Submitted by Ricardo Cedraz Duque Moliterno (ricardo.moliterno@uefs.br) on 2017-08-16T21:51:48Z No. of bitstreams: 1 VERS?O FINAL Sammya.pdf: 1907132 bytes, checksum: 1e1a59eb9dfae60b28627c832c9019fa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-16T21:51:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VERS?O FINAL Sammya.pdf: 1907132 bytes, checksum: 1e1a59eb9dfae60b28627c832c9019fa (MD5) Previous issue date: 2017-04-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The species Vatairea macrocarpa (Benth.) Ducke is typical of Brazil, popularly known as maleiteira, angelim-do-cerrado and bitter, and is popularly used to treat various pathologies. The present study had as objective to evaluate the chemical chemistry, a toxicity and biological potential of extracts of leaves and stem of V. macrocarpa. The extracts were obtained by maceration in methanol.The chemical composition was analyzed by Thin Layer Chromatography (TLC). Phenoliccompounds, flavonoid and antioxidant activity tests were performed using the diphenylpicrilhydrazyl radical sequestration method (DPPH) and the ?-carotene / linoleic acid co-oxidation method. The acute toxicity test and the motor coordination evaluation were performed by the rota-rod test, as well as the tests for the evaluation of the anti-inflammatory activity (carrageenan-induced paw edema) and analgesic (acetic acid, formalin and hot plate). In the extracts the presence of flavonoids, steroids, terpenes, coumarins, saponins and absence of alkaloids were identified. The content of phenolic compounds and flavonoids were determined and both extracts presented antioxidant activity in both methods. No toxic signs were observed for both extracts at the fixed dose of 300 mg / kg or changes in the motor coordination of the animals at the doses tested. Both the stem and the leaves showed antinociceptive and anti-inflammatory activity in the tests performed. In view of the promising results presented by this species it is necessary to continue the studies with the same in order to isolate and identify substances and elucidate their mechanisms of action regarding the anti-inflammatory and analgesic activities. / A esp?cie Vatairea macrocarpa (Benth.) Ducke ? t?pica do Brasil, conhecida popularmente como maleiteira, angelim-do-cerrado e amargoso, e ? utilizada popularmente para tratamento diversas patologias. O presente estudo teve como objetivo avaliar a composi??o qu?mica, a toxicidade e o potencial biol?gico dos extratos brutos das folhas e do caule de V. macrocarpa. Os extratos foram obtidos atrav?s da macera??o em metanol. A composi??o qu?mica foi analisadaatrav?s da Cromatografia em Camada Delgada (CCD) e testes de determina??o de fen?licos e flavonoides. A avalia??o da atividade antioxidante foi realizada atrav?s do m?todo de sequestro de radical difenilpicrilhidrazila (DPPH) e do m?todo de co-oxida??o do ?-caroteno/?cido linoleico. Testes in vivo de toxicidade aguda e a avalia??o da coordena??o motora pelo teste rota rod, al?mdos testes para a avalia??o da atividade anti-inflamat?ria (edema da pata induzida por carragenina) e analg?sica (?cido ac?tico, formalina e placa quente) foram realizados. Nos extratos foi identificada a presen?a de compostos fen?licos, esteroides, terpenos, cumarinas, saponinas e aus?ncia de alcaloides. Foi determinado o teor de compostos fen?licos e flavonoides e ambos os extratos apresentaram atividade antioxidante nos dois m?todos.N?o foi verificado sinais t?xicos por ambos os extratos na dose fixa de 300 mg/Kg, nem altera??es na coordena??o motora dos animais nas doses testadas.Tanto o caule quanto as folhas demonstraram atividade antinociceptiva e anti-inflamat?ria nos testes realizados. Diante dos resultados promissores apresentados por essa esp?cie deve-se continuar os estudos a fim de isolar e identificar subst?ncias, bem como elucidar seus mecanismos de a??o quanto ?s atividades anti-inflamat?ria e analg?sica.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CAROLINNE BORGES KHAYAT.pdf: 2297476 bytes, checksum: 992aa1b9dc7b17cdf96375464ab8d719 (MD5) Previous issue date: 2012-04-13 / The term pesticide is used to refer to a wide variety of chemicals used to kill weeds, insects and fungi. In Brazil, the use of pesticides in agriculture has been expanding continuously, and therefore the analysis of the effects of this type of environmental exposure begins to document an epidemiological profile of the distribution of cancer in both populations occupationally exposed to these chemicals as in the general population indirectly affected by contaminated food and water resources. The possible toxic effects of such exposures are unknown and the information related only to the toxicity of active ingredients are not sufficient to assess the risk of adverse effects of pesticides on human health and the environment. Workers exposed to pesticides when compared with the control group showed increased 8 times more micronucleus and 20 times more binucleated cells and increased DNA damage measured by comet assay. Variables such as smoking, alcohol consumption, age, sex, duration of exposure and type of pesticide did not affect the appearance of genetic damage. However, there was an increase of micronucleus in workers who did not use personal protective equipment. Pesticide exposure can cause genotoxicity and mutagenicity to individuals who deal with such agents. / O termo pesticida é usado para denominar uma ampla variedade de produtos químicos utilizados para destruir ervas daninhas, insetos e fungos. No Brasil, o uso de pesticidas na agricultura vem se ampliando de forma contínua e, consequentemente, a análise sobre os efeitos deste tipo de exposição ambiental começa a documentar um perfil epidemiológico da distribuição de câncer tanto em populações ocupacionalmente expostas a estes agentes químicos, como na população geral indiretamente afetada por contaminação alimentar e dos recursos hídricos. Os possíveis efeitos tóxicos de tais exposições ainda são desconhecidos e as informações da toxicidade relacionada apenas aos ingredientes ativos não são suficientes para avaliar o risco dos efeitos adversos dos pesticidas à saúde humana e ambiental. Os trabalhadores expostos a pesticidas, quando comparados ao grupo controle, tiveram aumento de 8 vezes mais micronúcleos e 20 vezes mais células binucleadas e maior dano ao DNA avaliado pelo ensaio cometa, em relação ao grupo controle (p<0,0001), como demonstrado pelo teste t e análises de regressão linear simples. Nesse estudo, variáveis como tabagismo, consumo de álcool, idade, sexo, tempo de exposição e tipo de pesticida não influenciaram o aparecimento de danos genéticos. Entretanto, houve aumento de micronúcleos em trabalhadores que não utilizavam equipamentos de proteção pessoal (p=0,006). Assim, a exposição a pesticidas, independente do tempo e tipo de agente utilizado, pode causar genotoxicidade e mutagenicidade aos indivíduos que os manipulam.

Os Ensaios Não Destrutivos (END), são aplicados em testes de qualidade de componentes e de máquinas. Estes elementos não teriam um bom desempenho se fossem concebidos alheios à qualidade do projeto, aos materiais envolvidos, aos processos de fabricação e à metodologia de inspeção e manutenção. Um alto nível de tecnologia é aplicado com um objetivo específico, ou seja, à garantia da qualidade dos componentes e do bom funcionamento dessas máquinas, seja na indústria e na geração e conversão de energia, incluindo a nuclear. A globalização nos diversos ramos da indústria leva a um aumento na quantidade de projetos e produtos contextualmente multinacionais. Surgem, as seguintes questões: como assegurar que os componentes e os processos utilizados se disponhem de alto índice na qualidade? Como otimizar os métodos e os rocessos de teste de materiais para assegurar a isenção de defeitos que possam afetar o esempenho dos componentes? As respostas para as questões se encontram notadamente na aplicação dos END. A análise de materiais complexos (não homogêneos) por meio de END requer um estudo detalhado dos sinais de resposta dos sensores. Um sistema de medidas e controle de processos não destrutivos usando radiação gama ou beta, em função do material a ser analisado foi desenvolvido. Esse sistema envolve: (a) Interface de entrada/saída (Hardware) e (b) Interface gráfica (Software). Na análise não destrutiva faz-se a comparação do sinal proveniente do sensor com um sinal preestabelecido (Set Point) ou sinal de referência, o qual é ajustado na Interface de entrada/saída. Após o processamento geral, o sistema tomará a decisão de rejeitar ou não o material analisado. A Interface de entrada/saída é implementada por um equipamento eletrônico constituído pelo MCS51, com a finalidade de fornecer um meio físico para troca de nformações, via de comunicação serial RS232, entre o sensor e o microcomputador . A Interface gráfica (programa computacional) foi escrita em linguagem C++ visual. / Nondestructive Assay (NDA) is applied to machines and components quality tests. These elements would not have a good performance if they were conceived without concern about the mechanical project quality, used materials, manufacture processes and inspection and maintenance methodology. There are constant developments in high level of technology with the objective of guaranteeing the components quality and the good functioning of these machines, in the mechanics, naval, aeronautical, petrochemical and steel industry, energy and nuclear generation as well. The globalization in the industry lines is a fact, leading to an increase in the multinational projects and products. The following questions arise: how to assure the high quality of components and processes? How to optimize the test methods to assure that the materials do not have defects affecting the performance of the components? The answers to the questions above are found in the application of NDA. The complex materials analysis (inhomogeneous) using NDA requires a detailed study of the sensors response signal. In this work, a measure and control system of non destructive processes was developed, using a radioactive source with a defined energy in function of the material to be analyzed. This system involves: (a) Interface of input/output (I/O) (the Hardware) and (b) graphical Interface (Software). In the non destructive analysis, it is made the comparison of the signal proceeding from the sensor with a signal preset (Set Point) or analogical signal of reference (Base Line), which is adjusted in the I/O Interface. Analyzed the signal, the system will make the decision: (a) to reject or (b) to accept the analyzed material. The I/O Interface is implemented by electronic equipment with a MCS51. The purpose of this interface is to supply conditions to exchange information, using serial RS232, between the sensor and the microcomputer. The graphical Interface (software) is written in visual C++ language.

O aproveitamento de dejetos industriais como fonte de insumos, apresenta além da vantagem econômica pelo uso de materiais de baixo valor comercial, um forte apelo ambiental. A presença de grande produção de resíduos orgânicos em abatedouros, como as penas de frango, leva à necessidade do desenvolvimento de tecnologias que possibilitem a sua reciclagem. As penas se constituem como os materiais queratinosos mais abundantes na natureza, e por isso, podem ser usados como material de partida para diferentes aplicações biotecnológicas, químicas e farmacêuticas. Existem na literatura vários métodos de extração de queratina das penas de frango, como as extrações por hidrólises ácidas e alcalinas, que além da desvantagem da hidrólise total da proteína, rompem também os sítios principais de reação de crosslinkings da proteína. Outros procedimentos envolvem o uso de grandes concentrações de reagentes onerosos, como o 2-mercaptoetanol e as enzimas proteolíticas. Estudo realizado por planejamento fatorial visou à extração e fragmentação da queratina, através da combinação de diferentes concentrações de sulfito de sódio, uréia e papaína. Ensaios preliminares de modificação da queratina foram conduzidos após esta extração. Temperaturas acima de 80°C, e concentrações intermediárias de uréia (3,75M) combinadas a baixas concentrações de sulfito de sódio (0,1M - 0,18M) foram os melhores parâmetros de extração. A hidrólise enzimática apresentou-se adequada somente quando combinada ao prévio tratamento químico. A combinação dos dois processos extrativos resultou em redução do tempo de reação da hidrólise enzimática. A queratina obtida apresentava tamanho de fragmentos homogêneos, ao redor de 650nm, e um grau de pureza de 72%-89% em massa seca de proteína purificada. A caracterização físico-química dos derivados da queratina demonstra a amplitude desta proteína como insumo para aplicações diversas. O estudo da inserção de grupamentos polares na molécula de queratina é feita por análise da solubilidade em diferentes solventes e por espectroscopia vibracional Raman. / The use of industrial wastes as a source of raw materials presents, besides the cost-effective advantages, an eco-friendly approach. Great amount of feather waste discharged from slaughterhouses demands the development of biotechnological alternatives for its recycling. Feather is the most keratinous material in nature and may be used for different applications in biotechnology, pharmaceutical and chemical industry. Several authors have written methods for feather keratin extraction, as acid and alkaline hydrolysis. Those methods presented disadvantages like damage to the backbone protein chain and loss of its main function as well as loss of cross linking groups. Other chemical treatments require large amounts of expensive reagents such as 2-mercaptoethanol and proteolytic enzymes. The present work comprises a factorial planning for extraction and fragmentation of feather keratin by combining sodium sulfide (0,1M 0,26M), urea (2M- 6M) and papain (0,13mg/ml). Feather keratin modification assay was conducted after protein extraction. The experiment presented satisfactory results when temperature extraction is maintained around 80° C, urea is used in an intermediate concentration (3,75M) and sodium sulfide in a low concentration(0,1M- 0,18M). Enzymatic hydrolysis is viable only after previous chemistry extraction. The combination of both treatment types resulted in a decrease of enzymatic time reaction and therefore an optimized keratin production. Extracted feather keratin presented homogenous size fragments with most particle diameters around 650nm. The percentage of proteins found was around 72%-89% compared to the total dry weight. The physicochemical characterization of feather keratin derivatives bring this protein of interest as a potencial component to renewable raw materials synthesis. Modification analysis of feather keratin was carried by qualitative solubility evaluation and vibrational spectrometry Raman.

Abstract Introduction This study evaluated the effect of the polymer polyvinylalcohol-carbazate (PVAC) on the bacteria Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Pseudomonas aeruginosa. PVAC is a polymer with a carbazate moiety that neutralizes free aldehydes and has shown great promise in stabilizing erythrocytes during long term storage. It has also been shown to reduce intraperitoneal adhesions after trauma. For this study, two Gram positive and two Gram negative bacteria strains were used with PVAC to evaluate its effect. Materials and methods PVAC was obtained from the research team at Ångström Laboratory, Uppsala. The bacteria were obtained from Clinical Microbiology and Hospital Hygiene, Academic Hospital, Uppsala. The methods used were spectrophotometric assessment of bacteria growth, use of FITC-conjugated PVAC to study adherence to bacteria, use of FITC-antibodies to study PVAC’s effect on bacterial adherence to erythrocytes and a qPCR for quantification of E. coli. Results and discussion PVAC displayed a clear effect of inhibition of bacteria growth in the study as shown by use of spectrophotometric assessment. Trials with FITC-PVAC showed that the polymer adheres directly to the bacteria, displaying a possible function of its inhibitory properties. The qPCR assay was able to detect the bacteria in all the dilutions used. Introduction This study evaluated the effect of the polymer polyvinylalcohol-carbazate (PVAC) on the bacteria Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Pseudomonas aeruginosa. PVAC is a polymer with a carbazate moiety that neutralizes free aldehydes and has shown great promise in stabilizing erythrocytes during long term storage. It has also been shown to reduce intraperitoneal adhesions after trauma. For this study, two Gram positive and two Gram negative bacteria strains were used with PVAC to evaluate its effect. Materials and methods PVAC was obtained from the research team at Ångström Laboratory, Uppsala. The bacteria were obtained from Clinical Microbiology and Hospital Hygiene, Academic Hospital, Uppsala. The methods used were spectrophotometric assessment of bacteria growth, use of FITC-conjugated PVAC to study adherence to bacteria, use of FITC-antibodies to study PVAC’s effect on bacterial adherence to erythrocytes and a qPCR for quantification of E. coli. Results and discussion PVAC displayed a clear effect of inhibition of bacteria growth in the study as shown by use of spectrophotometric assessment. Trials with FITC-PVAC showed that the polymer adheres directly to the bacteria, displaying a possible function of its inhibitory properties. The qPCR assay was able to detect the bacteria in all the dilutions used.

A fosfolipase A2 (PLA2) é considerada uma enzima chave no metabolismo de fosfolípides, principais constituintes das membranas celulares. Alterações da atividade da PLA2 têm sido descritas no cérebro e sangue (soro, plasma e plaquetas) de pacientes com diversas doenças neuropsiquiátricas e também em matrizes biológicas como tecido cerebral de ratos e cultura de células neuronais. A inibição da atividade da PLA2 em cultura primárias de neurônios corticais de rato resultou em neurotoxicidade, o que demonstra o papel da PLA2 em processos de sobrevivência e desenvolvimento neuronal. Neste estudo foi padronizado um ensaio radioenzimático para caracterização dos três principais subtipos da PLA2 em cultura primária de neurônios: PLA2 secretória dependente de cálcio (sPLA2), PLA2 citosólica dependente de cálcio (cPLA2) e PLA2 intracelular independente de cálcio (iPLA2). Para isso foram testadas variáveis críticas para a reação enzimática e com os resultados obtidos houve um aprimoramento do método empregado. Foi encontrada ainda, uma predominância do subtipo iPLA2 (71%) nas culturas de neurônios. Dessa forma, apresentamos um modelo in vitro para determinação da atividade dos subtipos de PLA2 que pode ser considerado uma ferramenta para compreensão dos mecanismos envolvidos nas doenças neuropsiquiátricas, nas quais a PLA2 encontra-se alterada. Além disso, a partir de modelos laboratoriais baseados em estudos com culturas de células, poderão ser evidenciados os efeitos de diversas substâncias químicas novas ou de uso tradicional, como drogas de interesse psiquiátrico, sobre os neurônios. / The phospholipase (PLA2) is considered a key enzyme in the metabolism of phospholipids, which are the main constitutes of cellular membranes. Alterations in PLA2 activity have been reported in the brain and blood cells of psychiatric patients and also in biological matrixes like rat brain tissues and cultures of neuron cells. Inhibition of PLA2 activity in primary cultures of rat neurons resulted in neurotoxicity, which demonstrates the role of PLA2 in survival processes and neuronal development. In this study, a radioenzymatic assay was standardized to detect the activity of the three main groups of PLA2, which are the calcium dependent secretory PLA2 (sPLA2), the cytosolic calcium dependent PLA2 (cPLA2) and the intracellular calcium independent PLA2 (iPLA2), in the culture of neurons. Critical variables for the enzymatic assay were tested and from the results the method used was modified. Our findings demonstrate that there is a predominance of iPLA2 subtype (71%) in cultures of rat neurons. So therefore we present an in vitro model which aims to determine the main activity of PLA2 subtypes and can be considered an investigative tool for comprehending the mechanisms involved in neuropsychiatric disorders that show alterations in PLA2 activity. Furthermore, the effects of new chemical and traditional substances, such as the drugs used in psychiatric treatments, can be evidenced in the neurons by the use of laboratorial models based on studies of neuron cultures.

O melanoma cutâneo maligno é uma lesão neoplásica originada nos melanócitos epidérmicos, sendo altamente invasiva e agressiva, com elevada taxa de mortalidade, cuja incidência vem aumentando nos últimos anos. O tratamento do melanoma é cirúrgico e os pacientes com metástase podem receber quimioterapia com cisplatina que ao formarem adutos com o DNA alteram o processo de replicação da célula cancerosa. Sugere-se que os sistemas de reparo do DNA tenham um papel importante na etiologia do melanoma (reparo deficiente) e no tratamento do mesmo (eficiente eliminação dos adutos). A identificação prévia da resposta dos pacientes com melanoma ao tratamento com cisplatina pode ser um indicador biológico importante na clínica oncológica. O presente trabalho teve como objetivo, a partir de linfócitos de sangue periférico de pacientes com melanoma e de controles, avaliar o dano no DNA antes e após a adição, in vitro, de cisplatina (10?M, 100?M e 250?M), além de estimar a capacidade de reparo do DNA, após a retirada da droga (1h, 2,5h e 5h). Foram utilizados os testes do micronúcleo (MN - dano basal) e do Cometa (dano basal, ação da cisplatina e reparo do DNA). A análise citogenética foi possível em 20 pacientes com melanoma (10 homens e 10 mulheres, média de 50,6 ± 5,9 anos) e 19 controles (9 homens e 10 mulheres, média de 49,9 ± 5,5 anos) que também responderam a um questionário sobre hábitos e tipos de exposição a fatores de risco ao melanoma. A frequência do dano basal pelo teste do MN e do Cometa em linfócitos de pacientes (MN = 1,2 ± 1,2 e Cometa = 59,3 ± 62,5) foi praticamente o dobro da observada nos controles (MN = 0,6 ± 1,0 e Cometa = 35,3 ± 18,6) embora a diferença entre os grupos, em ambos os testes, não tenha sido considerada estatisticamente significante (p=0,23 e p=0,85, respectivamente). O tratamento in vitro com cisplatina, em comparação com o dano basal, aumentou a frequência de Cometas nas três concentrações estudadas (10?M, 100?M e 250?M) tanto para os pacientes (65,50 ± 50,06, 72,74 ± 50,89 e 77,26 ± 44,16) quanto para os controles (66,53 ± 49,85, 66,53 ± 26,33 e 81,74 ± 43,12) diferença esta considerada significante somente para o grupo controle, nas três concentrações avaliadas (p=0,0175, p=0,0002, e p=0,0002, respectivamente). Quanto aos diferentes tempos de reparo (1h, 2,5h e 5h), após a retirada de cisplatina nas diferentes concentrações estudadas, verificou-se aumento na frequência média de Cometas tanto para os pacientes com melanoma (93,88 ± 33,7, 101,75 ± 35,7 e 99,31 ± 32,30) quanto para os controles (92,45 ± 38,4, 100,82± 38,8 e 100,81± 31,7), diferença que foi estatisticamente significante quando comparada ao dano basal observado nos pacientes (p<0,001) e nos controles (p<0,001). Resultados semelhantes foram observados quando comparados em conjunto os escores dos tempos de reparo com o escore obtido após tratamento com cisplatina nos pacientes (71,09 ± 48,2; p<=0,005) e nos controles (71,59 ± 40,5; p<=0,005). Os resultados obtidos parecem indicar um padrão de resposta semelhante em relação à cisplatina e ao reparo do DNA nos dois grupos de indivíduos avaliados. O período de incubação das células, após a retirada da cisplatina, bem como o número de indivíduos avaliados podem ter influenciado nos resultados obtidos. Por outro lado, a resposta observada nos linfócitos in vitro, pode não ser representativa do efeito in vivo da célula tumoral. Entretanto, a identificação de marcadores de resposta a tratamentos com quimioterápicos, a partir de linfócitos de sangue periférico pode ser uma estratégia de pesquisa importante na prática clínica, inclusive para o melanoma. / Cutaneous melanoma is a malignant tumor originated from epidermal melanocytes, highly invasive and aggressive, with high mortality, and incidence that has been increasing over the years. The treatment for melanoma is surgery and patients with metastasis may receive chemotherapy with cisplatin, that results in DNA adducts that alters the replication process in cancer cells. It is suggested that the DNA repair systems have an important role in the etiology of melanoma (risk due to deficient repair) and treatment efficiency (removal of DNA adducts can decrease the treatment results). The prior identification of the response of melanoma patients to treatment with cisplatin may be an important biological marker in clinical oncology. The aim of this study was to assess, in peripheral blood lymphocytes from melanoma patients and controls, the DNA damage before and after the addition of cisplatin (10?M, 100?M and 250?M), in vitro, and estimate the capacity of DNA repair after drug removal (1h, 2.5h and 5h). The micronucleus test (MN - basal DNA damage) and the Comet assay (basal DNA damage, action of cisplatin and DNA repair) were used for the evaluation. Cytogenetic analysis was performed in 20 melanoma patients (10 men and 10 women, average age 50.6 ± 5.9 years old) and 19 controls (9 men and 10 women, average age 49.9 ± 5.5 years old) who also answered a questionnaire on habits and types of exposure to risk factors for melanoma. The frequency of basal DNA damage by the MN test and the Comet assay in lymphocytes from patients (MN = 1.2 ± 1.2 and Comet = 59.3 ± 62.5) was nearly twice the observed in controls (MN = 0, 6 ± 1.0 and Comet = 35.3 ± 18.6), although the difference between the groups in both tests was not considered statistically significant (p = 0.23 and p = 0.85, respectively). The in vitro treatment with cisplatin, compared with the basal DNA damage, increased the frequency of Comets in the three studied concentrations (10?M, 100?M and 250?M) for patients (65.50 ± 50.06, 72.74 ± 50.89 and 77.26 ± 44.16) and for the controls (66.53 ± 49.85, 66.53 ± 26.33 and 81.74 ± 43.12) and the difference was statistically significant only for the control group, for all cisplatin concentrations (p = 0.0175, p = 0.0002 and p = 0.0002, respectively). Considering the different repair times (1h, 2.5h and 5h), after removal of cisplatin at different concentrations, there was an increase in the mean frequency of Comets for both melanoma patients (93.88 ± 33.7, 101.75 ± 35.7 and 99.31 ± 32.30) and for the controls (92.45 ± 38.4, 100.82 ± 38.8 and 100.81 ± 31.7), and the difference was statistically significant when the repair Comet score was compared to the basal DNA damage observed in patients (p <0.001) and controls (p <0.001). Similar results were observed when the Comet scores of repair times were compared to the Comet scores obtained after treatment with cisplatin in patients (71.09 ± 48.2, p <= 0.005) and controls (71.59 ± 40.5, p <= 0.005). The results seem to indicate a similar pattern of response to cisplatin and DNA repair in both groups of subjects evaluated. The period of incubation of the cells after cisplatin removal and the number of individuals studied may have influenced the results. The lymphocytes\' response, in vitro, to cisplatin may not be representative of the in vivo effect of tumor cell. However, the identification of markers of response to treatment with chemotherapy from peripheral blood lymphocytes may be an important research strategy in clinical practice, including melanoma.

O crescimento cada vez maior da industrialização e a existência de um mercado globalizado vêm exigindo dos produtores rurais à utilização de modernas tecnologias ligadas à produção animal. O baixo custo de produção e o aumento da qualidade do produto final gerado têm sido a grande meta dos pecuaristas e centros de pesquisa voltados à agropecuária. Devido à necessidade de aumento na produção, propriedades agropecuárias têm recorrido ao uso de todo e qualquer recurso disponível que possa promover melhorias na atividade produtiva.O uso indiscriminado dos antimicrobianos com a intenção de aumentar a produção animal pode resultar em concentrações residuais nos produtos como carne, ovos e leite acima das doses aceitáveis para o consumo humano. Inicialmente, os antibióticos eram usados como medida terapêutica, mas com o avanço do conhecimento e desenvolvimento de novos compostos, passaram a ser utilizados também como medida preventiva e como promotores do crescimento.O que se deve questionar não é a presença destes resíduos, mas sim o tipo e as concentrações dos mesmos. De fato, as modernas tecnologias analíticas têm permitido a detecção de partes por bilhão de substâncias químicas, componentes ou metabólitos de medicamentos de uso veterinário em alimentos e, nestas quantidades, dificilmente elas representariam perigo à saúde dos consumidores. Portanto, há necessidade de se estabelecer metodologias analíticas mais eficientes que possam auxiliar os órgãos de fiscalização da agricultura no controle do uso desses antimicrobianos na produção animal. Assim como auxiliar no controle de qualidade, principalmente em indústrias exportadoras que almejam expansão de mercado, onde essa prática é quase uma imposição no contexto do comércio internacional de produtos pecuários \"in natura\" e processados. Devido a essas necessidades, o objetivo do presente foi padronizar e desenvolver reagentes imunoenzimáticos para a pesquisa da ciprofloxacina em produtos de origem animal. Os resultados obtidos no desenvolvimento desses imunoreagentes foram positivos quando correlacionado (r2 = 0,9588) com o kit referência RIDASCREEN® Enro/Cipro da R-Biopharm. Diante disso, é possível concluir que o Brasil possui infra-estrutura adequada para padronizar esses testes rápidos, evitando com isso um grande gasto na importação desses kits / The growth each time higher of industrialization and the existence of a global market forces the rural producers to use modern technologies related to animal production. The low production cost and the increasing of obtained final product quality have been the great aim of cattle farmers and cattle farming research centers. Due to the necessity of increasing the production, rural properties have required the use of any available source able to promote better productive activities. The indiscriminated antibiotics use aiming to increase animal production may result in residual concentrations found in products such as meat, eggs and milk over acceptable doses to the human consumption. Firstly, antibiotics were used as therapeutic prescriptions although the advances on knowledge and development of new compounds were also used as a preventive way and as growth promoters. What must be questionable its not the presence of these residuals but surely what kind of residual and their concentrations. In fact, the modern analytic technologies make possible the detection of parts per billions (ppb) of chemical substances, compounds or medicine metabolites of veterinary use in food and in these quantities, hardly they would be dangerous to the consumer health. However, it\'s necessary to establish more efficient analytic methodologies to help on agriculture supervising organs in the control of these antibiotics use in the animal production. Thus, how to help in the quality control, mainly in industries that export to get the market expansion, where this activity is almost an imposition at the international trade context of farming products \"in natura\" and industrialized ones. Due to these necessities, the goal of our present work was to standard and develop immunoenzymatics reagents to the ciprofloxacin researching from animal products. The results obtained on development of these immunoreagents were positive when correlated (r2= 0,9588) to the kit RIPASCREEN® Enro/Cipro from R-Biopharm reference. At the light of these knowledge, it?s possible to conclude that Brazil has adequate proper-structure to standardize these quick tests, to avoid in this way a high cost to import these kits.

O guajiru (Chrysobalanus icaco L.) é um fruto rico em antocianinas, as quais exercem vários efeitos benéficos à saúde. Embora as folhas do guajiru sejam utilizadas na medicina popular como hipoglicemiante e antioxidante, os efeitos do fruto na saúde permanecem inexplorados. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do fruto do guajiruzeiro sobre danos ao DNA e estresse oxidativo in vivo e inflamação in vitro e in vivo. Ratos machos Wistar (4-5 semanas, 110 g) foram divididos em oito grupos e tratados por 14 dias com água ou fruto do guajiruzeiro liofilizado (100, 200 ou 400 mg/kg p.c.) por gavagem. No 14º dia, os animais receberam solução fisiológica ou DXR (15 mg/kg p.c. i.p.) e foram eutanasiados após 24 horas. A genotoxicidade e antigenotoxicidade foram avaliadas pelo ensaio do cometa em sangue periférico, fígado, rins e coração. A mutagenicidade e antimutagenicidade foram investigadas pelo teste do micronúcleo em medula óssea e sangue periférico. O burst oxidativo foi avaliado em neutrófilos do sangue periférico. Parâmetros de estresse oxidativo envolveram: concentração de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, razão glutationa reduzida e oxidada e atividade da catalase em fígado, rins e coração. As expressões de genes de dano/reparo de DNA Gadd45a (growth arrest and DNA damage-inducible alpha), Parp1 (Poly(ADP-ribose) polymerase 1) e Xrcc2 (X-Ray Repair complementing defective repair in Chinese hamster cells 2) e dos marcadores pró-inflamatórios Il-1? (interleukin 1 beta), Il-6 (interleukin 6), Nf-kb (nuclear factor kappa B) e Tnf-? (tumor necrosis factor alpha) foram realizadas por PCR quantitativo em tempo real. Células de cólon humano CCD-18Co (fibroblastos) e HT-29 (adenocarcinoma) foram tratadas com antocianinas do guajiru (1,0 a 20,0 mg/L equivalentes de ácido gálico - GAE) e as expressões de IL-1?, IL-6, NF-kB e TNF-? analizadas a nível de RNA mensageiro e proteína. TNF-? foi utilizado para induzir inflamação em células CCD- 18Co. Os polifenois do fruto do guajiruzeiro foram quantificados/caracterizados por métodos cromatográficos e espectrométricos. As concentrações de 19 elementos químicos foram determinadas por plasma indutivamente acoplado a espectrometria de massas. Delfinidina, cianidina, petunidina e peonidina foram as antocianinas majoritárias encontradas no fruto. Concentrações significantes de polifenois, magnésio e selênio foram encontradas nesse fruto. O fruto do guajiruzeiro exibiu atividade antioxidante in vivo em neutrófilos, antigenotoxicidade em sangue periférico e antimutagenicidade em sangue periférico e medula óssea. O guajiru diminuiu os danos ao DNA no fígado, rins e coração. O fruto também diminuiu as expressões de Gadd45a, Il-1?, e Tnf-? nos tecidos. A proliferação celular foi suprimida em células HT-29, acompanhado por aumento na produção de ROS e diminuição nas expressões de TNF-?, IL-1?, IL-6 e NF-kB. Não foi observado efeito citotóxico das antocianinas em células CCD-18Co. As expressões das proteínas IL- 1?, IL-6 e TNF-? foram reduzidas em células CCD-18Co tratadas com TNF-? e com as antocianinas. Os resultados deste trabalho demonstram que os fitoquímicos e elementos químicos no fruto do guajiruzeiro possuem efeitos antigenotóxico, antimutagênico, antioxidante e anti-inflamatório e encorajam a realização de outros ensaios in vivo e estudos clínicos com esse fruto subutilizado. / Guajiru (Chrysobalanus icaco L.) is a fruit rich in anthocyanins, which exert several beneficial effects on health. Although guajiru leaves are used in folk medicine as hypoglycemic and antioxidant, the fruit effects on health remain unknown. The aim of this study was to evaluate the effects of guajiru fruit against in vivo DNA damage and oxidative stress and in vivo/in vitro inflammation. Male Wistar rats (4-5 weeks old, 110 g) were divided into eight groups and treated for 14 days with water or lyophilized guajiru fruit (100, 200 or 400 mg/kg b.w.) by gavage. On the 14th day, animals received physiologic solution or DXR (15 mg/kg b.w. i.p.) and were euthanized after 24 hours. Genotoxicity and antigenotoxicity were evaluated by comet assay in peripheral blood, liver, kidney, and heart. Mutagenicity and antimutagenicity of guajiru fruit were investigated by micronucleus test in peripheral blood and bone marrow. The oxidative burst was measured in peripheral blood neutrophils. Oxidative stress parameters involved the concentration of thiobarbituric acid reactive substances, reduced/oxidized glutathione ratio, and catalase activity in liver, kidney and heart. The expressions of DNA damage/repair genes Gadd45a (growth arrest and DNA damage-inducible alpha), Parp1 (Poly(ADP-ribose) polymerase 1), and Xrcc2 (X-Ray Repair complementing defective repair in Chinese hamster cells 2) and pro-inflammatory markers Il-1 ? (interleukin 1 beta), Il-6 (interleukin 6), Nf-kb (nuclear factor kappa B), and Tnf-? (tumor necrosis factor alpha) were evaluated by real-time quantitative PCR. Human colon cell lines CCD- 18Co (fibroblasts), and HT-29 (adenocarcinoma) were treated with guajiru anthocyanins (1.0 - 20.0 mg/L gallic acid equivalents - GAE) and the expressions of IL-1 ?, IL-6, NF-kB and TNF-? were analyzed at mRNA and protein levels. TNF-? was used to induce inflammation in CCD-18Co cells. Guajiru fruit phytochemicals were quantified and characterized by chromatographic and spectrometric methods. The concentrations of 19 chemical elements were determined by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS). Delphinidin, cyanidin, petunidin and peonidin were the major anthocyanins in this fruit. Significant amounts of phytochemicals, magnesium, and selenium were found in this fruit. Guajiru fruit displayed in vivo antioxidant activity in neutrophils, antigenotoxicity in peripheral blood and antimutagenicity in bone marrow and peripheral blood. Guajiru fruit decreased DNA damage in liver, kidney, and heart. This fruit decreased the expression of Gadd45a, Il-1 ?, and Tnf-?, in tissues. Cell proliferation was suppressed in HT-29 cells, and this was accompanied by increased intracellular ROS production as well as decreased TNF-?, IL-1 ?, IL-6, and NF-kB expressions. There was no cytotoxic effect of guajiru fruit anthocyanins in CCD-18Co cells. IL-1 ?, IL-6, and TNF-? protein expressions were reduced in TNF-?-treated CCD-18Co cells by guajiru fruit anthocyanins. The findings from this investigation demonstrated that phytochemicals and chemical elements in guajiru fruit possess antigenotoxic, antimutagenic, antioxidant and antiinflammatory effects and encourage other in vivo and clinical studies with this underutilized fruit.

Gastrointestinal (GI) alpha-synuclein (ASN) detection may represent a clinically useful biomarker of Parkinson's disease (PD), but this has been challenged by conflicting results of recent studies employing different immunohistochemical (IHC) methods and reporting diverse morphological patterns with variable biological interpretation. To increase sensitivity and specificity, we applied three different techniques to detect different possible conformations of ASN in GI tissue derived from biopsies of the GI tract, which were obtained from a longitudinally followed, clinically well-characterized cohort of PD subjects and healthy controls (HC) (Oxford Discovery study). With IHC, we used antibodies reactive for total (T-ASN-Abs), phosphorylated (P-ASN-Abs) and oligomeric (O-ASN-Abs) ASN; with the ASN Proximity Ligation Assay (AS-PLA), we targeted oligomeric ASN species specifically; finally, with the Paraffin-Embedded Tissue Blot (PET-Blot) we aimed to detect fibrillary conformations of ASN specifically. Optimisation and validation of the PET-Blot and PLA techniques was carried out with studies on brain tissue from subjects with ASN pathology, and these experiments were used to gain insight into morphology and distribution of different conformational variants of ASN in the brain of subjects with Lewy pathology. We specified all the detected morphological staining patterns with each technique interpreting them as pathologic or non-specific. Correlation to clinical symptoms was assessed to investigate the potential predictive or diagnostic value of specific staining patterns as biomarkers. A total of 163 GI tissue blocks were collected from 51 PD patients (113 blocks) and 21 healthy controls (50 blocks). In 31 PD patients, GI biopsies had been taken before PD diagnosis (Prodromal PD group); while in 20 PD patients biopsies were obtained after PD diagnosis (Manifest PD group). The majority of these tissues blocks were from large intestine (62%), followed by small intestine (21%), stomach (10%) and oesophagus (7%). With IHC, four ASN staining patterns were detected in GI tissue (Neuritic, Ganglionic, Epithelial, and Cellular), while two distinct staining patterns were detected with AS-PLA (cellular and diffuse signal) and with AS-PET-Blot (ASN-localised and peri-crypt signal). The level of agreement between different techniques was generally low, and no single technique or staining pattern was able to reliably distinguish PD patients (Prodromal or Manifest) from HC. Overall, our study suggests that even specific detection of ASN conformational variants currently considered pathologic was not adequate for the prediction of PD. Future studies with these or other novel techniques focusing on the upper part of the GI tract could overcome current limitations in sensitivity and specificity.