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Triagem antif?ngica de extratos obtidos de esp?cies vegetais do nordeste brasileiroFerreira, Magda Rhayanny Assun??o 28 February 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The increase in the incidence of fungal infections due to the drug-resistance or to the number of patients with immune alterations such as AIDS, chemotherapy or organ transplantation, has done the research necesseray for new antifungal drugs. The species from Northeastern Brazil may become an important source of innovative natural molecules. To evaluate the antifungal activity of 10 medicinal plants from Northeastern Brazil, traditionally used as antimicrobial agents, 30 crude extracts (CE) were tested in vitro against four standard species of Candida spp. The CE most promising of these plants were evaluated against yeasts of the oral cavity of kidney transplant patients and through a bioassay-guided fractionation. The extracts form leaves of E. uniflora, the stem bark of L. ferrea and leaves of P. guajava showed significant activity against all yeasts evaluated, with MIC values between 15.62 and 62.5 μg/mL. E. uniflora also showed fungicidal properties against all yeasts, especially against Candida dubliniensis. In patients with immune systems compromised, such as transplanted, oral candidiasis manifests mainly due to immunosuppressive therapy, and resistance to conventional antifungals. The CE of E. uniflora presented range of MIC values between 1.95 to 1000 μg/mL, and lower MIC50 and MIC90 values were observed against C. non-albicans. Due the better results, the CE of E. uniflora was elected to performe the bioassay-guided fractionation. Thus it was possible to obtain enriched fractions, which showed good inhibitory ability against ATCC strains of Candida spp. It was also possible to perform experiments to verify the production of biofilm in two strains of C. dubliniensis and action of extracts and fractions on the same. With this, we observed a behavior between the yeast ATCC and clinical isolate. In addition, CE, fractions and subfractions of E. uniflora inhibit planktonic cells to preventing the growth of biofilm. The preliminary chemical characterization of the fractions obtained revealed the presence of polyphenols (especially flavonoids and tannins). Finally, the results suggests that among the plant species studied, E. uniflora showed a pattern very promising as regards the antifungal, requiring further study of purification and structural elucidation of compounds in order to verify that the antifungal effect found can be attributed to a specific compound or some mechanism depends on synergistic the mixture of polyphenols / O aumento na incid?ncia de infec??es por fungos, devido ? resist?ncia ?s drogas ou ao n?mero de pacientes com altera??es imunol?gicas, tais como SIDA, quimioterapia ou transplante de ?rg?os; tem feito a investiga??o de novas drogas antif?ngicas necess?ria. As esp?cies vegetais da regi?o Nordeste do Brasil podem se tornar uma importante fonte de mol?culas naturais inovadoras. Para avaliar a atividade antif?ngica de 10 plantas medicinais da regi?o Nordeste do Brasil, tradicionalmente usadas como antimicrobianas, 30 extratos brutos (EB) foram submetidos ? teste in vitro contra quatro cepas padr?o ATCC de Candida spp. Extratos das folhas de E. uniflora, cascas do caule de L. ferrea, e folhas de P. guajava mostraram atividade significativa contra as leveduras avaliadas, com valores MIC entre 15,62 e 62,5 μg/mL. E. uniflora tamb?m mostrou propriedade fungicida contra todas as leveduras, principalmente contra C. dubliniensis. O EB de E. uniflora apresentou intervalo de valores CIM entre 1,95-1000 μg/mL, e menores valores de MIC50 e MIC90 foram observados contra C. n?o albicans. Devido ao melhor desempenho, o EB de E. uniflora foi eleito para realiza??o do fracionamento biomonitorado. Assim, foi poss?vel obter fra??es enriquecidas, as quais apresentaram boa capacidade inibit?ria, na faixa entre 0,48 a 500 μg/mL, frente ?s cepas ATCC de Candida spp. Tamb?m foi poss?vel realizar experimentos para verificar a produ??o de biofilme de duas cepas de C. dubliniensis e a??o dos extratos e fra??es sobre o mesmo. Com isso, observou-se um comportamento diferente entre a levedura ATCC e o isolado cl?nico. Al?m disso, extrato bruto, fra??es e subfra??es de E. uniflora inibiram as c?lulas planct?nicas impedindo de se agragarem ao biofilme. A caracteriza??o qu?mica preliminar das fra??es obtidas revelou a presen?a de polifen?is (principalmente, flavon?ides e taninos). Por fim, os resultados permitiram afirmar que entre as esp?cies vegetais estudadas, E. uniflora apresentou comportamento bastante promissor no que diz respeito a a??o antif?ngica, sendo necess?rio a continua??o do estudo de purifica??o e elucida??o estrutural dos compostos presentes, a fim de verificar se a a??o antif?ngica encontrada poder? ser atribu?da a um composto espec?fico ou depende de algum mecanismo sin?rgico da mistura de polifen?is
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Morfoanatomia, composi??o qu?mica e atividade biol?gica do ?leo essencial de esp?cies nativas de LippiaOliveira, Ariana Reis Messias Fernandes de 17 December 2014 (has links)
Submitted by Ricardo Cedraz Duque Moliterno (ricardo.moliterno@uefs.br) on 2015-10-02T00:07:17Z
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Previous issue date: 2014-12-17 / The aim of this study was to characterize the morphology, production, content, chemical composition and bioactive activity of essential oils of Lippia bromleyana, Lippia lasiocalycina, Lippia insignis and Lippia thymoides, endemic species of the Bahia semi-arid. The species were grown in the Experimental Station Horto Florestal State University of Feira de Santana (UEFS) in the city of Feira de Santana - Bahia. The essential oils are extracted from dry leaves and inflorescences, by hydrodistillation in Clevenger apparatus, and chemical composition was determined by GC/MS and GC/FID. Were carried out quantitative and qualitative morphological characterizations, in addition to agronomic characterization. The leaf anatomy, types and frequency of hair were observed in binocular microscope and electronic scanning light. The antioxidant activity was assessed by the ability of the substances present in the sample capture the free radical DPPH, using five concentrations of essential oils (2, 6, 10, 14 and 18 mg mL1) and the antifungal activity by mycelium growth in vitro testing five essential oil concentrations (0.25, 0.50, 0.75, 1.0 and 1.25 ?L mL-1). In conditions where the study was conducted, it can be concluded that there are morphological differences between species in all traits, except only the number of flowers per inflorescence; there agronomic differences for all traits with L. lasiocalycina stood out in relation to the variable oil yield, while L. insignis and L. thymoides regarding the essential oil content; were identified six types of glandular trichomes one, two and tetracelular and three types of trichomes; the species L. bromleyana presents as differential anatomical absence of trichomes on the abaxial surface; L. thymoides has glandular trichomes with irregular contours on both sides, distinguishing it from other species; the frequency of trichomes on the abaxial surface is higher in species L. insignis and L. lasiocalycina, which are more anatomically similar; the major compounds found in the samples of essential oils of L. bromleyana, L. lasiocalycina, L. insignis and L. thymoides were piperitone oxide and limonene; E-ocimenona, myrcenone, myrcene, ?-myrcene and ?-cymene; thymol, myrcenone and E-ocimenona; and ?-caryophyllene, germacrene D, respectively; L. insignis and L. bromleyana stood out in relation to the antioxidant and antifungal activity, respectively. / O objetivo desse trabalho foi caracterizar a morfologia e a produ??o, teor, composi??o qu?mica e atividade bioativa de ?leos essenciais de Lippia bromleyana, Lippia lasiocalycina, Lippia insignis e Lippia thymoides, esp?cies end?micas do semi?rido baiano. As esp?cies foram cultivadas na Unidade Experimental Horto Florestal da Universidade Estadual de Feira de Santana (UEFS), na cidade de Feira de Santana ? Bahia. Os ?leos essenciais foram extra?dos de folhas e infloresc?ncias secas, por meio da hidrodestila??o em aparelho de Clevenger e a composi??o qu?mica determinada por CG/EM e CG/DIC. Foram realizadas caracteriza??es morfol?gicas quantitativas e qualitativas, al?m da caracteriza??o agron?mica. A anatomia foliar, tipos e frequ?ncia de tricomas foram observados em microsc?pio de luz binocular e eletr?nico de varredura. A atividade antioxidante foi avaliada pela capacidade das subst?ncias presentes na amostra captarem o radical livre DPPH, utilizando cinco concentra??es dos ?leos essenciais (2, 6, 10, 14 e 18 mg mL-1) e a atividade antif?ngica pelo crescimento miceliano in vitro, testando cinco concentra??es do ?leo essencial (0,25, 0,50, 0,75, 1,0 e 1,25 ?L mL-1). Nas condi??es em que foi realizado o estudo, pode-se concluir que existem diferen?as morfol?gicas entre as esp?cies em todas as caracter?sticas avaliadas, com exce??o apenas para o n?mero de flores por infloresc?ncia; existem diferen?as agron?micas para todos os caracteres avaliados, sendo que L. lasiocalycina se destacou em rela??o ? vari?vel rendimento de ?leo, enquanto que L. insignis e L. thymoides em rela??o ao teor de ?leo essencial; foram identificados seis tipos de tricomas glandulares uni, bi e tetracelular e tr?s tipos de tricomas tectores; a esp?cie L. bromleyana apresenta como diferencial anat?mico aus?ncia de tricomas tectores na face abaxial; L. thymoides possui tricomas glandulares com contornos irregulares em ambas as faces, distinguindo-a das demais esp?cies; a frequ?ncia de tricomas tectores na face abaxial ? superior nas esp?cies L. insignis e L. lasiocalycina, as quais s?o mais semelhantes anatomicamente; os compostos majorit?rios encontrados nas amostras dos ?leos essenciais de L. bromleyana, L. lasiocalycina L. insignis e L. thymoides foram: ?xido de piperitona e limoneno; E-ocimenona, mircenona, mirceno, ?-mirceno e ?-cimeno; timol, mircenona e E-ocimenona; ?-cariofileno e germacreno D, respectivamente; L. insignis e L. bromleyana se destacaram em rela??o ? atividade antioxidante e antif?ngica, respectivamente.
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Plantas do cerrado brasileiro: triagem fitoqu?mica e de atividades biol?gicas de esp?cies nativas do munic?pio de Diamantina, regi?o do Vale do Jequitinhonha, Minas GeraisCunha, Let?cia Figueiredo January 2016 (has links)
?rea de concentra??o: Ci?ncias farmac?uticas. / Data de aprova??o ausente. / Submitted by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2017-08-01T18:51:24Z
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Previous issue date: 2016 / As plantas, por serem fonte de subst?ncias biologicamente ativas, s?o utilizadas com a
finalidade terap?utica desde o in?cio da civiliza??o humana. O Brasil, por sua vez, ? detentor
de uma vasta diversidade biol?gica e possui uma grande quantidade de esp?cies vegetais com
potencial medicinal. Dentre os diversos biomas do territ?rio brasileiro, o Cerrado representa o
segundo maior, registrando-se muitas esp?cies medicinais. Apesar de sua rica biodiversidade
muitas plantas end?micas deste bioma foram pouco estudadas do ponto de vista qu?mico e
biol?gico. Consequentemente, ? necess?rio maior investimento em pesquisas com plantas
medicinais para tratamento de doen?as, principalmente, as cr?nicas degenerativas e
parasit?rias, como Doen?a de Chagas, Leishmanioses, C?ncer e as infec??es causadas por
bact?rias e fungos, cujo o tratamento apresenta importantes limita??es. Assim, o objetivo
deste estudo foi realizar a triagem fitoqu?mica e de atividades biol?gicas de extratos
etan?licos de 12 esp?cies de plantas oriundas do Cerrado, coletadas no mun?cipio de
Diamantina, Vale do Jequitinhonha/MG. Para a triagem fitoqu?mica preliminar destes extratos
foram realizadas rea??es cromog?nicas, de precipita??es e an?lises em cromatografia em
camada delgada comparativa (CCDC). A citotoxicidade para c?lulas normais de mam?feros
foi avaliada em fibroblastos de camundongos (L929). A linhagem celular de c?ncer de mama
MDA-MB-231 foi a utilizada para a avalia??o da atividade antitumoral dos extratos. A
avalia??o da atividade antitripanossomat?deo foi realizada sobre formas epimastigotas da cepa
Colombiana de Trypanossoma cruzi e, sobre as formas promastigotas das cepas BH46 de
Leishmania (leishmania) infantum e cepa M2269 de Leishmania (leishmania) amazonensis.
Para a avalia??o destas atividades foi empregada a t?cnica colorim?trica de MTT. A avalia??o
das atividades antibacteriana e antif?ngica foi realizada por meio da determina??o da
Concentra??o Inibit?ria M?nima (CIM), empregando a t?cnica colorim?trica da Resazurina.
As esp?cies de bact?rias utilizadas foram Escherichia coli, Proteus mirabilis, Pseudomonas
aeruginosa e Staphylococcus aureus. Na atividade antif?ngica foram utilizadas quatro
esp?cies de leveduras (Candida albicans, Candida famata, Candida krusei e Candida
tropicalis) e duas esp?cies de fungos filamentosos (Aspergillus niger e Penicillium
expansum). Dos 13 extratos avaliados com rela??o a citotoxicidade sobre fibroblastos de
camundongos da linhagem L929, todos apresentaram algum grau de citotoxicidade. Alguns
destes extratos apresentaram elevada toxicidade sobre esta linhagem celular, sendo que o
extrato etan?lico das folhas de E. erythropappus foi o mais t?xico. Na avalia??o da atividade
antitumoral, com exce??o do extrato etan?lico das folhas de P. rigida, todos os outros extratos
avaliados apresentaram atividade. Destes o mais promissor tamb?m foi o extrato etan?lico das
folhas de E. erythropappus. Na avalia??o da atividade tripanocida sobre formas epimastigotas
da cepa Colombiana de T. cruzi, nove extratos foram ativos contra este parasito. Destes os
mais promissores foram os extratos das folhas de A. aculeata e das folhas de E.
erythropappus. Na avalia??o da atividade leishmanicida para a cepa M2269 os extratos
etan?licos das folhas de E. erythropappus e das folhas de B. oxyclada apresentaram como os
mais promissores e, para a cepa BH46 o extrato etan?lico de toda esp?cie T. catahartica foi o
mais promissor, seguido tamb?m do extrato etan?lico das folhas de E. erythropappus. Na
avalia??o da atividade antibacteriana somente os extratos etan?licos das folhas de B.
oxyclada, de P. tomentosa e S. rugosa foram ativos e, as ?nicas bact?rias sens?veis foram P.
aeruginosa e S. aureus. Destes o extrato etan?lico de P. tomentosa inibiu um maior n?mero de
bact?rias com a??o bactericida. Os fungos filamentosos, A. niger e P. expansum, se mostraram
resistentes a todos os extratos avaliados e C. krusei foi a levedura mais sens?vel. Os extratos
das folhas de B. oxyclada e das folhas de P. tomentosa foram os extratos que inibiram o maior
n?mero de esp?cies f?ngicas com os menores valores de CIM. Atrav?s destes resultados,
sugere-se que os extratos etan?licos das folhas de Eremanthus erythropappus, de Peixotoa
tomentosa e de Banisteriopsis oxyclada apresentaram o maior n?mero de atividades
biol?gicas e com os melhores resultados, o que torna estas esp?cies as mais promissoras como
fontes potenciais de mol?culas bioativas para o tratamento de C?ncer, Doen?a de Chagas,
Leishmanioses e infe??es bacterianas e f?ngicas, necessitando de mais estudos a fim de
identificar as subst?ncias respons?veis por tais atividades e pela citotoxicidade e, valid?-las
atrav?s de outros modelos in vitro e in vivo. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, [2016]. / Plants are a potencial source of biologically active substances and they are used for
therapeutic purposes since the beginning of human civilization. Brazil, in turn, holds a vast
biological diversity and has a lot of plant species with medicinal potential. Among the various
biomes of Brazil, the Cerrado is the second largest, registering many medicinal species.
Consequently, it is necessary to invest more in research of medicinal plants as possible new
treatments, especially for the degenerative and chronic disease such as Chagas,
Leishmaniasis, cancer and infections caused by bacteria and fungi, whereof treatment has big
limitations. The objective of this study was the phytochemical screening and biological
activities studies of ethanolic extracts of 12 plants species from the Cerrado, collected in the
municipality of Diamantina, Vale do Jequitinhonha / MG.For the preliminary phytochemical
screening were made chromogenic and precipitation reactions and analysis in thin-layer
chromatography. Cytotoxicity for normal mammalian cells was evaluated in mouse fibroblasts
(L929) and the cell line of breast cancer MDA-MB-231 was used to analyze the antitumor
activity of the extracts. The evaluation of antitripanossomatideo activity was performed using
epimastigotas of Colombiana Trypanosoma cruzi strain and promastigotes of BH46
Leishmania (Leishmania) infantum strain and M2269 Leishmania (Leishmania) amazonensis
strain. The analyze of these activities were based at the colorimetric MTT technique. The
evaluation of antibacterial and antifungal activities was performed by determining the
Minimum Inhibitory Concentration (MIC) employing the colorimetric Resazurin technique.
Species of bacteria used were Escherichia coli, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa
and Staphylococcus aureus. In the antifungal activity were used four species of yeast
(Candida albicans, Candida famata, Candida krusei and Candida tropicalis) and two species
of filamentous fungi (Aspergillus niger and Penicillium expansum). Of the 13 extracts
evaluated for cytotoxicity using the L929 strain mouse fibroblasts, all they had some
cytotoxicity level. Some of these extractsthen showed a high toxicity in this assay cell line,
wherein the ethanolic extract of E. erythropappus leaves was the most toxic. In the evaluation
of antitumor activity all extracts showed activity, exception for the extract of P. rigida leaves.
Among these the most promising was either the ethanolic extract of the leaves of E.
erythropappus. Evaluation of trypanocidal activity using Colombian strain of T. cruzi
epimastigotas, present active for nine extracts against this parasite, been the A. aculeata and
leaves E. erythropappus leaf extract the most promising. Leishmanicidal activity for the
M2269 strain of E. erythropappus B. oxyclada leaf extract presented as the most promising
and, for the BH46 strain the T. catahartica role plant extract shows the best results, followed
by the E. erythropappus leaf extract. In the antibacterial activity assay only the B. oxyclada,
P. tomentosa and S. rugosa leaf extracts were active, and the only for P. aeruginosa and S.
aureus. Among these the P. tomentosa extract inhibited a greater number of bacteria with
bactericidal action. Filamentous fungus A. niger and P. expansum were resistant to all extracts
evaluated and C. krusei was the most sensitive yeast. P. tomentosa and B. oxyclada leaf
extracts inhibited more yeast species but with the lowest MIC values. Due these results, it is
suggested that the E. erythropappus of P. tomentosa and B. oxyclada leaf ethanolic extracts
showed the greatest of biological activities, making these the most promising species as
potential sources of bioactive molecules for the treatment of cancer, Chagas disease,
Leishmaniasis and bacterial and fungal infections, yet requiring further studies to identify the
substances responsible for such activities and cytotoxicity and validate them through other
models in vitro and in vivo.
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Avalia??o funcional e estrutural de um novo pept?deo antimicrobiano do escorpi?o Tityus stigmurusMelo, Edinara Targino de 31 March 2014 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-03-02T23:14:28Z
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Previous issue date: 2014-03-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / No Brasil, ? grande a incid?ncia de animais pe?onhentos, dentre os quais se
destacam os escorpi?es por sua import?ncia m?dica, sendo sua pe?onha fonte de
diversas subst?ncias qu?micas com atividades biol?gicas e farmacol?gicas ainda n?o
compreendidas, incluindo diversos pept?deos bioativos. Pept?deos antimicrobianos
(PAMs) s?o componentes do sistema imune de procariotos e eucariotos utilizados como
primeira linha de defesa contra micro-organismos. No presente trabalho, foi
caracterizado o primeiro PAM do escorpi?o Tityus stigmurus, nomeado Stigmurina,
previamente identificado por meio do transcriptoma da gl?ndula de veneno desta
esp?cie. As caracter?sticas da Stigmurina foram investigadas por modelagem
computacional e constru??o de dendrograma. Al?m disso, as caracter?sticas estruturais
da Stigmurina foram investigadas por dicro?smo circular em ?gua, em 2, 2, 2-
trifluoethanol (TFE) e em dodecil sulfato de s?dio (SDS) e os modelos refinados por
simula??es de din?mica molecular. Testes in vitro foram empregados para investigar a
atividade antibacteriana, antif?ngica, hemol?tica e citot?xica do veneno bruto e da
Stigmurina. Os resultados mostraram que a sequ?ncia selecionada codifica uma prote?na
madura com 17 res?duos de amino?cidos e o dendrograma revela um caso de
converg?ncia evolutiva. Os espectros de dicro?smo demonstraram flexibilidade
conformacional, predominando estrutura estendida e ??folha, al?m de not?vel
capacidade de renatura??o. A pe?onha bruta n?o apresentou atividade relevante nos
testes antimicrobianos para as concentra??es testadas. No entanto, a Stigmurina mostrou
um amplo espectro de atividade antibacteriana, com concentra??es inibit?rias m?nimas
(CIMs) entre 31,25?g/mL a 250 ?g/mL para diferentes micro-organismos, enquanto que
os resultados para a avalia??o da atividade hemol?tica nestas concentra??es foram
baixas. Nos estudos de citotoxicidade, a pe?onha bruta foi incapaz de reduzir a
viabilidade celular em c?lulas VERO E6, por?m sua toxicidade em c?lulas SiHa foi
significativamente superior, correspondendo a uma IC50 de 3,6 ?g/mL. J? nos testes
com a Stigmurina, as concentra??es capazes de reduzir a viabilidade celular das c?lulas
VERO E6 e SiHa em 50% foram de 275,67 ?g/mL e 212,54 ?g/mL, respectivamente.Os
resultados sugerem que a Stigmurina poder ser considerada como um potencial
medicamento anti-infeccioso. / In Brazil, there is a high incidence of venomous animals. Among them,
scorpions are highlighted by their medical importance, and for being their venom a
source of several molecules with biological and pharmacological activity not yet fully
understood, including several bioactive peptides. Antimicrobial peptides (AMPs) are
components of the immune system in prokaryotes and eukaryotes, used in the first line
of defense against microorganisms. In the present study, we characterized the first PAM
previously identified through transcriptome of the venom gland of the scorpion Tityus
stigmurus, named Stigmurin. The characteristics of Stigmurin were investigated by
computational modeling and construction of dendrogram. In vitro tests investigated the
antibacterial, antifungal, haemolytic and cytotoxic effects of crude venom and
Stigmurin. In addition, the structural characteristics of Stigmurin were investigated by
circular dochroism in water, 2, 2 , 2- trifluoethanol (TFE) and sodium dodecyl sulfate
(SDS) and the models were refined by molecular dynamics simulations. The results
showed that the selected sequence encodes a mature protein of 17 amino acid residues
and the dendrogram reveals a case of convergent evolution. The crude venom showed
no antimicrobial activity, however, Stigmurin exhibited a broad spectrum of
antibacterial activity, with minimal inhibitory concentrations (MIC) ranging from 31.25
and 250 ?g/mL for different strains, while the hemolytic activity at these concentrations
was low. In cytotoxicity studies, the crude venom was unable to reduce cell viability in
VERO E6 cells; in contrast, its activity in SiHa cells was significantly higher,
corresponding to IC50 of 3.6 ?g/mL. For Stigmurin the concentration sable to decrease
cell viability of Vero E6 and SiHa cells in 50% were 275.67 ?g/mL and 212.54 ?g/mL,
respectively. The dichroism spectra revealed the conformational flexibility, with
predominating extended and ??sheet structures, as well as a remark able renaturation
ability. The results suggest that Stigmurin could be considered as a potential antiinfective
drug
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