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Extratos brutos e constituintes de própolis brasileiras: avaliação dos efeitos nos carrapatos Rhipicephalus sanguineus, Rhipicephalus microplus e Amblyomma cajennense / Propolis extracts and their constituents: evaluation of the effects against the ticks Rhipicephalus sanguineus, Rhipicephalus microplus and Amblyomma cajennenseRighi, Adne Abbud 21 June 2013 (has links)
Própolis é uma substância resinosa produzida por Apis mellifera, contendo principalmente resinas vegetais e cera das próprias abelhas. É usada na colmeia para diversas finalidades, como vedar aberturas, reparar as células e envolver invasores que foram mortos na colméia, além de contribuir para a quase constância da temperatura dentro da colmeia (28 - 30oC). A própolis é importante para as abelhas, pois é responsável pela manutenção de um ambiente quase estéril, agindo contra bactérias, fungos e até larvas invasoras. Em virtude do amplo espectro de atividades biológicas e farmacológicas associadas a esse produto, a própolis vem sendo extensivamente utilizada em medicina alternativa, bem como na indústria cosmética e alimentícia. Apesar dos numerosos estudos já realizados com própolis, os poucos que foram feitos visando ao uso em veterinária relacionavam-se a combate de endoparasitas. Muitas doenças de animais vêm acometendo o homem atualmente, tais como as transmitidas pelos carrapato vermelho do cão (Rhipicephalus sanguineus) e carrapato-estrela (Amblyomma cajennense). Problemas de saúde para o gado e queda da produtividade pecuária é causada pelo carrapato do boi (Rhipicephalus microplus). Além disso, é crescente o interesse de profissionais veterinários pelo uso de produtos naturais, sobretudo em relação aos animais domésticos. Vale lembrar que o uso indiscriminado de acaricidas levou à seleção de carrapatos resistentes, de modo que outras estratégias para o controle dessas pragas são de grande importância. Com isso, o intuito do presente projeto foi a determinação da atividade de extratos brutos de própolis brasileira e seus constituintes no controle de carrapatos específicos e generalistas. Foram preparados extratos clorofórmicos de amostras de própolis verde de Lavras (MG) e própolis preta de Picos (PI), anteriormente analisadas quimicamente. Os extratos foram concentrados à secura e redissolvidos para administração a carrapatos mantidos em laboratório. Os ensaios com extratos brutos foram realizados in vitro para avaliar seu efeito nos artrópodos, empregando-se o teste de pacote de larvas. Foram realizados isolamentos biomonitorados, na tentativa de obtenção de substâncias ativas presentes nas própolis analisadas. O extrato bruto de Picos não revelou atividade acaricida. Por outro lado, o extrato bruto de Lavras mostrou-se bastante ativo e, então, foi fracionado por cromatografia em coluna de gel de sílica. As frações resultantes foram novamente avaliadas em ensaios in vitro em carrapatos. Novo fracionamento e novos bioensaios foram realizados, e foi identificada uma subfração com atividade acaricida. Análises por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foram desenvolvidas e quatro substâncias majoritárias (ácido 2,2-dimetil-cromeno-6-propenoico-dicafeoil glucosídeo, artepilina-C, bacarina e ácido 2,2-dimetil-cromeno-8-prenil-6-propenoico) dessa subfração ativa foram isoladas em CLAE-preparativo. As substâncias obtidas foram identificadas por meio de análises espectroscópicas correntes em química de produtos naturais (IV, UV, massas e RMN). Por fim, novos bioensaios foram realizados com a espécie de carrapato mais suscetível, Rhipicephalus microplus, porém não se observou atividade acaricida significativa para as substâncias isoladas. Assim sendo, talvez a alta atividade acaricida constatada na subfração ativa seja decorrente do sinergismo entre substâncias. / Propolis is a resinous substance produced by bees Apis mellifera, containing mainly plant exudates and bee waxes. It is used in the hive to close holes, repair cells and involve intruders that are killed inside the hive. Propolis is important to the bees, as it is responsible for the maintenance of the hive as a sterile environment, acting against bacteria, fungus and even invading larvae. Because of the wide range of biological and pharmacological activities of propolis, it has been extensivelly used in alternative medicine, as well as in cosmetic and food industries. However, few studies have been developed concerning the use of propolis to animal health. Nowadays, many animal diseases have affected humans, such as those transmited by ticks, the brown dog tick (Rhipicephalus sanguineus) and the star tick (Amblyomma cajennense). Cattle health problems and decrease of livestock productivity is caused by the cattle tick (Rhipicephalus microplus). In addition, the interest of veterinary professionals toward the use of natural products to animal health is increasing, mainly for the treatment of domestic animals. It is worth remembering that the indiscriminate use of acaricides leads to resistence selection. Thus, new strategies are of great importance for tick control. Hence, the aim of this project was to determine the activity of crude extracts of Brazilian propolis and their constituents for the control of specific and generalist ticks. Chloroform extracts were prepared from samples of green propolis from Lavras (state of Minas Gerais) and black propolis from Picos (state of Piauí), previously analyzed chemically. The extracts were concentrated to dryness and redissolved for ticks administration in laboratory. The bioassays were carried out in vitro to verify the effectivness of the extracts using the larval package test. Bioassays-guided isolations were carried out to obtain active constituents presented in the studied samples. The crude extract of propolis sample from Picos did not show any acaricide activity. On the other hand, the sample propolis from Lavras showed high activity, and then was fractionated by colunm chromatography in silica gel. The fractions obtained were tested, and a subfraction with acaricide activity was obtained. Analyses by high performance liquid chromatography (HPLC) were developed and four compounds (2,2-dimethyl-cromene-6-propenoic-dicafeoyl glucoside acid, artepillin-C, baccarin and 2,2-dimethyl-cromene-8-prenyl-6-propenoic acid) of the active subfraction were isolated using preparative HPLC. These compounds were identified by means of current spectroscopic analysis in chemistry of natural products (IR, UV, mass and NMR). Finally, new bioassays were carried out with the most susceptible tick specie, Rhipicephalus microplus, but no effect was observed testing the isolated compounds. Thus, probably the high acaricidal activity observed in the active subfraction was due to a synergism among the subfraction constituents.
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Efeito in vitro do monoterpeno carvacrol sobre estágios não ingurgitados de Amblyomma dubitatum Neumann, 1899 (Acari: Ixodidae)Franco, Cristiane Teixeira 29 March 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-03-29 / Amblyomma dubitatum apresenta importante papel como vetor de riquétsias na natureza. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a atividade carrapaticida do carvacrol sobre larvas e ninfas não ingurgitadas de A. dubitatum. A realização dos experimentos ocorreu através do teste de pacote de larvas e ninfas, sendo colocadas no centro de papel filtro, dobrado ao meio, fechado nas laterais com clipes binder e umedecido com 90 μL da solução testada em cada lado. Os grupos foram mantidos em câmara climatizada (27±1°C e UR>80±10) individualizadas. As concentrações testadas foram de 2,5; 7,5; 10; 15 e 20 mg/mL, com 10 repetições para larvas e sete para ninfas por tratamento. Foram formados dois grupos controle para cada estágio: água e etanol 70% (larvas) e água e DMSO 3% (ninfas). A mortalidade de larvas não ingurgitadas tratadas com a menor concentração de carvacrol foi 45,7%, sendo estatisticamente similar (p>0,05) para o grupo controle. Houve diferença estatística (p<0,05) a partir da concentração 7,5 mg/mL em relação ao grupo controle. O percentual de mortalidade de 100% foi obtido a partir da concentração 15 mg/mL, porém foi estatisticamente similar (p>0,05) a concentração 7,5 mg/mL. Para ninfas não ingurgitadas, a menor concentração não resultou em mortalidade, alcançando percentual de mortalidade de 65,7% na concentração de 20 mg/mL. A partir da concentração 10 mg/mL houve diferença estatística (p<0,05) em relação ao grupo controle. Na determinação da CL50, para larvas e ninfas não ingurgitadas foram observados valores de 2,81 mg/mL e 14,57 mg/mL, respectivamente. Os resultados obtidos indicam que carvacrol tem atividade carrapaticida sobre larvas de A. dubitatum. / Amblyomma dubitatum plays an important role as an vector of rickettsia in nature. The aim of this essay was to valuate the acaricial activity of the carvacrol on unengorged larvae and nymphs of A. dubitatum. The process of experiments happen through the packet test of larvae and nymphs, being pu in the center of the filter paper, folded in half, closed on the sides with binder clips and moistened with 90 μL of the solution to be tested on each side. The groups were kept in climate-controlled chamber (27±1°C and RH >80±10%) individuals. The concentrations tested were of 2,5; 7,5; 10; 15 e 20 mg/mL, with ten repetitions for larvae and seven for nymphs per treatment. Were formed two control groups for each stage: water and etanol 70% (larvae) and water and DMSO 3% (nymphs). The mortality of unengorged larvae treated with a lowest concentration of carvacrol was 45,7%, being similar statistically (p>0,05) to the control group. The was difference statistic (p<0,05) from the concentration 7,5 mg/mL in relation to group control. The mortality percentual of 100% was obtained from the concentration of 15 mg/mL, but it was statiscally similar (p>0,05) the concentration7,5 mg/mL. For the nymphs unengorged the lowest concentration did't resulted in mortality, reaching mortality percentual of 65,7% in concentration of 20 mg/mL. From concentration of 10 mg/mL there was difference statistic of (p<0,05) in relation the group controle. In the determination of CL50 for unengorged larvae and nymphs were observed values of 2,81 mg/mL and 14,57 mg/mL, respectively. The results obtained indicate that carvacrol has acaricidal activity on unengorged larvae of A. dubitatum.
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Extratos brutos e constituintes de própolis brasileiras: avaliação dos efeitos nos carrapatos Rhipicephalus sanguineus, Rhipicephalus microplus e Amblyomma cajennense / Propolis extracts and their constituents: evaluation of the effects against the ticks Rhipicephalus sanguineus, Rhipicephalus microplus and Amblyomma cajennenseAdne Abbud Righi 21 June 2013 (has links)
Própolis é uma substância resinosa produzida por Apis mellifera, contendo principalmente resinas vegetais e cera das próprias abelhas. É usada na colmeia para diversas finalidades, como vedar aberturas, reparar as células e envolver invasores que foram mortos na colméia, além de contribuir para a quase constância da temperatura dentro da colmeia (28 - 30oC). A própolis é importante para as abelhas, pois é responsável pela manutenção de um ambiente quase estéril, agindo contra bactérias, fungos e até larvas invasoras. Em virtude do amplo espectro de atividades biológicas e farmacológicas associadas a esse produto, a própolis vem sendo extensivamente utilizada em medicina alternativa, bem como na indústria cosmética e alimentícia. Apesar dos numerosos estudos já realizados com própolis, os poucos que foram feitos visando ao uso em veterinária relacionavam-se a combate de endoparasitas. Muitas doenças de animais vêm acometendo o homem atualmente, tais como as transmitidas pelos carrapato vermelho do cão (Rhipicephalus sanguineus) e carrapato-estrela (Amblyomma cajennense). Problemas de saúde para o gado e queda da produtividade pecuária é causada pelo carrapato do boi (Rhipicephalus microplus). Além disso, é crescente o interesse de profissionais veterinários pelo uso de produtos naturais, sobretudo em relação aos animais domésticos. Vale lembrar que o uso indiscriminado de acaricidas levou à seleção de carrapatos resistentes, de modo que outras estratégias para o controle dessas pragas são de grande importância. Com isso, o intuito do presente projeto foi a determinação da atividade de extratos brutos de própolis brasileira e seus constituintes no controle de carrapatos específicos e generalistas. Foram preparados extratos clorofórmicos de amostras de própolis verde de Lavras (MG) e própolis preta de Picos (PI), anteriormente analisadas quimicamente. Os extratos foram concentrados à secura e redissolvidos para administração a carrapatos mantidos em laboratório. Os ensaios com extratos brutos foram realizados in vitro para avaliar seu efeito nos artrópodos, empregando-se o teste de pacote de larvas. Foram realizados isolamentos biomonitorados, na tentativa de obtenção de substâncias ativas presentes nas própolis analisadas. O extrato bruto de Picos não revelou atividade acaricida. Por outro lado, o extrato bruto de Lavras mostrou-se bastante ativo e, então, foi fracionado por cromatografia em coluna de gel de sílica. As frações resultantes foram novamente avaliadas em ensaios in vitro em carrapatos. Novo fracionamento e novos bioensaios foram realizados, e foi identificada uma subfração com atividade acaricida. Análises por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foram desenvolvidas e quatro substâncias majoritárias (ácido 2,2-dimetil-cromeno-6-propenoico-dicafeoil glucosídeo, artepilina-C, bacarina e ácido 2,2-dimetil-cromeno-8-prenil-6-propenoico) dessa subfração ativa foram isoladas em CLAE-preparativo. As substâncias obtidas foram identificadas por meio de análises espectroscópicas correntes em química de produtos naturais (IV, UV, massas e RMN). Por fim, novos bioensaios foram realizados com a espécie de carrapato mais suscetível, Rhipicephalus microplus, porém não se observou atividade acaricida significativa para as substâncias isoladas. Assim sendo, talvez a alta atividade acaricida constatada na subfração ativa seja decorrente do sinergismo entre substâncias. / Propolis is a resinous substance produced by bees Apis mellifera, containing mainly plant exudates and bee waxes. It is used in the hive to close holes, repair cells and involve intruders that are killed inside the hive. Propolis is important to the bees, as it is responsible for the maintenance of the hive as a sterile environment, acting against bacteria, fungus and even invading larvae. Because of the wide range of biological and pharmacological activities of propolis, it has been extensivelly used in alternative medicine, as well as in cosmetic and food industries. However, few studies have been developed concerning the use of propolis to animal health. Nowadays, many animal diseases have affected humans, such as those transmited by ticks, the brown dog tick (Rhipicephalus sanguineus) and the star tick (Amblyomma cajennense). Cattle health problems and decrease of livestock productivity is caused by the cattle tick (Rhipicephalus microplus). In addition, the interest of veterinary professionals toward the use of natural products to animal health is increasing, mainly for the treatment of domestic animals. It is worth remembering that the indiscriminate use of acaricides leads to resistence selection. Thus, new strategies are of great importance for tick control. Hence, the aim of this project was to determine the activity of crude extracts of Brazilian propolis and their constituents for the control of specific and generalist ticks. Chloroform extracts were prepared from samples of green propolis from Lavras (state of Minas Gerais) and black propolis from Picos (state of Piauí), previously analyzed chemically. The extracts were concentrated to dryness and redissolved for ticks administration in laboratory. The bioassays were carried out in vitro to verify the effectivness of the extracts using the larval package test. Bioassays-guided isolations were carried out to obtain active constituents presented in the studied samples. The crude extract of propolis sample from Picos did not show any acaricide activity. On the other hand, the sample propolis from Lavras showed high activity, and then was fractionated by colunm chromatography in silica gel. The fractions obtained were tested, and a subfraction with acaricide activity was obtained. Analyses by high performance liquid chromatography (HPLC) were developed and four compounds (2,2-dimethyl-cromene-6-propenoic-dicafeoyl glucoside acid, artepillin-C, baccarin and 2,2-dimethyl-cromene-8-prenyl-6-propenoic acid) of the active subfraction were isolated using preparative HPLC. These compounds were identified by means of current spectroscopic analysis in chemistry of natural products (IR, UV, mass and NMR). Finally, new bioassays were carried out with the most susceptible tick specie, Rhipicephalus microplus, but no effect was observed testing the isolated compounds. Thus, probably the high acaricidal activity observed in the active subfraction was due to a synergism among the subfraction constituents.
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Relação entre a toxicidade de mono e sesquiterpenos identificados no óleo essencial de espécies dos gêneros Ocotea (Lauraceae) e Eugenia (Myrtaceae) sobre o ácaro rajado (Tetranycus urticae)MORAES, Marcílio Martins de 14 February 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-02-14 / The present study aims to investigate the chemical composition of essential oil from leaves of Ocotea duckei and Ocotea glomerata and leaves and fruits of Eugenia langsdorffii by GC-FID and GC-MS and to evaluate the acaricide action of essential oils and their compounds (separately and as blends) on the Tetranycus urticae.The oils from the leaves of species of the genus Ocotea were characterized by high percentage of sesquiterpenes. The main compounds identified were β-caryophyllene (18.6 ± 0.1%) and valenceno (17.6 ± 0.0%) for the oil of O. duckei and aromadendrene (17.3 ± 0.6%) and β-caryophyllene (14.6 ± 0.3%) for the oil of O. glemerata. The oils from leaves and fruits of E. langsdorffii were characterized by high percentage of sesquiterpenes. Epi-longipinanol (13.6 ± 0.1%) and -eudesmol (12.3 ± 0.2%) were the main components of oil from the leaves, while 10-epi-- eudesmol (35.7 ± 0.3%) and 1,10-di-epi-cubennol (15.6 ± 0.3%) were the major identified in the oil of the fruits. All oils tested were toxic to T. urticae. The oil of O. duckei (LC50 = 0.52 mL L-1from air) showed 2.5 times more toxic than the oil of O. glomerata fumigation test and 1.5 times more toxic than the oil of O. glomerata (LC50 = 7.22 mL / mL) in the residual contact test. The oil from the leaves of E. langsdorffii (LC50 = 1.7 mL L-1 air) was 1.7 times more toxic than the oil of the fruit by fumigation, and 1.8 times less toxic by residual contact. The fumigation toxicity observed for all oils was much lower compared with the positive control (eugenol). However, the effect of residual contact of the oils from the leaves of O. duckei, O. glomerata and the fruits of E. langsdorffii were only 2.5, 4.0 and 6.7 times lower than that of eugenol. The relationship between property acaricide, constituents and the blends of all the oils investigated in this work is also discussed. / O presente trabalho tem como objetivo investigar a composição química do óleo essencial das folhas de Ocotea duckei e Ocotea glomerata e das folhas e frutos de Eugenia langsdorffii por CG-FID e CG-EM bem como avaliar a ação acaricida desses óleos essenciais e de seus compostos (de forma isolada e na forma de blendas) sobre o Tetranycus urticae. Os óleos das folhas das espécies do gênero Ocotea foram caracterizados pelo alto percentual de sesquiterpenos. Os principais compostos identificados foram o β-cariofileno (18,6±0,1%) e o valenceno (17,6±0,0%) no óleo da O. duckei e o Aromadendreno (17,3±0,6%) e β-cariofileno (14,6±0,3%) no óleo da O. glomerata. Os óleos das folhas e dos frutos da E. langsdorffii foram caracterizados pelo alto percentual de sesquiterpenos. Epilongipinanol (13,6±0,1%) e -eudesmol (12,3±0,2%) foram os componentes principais no óleo das folhas, enquanto que 10-epi--eudesmol (35,7±0,3%) e 1,10- di-epi-cubennol (15,6±0,3%) foram os constituintes majoritários identificados no óleo dos frutos. Todos os óleos testados foram tóxicos ao T. urticae. O óleo da O. duckei (CL50 = 0,52 μL L-1de ar) se mostrou 2,5 vezes mais tóxico do que o óleo da O. glomerata no teste de fumigação e 1,5 vezes mais tóxico do que o óleo da O. glomerata (CL50 = 7,22 μL/mL) no teste de contato residual. O óleo das folhas da E. langsdorffii (CL50 = 1,7 mL L-1 ar) foi 1,7 vezes mais tóxico do que o óleo dos frutos por fumigação, e 1,8 vezes menos tóxico por contato residual. A toxicidade por fumigação observada para todos os óleos foi muito inferior comparada com o controle positivo (eugenol). Entretanto, o efeito de contato residual dos óleos das folhas de O. duckei, O. glomerata e dos frutos da E. langsdorffii foram apenas 2,5; 4,0 e 6,7 vezes menor do que a do eugenol. A relação entre a propriedade acaricida dos constituintes e das blendas de todos os óleos investigados também é discutida.
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