O câncer é um problema de saúde pública mundial. O Instituto Nacional do Câncer (INCA) estimou que no Brasil, no ano de 2015, 576 mil novos casos surgiram, representando a segunda maior causa de mortes por esta doença. Entre os tratamentos oferecidos para o câncer, podemos destacar a radioterapia, que utiliza fontes ionizantes para erradicar ou impedir a proliferação das células tumorais. Entretanto, o uso da radiação ionizante (R.I), pode acarretar danos às células não tumorais circunvizinhas ao tumor. Assim, tratamentos coadjuvantes que possam diminuir os efeitos deletérios da radiação são extremamente importantes. Neste contexto, o laser de baixa potência (LBP) surge como alternativa para modular a resposta das células frente à radiação ionizante. Sendo esse nosso objetivo, células de fibroblastos de gengiva humana (FMM1) e câncer de mama (MDA-MB-231) foram expostas as doses de 2,5 e 10 Gy e após 24 h receberam LBP (λ= 660 nm, 40 mW e 0,04 cm²) com as densidades de energia de 30, 60, 90, 120 e 150 J/cm². A viabilidade celular foi quantificada através do teste de exclusão com azul de tripan durante quatro dias. A influência do LBP nas fases do ciclo celular e a expressão do Antígeno Nuclear de Proliferação celular (PCNA) foram realizadas por citometria de fluxo. A expressão de β-Galactosidase foi considerada para quantificar a senescência celular. Considerando os parâmetros utilizados, observou-se aumento na viabilidade celular, da expressão de PCNA, maior população nas fases S e G2/m do ciclo celular, e a diminuição de células senescentes para as células não tumorais, enquanto que para as tumorais, nenhuma resposta foi observada na viabilidade celular, maior população nas fases S e G2/m do ciclo celular e na quantidade de células senescentes enquanto que a expressão de PCNA diminuiu. Diante disso, concluímos que o LBP exerceu efeitos em ambas as linhagens celulares. / Cancer is considered a public health problem worldwide. According to the Brazils National Cancer Institute (INCA), 576,000 new cases of cancer were estimated for 2015 in Brazil, representing the second leading cause of death. Radiotherapy may be a treatment to several of types of cancer, frequently using ionizing radiation to eradicate or prevent the proliferation of tumor cells. This treatment, however, can lead to death of non-tumor cells around in irradiated tissue. Given this, adjuvant therapies that can minimize the side effects of ionizing radiation are of extremely importance. In this context, low power laser (LPL) may be an alternative to modulate the response of healthy cells to ionizing radiation. In this study, cells of human gingival fibroblasts (FMM1) and breast cancer (MDAMB- 231) were exposed to gamma radiation at doses of 2.5 and 10 Gy. After twenty-four hours, cell were irradiated with LPL (λ= 660 nm, 40 mW and total area of 0.04 cm²) with energy densities of 30, 60, 90, 120 and 150 J/cm². The cell viability was measured during four days, using the trypan blue technique. The influence of LPL on the cell cycle and on expression of the nuclear antigen of cellular proliferation (PCNA) was evaluated by flow cytometry. The expression of β-Galactosidase was the chosen method to assess cell senescence. Considering our adopted parameters, and focusing on the non-tumor cells, we have observed an increase in: 1) cell viability; 2) cell population in phases S and G2/M cell cycle; 3) PCNA expression with decrease in senescence. No alterations were observed in the cell viability, with greater population in phases S and G2/M cell cycle, while the number of senescent cells and the expression of PCNA were decreased. Therefore, we have concluded that the LPL promoted effects on both cell lineages, with increased cell viability on FMM1 cells, whether cancer cells maintained a decreased proliferation.

INTRODUÇÃO: A Artrite aguda do joelho é o tipo mais comum de artrite, e sua prevalência aumenta em paralelo com o aumento da idade da população. Há muitas evidências de benefícios clínicos do laser para o tratamento da osteoartrite. No entanto, existem poucos estudos abordando os efeitos de 810 nm laser. Aqui nós iremos investigar os efeitos de Laser de Baixa Potencia (infra-vermelho, 810 nm). MATERIAL E MÉTODOS: Ratos Wistar machos (230 - 250g) foram anestesiados com halotano antes da injeção de pró-inflamatórios compostos. Carragenina e Kaolin, ambos a 3%, em solução diluída em soro Fisiológico, administrado intra-articular. Os grupos tratados receberam irradiação laser no local. Após 6 horas todos os animais foram anestesiados e mortos por deslocamento cervical para coleta de cavidade articular e lavado para celulares e análise bioquímica. O tecido articular foi analisado por PCR em tempo real análise, a fim de avaliar a expressão de COX-1 e COX-2. IL-1, TNF-alfa e IL-6 e a mieloperoxidase (MPO) também foi realizada. RESULTADOS E DISCUSSÃO: A terapia com laser de baixa potência foi capaz de inibir o número total de leucócitos, atividade de mieloperoxidase, o extravasamento vascular, IL-1b, TNF-a, IL-6 e Prostaglandina E2. / Introduction. Arthritis of the knee (AK) is the most common type of osteoarthritis, and its prevalence is rising in parallel with the increasing age of the population.. Here we investigate the effects of Low Level Laser Therapy (infra-red, 810 nm) in experimentally induced rat knee osteoarthritis. Methods. Male wistar rats (150 200g) were anaesthetized with halothane 1% prior the injection of pro-inflammatory compounds. Carrageenan and Kaolin (both 3%) administered intra-articular. After 6 hours all animals were killed by decaptation and articular cavity was washed and collected. Articular Tissue was carefully removed for edema and Real-time PCR analysis in order to evaluate COX-1 and COX-2 expression. Total and differential cell account, mieloperoxidase activity, IL-b, TNF-a, IL-6 was also analysed. Results. Low Level laser therapy was able to significantly inhibit the total number of leukocytes as well as the mieloperoxidase activity, polymorphonuclear cells at the inflammatory site, vascular extravasation, IL-1, TNF-alpha, IL-6 and prostaglandin E2. Conclusions. Low Level Laser Therapy operating in 810 nm markedly reduced inflammation in carrageenan, kaolin-induced knee osteoarthritis.

Introdução: A terapia com laser de baixa potência (LBP) vem sendo utilizada em Odontologia com diversos objetivos, em especial o de diminuir o tempo de cicatrização de feridas cirúrgicas. Objetivo: O objetivo do presente estudo in vivo foi avaliar qualitativamente e quantitativamente o efeito da irradiação com LBP no processo de remodelação óssea após a extração dentária em ratos jovens. Material e Método: Foram utilizados 60 ratos Wistar, distribuídos aleatoriamente nos seguintes grupos: Grupo Controle (n=30) animais com extração dentária sem aplicação do LBP, e Grupo Experimental (n=30) animais que tiveram extração dentária (Ext) e aplicação do LBP (Ext+LBP) nos três primeiros dias (54 J/cm2 por dia). Os animais foram sacrificados nos períodos de 1, 2, 3, 5, 7 e 10 dias após o procedimento de extração dentária. Neste estudo foram analisados os efeitos da aplicação do laser sobre o reparo alveolar através de microscopia de luz, luz polarizada e imunomarcação. Para isso foram avaliados os seguintes parâmetros: 1) porcentagem de formação óssea no interior do alvéolo; 2) grau de processo inflamatório; 3) grau de amadurecimento do colágeno; 4) imunomarcação para TRAP e RUNX-2. Todos os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística através do teste ANOVA e teste de Mann-Whitney U (p<0.05). Resultados: Observou-se que os alvéolos do Grupo Experimental apresentaram processo de reparo mais evoluído quando comparados ao Grupo Controle, caracterizado pela organização mais rápida do coágulo sanguíneo, proliferação de fibroblastos nos restos do ligamento periodontal mais pronunciada, organização do colágeno e formação óssea mais precoce e mais intensa. Conclusão: A utilização do laser de baixa potência acelerou o processo de formação óssea durante as fases iniciais do experimento, embora nos períodos finais não houve diferença no processo de ossificação. / Introduction: Low Power Laser (LPL) therapy has been used in Dentistry to achieve many objectives, particularly to decrease the healing period on wound healing. Objectives: The purpose of this in vivo study was to evaluate qualitatively and quantitatively the irradiation effect with LPL in the bone remodeling process after tooth extraction in young rats. Material and Method: 60 Wistar rats were used, randomly distributed in the following groups: Control Group (n=30) animals with tooth extraction without LPL application, and Experimental Group (n=30) animals with tooth extraction (Ext) and LPL application (Ext+LPL) on the three fist days (54 J/cm2 per day). The animals were euthanized after the end periods of 1, 2, 3, 5, 7 and 10 days after the tooth extraction. This study looked into the effects of laser application on the alveolar repair through light microscopy, polarized light and immunostaining. After that, the following parameters were evaluated: 1) percentage of bone formation inside the dental alveolus; 2) degree of inflammatory process; 3) degree of collagen maturation; 4) immunostaining for TRAP and RUNX-2. All the results obtained were submitted to statistical analysis over the ANOVA and Mann- Whitney (p<0.05) test. Results: It was observed that the alveolus from the Experimental Group presented an improved repair process when compared to the Control Group, characterized by faster blood clot organization, more apparent fibroblasts proliferation on the remnants of the periodontal ligament, earlier and more intense collagen organization and bone generation. Conclusion: The use of Low Power Laser accelerated the bone generation process during the experimental initial period, although there was no difference in the ossification process in the final periods.

Introdução: A terapia com laser de baixa potência (LBP) vem sendo utilizada em Odontologia com diversos objetivos, em especial o de diminuir o tempo de cicatrização de feridas cirúrgicas. Objetivo: O objetivo do presente estudo in vivo foi avaliar qualitativamente e quantitativamente o efeito da irradiação com LBP no processo de remodelação óssea após a extração dentária em ratos jovens. Material e Método: Foram utilizados 60 ratos Wistar, distribuídos aleatoriamente nos seguintes grupos: Grupo Controle (n=30) animais com extração dentária sem aplicação do LBP, e Grupo Experimental (n=30) animais que tiveram extração dentária (Ext) e aplicação do LBP (Ext+LBP) nos três primeiros dias (54 J/cm2 por dia). Os animais foram sacrificados nos períodos de 1, 2, 3, 5, 7 e 10 dias após o procedimento de extração dentária. Neste estudo foram analisados os efeitos da aplicação do laser sobre o reparo alveolar através de microscopia de luz, luz polarizada e imunomarcação. Para isso foram avaliados os seguintes parâmetros: 1) porcentagem de formação óssea no interior do alvéolo; 2) grau de processo inflamatório; 3) grau de amadurecimento do colágeno; 4) imunomarcação para TRAP e RUNX-2. Todos os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística através do teste ANOVA e teste de Mann-Whitney U (p<0.05). Resultados: Observou-se que os alvéolos do Grupo Experimental apresentaram processo de reparo mais evoluído quando comparados ao Grupo Controle, caracterizado pela organização mais rápida do coágulo sanguíneo, proliferação de fibroblastos nos restos do ligamento periodontal mais pronunciada, organização do colágeno e formação óssea mais precoce e mais intensa. Conclusão: A utilização do laser de baixa potência acelerou o processo de formação óssea durante as fases iniciais do experimento, embora nos períodos finais não houve diferença no processo de ossificação. / Introduction: Low Power Laser (LPL) therapy has been used in Dentistry to achieve many objectives, particularly to decrease the healing period on wound healing. Objectives: The purpose of this in vivo study was to evaluate qualitatively and quantitatively the irradiation effect with LPL in the bone remodeling process after tooth extraction in young rats. Material and Method: 60 Wistar rats were used, randomly distributed in the following groups: Control Group (n=30) animals with tooth extraction without LPL application, and Experimental Group (n=30) animals with tooth extraction (Ext) and LPL application (Ext+LPL) on the three fist days (54 J/cm2 per day). The animals were euthanized after the end periods of 1, 2, 3, 5, 7 and 10 days after the tooth extraction. This study looked into the effects of laser application on the alveolar repair through light microscopy, polarized light and immunostaining. After that, the following parameters were evaluated: 1) percentage of bone formation inside the dental alveolus; 2) degree of inflammatory process; 3) degree of collagen maturation; 4) immunostaining for TRAP and RUNX-2. All the results obtained were submitted to statistical analysis over the ANOVA and Mann- Whitney (p<0.05) test. Results: It was observed that the alveolus from the Experimental Group presented an improved repair process when compared to the Control Group, characterized by faster blood clot organization, more apparent fibroblasts proliferation on the remnants of the periodontal ligament, earlier and more intense collagen organization and bone generation. Conclusion: The use of Low Power Laser accelerated the bone generation process during the experimental initial period, although there was no difference in the ossification process in the final periods.

A mucosite oral é um dos efeitos adversos mais frequente e debilitantes em pacientes submetidos ao transplante de medula óssea (TMO). O Laser de Baixa Potência (LBP) tem sido estabelecido como importante ferramenta na prevenção de mucosite, durante o condicionamento com quimioterapia de altas doses no TMO. No entanto, protocolos que suportam tais intervenções variam e os fatores de riscos para mucosite em pacientes com diferentes tipos de neoplasias e condicionamentos mesmo recebendo a prevenção com o LBP são ainda desconhecidos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a prevalência de mucosite, sua relação com os parâmetros clínicos e fatores preditivos em pacientes submetidos ao TMO e que receberam a prevenção com LBP. Foi realizada uma análise retrospectiva de 374 pacientes consecutivos que foram submetidos ao TMO no A.C. Camargo Cancer Center, entre o período de janeiro de 2006 a janeiro de 2013. Todos os pacientes receberam profilaxia para mucosite oral com LBP, utilizando protocolo único, desde o primeiro dia do condicionamento até o D+2 (2 dias após a infusão da medula óssea). Os pacientes continuaram a receber o LBP nos casos de mucosite oral >= grau 2 até a remissão completa das lesões. Os dados clínicos como neutropenia febril, dor em boca, uso de alimentação parenteral e o uso de morfina foram coletados diariamente através dos prontuários dos pacientes desde o primeiro dia de internação até a alta hospitalar. As variáveis clínicas como idade, peso e função renal foram coletadas no dia da internação para o condicionamento. Dos 374 pacientes selecionados para este estudo, 37 (9%) pacientes foram excluídos, totalizando assim, 337 pacientes. Destes, 43 (12,76%) não apresentaram mucosite, 166 (49,25%) manifestaram mucosite grau 1, 84 (24,93%) grau 2, 32 (9,50%) grau 3 e 12 (3,56%) grau 4. Os pacientes com mucosite grau ? 2, apresentaram uma média de 1,4 dias de dor em boca comparado com 9,2 dias nos pacientes com mucosite ? 3 (p<0,0001). Em relação ao tempo de hospitalização, nos pacientes com mucosite grau ? 2, a média foi de 27,16 dias comparado com 36,07 nos com mucosite grau ?3 (p<0,0001). Através do modelo de regressão logística, observou-se que a cada aumento em uma unidade de creatinina a chance de ocorrer mucosite grau ? 3 foi 4,3 vezes maior (RC= 4,37; 95% IC: 1,68 - 11,32; p=0,0024). Além disso, os pacientes submetidos ao transplante alogênico apresentaram cerca de 5,97 vezes mais chance de apresentar mucosite grau ? 3 comparado com os pacientes submetidos ao transplante autólogo (RC= 5,97; 95% IC: 3,02 - 11,99; p<0,001). O estudo concluiu que a incidência e intensidade da mucosite oral severa foi baixa nos pacientes submetidos ao TMO, provavelmente devido à profilaxia com o LBP. Além disso, quanto maior a severidade da mucosite oral, maior o tempo de dor em boca, uso de alimentação parenteral, uso de morfina e período de internação. O transplante alogênico e o aumento no nível sérico de creatinina foram considerados fatores de risco para ocorrência de mucosite oral severa. Novos estudos são necessários para definir protocolos específicos para o LBP nestes pacientes com maior risco para o desenvolvimento de mucosite severa. / Oral mucositis is one of the most common and debilitating adverse effects in patients undergoing bone marrow transplantation (BMT). The low-power laser (LBP) has been established as an important tool in the prevention of mucositis, during conditioning with high-dose chemotherapy in BMT. However, protocols that support such intervention vary and risk factors for mucositis in patients with different types of neoplasms and conditioning protocols are still unknown. This study aimed to assess the prevalence of mucositis, its relationship with clinical parameters and predictive factors in patients undergoing BMT and receiving prevention with LBP. A retrospective analysis was performed concerning 374 patients who were submitted consecutively to BMT at the AC Camargo Cancer Center, from January 2006 to January 2013. All patients received prophylaxis for oral mucositis with LBP using only protocol from the first day of conditioning until D + 2 (2 days after the infusion of the bone marrow). Patients continued to receive the LBP in the case of oral mucositis grade >= 2 until the complete remission of the lesions. Clinical data, such as febrile neutropenia, mouth pain, parenteral nutrition usage and the use of morphine were collected daily through the medical records of patients from the first day of admission until discharge. The clinical variables such as age, weight and renal function data were collected on the day of admission for conditioning. Of the 374 patients selected for this study, 37 (9%) were excluded, totaling 337 patients. Of these, 43 (12.76%) had no mucositis, 166 (49.25%) expressed mucositis grade 1, 84 (24.93%) grade 2, 32 (9.50%) grade 3 and 12 (3.56 %) grade 4. Patients with mucositis grade <= 2, showed an average of 1.4 days of pain in the mouth compared with 9.2 days in patients with mucositis >= 3 (p <0.0001). Regarding the length of hospital stay in patients with mucositis grade <= 2, the average was 27.16 days compared to 36.07 in with mucositis grade >= 3 (p <0.0001). The logistic regression model showed that each increase of one unit of creatinine drives the chance of mucositis grade >= 3 4.3 times higher (OR = 4.37; 95% CI: 1.68 to 11.32 ; p = 0.0024). In addition, patients undergoing allogeneic transplantation showed about 5.97 times more likely to have grade >= 3 mucositis compared with patients undergoing autologous transplantation (OR = 5.97; 95% CI: 3.02 to 11.99 p <0.001). The study found that the incidence and intensity of severe oral mucositis was low in patients undergoing BMT, probably due to prophylaxis with LBP. In addition, the greater the severity of oral mucositis, the longer the pain in mouth, parenteral feeding use, morphine and time of hospitalization. Allogeneic transplantation and increase in serum creatinine level were considered risk factors for the occurrence of severe oral mucositis. Further studies are needed to define specific protocols for LBP in these patients at higher risk for developing severe mucositis.

A mucosite oral é um dos efeitos adversos mais frequente e debilitantes em pacientes submetidos ao transplante de medula óssea (TMO). O Laser de Baixa Potência (LBP) tem sido estabelecido como importante ferramenta na prevenção de mucosite, durante o condicionamento com quimioterapia de altas doses no TMO. No entanto, protocolos que suportam tais intervenções variam e os fatores de riscos para mucosite em pacientes com diferentes tipos de neoplasias e condicionamentos mesmo recebendo a prevenção com o LBP são ainda desconhecidos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a prevalência de mucosite, sua relação com os parâmetros clínicos e fatores preditivos em pacientes submetidos ao TMO e que receberam a prevenção com LBP. Foi realizada uma análise retrospectiva de 374 pacientes consecutivos que foram submetidos ao TMO no A.C. Camargo Cancer Center, entre o período de janeiro de 2006 a janeiro de 2013. Todos os pacientes receberam profilaxia para mucosite oral com LBP, utilizando protocolo único, desde o primeiro dia do condicionamento até o D+2 (2 dias após a infusão da medula óssea). Os pacientes continuaram a receber o LBP nos casos de mucosite oral >= grau 2 até a remissão completa das lesões. Os dados clínicos como neutropenia febril, dor em boca, uso de alimentação parenteral e o uso de morfina foram coletados diariamente através dos prontuários dos pacientes desde o primeiro dia de internação até a alta hospitalar. As variáveis clínicas como idade, peso e função renal foram coletadas no dia da internação para o condicionamento. Dos 374 pacientes selecionados para este estudo, 37 (9%) pacientes foram excluídos, totalizando assim, 337 pacientes. Destes, 43 (12,76%) não apresentaram mucosite, 166 (49,25%) manifestaram mucosite grau 1, 84 (24,93%) grau 2, 32 (9,50%) grau 3 e 12 (3,56%) grau 4. Os pacientes com mucosite grau ? 2, apresentaram uma média de 1,4 dias de dor em boca comparado com 9,2 dias nos pacientes com mucosite ? 3 (p<0,0001). Em relação ao tempo de hospitalização, nos pacientes com mucosite grau ? 2, a média foi de 27,16 dias comparado com 36,07 nos com mucosite grau ?3 (p<0,0001). Através do modelo de regressão logística, observou-se que a cada aumento em uma unidade de creatinina a chance de ocorrer mucosite grau ? 3 foi 4,3 vezes maior (RC= 4,37; 95% IC: 1,68 - 11,32; p=0,0024). Além disso, os pacientes submetidos ao transplante alogênico apresentaram cerca de 5,97 vezes mais chance de apresentar mucosite grau ? 3 comparado com os pacientes submetidos ao transplante autólogo (RC= 5,97; 95% IC: 3,02 - 11,99; p<0,001). O estudo concluiu que a incidência e intensidade da mucosite oral severa foi baixa nos pacientes submetidos ao TMO, provavelmente devido à profilaxia com o LBP. Além disso, quanto maior a severidade da mucosite oral, maior o tempo de dor em boca, uso de alimentação parenteral, uso de morfina e período de internação. O transplante alogênico e o aumento no nível sérico de creatinina foram considerados fatores de risco para ocorrência de mucosite oral severa. Novos estudos são necessários para definir protocolos específicos para o LBP nestes pacientes com maior risco para o desenvolvimento de mucosite severa. / Oral mucositis is one of the most common and debilitating adverse effects in patients undergoing bone marrow transplantation (BMT). The low-power laser (LBP) has been established as an important tool in the prevention of mucositis, during conditioning with high-dose chemotherapy in BMT. However, protocols that support such intervention vary and risk factors for mucositis in patients with different types of neoplasms and conditioning protocols are still unknown. This study aimed to assess the prevalence of mucositis, its relationship with clinical parameters and predictive factors in patients undergoing BMT and receiving prevention with LBP. A retrospective analysis was performed concerning 374 patients who were submitted consecutively to BMT at the AC Camargo Cancer Center, from January 2006 to January 2013. All patients received prophylaxis for oral mucositis with LBP using only protocol from the first day of conditioning until D + 2 (2 days after the infusion of the bone marrow). Patients continued to receive the LBP in the case of oral mucositis grade >= 2 until the complete remission of the lesions. Clinical data, such as febrile neutropenia, mouth pain, parenteral nutrition usage and the use of morphine were collected daily through the medical records of patients from the first day of admission until discharge. The clinical variables such as age, weight and renal function data were collected on the day of admission for conditioning. Of the 374 patients selected for this study, 37 (9%) were excluded, totaling 337 patients. Of these, 43 (12.76%) had no mucositis, 166 (49.25%) expressed mucositis grade 1, 84 (24.93%) grade 2, 32 (9.50%) grade 3 and 12 (3.56 %) grade 4. Patients with mucositis grade <= 2, showed an average of 1.4 days of pain in the mouth compared with 9.2 days in patients with mucositis >= 3 (p <0.0001). Regarding the length of hospital stay in patients with mucositis grade <= 2, the average was 27.16 days compared to 36.07 in with mucositis grade >= 3 (p <0.0001). The logistic regression model showed that each increase of one unit of creatinine drives the chance of mucositis grade >= 3 4.3 times higher (OR = 4.37; 95% CI: 1.68 to 11.32 ; p = 0.0024). In addition, patients undergoing allogeneic transplantation showed about 5.97 times more likely to have grade >= 3 mucositis compared with patients undergoing autologous transplantation (OR = 5.97; 95% CI: 3.02 to 11.99 p <0.001). The study found that the incidence and intensity of severe oral mucositis was low in patients undergoing BMT, probably due to prophylaxis with LBP. In addition, the greater the severity of oral mucositis, the longer the pain in mouth, parenteral feeding use, morphine and time of hospitalization. Allogeneic transplantation and increase in serum creatinine level were considered risk factors for the occurrence of severe oral mucositis. Further studies are needed to define specific protocols for LBP in these patients at higher risk for developing severe mucositis.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-09-30 / Introdução: O tendão calcâneo é um dos tendões mais lesados e a sua cicatrização total pode levar semanas, ou até meses. Na busca de acelerar o reparo tendíneo, a terapia a laser de baixa intensidade (TLBI), vem demonstrando efeitos satisfatórios. Objetivo: Avaliar a ação das diferentes potências da terapia a laser de baixa intensidade no reparo tendíneo, em ratos. Métodos: O laser utilizado foi (AsGaAl) 830nm, densidade de energia 30J/cm2 e potências de 40mW, 60mW, 80mW e 100mW, por um período de 5 dias consecutivos para todos os grupos. Todos os animais foram submetidos à lesão parcial do tendão calcâneo. No 6º dia após lesão, os tendões foram retirados e analisados por microscópio de polarização. Foi mensurada a organização das fibras de colágeno por meio da análise de birrefringência e verificada a predominância do tipo de colágeno no tendão calcâneo através da análise de picrosirius. Resultados: Os grupos tratados com TLBI mostraram uma melhora significante no realinhamento das fibras de colágeno, mas não apresentaram diferença significante entre si (p=0,139). Quanto à avaliação da quantidade de colágeno tipo III, foi observado que houve um aumento do percentual de colágeno, conforme o aumento da potência do laser (60 a 100mW) (p<0,01). Em relação ao colágeno tipo I, o grupo 80mW apresentou maior quantidade do que o grupo sham (p=0,05). Conclusão: A terapia a laser de baixa intensidade não apresentou diferença no realinhamento das fibras de colágenos entre diferentes potências. Potências a partir de 60mW aumentaram a quantidade de colágeno tipo III. Potência de 80mW aumentou a quantidade de colágeno tipo I e III. / Introduction: Calcaneous tendon is one of the most damaged tendons, and its healing may last from weeks to months to be completed. In the search after speeding tendon repair, low intensity laser therapy has shown favorable effect. Objective: To assess the effect of 40, 60, 80 and 100mW powers of low level laser on the process of tissue repair in partial lesion calcaneous tendon in rats. Methods: The was used 830-nm GaAlAs diode laser operating at output powers of 40, 60, 80 and 100 mW and energy density of 30 J/cm2 on the repair of partial calcaneal tendon ruptures in rats. A partial tendon rupture was induced in all animals, which were treated with laser irradiation for 5 consecutive days. Six days after injury, the injured tendons were removed and examined by polarized light microscopy. Results: Collagen fiber organization was evaluated by birefringence measurements, and collagen content was determined by picrosirius red staining. It was observed that the higher the output power (60-100 mW) the greater was the amount of type III collagen (P < 0.01). The amount of type I collagen was significantly greater (P = 0.05) in the 80-mW group than in the control group (sham stimulation). A non-statistically significant improvement in the realignment of collagen fibers was observed in the irradiated groups. Conclusion: Low-level laser therapy resulted in significantly greater amounts of type III collagen (output powers of 60 mW or more) and type I collagen (output power of 80 mW), however, no significant differences between groups were found in the realignment of collagen fibers. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

O sucesso do tratamento endodôntico depende da cuidadosa realização de todas as suas fases, terminando com uma obturação tridimensional que alcance todo o sistema de canais radiculares. Desta forma, os materiais obturadores, ou as substâncias liberadas, entrarão em contato com os tecidos perirradiculares, o que poderá influenciar a resposta inflamatória e o processo de reparo. A terapia laser de baixa potência (TLBP) tem sido estudada quanto à sua ação anti-inflamatória, favorecendo o reparo. O objetivo deste estudo foi investigar a produção das citocinas IL-1&#946;, IL-6 e IL-8 por fibroblastos de gengiva humana (linhagem FMM1) como resposta à presença dos extratos dos cimentos endodônticos AH Plus, MTA Fillapex e EndoSequence BC Sealer, bem como a eficácia da TLBP, neste modelo. Para isto, extratos destes cimentos, recém-manipulados e após 24 h do endurecimento, foram preparados em meio de cultura DMEM fresco, conforme as normas ISO 10993-12. Inicialmente, a citotoxicidade dos cimentos foi avaliada, após a interação das células com a diluição seriada destes extratos (1:1 a 1:16), por meio do ensaio MTT. Para a análise da produção de citocinas, 106 células por poço foram cultivadas em placas de cultura de 24 poços, para a interação com os extratos dos cimentos, na diluição 1:4. Estabeleceram-se os grupos não irradiado e irradiado. No grupo irradiado, as culturas celulares receberam duas irradiações do laser InGaAlP (660 nm, 30 mW, 5 J/cm2 e área do feixe de 0,028 cm2), com intervalo de 12 h. O grupo não irradiado foi submetido às mesmas condições ambientais que o irradiado. Os sobrenadantes das culturas foram coletados, centrifugados, aliquotados e armazenados congelados, para a posterior análise pelo ensaio de ELISA. Todos os dados obtidos (médias erro padrão) foram tratados estatisticamente por ANOVA one-way, complementado pelo teste de Tuckey e ANOVA two-way, com correção de Bonferroni (p< 0,05). A citotoxicidade dos cimentos AH Plus e EndoSequence BC Sealer revelou-se tempo/concentração-dependente, enquanto a do MTA Fillapex mostrou-se concentração-dependente. Os cimentos endodônticos induziram a produção das citocinas IL-1&#946;, IL-6 e IL-8 pelos fibroblastos, sem diferença significativa com os controles (p> 0,05). Somente o LPS de E. coli induziu a secreção de IL-8, com diferença estatística (p< 0,05). A TLBP não foi capaz de modular a produção das citocinas em questão, significativamente. / Endodontic treatment success depends on careful accomplishment of all steps, finishing with a three-dimensional obturation that reachs the entire root canal system. Thus, the obturation materials or the substances that are released will be in contact with perirradicular tissues, which may influence the inflammatory response and the repair process. Low-level laser therapy (LLLT) has been studied about its anti-inflammatory action, improving the repair. The aim of this study was to investigate the production of IL-1&#946;, IL-6 and IL-8 cytokines by human gingival fibroblasts (FMM1 lineage) as a response to the extracts of the endodontic cements AH Plus, MTA Fillapex and EndoSequence BC Sealer, besides the effectiveness of LLLT in this model. For that, freshly mixed and 24 h-set elutes of these sealers were prepared, in fresh DMEM, in accordance with ISO 10993-12. Firstly, cytotoxicity was assessed after cells were treated with cements extracts serial dilution (1:1 to 1:16), by MTT assay. To evaluate the cytokines production, 106 cells per well were cultured at 24-well-plates to interact with the 1:4 dilution of sealers extracts. Non-irradiated and irradiated groups were established. On the irradiated group, the cell culture received two InGaAlP laser irradiation (660 nm, 30 mW, 5 J/cm2, 0.028 cm2 spot size) at 12h-interval. The non-irradiated group was submitted to the same environment conditions of the irradiated group. The culture supernatants were collected, centrifuged, aliquoted and stored frozen to further analyse by ELISA assay. Data obtained (media standard error) were treated by ANOVA one-way, complemented by Tuckeys test and ANOVA two-way, with Bonferroni correction (p< 0.05). The cytotoxicity of AH Plus and EndoSequence BC Sealer was related to time/dose-dependent manner, whilst MTA Fillapex cytotoxicity was showed as dose-dependent manner. The endodontic sealers inducted the production of IL-1&#946;, IL-6 and IL-8 cytokines by fibroblasts similar to control (p> 0.05). Only E. coli LPS was capable to stimulate IL-8 secretion with statistic difference (p< 0.05). TLBP was not able to modulate the secretion of these cytokines, significantly.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:19:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissPMC.pdf: 6652992 bytes, checksum: ded1eb1eecf60367b1a7f8223eddbe63 (MD5) Previous issue date: 2004-02-18 / A lot of therapeutic techniques are used to accelerate and/or stimulate the tendineous repair process, among this techniques we have the low level laser therapy (LLLT). Therefore, this study had the aim of evaluating the effects of LLLT, in different wavelengths and different densities energy, on the tendineous repair process of calcaneal tendon of mice. In this study was used 48 male mice. 40 animals were submitted to the unilateral total tenotomy induced in the middle portion of the right calcaneal tendon. The tendons weren&#8217;t sutured after the surgery, just the skin around the surgery. The animals were randomized divided in 3 experimental groups (1, 2 and 3) and each group were divided in two subgroups. The subgroup A was treated with laser of 685 nm, 3 J/cm2, the subgroup B was treated with laser 685 nm, 10 J/cm2, the subgroup C was treated with 830 nm, 3 J/cm2 and the subgroup D with laser 830 nm, 10J/cm2; the subgroups E and F were classifieds as injured control/placebo treatment and non-injured control. It was used the lasers 685 nm and diode GaAlAs (830 nm), the parameters used in both lasers were 15 mW, continuos, power density of 5,4 W/cm2 and doses of 3 J/cm2 and 10 J/cm2. The applications were made punctually in each 24 hours, during 12 consecutive days, in just one point on the injured lesion. All animals were killed on the 13º day after the surgery and the tendons were extracted cirurgically and prepared for qualitative and quantitative analysis carry out through of polarization microscopy for obtain data of state of concentration, aggregation, orientation and deposition of collagen fibers in the site of tenotomy, was used measures of total birefringence take in polarization microscopy. After, it was obtained a picture of each tendon in the polarization microscopy for the qualitative histologic analysis of the tissue. The data analysis were made using the non-parametric test of multiple comparations in order to compare the data of all subgroups. It was found through of difference of OR (nm) values corresponding for the total birefringence that the molecules of collagen of tendons in process of tissue repair answered to the LLLT during the period of data collection, probabily through the increase in the fibroblastic proliferation and collagen synthesis. The tendinous repair of the subgroup A (685 nm, 3 J/cm2) showed the best result, considering the level of tissue organization, orientation, state of macromolecular aggregation and collagen deposition in the site of lesion. This subgroup was statistically different from the other subgroup, because it showed a higher OR value than the other subgroups treated with laser and the subgroup injured control/placebo treatment. We can conclude that, in the conditions our work was developed, there are different organizational answers in the injuried tendineous tissue and treated with LLLT. Therefore, there is a relationship between the improvement in the tendineous repair and the laser parameters used. In this case there were an acceleration of the tendineous repair when used the laser 685 nm and the dose of 3 J/cm2. / Várias técnicas terapêuticas são utilizadas para acelerar e/ou estimular o processo de reparo tendíneo, dentre elas a terapia laser de baixa potência (LLLT). Assim, este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos do laser de baixa potência, aplicado a diferentes comprimentos de onda e diferentes densidades de energia sobre o processo de reparação tendínea no tendão calcanear de rato. Foram utilizados 48 ratos machos, onde 40 animais foram lesados por uma tenotomia total unilateral feita por cisalhamento induzida na porção média do tendão calcanear direito, os tendões não foram suturados após a incisão cirúrgica, somente a pele ao redor da incisão sofreu sutura. Os animais foram divididos aleatoriamente em 3 grupos experimentais homogêneos (1, 2 e 3), sendo que cada grupo foi subdividido em 2 subgrupos; o grupo 1 foi dividido em subgrupo A que recebeu tratamento com laser de 685 nm, 3 J/cm2 e subgrupo B que recebeu tratamento laser 685 nm, 10 J/cm2; o grupo 2 foi dividido em subgrupo C que recebeu tratamento com laser de 830 nm, 3 J/cm2 e subgrupo D cujo tratamento foi com laser de 830 nm, 10J/cm2 e o grupo 3 que também foi dividido em subgrupo E (CL/PL) e F (CP) que foram classificados como controle lesado/tratamento placebo e controle padrão respectivamente. Foram utilizados os lasers de 685 nm e o diodo Ga-Al-As (830 nm), os parâmetros dosimétricos utilizados para ambos os lasers foram (15 mW, contínuo, densidade de potência de 5,4 W/cm2 e doses de 3 J/cm2 e 10 J/cm2), as aplicações foram feitas pontualmente a cada 24 horas, durante 12 dias consecutivos, irradiando-se transcutaneamente um único ponto sobre a região da lesão. Todos os animais foram sacrificados no 13º de P.O. e seus tendões foram retirados cirurgicamente e processados para a análise qualitativa e quantitativa realizadas por meio da microscopia de luz polarizada para se obter dados sobre o estado de concentração, agregação, orientação e deposição das fibras colágenas no local da tenotomia, foi utilizado medidas de birrefringência total tomadas no microscópio de luz polarizada. Posteriormente os tendões foram fotografados no microscópio de polarização para a análise histológica qualitativa do tecido. A análise estatística utilizada foi o teste não-paramétrico de comparações múltiplas para a comparação de todos os subgrupos dois a dois afim de detectar possíveis diferenças estatísticas. Os achados demonstraram por meio de diferenças de valores de OR (nm), correspondentes à birrefringência total, que as moléculas de colágeno presentes nos tendões em processo de reparação tecidual responderam a LLLT durante o período da coleta do material, provavelmente através do aumento da proliferação fibroblástica e síntese de colágeno. A reparação tendínea do subgrupo A tratado com laser de 685 nm e 3 J/cm2 apresentou melhores resultados considerando o nível de organização, orientação, estado de agregação macromolecular e deposição das fibras colágenas no local da lesão, diferindo-se estatisticamente dos demais subgrupos, uma vez que este subgrupo apresentou valor de OR considerado estatisticamente maior que o OR dos demais subgrupos tratados com laser e o subgrupo controle lesado/tratamento placebo. Com base nos nossos resultados podemos concluir, nas condições que o nosso trabalho foi desenvolvido, que há diferenças na resposta organizacional do tecido tendíneo lesado e estimulado pela LLLT, há portanto uma relação de melhora do reparo tendíneo com a combinação dos parâmetros laser utilizados; neste caso houve aceleração do processo de reparação tendínea quando utilizou-se o laser de 685 nm e 3 J/cm2.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseACA.pdf: 1948849 bytes, checksum: 00677b36766e019e8a7e13bd7b288172 (MD5) Previous issue date: 2004-03-11 / The Low Intensity Laser Therapy (LILT) constitutes one of the resources most used by physical therapists, with the goal of stimulating the process of repairing the skeleton muscle tissue. On the other hand, the intense utilization, its respective action mechanisms and therapeutic effectiveness are not scientifically proved. Based on this, we elaborated the present study aiming to investigate the influence of the LILT, at wavelengths (&#955;) usually used at clinical practices (670, 685 and 830 nm), on the function of the Myogenic Precursor Cells (MPCs), directly responsible for the tissue regeneration process. The beginning phase was carried out throughout in vitro experiments, determining the alterations started by radiations over the proliferation ability and the cellular differentiation. The MPCs used were in the second passage, after had been extracted from four days old Wistar rats. To analyze the proliferation, it was elaborated, for each &#955;, a dose-response data curve including the control group constituted of non-radiated cells, and the irradiated groups with doses of 0.3; 0.6; 0.9; 1.2; and 1.5 J/cm2. This procedure was carried out with the cells under the influence of 5 or 10% of fetal bovine serum (FBS). The dose demonstrating the highest effectiveness on the cellular proliferation in each radiation, was used to establish the influence on the process of cellular differentiation, and investigated throughout the analysis of the expression of the genes related to the isoforms IIa and IIx of the myosin heavy chain (MHC). The final phase of the study was pointed towards the radiation action evaluation, at the same dose parameters used before, on the muscle regeneration process in vivo, after induced cryoscopy lesion at the Tibialis anterior muscles of adults Wistar rats. There were evaluations of the histological, histochemical aspects for the Succinic Dehydrogenase enzyme (SDH) and the activity of the Lactate Dehydrogenase enzymes (LDH) and Citrate Sintase (CS). The outcomes demonstrated that the radiation at &#955; of 670, 685 and 830 nm promoted an increase of 56.8, 70.6 and 84.8 % on the proliferate ability of the PMCs. These values were achieved with the 1.2, 0.6 and 0.3 J/cm2 doses respectively, and with the cells under the influence of 5% of FBS. The highest concentration of serum (10% of FBS) determined a less pronounced bio-stimulating effect, rising only 13.6, 17.5 and 10.9 %, respectively. In relation to the MHC isoforms expression rate, it showed that there was a significant fall of the IIa isoform, due to the action of the 685 nm, and an increase of the IIx isoform, due to the action of the 685 and 830 nm radiations, in relation to the non-radiated cells rate. By means of in vivo analysis, it was possible to demonstrate the ability of radiation at &#955; of 685 and 830 nm on increasing DHL enzymes and CS during the muscle regeneration process. Therefore, according to the outcomes it is allowed to attribute to the LILT an ability &#955; and dose-dependent of influencing the proliferation function and the metabolism of the MPCs. It was not possible to infer its effect on the cellular differentiation process, because of the inverted effect on the MHC isoforms expression, though. / A terapia LASER de baixa intensidade (TLBI) constitui um dos recursos mais utilizados pelos fisioterapeutas com o intuito de estimular o processo de reparo do tecido muscular esquelético. Em contrapartida à intensa utilização, seus respectivos mecanismos de ação e sua efetividade terapêutica não se encontram cientificamente comprovados. Com base nesse contexto, elaboramos a presente pesquisa com o objetivo de investigar a influência exercida pela TLBI, nos comprimentos de onda (&#955;) freqüentemente utilizados na prática clínica (670, 685 e 830 nm), sob a função das células precursoras miogênicas (CPMs), responsáveis diretas pelo processo de regeneração tecidual. A fase inicial foi realizada por meio de experimentos in vitro, determinando as alterações desencadeadas pelas radiações sobre a capacidade de proliferação e diferenciação celular. As CPMs utilizadas encontravam-se na 2a passagem, após terem sido extraídas dos músculos de ratos Wistar com 4 dias após o nascimento. Para analisar a proliferação foi elaborada, para cada &#955;, uma curva doseresposta compreendendo o grupo controle, constituído por células não irradiadas, e os grupos irradiados com as doses de 0.3, 0.6, 0.9, 1.2 e 1.5 J/cm2. Esse procedimento foi realizado com as células sob influência de 5 ou 10 % de soro fetal bovino (SFB). A dose demonstrando a maior efetividade sobre a proliferação celular em cada radiação foi utilizada para estabelecer a influência sobre o processo de diferenciação celular, investigada por meio da análise da expressão dos genes relacionados as isoformas IIa e IIx da cadeia pesada de miosina (MHC). A fase final da pesquisa foi direcionada a avaliar a ação das radiações, nos mesmos parâmetros dosimétricos previamente utilizados, sobre o processo de regeneração muscular in vivo após criolesão induzida no músculo tibial anterior de ratos Wistar adultos. Foram avaliados os aspectos histológicos, histoquímicos para a enzima Succinato Desidrogenase (SDH) e a atividade das enzimas Lactato Desidrogenase (LDH) e Citrato Sintase (CS). Os resultados demonstraram que as radiações nos &#955; de 670, 685 e 830 nm proporcionaram um aumento de 56.8, 70.6 e 84.8 % na taxa de proliferação das CPMs. Esses valores foram alcançados com as respectivas doses 1.2, 0,6 e 0,3 J/cm2 e com as células sobre a influência de 5% de SFB. A maior concentração de soro determinou um efeito bioestimulante menos pronunciado, com elevação de 13.6, 17.5 e 10.9 % respectivamente. Em relação à taxa de expressão das isoformas de MHC foi demonstrado que houve uma significativa diminuição da isoforma IIa, pela ação da radiação de 685 nm, e uma elevação da isoforma IIx, pela ação das radiações de 685 e 830 nm, em relação às células não irradiadas. A análise in vivo demonstrou a capacidade das radiações nos &#955; de 685 e 830 nm em elevar a atividade das enzimas LDH e CS durante o processo de regeneração muscular. Conjuntamente os resultados permitem atribuir à TLBI uma capacidade &#955; e dose-dependente de influenciar a função proliferativa e o metabolismo das CPMs. Porém, não foi possível inferir seu efeito sobre o processo de diferenciação celular em virtude do efeito inverso sobre a expressão das isoformas de MHC.