Tesis para optar al grado de Magíster en Bioquímica área de Especialización en Bioquímica Clínica / Streptococcus agalactiae (SGB) es una bacteria Gram positiva anaeróbica facultativa capaz de colonizar el tracto genitourinario de un 15 a un 40% de mujeres sexualmente activas. En la mayoría de los casos la infección con este patógeno es asintomática pero en neonatos puede originar sepsis, meningitis y neumonía. A partir del año 1990 el CDC (Center for Disease Control and Prevention) ha implementado una serie de protocolos de prevención dirigidos a mujeres embarazadas los cuales constan de pruebas microbiológicas realizadas entre las 35 y 37 semanas de gestación y la aplicación de antibióticos intraparto en mujeres colonizadas. A pesar de que medidas han tenido un alto impacto en la disminución de la incidencia de la infección por SGB este patógeno persiste como el único y más frecuente aislado desde la sangre o del fluido cerebroespinal de infantes menores de 3 meses de edad y de mujeres con infecciones intraparto en Estados Unidos y en otros países industrializados. Numerosos estudios realizados a neonatos sanos nacidos de madres colonizadas con SGB indican que estos tienen niveles superiores de anticuerpos IgG transferidos transplacentalmente que aquellos que desarrollaron la infección. Basado en este hecho actualmente se trabaja arduamente en el desarrollo de una vacuna capaz proteger a mujeres embarazadas y sus infantes. En la actualidad, vacunas en base a polisacáridos conjugados están en Fase clínica III, con el inconveniente de que la vacuna ensayada será serotipo dependiente y solamente inducirá una respuesta inmune protectora contra los serotipos incluidos en su formulación (3 de 10 serotipos). Vacunas en base a proteínas conservadas de SGB se encuentran en estudio, una de ellas es la proteína SIP (Surface Immunogenic Protein), con la cual se trabaja en la Sección de Biotecnología del ISPCH. En este estudio se evaluará la respuesta inmune protectora de un prototipo de vacuna en base a la proteína recombinante SIP de SGB, evaluando parámetros inmunológicos que permitan demostrar la inducción de inmunidad protectora en modelo ratón

Source: Masters Abstracts International, Volume: 46-04, page: 2101. Adviser: Carol J. Baker. Includes bibliographical references.

Thesis (Ph.D.)--Auburn University, 2007. / Abstract. Vita. Includes bibliographic references (ℓ. 46-57)

Diss. (sammanfattning) Umeå : Umeå universitet, 2006. / Härtill 3 uppsatser.

Ulm, Univ., Diss., 2008.

Zugl.: Berlin, Freie Universiẗat, Diss., 2008.

Berlin, Techn. Univ., Diss., 2004. / Computerdatei im Fernzugriff.

Este estudo avaliou a colonização vaginal/anal por Streptococcus agalactiae em 167 grávidas entre a 32a e 41a semanas de gestação, atendidas no ambulatório prénatal da Maternidade Escola da Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ), no período de fevereiro de 2003 a fevereiro de 2004. A freqüência de colonização foi de 19,2%, não havendo diferenças significativas quando comparadas variáveis como faixa etária, número de gestações, hipertensão, doenças auto-imunes, prematuridade em gestações anteriores, número de abortos e a presença ou não de diabetes (p>0.05). Todas as 32 amostras isoladas foram sensíveis à penicilina, cefotaxima, ofloxacina, cloranfenicol, vancomicina e meropenem. Com relação à penicilina, a resistência apresentada por 3 amostras no teste de difusão, não foi confirmada pelo teste de diluição. A resistência concomitante a clindamicina e eritromicina foi verificada em 2 amostras; estas apresentaram o fenótipo MLSB constitutivo. A amostra resistente apenas a eritromicina apresentou o fenótipo M. A incidência relativamente elevada (19,2%) de colonização por S.agalactiae entre as gestantes estudadas e o isolamento de amostras resistentes aos antibióticos recomendados nos casos de alergia à penicilina, enfatizam a importância de detectar esta colonização no final da gravidez assim como de avaliar a susceptibilidade de S.agalactiae aos antimicrobianos, para uma correta prevenção da infecção neonatal. / This study evaluated the vaginal/anal colonization by Streptococcus agalactiae among 167 pregnant women between 32nd and 41st weeks of gestation, attended in the prenatal ambulatory of the School Maternity of Rio de Janeiro University (UFRJ), during the period from february 2003 to february 2004. The frequency of colonization was of 19,2%, without significant differences when variants like age, number of gestations, premature delivery in previous pregnancies, number of abortions and the presence or absence of diabetes (p>0,05) were compared. All 32 strains isolated were susceptible to penicillin, cefotaxime, ofloxacin, chloramphenicol, vancomycin and meropenem. Resistance to penicillin of two strains, as detected by disk diffusion susceptibility test, was not confirmed by dilution antimicrobial susceptibility tests. The concomitant resistance to clindamycin and erythromycin was verified in 2 strains; these presented the constitutive MLSB phenotype. The isolate resistant only to erythromycin presented the M phenotype. The relatively high incidence (19,2%) of colonization by S. agalactiae among the pregnant women evaluated and the recovery of antimicrobial resistant strains, specialy those recommended in cases of penicillin allergy, emphasize the importance, for a correct prevention of neonatal infections, to detect colonization at the end of pregnancy and to evaluate the antimicrobial susceptibility of S. agalacti

A agalaxia contagiosa é uma doença de notificação obrigatória que causa severas perdas econômicas para produção de ovinos e caprinos mundialmente. Apesar de seu impacto na produção animal, pouco se sabe sobre os fatores de virulência e patogenicidade do M. agalactiae (principal agente etiológico). Desta maneira, o presente estudo possuiu como objetivo a identificação, purificação e caracterização de proteínas antigênicas de M. agalactiae. Para tanto, quatro proteínas de superfície com potencial antigênico (WP_011949419.1, WP_011949418.1 (P40), WP_011949336.1, WP_011949770.1) foram selecionadas. Essas proteínas foram expressas em Escherichia coli e purificadas em coluna de níquel. As proteínas purificadas foram avaliadas quanto a antigenicidade em Western blotting utilizando soros de caprinos naturalmente infectados com M. agalactiae. Todas as proteínas expressas foram imunorreativas aos soros de caprinos naturalmente infectados, demonstrando que as proteínas utilizadas nesse estudo são possivelmente antigênicas e possuem epítopos acessíveis. / The Contagious agalactia is a notifiable disease that causes severe economic losses to sheep and goats worldwide. Despite its impact on animal production, little is known about the virulence factors and pathogenicity of M. agalactiae (main etiological agent). Thus, the present study identified, purified and characterized antigenic proteins of M. agalactiae. Therefore, four surface proteins with antigenic potential (WP_011949419.1, WP_011949418.1 (P40), WP_011949336.1, WP_011949770.1) were selected. These proteins were expressed in Escherichia coli and purified on nickel column. The purified proteins were assayed for antigenicity by Western blotting using goat sera naturally infected with M. agalactiae. All expressed proteins were immunoreactive with sera from naturally infected goats, demonstrating that the proteins used in this study are possibly antigenics and it have acessible epitopes.

A agalaxia contagiosa é uma doença de notificação obrigatória que causa severas perdas econômicas para produção de ovinos e caprinos mundialmente. Apesar de seu impacto na produção animal, pouco se sabe sobre os fatores de virulência e patogenicidade do M. agalactiae (principal agente etiológico). Desta maneira, o presente estudo possuiu como objetivo a identificação, purificação e caracterização de proteínas antigênicas de M. agalactiae. Para tanto, quatro proteínas de superfície com potencial antigênico (WP_011949419.1, WP_011949418.1 (P40), WP_011949336.1, WP_011949770.1) foram selecionadas. Essas proteínas foram expressas em Escherichia coli e purificadas em coluna de níquel. As proteínas purificadas foram avaliadas quanto a antigenicidade em Western blotting utilizando soros de caprinos naturalmente infectados com M. agalactiae. Todas as proteínas expressas foram imunorreativas aos soros de caprinos naturalmente infectados, demonstrando que as proteínas utilizadas nesse estudo são possivelmente antigênicas e possuem epítopos acessíveis. / The Contagious agalactia is a notifiable disease that causes severe economic losses to sheep and goats worldwide. Despite its impact on animal production, little is known about the virulence factors and pathogenicity of M. agalactiae (main etiological agent). Thus, the present study identified, purified and characterized antigenic proteins of M. agalactiae. Therefore, four surface proteins with antigenic potential (WP_011949419.1, WP_011949418.1 (P40), WP_011949336.1, WP_011949770.1) were selected. These proteins were expressed in Escherichia coli and purified on nickel column. The purified proteins were assayed for antigenicity by Western blotting using goat sera naturally infected with M. agalactiae. All expressed proteins were immunoreactive with sera from naturally infected goats, demonstrating that the proteins used in this study are possibly antigenics and it have acessible epitopes.