultados para os extratos oiticica folha c pereiro casca. Os procedimentos adotados no tratamento das sementes com os extratos das espécies vegetais demonstraram eficiência na manutenção da viabilidade não afetando a germinação durante os 180 dias do armazenamento. / Among the pests that attack bean seeds during storage, we highlight the 'Zabrotes subfasciatus (bean weevil) by reducing the quality and nutritional value of seeds. lhe reduction of the quality of grains / seeds during storage is mainly associated with the degree of infestai ion and environmental conditions in which it is the mass of beans. Thus. we attempted to produce this work and assess the potential of plant extracts of Aspidosperma pyrifolium (pereiro), Anadenanthera colubrína (angico) and Licania rígida (oiticica) of Zabrotes subfasciatus in control and evaluate the physical and physiological quality of seeds Phaseolus beans treated with extracts obtained from leaves and bark of these species, 180 days packed in like pet under uncontrolled temperature and relative humidity. The study was conducted in four experimenls. where the first extracts werc produccd and performed the bioactivky of insecticide hydroalcoholic plant extracts and dry in the extract from the bark pereiro dose of 3 ml. was 100% effective in killing the Zabrotes subfasciatus and, in doses of 4 and 5 ml 100% mortaliiy are given for ali the extracts. In the second experiment we studied the rcpcllcncy / attractiveness and mortality of Zabrotes subfasciatus post by extracts of these plants and has been observed that the number of adult inseets repelled by the extracts was higher with post myrtle bark extract, followcd by the others (pereiro shcll angico bark, leaf and angico pereiro sheet) that are staiisticaily similar, and the fewer inseets gave repelled with myrtle leaf extract. but the contrary to the attractiveness. The bioassays for phytochemical screening of plant extracts obtained from leaves and bark of these species corresponded to the third experiment, in which extracts pereiro revcaled the highest leveis of secondary compounds (alkaioids, steroids, tannins, flavonoids and saponins) followed by mimosa and myrtle. and lhe fourth experiment, the botanical extracts were used to control this insect pest during storage, where it was found in control insccticidal activity of Zabrotes subfasciatus, killing them and / or inhibiting its development. In the treatment of seeds o f Phaseolus beans, the dose of 3 ml was the best results for better control extracts oiticica, pereiro sheet and the shell. The procedures used in seed treatment with the extracts of plant species were efficient in maintaining the viability did not affect germination during 180 days of storage.