Much research has been done on the formation of fibrils from solutions of soluble collagen in vitro in order to gain some knowledge of the mechanisms which may occur in vivo. The in vitro formation of fibres from solutions of collagen has been shown to be extremely sensitive to the nature of the solution environment and the presence of added chemical compounds, and thus constitutes an interesting system for the study of collagen-small molecule inter actions. The present study is concerned with the effects of various corticosteroid drugs, used medicinally as anti-inflammatory agents, on collagen in solution. As these corticosteroids are administered to reduce inflammation in conditions such as rheumatoid arthritis and a host of other pathological conditions in which collagen is implicated, this work has been undertaken in order to establish and charac teri ze any binding mechanisms which may be involved. Furthermore, the corticosteroid drugs available commercially in pure form as the free base or as the water-soluble ester salts offer an interesting range of structural and stereochemical variants for the study of their reaction with a complex and biologically important protein molecule such as collagen. A great deal of research on drug- protein interactions (Goldstein, 1949; Meyer and Guttman, 1968a) and more specifically, steroid-protein interactions have been reported over the years (Daughaday, 1959; Sandberg et al., 1966; Villee and Engel, 1961; Westphal , 1971). Comprehensive reports, however, on steroid-collagen interactions in vitro are conspicuously absent from modern scientific literature although relatively superficial accounts have been published (Menczel and Maibach, 1972; Eik-Nes et al., 1954). Although work involving the above has appeared relating specifically to the effects of steroids on collagen biosynthesis both in vivo and in vitro there have been minimal accounts of steroid-collagen interactions tailored to characterize the binding at the molecular level. The effect of corticosteroids on the metabolism of connective tissue has also received special attention (Asboe-Hansen, 1959; Kivirikko, 1953; Nakagawa and Tsurufuji, 1972). Recently, Uitto et al. (1972) reported the effects of several anti-inflammatory corticosteroids on collagen biosynthesis in vitro, whilst Aalto and Kulonen (1972) reported the effects of several antirheumatic drugs on the synthesis of collagen and other proteins in vitro. The interactions between collagen and certain drugs has also been briefly reviewed (Chvapil, 1967). Much data also exists on the binding of a wide range of small molecules and ions with serum albumin (Steinhardt and Reynolds, 1969; Scatchard, 1949; Klotz, 1950). Serum albumin, being specialized for a very general transport function and apparently designed for the purpose of combining with a large range of small molecules, has a proportion of possible reactive sites 'buried' within the molecule itself because of its folded conformation. In addition, serum albumin shows a high degree of cooperative binding in contrast to collagen. The latter molecule, with its larger molecular size and weight is specialized for a biologically structural function and has a higher proportion of possible reactive sites which appear relatively more accessible to ligands. A study of the interactions between corticosteroids and collagen thus provides the opportunity to investigate a protein which is very different from the much studied serum albumin. Because of the limited information available regarding the interaction of steroid drugs and collagen at the molecular level, studies of this nature are relevant to the understanding of the mode of action of steroid compounds which are such an important group of therapeutic substances used in modern medicine.

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Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-09-01T12:21:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSETAÇAO_DEPOSITO.pdf: 1662534 bytes, checksum: 6bdb1ae293f1a65771c195438f64d3f0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-01T12:21:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSETAÇAO_DEPOSITO.pdf: 1662534 bytes, checksum: 6bdb1ae293f1a65771c195438f64d3f0 (MD5) Previous issue date: 2016-03-09 / CAPEs / A artrite reumatóide (AR) é uma doença crônico-degenerativa, sistêmica, auto-imune. Atualmente, o anticorpo antipeptídeo citrulinado cíclico (Anti-PCC) é considerado o marcador mais importante para o diagnóstico preditivo e prognóstico da AR. Neste trabalho, desenvolveu-se um imunossensor eletroquímico para detecção do Anti-PCC, a partir da modificação da superfície de um eletrodo de carbono vítreo com nanocompósito de óxido de grafeno reduzido-polissulfona (Gor-PSF) o qual apresenta boas características de aumento da área eletrocatalítica e imobilização de moléculas biológicas. Foram realizados capturas de imagens micrográficas por microscopia eletrônica de varredura da superfície do eletrodo de trabalho antes e após sua modificação, pelas quais foi possível comprovar uma superfície lisa não modificada sem estruturas adsorvidas após limpeza física, e que a superfície modificada com Gor-PSF apresentou um recobrimento ideal de toda a superfície com a presença de uma estrutura esponjosa comprovando a modificação da área de trabalho. Para captura do Anti-PCC, antígenos citrulina (CCP-Ag) foram imobilizados sobre a superfície eletródica do nanocompósito por provável ligação covalente entre os grupos amino e carboxilícos presentes no CCP-Ag e no óxido de grafeno reduzido, respectivamente. A técnica de voltametria de onda quadrada (VOQ) foi empregada para detecção do Anti-PCC, produzindo um imunossensor livre de marcação. Observou-se que o GOR-PSF foi capaz de aumentar a corrente de pico anódico (Ipa) 2,2 vezes mais, comparado com o controle (sem GOR-PSF) demonstrando que o filme proporcionou melhor capacidade eletrocatalítica, sendo também estável (coeficiente de variação da corrente < 1 %) avaliado por submeter o eletrodo a 20 ciclos consecutivos de voltametria cíclica. O imunossensor proposto apresentou uma boa linearidade com r=0,983 (p<0.003; n = 5) e limite de detecção de 0,004 ng/mL de Anti-PCC. A plataforma sensora demonstrou propriedades desejáveis de estabilidade, sensibilidade e reprodutibilidade na detecção de Anti-PCC com perspectivas de desenvolvimento de dispositivos “point-of-care”. / Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic degenerative disease, systemic, autoimmune. Currently, the cyclic citrullinated peptide (anti-CCP) is considered the most important predictive marker for the diagnosis and prognosis of RA. In this work, we developed an electrochemical immunosensor for the detection of anti-CCP, from the surface modification of a glassy carbon electrode with nanocomposite reduced-polysulfone graphene oxide (GOr-PSU) which has good rise characteristics of electrocatalytic area and immobilization of biological molecules. of micrographic images catches were performed by scanning electron microscopy of the surface of the working electrode before and after modification, by which it was possible to establish a smooth unmodified without adsorbed structures after physical cleaning, and that the modified surface with GOr-PSU presented an ideal coating the entire surface with the presence of a spongy structure confirming the modification of the work area. For capture of anti-CCP, citrulline antigens (Ag-CCP) were immobilized on the electrode surface of the nanocomposite probably due to covalent bond between the amino and carboxylic groups present in the CCP-Ag and the reduced graphene oxide, respectively. Square wave voltammetry technique (VOQ) was used for detection of anti-CCP producing a marking-free immunosensor. It was observed that the GOR-PSU was capable of increasing the anodic peak current (IPA) 2.2 times as compared with the control (without GOr-PSU) demonstrating that the electrocatalytic film provided better capacity also being stable (coefficient the variation of the current <1%) evaluated by subjecting the electrode 20 consecutive cycles of cyclic voltammetry. The proposed immunosensor exhibited good linearity with r = 0.983 (p <0.003; n = 5) and a detection limit of 0.004 ng / ml anti-CCP. The sensing platform demonstrated desirable properties of stability, sensitivity and reproducibility in the Anti-CCP detection with prospects of development of devices "point-of-care."

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-02-13T14:07:28Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) tese completa corrigida_junho (2016).pdf: 2219391 bytes, checksum: 7ac2338dbd07d9a53a3344311f51b5ce (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-13T14:07:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) tese completa corrigida_junho (2016).pdf: 2219391 bytes, checksum: 7ac2338dbd07d9a53a3344311f51b5ce (MD5) Previous issue date: 2014-05-26 / A artrite reumatóide (AR), é uma doença crônica inflamatória, em cuja etiologia estão envolvidos fatores genéticos, ambientais e infecções. Dentre as infecções se destacam as virais cujas proteínas modificam a função dos sinoviócitos como ocorre com o Parvovírus B19 (PVB19). Estudos tem mostrado a participação das citocinas IL-6 e L-10 na fisiopatogenia da AR. O diagnóstico da AR se baseia em critérios clínicos, radiológicos e laboratoriais.Dentre os auto- anticorpos, o fator reumatóide (FR) apresenta alta sensibilidade e baixa especificidade. Por lado, o anticorpo antipeptídeo citrulinado cíclico (ACCP) é um importante marcador para o diagnóstico e tem valor preditivo de um pior prognóstico. Sua detecção pelo ELISA, têm mostrado excelente desempenho diagnóstico, embora seja oneroso e mais demorado. Visando diagnósticos mais rápidos e práticos, os biossensores são ideais para testes tipo “point-of-care” devido à sua portabilidade. Os objetivos desta tese foram: avaliar a correlação dos niveis séricos de IL-10, IL-6 e a frequência do anti-IgG PVB19 com atividade clínica da AR mediante os índices compostos de atividade de doença (ICADs).em diferentes tratamentos e desenvolver um imunossensor eletroquímico label free para ACCP.Foi desenvolvido um estudo transversal para estimar a frequencia de anti-IgG PVB19 e determinar os níveis séricos da IL6 e IL10 pelo método ELISA.O imunossensor constituído por eletrodos screen printed de ouro,foi baseado no uso da SAM formada pela deposição do àcido tioglicólico.Oa antígenos foram imobilizadosde modo orientado via grupos carboxílicos do TGA. Os resultados mostraram uma frequencia de 73% (60/83) de IgG anti-PVB19 e uma correlação significativa entre os níveis de IL-6 e as medidas de atividade de AR nos pacientes com maior atividade inflamatória pelo EULAR. O maior contigente de pacientes IgG anti-PVB19 positivos estava com moderada e alta atividade pelo EULAR.O imunossensor eletroquímico apresentou uma resposta linear na curva de calibração, bom coeficiente de correlação e limite de detecção menor do que o método ELISA. / Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic inflammatory disease, whose etiology is influenced by genetics, the environment, and infections. Among the various types of infections, the ones that stand out are the viral infections whose proteins alter the function of synoviocytes as occurs with Parvovirus B19 (PVB19). Studies have shown the involvement of the IL-6 and IL-10 cytokines in the physiopathogenesis of RA. Diagnosis of RA is based on clinical, radiological, and laboratory criteria. In the autoantibodies, the rheumatoid factor (RF) has high sensitivity and low specificity. The Anti-cyclic Citrullinated Peptide (anti-CCP) is an important marker for the diagnosis and as a predictive value of a worst-case prognosis.Its detection by ELISA has shown excellent diagnostic performance, but it is expensive and takes longer.Aiming for faster and more practical diagnostics, biosensors are ideal for point-of-care testing, due to their portability. The objectives of this thesis were to evaluate the correlation of the serum levels of IL-10 and IL-6and the frequency of anti-IgG PVB19,with the clinical activity of RA, via composite indices of disease activity, under different treatments, in order to develop a labelfree electrochemical immunosensor for anti-CCP. A cross-sectional study was developed to estimate the frequency of anti-IgGPVB19and to determine the serum levels of IL-6 and IL-10 by the ELISA method. The immunosensor consisting of screen-printed gold electrodes was based on the use of the self-assembled monolayer (sam) formed by deposition of thioglycolic acid. The antigens were immobilized, driven via carboxylic groups of the TGA. The results showed a frequency of 73% (60/83) of IgG anti-PVB19 and a significant correlation between the levels of IL-6 and the activity measures of AR in the patients with higher inflammatory activity according to the EULAR. Most of the IgG anti-PVB19 positive patients had moderate and high activity according to the EULAR. The electrochemical immunosensor showed a linear response in the calibration curve, a good correlation coefficient, and a detection limit lower than the ELISA method.

Orientador: Alba Regina Monteiro Souza Brito / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T07:26:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Antonio_MarciaAparecida_M.pdf: 4108229 bytes, checksum: d450596d813706782c5d85b7c7c09a58 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A Tumera ulmifolia L. pertence à família Turneraceae e é popularmente conhecida como chanana. É um subarbusto de flores amareladas, comum no nordeste do Brasil. Devido ao seu uso popular em distúrbios inflamatórios, foram estudadas as propriedades antiinflamatórias do extrato hidroalcoólico bruto (EHB) e de sua fração ativa (Fr.EtOH) em modelos de inflamação, com o objetivo de fornecer subsídios para seu uso tradicional. Em ensaios de toxicidade aguda, verificou-se que EHB não foi tóxico aos animais quando administrado pelas vias oral (DLso > 15 g/kg) e intraperitoneal (DLso = 7.8 g/kg), demonstrando ser praticamente inócuo. EHB (1g/kg, po) e Fr.EtOH (100 mg/kg, po) mostraram efeito antiedematogênico dose-dependente em ensaios de edema de pata induzido por carragenina. As respostas máximas de ambos ocorreram 3 horas após o tratamento com o agente flogístico, com porcentagens de inibição de 30%. A DEso de Fr.EtOH foi de 150 mg/kg. EHB (1g/kg, po) reduziu o aumento de permeabilidade vascular induzido por PGE2 (34%), histamina (54%) e 5-hidroxitriptamina (79%), mas não aquele aumento induzido por bradicinina, enquanto que o diclofenaco sódico (5 mg/kg, po) diminuiu a permeabilidade vascular induzida por todos estes mediadores, com porcentagens de inibição de 46, 63, 88 e 61%, respectivamente. No teste de granuloma cotton pel/et, EHB (1 g/kg, po) e diclofenaco sódico (5mg/kg, po) mostraram ser equivalentes em inibir a fase transudativa do granuloma (57 e 54%, respectivamente), mas somente o diclofenaco sódico inibiu a fase proliferativa (64%). Foi avaliada a influência de Fr.EtOH (5 mg/kg, ip) sobre os parâmetros hematológicos do sangue periférico e do exsudato peritoneal. Nenhuma alteração relativa aos perfis numéricos totais eritrocitário e leucocitário do sangue periférico foi evidenciada; entretanto, na contagem diferencial dos leucócitos foi detectado um aumento do número de basófilos (80%). A análise dos dados obtidos no estudo do exsudato peritoneal demonstrou que Fr.EtOH (5 mg/kg, ip) inibiu, de modo dosedependente, a migração de leucócitos para o peritôneo. Esta diminuição ocorreu principalmente devido a uma redução no número de linfócitos (78%) e neutrófilos (57%) que migraram para a cavidade peritoneal. Por outro lado, em estudo de potência antiinflamatória versus atividade ulcerogênica, EHB (1g/kg, po) não potencializou as lesões gástricas induzidas pelo ácido acetilsalicílico, pelo contrário, produziu uma redução de 67% do índice de lesões ulcerativas (ILU). EHB (1 g/kg, po) e Fr.EtOH (100 mg/kg, po) reduziram as lesões gástricas induzidas por ligadura do piloro, inibindo o ILU em 79 e 82%, repectivamente; etanol (1 mllanimal, po) inibindo o ILU em 60 e 55%, respectivamente; assim como aquelas induzidas por indometacina (30 mg/kg, sc) inibindo o ILU em 51 e 57%, respectivamente; entretanto, ambos não foram capazes de produzir inibição sobre as lesões gástricas produzidas por estresse. A Fr.EtOH (100 mg/kg, po) produziu um aumento (38%) da formação de muco da barreira gastroprotetora; já a carbenoxolona (200 mg/kg, po) também aumentou o muco em cerca de 42%. Adicionalmente, Fr.EtOH (100 mg/kg, po) não produziu inibição do número de contorções abdominais induzidas por ácido acético (0.6%, ip), enquanto que a dipirona magnesiana (200 mg/kg, po) foi capaz de reduzir cerca de 90% dessas contorções. Assim, nos modelos de inflamação utilizados, EHB e Fr.EtOH apresentaram marcada atividade antiinflamatória, não acompanhada de danos gástricos; ao contrário, ambos apresentaram ações antiulcerogênicas em vários modelos experimentais de úlcera gástrica. Deste modo, foi possível confirmar, ainda que preliminarmente, as informações populares do uso em inflamação da espécie vegetal Tumera ulmifolia / Abstract: Tumera ulmifolia L. from the Tumeraceae family is popularly know as "chanana". It's a yellow flowered shrub fouf.'ld in the northeast states of Brazil. This plant is used by the natives for treatment of inflammatory disorders. Based on this knowledge the inflammatory properties of crude hydroalcoholic extract (CHE) and the active fraction (Fr.EtOH) of this plant were studied using a wide range of inflammation models. Acute toxicity assays using oral (DLso >15 g/kg) and intraperitoneal (DLso = 7.8 g/kg) administration of CHE weren't toxic to animais proving to be almost harmless. In carrageenin-induced rat paw edema assays CHE (1g/kg, po) and Fr.EtOH (100 mg/kg, po) revealed dose dependent inhibition effect. The highest reponse were obtained three hours after flogist agent treatment, with about 30% of inhibition. The EDso value of Fr.EtOH was calculated as being 150 mg/kg. CHE (1 g/kg, po) remarkably lowered the induced vascular permeability increase by prostaglandin E2 (34%), histamine (54%) and 5-hydroxitryptamine (79%), but not the inerease induced by bradykinin, whereas sodium dielofenac (5 mg/kg, po) diminished the induced vascular permeability in ali this inflammatory mediators, with inhibition of 46, 63, 88 and 61%, respectively. Cotton pellet granuloma assay of both CHE (1 g/kg, po) and sodium diclofenac (5 mg/kg, po) showed the same / inhibition of the transadutive phase (57 and 54%, repectively), but only sodium diclofenac inhibited the proliferative phase (64%). The acute administration of Fr.EtOH (5 mg/kg, ip) on. hematological peripheric blood and peritoneal exudate parameters were evaluated. No alterations on total number of eritrocytes and leucocytes of peripherical blood were observed, however leucocyté diferential count detected basophils increase (80%). The results from the peritoneal exudate assay showed that Fr.EtOH inhibited in a dosedependent manner the leueocyte migration toward the peritoneal cavity. This reduction was caused mainly by the decrease on the number of linphocytes (78%) and neutrophils (57%) migrating to the peritoneal cavity. However, when comparing antiinflammatory versus ulcerogenic activity, CHE (1 g/kg, po) didn't potentialize gastric mucosas lesions caused by aspirin, instead produced 67% of ulcerative lesion inhibition (ILU). CHE (1 g/kg, po) and Fr.EtOH (100 mg/kg, po) inhibited gastric induced lesions by pylorus ligature (79 and 82%), with absolute ethanol (1 mllanimal, po) 60 and 55%, those induced by indomethacin (30 mg/kg, se) were inhibited by 51 and 57%. However, neither CHE or Fr.EtOH were able to inhibited gastric lesions caused by hypotermic-restraint stress. Gastric barrier mucus formation increased by Fr.EtOH (100 mg/kg, po) in 38%, carbenoxolone (200 mg/kg, po) also raised the mucosa barrier about 42%. Fr.EtOH (100 mg/kg, po) didn't reduced abdominal writhing induced by acetic acid, whereas magnesion dipirone decreased in 90% the abdominal writhing. 80th CHE and Fr.EtOH showed antiinflammatory activity in several experimental models, therefore confirming, preliminarely, the activity of Tumera ulmifolia mentioned by natives / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Thales Rocha de Mattos Filho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-22T12:23:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_LucianeCruzLopes_D.pdf: 5490102 bytes, checksum: 5caae8500670ea147adcb8d9112d9e19 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: O efeito terapêutico dos antiinflamatórios não esteroidais (NSAIDs) vem acompanhado de efeitos indesejáveis relacionados à irritação gástrica, alterações de hemostasia, entre outros. Nimesulide (NMSL) é um NSAID que apresenta mecanismo de ação bastante peculiar. Estudos recentes mostram que o NMSL apresenta pouca atividade sobre a COX-1. O objetivo deste estudo foi verificar se o NMSL altera a função plaquetária e o tempo de sangramento (TS) o que, em odontologia, seria desvantajoso, podendo induzir um sangramento excessivo e, conseqüentemente, uma interferência negativa nos processos de reparação tecidual. Para tanto, a função plaquetária foi avaliada in vitra; ex vivo e in vivo. Amostras de sangue de voluntários sadios foram coletadas, em citrato de sódio 3.8%, para obtenção do plasma rico em plaquetas (PRP). O PRP foi incubado com NMSL(0.01 µM a 1 OOOµM) ou AAS (0.1 µM a 1 OOµM) por 20 min a 37°C sobre constante agitação. A IC50 para o efeito antiagregante plaquetário do NMSL e do AAS foi determinada após a adição de ADP(1 µM), ácido araquidônico (AA 1 mM), fator ativador plaquetário (PAF 1-3µM), colágeno (COL 2.5 - 5.0 µg/ml) e adrenalina (ADR 1 O~M). A formação de TXA2 após adição dos agonistas ao PRP foi determinada por radioimunoensaio. Nos estudos ex vivo, voluntários sadios foram selecionados e divididos em 2 grupos, tratados com NMSL (cp 100mg, n=4) ou com AAS (cp 100mg, n=3). Amostras de sangue foram coletadas antes e após 2 e 4h do tratamento, seguindo os procedimentos do estudo in vitro quanto a verificação da agregação plaquetária e determinação da produção de TXA2. IN VIVO, foram utilizadas as mesmas doses das drogas, seguida da determinação do TS utilizando SIMPLATE - 11 R®, antes e após 2, 4, 8, 24h e 7 dias. Verificou-se que- o NMSL é menos potente que o AAS para inibir a agregação plaquetária in vitra, induzida por ADP, CaL, ADR e AA, exceção feita ao PAF. Seu efeito é concentração e tempo dependentes. A produção de TXA2 foi inibida pelo NMSL(>30µM) em concentrações superiores a do AAS (>3µM) nos estudos in vitro. No entanto, a inibição de mais de 80% da produção de TXA2 só foi alcançada em concentrações superiores à 1 OO~M. NMSL não interferiu com a agregação plaquetária no ensaio ex vivo, inibindo entretanto, significativamente (p<0.05) a produção de TXA2 induzida por PAF. NMSL prolongou o TS (em média 56%) nos períodos 4h e 8h em proporções menores que o AAS (em média 160%); este, por sua vez interferindo nos tempos 2h, 4h, 8h e 24h. Concluíse que NMSL é menos potente que o AAS quanto a inibição da COX-1 plaquetária. No entanto, outros mecanismos podem estar envolvidos, dada a especificidade de ação desta droga para inibir os efeitos mediados pelo PAF, como por exemplo, a interferência com a fosfodiesterase plaquetária / Abstract: The therapeutic effect of nonsteroidal anti-inflammatory (NSAIDs) come with undesired effects related with gastric irritation, homeostatic changes, among others. Nimesulide (NMSL) is a NSAID that present ample peculiar action mechanism. Early studies show that the NMSL present short activity above COX-1. The objective of this study was verify if the NMSL modifies the platelet function and the bleending time (TS) what in odontology could be disadvantageous, prejudicing the cicatrixation of de damaged area. For this, platelet function was valued in vitro; ex vivo and in vivo. Voluntaries blood samples was collected in sodium citrate 3.8%, to obtainment of platelet rich plasma (PRP). The PRP was incubated with NMSL(0.01/lM a 1000/lM) or AAS(0.1/lM a 100/lM) per 20 min in 37°C above constant agitation. The IC50 to platelet anti-aggregation of NMSL and the AAS was determinated afier the addition of ADP.(1 /lM), aracdonic acid (AA 1 mM), platelet activating factor (PAF 1-3/lM), colagen (CaL 2.5 - 5.0 /lg/ml) and adrenaline (ADR 10/lM). The formation of TXA2 afier addition of agonistics of PRP was determinated by radioimunoassay. In ex vivp studies, health voluntaries was selected and distributed in 2 groups, with NMSL treatment (cp 100mg, n=4) or AAS (cp 100mg, n=3). Blood samples was collected before and afier 2h and 4h of treatment, following de proceeds of in vitro study while the verification of platelet aggregation and determination of the production of TXA2. IN VIVO, was utilized the same drugs doses, following the TS determination using SIMPLATE - 11 R@, before and afier 2h, 4h, 8h, 24h and 7 days. Was find out that the NMSL is less potent than the AAS to inhibit the platelet aggregation in vitro, induced by ADP, CaL, ADR e AA, exception made to PAF. His effect is concentration and time dependo The TXA2 production was inhibited by NMSL (>30/lM) in concentrations higher than AAS (>3/lM) in in vitro studies. Although more than 80% inhibition of' production only was reached in higher concentrations than 100/lM. NMSL didn't' interfered with the platelet aggregation in ex vivo assays, however inhibiting significantly (p<0.05) the TXA2 production induced by PAF. NMSL prolonged the TS (mean 56%) into times 4h and 8h in smaller proportions than AAS (mean 160%), that interfered into times 2h, 4h, 8h and 24h. Has been concluded that NMSL is less potent than AAS in the COX-1 platelet inhibition. Although others mechanisms may be involved, seem this drug especifity of action to inhibit the mediated effects by PAF, like a example, the interference with the platelet phosphodisterases / Doutorado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Doutor em Ciências

Orientador: Maria Cecilia Ferraz de Arruda Veiga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-26T03:03:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arsati_Franco_M.pdf: 1411836 bytes, checksum: 78885f4584b213b891a7d1e6cd1d7c83 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Estudos têm demonstrado que aproximadamente 20 a 30% da população adulta irá sofrer algum tipo de disfunção temporomandibular (DTM). Entretanto pouco se sabe a respeito dos mecanismos envolvidos com a inflamação e com a dor inflamatória que acompanham as DTMs. Em vista disso, HASS et aI. (1992) desenvolveram um modelo específico para o estudo do processo inflamatório agudo em A TM de ratos. Os autores demonstraram que a administração intra-articular do agente inflamatório e estimulante de fibra - C, Óleo de Mostarda (OM), induz um extravasamento plasmático (EP) quantificável na articulação temporomandibular. Entretanto não se conhece a contribuição dos metabólitos do ácido araquidônico no EP induzido pelo OM nesse modelo experimental de inflamação. Assim sendo, o objetivo desse trabalho foi o de testar o efeito da administração intraperitoneal (IP) do meloxicam sobre o EP induzido pelo OM. A inflamação foi induz ida, em três grupos de ratos anestesiados,' através da administração de 20~l' de OM nas concentrações de 20%, 2,5% e 0,5%, respectivamente. Para quantificar o EP, foi utilizado a técnica do corante azul de Evans. O antiinflamatório meloxicam ou salina (controle), foram administrados sistemicamente (IP) 2 h antes da administração do OM. O meloxicam na dose de 22 mglkg foi ineficaz em reduzir o EP induzido pelo OM nas concentrações de 20 e 2,5%. Entretanto, quando a inflamação foi induzida pelo OM a 0,5% e o meloxicam administrado na dose de 22 mg/kg, houve uma significativa (p<O,05) redução do EP (média + desvio padrão, 27,85 + 3,94) comparado cOm o grupo controle (43,21 :t 4,84).padrão, 27,85 :t 3,94) comparado com o grupo controle (43,21 :t 4,84). Os resultados obtidos demonstram que: 1) O OM nas concentrações de 20 e 2,5% não deve ser utilizado para o estudo de antiinflamatórios nesse modelo experimental de inflamação, sendo que a concentração de 0,5% é mais apropriada para tal objetivo. 2) As prostaglandinas estão envolvidas na inflamação neurogênica induzida pelo OM / Abstract: Little is known about the mechanism(s) involved in both initiation and maintenance of inflammation and inflammation - related pain within the temporomandibular joint (TMJ). Thus, HASS et aI. (1992), developed an orofacial model of acute inflammation in the rat. They showed that application of the small fiber excitant and inflammatory irritant mustard oil (MO) to the temporomandibular joint (TMJ) induces plasma protein xtravasation. However, relatively little is known about the contribution of eicosanoids (prostaglandins) to the plasma protein extravasation induced by MO. The purpose of this study was to test the effect of intraperitoneal (IP) administration of meloxicam on the plasma protein extravasation induced by MO. Inflammation was induced, in three indiyidual groups, by the intra-articular administration of 20 JlI of 20%, 2,5% and 0,5% MO, respectively. Plasma protein extravasation was measured by the Evans blue method. Meloxicam or saline (control) were given (IP) 2 hours before the administration of MO. Even in high dose (22 mg/kg), meloxicam did not have inhibitory effect on the protein plasma extravasation induced by 20% and 2,5% MO. On the other hand, when the inflammation was induced by 0,5% MO, the pretreatment with meloxicam induced a significant (p<0,05) reduction in the plasma protein extravasation (mean :I:: S.E.M; 27,85 ::I: 3,94) compared with the control (43,21 ::I: 4,84).These results demonstrated that 1) 0,5% MO is more appropriate than 20% or 2,5% to the study of anti-inflammatory drugs in this model of inflammation and that 2) prostaglands are involved in the MO-induced protein plasma extravasation / Mestrado / Fisiologia Oral / Mestre em Odontologia

Orientador : Maria Cecilia Ferraz de Arruda Veiga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-01T10:16:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Boleta_DanieladeCassiaFaglioni_M.pdf: 2374776 bytes, checksum: 0670dab02db5e421ca67b8f1d3033e7f (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Pouco se sabe sobre os mecanismos fisiopatológicos envolvidos com a inflamação eador inflamatória que acompanham as disfunções temporomandibulares. O objetivo desse trabalho foi padronizar um modelo para o estudo da inflamação aguda na região da articulação temporomandibular (A TM) de ratos utilizando carragenina (CA) e verificar os possíveis efeitos de drogas antiinflamatórias nesse modelo. Para tanto, CA 100 I-Ig/501-lL (A TM esquerda) e salina (A TM direita) foram administradas periarticularmente para determinar o extravasamento plasmático segundo a técnica descrita por FIORENTINO, et aI., (1999), em diferentes tempos (60, 120 e 180 minutos) (3 grupos n=5). A seguir, foi realizada a administração periarticular de CA em diferentes concentrações (100, 300 e 450 I-Ig/50 1-1 L) (A TM esquerda) e salina 0,9% (A TM direita) e o extravasamento plasmático foi avaliado no tempo de 60 minutos (4 grupos n=6). Em grupos adicionais foram administrados dexametasona (2,3; 4,6 e 6,9 mg/Kg) e meloxicam (7, 14 e 21 mg/Kg) intra-peritonealmente 2 horas antes da administração periarticular de CA 300 J-lg/50 J-lL (A TM esquerda) e de salina (A TM direita), após 60 minutos o extravasamento plasmático foi determinado. Realizou se um estudo morfológico em outros 2 grupos de animais (n=3), nos quais meloxicam (21 mg/Kg) ou salina 0,9% foram administrados via intraperitoneal, 2 horas antes da administração periarticular de CA 3001-lg/50 I-IL (A TM esquerda) e salina (ATM direita), após 180 minutos os animais foram sacrificados, as cabeças dissecadas e o material submetido a preparo histológico padronizado, corado com HE. Os resultados demonstraram que a administração de CA 100 J.Lg/50 J.1L produz um extravasamento plasmático quantificável somente no período de 60 minutos. Entre as diferentes concentrações de CA utilizadas, a análise de comparações múltiplas indicou que apenas as de 300 e 450 J.1g diferem significativamente (p<0,05) em relação ao controle. O pré-tratamento com dexametasona (4,6 e 6,9 mg/Kg) e com meloxicam (14 e 21mg/Kg) foi capaz de inibir significativamente o extravasamento plasmático induzido pela CA 300 J.1g/50 J.1L quando comparado ao controle salina 0,9%. A análise morfológica demonstrou que o pré-tratamento com meloxicam (21 mg/Kg) foi capaz de minimizar a destruição óssea provocada pela CA. Dessa forma, pode-se concluir que o pico de EP induzido pela administração periarticular de CA ocorre em 60 minutos; o EP induzido pela CA pode ser inibido pelos antiinflamatórios dexametasona e meloxicam e que a destruição óssea desencadeada pela administração de CA na A TM de ratos pode ser minimizada pelo pré-tratamento com meloxicam / Abstract: Little is known about the mechanism(s) involved in both initiation and maintenance of inflammation and pain related to the temporomandibular joint (TMJ). Thus, in 1992, HASS, et aI, developed an orofacial model of acute inflammation in the rat, quantifying the protein plasma extravasation induced by mustard oil (MO). The carrageenan (CA) is different from the MO because it causes a non-neurogenic inflammation. The purposes of this work were to standardize a study model using CA in the TMJ of rats, test the effect of intra peritoneal (IP) administration of anti-inflammatory drugs on the plasma extravasation and on the histological aspect of inflammation induced by CA. Firstly, CA 100 jJg/50jJL and the control saline (contralateral joint) were used to test different times (60, 120 e 180 minutes) of plasma extravasation caused by CA (3 groups n =5), measured by the Evans blue method using the technique developed by FIORENTINO, et aI., 1990. This study confirmed that there is a significant difference of the plasma extravasation afier CA intra-articular administration in 60 (100, 300 e 450 jJg/50 jJL) and saline administered into TMJ (3 groups n = 5), in 60 minutes compared to the control. Secondly, we tested different concentration of CA minutes. Although CA 100 J,lg/50J,lL was different from the control, multiple comparison (Ounn test) demonstrated that among the concentrations used, only 300 and 450 J,lg/50J,lL were statistically significant (p<0,05). Meloxicam (7, 14 e 21 mg/Kg), dexamethasone (2,3; 4,6 and 6,9 mg/Kg) and saline (control) were given (LP) 2 hours before the CA intra-articular administration. These anti-inflammatory drugs were able to reduce the plasma extravasation significantly only in high doses (meloxicam 14 and 21 mg/Kg and dexamethasone 4,6 e 6,9 mg/Kg). A morphological study was accomplished to prove the inflammation induced by CA and the inhibition caused by the meloxicam. The results showed that the CA could cause bone destruction in the TMJ and that the pre-treatment with meloxicam reduced this destruction. In conclusion: 1) the intra-articular administration of CA in rats can induce a quantified plasma extravasation in 60 minutes; 2) the pre treatment with meloxicam and dexamethasone minimizes the plasma extravasation induced by CA, 3) the intra-articular CA administration causes bone destruction that is reduced by meloxicam / Mestrado / Fisiologia Oral / Mestre em Odontologia

Orientador: João Ernesto de Carvalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-01T21:23:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Denny_Carina_M.pdf: 3390967 bytes, checksum: 3352a1a9ce2afe16b99f6ae293b147f2 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Pterodon pubescens Benth. (Leguminosae, Papilionoidea) conhecida como sucupira branca é utilizada na medicina popular como antiinflamatório, tônico e depurativo. O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade antiinflamatória; antinociceptiva a toxicidade aguda do óleo das sementes e identificar a fração ativa. O óleo foi obtido por prensagem das sementes e centrifugação. As frações foram obtidas através de cromatografia em coluna, monitoradas por cromatografia de camada delgada e identificadas por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas. Os modelos de edema de pata produzidos por carragenina, histamina e bradicinina e edema de orelha produzido por óleo de croton foram utilizados na avaliação da atividade antiinflamatória. A atividade antinociceptiva foi avaliada através do teste de analgesia induzi da por calor e do teste das contorções abdominais induzi das por ácido acético. A toxicidade do óleo de sucupira foi avaliada também em modelo animal, por meio de análise anatomohistopatológica, verificação dos níveis de glicose e do peso corporal diário. A atividade antiproliferativa foi avaliada em cultura de células tumorais humanas. A fração ativa revelou a presença majoritária de compostos terpênicos. O óleo de Pterodon pubescens e a fração rica em terpenos inibiram o edema de pata induzido por carragenina. Em ratos adrenalectomizados o óleo manteve atividade antiedematogênica eliminando a exclusividade da atividade antiinflamatória por corticóides endógenos. Nos modelos de edema de pata induzido por histamina e bradicinina o óleo de P. pubescens reduziu a formação de edema. Na dermatite provocada pela aplicação de óleo de cróton, o óleo de P. pubescens também inibiu a formação de edema. No modelo de nocicepção químico, o óleo de P. pubescens inibiu o número de contorções abdominais pelo ácido acético. O efeito antinociceptivo foi confirmado no teste da placa quente, onde o tratamento com o óleo de P. pubescens ampliou a reatividade ao estímulo térmico. O óleo e a fração ativa apresentaram atividade antiproliferativa concentração-dependente, apresentando citotoxicidade na maioria das concentrações estudadas. Houve um aumento significante da glicemia com o óleo de P. pubescens na dose de 30mg!kg; um aumento do peso corporal dos animais na dose de 30mglkg e uma diminuição nas doses de 100 e 300mg/kg; a análise anatomohistopatológica também revelou toxicidade. Os resultados indicam que o óleo de P. pubescens apresenta atividade antiinflamatória e antinociceptiva e que os terpenos parecem ser responsáveis por essa atividade. Apresenta toxicidade na dose efetiva como antiinflamatória e antinociceptiva após 14 dias de tratamento e atividade antiproliferativa em cultura de células tumorais, provavelmente relacionada a inibição de COX-2 / Abstract: Pterodon pubescens Benth.(Leguminosae, Papilionoidea), popularly known as "sucupira branca" is widely used by folk medicine as an anti-inflammatory. The present investigation was performed to examine the anti-inflammatory, antinociceptive activity, and the subacute toxicity evaluation of P. pubescens seed oil and identify the active fraction. The seed oil was extracted by pressure and centrigugation. The fractions were obtained by colum chromatography, monitored by thin layer chromatography and analyzed by gas chromatography with mass detection. The anti-inflammatory activity was evaluated by paw edema induced by carrageenin, histamine, bradykinin and ear croton oil edema. The antinociceptive activity was demonstrated employing hot plate and acetic acid-induced abdominal constriction writing model. The toxicological analysis involved anatomical and histopathological; glucose leveI and weight body examination in animal models. The antiproliferative activity was examinated in human cell culture. The terpenoids is the main c1ass of compounds identified in the active fraction. The treatment with P. pubescens seed oil and the enriched terpenoids fraction, inhibited edema formation induced by carragenin. In adrenalectomizated rats the seed's oil showed antiedematogenic activity, rejecting the anti-inflamatory activity exc1usively by endogen corticoids. The seed's oil reduced paw edema induced by histamine and bradykinin, as well as by ear croton oil induced edema. The seed's oil inhibited the number of acetic acid-induced abdominal constriction. The antinociceptive effect was confirmed by the hot plate test, where the treatment with the seed's oil increased reaction time period for thermic stimulus. Administration of 30mglkg doses increased glucose levels and body weight. Whereas 100 and 300mglkg doses of seed's oil decreased these parameters. The anatomical and histophatological examination indicated toxicity. The oil and the active fraction showed antiproliferative activity related to concentration, demonstrating citotoxicity in the highest concentration tested. Based on these results the seed's oil showed toxicity in the effective dose after 14 days of treatment and antiproliferative activity in the tumoral cell culture. We suggest that the antiinflamatory activity is due to the presence of terpenic compounds / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:27:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo7903_1.pdf: 280087 bytes, checksum: edcb4091de7ef5ff75c0e5a5fb786380 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2001 / A infecção pelo vírus da hepatite C é uma grande complicação entre os pacientes submetidos a tratamento dialítico em todo o mundo. As aminotransferases são rotineiramente empregadas para o seguimento da doença e do tratamento antiviral. A prática da utilização destas enzimas tem demonstrado que os pacientes com insuficiência renal crônica em hemodiálise apresentam níveis pouco elevados de transaminases. Para determinar um melhor ponto de corte ( cutoff ) dos níveis de alanina aminotransferase na identificação de pacientes em hemodiálise com anti-HCV positivo, 202 (123 homens e 79 mulheres) pacientes foram estudados durante 6 meses. Os níveis de alanina aminotransferase foram medidos mensalmente. O valor convencional de cutoff , pelo método, foi de 33 UI/mL para homens e 27 UI/mL para mulheres. O melhor ponto de corte foi obtido através de uma curva ROC (receiver operating characteristic). A prevalência de anti-HCV positivo foi de 7,5%. O tempo médio em hemodiálise foi maior nos pacientes anti- HCV positivos comparado ao grupo com anti-HCV negativo com média de 57 meses (7 a 248) e de 31 meses (6 a 114 meses), respectivamente (p<0,0001) . A média de alanina aminotransferase foi de 24,83 &#1048690; 6,36 UI/mL e 21,67 &#1048690; 6,2 UI/mL em homens e mulheres respectivamente para o grupo com anti-HCV positivo. A média de alanina aminotransferase nos pacientes com anti-HCV negativo foi de 16,5 &#1048690; 6,38 UI/mL e 13,17 &#1048690; 5,02 UI/mL para homens e mulheres respectivamente. Quando comparada, a média de alanina aminotransferase foi significantemente maior (p < 0,0001) entre os pacientes com anti-HCV positivo do que aqueles com anti-HCV negativo. O melhor ponto-de-corte é aquele que revela a maior sensibilidade e maior especificidade, correspondendo ao ponto mais elevado e desviado para a esquerda na curva ROC. O nosso valor de cutoff para a alanina aminotransferase teve uma sensibilidade e especificidade de 66,67 e 75,40%, respectivamente, quando se usa 0,60 do limite convencional de normalidade na identificação de hepatite viral. Sugere-se que os limites de normalidade para a alanina aminotranferases sejam reduzidos para os pacientes com insuficiência renal crônica em hemodiálise