Enterococos são bactérias que exercem um papel muito importante na produção de vários alimentos fermentados e também podem ser usadas como probióticos. A presença e o crescimento de enterococcos em alimentos fermentados como queijos e lingüiças conferem a esses produtos características organolépticas únicas. Em contrapartida, sua presença nos alimentos também está associada com falta de higiene durante a manipulação. Estes microrganismos também estão relacionados com o desenvolvimento de algumas doenças, como endocardites, septicemia, infecções do trato geniturinário, entre outras. A presença de características de virulência aumenta o potencial de infecção do microrganismo e a severidade da doença a ele relacionada. Com o objetivo de avaliar possíveis modificações fenotípicas e genotípicas de amostras de enterococos isoladas de frango, durante a subcultura destas cepas no laboratório, várias análises foram realizadas como: a presença dos fatores de virulência; proteína de superfície (esp) e gelatinase (gelE), do operon fsr-regulador do gelE, a expressão fenotípica do gelE, a capacidade de formação de biofilme e a resistência a antimicrobianos, desinfetantes e antisépticos. Quarenta isolados de Enterococcus sp. foram avaliados quanto a presença dos genes gelE, esp, operon-fsr, sprE por PCR, a atividade gelatinolítica por testes bioquímicos convencionais, resistência a antimicrobianos, antisépticos e desinfetantes por antibiograma e formação de biofilme pelo método cristal violeta. Todos os testes foram realizados na 1º geração e na 12º geração das cepas. 85% dos isolados produziram gelatinase e em 92,5% dos isolados o gene gelE estava presente na 1º geração. A análise do fsr-operon destes isolados do primeiro cultivo demonstrou que o gene fsrA estava presente em 35 isolados e o fsrC em 37 isolados e a presença destes genes pareceu não ter correlação com a atividade gelationolítica. O gene fsrB estava presente em todos os isolados (35) que apresentaram atividade gelatinolítica sugerindo que a presença deste gene é importante na expressão desta enzima. Após o subcultivo, apenas um isolado perdeu a atividade gelatinolítica e 15 perderam o gene gelE. Doze isolados perderam pelo menos um gene do fsr-operon durante a subcultura, porém nenhum destes perdeu a capacidade de expressar a enzima gelatinase talvez devido à presença do gene fsrB. O gene sprE foi detectado em 34 isolados na primeira geração e na 12º geração em apenas 20 isolados. O gene da proteína de superfície de Enterococcos (Esp), não foi encontrado em nenhum dos isolados. O antibiograma do isolados no primeiro cultivo demonstrou que 100% dos isolados foram sensíveis a ampicilina e a gentamicina, 95% sensíveis a vancomicina, 85% a ciprofloxacina, 5% a tetraciclina, 65% a eritromicina e 52,5% a cloranfenicol tanto na 1º quanto na 12º geração. Após a subcultura a susceptibilidade dos isolados aumentou a eritromicina (67,5%) e ao cloranfenicol (80%). Quanto ao perfil de resistência aos detergentes e anti-sépticos de uso comercial, todos os isolados apresentaram fenótipo de resistentes ao linear alquilbenzeno sulfonato (LAS) e ao triclosan durante a subcultura. Todos isolados foram suscetíveis ao formaldeído, mas se tornaram resistentes ao 8,5% hipoclorito de sódio e a clorexidina durante a subcultura. Em geral, todos os isolados foram formadores de biofilme e a produção de gelatinase parece ser necessária para esta formação. O perfil genético não pareceu ter relação com a formação de biofilme. Tanto o perfil genotípico quanto o fenotípico pode sofrer alterações durante a subcultura das cepas no laboratório. / Enterococci are bacteria that have a very important role in the production of various fermented foods and can also be used as probiotics. The presence and growth of enterococci in fermented foods like cheese and sausages bring to these products unique organoleptic characteristics. However, their presence in foods is also associated with lack of hygiene during handling. These microorganisms are also related to the development of some diseases such as endocarditis, septicemia, genitourinary infections, among others. The presence of virulence characteristics increases the potential infection of the organism and severity of disease related to it. The aim of the present study is analyze the possible changes of phenotypic and genotypic of enterococci isolated from chicken, during the subculture of the strains in the laboratory, the presence of virulence factors: enterococcal surface protein (esp) and gelatinase (gelE), operon-fsr gelE regulator, gelE phenotypic expression, the ability of biofilm formation and antibiotic, disinfectant and antiseptic resistance were determined in samples of enterococci isolated from chicken. The presence of gelE, esp operon-fsr and sprE genes were evaluated by PCR, gelatinase activity were observed by conventional biochemical tests, antibiotics resistance, antiseptics and disinfectants resistance were analyzed by standard disk diffusion method and biofilm formation were detected following the crystal violet staining method in forty enterococci isolates from chicken. All tests were performed in the 1st generation and 12th generation. 85% of the isolates produced gelatinase and in 92.5% of the isolated the gelE gene was present in the 1st generation. The analysis of operon-fsr in the 1st generation of these isolates showed that the fsrA gene was present in 35 isolates and fsrC gene was present in 37 isolates and the presence of these genes seemed to have no correlation with the gelatinase activity. The fsrB gene was present in all isolates (35) with gelatinase activity suggesting that the presence of this gene is important in the expression of this enzyme. After subculture, only one isolate lost the gelatinase activity and 15 isolates lost the gelE gene. Twelve isolates lost at least one gene of the operon-fsr during laboratory subculture, but none of these isolates lost the ability to express the enzyme gelatinase probably due the presence of the fsrB gene. The sprE gene was detected in 34 isolates in the 1st generation and in 12th generation only 20 isolates maintained this gene. The protein surface of enterococci gene (Esp), was not found in any isolate. The antibiogram of the isolates showed that 100% of the isolates were susceptible to ampicillin and gentamicin, 95% susceptible to vancomycin, 85% to ciprofloxacin, tetracycline 5%, 65% to erythromycin and 52.5% to chloramphenicol in the 1st generation. After subculture the susceptibility of isolates to erythromycin (67.5%) and chloramphenicol (80%) increased. As the profile of resistance to detergents and antiseptics for commercial use, all isolates showed resistance phenotype of the linear alkylbenzene sulfonate (LAS) and triclosan during subculture. All isolates were susceptible to formaldehyde, but became resistant to 8.5% sodium hypochlorite and chlorhexidine during the subculture. In general, all isolates were biofilm formers. Gelatinase production appears to be required for biofilme formation. The genetic profile did not appear to have relation with the formation of biofilms. Genotypic and the phenotypic profile may change during the subculture of the strains in the laboratory.

Submitted by Programa de Pós-graduação em Biotecnologia (mebiotec.ufba@gmail.com) on 2017-04-04T12:20:08Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Final Fúlvia - pdf.pdf: 2635541 bytes, checksum: 2467e7499254166de412e643a75fac66 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-07-06T12:50:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Final Fúlvia - pdf.pdf: 2635541 bytes, checksum: 2467e7499254166de412e643a75fac66 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-06T12:50:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Final Fúlvia - pdf.pdf: 2635541 bytes, checksum: 2467e7499254166de412e643a75fac66 (MD5) / CAPES / O bioma restinga pode ser caracterizado por áreas arenosas, de alta salinidade e com uma vegetação típica, com plantas adaptadas e de ocorrência descontínua no litoral brasileiro, sendo inclusive a transição para a mata atlântica. A maçaranduba, Manilkara salzmannii, uma sapotácea muito comum em áreas de transição e em vários biomas, inclusive na floresta amazônica atingindo mais de 20 metros de altura e usada como madeira para reflorestamento e na fabricação de móveis, mas várias espécies de plantas do gênero Manilkara sp tem características herbáceas como na restinga, sendo retorcida e com folhas duras e alternadas, A ocorrência de plantas da família Sapotaceae na restinga, pode representar um modelo para estudos desde em eco-fisiologia até de biodiversidade. Os micro-organismos endofíticos vivem no interior das plantas e desempenham importantes papéis ecológicos, podendo ser benéficos às plantas, como produtores de fito-hormônios e agentes de controle biológico e até prejudiciais, como os fitopatógenos, Recentemente, tem-se estudado fungos endofíticos principalmente para fins de bioprospecção e neste trabalho foram isolados e caracterizados endofíticos de Manilkara salzmannii quanto á atividade antimicrobiana. Um isolado, MK001, apresentou atividade antimicrobiana, onde, diferentes frações do mesmo extrato, inibiram fungos (Candida albicans ATCC18804) e bactérias (Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Corynebacterium sp. VD57). Este isolado foi caracterizado como do gênero Lophiostoma sp., Ordem Pleosporales, e com características que podem indicar uma nova espécie. / The biome sandbank, can be characterized by sandy areas, high salinity and with a typical vegetation with plants adapted and with a discontinuous occurrence of the Brazilian coast, and even the transition to rainforest. The maçaranduba, Manilkara salzmannii, represents a sapotacea very common in transitions areas and can be found in various biomes, including the Amazon rainforest reaching over 20 feet tall and used as wood for reforestation and the manufacture of furniture, but several species of plants from this genus Manilkara sp has herbaceous characteristics, mainly in the sandbank, being twisted and stiff and alternate leaves, the occurrence of plants from the Sapotaceae family in sandbank, may represent as a model for studies on ecophysiology and biodiversity. Endophytic microorganisms living inside the plants and play important ecological roles, may be beneficial to plants as producers of phyto-hormones and biological control agents and even harmful, such as pathogens, has been recently studied, mainly endophytic fungi for bioprospecting purposes and in this work were isolated and characterized endophytic from Manilkara salzmannii with the goal to selected fungi with an antimicrobial activity. One isolate, MK001, shows antimicrobial activity, where different fractions from the same extract was able to inhibit the growth fungi Candida albicans and bacteria (Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Corynebacterium sp.). This isolate was characterized as genus Lophiostoma sp., Order Pleosporales, and can be a new species.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-05-02T14:01:13Z No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_João Alves dos Reis Júnior.pdf: 925805 bytes, checksum: 0bcef2c8c9a48fca7b38fa65514614a1 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-06-06T13:17:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_João Alves dos Reis Júnior.pdf: 925805 bytes, checksum: 0bcef2c8c9a48fca7b38fa65514614a1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-06T13:17:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_João Alves dos Reis Júnior.pdf: 925805 bytes, checksum: 0bcef2c8c9a48fca7b38fa65514614a1 (MD5) / CAPES / Osteomielite é um processo inflamatório agudo ou crônico nos espaços medulares ou nas superfícies corticais do osso e pode estar associado com infecções bacterianas ou fúngicas. A Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (TFDa) a laser é um tratamento baseado na reação fotoquímica citotóxica que resulta em uma série de reações metabólicas que culminam na morte bacteriana. O objetivo do presente estudo randomizado foi avaliar, in vitro e in vivo, através de análise microbiológica e histológica, os efeitos da TFDa em defeitos ósseos cirúrgicos em tíbias de ratos infectados por Staphylococcus aureus com tempo de observação de 0 e 30 dias após o tratamento. No estudo in vitro, um laser de diodo (λ660 nm; 40 mW; Ø = 0,04 cm², 5 ou 10 J/cm²) e concentrações de 5, 10 e 15 μg/mL do Azul de Toluidina foram testados e o melhor parâmetro escolhido para o estudo in vivo. A concentração de 5 μg/mL foi escolhida para realizar a descontaminação da infecção por Staphylococcus aureus nos defeitos ósseos. Nos grupos tratados com Fototerapia utilizou-se o laser (λ = 780 nm, P = 70 mW, CW, 16,8 J/cm2 por sessão, t= 240s, divididos em quatro pontos NSLO de 4,2 J/cm2, 134,4 J/cm2 por tratamento). Os protocolos de irradiação foram realizados a cada 48 horas durante 15 dias. Os resultados foram submetidos à análise estatística. Para todos os grupos TFDas do estudo microbiológico in vitro, houve redução significativa (p < 0,001) na quantidade de bactérias com as diferentes concentrações do fotossensibilizador. No estudo microbiológico in vivo, no tempo 0, o grupo TFDa apresentou redução bacteriana de 97,4 % (p < 0,001). Já no tempo de observação de 30 dias, observou-se redução bacteriana de mais de 99,9% (p < 0,001). No estudo histológico, observou-se que os grupos tratados com TFDa demonstraram presença intensa de osteócitos e ausência de sequestro ósseo e de micro abscessos. A TFDa com azul de toluidina foi eficaz na redução da contagem de Staphylococcus aureus possibilitando um reparo ósseo de melhor qualidade.

Submitted by Pós graduação Farmácia (ppgfar@ufba.br) on 2017-05-12T16:19:59Z No. of bitstreams: 1 ANTÍDIO DOS REIS.pdf: 3980549 bytes, checksum: 957292585ecd07fe1b26c22206466c42 (MD5) / Approved for entry into archive by Uillis de Assis Santos (uillis.assis@ufba.br) on 2017-05-15T13:55:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ANTÍDIO DOS REIS.pdf: 3980549 bytes, checksum: 957292585ecd07fe1b26c22206466c42 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-15T13:55:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANTÍDIO DOS REIS.pdf: 3980549 bytes, checksum: 957292585ecd07fe1b26c22206466c42 (MD5) / FAPESB e CNPq / A resistência bacteriana aos antibióticos tem aumentado a cada ano em todo o mundo e se tornado um problema de saúde pública. Uma das principais fontes de novos fármacos são as espécies vegetais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação antibacteriana dos extratos e frações das partes aéreas e subterrâneas da Ertela (Monnieria) trifolia (L.) Kuntze (Rutaceae) e identificar quais são as possíveis moléculas responsáveis por esta atividade. Esta espécie foi selecionada a partir de um estudo etnobotânico realizado em um terreiro de candomblé de Salvador-BA, onde a mesma é utilizada tanto para fins medicinais como para fins ritualísticos. A extração da raiz e caule in natura foi realizada através da maceração a frio com diclorometano e por Soxhlet com metanol. O óleo essencial das folhas foi extraído por hidrodestilação em aparelho de Clevenger modificado e as folhas foram maceradas em metanol. Os testes de atividade antimicrobiana foram realizados através do método de difusão em disco, difusão em poço, concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM), segundo as recomendações do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), adaptados para produtos naturais. As cepas bacterianas utilizadas foram Staphylococcus aureus ATCC 25923 e 33591, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Salmonela enterica ATCC 13076 e três isolados clínicos de S. aureus multirresistentes. O óleo essencial das folhas, os extratos da raiz e o aquoso das folhas não apresentaram atividade antibacteriana frente às bactérias testadas. O extrato diclorometânico do caule apresentou atividade frente S. aureus ATCC 25923, ATCC 33591 e dois isolados clínicos; o extrato acetato de etila e o extrato clorofórmico das folhas foram ativos frente S. aureus ATCC 25923 e dois isolados clínicos. Nenhum extrato apresentou atividade frente às bactérias Gram negativas. Os resultados obtidos demonstram a tendência dos extratos inibirem bactérias Gram positivas. Os dados espectroscópicos em conjunto com o conhecimento da ocorrência de alcalóides derivados do ácido antranílico em Rutaceaes e a comparação com dados da literatura, sugeriram a presença dos alcalóides arborinina, evolitrina, esquimianina e dictamina nos extratos e frações bioativos. Estes alcalóides provavelmente são os responsáveis pela atividade antibacteriana da E. trifólia. / Bacterial resistance to antibiotics has increased each year throughout the world and became a public health problem. Plant species are major source of new drugs. The objective of this study was to evaluate the antibacterial activity of extracts and fractions of overhead and underground parts of Ertela (Monnieria) trifolia (L.) Kuntze (Rutaceae) and identify what are the possible molecules responsible for this activity. This species was selected from an ethnobotanical study conducted in a Candomblé temple in Salvador, Bahia, where it´s used both for medicinal and ritualistic purposes. The extraction from fresh root and stem was performed by cold maceration with dichloromethane and Soxhlet with methanol. The essential leaves oil was extracted by hydrodistillation in a modified Clevenger apparatus and the sheets were soaked in methanol. The antimicrobial activity tests were performed using the disk diffusion method, well diffusion, minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC), according to the recommendations of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), adapted for natural products. The bacterial strains used were Staphylococcus aureus ATCC 25923 and 33591, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Salmonella enterica ATCC 13076 and three clinical isolates of S. aureus multidrug-resistant. The essential leaves oil, the root and the leaves aqueous extracts showed no antibacterial activity against any bacteria tested. The dichloromethane extract of the stem show activity against S. aureus ATCC 25923, ATCC 33591 and two clinical isolates; the ethyl acetate and chloroform extracts of the leaves were active against S. aureus ATCC 25923 and two clinical isolates. No extract showed activity against Gram-negative bacteria.. The results shows the trend of the extracts inhibit Grampositive bacteria. Spectroscopic data together with knowledge of the occurrence of alkaloids anthranilic acid derivatives in Rutaceae and comparison with literature data, suggested the presence of alkaloids arborinine, evolitrina, and esquimianina dictamnine in bioactive extracts and fractions. These alkaloids are probably responsible for the antibacterial activity of E. trifolia.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-12T11:44:55Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 14058 bytes, checksum: 503c70b34831b52e566bcac5da6d8e71 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-12T11:44:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 14058 bytes, checksum: 503c70b34831b52e566bcac5da6d8e71 (MD5) Previous issue date: 2001-08-13 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A produção de cogumelos por quatro isolados de Lentinula edodes, além da atividade antimicrobiana e a concentração de alguns nutrientes nesses cogumelos foram avaliadas. Os cogumelos foram cultivados em substrato à base de serragem, suplementado com farelos de arroz, de soja, de trigo, ou em combinações desses farelos. Os substratos foram umedecidos com chá mate a 0,1 % ou com água. Os cogumelos também foram produzidos em toras de eucalipto. A produtividade variou conforme o isolado e o substrato de cultivo. Constatou-se que em toras de eucalipto ocorreu uma maior produção de cogumelos do que nos substratos à base de serragem. Os extratos aquosos, correspondentes a 40mg de matéria seca dos cogumelos shiitake, inibiram o crescimento tanto de Bacillus subtilis como de Escherichia coli K-12. Esse efeito foi constatado independentemente do substrato, do estádio em que foram colhidos e do processamento, fresco ou desidratado. A fração do extrato solúvel em acetato de etila, nas concentrações equivalentes a 150μg e a 300μg da matéria seca do cogumelo, não inibiu nem B. subtilis nem E. coli pela técnica de difusão em disco de papel. Os teores de nitrogênio, de potássio, de fósforo, de magnésio e de cálcio variaram conforme o substrato de cultivo e em geral, a concentração desses nutrientes foi maior nos cogumelos cultivados em substratos à base de serragem. Os resultados confirmaram que o shiitake é boa fonte desses nutrientes. O nitrogênio foi o elemento mais abundante, seguido por fósforo, potássio, magnésio e cálcio. Além do isolado fúngico, o substrato de cultivo e a forma de processamento devem ser levados em consideração tanto na avaliação nutricional como na produção de substância(s) antimicrobiana (s) pelos cogumelos. / Mushroom production by four isolates of Lentinula edodes, the presence of substance (s) with antimicrobial activity, and the nutrient concentration in the basidiocarps were evaluated. The mushrooms were cultivated in sawdust enriched with rice, wheat, soybean bran, or a combination of two of these supplements. Additionally, the substrates were humidified with 0.1% tea extract or water. The mushrooms were also produced on eucalypt logs. Productivity varied among isolates and substrates on which the mushrooms were grown, and was highest in the logs. Antimicrobial activity of the water extract, corresponding to 40 mg of mushroom dry matter, inhibited both Bacillus subtilis and Escherichia coli K-12, regardless of the cultivation substrates, growth stage of mushrooms, and processing method (fresh or dried). The ethyl acetate soluble fraction, equivalent to 150 μg and 300 μg of mushroom dry matter, using the paper disk diffusion technique, inhibited neither B. subtilis nor E. coli. Nitrogen, phosphorus, potassium, magnesium and calcium concentrations varied according to the substrate on which the mushrooms were grown. Generally, these nutrients were higher when the mushrooms were cultivated on the sawdust- based substrates than on eucalypt logs. However, these results confirmed that shiitake is rich in these nutrients. Besides fungal isolate, the substrate of mushroom growth, and the processing method have to be considered in the nutritional evaluation of the mushrooms, as well as in the production of antimicrobial substance(s).

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-06-01T09:01:12Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1025665 bytes, checksum: 88301ff005d1f6fd5e14ded3d67ff5e8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-01T09:01:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1025665 bytes, checksum: 88301ff005d1f6fd5e14ded3d67ff5e8 (MD5) Previous issue date: 2009-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A embalagem antimicrobiana é um tipo promissor de embalagem ativa, capaz de eliminar ou inibir microrganismos deterioradores e patogênicos presentes nos alimentos. Este trabalho teve como objetivos: I) desenvolver filmes de polietileno de baixa densidade com diferentes concentrações de produto à base de triclosan; II) avaliar suas propriedades físicas e mecânicas e suas características microscópicas; III) avaliar sua eficiência antimicrobiana in vitro sobre Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella choleraesuis, Pseudomonas aeruginosa e Listeria innocua; IV) determinar a concentração mínima inibitória do produto à base de triclosan sobre os mesmos microrganismos e verificar a capacidade destes microrganismos de desenvolverem mecanismos de resistência, após sucessivas exposições ao produto à base de triclosan; V) avaliar a eficiência antimicrobiana e difusão do triclosan dos filmes em bifes de carne bovina. O processo de incorporação do produto à base de triclosan em polietileno de baixa densidade (PEBD) não foi totalmente eficiente, sendo que, aproximadamente, 36% do composto adicionado foi incorporado. A presença de triclosan nos filmes não alterou a espessura, as propriedades mecânicas dos filmes (carga máxima ruptura, porcentagem de alongamento na ruptura e módulo de elasticidade), a taxa de transmissão ao vapor de água (TTVA) e a taxa de transmissão ao oxigênio (TTO). Nas fotomicrografias obtidas por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV) e por microscopia de força atômica (MFA) observou-se que os filmes com ou sem triclosan eram homogêneos, sugerindo que o triclosan é muito miscível no polímero de polietileno de baixa densidade, o que pode ser explicado pela interação favorável entre o antimicrobiano e o polímero. Os filmes que continham triclosan apresentaram eficiência antimicrobiana in vitro sobre E. coli e S. aureus, com formação de halos de inibição, sendo que com o aumento da concentração de produto à base de triclosan no filme, maior foi o diâmetro do halo encontrado. Não houve formação de halo de inibição para L. innocua, S. choleraesuis e P. aeruginosa, no entanto, ocorreu pequena redução da densidade das colônias ao redor dos filmes com diferentes concentrações do antimicrobiano para S. choleraesuis e P. aeruginosa. Após sucessivas exposições subletais ao produto à base de triclosan, E. coli e S. aureus apresentaram maior concentração mínima inibitória de triclosan, o que sugere que estas bactérias desenvolveram mecanismos de resistência a este antimicrobiano. Os filmes com triclosan não apresentaram atividade sobre bactérias láticas, enterobactérias e de Pseudomonas sp. na carne durante o período de estocagem comparados com o filme controle. Houve efeito dos filmes antimicrobianos sobre de psicrotróficos, sendo que o filme do tratamento com 3% de triclosan apresentou menor contagem de psicrotróficos até o 5 o dia de estocagem da carne e os filmes dos tratamentos com 1% e 2% de triclosan inibiram o crescimento destes microrganismos apenas até o 3 o dia. A difusão do triclosan dos filmes com 3% de triclosan para a carne embalada em bandejas de poliestireno ultrapassou o limite estabelecido pela Comunidade Européia após o 6o dia de estocagem da carne em contato com o filme do tratamento. Para os demais tratamentos, a concentração máxima de triclosan detectada na carne foi inferior ao limite permitido. Os filmes incorporados com triclosan apresentaram comportamento típico de embalagem ativa com difusão do antimicrobiano de maneira controlada para o alimento. Portanto, os filmes possuem potencial de aplicação como embalagens de alimentos em relação as suas características antimicrobianas e mecânicas, podendo aumentar a vida de prateleira dos alimentos e auxiliar na garantia da segurança alimentar. A eficiência do filmes em carne bovina pode ter sido afetada pela baixa qualidade matéria-prima. / The antimicrobial packaging is a promising type of active packaging able to eliminate or inhibit spoilage and pathogens microorganisms in food. This study aimed to: i) develop films of low density polyethylene with different concentrations of triclosan based product; II) evaluate the physical and mechanical properties and microscopic characteristis of the films; III) evaluate the in vitro antimicrobial efficiency against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella choleraesuis, Pseudomonas aeruginosa and Listeria innocua; IV) evaluate the effect of successive exposures to triclosan based product on different microorganisms; V) evaluate the antimicrobial effectiveness of triclosan and the diffusion of the triclosan from the films to the meat. The incorporation process of triclosan based product in low-density polyethylene (LDPE) was not fully effective, only 36% of added compound was incorporated. The presence of triclosan in the films did not change the thickness, the mechanical properties of films (maximum load at break, percent elongation at break elastic modulus), the water vapor transmission rate (WVT) and the oxygen transmission rate. The antimicrobial incorporation did not affect the polymeric structure of the films, suggesting that triclosan is very miscible in the polymer of low-density polyethylene, which may be explained by favorable interaction between the antimicrobial and the polymer. The films containing triclosan showed in vitro antimicrobial efficiency on E. coli and S. aureus inoculated on agar surfaces. The increasing concentration of triclosan in the film increased the diameter of the inhibition halo. There was no formation of inhibition halo for L. innocua, S. choleraesuis and P. aeruginosa. However, there was a small reduction in colonies density around the films on S. choleraesuis and P. aeruginosa. After successive sublethal exposure to triclosan based product, both E. coli and S. aureus increased the triclosan minimal inhibitory concentration suggesting that these bacteria develop mechanisms of resistance to triclosan. The films with triclosan did not reduce the count of lactic acid bacteria, Enterobacteriaceae and Pseudomonas sp. in meat during storage when compared with the control film. There was an effect of the antimicrobial films against psychrotrophic bacteria. The film treated with 3% triclosan showed lower counts of psychrotrophic until the 5 th day of storage of meat, and the films treated with 1% and 2% triclosan inhibited growth of these microorganisms until the 3 rd day. The diffusion of triclosan from the films for the meat in contact with the film obtained by treatment with 3% of triclosan and packed in polystyrene trays was higher than the limit allowed by the Scientific Commitee for Food at 6 th day of storage. In the other treatments, the maximum concentration of triclosan found in meat was lower than the permitted limit. The films incorporated with triclosan based product showed typical behavior of active packaging with controlled antimicrobial diffusion for the food. Therefore, the films have potential application as packaging for food for their antimicrobial and mechanical characteristics and can increase the shelf life and ensure the safety of foods. The efficiency of the films in beef may have been affected by low quality raw material. / Dissertação antiga, sem folha de aprovação e ficha catalográfica.

LIMA, Rejane Maria Moreira. Ação antimicrobiana e antioxidante in vitro das frações proteicas da microalga Scenedesmus obliquus. 2016. 86 f. Dissertação (Mestrado em Ciência e Tecnologia de Alimentos)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Paulo Alencar (ppgcta@ufc.br) on 2017-06-23T17:39:38Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_rmmlima.pdf: 1690211 bytes, checksum: d0cfc868ddc16088a09ed8e8b65b3ce0 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-06-27T21:55:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_rmmlima.pdf: 1690211 bytes, checksum: d0cfc868ddc16088a09ed8e8b65b3ce0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-27T21:55:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_rmmlima.pdf: 1690211 bytes, checksum: d0cfc868ddc16088a09ed8e8b65b3ce0 (MD5) Previous issue date: 2016 / The increase in research involving the extraction of biologically active compounds microalgae has recently around the world, thanks to the advancement of studies that demonstrate its potential biotechnology, and medical nutrition. The aim of this study was to evaluate the productivity of chlorophyll a, the rate of cell growth and the soluble protein content of microalgae obliquus Scenedesmus grown in vertical photobioreactor amid toilet cultivation (Water Culture) modified under controlled conditions of temperature and light. In addition, we evaluated the protein fractions subjected to precipitation with ammonium sulfate at different levels of saturation (0-20%, 20-40%, 40-60% and 60-80%), as the antifungal activity, using the disk diffusion method, and the antioxidant activity using the DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl). There was the quantification of the essential amino acid content present in the fraction with the highest activity. The results showed a production of 8.5 mg chlorophyll a / L Cell density Maximum (DCM) was 130 x 105 cells / ml and the protein concentration measured in protein fractions ranged from 0.485 to 1.042 mg / ml. The electrophoretic pattern of protein fractions delineated by a wide range of molecular weight ranging from 116 kDa and 14.4 kDa, predominantly greater concentration of proteins in the range between 21.5 and 45 kDa. The protein fractions tested (FrP0-20% FrP20-40% FrP40-60% and FrP60-80%) had antimicrobial effect against C. kefyr fungus, A. niger and A. fumigatus, but only a fraction FrP40-60 % and the control treatment showed inhibition zone for C. albicans. No treatment had inhibitory effect of growth of bacteria S. epidermidis, E. coli and P. aeruginosa. Only FrP fractions 40-60% and FrP60-80% showed growth inhibition of S. aureus. The FrP40-60% fraction showed superior results in all analyzes with a maximum of 85% antioxidant effect at a concentration of 0.8 mg / mL. Quantitative analysis of essential amino acids revealed the presence of Cys, Lys, Leu, Phe, Thr, Tyr, Val, Met, Ile and Trp. The results showed that Scenedesmus obliquus is a promising source of biocompounds that can be used in the manufacture of food supplements for humans and animals, cosmetics and medicines preparation. / O aumento de pesquisas envolvendo a extração de compostos biologicamente ativos de microalgas se deu recentemente em todo o mundo, graças ao avanço de estudos que comprovam o seu potencial biotecnológico, nutricional e medicinal. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a produtividade de clorofila a, a taxa de crescimento celular e o teor de proteínas solúveis da microalga Scenedesmus obliquus cultivada em fotobiorreator plano vertical em meio de cultivo W.C. (Water Culture) modificado sob condições controladas de temperatura e luminosidade. Além disso, avaliou-se as frações proteicas submetidas à precipitação com sulfato de amônio em diferentes níveis de saturação (0-20%, 20-40%, 40-60% e 60-80%), quanto a atividade antifúngica, empregando o método de disco difusão, e a atividade antioxidante, utilizando o método DPPH (1,1-difenil-2-picrilhidrazil). Fez-se a quantificação do teor de aminoácidos essenciais presentes na fração que apresentou maior atividade. Os resultados demonstraram uma produção de clorofila a de 8,5 mg/ L, a Densidade Celular Máxima (DCM) foi de 130 x 105 cel/ mL e a concentração de proteínas nas frações proteicas avaliadas variou entre 0,485 a 1,042 mg/ mL. O perfil eletroforético das frações proteicas delineou-se por uma ampla faixa de peso molecular que variou entre 14,4 kDa e 116 kDa, predominando uma maior concentração de proteínas na faixa entre 21,5 e 45 kDa. As frações proteicas testadas (FrP0-20%, FrP20-40%, FrP40-60% e FrP60-80%) apresentaram efeito antimicrobiano contra os fungos C. kefyr, A. niger e A. fumigatus, porém somente a fração FrP40-60% e o tratamento controle apresentaram halo de inibição para C. albicans. Nenhum tratamento teve efeito inibidor do crescimento das bactérias S. epidermidis, E. coli e P. aeruginosa. Apenas as frações FrP 40-60% e FrP60-80% apresentaram inibição do crescimento da bactéria S. aureus. A fração FrP40-60% apresentou resultados superiores em todas as análises com um efeito antioxidante máximo de 85% na concentração de 0,8 mg/ mL. A análise quantitativa de aminoácidos essenciais revelou a presença de Cis, Lis, Leu, Fen, Tre, Tir, Val, Met, Ile e Trp. Os resultados evidenciaram que Scenedesmus obliquus é uma fonte promissora de biocompostos que podem ser utilizados na fabricação de suplementos alimentares para humanos e animais, elaboração cosméticos e de medicamentos.

OLIVEIRA FILHO, Rosueti Diógenes de. Incorporação de óleo essencial de manjericão em filmes biodegradáveis à base de galactomanana e óleo de canola. 2015. 77 f. Dissertação (mestrado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015 / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-03-22T18:12:30Z No. of bitstreams: 1 2016_rdoliveirafilho.pdf: 1493866 bytes, checksum: bece9362961e66588fbfbaff693bdd5d (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-05-18T18:27:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_rdoliveirafilho.pdf: 1493866 bytes, checksum: bece9362961e66588fbfbaff693bdd5d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-18T18:27:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_rdoliveirafilho.pdf: 1493866 bytes, checksum: bece9362961e66588fbfbaff693bdd5d (MD5) Previous issue date: 2015 / Biodegradable Packaging are used in foods as films or coatings formed by plant macromolecules such as animal, ensuring barrier properties and can serve as a carrier for antimicrobial compounds. The cell wall polysaccharides reservation, especially hemicelluloses as galactomannans, have been used widely as biodegradable polymer matrices films. The objective of this study was to evaluate the Basil essential oil (BEO) (Ocimum basilicum) incorporation in biodegradable films based on endospermic galactomannan Delonix regia seeds and canola oil (CO) (Brassica napus L.). The galactomannan (Gal) was isolated by aqueous extraction, followed by ethanol precipitation. The yield was 12.0% with high purity presented by low nitrogen content expressed protein (0.67%). The Gal showed an average intrinsic viscosity of 3.79 dL/g and molecular weight estimated in 1,04x106 g/mol. Infrared spectra by Fourier transform (FTIR) and nuclear magnetic resonance (NMR) 1H and 13C were similar to those found in the literature for other galactomannans. The fatty acid composition of CO by gas chromatography (GC-FID) showed oleic acid (62.07%), linoleic (18.91%) and heneicosanóico (6.61%) content. The major components of BEO determined by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) were camphor (14.85%) and 1.8-cineole (3.48%). The films were formulated with galactomannan 1% (w/v), glycerol 0.5% (w/v) and CO at different concentrations, 0.25, 0.5 and 0.75% (w/v). The films were obtained by the solvent evaporation method (casting) and characterized as the moisture content, thickness, water vapor permeability (WVP), color and opacity. The CO promoted increase of WPV and reduced moisture content when compared to the film based only in galactomannan but no significant difference between concentrations. BEO was tested against the bacterial strains of Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Salmonella choleraesuis, Staphylococcus aureus and Candida albicans yeast by broth microdilution and showed minimum inhibitory concentration (MIC) ranging between 2.5 and 5.0 mg/ml and minimum bactericidal concentration (MBC) between 5.0 and 20.0 mg/ml. BEO was incorporated into film formulation with CO 0.5% (w/v) in different concentrations (2.5, 5.0 and 7.5 mg/ml). The antimicrobial films were obtained by casting and disks of 1 cm in diameter were excised and tested by the agar diffusion method and a contact zone and inhibition halos analyzed. S. aureus, E. coli and P. aeruginosa were sensitive to film containing BEO 5.0 mg/ml showed halos of 14, 15 and 16.3 mm, respectively. K. pneumoniae was inhibited only in the contact zone of the film, while S. choleraesuis and C. albicans were resistant to all formulations. However, the OC promoted changes in physical and barrier properties of the films of with galactomannan. BEO when incorporated into the film showed a moderate antimicrobial activity for potential application as bioactive packaging. / Embalagens biodegradáveis são coberturas utilizadas em alimentos na forma de filmes ou revestimentos, formadas por macromoléculas tanto de origem vegetal como de origem animal, que garantem propriedades de barreira e podem servir como veículo para compostos antimicrobianos. Os polissacarídeos de reserva de parede celular, principalmente as hemiceluloses como as galactomananas, vêm sendo extensamente usadas como matrizes poliméricas de filmes biodegradáveis. O objetivo deste trabalho foi avaliar a incorporação de óleo essencial de manjericão (OEM) (Ocimum basilicum) em filmes biodegradáveis à base de galactomanana endospérmica de sementes de flamboyant (Delonix regia) e óleo canola (OC) (Brassica napus L.). A Galactomanana (Gal) foi isolada por extração aquosa, seguida por precipitação em etanol. O rendimento determinado foi de 12,0%, com alto grau de pureza apresentado pelo baixo teor de nitrogênio expresso em proteína (0,67%). A Gal apresentou viscosidade intrínseca média de 3,79 dL/g e massa molar estimada de 1,04x106 g/mol. Os espectros de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e ressonância magnética nuclear (RMN) de 1H e 13C foram similares aos encontrados na literatura para outras galactomananas. A composição em ácidos graxos do OC por cromatografia a gás (GC-FID) apresentou teores de ácido oleico (62,07%), linoleico (18,91%) e heneicosanóico (6,61%). Os componentes majoritários do OEM determinados por cromatografia a gás acoplado à espectrometria de massas (GC-MS) foram cânfora (14,85%) e 1,8-cineol (3,48%). Os filmes foram formulados com Gal 1% (m/v), glicerol 0,5% (m/v) e OC em diferentes concentrações, 0,25, 0,5 e 0,75% (m/v). Os filmes foram obtidos pelo método de evaporação de solvente (casting) e caracterizados quanto ao teor de umidade, espessura, permeabilidade ao vapor de água (PVA), cor e opacidade. O OC promoveu aumento de PVA e diminuição do teor de umidade quando comparado ao filme apenas de galactomanana, mas sem diferença significativa entre as concentrações. O OEM foi testado frente às cepas bacterianas de Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Salmonella choleraesuis, Staphylococcus aureus e levedura Candida albicans por microdiluição em caldo e apresentou concentração inibitória mínima (CIM) variando entre 2,5 e 5,0 mg/mL e concentração bactericida mínima (CBM) entre 5,0 e 20,0 mg/mL. A partir do filme com formulação de 0,5 % (m/v) de OC incorporou-se OEM em diferentes concentrações (2,5, 5,0 e 7,5 mg/mL). Os filmes antimicrobianos foram obtidos por casting e discos de 1 cm de diâmetro foram excisados e testados por método de difusão em ágar e a zona de contato e os halos de inibição analisados. S. aureus, E. coli e P. aeruginosa foram sensíveis ao filme contendo 5,0 mg/mL de OEM apresentando halos de 14, 15 e 16,3 mm, respectivamente. K. pneumoniae foi inibida apenas na zona de contato do filme, enquanto que S. choleraesuis e C. albicans foram resistentes à todas as formulações. Contudo, O OC promoveu alterações nas propriedades físicas e de barreira dos filmes de galactomanana e OEM quando incorporado ao filme apresentou uma atividade antimicrobiana moderada para potencial aplicação como embalagens bioativas.

A distribuição das espécies de enterococos, bactérias comensais do trato gastrointestinal (TGI), é bastante estudada nos diferentes mamíferos; entretanto, em lobos-marinhos (Arctocephalus spp.) ainda não existem dados. Os objetivos do estudo foram: a) isolar Enterococcus spp. a partir de amostras fecais de lobos-marinhos encontrados no litoral norte do Rio Grande do Sul; b) determinar a prevalência das espécies; c) avaliar o perfil de suscetibilidade antimicrobiana; d) verificar a presença de genes relacionados à resistência e à virulência e; e) analisar o perfil genotípico por RAPD-PCR. No total, 160 enterococos foram isolados e identificados como E. faecalis (50,62%), E. hirae (34,37%), E. casseliflavus (11,87%), E. gallinarum (1,87%), E. mundtii (0,62%) e E. faecium (0,62%). Noventa e três isolados foram sensíveis aos dez antimicrobianos testados. As propriedades de resistência foram encontradas para eritromicina (21,25%), nitrofurantoína (15,62%), tetraciclina (6,25%), norfloxacina (3,12%) e ciprofloxacina (3,12%). Dentre os 10 isolados resistentes à tetracilina, 3 apresentaram o gene tet(M) e nenhum o tet(L). Dos 34 resistentes à eritromicina, 2 apresentaram o gene erm(B). Quanto à presença dos genes de virulência, maior incidência foi observada para os genes ace (66,87%) e gelE (50,62%), seguidos por asa (11,87%) e cylA (2,5%). A atividade de gelatinase e citolisina indicou a presença de genes silenciosos. A análise do RAPD-PCR permitiu reunir os isolados em cinco grupos. Em conclusão, diferentes espécies de enterococos compõem a microbiota do TGI de lobos-marinhos e a presença de elementos de resistência e virulência podem estar relacionados a fatores antropogênicos ou ter origem no resistoma ambiental. / The species distribution of enterococci, commensal bacteria of the gastrointestinal tract (GIT), is well studied in different mammals, however in fur seals (Arctocephalus spp.) data do not exist yet. The objectives of this study were: a) to isolate Enterococcus spp. from fecal samples of fur seals found on the North coast of Rio Grande do Sul; b) to determine the prevalence of species; c) to assess the antimicrobial susceptibility profile; d) to check the presence of resistance and virulence related genes and; e) to evaluate the genotypic profile by RAPD-PCR. A total of 160 enterococci were isolated and identified as E. faecalis (50.62%), E. hirae (34.37%), E. casseliflavus (11.87%), E. gallinarum (1.87%), E. mundtii (0.62%), and E. faecium (0.62%). Ninety-three isolates were susceptible to 10 antimicrobials tested. Resistance properties were found for erythromycin (21.25%), nitrofurantoin (15.62%), tetracycline (6.25%), norfloxacin (3.12%), and ciprofloxacin (3.12%). Among the 10 isolates resistant to tetracycline, 3 harbored the tet(M) gene and none were positive to tet(L) gene. Among the 34 erythromycin-resistant isolates, 2 harbored the erm(B) gene. Regarding the virulence genes, a higher incidence was observed for the ace (66.87%) and gelE (50.62%), followed by asa (11.87%) and cylA (2.5%). Gelatinase and cytolysin activity indicated the presence of silent genes. Analysis of RAPD-PCR allowed to assemble the isolates into five groups. In conclusion, different species of enterococci are part of the fur seals GIT microbiota and the presence of resistance and virulence elements may be related to anthropogenic factors or origin in the environmental resistome.

A bacteriocina P34 é produzida por um Bacillus sp. e apresenta atividade antimicrobiana para diversas espécies de Listeria sp. e para L. monocytogenes ATCC 7644. Neste trabalho, foi pesquisada a presença de bactérias lácticas em lingüiça frescal de frango. Os resultados demonstraram o isolamento de seis culturas em placas de ágar MRS a 30ºC por 48 h. Cinco das seis linhagens isoladas inibiram o crescimento da L. monocytogenes após incubação a 30o C por 24 h. Os sobrenadantes brutos destas bactérias lácticas demonstraram efeito sinérgico quando adicionados em conjunto com a bacteriocina P34 frente ao microrganismo indicador, L .monocytogenes, pelo método de difusão em ágar com discos. Foi inoculada L. mononocytogenes ATCC 7644 em suspensão com 103 UFC/g em lingüiça frescal de frango no dia zero e recuperada em meio MOX nos dias zero, três, sete e dez da inoculação. Os resultados permitiram concluir que a bacteriocina P34 parcialmente purificada na concentração de 256 UA/g inibiu L. monocytogenes em todos os tempos. A bacteriocina P34 parcialmente purificada foi testada em envoltórios naturais de bovinos (tripas semi-secas salgadas) frente ao mesmo microrganismo indicador, L. monocytogenes ATCC 7644, demonstrando sua inibição in vitro. / The bacteriocin P34, produced by Bacillus sp., showed antimicrobial activity for many species of Listeria sp and L. monocytogenes ATCC 7644 . In this work, it was investigated the presence of lactic bacteria in fresh chicken sausage. The results demonstrated the isolation of six cultures in MRS agar plates at 30o C for 48h. Five of the six isolated strains inhibited the growing of the L. monocytogenes after incubation at 30ºC for 24h. The crude supernatants of these lactic bacteria demonstrated the synergic effect when it were added together with the bacteriocin P34 against indicator microorganism, L. monocytogenes ATCC 7644, using the method of diffusion in agar with paper discs. L. monocytogenes ATCC 7644 was inoculated in a suspension with 103 UFC/g in chilled chicken sausage and recovered in MOX counting from zero, three, seven and ten days from the inoculationt. The results allowed concluding that the P34 bacteriocin partially purified, in a 256 UA/g concentration, inhibited the indicator microorganism in all periods of time. At the same time, the partially purified P34 bacteriocin were tested in natural bovine wrapping ( salty semi-dried tripe ) using the same indicator micro-organism, L. monocytogenes ATCC 7644, demonstrating its inhibition in vitro.