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Efeitos da laserterapia de baixa intensidade sobre marcadores de estresse oxidativo do músculo gastrocnêmio de ratos diabéticos submetidos a exercício de alta intensidade / Effects of low level laser on oxidative stress markers of the gastrocnemius muscle of diabetic rats subjects to high intensity exerciseFrigero, Marcelo 14 December 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-12-14 / Purpose: The aim of the present study was to determine whether low-level laser therapy (LLLT), when used in gastrocnemius muscle of diabetic rats subjected to high-intensity exercise to fatigue, Interferes with the expression of stress markers oxidative.
Materials and Methods: The total of 24 male Wistar rats (Norvergicos Albinos). Were used for this study: 24 diabetics rats. The animals were randomly divided into three groups designated as follows: Group Diabetic Fatigue - Did not receive irradiation to LLLT and performed the fatigue protocol; Group Diabetic Laser Fatigue - received irradiation to LLLT and performed the fatigue protocol and Group Non-Diabetic Control - Did not receive irradiation to LLLT and performed the fatigue protocol. Diabetes was induced in rats by streptozotocin (50 mg / kg, ip) was subsequently performed measure of blood lactate levels, LLLT laser was applied at 808 nm and 4 joules of energy to the Indicated groups and the animals were exercised groups submitted to treadmill running with speed and gradual slope until exhaustion noted by VO2máx and lactate level. The rats were euthanized, and muscle tissue and presented the analysis of SOD markers; CAT; GPX and TBARS. Results: VO20.75máx values in the Group Diabetic Fatigue were significantly higher from those in the control group (p <0.01) and the Group Diabetic Laser Fatigue (p <0.05). The results indicate that the activities of CAT, SOD, and GPx were higher and statistically significant (p<0.05) in the Group Diabetic Laser Fatigue than those in the diabetic groups. Outcomes for LBI group were similar than control group (p>0.05), statistically significant activities of antioxidant enzymes compared to the Group Diabetic Fatigue. The LBI group could also mitigate the concentration of TBARS (p> 0.05). Conclusion: LBI imay reduce oxidative stress, as well as increase VO20.75máx. Furthermore, our outcomes indicate that LBI can be an alternative to maintain physical fitness in conditions where subjects aren’t able to perform exercise. Which needs to be tested in further clinical studies. / Objetivo: O objetivo do presente estudo foi determinar se a terapia Laser de baixa intensidade (LBI), quando usado no músculo gastrocnêmio de ratos diabéticos, submetidos a exercícios de alta intensidade, até a fadiga, interfere com a expressão de marcadores de estresse oxidativo. Materiais e Métodos: Para realização do trabalho, a amostra foi composta por 24 ratos machos (Norvergicos Albinus), de linhagem Wistar. Os animais foram divididos aleatoriamente em três grupos designados da seguinte forma: Grupo Diabético Fadiga - Não recebeu irradiação para LBI e realizou o protocolo de fadiga; Grupo Diabético Fadiga Laser - recebeu irradiação com LBI e realizou o protocolo de fadiga e o Grupo Controle Não Diabético – não recebeu irradiação e realizou protocoloco de fadiga. A Diabetes foi induzida por estreptozotocina (STZ) (50 mg / kg, ip), e confirmado através da medida de glicose no sangue. Foi utilizado o Laser de 808 nm e energia de 4J, para os grupo indicado e os animais foram submetidos ao exercicio de corrida em esteira rolante com velocidade e inclinação gradual até a fadiga, observado através do VO2máx e nível de lactato. Os ratos foram sacrificados, e o tecido muscular retirado para a análise dos marcadores de SOD; CAT; GPX e TBARS. Resultados: Os valores VO20.75máx no Grupo Diabético Fadiga foram significativamente mais elevados do que aqueles no Grupo Controle Não Diabético (p <0,01) e do Grupo Diabético Fadiga Laser (p <0,05). Os resultados indicam que as atividades de CAT, SOD, e GPx foram maiores e estatisticamente significativas (p <0,05) no do que as dos Grupo Diabético Fadiga. Resultados para o Grupo Diabético Fadiga Laser foram semelhantes ao Grupo Controle Não Diabético e estatisticamente (p> 0,05) significativas para as atividades de enzimas antioxidantes em comparação com o Grupo Diabético Fadiga. No Grupo Diabético Fadiga Laser poderia também minimizar a concentração de TBARS (p> 0,05). Conclusão: LBI pode reduzir o estresse oxidativo, bem como aumentar o VO20.75máx. Além disso, nossos resultados indicam que a LBI pode ser uma alternativa para melhoria das condições musculares em relação a fadiga. Novos estudos clínicos devem ser realizados para verificar a eficácia da técnica.
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Papel da fototerapia e de um programa de exercício físico na fibromialgia com disfunção temporomandibular: ensaio clínico controlado, randomizado e duplo-cego / Role of phototherapy and a physical exercise program in fibromyalgia, temporomandibular dysfunction: controlled clinical trial, randomized double-blindSilva, Mariana Moreira da 29 June 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-06-29 / Introduction: Fibromyalgia (FM) is a syndrome characterized by chronic widespread pain, with prevalence in women. An important issue is that many patients with FM also have the diagnosis of temporomandibular disorders (TMD) and the coexistence of these conditions generates a clinical result of high complexity. Exercise and phototherapy (low level laser therapy / LED) are two areas used for the treatment of chronic pain and may be promising in the rehabilitation of these comorbidities. In a protocol (1) the objective was to verify if the phototherapy and exercise program in a single application can increase or decrease the sensitivity of pain in patients with FM associated with TMD. Objective of the protocol two (2) was to evaluate the potential of physical exercise program and phototherapy on condition of chronic pain in women with FM associated with TMD. Methods / Study Design: Randomized clinical trial, double-blind and controlled. Protocol 1 was conducted involving 80 women aged ≥ 35 years old with a diagnosis of FM TMD. Patients were randomly allocated to one of four groups: CON (have not undergone any operation); PHO group (intervention with phototherapy); EXT group (intervention with exercise); PHO + EXT group (more intervention exercise phototherapy). One session of the treatments and the revaluation was carried out was after thirty (30) minutes of application, with analysis of algometry. In Protocol 2 used the same methodology to protocol 1, but the revaluation was after ten (10) weeks of treatment, with addition of other evaluative tools algometry. Statistical analysis was performed using Student's t-test, one-tailed and paired and was held Gaussian distribution: Shapiro-Wilk and Kruskal Wallis test (Dunnes post-test), and even the use of the Wilcoxon test and the significance of statistical analysis 0.05 for all tests. The study protocol is registered with the World Health Organization under protocol number NCT02279225. Results: Groups with active intervention, had a good response on the group without intervention and even the combination of therapeutic resources was more effective in the two periods evaluated, there was a significant improvement from the point corresponding to DTM in the intervention groups. Discussion: This is the first randomized controlled trial to evaluate the role of phototherapy, a physical exercise program and the combination of these interventions for pain in fibromyalgia patients with TMD in assessment baseline and after longitudinal treatment. The results provide valuable clinical evidence for objective assessment of the potential benefits and risks of the procedures. Conclusion: The therapy associated with specific exercise program improves the painful condition FM patient with TMD. Perspectives: Check the role of phototherapy, the exercise program and these therapies in combination in the hormone changes that may be related to quality of life of patients. / Introdução: A Fibromialgia (FM) é uma síndrome caracterizada pela dor crônica generalizada, com prevalência em mulheres. Uma questão importante é que vários pacientes com FM também apresentam o diagnóstico de disfunção temporomandibular (DTM) e a coexistência dessas patologias gera um resultado clínico de alta complexidade. O exercício físico e a fototerapia (laserterapia de baixa potência/ diodo emissor de luz) são duas áreas utilizadas para o tratamento da dor crônica, podendo ser promissores na reabilitação dessas comorbidades. No protocolo um (1) o objetivo foi verificar se a fototerapia e o programa de exercício físico em uma única aplicação pode aumentar ou diminuir a sensibilidade da dor no paciente com FM associado a DTM. Objetivo do protocolo dois (2) foi avaliar o potencial do programa de exercício físico e da fototerapia na condição de dor crônica em mulheres com FM associado a DTM. Métodos / Desenho do estudo: Ensaio clínico randomizado, duplo-cego e controlado. O protocolo 1 foi realizado envolvendo 80 mulheres com ≥ 35 anos de idade com diagnóstico de FM com DTM. Os pacientes foram alocados aleatoriamente para um dos quatro grupos: Grupo CON (não foram submetidas a qualquer intervenção); Grupo PHO (intervenção com a fototerapia); Grupo EXT (intervenção com exercícios físicos); Grupo PHO + EXT (fototerapia mais intervenção do exercício). Foi realizado uma única sessão dos tratamentos e a reavaliação foi após trinta (30) minutos da aplicação, com analise da algometria. No Protocolo 2 usou a mesma metodologia que o protocolo 1, mas as reavaliações foram após dez (10) semanas de tratamento, com outras ferramentas avaliativas além da algometria. Para análise estatística foi utilizado o teste t-Student, unicaudal e pareado e foi realizada a distribuição Gaussiana: Shapiro-Wilk e teste Kruskall Wallis (pós-teste de Dunnes), e ainda a utilização do teste Wilcoxon, sendo a analise estatística de significância 0,05 para todos os testes. O protocolo deste estudo está registrado com a Organização Mundial de Saúde sob protocolo número NCT02279225. Resultados: Os grupos com intervenção ativa, tiveram uma boa resposta sobre o grupo sem intervenção e ainda a combinação de recursos terapêuticos mostrou ser mais eficaz nos dois momentos avaliados, houve uma melhora significante quanto ao ponto correspondente a DTM nos grupos de intervenção. Discussão: Este é o primeiro estudo controlado randomizado avaliando o papel da fototerapia, de um programa de exercício físico e a combinação dessas intervenções para a dor em pacientes fibromiálgicos com DTM, em avaliação em linha de base e após tratamento longitudinal. Os resultados oferecem evidências clínicas valiosas para avaliação objetiva dos potenciais benefícios e riscos dos procedimentos. Conclusão: A fototerapia associada ao programa de exercício físico específico melhora a condição dolorosa do paciente de FM com DTM. Perspectivas: Verificar o papel da fototerapia, do programa de exercícios e essas terapias de forma combinada na alteração de hormônios que podem estar relacionados a qualidade de vida destes pacientes.
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Migração de células precursoras miogênicas sob a influência de sobrenadantes de macrófagos irradiados com laser de baixa potência / Migration of myogenic precursor cells under the influence of macrophage supernatants irradiated with low level laserBatista, Érika Cássia Barroso 16 December 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-12-16 / The activation, proliferation and migration of myogenic precursor cells are essential for muscle regeneration after injury, orchestrated by cells and local components, mainly inflammatory cells, especially macrophages. These are identified as a target for the treatment of muscle injuries. Laser therapy has shown good results in treatment of injuries and the ability to accelerate the migration of various cell types, but there are no reports on their effect on macrophage products influencing the migration of myogenic precursor cells. The aim of the study was to evaluate the effect of low level laser (LLL) on migration of myoblasts cultured with macrophage culture supernatants of different phenotypes. Therefore, C2C12 cells were cultured with supernatants from cultures of macrophages (J774) treated with LPS and IFN-γ (for the activation phenotype M1), IL-4 (M2a phenotype) and IL-10 and dexamethasone (M2c phenotype) and LLL irradiated at wavelengths of 660nm and 780nm (70mW; 17,5J / cm2; 14.3 s; 0,8J). Supernatants from macrophage cultures were harvested 24h after irradiation and transferred to myoblast cultures. Migration was assessed using the scratch assay and the results statistically analyzed. Myoblasts cultured with phenotype macrophage supernatants M2c and irradiated with LBP (660nm) showed higher migration capability that cultured with supernatants of M2C phenotype of macrophages after 12 hours of cultivation. There was no difference between the other groups. The LLL was able to modulate the migration of myoblasts C2C12 when M2c supernatants of macrophage phenotype / A ativação, proliferação e migração das células precursoras miogênicas são essenciais na regeneração muscular após lesões, orquestrados pelas células e componentes locais, principalmente pelas células inflamatórias, em especial os macrófagos. Estes são apontadas como alvo para o tratamento das lesões musculares. A laserterapia tem demonstrado bons resultados no tratamento destas lesões e na capacidade de acelerar a migração de vários tipos celulares, mas não existem relatos sobre seu efeito nos produtos de macrófagos que influenciam a migração de células precursoras miogênicas. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito do laser de baixa potência (LBP) sobre a migração de mioblastos cultivadas com sobrenadantes de culturas de macrófagos de diferentes fenótipos. Para tanto, as células C2C12 foram cultivadas com sobrenadantes de culturas de macrófagos (J774) tratadas com LPS e IFN- γ (ativação para o fenótipo M1), IL-4 (fenótipo M2a) e IL-10 e dexametasona (fenótipo M2c) e irradiadas com LBP nos comprimentos de onda de 660nm e 780nm (70mW; 17,5J/cm2; 14,3 s; 0,8J). Os sobrenadantes das culturas de macrófagos foram colhidos 24h após as irradiações e transferidos para culturas de mioblastos. A migração foi avaliada por meio do ensaio de ferida e os resultados submetidos à análise estatística. Após 12h de cultivo, os mioblastos cultivados com sobrenadantes de macrófagos de fenótipo M2c e irradiados com LBP (660nm) mostraram maior capacidade de migração que os cultivados com sobrenadantes de macrófagos de fenótipo M2c não irradiados. Não houve diferença entre os demais grupos. O LBP foi capaz de modular a migração de mioblastos C2C12 quando cultivados com sobrenadantes de macrófagos de fenótipo M2c.
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Influência da fumaça de cigarro e da aplicação do laser de baixa potência na remodelação óssea / The effect of cigarette smokimg and low-level laser irradiation on bone regenerationRibeiro, Larissa Nogueira Soares 05 June 2018 (has links)
Introdução: Os efeitos nocivos da fumaça de cigarro (FC) não se limitam apenas ao organismo do indivíduo fumante. A nicotina, devido aos seus efeitos tóxicos, provoca alterações graves no metabolismo ósseo, podendo prejudicar a reparação óssea alveolar. A terapia com laser de baixa potência (LBP) apresenta efeitos anti-inflamatórios e analgésicos além de modular a reparação tecidual, acelerando a cicatrização e melhorando o processo de reparo ósseo. Objetivo: O objetivo do presente estudo in vivo foi avaliar o efeito da irradiação com LBP no processo de remodelação óssea após a extração dentária em ratos submetidos à fumaça de cigarro. Material e Métodos: Um total de 144 ratos Wistar foram distribuídos aleatoriamente nos seguintes grupos: Grupo Controle (n=36) animais com extração dentária (Ext); Grupo Experimental I (n=36) animais que tiveram extração dentária (Ext) e aplicação do LBP nos três primeiros dias (54 J/cm2 por dia); Grupo Experimental II (n=36) animais com extração dentária (Ext) e expostos à fumaça de cigarro (FC). Grupo Experimental III (n=36) animais com Ext + LBP+ FC. Os animais foram sacrificados nos períodos de 3, 7 e 14 dias após o procedimento de extração dentária, sendo que em cada grupo 18 animais foram destinados para análise da expressão gênica (RT-PCR) e 18 animais para exames histológicos. Foram avaliadas: 1) porcentagem de formação óssea no interior do alvéolo, 2) mudanças na expressão gênica de Rank, Rank-l, Opg, Onc; Occ, Opn, Bmp-2 e Bsp. Os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística através do teste ANOVA e o pós-teste de Bonferroni (p<0.05). Resultados: Observou-se que os alvéolos do Grupo Exp I apresentaram processo de reparo mais avançado quando comparados ao Grupo Controle, caracterizado pela formação óssea mais precoce e mais intensa e pela maior expressão dos genes relacionados à remodelação óssea. O Grupo Exp II foi o que teve o pior resultado, mostrando que a fumaça de cigarro interfere negativamente no processo de reparo ósseo. No Grupo Exp III, houve uma melhora na ossificação e na expressão gênica, mostrando que o LBP pode influenciar positivamente a formação óssea. Conclusão: A utilização do LBP acelerou o processo de formação óssea durante as fases iniciais do experimento, embora nos períodos finais não houve diferença no processo de ossificação, e a FC interferiu negativamente no processo de remodelação óssea durante todo o período experimental / Introduction:The harmful effects of cigarette smoke (CS) are not limited only to the body of the smoker. Nicotine, due to its toxic effects, causes serious alterations in the bone metabolism, which may impair alveolar bone repair. Low level laser therapy (LLLT) has anti-inflammatory and analgesic effects beyond modulating tissue repair, accelerating the healing and improving the bone healing process. Objective: The objective of the present in vivo study was to evaluate the effect of LLLT irradiation in the process of bone remodeling after dental extraction in rats submitted to cigarette smoke. Material and Methods: A total of one hundred and forty-four Wistar rats were randomly divided into four groups: Control Group (n = 36) animals with dental extraction (Ext), Experimental Group I (n = 36) animals that had dental extraction (Ext) and application of LLLT in the first three days (54 J / cm2 per day); Experimental Group II (n = 36) animals with dental extraction (Ext) and exposed to cigarette smoke (CS). Experimental Group III (n = 36) animals with Ext + LLLT + CS. The animals were sacrificed at 3, 7 and 14 days after the dental extraction procedure. In each group, 18 animals were used for analysis of gene expression (RT-PCR) and 18 animals for histological examination. We evaluated: 1) percentage of bone formation inside the alveolus, 2) changes in the gene expression of Rank, Rank-l, Opg, Onc; Occ, Opn, Bmp-2 and Bsp. The results were submitted to statistical analysis using the ANOVA test and the Bonferroni post-test (p <0.05). Results: It was observed that the sockets of the Exp Group I presented a more advanced repair process when compared to the Control Group, characterized by the earlier and more intense bone formation and the greater expression of the genes related to the bone remodeling. The Exp Group II was the one that had the worst result, showing that cigarette smoke interferes negatively in the process of bone repair. In the Exp Group III, there was an improvement in ossification and gene expression, showing that LLLT can positively influence bone formation. Conclusion: The use of LLLT accelerated the bone formation process during the initial phases of the experiment, although in the final periods there was no difference in the ossification process, and the CS interfered negatively in the process of bone remodeling throughout all the experimental period
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Avaliação in vivo do potencial regenerativo na Degeneração Walleriana de nervos periféricos - com a utilização de laser de baixa potência e composto polivitamínico 3-NERVE® / Evaluation in potential of live in regenerative Walleriana degeneration peripheral nerve - with laser use low power and compound multivitamin 3-NERVE®Pistarini, Luciana Crepaldi Yazawa 24 June 2015 (has links)
Nas áreas médica e odontológica existem situações clínicas e cirúrgicas que podem ter, como consequência, um dano ao tecido conjuntivo nervoso, chamado de neuropatia. O objetivo deste trabalho é avaliar terapias para tratamento das neuropatias causadas por manipulação do feixe nervoso periférico, minimizando ou eliminando sintomas causados pela lesão. O estudo foi feito em 60 ratos machos Wistar, com a avaliação morfológica da degeneração Walleriana e da regeneração do tecido nervoso no 15º e 30º dia após o trauma. A lesão consistiu na exposição e compressão do nervo isquiático da pata direita do animal, através de três nós consecutivos com fio de sutura e distância entre eles de ~ 2mm. Três tratamentos sobre a lesão foram comparados: o uso do biomaterial 3-NERVE®, a laserterapia de baixa potência e a associação dos dois. Os resultados histológicos revelaram que o biomaterial aumentou o processo inflamatório, mas modulou a degeneração inicial, através do surgimento de células de neoformação, favorecendo a regeneração nervosa no decorrer dos trinta dias. A laserterapia foi um tratamento favorável para a parestesia porque modulou os danos do processo de degeneração inicial e estimulou o reparo do tecido desde os 15 primeiros dias. Ao atingir os 30 dias o tecido se apresentou organizado e com uma quantidade menor de tecido neoformado quando comparado com o uso do biomaterial. A associação das terapias associou as propriedades das duas terapias, pois modulou a inflamação inicial, propiciou o aumento do número de células de neoformação do tecido nervoso e favoreceu a regeneração dos feixes nervosos nas amostras de 15 e 30 dias. Conclui-se que o não tratamento dificulta ou impede a regeneração nervosa, pois qualquer uma das terapias citadas modula os eventos desencadeados pela lesão. A associação do uso da laserterapia com o 3-NERVE® mostrou melhores resultados. / In medical and dental areas are clinical and surgical situations that may have, as a result, damage to the nervous tissue. This is called a neuropathy. The objective is to support therapies for treatment of neuropathies caused by manipulation of the peripheral nervous bundle, minimizing or eliminating symptoms caused by injury. The study was conducted in 60 male Wistar rats by morphological analysis of Wallerian degeneration and regeneration of nerve tissue in the 15th and 30th day after the trauma. The lesion consisted of exposure and sciatic nerve compression of the right paw of the animal through three consecutive nodes with suture and the distance between them of ~ 2mm. Three treatments on the injury were compared: the use of -NERVE® biomaterial, the low level laser therapy and their association. Histological findings revealed in samples 15 and 30 days the biomaterial increased inflammation and degeneration of the initial modulated through the cell neogenesis emergence favored nerve regeneration in the course of 30 days. Laser therapy was a favorable treatment for paresthesia because modulates the damage of the initial degeneration process and stimulates tissue repair since the first 15 days. When reaching the 30 days the tissue was organized and presented with a smaller amount of neoformed tissue when compared with the use of the biomaterial. The combination therapies of the modulated the initial inflammation, led to an increase in the number of cells neogenesis and promoted nerve tissue regeneration of nerve bundles in the samples 15 and 30 days. We conclude that no treatment hinders or prevents nerve regeneration, for any of the therapies mentioned modulate the events triggered by the injury. The association between the use of laser therapy with Nerve® proved with better results.
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Efeito do laser de baixa potência (810 nM) na tendinite induzida por colagenase em tendão calcâneo de ratos. / Effect of the law level lase therapy (810nm) in the induced tendinitis by collagenase in aquiles tendon of rats.Marcos, Rodrigo Labat 16 September 2010 (has links)
Tendinopatias são distúrbios comuns com uma variedade de tratamentos e terapias e a Laserterapia aparece como uma alternativa no tratamento destas doenças. Nós investigamos os efeitos da irradiação laser no modelo de tendinite induzida por colagenase, em tendões calcâneo de ratos, verificando sua ação em importantes marcadores inflamatórios. Métodos: Foram utilizados ratos machos (Wistar) divididos em grupos: Salina e tendinite tratados com Diclofenado de Sódio ou Laser (1J, 3J ou 6J). A tendinite foi induzida por colagenase (100<font face=\"Symbol\">mg/tendão) sobre o tendão calcâneo que foi removido para análises. Foi verificado a expressão de COX-1, 2, TNF-a, TGF-<font face=\"Symbol\">b, IL-10, MMP-3, 9 e 13 (RT-PCR), a produção de PGE2 (ELISA) e a expressão de NT, COX-2 e NK-1 (Western Blotting). Resultados e discussão: A laserterapia (810nm, 100mW, 3 J), utilizada no tratamento da tendinite induzida por colagenase em tendão calcâneo de ratos, foi eficaz na redução de importantes marcadores inflamatórios, tornando-se uma ferramenta promissora para o tratamento de lesões tendíneas. / Tendinopathy is a common disease with a variety of treatments and therapies. Laser therapy appears as a alternative treatment. We research the effects of the laser irradiation in tendinitis model induced by collagenase injection on Achilles tendon rats, verified its action in important inflammatory markers. Methods: The male rats (Wistar) were used and divided in groups: Saline and tendinitis, treated with Sodium diclofenac or Laser (1J, 3J or 6J). The tendinitis was induced by collagenase (100<font face=\"Symbol\">mg/tendon) on the Achilles tendon which was removed for analyzes. The genic expression for COX-1, 2; TNF-a, TGF-<font face=\"Symbol\">b; IL-10; MMP-3, 9, 13 (RT-PCR); PGE2 production (ELISA kits) and NT, COX-2, NK-1 expression (Western Blotting) was measured. Results and discussion: The Laser therapy (810nm, 100mW, 3 J) used in the treatment of the tendinitis induced by collagenase in Achilles tendon in rats, was effective in the reduction of important inflammatory markers, becoming a promising tool for the treatment of tendon diseases.
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Os efeitos da irradiação com laser de baixa potência na regeneração do nervo fibular comum do rato submetido a lesão por esmagamento / The effects of low power laser irradiation on the regeneration of the common fibular nerve in rat submitted to a crush lesion.Andraus, Rodrigo Antonio Carvalho 10 February 2009 (has links)
A regeneração dos nervos periféricos é um processo natural, que demanda um período longo para se completar, havendo algumas evidências de que agentes físicos, inclusive o laser, podem acelerá-lo. O objetivo primordial deste estudo foi analisar a influência da irradiação com o laser de baixa potência (AsGaAL) sobre a regeneração nervosa, num modelo de lesão por esmagamento do nervo fibular comum de ratos. O objetivo secundário foi avaliar a concordância entre os índices funcionais do nervo fibular (PFI) e o dos nervos ciático (SFI) e tibial (TFI), segundo os métodos propostos por dois autores diferentes. Foram utilizados 35 ratos Wistar (130 dias de idade, massa corporal média de 240 gramas), divididos em quatro grupos no total, sendo três grupos de dez animais cada, conforme o procedimento realizado (1: esmagamento, sem tratamento; 2: esmagamento e tratamento simulado; 3: esmagamento e tratamento efetivo) e num grupo de cinco animais intactos, para controle. A lesão por esmagamento do nervo fibular comum foi obtida pela aplicação de uma carga de 5 Kgf por dez minutos, com uma pinça especialmente confeccionada para esse fim. A irradiação com o laser foi iniciada no primeiro dia pós-operatório, empregando um equipamento de laser AsGaAL de baixa potência (potência de 100 mW, comprimento de onda de 830 nm, dose de 140 J/cm2) de emissão contínua, pelo método transcutâneo pontual de contato, e continuada por 21 dias consecutivos. Os resultados foram avaliados pela medida da velocidade de marcha do animal e do índice funcional do fibular (PFI, de peroneal functional index). A massa corporal, a velocidade de marcha e o PFI foram medidos antes da operação e no 21º dia pós-operatório, o PFI foi obtido por meio de um programa de computador específico para esse fim, utilizando duas fórmulas diferentes. Os resultados mostraram que a massa corporal aumentou em todos os grupos, sem diferença estatística entre os períodos. A velocidade de marcha diminuiu, com diferença estatística em todos os grupos. O PFI aumentou em todos os grupos e com as duas fórmulas utilizadas na sua medida, mas no Grupo 3, embora sem diferença estatística nos períodos pré e pós-operatórios, evidenciando que a irradiação com o laser interferiu na regeneração do nervo fibular esmagado. Houve uma concordância moderada entre o PFI e o SFI, maior no período pós-operatório, demonstrando que o SFI pode ser empregado para a avaliação do nervo fibular, o que, entretanto, não é recomendável. Concluímos que a irradiação do laser de baixa potência influenciou na regeneração do nervo fibular comum esmagado de ratos, pela medida do índice funcional do fibular. / Peripheral nerve regeneration is a natural process, which requires a long period to complete, with a few evidences that physical agents including laser, can speed it up. The main objective of this investigation was to analyze the influence of low power laser (AsGaAL) irradiation on nerve regeneration, in a model of crush injury of the common fibular nerve of rats. A secondary objective was to evaluate the concordance between the fibular (PFI) and sciatic (SFI) nerves functional indexes, according to the methods proposed by two different research groups. Thirty-five Wistar rats (130 days of age, 240 g average body mass) were used and divided into four groups in total, be three groups of ten animals each, according to the procedure carried out (1: crush injury, no treatment; 2: crush injury, sham irradiation; 3: crush injury, effective irradiation), and a group of five untouched animals, for normal control. The crush injury was obtained by the application of a 5 kgf load for 10 minutes, using a spring forceps especially built for this purpose. Laser irradiation was started on the first postoperative day and continued for 21 consecutive days, using a commercially available continuous emission equipment (100 mW intensity, 830 nm wave length, 140 J/cm2 dose) and the transcutaneous punctual contact method. The results were appraised for the measure of the speed of the gait of the animal and of the functional index of the fibular (PFI, de peroneal functional index). Body mass, walking speed and the functional indexes were measured before the operation and on the 21st postoperative day, the functional indexes using a specific software especially developed for this purpose and the two different methods mentioned above. The results showed that the body mass increased while speed decreased with time for all groups, but without statistical significance. The PFI increased in all groups according to the two methods of evaluation used and more markedly in Group 3, although without statistical significance, period pre and post-operative. Moderate concordance was showed between PFI and SFI, higher in the post-treatment than in the preoperative evaluation, meaning that, although not recommendable, the SFI can be used to evaluate the fibular nerve. We concludes that low power laser irradiation influence the regeneration of the crush fibular nerve of rats, as measured by the peroneal functional index.
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Avaliação do efeito da radiação laser de baixa potência e do plasma rico em fibrina na reparação óssea em ratos. / The effect of low level laser therapy and fibrin-rich plasma on bone repair in rats.Pallotta, Rodney Capp 26 August 2014 (has links)
O reparo ósseo é regulado por fases: inflamatória, proliferativa e remodelação, sendo importante para a qualidade do osso. Terapias têm sido estudadas para ajudar neste processo, como Plasma Rico em Fibrina (PRF) e terapia a laser (LBP). No entanto os estudos são controversos. O objetivo deste estudo foi analisar o impacto da LBP com ou sem PRF no reparo após o defeito ósseo crítico em tíbia de ratos. Os animais foram divididos em grupos: hígido, defeito sem tratamento, defeito tratado com 3 doses de LBP, PRF sozinho e associado com LBP. A fim de analisar o processo de reparo, a tíbia foi removida após 1,3,7,14,21,30 e 60 dias após o procedimento, sem qualquer tipo de tratamento para análise histológica e bioquímica do curso de temporal. Após determinação do tempo ideal, analisamos os diferentes tratamentos. Os resultados mostram que o tempo de curso do procedimento de defeito ósseo induz um aumento de IL - 1b e de fosfatase alcalina, sem alterações no TNF-a e IL-10 e diminuição de IL-6. Tratamento LBP induziu a expressão de IL10 e inibir IL-1 b, TNF-a, IL-6 e fosfatase alcalina. O tratamento associado reduziu a fosfatase alcalina, TNF-a, IL-6 e aumento de IL-10. Conclui-se que o tratamento combinado não apresentara melhora significativa no reparo ósseo. / The bone repair is regulated by phases: inflammatory, proliferative and remodeling and is important for bone quality. Therapies have been studied to help in this process, as Platelet Rich Fibrin (PRF) and laser therapy (LLLT). However the studies are controversial. The aim of this study was to analyze the impact of LLLT with or without PRF repair after the critical bone defects in tibias. The animals were divided into groups: healthy male without blemish treatment, defect treated with 3 doses of LBP, PRF alone and associated with LLLT. In order to analyze the repair process , the tibia was removed after 1,3,7,14,21,30 and 60 days after the procedure, without any kind of treatment for histological and biochemical analysis of the course of time. After determining the optimal time, we analyze the different treatments. The results show that the time course of the procedure of defect induces an increase of IL - 1b and alkaline phosphatase, without changes in TNF- a and IL-10 and reduced IL-6. LBP treatment induced the expression of IL -10 and inhibiting IL-1 b, TNF- a, IL-6 and alkaline phosphatase. The combined treatment decreased the alkaline phosphatase, TNF- a , IL-6 and increased IL-10. We conclude that combined treatment had not produced significant improvement in bone repair.
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Estudo clínico, bioquímico e histológico do efeito da terapia fotodinâmica na mucosite oral induzida por 5-Fluorouracil em hamsters / Clinical, biochemical and histolólico study about the effect of photodynamic therapy in oral mucositis induced by 5-fluorouracil in hamstersCruz, Érika de Paula da 17 July 2014 (has links)
A mucosite oral (MO) é uma consequência debilitante do tratamento quimioterápico, que pode ser aliviada com o uso de fototerapias. A terapia fotodinâmica (Photodynamic Therapy - PDT), pode ser usada para o tratamento da MO, quando esta se encontra infectada por microrganismos. No entanto, não há estudos que demonstrem se a PDT, quando aplicada sobre lesões em mucosa oral, pode interferir na reparação tecidual. Assim, este trabalho tem o objetivo de induzir a MO, em hamsters, através da confecção de ranhuras em animais que receberam o quimioterápico 5-Fluorouracil (5-FU), e avaliar, através de análises clínicas, bioquímicas e histológica, o efeito da PDT no reparo destas lesões. Os animais foram divididos em dois grupos, controle e experimental. O grupo controle é formado pelo grupo CN, o qual recebeu o veículo da quimioterapia e anestesia. O grupo experimental é formado pelos grupos CQ, o qual recebeu quimioterapia (QT), anestesia e indução da MO; CQC, o qual recebeu QT, anestesia, indução da MO e aplicação do corante azul de metileno (AM) 0,01%; CQL, o qual recebeu QT, anestesia, indução da MO e irradiação com laser de baixa potência (LBP - 660nm, 120J/cm2, 40mW, 4,4J por ponto); e PDT, o qual recebeu QT, anestesia, indução da MO, aplicação do AM 0,01% e irradiação com LBP (mesmo protocolo do grupo CQL). O 5-FU foi aplicado através de injeções intraperitoneais ao que se seguiu a indução da MO pela confecção de ranhuras com o auxílio de uma agulha de ponta fina. O experimento teve duração total de 10 dias sendo que a avaliação da severidade da MO foi realizada diariamente através da utilização das escalas propostas pela Organização Mundial de Saúde (OMS) e por W-Smith modificadas para animais. Os animais foram sacrificados após 5, 7 e 10 dias de experimento e suas mucosas jugais (direita e esquerda) foram removidas para a realização das análises bioquímicas (através da determinação da concentração total de proteína e da avaliação de parâmetros do sistema antioxidante, como a atividade enzimática da Superóxido Dismutase - SOD e da Catalase) e histológica (por microscopia de luz). Após análises estatísticas, os resultados clínicos, bioquímicos e histológico mostraram que a PDT diminuiu a severidade da MO no décimo dia do experimento (p<0,05) e mostrou maior queratinização do epitélio com deposição de fibras colágenas organizadas na lâmina própria. Com base no protocolo experimental desenvolvido neste estudo e nos resultados obtidos podemos concluir que a PDT pode ser utilizada de maneira segura em lesões infectadas de MO, pois a mesma não interferirá na reparação destas lesões. / Oral mucositis (OM) is a debilitating side effect of chemotherapy, which can be relieved with the use of phototherapy. Photodynamic therapy (PDT) may be used for the treatment of OM, when infection is present. However, there are no studies that demonstrate PDTs interference on tissue repair processes when applied on lesions of the oral mucosa. In this sense, this work aims to induce OM in hamsters, by grooving the oral mucosa of animals receiving 5-fluorouracil (5-FU) chemotherapy, and evaluate through clinical, biochemical and histological parameters the effect of PDT in repairing these lesions. The animals were divided into two groups, experimental and control. The control group is formed by the C group, which received the vehicle of chemotherapy and anesthesia. The experimental group is formed by the Ch group, which received chemotherapy, anesthesia and induction of OM; ChP, which received chemotherapy, anesthesia, induction of OM and application of methylene blue (MB) 0.01%; ChL, which received chemotherapy, anesthesia, induction of OM and irradiation with low-power laser (LPL - 660nm, 120J/cm2, 40 mW, 4.4 J per point); and PDT, which received chemotherapy, anesthesia, induction of OM, application of MB 0.01% and LPL irradiation (same protocol as ChL group). 5-FU was administered by intraperitoneal injection, which was followed by the induction of OM by making mucosal grooves. The experimental period was of 10 days and the assessment of the severity of OM was performed on a daily basis using the scales proposed by the World Health Organization (WHO) and by W-Smith modified for animals. The animals were sacrificed after 5, 7 and 10 days of the experiment and their cheek pouch mucosa (left and right) were removed for carrying out the biochemical (by measuring the total protein concentration and by evaluating the antioxidant system parameters, such as enzymatic activity of Superoxide Dismutase - SOD and catalase) and histological (by light optical microscopy) analyzes. After statistical analysis, the clinical, biochemical and histological results showed that PDT reduced the severity of OM on the tenth day of the experiment, when compared to the initial mucositis score (p<0.05) and showed greater keratinization with organized collagen deposition in the lamina propria. Based on the experimental protocol developed in this study and the results obtained we can conclude that PDT can be used safely in infected OM injuries because it does not interfere with the repair of these lesions.
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Análise da expressão e mecanismos de ação das proteínas Akt, Hsp90, mTOR e ciclina D1 em cultura de células de carcinoma epidermoide humano e células displásicas após irradiação com laser em baixa intensidade / The expression and action mechanisms of Akt, Hsp90, mTOR and cyclin D1 proteins in cultured cells of squamous cell carcinoma and dysplastic cells after being irradiated with low level laser therapySperandio, Felipe Fornias 06 December 2012 (has links)
O carcinoma de cabeça e pescoço é uma neoplasia maligna de origem epitelial que resulta em aproximadamente 500.000 novos casos por ano ao redor do mundo. Diversos estudos têm sido conduzidos de maneira a elucidar os mecanismos de proliferação e invasão desta doença, sendo a via de sinalização Akt/mTOR e proteínas relacionadas, apontada como uma das principais vias envolvidas em sua progressão. Sabe-se que células neoplásicas, bem como células de diferentes tecidos, podem ter seu comportamento modificado após terem sido irradiadas com laser em baixa intensidade (LLLT). Porém, os mecanismos de atuação da luz laser de baixa potência sobre estas células permanecem ainda não completamente esclarecidos. Portanto, o objetivo deste estudo foi o de analisar a viabilidade celular e expressão das proteínas Akt, pAkt, Hsp90, S6, pS6 e Ciclina D1 em duas linhagens celulares de carcinoma de boca (SCC9 e SCC25), bem como em uma linhagem de queratinócitos orais humanos com displasia (DOK) após irradiação com laser em baixa intensidade. O laser utilizado foi um diodo semicondutor de arseneto de Gálio e Alumínio (GaAlAs) operando nos comprimentos de onda vermelho (660nm) e infravermelho (780nm), com potência fixa em 40mW e três densidades de energia para cada comprimento de onda disponível: 2.05J/cm², 3.07J/cm² e 6.15J/cm². A análise de apoptose foi realizada por meio do teste de TUNEL e a expressão proteica foi obtida com imunofluorescência e western blotting. Após análise estatística por meio do método ANOVA dois critérios e testes de Tukey ou teste T de estudante, todos com nível de significância de 5%, pôde-se concluir que a LLLT induziu comportamentos distintos em cada uma das linhagens celulares utilizadas. Foi notado aumento, bem como diminuição da viabilidade celular, dependendo do comprimento de onda utilizado e das células irradiadas. A densidade de energia de 2.05J/cm² foi a que produziu efeitos mais significativos em SCC9. Para a linhagem celular SCC25, a dose mais relevante foi a de 3.07J/cm², enquanto que para a linhagem DOK, a dose de 6.15J/cm² causou efeitos mais proeminentes. Estas respectivas doses foram escolhidas para cada uma das linhagens para dar continuidade aos experimentos de Western Blotting e Imunofluorescência. Dentre os resultados mais relevantes obtidos com estas técnicas, pode-se citar a variação dos níveis de pS6 e Ciclina D1 para a linhagem DOK em determinados períodos. Já a linhagem SCC9 apresentou variação dos níveis de pAkt e Ciclina D1 nos períodos estudados. A linhagem SCC25 também teve as expressões de pAkt, pS6 e Ciclina D1 modificadas por LLLT. De maneira interessante, o aparecimento ou manutenção de uma isoforma de Hsp90 foi encontrado em SCC9 e SCC25 após irradiação laser. Por fim, a indução de apoptose foi detectada na linhagem SCC25. Em conclusão, pode-se dizer que a LLLT, como empregada neste estudo, foi capaz de aumentar a expressão de proteínas relacionadas à progressão e invasão em todas as linhagens estudadas. Além disso, a irradiação laser foi única, apesar de ter causado efeitos prolongados, algumas vezes até o último período estudado. / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is an epithelial malignant neoplasm that accounts for approximately 500.000 new cases yearly around the world. Several studies have been conducted to elucidate the mechanisms of proliferation and invasion of this lesion, whereas the Akt/mTOR signaling pathway with its related proteins is being pointed out as one of the main pathways involved in HNSCC`s progression. Neoplastic cells, as well as cells that originate from different tissues may have their behavior modified by low level laser therapy (LLLT); however, the mechanisms through which the low level laser light interacts with these cells remain poorly understood. Thus, this study sought to evaluate the cell viability and the expression levels of Akt, pAkt, Hsp90, S6, pS6 and Cyclin D1 proteins in two oral squamous cell carcinoma cell lineages (SCC9 and SCC25) and in one oral dysplastic human keratinocyte cell line (DOK) after they had been treated with LLLT. The laser device was a semiconductor diode of Gallium and Aluminum Arsenate (GaAlAs), operating with wavelengths of 660nm (red) and 780nm (infrared), with a fixed power of 40mW and giving three different energy densities: 2.05J/cm², 3.07J/cm² and 6.15J/cm². Apoptosis was analyzed through TUNEL test and the protein expression was accessed with Immunofluorescence and Western blotting. After statistical analysis through two-way ANOVA and Tukey or Student`s T test, all of them with a level of significance of 5%, it was concluded that LLLT induced distinct behaviors to each of the studied cell lines. Increases and inhibitions in cell viabilities were detected depending on the wavelength and also on the irradiated cell line. The energy density of 2.05J/cm² produced the most significant findings over SCC9. On the other hand, in SCC25 the most relevant results were detected with 3.07J/cm², while the most prominent findings were seen with 6.15J/cm² when the cell line DOK was evaluated. In that way, these respective doses were chosen for each cell line to continue with Western blotting and Immunofluorescence. Among the most relevant findings, the variation of pS6 and Cyclin D1 levels can be cited for DOK in some evaluated periods. SCC9 presented both pAkt and Cyclin D1 variations in the studied periods. Besides that, SCC25 also had pAkt, pS6 and Cyclin D1 levels modified by LLLT. Interestingly, the appearance and maintenance of an Hsp90 isoform was found in SCC9 and SCC25 after laser irradiation. Moreover, the induction of apoptosis was detected for the SCC25 cell line. Finally, the LLLT employed herein was able to enhance the expression of proteins related to progression and invasion in all of the studied cell lines. In addition, there was a single laser irradiation, although it caused prolonged effects, sometimes through the latest evaluated period.
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