Sabe-se que micro-organismos são vistos como promissoras fontes de moléculas bioativas, incluindo-se nesse grupo fungos endofíticos e também entomopatogênicos. Desse modo, foram selecionados o fungo entompatogênico Beauveria bassiana e o fungo endofítico Mycoleptodiscus indicus. Numa primeira etapa foram prospectadas condições de cultivo favoráveis à obtenção de metabólitos secundários com atividade biológica. Este trabalho foi guiado por ensaios biológicos e análises cromatográficas. As frações obtidas nos cultivos de escala ampliada foram submetidas a ensaios biológicos (leishmanicida, antimalárico, antimcrobiano e citotóxico). As frações diclorometânicas e em acetato de etila de ambos os fungos apresentaram resultados promissores em ensaios antitumorais e leishmanicidas. Em seguida, estas frações foram submetidas a processos cromatográficos que permitiram o isolamento de substâncias, cujas estruturas químicas foram elucidadas por meio do uso de técnicas de RMN, espectrometria de massas, UV, IV, rotação óptica (?D) e difração de raio-X. A partir de cultivos de B. bassiana foram obtidos compostos da classe das piridonas: piridovericina, piridovericina-N-O-(4-O-metil-?-D-glucopiranosídeo) e 15-desóxi-piridovericina, sendo os dois últimos inéditos; e das aloxazinas: 7,8-dimetilaloxazina (lumicromo) e 1-metil-11-hidróxilumicromo, sendo este inédito. A partir dos cultivos de M. indicus foram obtidas substâncias de duas classes: cromenos e azafilonas. Neste trabalho foram isolados derivados cromenos: eugenitina, 6-metóxieugenina e 9-hidróxieugenina, os quais têm sido isolados de uma ampla variedade de plantas e fungos. As azafilonas são uma classe estruturalmente diversa de metabólitos fúngicos, conhecidos pigmentos com estrutura pirano-quinona que contêm um núcleo bicíclico altamente oxigenado e um centro quiral quaternário. Foram obtidas duas azafilonas conhecidas: austidiol e austidiol diacetato (produto de acetilação); e três azafilonas inéditas: dímero de austidiol, austidiol diidroisocumarina e austidiol cromeno. As três azafilonas inéditas de M. indicus apresentam um padrão não usual de conexão entre dois policetídeos aromáticos, uma ponte metilênica. O isolamento de tais moléculas reforça a hipótese de que a biossíntese ocorra com a participação de uma molécula de formaldeído. As substâncias purificadas foram submetidas aos ensaios biológicos para confirmar o potencial de suas frações geradoras. No ensaio citotóxico as azafilonas austidiol e austdiol diacetato e a piridona piridovericina mostraram-se ativas contra as linhagens tumorais avaliadas, embora em concentrações superiores aos padrões utilizados. Além disso, apresentaram algum grau de seletividade (não tóxicas para linfócitos humanos). Também nos ensaios leishmanicidas, austidiol, austidiol diacetato e piridovericina mostraram-se ativos, embora em níveis inferiores aos leishmanicidas padrões. De modo que, pode-se considerar que as azafilonas e piridonas são bons compostos líderes para a busca de agentes citotóxicos e leishmanicidas, uma vez que estas classes de compostos possuem dinamicidade biológica. Por fim, o isolamento e elucidação de novos metabólitos das classes azafilonas e piridonas contribuem para o enriquecimento destas importantes classes de metabólitos fúngicos, ao mesmo tempo, que evidenciam a importância dos fungos endofíticos e entomopatogênicos na química de produtos naturais. / It is known that microorganisms are considered as promising source of bioactive molecules and endophytic and entomopathogenic fungi are included in this group. Therefore, we selected the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana and the endophytic fungus Mycoleptodiscus indicus to initiate the prospection aiming to determine the favorable growing conditions to obtain secondary metabolites with biological activity. This work was guided by biological assays and chromatographic analysis. The fractions obtained in the cultivation in a large scale were subjected to biological tests (leishmanicidal, antimalarial, antimicrobial and cytotoxic). The dichloromethane and ethyl acetate fractions of both fungi showed promising results in antitumor and leishmanicidal assays. Then, these fractions were subjected to chromatographic processes that allowed the isolation of compounds whose chemical structures were elucidated through the use of NMR techniques, mass spectrometry, UV, IR, ?D, and X-ray diffraction. From cultures of B. bassiana were obtained compounds from the pyridone class: pyridovericin, pyridovericin-N-O-(4-O-methyl-?-D-glucopyranoside) and pyridovericin-15-deoxy, being the latter two novel compounds; and alloxazine class: 7,8-dimethylalloxazine (lumichrome) and 1-methyl-11-hydroxylumichrome, being this last one unprecedented. From M. indicus cultures were obtained compounds from two classes: azaphilone and chromene. In this thesis we report the derivatives eugenitin, 6-methoxyeugenin and 9-hydroxyeugenin, which have been isolated from a wide variety of plants and fungi. Azaphilones are a class of structurally diverse fungal metabolites, known pigments with pyran-quinone structure and contains a highly oxygenated bicyclic core and a chiral quaternary center. Then, we obtained two known azaphilones: austdiol and austdiol diacetate (product of acetylation), and three unprecedent azaphilones: austdiol dimer, austdiol dihydroisocoumarin and austdiol chromen. The three new azaphilones from M. indicus have an unusual pattern of connection between two aromatic polyketides, a methylene bridge. The isolation of these molecules reinforces the hypothesis that the biosynthesis occurs with the participation of one formaldehyde molecule. The purified compounds were submitted to biological assays. In the cytotoxic assay the azaphilones austdiol and austdiol diacetate, and the pyridone pyridovericin displayed activity against tumor cell lines, although at higher concentrations than the standard compounds used. Moreover, there was some degree of selectivity, since the assayed compounds were not toxic to human lymphocytes. Also in leishmanicidal assays, austdiol, austdiol diacetate and pyridovericin displayed activity, although at levels lower than leishmanicidal standards. Thereby, it can be considered that azaphilone and pyridone compounds are good leader compounds to search for cytotoxic and leishmanicidal agents, since these classes of compounds have biological dynamicity. Finally, the isolation and elucidation of new metabolites belonging to azaphilone and pyridone classes contribute to the enrichment of these important fungal metabolites and, likewise, this study demonstrates the importance of endophytic and entomopathogenic fungi in natural products chemistry.

Sabe-se que micro-organismos são vistos como promissoras fontes de moléculas bioativas, incluindo-se nesse grupo fungos endofíticos e também entomopatogênicos. Desse modo, foram selecionados o fungo entompatogênico Beauveria bassiana e o fungo endofítico Mycoleptodiscus indicus. Numa primeira etapa foram prospectadas condições de cultivo favoráveis à obtenção de metabólitos secundários com atividade biológica. Este trabalho foi guiado por ensaios biológicos e análises cromatográficas. As frações obtidas nos cultivos de escala ampliada foram submetidas a ensaios biológicos (leishmanicida, antimalárico, antimcrobiano e citotóxico). As frações diclorometânicas e em acetato de etila de ambos os fungos apresentaram resultados promissores em ensaios antitumorais e leishmanicidas. Em seguida, estas frações foram submetidas a processos cromatográficos que permitiram o isolamento de substâncias, cujas estruturas químicas foram elucidadas por meio do uso de técnicas de RMN, espectrometria de massas, UV, IV, rotação óptica (?D) e difração de raio-X. A partir de cultivos de B. bassiana foram obtidos compostos da classe das piridonas: piridovericina, piridovericina-N-O-(4-O-metil-?-D-glucopiranosídeo) e 15-desóxi-piridovericina, sendo os dois últimos inéditos; e das aloxazinas: 7,8-dimetilaloxazina (lumicromo) e 1-metil-11-hidróxilumicromo, sendo este inédito. A partir dos cultivos de M. indicus foram obtidas substâncias de duas classes: cromenos e azafilonas. Neste trabalho foram isolados derivados cromenos: eugenitina, 6-metóxieugenina e 9-hidróxieugenina, os quais têm sido isolados de uma ampla variedade de plantas e fungos. As azafilonas são uma classe estruturalmente diversa de metabólitos fúngicos, conhecidos pigmentos com estrutura pirano-quinona que contêm um núcleo bicíclico altamente oxigenado e um centro quiral quaternário. Foram obtidas duas azafilonas conhecidas: austidiol e austidiol diacetato (produto de acetilação); e três azafilonas inéditas: dímero de austidiol, austidiol diidroisocumarina e austidiol cromeno. As três azafilonas inéditas de M. indicus apresentam um padrão não usual de conexão entre dois policetídeos aromáticos, uma ponte metilênica. O isolamento de tais moléculas reforça a hipótese de que a biossíntese ocorra com a participação de uma molécula de formaldeído. As substâncias purificadas foram submetidas aos ensaios biológicos para confirmar o potencial de suas frações geradoras. No ensaio citotóxico as azafilonas austidiol e austdiol diacetato e a piridona piridovericina mostraram-se ativas contra as linhagens tumorais avaliadas, embora em concentrações superiores aos padrões utilizados. Além disso, apresentaram algum grau de seletividade (não tóxicas para linfócitos humanos). Também nos ensaios leishmanicidas, austidiol, austidiol diacetato e piridovericina mostraram-se ativos, embora em níveis inferiores aos leishmanicidas padrões. De modo que, pode-se considerar que as azafilonas e piridonas são bons compostos líderes para a busca de agentes citotóxicos e leishmanicidas, uma vez que estas classes de compostos possuem dinamicidade biológica. Por fim, o isolamento e elucidação de novos metabólitos das classes azafilonas e piridonas contribuem para o enriquecimento destas importantes classes de metabólitos fúngicos, ao mesmo tempo, que evidenciam a importância dos fungos endofíticos e entomopatogênicos na química de produtos naturais. / It is known that microorganisms are considered as promising source of bioactive molecules and endophytic and entomopathogenic fungi are included in this group. Therefore, we selected the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana and the endophytic fungus Mycoleptodiscus indicus to initiate the prospection aiming to determine the favorable growing conditions to obtain secondary metabolites with biological activity. This work was guided by biological assays and chromatographic analysis. The fractions obtained in the cultivation in a large scale were subjected to biological tests (leishmanicidal, antimalarial, antimicrobial and cytotoxic). The dichloromethane and ethyl acetate fractions of both fungi showed promising results in antitumor and leishmanicidal assays. Then, these fractions were subjected to chromatographic processes that allowed the isolation of compounds whose chemical structures were elucidated through the use of NMR techniques, mass spectrometry, UV, IR, ?D, and X-ray diffraction. From cultures of B. bassiana were obtained compounds from the pyridone class: pyridovericin, pyridovericin-N-O-(4-O-methyl-?-D-glucopyranoside) and pyridovericin-15-deoxy, being the latter two novel compounds; and alloxazine class: 7,8-dimethylalloxazine (lumichrome) and 1-methyl-11-hydroxylumichrome, being this last one unprecedented. From M. indicus cultures were obtained compounds from two classes: azaphilone and chromene. In this thesis we report the derivatives eugenitin, 6-methoxyeugenin and 9-hydroxyeugenin, which have been isolated from a wide variety of plants and fungi. Azaphilones are a class of structurally diverse fungal metabolites, known pigments with pyran-quinone structure and contains a highly oxygenated bicyclic core and a chiral quaternary center. Then, we obtained two known azaphilones: austdiol and austdiol diacetate (product of acetylation), and three unprecedent azaphilones: austdiol dimer, austdiol dihydroisocoumarin and austdiol chromen. The three new azaphilones from M. indicus have an unusual pattern of connection between two aromatic polyketides, a methylene bridge. The isolation of these molecules reinforces the hypothesis that the biosynthesis occurs with the participation of one formaldehyde molecule. The purified compounds were submitted to biological assays. In the cytotoxic assay the azaphilones austdiol and austdiol diacetate, and the pyridone pyridovericin displayed activity against tumor cell lines, although at higher concentrations than the standard compounds used. Moreover, there was some degree of selectivity, since the assayed compounds were not toxic to human lymphocytes. Also in leishmanicidal assays, austdiol, austdiol diacetate and pyridovericin displayed activity, although at levels lower than leishmanicidal standards. Thereby, it can be considered that azaphilone and pyridone compounds are good leader compounds to search for cytotoxic and leishmanicidal agents, since these classes of compounds have biological dynamicity. Finally, the isolation and elucidation of new metabolites belonging to azaphilone and pyridone classes contribute to the enrichment of these important fungal metabolites and, likewise, this study demonstrates the importance of endophytic and entomopathogenic fungi in natural products chemistry.

Plutella xylostella, commonly known as diamondback moth, causes great damages in collard greens and broccolis crops of Itabaiana municipality in Sergipe State-BR. Alternative control techniques are being researcher s goals because the intensive use of chemicals has enhancing resistance problems, intoxication of workers, beside the pollution of environment and residues in the products, making difficult their commercialization. Entomogenous fungi have been used widespread in biological control of agriculture pests and have a remarkable role among micro-organisms as an alternative method to control the moth. This work aims to evaluate the pathogenicity of ten isolates of Beauveria and Paecilomyces, from different research institutions, on diamondback moth and also to identify and quantify extra cell enzyme patterns made by the mentioned fungi. The rearing of the moths will be at lab conditions starting from young crawlers and pupae picked up in field crops of collard and broccolis. The enzyme activities will be evaluated in extra cell fluids filtrated from entomogenous fungi reared in aqueous medium. The results obtained from the bioassays will give contribution in the identification of the most efficient genera or isolates to be used in IPM of diamondback moth. Moreover, it is expected that the relationship pathogenicity x enzyme activity be one other tool to characterizing these micro-organisms. / A traça-das-crucíferas tem causado grandes danos a produtores de couve e brócolis do município de Itabaiana-SE. O uso indiscriminado de agrotóxicos para o controle desta praga tem causado problemas quanto à resistência a determinados ingredientes ativos, além de comprometer a saúde dos aplicadores e o consumo dos produtos pela veiculação de resíduos desses produtos. Os fungos entomopatogênicos são uma alternativa de controle para a traça. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a patogenicidade de fungos entomopatogênicos sobre a traça-das-crucíferas (Plutella xylostella), observando sua interação com a quantificação e tipos de enzimas proteases produzidas pelos isolados. Foi realizado no Laboratório de Controle Biológico da Embrapa Tabuleiros Costeiros usando 9 isolados de Beauveria bassiana e 1 isolado de Paecilomyces fumosoroseus, provenientes de diferentes instituições para o controle da traça-das-crucíferas. Foi realizado um bioensaio, com os 10 isolados em uma mesma concentração (1x108 conídios/ml). Folhas de couve foram banhadas com a solução de conídios dos fungos e oferecidas como alimentação as lagartas. Análises da atividade enzimática de duas proteases degradadoras de cutícula, Pr1 e Pr2, enzimas relacionadas diretamente com o processo de infecção do inseto pelo patógeno foram realizadas no Laboratório de Enzimologia da Universidade Federal de Sergipe. Os isolados 447© e 1213 apresentaram as maiores médias de mortalidade, sendo o 447© o mais virulento. Não foi confirmada uma correlação entre patogenicidade e atividadade enzimática para os isolados de fungos entomopatogênicos estudados. Este resultado não contradiz a influencia da atividade enzimática no processo de infecção e patogenicidade destes microrganismos, porém, confirma o quanto é complexo o estudo desta relação na interação patógeno hospedeiro. Os períodos de avaliação de 96 e 144 horas apresentaram os maiores valores de atividade para as duas enzimas avaliadas, coincidindo com o período de maior número de lagartas mortas.

The fungus Ophiocordyceps camponoti-floridani (Ophcf) infects Camponotus floridanus carpenter ants and manipulates them to climb to a high tree branch, bite down on foliage and die. Post ant death, the fungus grows out of the ant and spreads spores for reproduction. I investigated the function of an Ophcf gene product highly activated during the behavioral manipulation of these “zombie ants”; an enterotoxin. I have created an expression vector and heterologously expressed this enterotoxin in Cordyceps bassiana (Cbass), a related fungus that does not normally manipulate behavior. This process includes gene amplification, Golden Gate vector cloning in E. coli, A. tumefaciens-mediated transformation to Cbass, and RT-qPCR to verify heterologous gene expression. This was followed by carpenter ant infections with transgenic Cbass (EntB), wildtype Cbass (infected control), and sham (non-infected control) infected ants. Subsequent behavioral observations using tracking system MARGO (Werkhoven et al., 2019) have detected changes in activity levels of ants infected with both transgenic and WT Cbass compared to sham infected ants. This supports previously qualitative descriptions of increased activity caused during infection with WT Cbass (Trinh, 2020). There is a slight but insignificantly higher activity response from EntB compared to WT infected ants over the course of the trial that may be indicative of Ophcf induced changes that are different from general sickness behavior. Additional replicates are necessary to discern if these findings are statistically robust. Future studies should administer this enterotoxin expressing Cbass to observe inter-social behaviors of Carpenter ants. If the enterotoxin is sufficient to elicit one of the side effects of typical Ophcf infection, this would justify further characterization of the proteins and their functions in altering C. floridanus behavior. This characterization could yield information applicable to other parasite-host relationships as well.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-07-18T17:55:28Z No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 367298 bytes, checksum: b649be35d1d2a5a68ae2778092338d9f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-18T17:55:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 367298 bytes, checksum: b649be35d1d2a5a68ae2778092338d9f (MD5) Previous issue date: 2002-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os programas de erradicação de pragas têm dado maior ênfase ao controle biológico como alternativa para minimizar o uso de agentes químicos e se reduzir a destruição de inimigos naturais no agroecossistema cafeeiro, a resistência em insetos-praga e a contaminação ambiental por resíduos químicos. Este trabalho foi dividido em duas etapas, com a primeira abordando a penetração da broca (Hypothenemus hampei) (Coleoptera: Scolytidae) em frutos de café em diferentes fases de crescimento e a segunda etapa a seletividade de defensivos agrícolas ao fungo entomopatogênico Beauveria bassiana. A primeira etapa foi conduzida em cafezal de três anos de idade, com duas variedades de café Coffea arabica (catuaí vermelho e mundo novo) e uma de Coffea canephora (conilon), na área experimental do aeroporto da Universidade Federal de Viçosa (UFV) em Viçosa, Minas Gerais. Determinou-se os tempos fisiológicos (graus-dia) em que os frutos da florada principal de cada uma das três variedades de café atingiram estágio fenológico adequado para a penetração da broca-do-café Hypothenemus hampei (Coleoptera: Scolytidae). Além disso, determinou-se, também o intervalo durante o trânsito dessa praga, quando suas fêmeas adultas saem à procura de novos frutos e têm capacidade de penetrá-los para se reproduzir, e, consequentemente, aumentar sua população. Foram feitas considerações para a utilização dos tempos fisiológicos (graus-dia) para a tomada de decisão em programas de manejo integrado da broca do café. O inseto penetrou no mesocarpo de 50% dos frutos brocados com percentuais de umidade de 78,5; 77,4 e 75,6% e peso da matéria seca acumulada de 18,1; 28,5 e 4,8 mg. Isto equivaleu ao tempo fisiológico em graus-dia acumulados de 1825, 1943 e 1176 graus-dia para o catuaí vermelho, mundo novo e conilon, respectivamente e constitui o período de maior trânsito da broca nas variedades testadas, sendo, portanto, o momento ideal para realização de amostragem e eventuais intervenções com inseticidas. A broca tem capacidade de penetrar grãos mais jovens da variedade conilon, provavelmente devido aos menores percentuais de umidade de seus frutos durante os primeiros estágios de desenvolvimento e pode determinar maior número de gerações da broca e, consequentemente maiores percentuais de infestação nesta variedade. A utilização de faixas com vegetação nativa entre variedades de café pode ser importante para o manejo da broca H. hampei, pois variedades com floradas tardias ficam expostas a maiores populações dessa broca, que se reproduzem em frutos de variedades precoces. Além disto, essas faixas podem aumentar as populações de inimigos naturais e impedir a movimentação da praga entre talhões de café. Na segunda etapa, avaliou-se a toxicidade relativa dos inseticidas organofosforados clorpirifós-metílico, dissulfotom, etiom, paratiom-metílico; do organoclorado endosulfam; da mistura do fungicida + inseticida triadimenol + dissulfotom e dos fungicidas inibidores da demetilação de esteróis: triadimenol e tebuconazole, ao fungo Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin, patógeno da broca do café, foi estudada em laboratório. As concentrações dos pesticidas que inibiram 99% do crescimento micelial desse fungo, em miligramas de ingrediente ativo por mL, foram: tebuconazole= 0,42; paratiom-metílico= 1,69; triadimenol= 6,53; triadimenol + dissulfotom= 14,42; clorpirifós-metílico= 31,75; etiom= 7.028,96; endosulfam= 10.326,76 e dissulfotom= 763.959,86. As equações de regressão da inibição do crescimento micelial (%), em função da concentração obtidas por ensaios in vitro, em meio batata-dextrose-ágar (BDA), impregnado com os ingredientes ativos destes compostos, foram usadas para se estimar a seletividade das concentrações de pesticidas prescritas para cafezais, pelos seus respectivos fabricantes. Tebuconazole, paratiom-metílico e clorpirifós- metílico foram altamente tóxicos ao fungo B. bassiana; endosulfam e triadimenol + dissulfotom apresentaram seletividade moderada e o triadimenol, etiom e dissulfotom foram seletivos para B. bassiana. / This research was developed in a three years old coffee plantation formed by two varieties of Coffee arabica “ (catuaí vermelho and novo mundo)” and one of Coffea canephora “(conilon)” in an experimental area of the Universidade Federal de Viçosa (UFV), in the Municipality of Viçosa, State of Minas Gerais, Brasil. The period (degree-days) when fruits of the main bloom of each one of these three coffee varieties reached appropriate phenological stage for penetration of the borer Hypothenemus hampei (Coleoptera: Scolytidae) was calculated. The period of movement of this pest when its adult females come out to search for new fruits to be colonized and consequently this borer can increase its population were also evaluated. Considerations were made aiming to use the physiological time (degree-day) for decision making in integrated management programs of the coffee borer. This insect penetrates into the mesocarpo of about 50% of coffee fruits sampled with humidity of 78.5; 77.4 and 75.6% and accumulated dry weight of 18.1; 28.5 and 4.8 equivalent mg with an accumulated degree-day at the physiological time of 1,825, 1,943 and 1,176 degree-day for the catuaí vermelho, novo mundo and conilon coffee varieties, respectively. This represents the period of movement of this borer and the ideal moment of sampling and eventual control of this pest with insecticides. H. hampei penetrates into younger coffee fruits of the conilon variety probably due to their lower humidity during initial development stages. For this reason this borer can have a higher number of cycles in this coffee variety and, consequently a higher percentage of infestation. Management H. hampei populations in coffee plantations should include different varieties per plantation and the use of strips of native vegetation between them. This is necessary because later bloom coffee varieties are exposed to higher populations of this pest which reproduce in precocious ones. Besides, strips of native vegetation can increase populations of natural enemies and to difficult movement of this pest between areas planted with coffee. Studies about relative toxicity of the organofosforate insecticides methyl clorpiriphos, dissulfoton, ethion, methyl parathion and the organoclorinated endosulfan, besides a mixture of the fungicide + insecticide (triadimenol + dissulfoton) and a fungicide which inhibits sterol demetilation: triadimenol and tebuconazole to the fungi Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin pathogen of the coffee borer was evaluated in laboratory. Concentrations of pesticides with inhibition of 99% of micelial growth of this fungi in milligrams of active ingredient per mL were: tebuconazole= 0.42; methyl parathion= 1.69; triadimenol= 6.53; triadimenol + dissulfotom= 14.42; methyl clorpiriphos= 31.75; ethion= 7,028.96; endosulfam= 10,326.76 and dissulfotom= 763,959.86. Regression equations of micelial growth (%) as function of concentration obtained in vitro in half potato-destroxe-agar (BDA) impregnated with active ingredients of these compounds were used to estimate the selectivity of their concentrations prescribed for coffee plantations. Tebuconazole, methyl parathion and methyl clorpiriphos were highly toxic to B. bassiana; endosulfan and triadimenol + dissulfoton presented moderate selectivity and triadimenol, ethion and dissulfotom were selective to this fungi. / Dissertação importada do Alexandria

Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-13T11:56:16Z No. of bitstreams: 2 TESE Ana Paula de Almeida.pdf: 2200179 bytes, checksum: 4dcc526cd8f5268cf18fe96d57c8245b (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T11:56:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Ana Paula de Almeida.pdf: 2200179 bytes, checksum: 4dcc526cd8f5268cf18fe96d57c8245b (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014 / O Brasil é o maior produtor mundial de cana-de-açúcar, porém as condições ambientais favorecem o aparecimento de pragas, dentre elas, Diatraea saccharalis, conhecida como broca da cana. Este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito de um óleo adjuvante emulsionável e de extratos de Indigofera suffruticosa e de Myrciaria cauliflora sobre Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana, bem como a patogenicidade de formulações a D. saccharalis. Foram utilizadas as linhagens M. anisopliae PL43, M. anisopliae IBCB425, B. bassiana ESALQ447 e B. bassiana ARSEF1398. O efeito fungitóxico foi avaliado por meio da incorporação de Veget’oil® e dos extratos vegetais das folhas e sementes de Indigofera suffruticosa e dos frutos de Myrciaria cauliflora ao Batata-Dextrose-Ágar (BDA) em diferentes concentrações. O grupo controle foi estava isento de óleo e extrato. Foram analisados os parâmetros biológicos: crescimento vegetativo, produção e germinação de conídios. Os efeitos do armazenamento das formulações (fungo + óleo) foram avaliados levando em consideração o percentual de germinação dos conídios formulados, em dois ambientes (25 ± 1ºC e -7 ± 1ºC). As larvas de D. saccharalis, do 3º estágio, foram imersas em suspensões contendo conídios fúngicos, formulação e extratos vegetais. O grupo controle foi inoculado com água destilada autoclavada e óleo. Os bioensaios foram realizados em cinco repetições e observados diariamente, por 10 dias. Veget’oil é compatível com B. bassiana ESALQ447, moderadamente tóxico para M. anisopliae PL43 e IBCB425 e tóxico para B. bassiana ARSEF1398, na menor concentração. Os fungos formulados permaneceram viáveis por até 90 dias, a 25 ± 1ºC. Os conídios formulados estocados a -7 ± 1ºC permaneceram viáveis por 11 meses. Todas as linhagens testadas foram patogênicas a D. saccharalis. A formulação em óleo mais eficiente foi a de Beauveria bassiana ESALQ447 que causou mortalidade de 74% das larvas. Os extratos vegetais analisados são compatíveis com os fungos e sua associação resultou num maior número de insetos mortos (96%) para M. anisopliae IBCB425 e 94% para M. anisopliae PL43 ambos com o extrato das sementes de I. suffruticosa. O extrato dos frutos de M cauliflora associado a B. bassiana ESALQ447 matou 84% das larvas. O extrato das folhas de I. suffruticosa foi o menos eficiente, atingindo 70% de mortalidade, somente quando associado à formulação. Os resultados demonstram o potencial das formulações e associação dos fungos com os extratos vegetais, que constituem uma alternativa viável para o controle de D. saccharalis.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:06:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4623_1.pdf: 4005280 bytes, checksum: 1e7bad4aa278938925381ecdcffd8d62 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Zaprionus indianus é conhecida como a mosca do figo. Vem se disseminando por todo Brasil, devido às condições ambientais favoráveis. Por ser recém-introduzida não há medidas eficazes para seu controle. Uma alternativa viável poderá ser o uso de fungos entomopatogênicos, como Beauveria bassiana. Este trabalho foi conduzido em condições de laboratório, para avaliar a suscetibilidade de Z. indianus à B. bassiana. As larvas foram submersas e os adultos foram pulverizados com diferentes concentrações fúngicas (104 a 108 conídios/mL) e em seguida colocados em recipiente contendo meio específico, para análise dos parâmetros biológicos. O período de pré-pupa não sofreu alteração em relação ao grupo controle, já o estágio pupal foi aumentado em três dias. O percentual de emergência no grupo controle foi de 97,33%, enquanto na maior concentração (108) foi de 10,60 e de 13,33% para B. bassiana URM2916 e B. bassiana URM3447, respectivamente. No bioensaio com adultos foi observada morte a partir do 2º dias após a inoculação. O percentual de mortalidade variou de 37,00% a 98,66%. Os valores da CL50 foram de 1,09 x 105 e de 3,8 x 106 conídios/mL, e os do TL50 variaram de 5,3 e 7 dias. O fungo reisolado de Z. indianus não apresentou diferenças morfológicas, contudo o seu desenvolvimento foi acelerado. Os dados demonstraram que B. bassiana URM2916 foi a mais eficiente, contudo as duas linhagens analisadas foram potencialmente patogênicas à Z. indianus e mostraram ser promissores agentes biocontroladores

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:04:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4416_1.pdf: 690757 bytes, checksum: 6e1d8fd2843b82ae7a0a60b516bd6c3c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2002 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Foram analisadas vinte linhagens de Beauveria bassiana isoladas de diferentes regiões e hospedeiros, quanto ao perfil de DNA, através da análise da região ITS do rDNA, de RAPD e Intron, para avaliação da diversidade genética e auxílio na caracterização. A região ITS1-5.8s-ITS2 do rDNA foram digeridas com as enzimas Eco RI, Dra I, Msp I e Hae III, onde a Eco RI e Dra I não apresentaram sítio de restrição e a Hae III e Msp I não apresentaram polimorfismo entre as linhagens, confirmando a espécie estudada. Para RAPD foram selecionados cinco primers OPX17, OPW4, OPW7, OPW19, 0PW20, que produziram um total de 442 bandas. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística pelo programa NTSYS.PC e construída uma matriz de similaridade utilizando o coeficiente de Jaccard, que gerou um dendrograma através do método de agrupamento UPGMA. A similaridade foi em torno de 70%. A análise do dendrograma mostrou a formação de quatro grupos, onde não houve correlação com o hospedeiro ou origem geográfica, embora duas linhagens isoladas de Nezara viridula e duas de Deois flavopicta tenham mostrado maior nível de similaridade. Os dados obtidos pela análise de Intron, mostraram o aparecimento de cinco grupos

Orientador: Ricardo Antonio Polanczyk / Resumo: A lagarta do algodão, Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) é uma das mais importantes pragas da agricultura mundial. Os danos causados por essa espécie ocorrem desde a emergência da planta. O uso desordenado de produtos químicos para controlar essas lagartas acelerou o desenvolvimento de resistência e têm causado efeitos adversos aos inimigos naturais, tornando-se uma grande preocupação ambiental. Diante disso, a busca por medidas alternativas que visam diminuir esses impactos aumenta. Agente de controle microbiano é considerada uma alternativa eficiente e segura, especialmente o uso de fungos entomopatogênicos. As principais espécies de fungos entomopatogênicos utilizadas são Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae, essas têm sido utilizadas para controlar insetos pragas de várias ordens, e a variabilidade genética presente nesses microrganismos é muito alta, possibilitando estudos de seleção de isolados fúngicos para o desenvolvimento de formulações eficientes em condições de laboratório e campo. Assim, o objetivo desse trabalho foi selecionar isolados dos fungos entomopatogênicos B. bassiana e M. anisopliae para controle de H. armigera em condições de laboratório e campo (persistência) considerando os efeitos letais e subletais. Nos primeiros bioensaios utilizou-se 23 isolados, sendo 10 isolados de M. anisopliae e 13 de B. bassiana avaliando a interação das lagartas e os isolados fúngicos. Para isso foram confeccionadas tabelas de vida e realizados te... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The cotton caterpillar, Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) is one of the most important pests in world agriculture for attacking several species of plants of economic importance. The damage caused by this species occurs since the emergence of the plant. The disordered use of chemicals to control these caterpillars has accelerated the development of resistance and has caused adverse effects to natural enemies, becoming a major environmental concern. Therefore, the search for alternative measures to reduce these impacts increases. Microbial control agent is considered an efficient and safe alternative, especially the use of entomopathogenic fungi. The main species of entomopathogenic fungi used are Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae, these have been used to control insect pests of various orders, and the genetic variability present in these microorganisms is very high, enabling studies on the selection of fungal isolates for the development of efficient formulations under laboratory and field conditions. Thus, the objective of this work was to select isolates of the entomopathogenic fungi B. bassiana and M. anisopliae to control H. armigera in laboratory and field conditions (persistence) considering the lethal and sublethal effects. In the first bioassays, 23 isolates were used, 10 of which were M. anisopliae and 13 of B. bassiana, evaluating the interaction of caterpillars and fungal isolates. For that, life tables were made and tests of mortali... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

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