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Ativação de vilos placentários humanos com agonista de receptor toll-like 4 na infecção in vitro por Zika vírus / Activation of human placental villi with toll-like receptor 4 agonist during in vitro infection by Zika vírusBranco, Anna Cláudia Calvielli Castelo 18 January 2019 (has links)
O Zika vírus (ZIKV) pertence à família flaviviridae que inclui espécies transmitidas principalmente por mosquitos Aedes sp. No Brasil, casos de microcefalia fetal foram associados à infecção congênita por ZIKV. Vários mecanismos de imunorregulação operantes durante a gestação como a inflamação gerada e resposta antiviral são vitais para o entendimento da infecção congênita do ZIKV. Desta forma, é proposto avaliar se a inflamação via ativação do receptor Toll-like 4 (TLR4-LPS) em vilos placentários humanos e em modelo murino interfere na infecção por ZIKV. Para isso, explantes de vilos placentários humanos de 3o trimestre foram ativados com LPS e posteriormente infectados com ZIKV. Nossos achados mostram que a ativação com LPS é capaz de aumentar a replicação de ZIKV em vilos placentários e de elevar a atividade enzimática da lactato desidrogenase, indicativo de ativação celular. A replicação viral foi inibida com o tratamento dos explantes com um antioxidante, Naringenina, mostrando potencial terapêutico. A ativação placentária com LPS inibiu a via IRF-3, diminuindo a atividade antiviral e aumentando a clivagem proteica do componente da via de autofagia LC3, sendo que estes mecanismos podem estar relacionados com o aumento da replicação viral. Em paralelo, foi detectado aumento da produção de citocinas inflamatórias e hiperplasia das células de Hofbauer nos explantes inflamados e infectados, indicando que estes macrófagos fetais podem ser um nicho de replicação viral. Em modelo murino, evidenciamos que a inoculação intravaginal de LPS em fêmeas prenhas previamente à infecção com ZIKV é capaz de promover o aumento de carga viral no cérebro das mães e da prole, com agravamento do quadro de microcefalia nos fetos. Em conjunto, os dados mostram que em modelo de explante placentário humano e, in vivo , em camundongos, a inflamação é fator predisponente da replicação do ZIKV. As estratégias imunomoduladoras mostram potencial terapêutico, atenuando a resposta inflamatória e a diminuição da replicação viral. / The Zika virus (ZIKV) belongs to the flaviviridae family that includes species transmitted mainly by mosquitoes Aedes sp. In Brazil, cases of fetal microcephaly were associated with ZIKV congenital infection. Several mechanisms of immunoregulation operative during gestation as the inflammation generated and antiviral response are vital for the understanding of congenital ZIKV infection. Thus, it is proposed to evaluate whether inflammation via Toll-like receptor 4 (TLR4-LPS) activation in human and murine placental villi interferes with ZIKV infection. For this, human placental explants of 3rd trimester were activated with LPS and later infected with ZIKV. Our findings show that LPS activation is capable of increasing ZIKV replication in placental villi and elevating the enzymatic activity of lactate dehydrogenase, indicative of cellular activation. Viral replication was inhibited with the treatment of explants with an antioxidant, Naringenin, showing therapeutic potential. LPS placental activation inhibited the IRF-3 pathway, decreasing antiviral activity and increasing protein cleavage of the autophagy pathway component LC3, and these mechanisms may be related to increased viral replication. In parallel, increased production of inflammatory cytokines and Hofbauer cell hyperplasia were detected in inflamed and infected explants, indicating that these fetal macrophages may be a niche for viral replication. In the murine model, we demonstrated that the intravaginal inoculation of LPS in pregnant females prior to infection with ZIKV is able to promote the increase of viral load in the brains of mothers and offspring, with worsening of the microcephaly in fetuses. Together, the data show that in the model of human placental explant and, in vivo, in mice, inflammation is a predisposing factor of ZIKV replication. Immunomodulatory strategies show therapeutic potential, attenuating the inflammatory response and decreasing viral replication.
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Crescimento e desenvolvimento de crianças com microcefalia associado a Síndrome Congênita do Zika vírus no BrasilFrança, Thaís Lorena Barbosa de 18 June 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-06-18 / Introdução: O surto do Zika vírus na América Latina no período de 2015-2016 ocasionou um
aumento repentino no número de manifestações graves e relatos de alterações congênitas em
recém-nascidos no Brasil. Objetivo: Este é o primeiro estudo que avaliou e comparou o
crescimento e desenvolvimento cognitivo e motor de crianças com microcefalia por Síndrome
Congênita da Zika (SCZ) em relação às crianças típicas. Método: Estudo observacional,
analítico, transversal, com oito crianças com SCZ e 16 crianças típicas, com média de idade
de 20,5 meses (± 2,1) em uma região do nordeste brasileiro. Resultados: Considerando a
média, às crianças com SCZ apresentaram desempenho extremamente baixo no domínio
motor global e no domínio cognitivo, já as crianças típicas apresentaram desempenho médio
nos domínios cognitivo e motor. Conclusões: As crianças com SCZ apresentaram média de
crescimento (perímetro cefálico e peso) menor que as crianças típicas. Portanto, as crianças
com SCZ estão em risco de atraso de crescimento e desenvolvimento em comparação com as
crianças típicas. / Introduction: The outbreak of Zika virus in Latin America in the period 2015-2016 has caused
a sudden increase in the number of severe manifestations and reports of congenital changes in
newborns in Brazil. Objective: This is the first study that evaluated and compared the growth
and cognitive and motor development of children with microcephaly due to Congenital Zika
Virus Syndrome (CZS) in relation to typical children. Methods: An observational, analytical,
cross-sectional study with eight children with CZS and 16 typical children, with a mean age
of 20.5 months (± 2.1) in a region of northeastern Brazil. Results: Considering the mean,
children with CZS presented extremely low performance in the motor domain and in the
cognitive development domain, whereas typical children presented average performance in
the cognitive and motor development domains. Conclusion: Children with CZS presented a
mean growth rate (head circumference and weight) lower than typical children. Therefore,
children with CZS are at risk for growth retardation and development compared to typical
children.
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Relação entre a infecção gestacional por Zika vírus (ZIKV) e alterações na acuidade visual e desenvolvimento visual em bebês e crianças de duas coortes: Jundiaí e Rio de Janeiro / Not informed by the authorBaran, Luiz Claudio Portnoi 13 March 2019 (has links)
O Zika virus (ZIKV) é um flavívirus, tal qual o virus da dengue e, assim como esse, também é transmitido pelos mosquitos do gênero Aedes, especialmente o Aedes aegipty Restrito ao continente africano até 2007, o ZIKV chegou as Américas em 2013, com os primeiros registros brasileiros da infecção datando de 2014 - 2015. Em 2016, a OMS classificou o surto de ZIKV como Emergência de Saúde Mundial. O ZIKV pode acarretar na Sindrome Congênita do ZIka Vírus (SCZ) em bebês que sofreram infecção gestacional. Além da manifestação mais temida e marcante, a microcefalia, e de demais danos neurológicos, a SCZ tem sido principalmente associada com anomalias visuais e oftalmológicas. Entretanto, poucas informações se encontram disponíveis na literatura sobre o impacto da infecção por ZIKV nas funções visuais e desenvolvimento visual em crianças sem microcefalia. Pouco se conhece também do impacto da infecção em diferentes populações brasileiras, de localidades distintas. Dessa forma, o presente trabalho se propôs a preencher essa lacuna, avaliando a acuidade visual (AV) e desenvolvimento da acuidade visual em crianças expostas gestacionalmente ao ZIKV, utilizando-se o Teste dos Cartões de Acuidade de Teller (CAT). As crianças avaliadas vieram de duas populações distintas da região Sudeste do Brasil, a cidade de Jundiaí (SP) e a cidade do Rio de Janeiro (RJ). A Coorte Zika Jundiaí foi composta de 118 crianças divididas entre grupo controle saudável (ZC) com 63 crianças, grupo experimental, dividido em dois subgrupos, baseado em exame de RT- qPCR, sorologia ou avaliação clínica, o subgrupo Exposto (ZE) com 23 crianças, em que apenas as mães tiveram infecção confirmada por ZIKV e o subgrupo Infectado (ZI), com 24 crianças no qual mãe e criança tiveram infecção confirmada. Oito crianças formaram o grupo Controle Postivo (M), com crianças com microcefalia em decorrência de outras causas. A Coorte IFF Fiocruz Rio de Janeiro foi composta de 32 crianças, todas com infecção confirmada pelo ZIKV (ZI), por exame de RT-qPCR, sorologia ou avaliação clínica. Os resultados do presente trabalho mostram que a exposição gestacional ao ZIKV, na ausência de infecção, parece não ter efeito sobre a AV ou seu desenvolvivemento. No entanto, quando ocorre infecção gestacional por ZIKV, pode haver prejuízos à AV mesmo quando a criança não apresenta anomalias neurológicas e/ou oftalmológicas aparentes. Esse trabalho, entretanto, concorda com estudos anteriores que mostram uma maior chance de haver perdas de AV concomitantementes a um comprometimento cognitivo e/ou oftalmologico. As análises do subgrupo ZI de Jundiaí dão suporte a noção de que crianças gestacionalmente infectadas por ZIKV tendem a apresentar um desenvolvimento anormal (mais lento) da AV. Esse achado, se reproduzido, possuí repercussões mais gerais, dado que quaisquer danos à função visual podem indicar deficiências no sistema nervoso central. Assim sendo, tais achados tem importantes repercussões na saúde pública. Além disso, as taxas diferentes de danos à AV, bem como de incidência de microcefalia e comprometimento oftalmológico entre as populações estudadas neste trabalho, apoiam a hipótese da existência de demarcadas diferenças regionais entre as linhagens de ZIKV circulantes no país, assim como de diferenças de suscetibilidade de hospedeiros entre as populações estudadas / The Zika virus (ZIKV) is a flavivirus, such as the dengue virus, and like the dengue virus is also transmitted by the Aedes osquitoes, especially the Aedes aegipty Restricted to the African Country until 2007, the ZIKV arrived in the Americas in 2013, with the first brazillian cases of the infection dating to 2014 - 2015. In 2016, WHO classified the ZIKV spread as a World Health Emergency. The ZIKV, in gestationally exposed children, can lead to Congenital Zika Syndrome (CZS). Beyond its most marked and feared manifestation, microcephaly, and its other neurological damages, CZS is mostly associated with visual and ophthalmologic anomalies. However, little information is available on the literature about the impact of the ZIKV infection in the visual function and on the visual development in infected children without microcephaly. Little is also known about the impact of the infection in different brazillian populations from distinct areas. With that in mind, the present work intends to fill this gap in literature, evaluating the visual acuity (VA) and visual acuity development in children gestationally exposed to the ZIKV, using the Teller Acuity Cards Test (TAC). The evaluated children were from two different populations of the Southeast region of Brazil, the city of Jundiaí (SP) and the city of Rio de Janeiro (RJ). The Zika Jundiaí Cohort was composed of 118 children divided between the healthy control group (ZC) with 63 children and the experimental group, divided in two subgroups based on RT-qPCR, sorology or clinical evaluation, the Exposed subgroup (ZE) with 23 children, which only the mothers had ZIKV confirmed and the Infected subgroup (ZI), with 24 children, wich both mother and children had ZIKV confirmed infection. Eight children formed the Positive Control Group (M), composed of children with microcephaly due to other causes. The IFF Fiocruz Rio de Janeiro Cohort was composed of 32 children, all with confirmed ZIKV infection (ZI), either by RT-qPCR/sorology exam or by clinical evaluation. The results of the present work show that ZIKV exposition in absence of infection, does not seem to affect VA or its development. However when theres a gestational ZIKV infection, it may lead to VA damages even when the children does not show any apparent neurologic/ophtalmologic anomalies. This work, nonetheless, is in agreement with former studies that show a higher chance of VA losses when the children also have cognitive and/or ophtalmologic deficits. The Jundiaí ZI Subgroup analisies support the notion that ZIKV gestationally infected children tend to have an abnormal (slower) VA development. This finding, if replicated, has more general repercussions given that any visual function damages may indicate central nervous system deficiencies. Thus, these findings have important repercussions in the public health area. Furthermore, the different rates of VA damages as well as the different rates of microcephaly incidencies and ophthalmologic deficits between the populations studied in this work support the hypothesis of marked regional differences between the brazillian ZIKV strains, as well as host suscepitibilitiess differences between the studied populations
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PREVALÊNCIA DO VÍRUS ZIKA EM DOADORES DE SANGUE DE UM SERVIÇO DE HEMOTERAPIA DA REGIÃO SUL DO BRASILDiefenbach, Cristiane Fração 21 December 2017 (has links)
Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-21T13:27:45Z
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Previous issue date: 2017-12-21 / The Zika Virus (ZIKV) is a flavivirus, which is responsible for causing an emerging arbovirosis in Brazil what is primarily transmitted by the bite of infected mosquitoes of the genus Aedes. A much discussed transmission route lately is blood transfusion due to the large number of asymptomatic cases and the epidemic potential of ZIKV that causes epidemics of great proportions. As such, asymptomatic individuals may contaminate blood components and thereby participate in the transfusion transmission of this infection. The disease has a benign clinical picture but serious clinical consequences have been reported, such as Guillain-Barré syndrome (GBS) and fetal malformations such as microcephaly. Due to this fact, recently, the Health Ministry (HM) declared the infection by ZIKV a Public Health Emergency of National Importance (PHENI). Thus, the major challenge for blood banks is the transfusion prevention of ZIKV due to lack of licensed laboratory routine tests for blood donor screening. In the South region of Brazil there is no epidemiological study in this population. This study will allow a robust assessment of the current epidemiological situation in this region. The objective of the study is to estimate the seroprevalence and asymptomatic viremia of ZIKV in blood donors of a Hemotherapy Service in the southern region of Brazil. In this study, blood samples were collected from 500 donors in the period from December 2016 to January 2017. The biological materials were tested for the presence of ribonucleic acid (RNA) from ZIKV, by means of real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) test by commercial kit (TaqPath™ Zika Virus Kit (ZIKV) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) serologically assessed for anti-ZIKV IgG using Anti-Zika Virus ELISA IgG kit (Euroimmun, Medizinische Labordiagnostika AG, Lübek, Germany). No samples showed positive results for ZIKV RNA, which shows the low risk of transfusion transmission in the region studied. However, the serologically assessed showed the detection of a properly positive sample for anti-ZIKV IgG (0.55%) and 4 samples with optical density (OD) values in the gray zone of the test. Due to the high rate of cross-reaction between the different flaviviruses all samples (including the positive) were assessed to confirmatory testing for anti-DENV IgG (Anti-Dengue Virus ELISA IgG, Euroimmun, Medizinische Labordiagnostika AG, Lübek, Germany). The positive sample for anti-ZIKV IgG was negative for anti-DENV IgG, confirming the positive result for anti-ZIKV IgG. However, 3 gray zone seroreactive samples showed very high title of anti-DENV IgG and one remained in the gray zone. Confirmatory analysis of this sample using in-house ELISA with anti-DENV IgG antibody adsorption revealed that it was negative for anti-DENV IgG. This indicates a 0.55% seroprevalence of ZIKV in the Santa Maria-RS region. Our results demonstrate that the transfusional risk of ZIKV in the South of the Country is relatively low, however, it cannot be underestimated and serological analyses of large numbers of samples are required to determine the exact seroprevalence of anti-ZIKV and anti- DENV IgG in blood donors in the region of Santa Maria. / O vírus Zika (ZIKV) é um flavivírus responsável por causar uma arbovirose emergente no Brasil que é transmitido principalmente por picada de mosquitos infectados do gênero Aedes. Uma via de transmissão muito discutida ultimamente é a transfusão de sangue devido ao grande número de casos assintomáticos e o potencial epidêmico do ZIKV que causa epidemias de grandes proporções. Nessas ocasiões, os indivíduos assintomáticos podem contaminar hemocomponentes e deste modo participar na transmissão transfusional dessa infecção. A doença tem quadro clínico benigno, porém consequências clínicas graves têm sido relatadas, tais como a síndrome de Guillain-Barré (SGB) e malformações fetais como microcefalia. Diante desse fato, recentemente, o Ministério da Saúde (MS) declarou a infecção por ZIKV como uma Emergência em Saúde Pública de Importância Nacional (ESPIN). Assim, o principal desafio para bancos de sangue é a prevenção transfusional do ZIKV devido a falta de teste de rotina laboratorial licenciado para triagem de doadores de sangue. Na região Sul do Brasil não há nenhum estudo epidemiológico nessa população. Este estudo permitirá de uma forma robusta avaliar a situação atual epidemiológica nessa região. O objetivo do estudo é estimar a soroprevalência e a viremia assintomática do ZIKV em doadores de sangue de um Serviço de Hemoterapia da região sul do Brasil. Neste estudo foram coletadas amostras sanguíneas de 500 doadores voluntários de sangue no período de dezembro de 2016 a janeiro de 2017. Os materiais biológicos foram testados pela presença do ácido ribonucleico (RNA) do ZIKV, por meio de um teste de reação em cadeia da polimerase por transcrição reversa (RT-PCR) em tempo real por kit comercial TaqPath™ Zika Virus Kit (ZIKV) e inquérito sorológico por teste de imunoabsorbância ligada a enzima (ELISA) Anti-Zika Virus ELISA IgG kit (Euroimmun, Medizinische Labordiagnostika AG, Lübek, Alemanha). Nenhuma amostra mostrou resultado positivo para o RNA do ZIKV, o que mostra o baixo risco de transmissão transfusional na região estudada. No entanto, o inquérito sorológico revelou a detecção de uma amostra devidamente positiva para anti-ZIKV IgG (0.55%) e 4 amostras com valores de densidade ótica (DO) na zona cinza do teste. Devido a alta taxa de reação cruzada entre os diferentes flavivírus todas as amostras (incluindo a positiva) foram submetidas a teste confirmatório para anti-DENV IgG (Anti-Dengue Virus ELISA IgG, Euroimmun, Medizinische Labordiagnostika AG, Lübek, Alemanha). A amostra positiva para anti-ZIKV IgG foi negativa para anti-DENV IgG, confirmando o resultado positivo para anti-ZIKV IgG. No entanto, três amostras sororeagentes na zona cinza mostraram título muito elevado de anti-DENV IgG e uma permaneceu na zona cinza. Análise confirmatória dessa amostra via utilização de ELISA in house com adsorção de anticorpo anti-DENV IgG revelou que a mesma é negativa para anti-DENV IgG. Isso demonstra uma soroprevalência de 0.55% de ZIKV na região de Santa Maria-RS. Nossos resultados demonstram que o risco transfusional do ZIKV no Sul do país é relativamente baixo, contudo, não pode ser subestimado e análises sorológicas de grande número de amostras são necessárias para determinação da soroprevalência exata do anti-ZIKV e anti-DENV IgG em doadores de sangue na região de Santa Maria.
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Influência da fisioterapia nas habilidades motoras de crianças com a síndrome da Zika congênita / Influence of physiotherapy on the motor skills of children with congenital Zika syndrome : clinical trialKlinger, Tainã Ribeiro 27 August 2018 (has links)
Congenital Zika syndrome can cause a number of changes in the child, including severe brain abnormalities. Injuries to the developing central nervous system result in sensorimotor disorders with repercussions on motor performance. Physical therapy allows the acquisition of motor skills based on the child's interaction with the environment and the task. The present study aimed to analyze the role of physiotherapy in the acquisition of the motor skills of children with congenital Zika syndrome. This is a clinical trial developed at the Physiotherapy Clinic of the University Hospital of Sergipe, with a sample of 46 children with congenital Zika syndrome. Data collection was from January 2016 to December 2017, at the physiotherapeutic admission of the child and at 18 months of age. The children were stratified according to the age group in the initial evaluation. In the first moment, a form was designed to record information on the identification and clinical characteristics of mothers and children, sociodemographic characteristics of families, neurological and musculoskeletal disorders, and type of neurological lesion. The severity of the neurological lesion was classified based on the data obtained in the medical record in the transfontanel ultrasonography report, based on the Noyola Classification System. Motor skills were assessed through the Alberta Infant Motor Scale (AIMS), stratified scores by age group and subgroup of neurological injury. The children were then submitted to a physiotherapy program, with a frequency of two weekly sessions and a duration of up to 50 minutes each. The program was based on the principles of neurodevelopment therapy (Bobath), muscle stretching and passive mobilizations. When children completed 18 months of age, motor skills reassessment was performed through the AIMS. The results showed that there was an increase in the total score comparing the initial evaluation and at 18 months of age in the children who started physical therapy with age from 0 to 6 months (p <0.0001). Despite this increase, the total scores of the study sample at 18 months were significantly lower than the normative values, with a significant difference (p <0.0001). In the initial evaluation, only children older than 4 months of age presented motor impairment when compared with normative values (p <0.0001). As for most neurological lesions, the degree was moderate to severe, with a predominance of multiple calcifications, mainly cortical-subcortical, severe cortical atrophy and agenesis / hypoplasia of the corpus callosum. The severity and type of neurological lesions in children with congenital Zika syndrome suggest impairment of neuronal migration and proliferation related to motor dysfunction. However, early physiotherapy promoted a difference in the behavior of the motor skills of these children. / A síndrome da Zika congênita pode causar um conjunto de alterações na criança, dentre elas graves anomalias cerebrais. As lesões do sistema nervoso central em desenvolvimento acarretam em desordens sensoriomotoras com repercussão no desempenho motor. A fisioterapia possibilita a aquisição de habilidades motoras a partir da interação da criança com o ambiente e com a tarefa. O presente estudo teve como objetivo analisar o papel da fisioterapia na aquisição das habilidades motoras de crianças com a síndrome da Zika congênita. Trata-se de um ensaio clínico, desenvolvido no ambulatório de fisioterapia do Hospital Universitário de Sergipe, com amostra constituída por 46 crianças com a síndrome da Zika congênita. A coleta de dados ocorreu de janeiro de 2016 a dezembro de 2017, na admissão fisioterapêutica da criança e ao completar 18 meses de idade. As crianças foram estratificadas de acordo com a faixa etária na avaliação inicial. No primeiro momento foi aplicado formulário construído para registro de informações referentes a identificação e características clinicas das mães e das crianças, características sociodemográficas das famílias, alterações neurológicas e musculoesqueléticas e tipo de lesão neurológica. Classificou-se a gravidade da lesão neurológica, a partir dos dados obtidos em prontuário no laudo da ultrassonografia transfontanela, baseada no Sistema de Classificação de Noyola. Foi realizada avaliação das habilidades motoras através da Alberta Infant Motor Scale (AIMS), estratificados escores por faixa etária e por subgrupo de lesão neurológica. Em seguida, as crianças foram submetidas a um programa de fisioterapia, com frequência de duas sessões semanais e duração de até 50 minutos cada. O programa baseou-se nos princípios da terapia do neurodesenvolvimento (Bobath), alongamentos musculares e mobilizações passivas. Quando as crianças completaram 18 meses de idade, foi realizada reavaliação das habilidades motoras por meio da AIMS. Os resultados apontaram que houve aumento do escore total comparando a avaliação inicial e aos 18 meses de idade, nas crianças que iniciaram a fisioterapia com idade de 0 a 6 meses (p<0,0001). Apesar deste aumento, os escores totais da amostra do estudo aos 18 meses são bastantes inferiores aos valores normativos, com diferença significativa (p<0,0001). Na avaliação inicial, somente as crianças com idade superior a 4 meses de idade apresentaram comprometimento motor ao comparar com os valores normativos (p<0,0001). Quanto as lesões neurológicas, em sua maioria, o grau foi de moderado a grave com predomínio de calcificações múltiplas, principalmente córtico-subcortical, atrofia cortical grave e agenesia/ hipoplasia de corpo caloso. A gravidade e o tipo das lesões neurológicas nas crianças com síndrome da Zika congênita, sugerem comprometimento da migração e proliferação neuronal, relacionados com a disfunção motora. Porém, a fisioterapia precoce promoveu uma diferença no comportamento das habilidades motoras dessas crianças. / Aracaju
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